E faecium: Enterococcus faecium ENCfa-68 | GSK Health Partner

Содержание

Энтерококки . Азбука антибиотикотерапии. Видаль справочник лекарственных препаратов

Автор: Трубачева Е.С., врач – клинический фармаколог

Темой сегодняшнего разговора будут одни из наиболее распространенных микроорганизмов из семейства Enterobacteriaceae – энтерококки, которые являются грамположительными кокками и факультативными анаэробами.

Микробиологические аспекты

Энтерококки входят в состав нормальной микрофлоры кишечника, обитают в основном в тонкой кишке и при этом, обнаруживаясь за пределами своей естественной среды обитания, являются возбудителями множества социально-значимых заболеваний. Наибольшее клиническое значение имеют E.faecalis и E.faecium.

Отличительным свойством энтерококков является их способность к образованию биопленок. О биопленках достаточно подробно мы рассуждали в статье, посвященной синегнойной палочке. И специфика течения многих заболеваний, вызванных энтерококками, объясняется именно пленкообразованием.

Одной из отличительных особенностей этого класса является изначальная природная устойчивость энтерококков к целому ряду антибактериальных препаратов, особенно это касается такого представителя как E.faecium,– большинство бета-лактамов цефалоспоринового ряда против него бессильны. Хотя и фекальный энтерококк пытаться истреблять цефалоспоринами тоже не стоит. Помимо наличия природной устойчивости к антибактериальным препаратам, одним из значимых событий стало появление ванкомицин-резистентных штаммов энтерококка (ВРЭ) не только в условиях специализированных онкогематологических стационаров, но и в общей клинической практике. Причем на данный момент уровень резистентности к ванкомицину у E.faecium составляет порядка 80%, что приводит к тому, что без микробиологической детекции и определения чувствительности к антибиотикам данный препарат не может быть использован в рутинной практике. У

E.faecalis уровень резистентности к ванкомицину пока не превышает 7%.

Клинические аспекты

Наиболее частым возбудителем внебольничных инфекций является E.faecalis – сюда относятся инфекции мочевыводящих путей и инфекционные эндокардиты у внутривенных наркозависимых пациентов.

E.faecium наиболее часто выявляется при нозокомиальных инфекциях – здесь преобладают так же инфекции мочевыводящих путей, но связанные с проведением инструментальных методов исследования, а также всевозможные виды бактеремий, связанных с медицинскими вмешательствами.

Когда мы можем думать о состояниях, вызванных энтерококками?

  • Менингиты, как следствие черепно-мозговых травм, нейрохирургических вмешательств и при наличии антомических дефектов центральной нервной системы
  • Перитониты любой этиологии
  • Пельвиоперитониты (в составе микст-флоры)
  • У пациентов с диабетической стопой
  • У пациентов с инфекциями мочевыводящих путей, особенно в случаях их катетеризации
  • Уросепсис
  • У внутривенных наркозависимых – наравне с зеленящими стрептококками – энтерококки являются одними из наиболее частых возбудителей, а потому эмпирическая антибактериальная терапия должна перекрывать оба эти возбудителя
  • Холангиты и инфекции билиарного тракта
  • Катетер-ассоциированные инфекции (наряду с эпидермальными стафилококками)

Существуют следующие факторы риска инфицирования энтерококками:

  • Длительные и неоднократные госпитализации
  • Пациенты старшего возраста
  • Пациенты с иммунодефицитами различной этиологии
  • Лица, страдающие хроническими заболеваниями, такими как рак и диабет
  • Пациенты с установленными мочевыми катетерами
  • Пациенты на гемодиализе
  • Пациенты с нейтропениями
  • Наличие центральных венозных катетеров и дефекты ухода за оными
  • Использование в стационарах антибиотиков широкого спектра действия (срабатывает принцип «свято место пусто не бывает», и энтерококки получают селективное преимущество на поле боя, где полегла остальная микрофлора)
  • Недавно прооперированные пациенты или пациенты с открытыми ранами и язвами (высокий риск внутрибольничного инфицирования)
  • Пациенты с установленными дренажами, а также интубированные пациенты (риск внутрибольничного инфицирования)

Как мы можем заметить, основную роль в развитии заболеваний, вызванных энтерококками, играет человеческий, точнее ятрогенный фактор.

Энтерококки, как и вся остальная кишечная микрофлора, по воздуху летать не умеют, да и ножками не ходят, а потому главное в их нераспространении – чистота наших рук и соблюдение санитарно-противоэпидемических правил, написанных, как и большинство подобных документов (например, как ПДД), кровью, причем кровью пациентов.

Аспекты лечения

Их можно разделить на лекарственные и нелекарственные.

К нелекарственным аспектам относятся замена всех катетеров и дренажей, а также повторная хирургическая обработка ран. Это связано с тем, что энтерококки умеют образовывать биопленки, и пока эти пленки физически не будут удалены, все остальные лекарственные мероприятия будут почти бессмысленны, так как редкий антибиотик может пробиться сквозь полимерную структуру пленки, ведь это все равно что вылить препарат на целлофановый пакет – сверху, может быть, что-то и умрет, и то не факт, а внутри жизнь как бурлила, так и бурлит, что приведет к дальнейшему отшнуровыванию новых энтерококков и продолжающемуся развитию инфекционного процесса.

Например, одна из причин неудач лечения инфекционного эндокардита, вызванного E.faecium, помимо устойчивости к ванкомицину, может быть вызвана отсутствием кардиохирургического лечения и физического удаления очага инфекции, то есть вегетации. Вегетация может оторваться и стать эмболом, но если пациент выживет, то на ее месте вырастет новая вегетация, которая так же оторвется и… думаю дальше продолжать не надо.

Аспекты медикаментозного лечения

Здесь автор отступит от правила и не отправит изучать вопрос по книжкам и таблицам, а попытается расписать антибактериальную терапию более подробно. Это связано и со спецификой самого возбудителя, и со спецификой контингента, имеющего заболевания, им вызванные.

  1. Инфекционный эндокардит

Как уже упоминалось ранее, наряду с зеленящим стрептококком, а вообще намного чаще, энтерококк является основным возбудителем инфекционного эндокардита у лиц с внутривенной наркотической зависимостью. Проще говоря, если перед вами наркозависимый, и у него эндокардит трикуспидального клапана, то первое, о чем вы должны подумать, – это энтерококк, и эмпирическую терапию назначать с учетом этого знания. Конечно, могут быть варианты в виде того же зеленящего стрептококка или даже золотистого стафилококка, но эти возбудители более присущи пациентам с несанированной ротовой полостью и на митральном клапане (зеленящий) или после кардиохирургического вмешательства (золотистый стафилококк). Также на стафилококковый, а не энтерококковый характер поражения будет намекать снимок органов грудной клетки в прямой проекции, подозрительно напоминающий решето (один раз увидев стафилококковую метастатическую пневмонию ее уже ни с чем не перепутаешь).

Чем будем лечить?

Как ни странно это прозвучит в современных условиях, но препаратами выбора будут представители аминопенициллинового ряда – ампициллин (дешевле) или амоксициллин (в разы дороже) в обязательной комбинации с аминогликозидом гентамицином (этот дешевле) или амикацином. Поэтому если вы работаете в стационаре скорой помощи и у вас попадаются пациенты данной категории – ампициллин для инъекций крайне рекомендуется иметь на полках аптеки в достаточных количествах. Это до сих пор дешево, сердито и очень эффективно в случаях терапии энтерококковых инфекций почти любой этиологии, и главное правильно рассчитать дозу, так как аминопенициллины относятся к так называемым время-зависимым препаратам (читаем первую и вторую часть здесь).

Повторимся еще раз – аминопенициллины в данном случае должны использоваться только в комбинации с аминогликозидами ввиду их синергетического действия в отношении энтерококков и ввиду вероятности микст-инфекции у подобной категории пациентов.

Вопрос по эмпирическому использованию ванкомицина остается дискуссионным – если в случае E.faecalis его можно назначать на уровне эмпирической терапии, когда у пациента имеется документированная аллергия на пенициллины (если конечно вам покрасили мазок по Граму или ваш стационар настолько крут, что имеет свой масс-спектрометр), то в случае E. faecium даже начинать не стоит — сразу зовите специально обученного человека, пусть он думает, что дальше делать.

Как уже было выше упомянуто, цефалоспорины назначать не стоит — энтерококки к ним природно устойчивы. А для того чтобы рука потянулась к карбопенемам, вам надо иметь доказанную мульти-резистентность возбудителя.

Итак, исходя из вышесказанного, в типичной ситуации бактериального эндокардита (особенно трикуспидального клапана у наркозависимых), а также менингита или энтерококкового сепсиса на фоне нейтропении, препаратами выбора до сего дня остаются – ампициллин в комбинации с гентамицином:

  • Ампициллин назначается в дозировке 2 грамма каждые 4 часа внутривенно (6 раз в сутки, так как препарат создает времязависимую подавляющую концентрацию), либо, если уж совсем денег нет, то можно использовать пенициллин в дозировке 18-24 млн ЕД в сутки в виде суточной инфузии, если в отделении есть инфузомат (если нет, то делим на шесть введений).
    Таблетированными формами ампициллина пользоваться нельзя, и не только в таких серьезных ситуациях – у таблеток большие проблемы с биодоступностью (менее 40%), то есть создать бактерицидную концентрацию почти не реально.
  • Гентамицин рассчитывается на килограмм массы тела (1 мг/кг/сут) и вводят однократно внутримышечно (так как он относится к дозозависимым антибиотикам). Стоит отдельно отметить, что правило отмены через 7-10 суток в отношении гентамицина в случае жизнеугрожающих инфекций не действуют, так как польза превышает возможный вред, и препараты назначаются на весь срок лечения под контролем клиренса креатинина, который берется до начала лечения и далее каждые три дня.

В случае развития резистентности к ампициллину используется его защищенная форма в виде ампициллина/сульбактама в комбинации с гентамицином. Дозировки рассчитываются по ампициллину.

Если совсем не повезло и лаборатория дала мультирезистентного фекального энтерококка, то используется комбинация ванкомицин (15 мг/кг/сут) в комбинации с гентамицином (8 мг/кг/сут) под жесточайшим контролем функции почек. Кроме того, в случае мультирезистентного возбудителя может быть использована комбинация имипенема с ампициллином, если, конечно, сможете обосновать ее для страховой компании – автор обосновывала, необходимый эффект получала, пациент не только выживал, но и выздоравливал. Только призывать к такого рода схемам, описанным, в основном, в американской литературе, автор ни в коем случае не будет, особенно в нынешние неспокойные времена. Сейчас наши основные документы по назначению любого вида терапии располагаются здесь.

В случае обнаружения резистентного E.faecium препаратом выбора становится линезолид и, не побоюсь этого слова, молитва, так как срок лечения не менее 8 недель, а кто нам столько препарата выдаст, да и прогноз при применении бактериостатика как-то не очень.

  1. Катетер-ассоциированные инфекции: помимо удаления катетера и обязательного исследования оного в микробиологической лаборатории, установки нового катетера в новом месте, также используется ампициллин в комбинации с гентамицином (в тех же дозировках, что описаны выше) либо ванкомицин (15 мг/кг/сут), если пациент демонстрирует аллергическую реакцию на оные, либо линезолид 600 мг каждые 12 часов, либо даптомицин 6 мг/кг/сут (если сможете его добыть).
  2. Инфекции мочевыводящих путей – здесь предпочтение стоит отдать пероральному амоксициллину в комбинации с клавулановой кислотой дважды в день. Вызвана сия рекомендации тем, что это чаще всего эта инфекция, присущая амбулаторному этапу, будет вызвана дикой и непуганой флорой, и заодно прикроетесь от вероятной кишечной палочки как второго возбудителя. Если ситуация развилась в стационаре – смотрим пункт первый и лечим по той же схеме.
  3. Отдельного упоминания требует лечение ванкомицин-резистентных энтерококков, так как видят их уже практически все доктора хирургического и реанимационного профиля. Арсенал наш в этом случае крайне беден – это, по сути, только линезолид да даптомицин. Линезодид является бактериостатиком, дающим высокие риски миелосупресии и тромбоцитопении через 2 недели от начала применения, которое должно составлять не менее 8 недель, но это, по сути, единственный шанс для пациента с энтероккоковым менингитом, устойчивым к ванкомицину, так как даптомицин, который надо найти, и как-то убедить его купить (стоит он просто безбожных денег), в мозговые оболочки не проникает в виду размера самой молекулы. Можно также упомянуть о тигециклине (100 мг нагрузочная и далее по 50 мг каждые 12 часов), но он тоже стоит как самолет. Поэтому самым лучшим вариантом лечения ванкомицин-устойчивых энтерококковых инфекций является их недопущение в принципе, то есть СанПин, СанПин и еще раз СанПин. А уж если такой пациент все-таки приключился, то необходима немедленная изоляция оного в отдельную палату, а еще лучше в изолятор, чтобы от него не переинфицировать всех вокруг, если вдруг кто-то про обработку рук забудет.

На этом краткий обзор энтерококковых инфекций закончим, и из кишечной микрофлоры у нас останется только королева внтурибольничных инфекций – ее величество Klebsiella, о которой мы поговорим в одной из следующих публикаций.

Поделиться с друзьями

Пожалуйста, заполните поля e-mail адресов и убедитесь в их правильности

Enterococcus faecium L3 корректирует микробиотику кишечника и модулирует иммунные функции у крыс с ЭАЭ и пациентов с рассеянным склерозом

Абдурасулова И. Н., Тарасова Е.А., Ермоленко Е.И., Кудрявцев И.В., Серебрякова М.К., Большакова К.О., Бисага Г.Н., Скулябин Д.И., Клименко В. М. Enterococcus faecium L3 корректирует микробиотику кишечника и модулирует иммунные функции у крыс с ЭАЭ и пациентов с рассеянным склерозом. Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. Спецвыпуски. 2015;115(8-2):45-45.
Abdurasulova IN, Tarasova EA, Ermolenko EI, Kudryavtsev IV, Serebrjakova MK, Bol’shakova KO, Bisaga GN, Skulyabin ID, Klimenko VM. Enterococcus faecium L3 korrektiruet mikrobiotiku kishechnika i moduliruet immunnye funktsii u krys s EAE i patsientov s rassejannym sklerozom. Zhurnal Nevrologii i Psikhiatrii imeni S.S. Korsakova. 2015;115(8-2):45-45. (In Russ.).

Enterococcus faecium

Enterococcus faecium (энтерококки фэциум) — вид дружественных бактерий, живущих в кишечнике кошек и собак. Получая от организма животного нужные им питательные вещества, энтерококки в процессе своей жизнедеятельности участвуют в процессах обмена веществ в кишечнике, помогают пищеварению, усвоению витаминов и т.д. Кроме того, они успешно борются за место под солнцем с патогенными бактериями, не давая им заселять кишечник. Именно для этого их и используют в кормах для домашних животных.

Энтерококки фэциум — вовсе не альтруисты, просто кишечник — это их среда обитания, как лес для волка, или степь для орла. Когда вокруг всё хорошо, энтерококки процветают, заодно принося пользу организму. Но стоит случиться какому-нибудь катаклизму — например, животное испытывает стресс или его организм подвергся атаке инфекции и получил ударную дозу антибиотиков — как популяция энтерококков фэциум начинает стремительно сокращаться. Но, к счастью, кишечник можно снова заселить, если принять дозу энтерококков внутрь — в этом и заключается смысл использования так называемых пробиотических добавок.

Прелесть энтерококков фэциум — в том, что они очень устойчивы не только к тем бедствиями, которые мы перечислили, но и к высоким температурам, а ведь только этого производителям сухих кормов и надо. Пройдя испытание экструдером, энтерококки попадают в организм живёхонькими, и начинают активно размножаться.

Правда, в корма пробиотики добавляют в профилактических, а в не лечебных дозах, а потому при серьёзных расстройствах пищеварения у животного одним питанием его не вылечишь — нужны лекарства.

Ответственные производители всегда указывают, в каком количестве они добавляют в рацион пробиотики. Это количество измеряется в КОЕ — колониеобразующих единицах, то есть живых бактериях, способных основать новую колонию. После этой цифры — почти астрономической, ведь чтобы рассмотреть каждого «основателя», нужен мощный микроскоп, указывается код из латинских букв и цифр. Это имя колонии бактерий, которое присваивается в лаборатории, где она была выращены. Такое имя гарантирует, что колония — чистая, без чужаков.

Enterococcus faecium: от микробиологических открытий к практическим рекомендациям по инфекционному контролю и диагностике | Устойчивость к противомикробным препаратам и инфекционный контроль

  • Шлейфер, Килппер-Балц. Перевод Streptococcus faecalis и Streptococcus faecium в род Enterococcus norn.обр. как гребенчатый Enterococcus faecalis. ноябрь и Enterococcus faecium гребенчатый. ноябрь Int J Syst Bacteriol, январь 1984 г.; 34:31–4.

    Google ученый

  • Часть AC. LPSN — список названий прокариот со стоянием в номенклатуре. Нуклеиновые Кислоты Res. 2014; 42 (выпуск базы данных): D613–6.

    КАС пабмед Google ученый

  • Gilmore MS, Lebreton F, van Schaik W. Геномный переход энтерококков от кишечных комменсалов к ведущим причинам полирезистентной больничной инфекции в эпоху антибиотиков.Curr Opin Microbiol. 2013;16(1):10–6.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Top J, Willems R, Bonten M. Возникновение CC17 Enterococcus faecium: от комменсального к адаптированному в больнице патогену. FEMS Immunol Med Microbiol. 2008;52(3):297–308.

    КАС пабмед Google ученый

  • Бонтен М.Дж., Виллемс Р., Вайнштейн Р.А. Ванкомицинрезистентные энтерококки: почему они здесь и откуда? Ланцет Infect Dis.2001;1(5):314–25.

    КАС пабмед Google ученый

  • Ариас, Калифорния, Мюррей, BE. Возникновение энтерококков: преодоление устойчивости к ванкомицину. Nat Rev Microbiol. 2012;10(4):266–78.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Willems RJ, Top J, van Den Braak N, van Belkum A, Endtz H, Mevius D, et al. Хозяйственная специфичность устойчивых к ванкомицину Enterococcus faecium.J заразить Dis. 2000;182(3):816–23.

    КАС пабмед Google ученый

  • Галлоуэй-Пена Дж., Рох Дж. Х., Латорре М., Цинь Х., Мюррей Б.Э. Геномный анализ и анализ SNP демонстрируют отдаленное разделение госпитальной и внебольничной клады Enterococcus faecium. ПЛОС Один. 2012;7(1):e30187.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Ливис Х.Л., Виллемс Р.Дж., ван Вамель В.Дж., Шурен Ф.Х., Касперс М.П., ​​Бонтен М.Дж.Диверсификация, основанная на вставочной последовательности, создает глобально рассредоточенные появляющиеся полирезистентные подвиды E. faecium. PLoS Патог. 2007;3(1):e7.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Willems RJ, Top J, van Santen M, Robinson DA, Coque TM, Baquero F, et al. Глобальное распространение устойчивого к ванкомицину Enterococcus faecium из отдельного нозокомиального генетического комплекса. Эмердж Инфекция Дис. 2005;11(6):821–8.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Виллемс Р.Дж., Топ Дж., Ван Шайк В., Ливис Х., Бонтен М., Сирен Дж. и др.Ограниченный поток генов среди госпитальных субпопуляций Enterococcus faecium. МБио. 2012;3(4):e00151–12.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Гао В., Хауден Б.П., Стинир Т.П. Эволюция вирулентности Enterococcus faecium, условно-патогенного микроорганизма, адаптированного к больнице. Curr Opin Microbiol. 2017;41:76–82.

    ПабМед Google ученый

  • Бакеро Ф.От кусочков к образцам: эволюционная инженерия бактериальных патогенов. Nat Rev Microbiol. 2004;2(6):510–8.

    КАС пабмед Google ученый

  • Top J, Willems R, Blok H, de Regt M, Jalink K, Troelstra A, et al. Экологическая замена Enterococcus faecalis полирезистентным клональным комплексом 17 Enterococcus faecium. Клин Микробиол Инфект. 2007;13(3):316–9.

    КАС пабмед Google ученый

  • де Кракер М.Е., Ярлье В., Монен Дж.К., Хойер О.Е., ван де Санде Н., Грундманн Х.Изменение эпидемиологии бактериемии в Европе: тенденции Европейской системы надзора за устойчивостью к противомикробным препаратам. Клин Микробиол Инфект. 2012;3.

  • Gudiol C, Ayats J, Camoez M, Dominguez MA, Garcia-Vidal C, Bodro M, et al. Увеличение инфекции кровотока из-за чувствительных к ванкомицину Enterococcus faecium у онкологических больных: факторы риска, молекулярная эпидемиология и исходы. ПЛОС Один. 2013;8(9):e74734.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Pinholt M, Ostergaard C, Arpi M, Bruun NE, Schonheyder HC, Gradel KO, et al.Заболеваемость, клинические характеристики и 30-дневная смертность от энтерококковой бактериемии в Дании, 2006–2009 гг.: популяционное когортное исследование. Клин Микробиол Инфект. 2014;20(2):145–51.

    КАС пабмед Google ученый

  • Гавришевска И., Забицка Д., Боярска К., Малиновска К., Гриневич В., Садовы Е. Инвазивные энтерококковые инфекции в Польше: текущая эпидемиологическая ситуация. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2016;35(5):847–56.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Вайссер М., Капаул С., Дангель М., Эльзи Л., Куенцли Э., Фрей Р. и др. Аддитивное влияние Enterococcus faecium на энтерококковые инфекции кровотока: 14-летнее исследование в швейцарской больнице третичного уровня. Infect Control Hosp Epidemiol. 2013;34(10):1109–12.

    ПабМед Google ученый

  • Райан Л., О’Махони Э., Ренн С., Фитцджеральд С., Фокс Ю., Бойл Б. и др.Эпидемиология и молекулярное типирование изолятов VRE из кровотока в ирландской больнице третичного уровня. J Антимикробная химиотерапия. 2015;70(10):2718–24.

    КАС пабмед Google ученый

  • Mendes RE, Castanheira M, Farrell DJ, Flamm RK, Sader HS, Jones RN. Продольный (2001-14 гг.) анализ энтерококков и VRE, вызывающих инвазивные инфекции в больницах Европы и США, включая современный (2010-13 гг.) анализ эффективности оритаванцина in vitro.J Антимикробная химиотерапия. 2016;71(12):3453–8.

    КАС пабмед Google ученый

  • Weiner LM, Webb AK, Limbago B, Dudeck MA, Patel J, Kallen AJ, et al. Устойчивые к противомикробным препаратам патогены, связанные с инфекциями, связанными со здравоохранением: сводка данных, представленных в Национальную сеть безопасности здравоохранения в Центрах по контролю и профилактике заболеваний, 2011–2014 гг. Infect Control Hosp Epidemiol. 2016;37(11):1288–301.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Кумбс Г.В., Дейли Д.А., Тонкий Ли И., Панг С., Пирсон Дж.С., Робинсон Дж.О. и др.Австралийская группа по устойчивости к противомикробным препаратам Годовой отчет Австралийской программы по энтерококковому сепсису, 2014 г. Commun Dis Intell Q Rep. 2016;40(2):E236–43.

    ПабМед Google ученый

  • Leclercq R, Derlot E, Duval J, Courvalin P. Опосредованная плазмидами резистентность к ванкомицину и тейкопланину у Enterococcus faecium. N Engl J Med. 1988;319(3):157–61.

    КАС пабмед Google ученый

  • Freitas AR, Sousa C, Novais C, Silva L, Ramos H, Coque TM и др. Быстрое обнаружение клонов Enterococcus faecium высокого риска с помощью времяпролетной масс-спектрометрии с лазерной десорбцией и ионизацией на матрице. Диагностика Microbiol Infect Dis. 2017;87(4):299–307.

    КАС пабмед Google ученый

  • Werner G, Coque TM, Hammerum AM, Hope R, Hryniewicz W, Johnson A, et al.Возникновение и распространение резистентности к ванкомицину среди энтерококков в Европе. Евронаблюдение. 2008;13(47):19046.

    ПабМед Google ученый

  • Четинкая Ю., Фальк П., Мэйхолл К.Г. Ванкомицинрезистентные энтерококки. Clin Microbiol Rev. 2000;13(4):686–707.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Grayson ML, Eliopoulos GM, Wennersten CB, Ruoff KL, De Girolami PC, Ferraro MJ, et al.Повышение устойчивости к бета-лактамным антибиотикам среди клинических изолятов Enterococcus faecium: 22-летний обзор в одном учреждении. Противомикробные агенты Chemother. 1991;35(11):2180–4.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Джонс Р.Н., Садер Х.С., Эрвин М.Э., Андерсон С.К. Появление мультирезистентных энтерококков среди клинических изолятов. I. Данные о распространенности, полученные в ходе исследования, проведенного в 97 медицинских центрах США.Группа по изучению энтерококков. Диагностика Microbiol Infect Dis. 1995;21(2):85–93.

    КАС пабмед Google ученый

  • ван ден Браак Н., ван Белкум А., ван Кеулен М., Флигентхарт Дж., Вербруг Х.А., Эндц Х.П.Молекулярная характеристика устойчивых к ванкомицину энтерококков от госпитализированных пациентов и продуктов птицеводства в Нидерландах. Дж. Клин Микробиол. 1998;36(7):1927–32.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Klare I, Badstubner D, Konstabel C, Bohme G, Claus H, Witte W. Снижение заболеваемости энтерококками, устойчивыми к ванкомицину типа VanA, выделенными из мяса птицы и из образцов фекалий людей в сообществе после прекращения использования авопарцина в животноводстве. Устойчивость к микробам. 1999;5(1):45–52.

    КАС пабмед Google ученый

  • Coque TM, Tomayko JF, Ricke SC, Okhyusen PC, Murray BE. Устойчивые к ванкомицину энтерококки внутрибольничного, внебольничного и животного происхождения в США. Противомикробные агенты Chemother. 1996;40(11):2605–9.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Кирст Х.А., Томпсон Д.Г., Никас Т.И.Историческое годовое использование ванкомицина. Противомикробные агенты Chemother. 1998;42(5):1303–4.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Bonten MJ, Hayden MK, Nathan C, van Voorhis J, Matushek M, Slaughter S, et al. Эпидемиология колонизации больных и окружающей среды ванкомицинрезистентными энтерококками. Ланцет. 1996;348(9042):1615–9.

    КАС пабмед Google ученый

  • Bortolaia V, Mander M, Jensen LB, Olsen JE, Guardabassi L. Устойчивость к ванкомицину у нескольких клонов Enterococcus faecium, выделенных из датских бройлеров через 15 лет после запрета авопарцина.Противомикробные агенты Chemother. 2015;59(5):2926–9.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Nilsson O. Устойчивые к ванкомицину энтерококки у сельскохозяйственных животных – встречаемость и значение. Заразить Экол Эпидемиол. 2012;2. https://doi.org/10. 3402/iee.v2i0.16959 Epub 2012 Apr 19.

  • Johnsen PJ, Osterhus JI, Sletvold H, Sorum M, Kruse H, Nielsen K, et al. Сохранение резистентных к гликопептидам энтерококков животных и человека на двух норвежских птицефабриках, ранее подвергшихся воздействию авопарцина, связано с широко распространенным плазмидно-опосредованным элементом vanA в поликлональной популяции Enterococcus faecium.Appl Environ Microbiol. 2005;71(1):159–68.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC). Устойчивые к антибиотикам бактерии, инфекции, связанные с оказанием медицинской помощи, данные за 2011–2014 гг.: https://gis.cdc.gov/grasp/PSA/MapView.html.

  • Европейский центр профилактики и контроля заболеваний (ECDC). Данные из Атласа эпиднадзора ECDC — Устойчивость к противомикробным препаратам: https://ecdc. europa.eu/en/antimicrobial-resistance/surveillance-and-disease-data/data-ecdc. Отчеты 2005-2019 гг.

  • Небреда Т., Отео Дж., Алдеа С., Гарсия-Эстебанес С., Гастелу-Итурри Дж., Баутиста В. и др. Госпитальная диссеминация клонального комплекса 17 vanB2-содержащего Enterococcus faecium. J Антимикробная химиотерапия. 2007;59(4):806–7.

    КАС пабмед Google ученый

  • Valdezate S, Labayru C, Navarro A, Mantecon MA, Ortega M, Coque TM и др.Крупная клональная вспышка полирезистентного CC17 ST17 Enterococcus faecium, содержащего Tn5382, в испанской больнице. J Антимикробная химиотерапия. 2009;63(1):17–20.

    КАС пабмед Google ученый

  • Protonotariou E, Dimitroulia E, Pournaras S, Pitiriga V, Sofianou D, Tsakris A. Тенденции устойчивости к противомикробным препаратам клинических изолятов Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium в Греции в период с 2002 по 2007 год. J Hosp Infect.2010;75(3):225–7.

    КАС пабмед Google ученый

  • Sivertsen A, Billstrom H, Melefors O, Liljequist BO, Wisell KT, Ullberg M, et al. Вспышка в многоцентровой больнице в Швеции, вызванная введением транспозона vanB2 в стабильно поддерживаемую pRUM-плазмиду в клоне Enterococcus faecium ST192. ПЛОС Один. 2014;9(8):e103274.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Лыцы Б., Энгстранд Л., Густафссон А., Каден Р.Время пересмотреть золотой стандарт генотипирования устойчивых к ванкомицину энтерококков в эпидемиологии: сравнение полногеномного секвенирования с PFGE и MLST при трех предполагаемых вспышках в Швеции в 2013–2015 гг. Заразить Генет Эвол. 2017; 54:74–80.

    КАС пабмед Google ученый

  • Бендер Дж.К., Калмбах А. , Флайге С., Кларе И., Фукс С., Вернер Г. Структура популяции и приобретение детерминанты устойчивости к vanB у немецких клинических изолятов Enterococcus faecium ST192.Научный доклад 2016; 6: 21847.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Бурдон Н., Файнс-Гийон М., Тиоле Дж.М., Могат С., Куаньяр Б., Леклерк Р. и др. Изменение тенденций в отношении устойчивых к ванкомицину энтерококков во французских больницах, 2001-08 гг. J Антимикробная химиотерапия. 2011;66(4):713–21.

    КАС пабмед Google ученый

  • Садовы Е., Гавришевская И., Куч А., Забицкая Д., Гриневич В.Изменение эпидемиологии VanB Enterococcus faecium в Польше. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2018;13:927–36.

    Google ученый

  • Институт Роберта Коха. Eigenschaften, Häufigkeit und Verbreitung von Vancomycinresistenten Enterokokken (VRE) в Германии https://www. rki.de/DE/Content/Infekt/EpidBull/Archiv/2017/Ausgaben/46_17.pdf?__blob=publicationFile Epidemiologisches Bulletin, ноябрь 2017 г. (46 ):519-530.

  • NethMap 2016.NethMap 2016: Потребление противомикробных препаратов и устойчивость к противомикробным препаратам среди важных с медицинской точки зрения бактерий в Нидерландах, 2015 г.

  • Австралийская комиссия по безопасности и качеству в здравоохранении (ACSQHC). AURA 2017: второй австралийский отчет об использовании противомикробных препаратов и резистентности в отношении здоровья человека. Сидней: ACSQHC; 2017.

    Google ученый

  • Кумбс Г.В., Пирсон Дж.К., Кристиансен К., Готлиб Т., Белл Дж.М., Джордж Н. и др.Годовой отчет Австралийской группы по программе эпиднадзора за устойчивостью к противомикробным препаратам энтерококков, 2010 г. Commun Dis Intell Q Rep. 2013;37(3):E199–209.

    ПабМед Google ученый

  • Coombs GW, Pearson JC, Daly DA, Le TT, Robinson JO, Gottlieb T, et al.Годовой отчет Австралийской программы по борьбе с энтерококковым сепсисом, 2013 г. Commun Dis Intell Q Rep. 2014;38(4):E320–6.

    ПабМед Google ученый

  • Buultjens AH, Lam MM, Ballard S, Monk IR, Mahony AA, Grabsch EA, et al. Эволюционное происхождение нового клона ST796 устойчивого к ванкомицину Enterococcus faecium. Пир Дж. 2017;5:e2916.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • van Hal SJ, Espedido BA, Coombs GW, Howden BP, Korman TM, Nimmo GR, et al. Появление поликлональных штаммов Enterococcus faecium, устойчивого к ванкомицину vanA, в Австралии. J Антимикробная химиотерапия. 2017;72(4):998–1001.

    ПабМед Google ученый

  • Кумбс Г.В., Дейли Д., Пирсон Дж.С., Ингрэм П.Р. Изменение молекулярной эпидемиологии устойчивых к ванкомицину энтерококков в Западной Австралии. Патология. 2014;46(1):73–5.

    ПабМед Google ученый

  • Бриллиантова А.Н., Клясова Г.А., Миронова А.В., Тишков В.И., Новичкова Г.А., Бобрынина В.О., и соавт.Распространение ванкомицинрезистентных Enterococcus faecium в двух гематологических центрах России. Противомикробные агенты Int J. 2010;35(2):177–81.

    КАС пабмед Google ученый

  • Хан М.А., Нортвуд Дж.Б., Лоор Р.Г., Толен А.Т., Риера Э., Фалькон М. и др. Высокая распространенность устойчивых к ванкомицину Enterococcus faecium, связанных с инфекцией ST-78, в больницах Асунсьона, Парагвай. Клин Микробиол Инфект. 2010;16(6):624–7.

    КАС пабмед Google ученый

  • Хан М.А., ван дер Валь М., Фаррелл Д.Дж., Коссинс Л., ван Белкум А., Алаидан А. и др.Анализ устойчивых к VanA ванкомицину изолятов Enterococcus faecium из больниц Саудовской Аравии выявил наличие клонального кластера 17 и двух новых типов линии Tn1546. J Антимикробная химиотерапия. 2008;62(2):279–83.

    КАС пабмед Google ученый

  • Очоа С.А., Эскалона Г., Крус-Кордова А., Давила Л.Б., Салдана З., Казарес-Домимгес В. и др. Молекулярный анализ и распределение изолятов Enterococcus faecium с множественной лекарственной устойчивостью, принадлежащих к клональному комплексу 17, в центре третичной медицинской помощи в Мехико.БМС микробиол. 2013;13:291-2180-13-291.

    Google ученый

  • Aamodt H, Mohn SC, Maselle S, Manji KP, Willems R, Jureen R, et al.Анализ генетического родства и факторов риска энтерококков, устойчивых к ампициллину и гентамицину, вызывающих инфекции кровотока у танзанийских детей. BMC Infect Dis. 2015;15:107-015-0845-8.

    Google ученый

  • Ван Хэл С.Дж., Ип С.Л., Ансари М.А., Уилсон Д.Дж., Эспедидо Б.А., Дженсен С.О. и др. Эволюционная динамика Enterococcus faecium выявляет сложные геномные отношения между изолятами с независимым появлением резистентности к ванкомицину.Микроб Геном. 2016;2(1). https://doi.org/10. 1099/mgen.0.000048.

  • Howden BP, Holt KE, Lam MM, Seemann T, Ballard S, Coombs GW, et al. Геномные идеи для контроля появления устойчивых к ванкомицину энтерококков. МБио. 2013;4(4). https://doi.org/10.1128/mBio.00412-13.

  • Zhou X, Chlebowicz MA, Bathoorn E, Rosema S, Couto N, Lokate M, et al. Выяснение вспышек устойчивых к ванкомицину Enterococcus faecium: роль клонального распространения и перемещения мобильных генетических элементов.J Антимикробная химиотерапия. 2018;73(12):3259–67.

    КАС пабмед Google ученый

  • Подкомитет EUCAST по выявлению механизмов резистентности и специфических резистентностей, имеющих клиническое и/или эпидемиологическое значение: Руководство EUCAST по выявлению механизмов резистентности и специфических резистентностей, имеющих клиническое и/или эпидемиологическое значение. 2017.

  • Werner G, Klare I, Fleige C, Geringer U, Witte W, Just HM, et al. Устойчивые к ванкомицину изоляты Enterococcus faecium типа vanB, экспрессирующие различные уровни устойчивости к ванкомицину, широко распространены среди новорожденных пациентов в одном отделении интенсивной терапии. Противомикробная защита от инфекций. 2012;1(1):21.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам, 2014 г.Европейский комитет по тестированию чувствительности к противомикробным препаратам. Таблицы точек останова для интерпретации МИК и диаметров зон. Версия 7.1, 2017 г. http://www.eucast.org.

  • Wijesuriya TM, Perry P, Pryce T, Boehm J, Kay I, Flexman J, et al. Низкие МПК ванкомицина и плотность фекалий снижают чувствительность методов скрининга на устойчивость к ванкомицину энтерококков. Дж. Клин Микробиол. 2014;52(8):2829–33.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Пирман Дж.В.Лекция в Лоубери, 2004 г.: опыт Западной Австралии в отношении устойчивых к ванкомицину энтерококков — от катастрофы к постоянному контролю. Джей Хосп заражает. 2006;63(1):14–26.

    КАС пабмед Google ученый

  • Sinnige JC, Willems RJL, Ruijs GJHM, Mascini E, Arends JP, Troelstra A. Руководство NVMM HRMO VRE; 2015.

    Google ученый

  • Баллард С.А., Пертиле К.К., Лим М. , Джонсон П.Д., Грейсон М.Л.Молекулярная характеристика элементов vanB в естественных анаэробах кишечника. Противомикробные агенты Chemother. 2005;49(5):1688–94.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Баллард С.А., Грабш Э.А., Джонсон П.Д., Грейсон М.Л. Сравнение трех наборов праймеров для ПЦР для выявления носительства гена vanB в фекалиях и корреляции с носительством ванкомицин-резистентных энтерококков: интерференция vanB-содержащими анаэробными бациллами.Противомикробные агенты Chemother. 2005;49(1):77–81.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Domingo MC, Huletsky A, Bernal A, Giroux R, Boudreau DK, Picard FJ, et al. Характеристика Tn5382-подобного транспозона, содержащего кластер генов vanB2, в штамме Clostridium, выделенном из фекалий человека. J Антимикробная химиотерапия. 2005;55(4):466–74.

    КАС пабмед Google ученый

  • Грэм М., Баллард С.А., Грабш Э.А., Джонсон П.Д., Грейсон М.Л.Высокие показатели фекального носительства неэнтерококкового vanB как у детей, так и у взрослых. Противомикробные агенты Chemother. 2008;52(3):1195–1197.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Стинеар Т.П., Олден Д.К., Джонсон П.Д., Дэвис Дж.К., Грейсон М.Л. Энтерококковый локус устойчивости к vanB в анаэробных бактериях в фекалиях человека. Ланцет. 2001;357(9259):855–6.

    КАС пабмед Google ученый

  • Zhou X, Arends JP, Kampinga GA, Ahmad HM, Dijkhuizen B, van Barneveld P, et al.Оценка анализа Xpert vanA/vanB с использованием обогащенных инокулированных бульонов для прямого обнаружения устойчивых к vanB ванкомицину энтерококков. Дж. Клин Микробиол. 2014;52(12):4293–7.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Пак И.Дж., Ли В.Г., Шин Дж.Х., Ли К.В., Ву Г.Дж. VanB фенотип-vanA генотип Enterococcus faecium с гетерогенной экспрессией устойчивости к тейкопланину. Дж. Клин Микробиол. 2008;46(9):3091–3.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Szakacs TA, Kalan L, McConnell MJ, Eshaghi A, Shahinas D, McGeer A, et al.Вспышка чувствительных к ванкомицину Enterococcus faecium, содержащих ген vanA дикого типа. Дж. Клин Микробиол. 2014;52(5):1682–6.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Gagnon S, Levesque S, Lefebvre B, Bourgault AM, Labbe AC, Roger M. Enterococcus faecium, содержащий vanA, чувствителен к ванкомицину и тейкопланину из-за больших делеций нуклеотидов в Tn1546. J Антимикробная химиотерапия. 2011;66(12):2758–62.

    КАС пабмед Google ученый

  • Sivertsen A, Pedersen T, Larssen KW, Bergh K, Ronning TG, Radtke A, et al.Молчащий кластер генов vanA на переносимой плазмиде вызвал вспышку ванкомицин-вариабельных энтерококков. Противомикробные агенты Chemother. 2016;60(7):4119–27.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Колер П., Эшаги А., Ким Х.К., Плевнеши А., Грин К., Уилли Б.М. и др. Распространенность ванкомицин-вариабельного Enterococcus faecium (VVE) среди vanA-позитивных изолятов из стерильных участков и факторы пациента, связанные с бактериемией VVE.ПЛОС Один. 2018;13(3):e0193926.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Thaker MN, Kalan L, Waglechner N, Eshaghi A, Patel SN, Poutanen S, et al. Ванкомицин-вариабельные энтерококки могут вызывать конститутивную резистентность во время антибактериальной терапии. Противомикробные агенты Chemother. 2015;59(3):1405–10.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Курвалин П.Устойчивость к ванкомицину грамположительных кокков. Клин Инфекция Дис. 2006; 42 (Приложение 1): S25–34.

    КАС пабмед Google ученый

  • Xu X, Lin D, Yan G, Ye X, Wu S, Guo Y и др. vanM, новый кластер генов устойчивости к гликопептидам, обнаруженный у Enterococcus faecium. Противомикробные агенты Chemother. 2010;54(11):4643–7.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Бойд Д.А., Уилли Б.М., Фосетт Д., Гиллани Н., Малви М.Р.Молекулярная характеристика Enterococcus faecalis N06-0364 с низким уровнем устойчивости к ванкомицину, содержащим новый кластер генов D-Ala-D-Ser, vanL. Противомикробные агенты Chemother. 2008;52(7):2667–72.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Лебретон Ф., Депардье Ф., Бурдон Н., Файн-Гийон М., Берже П., Камиад С. и др. Переносимая резистентность к ванкомицину D-Ala-d-Ser VanN-типа у Enterococcus faecium. Противомикробные агенты Chemother.2011;55(10):4606–12.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Фрейтас А.Р., Тедим А.П., Франсия М.В., Дженсен Л.Б., Новаис С., Пейкс Л. и др. Многоуровневый популяционно-генетический анализ vanA и vanB Enterococcus faecium, вызывающих внутрибольничные вспышки в 27 странах (1986-2012 гг.). J Антимикробная химиотерапия. 2016;71(12):3351–66.

    КАС пабмед Google ученый

  • Top J, Sinnige JC, Brouwer EC, Werner G, Corander J, Severin JA, et al. Идентификация нового геномного островка, связанного с устойчивостью к ванкомицину vanD-типа, в шести голландских изолятах Enterococcus faecium, устойчивых к ванкомицину. Противомикробные агенты Chemother. 2018;62(3). https://doi.org/10.1128/AAC.01793-17 Версия для печати Март 2018 г.

  • Лебретон Ф., Мэнсон А.Л., Сааведра Дж.Т., Штрауб Т.Дж., Эрл А.М., Гилмор М.С. Отслеживание энтерококков от палеозойского происхождения до госпиталя. Клетка. 2017;169(5):849–861.e13.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Wagenvoort JH, De Brauwer EI, Penders RJ, van der Linden CJ, Willems RJ, Top J, et al.Выживание в окружающей среде чувствительного к ванкомицину устойчивого к ампициллину Enterococcus faecium (AREfm). Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2015;34(9):1901–3.

    КАС пабмед Google ученый

  • Бём А.Б., Сассубр Л.М.Энтерококки как индикаторы фекального загрязнения окружающей среды. В: Гилмор М.С., Клеуэлл Д.Б., Айк И., Шанкар Н., редакторы. Энтерококки: от комменсалов к основным причинам лекарственно-устойчивых инфекций Бостон; 2014.

    Google ученый

  • de Regt MJ, van der Wagen LE, Top J, Blok HE, Hopmans TE, Dekker AW и др. Высокий уровень приобретения и загрязнения окружающей среды устойчивыми к ампициллину штаммами CC17 Enterococcus faecium в голландской больнице.J Антимикробная химиотерапия. 2008;62(6):1401–6.

    ПабМед Google ученый

  • Grabsch EA, Mahony AA, Cameron DR, Martin RD, Heland M, Davey P, et al.Значительное снижение колонизации энтерококков, устойчивых к ванкомицину, и бактериемии после внедрения программы очистки и дезинфекции с использованием хлорной извести. Джей Хосп заражает. 2012;82(4):234–42.

    КАС пабмед Google ученый

  • Passaretti CL, Otter JA, Reich NG, Myers J, Shepard J, Ross T, et al. Оценка обеззараживания окружающей среды парами перекиси водорода для снижения риска заражения пациентов микроорганизмами с множественной лекарственной устойчивостью.Клин Инфекция Дис. 2013;56(1):27–35.

    КАС пабмед Google ученый

  • Брэдли Ч.Р., Фрейз А.П. Тепловая и химическая устойчивость энтерококков. Джей Хосп заражает. 1996;34(3):191–6.

    КАС пабмед Google ученый

  • Pidot SJ, Gao W, Buultjens AH et al. Повышение толерантности госпитальных Enterococcus faecium к спиртам для мытья рук. 2016. Препринт bioRxiv размещен в сети.https://doi.org/10.1101/053728.

  • Маколи К.М., Гобиус К.С., Бритц М.Л., Крейвен Х.М. Терморезистентность термодурических энтерококков, выделенных из молока. Int J Food Microbiol. 2012;154(3):162–8.

    КАС пабмед Google ученый

  • Центры по контролю и профилактике заболеваний. Рекомендации по предотвращению распространения устойчивости к ванкомицину. Рекомендации Консультативного комитета по практике больничного инфекционного контроля (HICPAC). MMWR Recomm Rep. 1995;44(RR-12):1–13.

    Google ученый

  • Де Анджелис Г., Катальдо М.А., Де Вор С., Вентуриелло С., Ла Торре Г., Кауда Р. и др. Инфекционный контроль и профилактические меры по снижению распространения ванкомицин-резистентных энтерококков у госпитализированных пациентов: систематический обзор и метаанализ. J Антимикробная химиотерапия. 2014;69(5):1185–92.

    ПабМед Google ученый

  • Хейден М.К., Бонтен М.Дж., Блом Д.В., Лайл Э.А., ван де Вийвер Д.А., Вайнштейн Р.А.Уменьшение заражения ванкомицин-резистентным энтерококком после проведения рутинных мероприятий по очистке окружающей среды. Клин Инфекция Дис. 2006;42(11):1552–60.

    ПабМед Google ученый

  • Шейх З.Х., Остинг К.А., Ханна Х.А., Арбакл Р.Б., Тарр Дж.Дж., Раад II. Эффективность многогранной политики инфекционного контроля в снижении использования ванкомицина и устойчивых к ванкомицину энтерококков в онкологическом центре третичной помощи. Джей Хосп заражает.2002;51(1):52–8.

    КАС пабмед Google ученый

  • Монтекальво М.А., Джарвис В.Р., Уман Дж., Шай Д.К., Петрулло С., Родни К. и др. Меры инфекционного контроля снижают передачу устойчивых к ванкомицину энтерококков в эндемичных условиях. Энн Интерн Мед. 1999;131(4):269–72.

    КАС пабмед Google ученый

  • Donskey CJ, Chowdhry TK, Hecker MT, Hoyen CK, Hanrahan JA, Hujer AM, et al.Влияние антибактериальной терапии на плотность ванкомицинрезистентных энтерококков в стуле колонизированных больных. N Engl J Med. 2000;343(26):1925–32.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Эдмонд М.Б., Обер Дж.Ф., Вайнбаум Д.Л., Пфаллер М.А., Хванг Т., Сэнфорд М.Д. и др. Устойчивая к ванкомицину бактериемия Enterococcus faecium: факторы риска инфекции. Клин Инфекция Дис. 1995;20(5):1126–33.

    КАС пабмед Google ученый

  • Донски С.Дж., Ханрахан Дж.А., Хаттон Р.А., Райс Л.Б.Влияние парентерального введения антибиотиков на установление колонизации устойчивыми к ванкомицину Enterococcus faecium в желудочно-кишечном тракте мышей. J заразить Dis. 2000; 181(5):1830–3.

    КАС пабмед Google ученый

  • Торнипорт Н.Г., Робертс Р.Б., Джон Дж., Хафнер А., Райли Л.В. Факторы риска, связанные с инфекцией или колонизацией устойчивых к ванкомицину Enterococcus faecium у 145 пациентов из группы пациентов и контрольной группы.Клин Инфекция Дис. 1996;23(4):767–72.

    КАС пабмед Google ученый

  • Убеда С., Таур Ю., Дженк Р.Р., Эквинда М.Дж., Сон Т., Самстейн М. и др. Доминирование устойчивых к ванкомицину энтерококков в кишечной микробиоте обеспечивается лечением антибиотиками у мышей и предшествует инвазии в кровоток у людей. Джей Клин Инвест. 2010;120(12):4332–41.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • McKinnell JA, Kunz DF, Chamot E, Patel M, Shirley RM, Moser SA, et al.Связь между бактериемией устойчивых к ванкомицину энтерококков и применением цефтриаксона. Infect Control Hosp Epidemiol. 2012;33(7):718–24.

    ПабМед Google ученый

  • Иосифидис Э., Евдориду И., Агакиду Э., Чохлиуру Э., Протонотариу Э., Каракула К. и др. Вспышка устойчивых к ванкомицину энтерококков в отделении интенсивной терапии новорожденных: эпидемиология, молекулярный анализ и факторы риска. Am J Infect Control. 2013;41(10):857–61.

    ПабМед Google ученый

  • Frakking FNJ, Bril WS, Sinnige JC, Klooster JEV, de Jong BAW, van Hannen EJ и др. Рекомендации по успешному контролю крупной вспышки устойчивого к ванкомицину Enterococcus faecium (VRE) в неэндемичных больничных условиях. Джей Хосп заражает. 2018.

  • Cattoir V, Leclercq R. Двадцать пять лет совместной жизни с устойчивыми к ванкомицину энтерококками: пора ли разводиться? J Антимикробная химиотерапия.2013;68(4):731–42.

    КАС пабмед Google ученый

  • Деплано А., Денис О., Нонхофф С., Рост Ф., Бил Б., Джейкобс Ф. и др. Вспышка адаптированного к больнице штамма Enterococcus faecium, клонального комплекса-17, устойчивого к ванкомицину, в гематологическом отделении: роль быстрого типирования для раннего контроля. J Антимикробная химиотерапия. 2007;60(4):849–54.

    КАС пабмед Google ученый

  • Mahony AA, Buultjens AH, Ballard SA, Grabsch EA, Xie S, Seemann T, et al.Устойчивый к ванкомицину Enterococcus faecium с последовательностью типа 796 — быстрое международное распространение нового эпидемического клона. Противомикробная защита от инфекций. 2018;7:44-018-0335-z Электронная коллекция 2018.

    Google ученый

  • Brodrick HJ, Raven KE, Harrison EM, Blane B, Reuter S, Torok ME, et al. Полногеномное секвенирование выявило передачу устойчивого к ванкомицину Enterococcus faecium в сети здравоохранения. Геном Мед. 2016;8(1):4-015-0259-7.

    Google ученый

  • МакНалли А., Орен Ю., Келли Д., Паско Б., Данн С., Шричаран Т. и др. Комбинированный анализ изменчивости в основных, дополнительных и регуляторных областях генома обеспечивает взгляд со сверхвысоким разрешением на эволюцию бактериальных популяций. Генетика PLoS. 2016;12(9):e1006280.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Tagini F, Greub G. Секвенирование бактериального генома в клинической микробиологии: обзор, ориентированный на патогены.Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 2017;36(11):2007–20.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Schurch AC, Arredondo-Alonso S, Willems RJL, Goering RV. Варианты секвенирования всего генома для типирования бактериальных штаммов и эпидемиологического анализа на основе однонуклеотидного полиморфизма по сравнению с подходами, основанными на анализе генов. Клин Микробиол Инфект. 2018;24(4):350–4.

    КАС пабмед Google ученый

  • Деуренберг Р.Х., Батхорн Э., Хлебович М.А., Коуто Н., Фердоус М., Гарсия-Кобос С. и др.Применение секвенирования нового поколения в клинической микробиологии и профилактике инфекций. Дж Биотехнолог. 2017; 243:16–24.

    КАС пабмед Google ученый

  • Rossen JWA, Friedrich AW, Moran-Gilad J, Исследовательская группа ESCMID по геномной и молекулярной диагностике (ESGMD). Практические вопросы внедрения полногеномного секвенирования в рутинную диагностическую микробиологию. Клин Микробиол Инфект. 2017.

  • Quainoo S, Coolen JPM, van Hijum SAFT, Huynen MA, Melchers WJG, van Schaik W, et al.Полногеномное секвенирование бактериальных патогенов: будущее анализа внутрибольничных вспышек. Clin Microbiol Rev. 2017;30(4):1015–63.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • де Бин М., Пинхольт М., Топ Дж., Блетц С., Меллманн А., ван Шайк В. и др. Схема основного генома MLST для типирования Enterococcus faecium с высоким разрешением. Дж. Клин Микробиол. 2015;23(12):3788–97.

    Google ученый

  • Доступно по адресу: https://ars.rki.de/Content/Database/ResistanceOverview.aspx. Даты доступа 2013-2016.

  • Ремшмидт С., Шредер С., Бенке М., Гастмайер П., Гефферс С., Крамер Т.С. Непрерывное повышение устойчивости к ванкомицину энтерококков, вызывающих внутрибольничные инфекции в Германии — 10 лет наблюдения. Противомикробная защита от инфекций. 2018;7:54-018-0353-x Электронная коллекция 2018.

    Google ученый

  • Jurke A, Kock R, Becker K, Thole S, Hendrix R, Rossen J, et al.Снижение плотности нозокомиального метициллин-резистентного золотистого стафилококка путем общерегионального поиска и стратегии наблюдения в сорока больницах Германии, входящих в EUREGIO, с 2009 по 2011 год. Euro Surveill. 2013;18(36):pii=20579.

    КАС пабмед Google ученый

  • Баффи К.Г., Памер Э.Г. Опосредованная микробиотой колонизационная резистентность к кишечным патогенам. Нат Рев Иммунол. 2013;13(11):790–801.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Убеда С., Буччи В., Кабальеро С., Джукович А., Туссен Н.С., Эквинда М. и др.Кишечная микробиота, содержащая виды Barnesiella, излечивает устойчивые к ванкомицину колонии Enterococcus faecium. Заразить иммун. 2013;81(3):965–73.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • ван Хартен Р.М., Виллемс Р.Дж.Л., Мартин Н.И., Хендриккс АПА. Мультирезистентные энтерококковые инфекции: новые соединения, новые противомикробные препараты? Тенденции микробиол. 2017;25(6):467–79.

    ПабМед Google ученый

  • Кларе И., Флейге С., Герингер У., Витте В., Вернер Г.Эффективность трех хромогенных агаров для скрининга VRE, двух протоколов Etest((R)) с ванкомицином и различных методов микроразведений при обнаружении генотипа vanB Enterococcus faecium с различными МИК ванкомицина. Диагностика Microbiol Infect Dis. 2012;74(2):171–6.

    КАС пабмед Google ученый

  • Hegstad K, Giske CG, Haldorsen B, Matuschek E, Schonning K, Leegaard TM, et al. Эффективность метода дисковой диффузии EUCAST, метода скрининга на агаре CLSI и автоматизированной системы тестирования чувствительности к противомикробным препаратам Vitek 2 для выявления клинических изолятов энтерококков с низким и средним уровнем устойчивости к ванкомицину VanB-типа: многоцентровое исследование.Дж. Клин Микробиол. 2014;52(5):1582–1589.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Zhou K, Lokate M, Deurenberg RH, Tepper M, Arends JP, Raangs EG, et al. Использование полногеномного секвенирования для отслеживания, контроля и характеристики региональной экспансии бета-лактамаз расширенного спектра, продуцирующих ST15 Klebsiella pneumoniae. Научный доклад 2016; 6: 20840.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Сигрид Розема, Моника Хлебович, Мариэтт Локате, Александр В.Фридрих, Эрик Баторн, Джон В. А. Россен. Индивидуальная диагностика для дифференциации двух одновременно возникающих вспышек устойчивых к ванкомицину Enterococcus faecium, вызванных разными клонами ST117. ECCMID, O0136. 2018 Мадрид, Испания.

  • Prematunge C, MacDougall C, Johnstone J, Adomako K, Lam F, Robertson J, et al. Результаты бактериемии VRE и VSE в эпоху эффективной терапии VRE: систематический обзор и метаанализ. Infect Control Hosp Epidemiol. 2016;37(1):26–35.

    ПабМед Google ученый

  • Чеа А.Л., Спелман Т., Лью Д., Пил Т., Хауден Б.П., Спелман Д. и др. Энтерококковая бактериемия: факторы, влияющие на смертность, продолжительность госпитализации и стоимость госпитализации. Клин Микробиол Инфект. 2013;19(4):E181–9.

    КАС пабмед Google ученый

  • Засовски Э.Дж., Клэйс К.С., Лагнф А.М., Дэвис С.Л., Рыбак М.Дж. Время имеет значение: влияние отсроченной антибиотикотерапии на исходы лечения пациентов с энтерококковыми инфекциями кровотока, возникающими в больнице.Клин Инфекция Дис. 2016;62(10):1242–50.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Wang Y, Lv Y, Cai J, Schwarz S, Cui L, Hu Z и др. Новый ген optrA, придающий переносимую устойчивость к оксазолидинонам и фениколам, и его присутствие в Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium человеческого и животного происхождения. J Антимикробная химиотерапия. 2015;70(8):2182–90.

    КАС пабмед Google ученый

  • Диаз Л., Тран Т.Т., Мунита Дж.М., Миллер В.Р., Ринкон С., Карвахаль Л.П. и др.Полногеномный анализ изолятов Enterococcus faecium с различными МИК даптомицина. Противомикробные агенты Chemother. 2014;58(8):4527–34.

    ПабМед ПабМед Центральный Google ученый

  • Фидлер С., Бендер Дж. К., Клэр И., Халбедель С., Грохманн Э., Шевчик У. и другие. Устойчивость к тигециклину у клинических изолятов Enterococcus faecium опосредована активацией кодируемых плазмидами тетрациклиновых детерминант tet(L) и tet(M). J Антимикробная химиотерапия.2016;71(4):871–81.

    КАС пабмед Google ученый

  • Донабедиан С.М., Перри М.Б., Вагер Д., Хершбергер Э., Малани П., Симджи С. и др. Устойчивость к хинупристину и дальфопристину изолятов Enterococcus faecium от людей, сельскохозяйственных животных и мяса из продуктовых магазинов в США. Дж. Клин Микробиол. 2006;44(9):3361–5.

    КАС пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Энтерококковые инфекции — инфекционные заболевания

    • Варьируется в зависимости от места заражения и теста на чувствительность , пиперациллин, ванкомицин) плюс аминогликозид (например, гентамицин, стрептомицин) используются для достижения бактерицидной активности.Однако некоторые препараты, действующие на клеточную стенку, обладают ограниченной активностью или не действуют против энтерококков; они включают нафциллин, оксациллин, тикарциллин, эртапенем, большинство цефалоспоринов и азтреонам. E. faecium более устойчивы к пенициллину, чем E. faecalis . Когда нельзя использовать аминогликозиды, комбинация аминопенициллинов, таких как ампициллин, плюс цефтриаксон является эффективной альтернативой для лечения эндокардита E. faecalis . Имипенем и, в меньшей степени, меропенем активны в отношении E.фекальные .

      При осложненных кожных инфекциях, вызванных чувствительными к ванкомицину энтерококками, эффективными вариантами лечения являются даптомицин, линезолид, тедизолид, тигециклин и омадациклин.

      Пиперациллин/тазобактам, имипенем или меропенем, тигециклин и эравациклин рекомендуются при осложненных интраабдоминальных инфекциях, когда известно или предполагается участие энтерококков.

      Инфекции мочевыводящих путей не требуют бактерицидной терапии и, если возбудитель чувствителен, обычно лечат одним антибиотиком, например ампициллином.Нитрофурантоин и фосфомицин часто эффективны против ванкомицин-резистентной энтерококковой инфекции мочевыводящих путей.

      За последние несколько десятилетий резистентность ко многим противомикробным препаратам быстро возросла, особенно среди E. faecium .

      Устойчивость к аминогликозидам (например, гентамицину, стрептомицину), особенно к E. faecium , продолжает появляться.

      Устойчивые к ванкомицину энтерококки (VRE) также могут быть устойчивыми к другим гликопептидам (например, тейкопланину), аминогликозидам и бета-лактамам, активным в отношении клеточной стенки (например, пенициллину G, ампициллину).При выявлении инфицированных пациентов строго изолируют. Рекомендуемое лечение включает стрептограмины (хинупристин/дальфопристин только для E. faecium ) и оксазолидиноны (линезолид, тедизолид). Даптомицин, оритаванцин, тигециклин и эравациклин обладают активностью in vitro в отношении VRE и могут применяться не по прямому назначению.

      Энтерококки, продуцирующие бета-лактамазу, иногда вызывают проблемы, особенно когда в тканях присутствует большое количество организмов (например, в вегетации эндокардита).Резистентность может присутствовать клинически, даже если организм кажется восприимчивым на основании стандартного тестирования. Можно использовать ванкомицин или комбинацию бета-лактамных/бета-лактамазных ингибиторов (например, пиперациллин/тазобактам, ампициллин/сульбактам).

      Энтерококки могут включать экзогенно продуцируемые фолаты и тем самым обращать вспять действие триметоприма и сульфаметоксазола; следовательно, терапия этими препаратами может оказаться неудачной, несмотря на очевидную чувствительность in vitro (по этой причине TMP/SMX часто не включают в панели чувствительности энтерококков).

      Границы | Продукция мембранных везикул Enterococcus faecium, культивируемых с субингибирующими концентрациями антибиотиков или без них, и их патологические эффекты на эпителиальные клетки

      Введение

      Энтерококки, грамположительные, факультативные анаэробные бактерии, относятся к наиболее многочисленной комменсальной флоре микробиомов кишечника человека и животных (Shepard and Gilmore, 2002; Heidari et al., 2016). Эти микроорганизмы имеют медицинское значение как условно-патогенные микроорганизмы, особенно у тяжелобольных или у людей с ослабленным иммунитетом (Carmeli et al., 2002; да Силва и др., 2014). Из важных с медицинской точки зрения видов Enterococcus , в частности E. faecium и E. faecalis, E. faecium вызывает возникающие и сложные внутрибольничные инфекции из-за своей устойчивости к антибиотикам (French, 1998; Shepard and Gilmore, 2002; Зиракзаде и Патель, 2006 г.; О’Дрисколл и Крэнк, 2015 г.; Хейдари и др., 2017 г.). E. faecium входит в список патогенов «ESKAPE», потенциально устойчивых к лекарственным препаратам и способных вызывать опасные для жизни внутрибольничные инфекции (Rice, 2008; Pendleton et al., 2013). Колонизация и инфицирование ванкомицин-резистентными энтерококками (VRE) резко возросли за короткий период времени во многих странах (O’Driscoll and Crank, 2015). У ВРЭ развилась устойчивость к другим классам антибиотиков, а инфекции ВРЭ лечить труднее, чем другие энтерококковые инфекции, поскольку для уничтожения этих бактерий доступно меньше терапевтических средств, таких как линезолид, даптомицин и тигециклин (Zirakzadeh and Patel, 2006; O). «Дрисколл и Крэнк, 2015 г.).Помимо устойчивости к противомикробным препаратам, энтерококки обладают несколькими факторами вирулентности, в том числе главным аутолизином (AtlA), энтерококковым лейцин-богатым повторяющимся белком (ElrA), энтерококковым поверхностным белком (Esp), цитолизином (CylA) и коллаген-связывающим белком (Acm ), что делает их условно-патогенными микроорганизмами (Shankar et al., 2002; Eckert et al., 2006; Emirian et al., 2009; Arias and Murray, 2012; Dumoulin et al., 2013; Hendrickx et al., 2013). ; Heidari et al., 2016, 2017).

      Производство и секреция везикул наружной мембраны (OMV) были обнаружены у многих грамотрицательных патогенов (Kuehn and Kesty, 2005; Kulp and Kuehn, 2010).OMV усиливают бактериальный патогенез за счет доставки факторов вирулентности клеткам-хозяевам, образования биопленок, повышения устойчивости к противомикробным препаратам и модуляции врожденных иммунных ответов (Kuehn and Kesty, 2005; Kulp and Kuehn, 2010). Мембранные везикулы (МВ), полученные из грамположительных бактерий, были обнаружены у Staphylococcus aureus, Bacillus spp., Clostridium spp. и Listeria monocytogenes (Lee et al., 2009, 2013; Rivera et al., 2010; Gurung et al., 2011; Nicholas et al., 2017). МВ, полученные из грамположительных патогенов, являются мощными посредниками взаимодействия хозяина и патогена посредством транспорта факторов вирулентности и модуляции иммунного ответа, подобно ВК из грамотрицательных патогенов (Rivera et al., 2010; Gurung et al., 2011; Thay). и др., 2013; Николас и др., 2017). Биогенез бактериальных внеклеточных везикул до сих пор плохо изучен, но было показано, что стрессовые условия, такие как температура роста, стресс оболочки или окисляющие агенты, увеличивают их продукцию (Mug-Opstelten and Witholt, 1978; Katsui et al., 1982; Томпсон и др., 1985; МакБрум и Куэн, 2007). Субингибирующие концентрации гентамицина и полимиксина B увеличивают продукцию OMV у грамотрицательных патогенов (Kadurugamuwa and Beveridge, 1995; Macdonald and Kuehn, 2013). Более того, обработка грамположительных бактерий β-лактамными антибиотиками стимулирует продукцию МВ за счет ослабления клеточных стенок (Biagini et al., 2015; Toyofuku et al., 2017; Yun et al., 2018; Andreoni et al. ., 2019). Таким образом, внеклеточные везикулы, продуцируемые патогенами в условиях антибиотического стресса, которые часто встречаются во время инфекции, могут взаимодействовать с клетками-хозяевами иначе, чем везикулы, продуцируемые патогенами в условиях отсутствия антибиотиков.

      Было показано, что клинические изоляты E. faecium продуцируют MV во время культивирования in vitro (Wagner et al., 2018). Несколько факторов вирулентности и белков, связанных с устойчивостью к противомикробным препаратам, были идентифицированы в MV E. faecium , что позволяет предположить, что MV E. faecium могут усиливать патогенез и устойчивость к противомикробным препаратам. Однако патогенные свойства E. faecium MV по отношению к клеткам-хозяевам еще предстоит определить. Целью этого исследования было изучить производство MV у E.faecium , культивируемых с субингибирующими концентрациями различных антибиотиков, и исследовать способность этих MV индуцировать цитотоксичность и провоспалительные реакции в эпителиальных клетках толстой кишки.

      Материалы и методы

      Бактериальные штаммы

      В этом исследовании использовали штамм

      E. faecium ATCC 700221, полученный из Американской коллекции типовых культур (Манассас, Вирджиния, США). Бактерии выращивали в среде для инфузии мозгового сердца (BHI) (BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния, США) при 37°C.

      Культура клеток

      клетки Caco-2, происходящие из гетерогенной колоректальной аденокарциномы, были приобретены в Корейском банке клеточных линий (Сеул, Корея). Клетки выращивали в минимальной основной среде (HyClone, Logan, UT, USA) с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (HyClone), 2 мМ L -глютамина, 1000 ЕД/мл пенициллина G и 50 мкг/мл стрептомицина при 37 ч. °C во влажной атмосфере с 5% CO 2 .

      Тест на чувствительность к противомикробным препаратам

      Минимальные ингибирующие концентрации (МИК) ванкомицина и линезолида определяли методами микроразведений в соответствии с Институтом клинических лабораторных стандартов (Clinical Laboratory Standards Institute, 2015).В качестве контрольных штаммов использовали штаммы E. faecalis ATCC 29212 и S. aureus ATCC 29213.

      Изоляция СН

      MV, продуцируемых штаммом E. faecium ATCC 700221, выделяли из супернатантов бактериальной культуры, как описано ранее (Gurung et al., 2011; Kim et al., 2016; Yun et al., 2018). E. faecium культивировали в 500 мл бульона BHI при 37°C при встряхивании. Бактерии культивировали в 500 мл бульона BHI с добавлением 1/2 МПК ванкомицина (256 мкг/мл) или линезолида (1 мкг/мл) при 37°C при встряхивании для выделения MV из E.faecium в условиях антибиотического стресса. Бактерии культивировали до поздней экспоненциальной фазы (рис. S1). Бактериальные клетки центрифугировали при 6000g в течение 15 мин при 4°С. Супернатанты культуры фильтровали с использованием системы QuixStand Benchtop System (GE Healthcare, Amersham, UK) с мембраной из полых волокон 0,2 мкм (GE Healthcare) и концентрировали с использованием системы QuixStand Benchtop System с мембраной из полых волокон 500 кДа (GE Healthcare). Образцы МВ ультрацентрифугировали при 150 000g в течение 3 ч при 4°С и промывали в фосфатно-солевом буфере (PBS) с последующим повторным циклом ультрацентрифугирования, после чего осадки МВ ресуспендировали в PBS.Концентрации белка в MV измеряли с использованием модифицированного анализа BCA (Thermo Scientific, Waltham, MA, USA). Очищенные MV проверяли на стерильность путем посева штрихом на чашки с кровяным агаром, а затем хранили при -80°C до использования. ВК E. faecium обрабатывали протеиназой К (0,1 мкг/мл) (Biofact, Тэджон, Корея) в течение 3 ч при 50°C для деградации белков ВК (Jeon et al., 2016).

      Электрофорез в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-страница)

      Бактерии культивировали для достижения поздней экспоненциальной фазы, а затем разрушали обработкой ультразвуком (Branson Ultrasonics Corp., Данбери, Коннектикут, США). Белки культурального супернатанта осаждали 10% трихлоруксусной кислотой. Бактериальный лизат, культуральные супернатанты и MV, соответствующие 10 мкг белка, смешивали с буфером для образцов SDS-PAGE (1 М Tris HCl [pH 6,8], 10% SDS, 1% бромфенолового синего, глицерин и β-меркаптоэтанол) и варится 10 мин. Затем образцы разделяли на 10% геле SDS-PAGE и гели окрашивали кумасси бриллиантовым синим R-250 (Bio-Rad, Hercules, CA, USA).

      Анализ с помощью трансмиссионной электронной микроскопии (ПЭМ)

      Очищенный Е.Образцы faecium MVs наносили на медные сетки и окрашивали 1 или 2% раствором уранилацетата. Образцы визуализировали с помощью просвечивающего электронного микроскопа (HT-7700, Hitachi, Япония), работающего при 120 кВ.

      Идентификация белков в

      E. faecium MV

      Белки в MV E. faecium ATCC 700221 идентифицировали с помощью одномерного гель-электрофореза и жидкостной хроматографии-тандемной масс-спектрометрии (1-DE-LC-MS/MS), как описано ранее (Yun et al., 2018). Пятнадцать мкг белков MV разделяли на 12% SDS-PAGE. Гель фракционировали на восемь фракций по молекулярной массе. Расщепление трипсином в геле проводили, как описано ранее (Choi et al., 2014). Расщепленные пептиды растворяли в буфере для образцов (0,02% уксусной кислоты и 0,1% муравьиной кислоты). Пептиды загружали в колонку-ловушку 2G-V/V (Waters, Milford, MA, USA). Пептиды направляли на обращенно-фазовую колонку C18 размером 10 см × 75 мкм (внутренний диаметр) при скорости потока 300 нл/мин. Условия высокоэффективной жидкостной хроматографии и параметры поиска для анализа тандемной масс-спектрометрии (МС/МС) применяли, как описано ранее (Choi et al., 2014). Все спектры МС и МС/МС, полученные с помощью масс-спектрометра с ионной ловушкой LTQ-Velos ESI, были получены в режиме зависимости от данных. Поиск спектров нано-ЖХ-МС/МС проводили с помощью MASCOT версии 2.4 (Matrix Science, Великобритания) с использованием белковых последовательностей из генома E. faecium ATCC 700221 в качестве эталона. Протеомный анализ проводили трижды для каждого образца ВК. Анализировали только белки, идентифицированные в трех экспериментах. Расположение белков МВ было предсказано с использованием программы предсказания субклеточного местоположения CELLO, версия 2.5 (http://cello.life.nctu.edu.tw/), по ссылкам в UniProt (https://www.uniprot.org/). Белки в E. faecium MV были классифицированы на основе функций Gene Ontology (GO) с использованием программы Blast2GO 5.2 (https://www.blast2go.com/).

      Тесты на жизнеспособность клеток

      Жизнеспособность клеток Caco-2 измеряли с помощью анализа 3-[4,5-диметилтиазол-2-ил]-2,5-дифенилтетразолия бромида (МТТ) (Abcam, Кембридж, Великобритания). Клетки высевали в концентрации 1,0×10 5 на лунку в 24-луночный микропланшет.Клетки Caco-2 обрабатывали MV E. faecium в течение 24 часов, а затем измеряли рост клеток при 570 нм после 2 часов инкубации с реагентом МТТ.

      Проточные цитометрические анализы

      клеток Caco-2 высевали в концентрации 2,5×10 5 клеток/мл в 6-луночные планшеты. После обработки 20 мкг/мл E. faecium MV в течение 24 часов клетки окрашивали аннексином V, конъюгированным с флуоресцеинизотиоцианатом (FITC), и йодидом пропидия (PI) (BD Biosciences, Сан-Хосе, Калифорния, США).Образцы анализировали на проточном цитометре FACSCalibur (BD Biosciences) путем построения графиков интенсивности флуоресценции PI и аннексина V. Для каждого образца было получено 10 000 клеток для анализа данных.

      Количественная полимеразная цепная реакция (КПЦР) в реальном времени генов провоспалительных цитокинов и хемокинов

      Оценивали экспрессию генов, кодирующих глицеральдегид-3-фосфатдегидрогеназу (GAPDH), интерлейкин (IL)-1β, IL-6, IL-8, фактор некроза опухоли (TNF)-α и моноцитарный хемоаттрактантный белок (MCP)-1. с помощью количественной ПЦР, как описано ранее (Jun et al., 2013; Нхо и др., 2015). Клетки Caco-2 высевали в 6-луночные планшеты и затем обрабатывали 1, 2 или 5 мкг/мл E. faecium MV в течение 3 часов. Тотальную РНК экстрагировали с использованием набора RNeasy Mini Kit (Qiagen, Валенсия, Калифорния, США). кДНК синтезировали путем обратной транскрипции 1 мкг тотальной РНК с использованием праймеров oligo dT и обратной транскриптазы M-MLV (Enzynomics, Daejeon, Korea). Экспрессию генов количественно оценивали с использованием TOPreal™ qPCR 2X PreMIX (SYBR Green с высоким ROX) (Enzynomics) с системой реального времени ABI PRISM 7500 (Applied Biosystems, Фостер-сити, Калифорния, США).Кратность изменения экспрессии генов рассчитывали с использованием сравнительного метода Ct. Уровни экспрессии генов нормализовали по уровням экспрессии GAPDH. Каждый эксперимент проводили в трехкратной повторности.

      Статистический анализ

      Данные были проанализированы с использованием R 3.3.4 (https://www.r-project.org/). Экспрессию генов анализировали с использованием одностороннего ANOVA с апостериорным тестом Dunnett . Гибель клеток и экспрессия генов цитокинов между интактными MV и MV, обработанными протеиназой K, анализировали с использованием теста Стьюдента t .Различия P < 0,05 считались статистически значимыми.

      Результаты

      Продукция MV в

      E. faecium ATCC 700221 Выращивание с антибиотиками или без них

      Чтобы определить, продуцируют ли E. faecium ATCC 700221 MV, бактерии культивировали в бульоне BHI до поздней экспоненциальной фазы (рис. S1) и MV выделяли из культурального супернатанта. Анализ ПЭМ показал, что E. faecium продуцировали сферические MV размером ≤50 нм (рис. 1A).Анализ SDS-PAGE показал различные профили белков среди бактериальных лизатов, культурального супернатанта и MV (рис. 1B). E. faecium ATCC 700221 были устойчивы к ванкомицину (МИК 512 мкг/мл), но чувствительны к линезолиду (МИК 2 мкг/мл). E. faecium культивировали в бульоне BHI с 1/2 МИК ванкомицина (256 мкг/мл) или линезолида (1 мкг/мл), и МВ выделяли из культуральных супернатантов для определения влияния субингибирующих концентраций антибиотиков на Продукция МВ и их белковые профили. E. faecium , культивированные с 1/2 МИК ванкомицина или линезолида, продуцировали в 3,0 (197,0 ± 5,4 мкг/л) и 1,5 (95,8 ± 3,9 мкг/л) раз больше белков МВ, чем бактерии, культивируемые в бульоне BHI без антибиотиков (65,0 ± 3,2 мкг/л) соответственно (рис. 1С). Кроме того, анализ SDS-PAGE показал различные профили белков среди MV E. faecium , культивируемых в бульоне BHI без антибиотиков (MVs/BHI), с ванкомицином (MVs/VAN) или с линезолидом (MVs/LIN) (рис. 1D). ). Эти результаты позволяют предположить, что антибиотики модулируют биогенез MV E.faecium ATCC 700221 в субингибиторных концентрациях.

      Рисунок 1 . Мембранные везикулы (МВ), продуцируемые штаммом E. faecium ATCC 700221, культивируемым с антибиотиками или без них. (A) Трансмиссионные электронные микрофотографии MV от E. faecium , культивируемых в бульоне BHI. (B) SDS-PAGE анализ белков, полученных из бактериальных лизатов (дорожка 1), культурального супернатанта (дорожка 2) и MV (дорожка 3). Бактерии культивировали в бульоне BHI до поздней экспоненциальной фазы.Дорожка M, маркер молекулярной массы. (C) Получение MV из E. faecium , культивируемых с антибиотиками или без них. MV выделяли из E. faecium , культивируемых в бульоне BHI (MVs/BHI), бульоне BHI с 256 мкг/мл ванкомицина (MVs/VAN) или бульоне BHI с 1 мкг/мл линезолида (MVs/LIN). Концентрацию белка в МВ, выделенных из 1 л бактериальной культуры, измеряли с помощью модифицированного анализа ВСА. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов. ** P < 0.01 по сравнению с MV/BHI. (D) SDS-PAGE анализ белков MV. Дорожка M, маркер молекулярной массы; 1, МВ/БХИ; 2, МВ/ВАН; 3, МВ/ЛИН. (A,B,D) представляют собой один из трех независимых экспериментов.

      Протеомы MV

      E. faecium ATCC 700221 Культивированные с антибиотиками или без них

      Был проведен протеомный анализ для идентификации белков в E. faecium MV. Всего в MV/BHI было идентифицировано 438 белков (таблица S1). Было идентифицировано, что из этих 438 белков 265, 153 и 20 расположены в цитоплазме, мембране и внеклеточных компартментах соответственно (рис. 2А).В общей сложности 371 белок в MVs/BHI был классифицирован по функциям GO, но 67 белков не были отнесены ни к одной группе GO. Белки, связанные с трансляцией ( n = 42), были наиболее распространенными (рис. 2В). Затем, чтобы определить влияние антибиотиков на белковые профили E. faecium MV, были проанализированы протеомы MV/LIN и MV/VAN. Всего было идентифицировано 461 и 513 белков в MV/VAN и MV/LIN соответственно (таблица S1). Всего во всех трех штаммах E.faecium MV, тогда как 51, 56 и 76 белков были специфически идентифицированы в MV/BHI, MV/VAN и MV/LIN соответственно (рис. 2C). Клеточная локализация белков МВ была одинаковой среди МВ/BHI, МВ/LIN и МВ/VAN (рис. S2), но преобладание белков МВ, принадлежащих к функциональным группам ГО, было различным для трех МВ E. faecium (рис. S3). ).

      Рисунок 2 . Протеомный анализ МВ, продуцируемых E. faecium ATCC 700221. МВ были выделены из E.faecium , культивируемых в бульоне BHI (MVs/BHI), бульоне BHI с 256 мкг/мл ванкомицина (MVs/VAN) или бульоне BHI с 1 мкг/мл линезолида (MVs/LIN). (A,B) Всего было проанализировано 438 белков в MV/BHI на основе клеточной локализации (A), и Gene Ontology (B). (C) Диаграмма Венна белков, идентифицированных в MV/BHI, MV/VAN и MV/LIN.

      E. faecium ATCC 700221 содержит опосредованный плазмидой кластер vanA , ответственный за устойчивость к ванкомицину.Белки, кодируемые кластером vanA , включая VanA, VanH, VanR, VanS, VanX и VanZ, а также аминогликозид-модифицирующий фермент AphA, были идентифицированы в MVs/VAN (табл. 1). Белок устойчивости к кадмию CadD и белок устойчивости к теллуриту TelA также были идентифицированы в MVs/VAN. Предполагаемые факторы вирулентности, включая аутолизин (AMQ96750.1), коллаген-связывающий белок (AMQ98256.1), катаболит-контролирующий белок А (AMQ97727.1), фибронектин-связывающий белок (AMQ97173.1) и белок сборки ворсинок (AMQ98642.1), также были связаны с E. faecium MV. Однако относительное количество белков, связанных с устойчивостью к противомикробным препаратам и вирулентностью, в MV E. faecium варьировалось в зависимости от условий культивирования бактерий (таблица 1 и таблица S1). Эти результаты позволяют предположить, что субингибирующие концентрации антибиотиков модулируют протеомы E. faecium MV.

      Таблица 1 . Идентификация белков, связанных с устойчивостью к противомикробным препаратам и вирулентностью, у E.faecium МВс.

      Цитотоксичность клеток-хозяев в отношении MV

      E. faecium , культивируемых с антибиотиками или без них

      Чтобы определить, могут ли MV, продуцируемые E. faecium ATCC 700221, вызывать цитотоксичность в эпителиальных клетках толстой кишки человека, клетки Caco-2 обрабатывали MV E. faecium (0,25–20 мкг/мл белка) в течение 24 часов, и жизнеспособность клеток анализировали с помощью МТТ-анализа. Цитотоксичность наблюдалась в клетках Caco-2, обработанных ≥5 мкг/мл MV/BHI и MV/VAN, и в клетках Caco-2, обработанных ≥0.5 мкг/мл MV/LIN (рис. 3А). Цитотоксичность значительно различалась между MV/BHI и MV/LIN при ≥0,5 мкг/мл, а также между MV/VAN и MV/LIN при ≥2 мкг/мл. Живые бактерии при множественности заражения (MOI) 10 были более цитотоксичны для клеток Caco-2, чем 5 мкг/мл MV/BHI, но цитотоксическая активность была сходной между мертвыми бактериями при MOI 100 и 5 мкг/мл MV/BHI (рис. С4). Когда клетки Caco-2 обрабатывали 256 мкг/мл ванкомицина или 1 мкг/мл линезолида в качестве отрицательного контроля, цитотоксичности не наблюдалось.Гибель клеток, вызванная MV E. faecium , дополнительно анализировали с помощью проточной цитометрии, где клетки Caco-2 обрабатывали 20 мкг/мл MV/BHI, MV/VAN или MV/LIN в течение 24 часов. MV/LIN были более цитотоксичны для клеток Caco-2, чем MV/BHI или MV/VAN (рис. 3B). Эти результаты свидетельствуют о том, что МВ E. faecium содержат факторы, которые являются цитотоксическими для клеток-хозяев, и что E. faecium , подвергнутые воздействию субингибирующих концентраций линезолида, продуцируют больше цитотоксических МВ, чем при воздействии субингибирующих концентраций ванкомицина или при отсутствии антибиотиков.

      Рисунок 3 . Цитотоксичность клеток Caco-2, обработанных MV из E. faecium ATCC 700221. MV выделяли из культуральных супернатантов E. faecium , культивируемых в бульоне BHI (MVs/BHI), бульоне BHI с 256 мкг/мл ванкомицина (MVs /VAN), или бульон BHI с 1 мкг/мл линезолида (MVs/LIN). Клетки обрабатывали различными концентрациями E. faecium MV в течение 24 часов. (A) Жизнеспособность клеток определяли с использованием анализа МТТ. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов. + P < 0,05, ++ P < 0,01 по сравнению с необработанными контрольными клетками. * P < 0,05, ** P < 0,01 среди одинаковых концентраций MV/BHI, MV/VAN или MV/LIN. (B) Проточный цитометрический анализ гибели клеток Caco-2, индуцированной E. faecium MV. Клетки обрабатывали 20 мкг/мл E. faecium MV в течение 24 часов. Клетки окрашивали FITC-аннексином V и йодидом пропидия и подсчитывали 10 4 клеток.На рисунке представлен один из трех независимых экспериментов, которые дали аналогичные результаты.

      Провоспалительные реакции в клетках Caco-2, обработанных MV

      E. faecium , культивируемых с антибиотиками или без них

      Чтобы определить, могут ли МВ E. faecium вызывать провоспалительные реакции, клетки Caco-2 обрабатывали 1, 2 или 5 мкг/мл МВ/BHI, МВ/ВАН или МВ/LIN в течение 3 ч, и экспрессию генов, кодирующих провоспалительные цитокины, такие как IL-1β, IL-6 и TNF-α, и хемокины, такие как IL-8 и MCP-1, анализировали с помощью количественной ПЦР.Цитотоксичность не наблюдалась в клетках Caco-2, обработанных ≤5 мкг/мл E. faecium MV в течение 3 ч (данные не представлены). Экспрессия генов IL-1 β, IL-6, IL-8 и MCP-1 значительно увеличилась в клетках, обработанных ≥1 мкг/мл MV/BHI (рис. 4). Однако MV/BHI не стимулировали экспрессию TNF -α в клетках, обработанных ≤5 мкг/мл. MV/VAN стимулировали экспрессию всех протестированных генов цитокинов в клетках, обработанных ≥1 мкг/мл. MV/LIN стимулировали экспрессию IL-1 β, IL-6 и IL-8 при ≤5 мкг/мл, тогда как MV/LIN значительно снижали экспрессию TNF -α в клетки, обработанные 1 и 2 мкг/мл МВ/ЛИН.Уровни экспрессии генов IL-1 β, IL-6 и TNF -α были значительно повышены в клетках, обработанных MV/VAN, по сравнению с уровнями в клетках, обработанных MV/BHI или MV/LIN. Однако MV/VAN не вызывали значительного увеличения экспрессии генов IL-8 и MCP-1 в клетках Caco-2 по сравнению с MV/BHI и MV/LIN, за исключением IL-8 и MCP-1 в клетках, обработанных 1 мкг/мл MVs/VAN. MV/BHI (5 мкг/мл) индуцировали более экспрессию генов 90 855 IL-8 90 856, чем мертвые бактерии при MOI 10 и 100 и живые бактерии при MOI 10 (рис. S5).Ванкомицин (256 мкг/мл) и линезолид (1 мкг/мл) не индуцировали экспрессию гена IL-8 в клетках Caco-2. Эти результаты свидетельствуют о том, что MV/VAN вызывают более сильные провоспалительные реакции в клетках Caco-2, чем MV/BHI и MV/LIN.

      Рисунок 4 . Экспрессия генов провоспалительных цитокинов и хемокинов в клетках Caco-2, обработанных MV из E. faecium ATCC 700221. MV выделяли из культуральных супернатантов E. faecium , культивируемых в бульоне BHI (MVs/BHI), бульоне BHI с 256 мкг/мл ванкомицина (MVs/VAN) или бульона BHI с 1 мкг/мл линезолида (MVs/LIN).Клетки обрабатывали различными концентрациями E. faecium MV в течение 3 часов и оценивали экспрессию генов с помощью количественной ПЦР. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов. + P < 0,05, ++ P < 0,01 по сравнению с необработанными контрольными клетками. * P < 0,05, ** P < 0,01 среди одинаковых концентраций MV/BHI, MV/VAN или MV/LIN.

      Подавление провоспалительных реакций на обработанные протеиназой К

      E.faecium МВс

      MV, выделенные из E. faecium ATCC 700221, культивируемых в условиях стресса с различными антибиотиками, демонстрировали разные протеомы и ответы клеток-хозяев. Чтобы определить, способствуют ли белки E. faecium MV цитотоксичности и провоспалительным реакциям в клетках-хозяевах, MV/BHI обрабатывали протеиназой K, и белки MV подвергали деградации. Большинство белков ВК подверглись деградации, но некоторые белки ВК оказались устойчивыми к протеиназе К (рис. S6). Клетки Caco-2 инкубировали либо с интактными, либо с обработанными протеиназой К MV в течение 24 часов.Гибель клеток существенно не отличалась между интактными MV и MV, обработанными протеиназой K (фиг. 5A). Эти результаты позволяют предположить, что небелковые молекулы или белки, устойчивые к протеиназе К, в MV E. faecium способствуют цитотоксичности клетки-хозяина. Затем клетки Caco-2 инкубировали с интактными или обработанными протеиназой К MV в течение 3 часов и анализировали уровни экспрессии двух выбранных генов цитокинов, IL-1 β и IL-8 , с использованием количественной ПЦР. Несмотря на некоторые различия в уровнях экспрессии IL-1 β между партиями MV (как показано на рисунках 4, 5B), экспрессия IL-1 β и IL-8 была значительно снижена в клетках. инкубировали с MV, обработанными протеиназой К, по сравнению с клетками, обработанными интактными MV (фиг. 5B).Эти результаты свидетельствуют о том, что белки MV, разлагаемые протеиназой K, способствуют провоспалительным реакциям в клетках Caco-2.

      Рисунок 5 . Реакции клеток-хозяев на обработанные протеиназой K (PK) E. faecium MV. (A) Клетки Caco-2 инкубировали с интактными или обработанными ФК MV/BHI в течение 24 часов и определяли жизнеспособность клеток с помощью анализа МТТ. Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов. (B) Клетки инкубировали с интактными или обработанными ФК MV/BHI в течение 3 часов и оценивали экспрессию генов с помощью количественной ПЦР.Данные представлены как среднее ± стандартное отклонение трех независимых экспериментов. ** P <0,01 при сравнении интактных и обработанных ПК МК.

      Обсуждение

      Антибиотики модулируют физиологию бактерий в отношении роста бактерий, транскрипции генов и продукции токсинов в субингибиторных концентрациях (Goh et al., 2002; Yim et al., 2011; Moura et al., 2015; Ramos et al., 2015; Sinel et al. ., 2017). Это исследование демонстрирует, что антибиотики в субингибирующих концентрациях могут модулировать биогенез и протеомы МВ у 90 855 E.фаэций . Более того, MV, продуцируемые E. faecium , культивируемыми в условиях стресса с различными антибиотиками, также индуцируют различные уровни цитотоксичности и провоспалительных реакций в эпителиальных клетках толстой кишки in vitro .

      Продукция MV у E. faecium впервые была описана в клинических изолятах (Wagner et al., 2018). Четыре штамма E. faecium продуцировали MV сферической формы, но размер MV варьировал среди штаммов. MV, полученные из трех из E.faecium были похожи по размеру при диаметре ≤50 нм, тогда как MV E. faecium K59-68 имели средний диаметр 83 нм. Белки, идентифицированные в 90 855 E. faecium 90 856 MV, также различались в зависимости от штамма и фазы роста бактерий. МВ E. faecium , выращенных до стационарной фазы, содержали более разнообразные белки, чем МВ E. faecium , выращенных в экспоненциальную фазу. Количество белков, идентифицированных в MV четырех клинических штаммов E. faecium , культивированных в бульоне BHI до экспоненциальной фазы, варьировалось от 162 до 605.В настоящем исследовании E. faecium ATCC 700221 продуцировал MV сферической формы размером ≤50 нм. Различные белковые профили наблюдались среди бактериальных лизатов, культуральных супернатантов и MV. Всего в MV/BHI E. faecium ATCC 700221 было идентифицировано 438 белков. Более того, цитотоксичность и экспрессия гена IL-8 в клетках-хозяевах различались между мертвыми бактериями и MV E. faecium . Эти результаты позволяют предположить, что MV E. faecium представляют собой не мертвые бактериальные клетки или бактериальный мусор, а специфический нанокомплекс, который несет специфические белки и другие молекулы, полученные из бактерий.Кроме того, размер MV и протеом различаются среди штаммов E. faecium .

      MV, выделенные из E. faecium , культивированных в условиях стресса антибиотиками, содержали более разнообразный набор белков, чем MV из E. faecium , культивированных без антибиотиков. Более того, E. faecium продуцировал больше MV в условиях стресса, вызванного ванкомицином, чем в условиях стресса, вызванного линезолидом, тогда как количество белков MV было более разнообразным в условиях стресса, вызванного линезолидом, чем в условиях стресса, вызванного ванкомицином.Было показано, что уменьшение перекрестного связывания пептидогликана увеличивает продукцию MV у S. aureus (Wang et al., 2018). Ванкомицин ингибирует перекрестное связывание N -ацетилмурамовой кислоты с N -ацетилглюкозамином. Таким образом, субингибирующие концентрации ванкомицина могут приводить к ослаблению пептидогликановых слоев, что приводит к увеличению продукции MV у E. faecium . MV E. faecium содержали разнообразный набор белков, локализованных в мембране, цитозоле и внеклеточных компартментах, с высоким содержанием рибосомных белков.Это резюмирует данные предыдущих исследований МВ, полученных из других грамположительных бактерий (Lee et al., 2009, 2013; Gurung et al., 2011; Nicholas et al., 2017). Однако состав и относительное количество белков различались среди MV/BHI, MV/VAN и MV/LIN. Хотя линезолид блокирует инициацию синтеза белка, количество белков в MV/LIN было самым высоким среди всех трех E. faecium MV. Хотя и ванкомицин, и линезолид обладают бактерицидным действием по отношению к E. faecium , остается неясным, почему они по-разному модулируют профили бактериальной транскрипции и трансляции.Факторы вирулентности, такие как коллаген-связывающий белок (SdrD), CcpA, фибронектин-связывающий белок (PavA) и белок сборки пилуса, были связаны с MV/LIN, тогда как белки кластера vanA , аминогликозид-модифицирующий фермент AphA, рибосомальная метилаза ErmB и транспортные белки обнаружены в МВ/ВАН. В предыдущем исследовании были идентифицированы факторы вирулентности Acm, CapD, Fnm, PilA2, PrpA, PtsD и Scm, связанные с бактериальной адгезией и колонизацией, AtlA, Esp и SagA, связанные с образованием биопленок, и CcpA, связанные с ростом бактерий. Э.faecium MV, но их ассоциации в нем различались среди бактериальных штаммов и фаз роста (Wagner et al., 2018). В настоящем исследовании идентифицированы аутолизин ArpU, CcpA, SdrD, PavA и белок сборки пилуса в E. faecium ATCC 700221 MV. Однако их связь с МК варьировала среди МВ/BHI, MV/LIN и MV/VAN. Антибиотики могут активировать или подавлять транскрипцию генов и модулировать биогенез ВК у бактерий в субингибиторных концентрациях. Это явление может привести к различиям в белковых компонентах, включая факторы вирулентности и белки, связанные с устойчивостью к противомикробным препаратам, между MV/VAN и MV/LIN.

      E. faecium MV индуцировали цитотоксичность клетки-хозяина дозозависимым образом. MV/LIN показали самую высокую цитотоксическую активность в отношении клеток Caco-2 среди трех MV E. faecium . Липотейхоевая кислота, внеклеточный супероксид-анион, желатиназа, гиалуронидаза и цитолизин в E. faecalis или E. faecium способствуют повреждению тканей у хозяев (Kayaoglu and Ørstavik, 2004; Fisher and Phillips, 2009; Arias and Murray, 2012). ). Однако эти цитотоксические факторы не были идентифицированы у E.faecium MV в настоящем исследовании. Более того, не было выявлено существенных различий в цитотоксичности клеток-хозяев между интактными и обработанными протеиназой К МВ, что позволяет предположить, что небелковые компоненты и/или устойчивые к протеиназе К белки в МВ E. faecium ответственны за эту цитотоксичность, даже несмотря на то, что наши предыдущее исследование показало, что белки, связанные с MV S. aureus , играют роль в цитотоксичности клетки-хозяина (Jeon et al., 2016). Кроме того, α-гемолизин, связанный с S.aureus MV способствуют цитотоксичности клеток-хозяев (Thay et al., 2013). Хотя специфические цитотоксические факторы, связанные с MV E. faecium , не были определены в настоящем исследовании, MV, продуцируемые E. faecium , культивируемыми с субингибирующими концентрациями линезолида, были высокоцитотоксичными.

      MV, полученные из грамположительных бактерий, содержат множество патоген-ассоциированных молекулярных паттернов (PAMP), таких как мембранные и цитоплазматические белки, флагеллины, пептидогликаны и ДНК (Lee et al., 2009; июнь и др., 2017 г.; Лю и др., 2018). Эти бактериальные лиганды в МВ могут взаимодействовать со специфическими рецепторами на клетках-хозяевах и тем самым вызывать воспалительные реакции. Наше предыдущее исследование показало, что MV S. aureus стимулировали экспрессию генов IL-1 β, IL-6, IL-8 и MIP-1 α в кератиноцитах (Jun et al., 2017). . Нуклеотид-связывающий домен олигомеризации 2 и Toll-подобный рецептор 2 связаны с пептидогликанами в 90 855 S. aureus 90 856 MV и участвуют в сигнальных путях воспалительных реакций (Jun et al., 2017). В настоящем исследовании MV E. faecium стимулировали экспрессию генов провоспалительных цитокинов IL-1 β и IL-6 и генов хемокинов IL-8 и MCP-1 в Caco-2. клеток аналогично S. aureus МВ. Однако обработанные протеиназой К MV E. faecium значительно подавляли экспрессию этих генов цитокинов по сравнению с интактными MV, что свидетельствует о том, что белковые компоненты в MV E. faecium в значительной степени ответственны за провоспалительные ответы в клетках Caco-2. , в отличие от С.aureus МВс. Альтернативное объяснение заключается в том, что деградация поверхностных белков протеиназой К могла косвенно модулировать другие поверхностные компоненты. Поскольку обработанные протеиназой К MV E. faecium не полностью подавляли экспрессию этих генов цитокинов, возможно, что небелковые компоненты, такие как пептидогликаны или устойчивые к протеиназе K белки MV E. faecium , также связаны с провоспалительные реакции в клетках-хозяевах.

      Экспрессия генов провоспалительных цитокинов IL-1 β, IL-6 и TNF -α была на самом высоком уровне в клетках, обработанных MVs/VAN, тогда как экспрессия MCP-1 ген был на самом высоком уровне в клетках, обработанных MVs/BHI.Эти результаты позволяют предположить, что антибиотики модулируют ассоциацию PAMPs с MV E. faecium , которые, в свою очередь, влияют на провоспалительные реакции в клетках-хозяевах. Необходимы дальнейшие исследования для выявления специфических PAMP в E. faecium MV и выяснения сигнальных путей, связанных с этими провоспалительными реакциями.

      Антибиотики повлияли на клинические исходы у пациентов с бактериемией E. faecalis (Foo et al., 2014). Из пациентов, получавших лечение β-лактамами или гликопептидами, гликопептидная терапия повышала смертность пациентов с 90 855 Е.faecalis бактериемия (Foo et al., 2014). В нескольких сообщениях также показано, что гликопептиды, а не β-лактамы, были связаны с большей неэффективностью лечения пациентов и смертностью (Kim et al., 2008; Schweizer et al., 2011). Более того, субингибирующие концентрации антибиотиков увеличивают образование биопленок у многих видов бактерий, включая E. faecalis (Kaplan, 2011; Andersson and Hughes, 2014; Yu et al., 2017). В настоящем исследовании субингибирующие концентрации ванкомицина усиливали продукцию MV у E.фаэций . MV, продуцируемые E. faecium , культивируемыми с субингибирующими концентрациями ванкомицина, индуцировали более сильные провоспалительные реакции, чем MV, продуцируемые E. faecium с субингибирующими концентрациями линезолида in vitro . Возможная ассоциация МВ E. faecium с бактериальным патогенезом и клиническим течением инфицированных пациентов, получавших различные антибиотики, должна быть изучена более глубоко в будущем.

      Это исследование демонстрирует, что субингибирующие концентрации антибиотиков модулируют патологию клетки-хозяина, опосредованную ВК, способами, отличными от их антибактериального действия.Продукция MV в E. faecium в условиях стресса антибиотиков и их патологические эффекты на клетки-хозяева помогают улучшить наше понимание функциональной важности бактериальных внеклеточных везикул.

      Доступность данных

      Необработанные данные, подтверждающие выводы этой рукописи, будут предоставлены авторами без неоправданных оговорок любому квалифицированному исследователю.

      Вклад авторов

      MK, SYK и JS выполнили выделение MV из бактерий, культивируемых в условиях стресса антибиотиков или без них.MK и SYK выполнили цитотоксичность, экспрессию генов цитокинов и выполнили анализ TEM. MK, SIK и HL выполнили протеомный анализ MV. С.К., М.С. и Д.Л. проанализировали полученные данные. Все авторы внесли свой вклад в разработку экспериментов, анализ данных, а также в написание и пересмотр рукописи.

      Финансирование

      Эта работа была поддержана грантом Национального исследовательского фонда Кореи (NRF), финансируемым правительством Кореи (NRF-2017R1A2A2A05001014).

      Заявление о конфликте интересов

      Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

      Дополнительный материал

      Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fcimb.2019.00295/full#supplementary-material

      .

      Ссылки

      Андреони Ф., Тойофуку М., Мензи К., Калавонг Р., Шамбат С. М., Франсуа П. и др. (2019). Антибиотики стимулируют образование везикул в Staphylococcus aureus фагозависимым и независимым образом и различными путями. Антимикроб.Агенты Чемотер. 63, e01439–e01418. doi: 10.1128/AAC.01439-18

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Biagini, M., Garibaldi, M., Aprea, S., Pezzicoli, A., Doro, F., Becherelli, M., et al. (2015). Патоген человека Streptococcus pyogenes высвобождает липопротеины в виде богатых липопротеинами мембранных везикул. Мол. Клетка. Протеомика 14, 2138–2149. doi: 10.1074/mcp.M114.045880

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Кармели, Ю., Элиопулос Г., Мозаффари Э. и Саморе М. (2002). Здравоохранение и экономические последствия устойчивых к ванкомицину энтерококков. Арх. Стажер Мед. 162, 2223–2228. doi: 10.1001/archinte.162.19.2223

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Чой, К.В., Пак, Э.К., Юн, С.Х., Ли, С.Ю., Ли, Ю.Г., Хонг, Ю., и др. (2014). Протеомная характеристика везикул наружной мембраны Pseudomonas putida KT2440. J. Proteome Res. 13, 4298–4309. дои: 10.1021/pr500411d

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Институт клинических и лабораторных стандартов (2015 г.). Стандарты эффективности для тестирования чувствительности к противомикробным препаратам: двадцать пятое информационное приложение . Уэйн, Пенсильвания: CLSI.

      да Силва, Н.С., Муниз, В.Д., Эстофолете, К.Ф., Фуртадо, Г.Х., и Рубио, Ф.Г. (2014). Выявление временных кластеров и факторов риска бактериемии внутрибольничными ванкомицинрезистентными энтерококками. утра. Дж. Заразить. Контроль 42, 389–392. doi: 10.1016/j.ajic.2013.11.010

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Dumoulin, R., Perez, N.C., Gaubert, S., Duhutrel, P., Brinster, S., Torelli, R., et al. (2013). Энтерококковый Rgg-подобный регулятор ElrR активирует экспрессию оперона elrA . J. Бактериол. 195, 3073–3083. doi: 10.1128/JB.00121-13

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Экерт, К., Lecerf, M., Dubost, L., Arthur, M., and Mesnage, S. (2006). Функциональный анализ AtlA, мажорной N -ацетилглюкозаминидазы Enterococcus faecalis . J. Бактериол. 188, 8513–8519. doi: 10.1128/JB.01145-06

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Эмириан, А., Фромантен, С., Эккерт, К., Чау, Ф., Дюбо, Л., Делепьер, М., и соавт. (2009). Влияние пептидогликана O -ацетилирования на аутолитическую активность Enterococcus faecalis N -ацетилглюкозаминидазы AtlA и N -ацетилмурамидазы AtlB. ФЭБС Письмо. 583, 3033–3038. doi: 10.1016/j.febslet.2009.08.010

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Фу, Х., Чейтер, М., Малей, М., и ван Хал, С. Дж. (2014). Использование гликопептидов связано с повышенной смертностью при бактериемии Enterococcus faecalis . J. Антимикроб. Чемотер. 69, 2252–2257. doi: 10.1093/jac/dku107

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Го Э. Б., Йим Г., Цуй В., McClure, J., Surette, M.G., and Davies, J. (2002). Транскрипционная модуляция экспрессии бактериальных генов субингибирующими концентрациями антибиотиков. Проц. Натл. акад. науч. США 99, 17025–17030. doi: 10.1073/pnas.252607699

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Gurung, M., Moon, D.C., Choi, C.W., Lee, J.H., Bae, Y.C., Kim, J., et al. (2011). Staphylococcus aureus продуцирует везикулы мембранного происхождения, которые вызывают гибель клетки-хозяина. PLoS ONE 6:e27958. doi: 10.1371/journal.pone.0027958

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Хейдари Х., Эманейни М., Дабири Х. и Джабаламели Ф. (2016). Факторы вирулентности, характер антимикробной резистентности и молекулярный анализ штаммов энтерококков, выделенных от ожоговых больных. Микроб. Патог. 90, 93–97. doi: 10.1016/j.micpath.2015.11.017

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Хейдари, Х., Hasanpour, S., Saraie, HSE, and Motamedifar, M. (2017). Высокая частота факторов вирулентности среди клинических изолятов Enterococcus faecalis на юго-западе Ирана. Заразить. Чемотер. 49, 51–56. doi: 10.3947/ic.2017.49.1.51

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Хендрикс, А. П., ван Шайк, В., и Виллемс, Р. Дж. (2013). Архитектура клеточной стенки Enterococcus faecium : от устойчивости к патогенезу. Будущий Микроб. 8, 993–1010. doi: 10.2217/fmb.13.66

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Чон, Х., О, М. Х., Джун, С. Х., Ким, С. И., Чой, К. В., Квон, Х. И., и другие. (2016). Вариации среди протеомов мембранных везикул Staphylococcus aureus влияют на цитотоксичность клеток-хозяев. Микроб. Патог. 93, 185–193. doi: 10.1016/j.micpath.2016.02.014

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      июня, С. Х., Lee, J.H., Kim, B.R., Kim, S.I., Park, T.I., Lee, J.C., et al. (2013). Везикулы внешней мембраны Acinetobacter baumannii вызывают мощный врожденный иммунный ответ через мембранные белки. PLoS ONE 8:e71751. doi: 10.1371/journal.pone.0071751

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Jun, S.H., Lee, J.H., Kim, S.I., Choi, C.W., Park, T.I., Jung, H.R., et al. (2017). Staphylococcus aureus — производные мембранных везикул, усугубляют воспаление кожи при атопическом дерматите. клин. Эксп. Аллергия 47, 85–96. doi: 10.1111/cea.12851

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Кадуругамува, Дж. Л., и Беверидж, Т. Дж. (1995). Факторы вирулентности высвобождаются из Pseudomonas aeruginosa в ассоциации с мембранными везикулами во время нормального роста и воздействия гентамицина: новый механизм секреции ферментов. J. Бактериол. 177, 3998–4008. doi: 10.1128/jb.177.14.3998-4008.1995

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Кацуи, Н., Цучидо Т., Хирамацу Р., Фудзикава С., Такано М. и Сибасаки И. (1982). Индуцированное нагреванием пузырение и образование пузырьков на внешней мембране Escherichia coli . J. Бактериол. 151, 1523–1531.

      Резюме PubMed | Академия Google

      Каяоглу Г. и Орставик Д. (2004). Факторы вирулентности Enterococcus faecalis : связь с эндодонтической болезнью. Крит. Преподобный Орал Биол. Мед. 15, 308–320. дои: 10.1177/154411130401500506

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ким, С.H., Kim, K.H., Kim, H.B., Kim, N.J., Kim, E.C., Oh, M.D., et al. (2008). Результат лечения ванкомицином у пациентов с метициллин-чувствительной Staphylococcus aureus бактериемией. Антимикроб. Агенты Чемотер. 52, 192–197. doi: 10.1128/AAC.00700-07

      Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

      Kim, YJ, Jeon, H., Na, S.H., Kwon, H.I., Selasi, G.N., Nicholas, A., et al. (2016). Stenotrophomonas maltophilia Везикулы внешней мембраны вызывают сильную воспалительную реакцию in vitro и in vivo . Патог. Дис. 74:ftw104. DOI: 10.1093/femspd/ftw104

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Кулп, А., и Куэн, М. Дж. (2010). Биологические функции и биогенез секретируемых бактериальных везикул наружной мембраны. год. Преподобный Микробиолог. 64, 163–184. doi: 10.1146/annurev.micro.0.073413

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ли, Э.Ю., Чой, Д.Ю., Ким, Д.К., Ким, Дж.В., Парк, Дж.О., Ким С. и др. (2009). Грамположительные бактерии продуцируют мембранные везикулы: основанная на протеомике характеристика мембранных везикул, происходящих из Staphylococcus aureus . Протеомика 9, 5425–5436. doi: 10.1002/pmic.200

      8

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ли, Дж. Х., Чой, К. В., Ли, Т., Ким, С. И., Ли, Дж. К., и Шин, Дж. Х. (2013). Фактор транскрипции σB играет важную роль в продукции внеклеточных мембранных везикул у Listeria monocytogenes . PLoS ONE 8:e73196. doi: 10.1371/journal.pone.0073196

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Лю, Ю., Дефурни, К.А.Ю., Смид, Э.Дж., и Аби, Т. (2018). Внеклеточные везикулы грамположительных бактерий и их влияние на здоровье и болезни. Фронт. микробиол. 9:1502. doi: 10.3389/fmicb.2018.01502

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Макбрум, А. Дж., и Куэн, М. Дж. (2007). Высвобождение везикул внешней мембраны грамотрицательными бактериями является новой реакцией оболочки на стресс. Мол. микробиол. 63, 545–558. doi: 10.1111/j.1365-2958.2006.05522.x

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Moura, T.M., Campos, F.S., Caierão, J., Franco, A.C., Roehe, P.M., d’Azevedo, P.A., et al. (2015). Влияние субингибирующей концентрации ванкомицина на in vitro экспрессию генов, связанных с вирулентностью, у устойчивых к ванкомицину Enterococcus faecalis . Rev. Soc. Бюстгальтеры. Мед. Троп. 48, 617–621.дои: 10.1590/0037-8682-0017-2015

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Mug-Opstelten, D., and Witholt, B. (1978). Преимущественное высвобождение новых фрагментов внешней мембраны экспоненциально растущей Escherichia coli . Биохим. Биофиз. Acta 508, 287–295. дои: 10.1016/0005-2736(78)

    • -0

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Нхо, Дж. С., Джун, С. Х., О, М. Х., Парк, Т. И., Чой, К. В.и Ким С.И. (2015). Acinetobacter nosocomialis секретирует везикулы наружной мембраны, которые вызывают гибель эпителиальных клеток и вызывают воспалительные реакции хозяина. Микроб. Патог. 81, 39–45. doi: 10.1016/j.micpath.2015.03.012

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Николас, А., Чон, Х., Селаси, Г.Н., На, С.Х., Квон, Х.И., Ким, Ю.Дж., и соавт. (2017). Мембранные везикулы, полученные из Clostridium difficile , индуцируют экспрессию генов провоспалительных цитокинов и цитотоксичность в эпителиальных клетках толстой кишки in vitro . Микроб. Патог. 107, 6–11. doi: 10.1016/j.micpath.2017.03.006

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      О’Дрисколл, Т., и Крэнк, К.В. (2015). Ванкомицинрезистентные энтерококковые инфекции: эпидемиология, клинические проявления и оптимальное лечение. Заразить. Сопротивление наркотикам. 8, 217–230. дои: 10.2147/IDR.S54125

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Рамос С., Чафси И., Сильва Н., Hébraud, M., Santos, H., Capelo-Martinez, J.L., et al. (2015). Влияние ванкомицина на протеом полирезистентного штамма Enterococcus faecium SU18. J. Протеомика 113, 378–387. doi: 10.1016/j.jprot.2014.10.012

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ривера, Дж., Кордеро, Р.Дж., Накузи, А.С., Фразес, С., Никола, А., и Касадевалл, А. (2010). Bacillus anthracis продуцирует везикулы мембранного происхождения, содержащие биологически активные токсины. Проц. Натл. акад. науч. США 107, 19002–19007. doi: 10.1073/pnas.1008843107

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Schweizer, M.L., Furuno, J.P., Harris, A.D., Johnson, J.K., Shardell, M.D., McGregor, J.C., et al. (2011). Сравнительная эффективность нафциллина или цефазолина по сравнению с ванкомицином при метициллин-чувствительной бактериемии. BMC Заражение. Дис. 11:279. дои: 10.1186/1471-2334-11-279

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Шанкар, Н., Багдаян, А.С., и Гилмор, М.С. (2002). Модуляция вирулентности в островке патогенности у устойчивых к ванкомицину Enterococcus faecalis . Природа 417, 746–750. doi: 10.1038/nature00802

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Шепард, Б.Д., и Гилмор, М.С. (2002). Антибиотикорезистентные энтерококки: механизмы и динамика внедрения и лекарственной резистентности. Заражение микробами. 4, 215–224. doi: 10.1016/S1286-4579(01)01530-1

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Синел, К., Cacaci, M., Meignen, P., Guérin, F., Davies, B.W., Sanguinetti, M., et al. (2017). Субингибиторные концентрации ципрофлоксацина усиливают устойчивость к противомикробным препаратам и патогенность Enterococcus faecium . Антимикроб. Агенты Чемотер. 61, e02763–e02716. doi: 10.1128/AAC.02763-16

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Тэй, Б., Вай, С. Н., и Оскарссон, Дж. (2013). Staphylococcus aureus α-токсин-зависимая индукция гибели клеток-хозяев мембранными везикулами. PLoS ONE 8:e54661. doi: 10.1371/journal.pone.0054661

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Томпсон С.С., Найду Ю.М. и Пестка Дж.Дж. (1985). Ультраструктурная локализация внеклеточной протеазы в Pseudomonas fragi с помощью пероксидазно-антипероксидазной реакции. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 50, 103810–103842.

      Резюме PubMed | Академия Google

      Тойофуку, М., Каркамо-Оярсе, Г., Yamamoto, T., Eisenstein, F., Hsiao, C.C., Kurosawa, M., et al. (2017). Запускаемое профагом образование мембранных везикул посредством повреждения пептидогликана у Bacillus subtilis . Нац. коммун. 8:481. doi: 10.1038/s41467-017-00492-w

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Вагнер, Т., Джоши, Б., Дженис, Дж., Аскариан, Ф., Шкалко-Баснет, Н., Хагестад, О.К., и соавт. (2018). Enterococcus faecium продуцирует мембранные везикулы, содержащие факторы вирулентности и белки, связанные с устойчивостью к противомикробным препаратам. J. Протеомика 187, 28–38. doi: 10.1016/j.jprot.2018.05.017

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ван, X., Томпсон, К. Д., Вайденмайер, К., и Ли, Дж. К. (2018). Выпуск внеклеточных везикул Staphylococcus aureus и их применение в качестве вакцинной платформы. Нац. коммун. 9:1379. doi: 10.1038/s41467-018-03847-z

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Йим Г., МакКлюр Дж., Surette, MG, и Davies, JE (2011). Модуляция экспрессии гена Salmonella субингибирующими концентрациями хинолонов. Дж. Антибиот. 64, 73–78. doi: 10.1038/ja.2010.137

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Ю. В., Халлинен К. М. и Вуд К. Б. (2017). Взаимодействие между эффективностью антибиотиков и лизисом, вызванным лекарственными средствами, лежит в основе усиленного образования биопленок при субингибирующих концентрациях лекарств. Антимикроб. Агенты Чемотер. 62, e01603–e01617. doi: 10.1128/AAC.01603-17

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Yun, S.H., Park, E.C., Lee, S.Y., Lee, H., Choi, C.W., Yi, Y.S., et al. (2018). Лечение антибиотиками модулирует белковые компоненты цитотоксических везикул наружной мембраны полирезистентного клинического штамма Acinetobacter baumannii DU202. клин. Протеомика 15:28. doi: 10.1186/s12014-018-9204-2

      Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

      Количественная оценка приобретения и передачи Enterococcus faecium с использованием геномного наблюдения

    • Arias, C.А. и Мюррей, Б. Е. Рост энтерококков: за пределами устойчивости к ванкомицину. Нац. Преподобный Микробиолог. 10 , 266–278 (2012).

      КАС Статья Google ученый

    • Werner, G. et al. Возникновение и распространение резистентности к ванкомицину среди энтерококков в Европе. Евронадзор 13 , 19046 (2008).

      ПабМед Google ученый

    • Прематунг, К.и другие. Исходы бактериемии VRE и VSE в эпоху эффективной терапии VRE: систематический обзор и метаанализ. Заразить. Хосп. Эпидемиол . 37 , 26–35 (2016).

    • Tacconelli, E. et al. Открытие, исследование и разработка новых антибиотиков: список приоритетов ВОЗ в отношении устойчивых к антибиотикам бактерий и туберкулеза. Ланцет Заражение. Дис. 18 , 318–327 (2017).

      Артикул Google ученый

    • Таур Ю.и другие. Доминирование кишечника и риск бактериемии у пациентов, перенесших аллогенную трансплантацию гемопоэтических стволовых клеток. клин. Заразить. Дис. 55 , 905–914 (2012).

      КАС Статья Google ученый

    • Морадигараванд, Д. и др. Внутрихозяинная эволюция Enterococcus faecium при продольном носительстве и переходе к инфекции кровотока у пациентов с ослабленным иммунитетом. Геном Мед. 9 , 119 (2017).

      Артикул Google ученый

    • Фальк, П. С., Виннике, Дж., Вудманси, К., Десаи, М. и Мэйхолл, К. Г. Вспышка ванкомицин-резистентных энтерококков в ожоговом отделении. Заразить. Хосп. Эпидемиол. 21 , 575–582 (2000).

      КАС Статья Google ученый

    • Нили, А. Н. и Мали, М.П. Выживаемость энтерококков и стафилококков на больничных тканях и пластике. Дж. Клин. Макробиол. 38 , 724–726 (2000).

      КАС Статья Google ученый

    • Митчелл, Б.Г., Дэнсер, С.Дж., Андерсон, М. и Ден, Э. Риск заражения микроорганизмами от предыдущих обитателей комнаты: систематический обзор и метаанализ. Дж. Хосп. Заразить. 91 , 211–217 (2015).

      КАС Статья Google ученый

    • Турабелидзе Д., Котетишвили М., Крегер А., Моррис Дж. Г. и Сулаквелидзе А. Улучшенный гель-электрофорез в импульсном поле для типирования устойчивых к ванкомицину энтерококков. Дж. Клин. микробиол. 38 , 4242–4245 (2000).

      КАС Статья Google ученый

    • Gouliouris, T. et al. Геномный надзор за Enterococcus faecium выявил ограниченное распространение штаммов и генов резистентности между домашним скотом и людьми в Соединенном Королевстве. mBio 9 , e01780-18 (2018).

      Артикул Google ученый

    • Арредондо-Алонсо, С. и др. Плазмиды сформировали недавнее появление основного нозокомиального патогена Enterococcus faecium. mBio 11 , e03284-19 (2020).

      Артикул Google ученый

    • Lee, T. et al. Трехлетняя перспектива секвенирования всего генома сепсиса Enterococcus faecium в Австралии. PLoS ONE 15 , e0228781 (2020).

      КАС Статья Google ученый

    • Raven, K. E. et al. Десятилетие геномной истории связанного со здравоохранением Enterococcus faecium в Соединенном Королевстве и Ирландии. Рез. генома. 26 , 1388–1396 (2016).

      КАС Статья Google ученый

    • Пинхольт, М.и другие. WGS 1058 Enterococcus faecium из Копенгагена, Дания, показывает быструю клональную экспансию устойчивого к ванкомицину клона ST80 в сочетании с широким распространением vanA -содержащей плазмиды и приобретением гетерогенного дополнительного генома. J. Антимикроб. Чемотер. 74 , 1776–1785 (2019).

      КАС Статья Google ученый

    • van Hal, S.J. et al. Эволюционная динамика Enterococcus faecium выявляет сложные геномные отношения между изолятами с независимым появлением резистентности к ванкомицину. Микроб. Геном. 2 , e000048 (2016).

      Google ученый

    • Wang, G. et al. Эволюция и мутации, предрасполагающие к устойчивости к даптомицину в устойчивых к ванкомицину штаммах Enterococcus faecium ST736. PLoS ONE 13 , e0209785 (2018).

      КАС Статья Google ученый

    • Raven, K. E. et al.Сложные пути внутрибольничной передачи устойчивых к ванкомицину штаммов Enterococcus faecium , выявленных с помощью секвенирования генома. клин. Заразить. Дис. 64 , 886–893 (2017).

      Артикул Google ученый

    • Liese, J. et al. Распространение резистентного к ванкомицину Enterococcus faecium в академической третичной больнице на юго-западе Германии: крупномасштабное исследование вспышки на основе всего генома. Антимикроб. Агенты Чемотер. 63 , e01978-18 (2019).

      Артикул Google ученый

    • Brown, D.F.J. & Walpole, E. Оценка селективных и обогащенных сред для выделения энтерококков, устойчивых к гликопептидам, из образцов фекалий. J. Антимикроб. Чемотер. 51 , 289–296 (2003).

      КАС Статья Google ученый

    • Тонкин-Хилл, Г., Лиз, Дж. А., Бентли, С. Д., Фрост, С. Д. У. и Корандер, Дж. Быстрый иерархический байесовский анализ структуры населения. Рез. нуклеиновых кислот. 47 , 5539–5549 (2019).

      КАС Статья Google ученый

    • Прието, А. М. Г. и др. Двухкомпонентная система ХтРС способствует устойчивости к хлоргексидину у Enterococcus faecium . Антимикроб. Агенты Чемотер. 61 , e02122-16 (2017).

      Артикул Google ученый

    • Pidot, S.J. et al. Повышение толерантности госпиталя Enterococcus faecium к спиртам для мытья рук. науч. Перевод Мед. 10 , eaar6115 (2018 г.).

      Артикул Google ученый

    • de Regt, M.J.A. et al. Высокий уровень приобретения и загрязнения окружающей среды устойчивым к ампициллину штаммом CC17 Enterococcus faecium в голландской больнице. J. Антимикроб. Чемотер. 62 , 1401–1406 (2008).

      Артикул Google ученый

    • Ludden, C. et al. Исследование One Health генетического родства Klebsiella pneumoniae и их мобильных элементов на востоке Англии. клин. Заразить. Дис. 70 , 219–226 (2020).

      Артикул Google ученый

    • Пассаретти, К.Л. и др. Оценка обеззараживания окружающей среды парами перекиси водорода для снижения риска заражения пациентов микроорганизмами с множественной лекарственной устойчивостью. клин. Заразить. Дис. 56 , 27–35 (2013).

      КАС Статья Google ученый

    • Grabsch, E. A. et al. Значительное снижение колонизации энтерококков, устойчивых к ванкомицину, и бактериемии после внедрения программы очистки и дезинфекции с использованием хлорной извести. Дж. Хосп. Заразить. 82 , 234–242 (2012).

      КАС Статья Google ученый

    • Лебретон, Ф. и др. Возникновение эпидемической множественной лекарственной устойчивости Enterococcus faecium из животных и комменсальных штаммов. mBio 4 , e00534-13 (2013).

      Артикул Google ученый

    • Ли, Х. и др. Формат выравнивания/карты последовательностей и SAMtools. Биоинформатика 25 , 2078–2079 (2009).

      Артикул Google ученый

    • Краучер, Нью-Джерси и др. Быстрый филогенетический анализ больших образцов последовательностей рекомбинантных бактериальных полных геномов с использованием Габбинса. Рез. нуклеиновых кислот. 43 , e15 (2015).

      Артикул Google ученый

    • Стаматакис, А. RAxML, версия 8: инструмент для филогенетического анализа и постанализа больших филогений. Биоинформатика 30 , 1312–1313 (2014).

      КАС Статья Google ученый

    • R Основная команда. R: язык и среда для статистических вычислений (R Foundation for Statistical Computing, 2017).

    • Смут, М. Э., Оно, К., Рущейнски, Дж., Ван, П.-Л. & Ideker, T. Cytoscape 2.8: новые функции для интеграции данных и визуализации сети. Биоинформатика 27 , 431–432 (2011).

      КАС Статья Google ученый

    • Wiegand, I., Hilpert, K. & Hancock, R.E.W. Методы разбавления агара и бульона для определения минимальной ингибирующей концентрации (MIC) противомикробных веществ. Нац. протокол 3 , 163–175 (2008).

      КАС Статья Google ученый

    • Enterococcus faecium: симптомы | возможность передачи

      © Shutterstock Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis

      Что такое энтерококки?

      Бактериальные виды Enterococcus faecium и Enterococcus faecalis являются частью здоровой кишечной флоры человека и животных.Только когда они колонизируют горло или область половых органов, возбудители вызывают дискомфорт. Энтерококки обитают в почве, воде и сточных водах, а также на растительной и животной пище. Некоторые штаммы имеют естественную устойчивость к антибиотикам. Enterococcus faecium , например, устойчив к ванкомицину. Полирезистентные энтерококки часто можно обнаружить в отделениях интенсивной терапии, в частности, с устойчивостью к веществам классов активных веществ пенициллинов, фторхинолонов и аминогликозидов, среди прочих.

      Как передаются энтерококки?

      Возбудитель в основном передается при прямом или косвенном контакте с зараженными людьми или предметами. Это особенно опасно для пациентов с ослабленным иммунитетом.

      Каковы симптомы заболевания?

      Энтерококки могут вызывать инфекции мочевыводящих путей, перитонит, сепсис или эндокардит. Они часто являются частью смешанной флоры. Введение антибиотиков может привести к еще большему размножению резистентных энтерококков и в конечном итоге достичь очагов инфекции и вызвать там заболевания.

      Значение для инфекций в больницах и в амбулаторном секторе

      Основной проблемой при энтерококковой инфекции является ее частично выраженная антибиотикорезистентность. Полирезистентные штаммы труднодоступны при антибактериальной терапии. Энтерококки являются частыми причинами послеоперационных ран, инфекций мочевыводящих путей и кровотока. Редко они являются причиной инфекций нижних дыхательных путей и диареи.

      Время выживания патогенов на неодушевленных поверхностях

      от 5 дней до 4 месяцев

      Дезинфицирующая эффективность для профилактики

      Необходимый спектр действия в отношении энтерококков: бактерицидный

      Enterococcus faecalis и faecium — VelocityEHS

      Enterococcus faecalis и faecium

      ПАСПОРТ БЕЗОПАСНОСТИ ПАТОГЕНА — ИНФЕКЦИОННЫЕ ВЕЩЕСТВА

      РАЗДЕЛ I — ИНФЕКЦИОННЫЙ АГЕНТ

      НАЗВАНИЕ: Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium

      СИНОНИМ ИЛИ ПЕРЕКРЕСТНАЯ ССЫЛКА: Негемолитические стрептококки, гамма-гемолитические стрептококки, энтерококки, стрептококки группы D, ванкомицин-резистентные энтерококки (VRE).Ранее известный как Streptococcus faecalis и Streptococcus faecium(1).

      ХАРАКТЕРИСТИКИ: Enterococcus spp. представляют собой факультативно анаэробные, каталазоотрицательные грамположительные кокки, расположенные индивидуально, парами или короткими цепочками (1,2). Оптимальная температура для роста E. faecalis и E. faecium составляет 35°C(2). E. faecalis и E. faecium являются нормальными обитателями желудочно-кишечного тракта, женских половых органов и (реже) ротовой полости (1-3).

      РАЗДЕЛ II — ИДЕНТИФИКАЦИЯ ОПАСНОСТИ

      ПАТОГЕННОСТЬ/ТОКСИЧНОСТЬ: Энтерококки могут вызывать инфекции мочевыводящих путей, ран и мягких тканей(2,4).Они также связаны с бактериемией, которая может привести к эндокардиту в ранее поврежденных сердечных клапанах (4). E. faecalis является наиболее частым видом, выделяемым из образцов кишечника человека (80-90%), E. faecium составляет 5-10% изолятов (1,2).

      ЭПИДЕМИОЛОГИЯ: Распространение по всему миру(2). Энтерококки являются условно-патогенными микроорганизмами, которые поражают пожилых пациентов с сопутствующими заболеваниями и других пациентов с ослабленным иммунитетом, которые были госпитализированы в течение длительного времени, лечились инвазивными устройствами или получали антибиотики широкого спектра действия (2).Энтерококки являются распространенными внутрибольничными возбудителями, на долю которых приходится 10% внутрибольничных инфекций в США (5). Энтерококки неизменно занимают второе или третье место по распространенности при инфекциях мочевыводящих путей, раневых инфекциях и бактериемии в больницах. Они являются причиной около 16% внутрибольничных инфекций мочевыводящих путей (2).

      ДИАПАЗОН ХОЗЯЙСТВ: Люди, домашние животные и домашний скот(6).

      ИНФЕКЦИОННАЯ ДОЗА: Неизвестно.

      ПУТ ПЕРЕДАЧИ ПЕРЕДАЧИ: внутрибольничный и от человека к человеку; также может передаваться через продукты питания (7).

      ИНКУБАЦИОННЫЙ ПЕРИОД: Неизвестно.

      КОММУНИКАТИВНОСТЬ: Да, может передаваться от человека к человеку(7).

      РАЗДЕЛ III — РАСПРОСТРАНЕНИЕ

      РЕЗЕРВУАР: Желудочно-кишечный тракт человека и животных, включая млекопитающих, птиц, насекомых и рептилий(2,6).

      ЗООНОЗ: Весьма вероятно, что Enterococcus может передаваться от животных к человеку(8).

      ВЕКТОРА: Нет.

      РАЗДЕЛ IV — СТАБИЛЬНОСТЬ И ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ

      РЕЗУЛЬТАТИВНОСТЬ К ЛЕКАРСТВЕННЫМ СРЕДСТВАМ: Большинство штаммов остаются чувствительными к пенициллину, ампициллину и ванкомицину.

      ЛЕКАРСТВЕННАЯ РЕЗИСТЕНТНОСТЬ: Описаны штаммы, устойчивые к β-лактамам, аминогликозидам и, все чаще, к ванкомицину (2,4). Также были идентифицированы штаммы, несущие генетические элементы, придающие устойчивость к хлорамфениколу, тетрациклинам, макролидам, линкозамидам, хинолонам и стрептограминам (2).

      ВОСПРИИМЧИВОСТЬ/УСТОЙЧИВОСТЬ К ДЕЗИНФИЦИРУЮЩИМ СРЕДСТВАМ: Чувствителен к 70% изопропиловому спирту, 70% этанолу, 5,25% гипохлорита натрия, фенольным и четвертичным аммиачным соединениям и глутаральдегиду.Устойчив к 3% перекиси водорода (9,10).

      ФИЗИЧЕСКАЯ ИНАКТИВАЦИЯ: Энтерококки погибают при температуре выше 80°C(10).

      ВЫЖИВАНИЕ ВНЕ ХОЗЯИНА: Энтерококки могут расти и выживать в суровых условиях и могут сохраняться практически везде, включая почву, растения, воду и продукты питания (2). Может выживать от 5 дней до 4 месяцев на сухих неодушевленных поверхностях (11).

      РАЗДЕЛ V — ПЕРВАЯ ПОМОЩЬ / МЕДИЦИНСКАЯ

      НАБЛЮДЕНИЕ: Мониторинг симптомов. Диагноз ставится путем выделения энтерококков из клинических образцов (2,12).

      Примечание. Все методы диагностики доступны не во всех странах.

      ПЕРВАЯ ПОМОЩЬ/ЛЕЧЕНИЕ: Лечение пенициллином или ампициллином инфекций, таких как инфекции мочевыводящих путей, перитонит и раневые инфекции. Для лечения эндокардита и, возможно, менингита требуется комбинированная терапия препаратами, действующими на клеточную стенку (пенициллин, ампициллин или ванкомицин) и аминогликозидами (2,12).

      ИММУНИЗАЦИЯ: Нет.

      ПРОФИЛАКТИКА: Нет.

      РАЗДЕЛ VI — ЛАБОРАТОРНЫЕ ОПАСНОСТИ

      ЛАБОРАТОРНЫЕ ИНФЕКЦИИ: случаев не зарегистрировано; однако Пайк сообщил о 78 случаях с 4 смертельными исходами, связанными с Streptococcus spp. до того, как E. faecalis и E. faecium были отнесены к роду Enterococcus (13).

      ИСТОЧНИКИ/ОБРАЗЦЫ: Кровь, моча, образцы из ран и фекалии(2).

      ОСНОВНАЯ ОПАСНОСТЬ: Случайная парентеральная инокуляция или проглатывание.

      ОСОБЫЕ ОПАСНОСТИ: Нет.

      РАЗДЕЛ VII — КОНТРОЛЬ ВОЗДЕЙСТВИЯ / ИНДИВИДУАЛЬНАЯ ЗАЩИТА

      КЛАССИФИКАЦИЯ ГРУППЫ РИСКА: Группа риска 2(14).

      ТРЕБОВАНИЯ К СОДЕРЖАНИЮ: Помещения, оборудование и методы работы Уровня сдерживания 2 для работы с инфекционными или потенциально инфекционными материалами, животными или культурами(15).

      ЗАЩИТНАЯ ОДЕЖДА: Лабораторный халат. Перчатки, когда прямой контакт кожи с зараженными материалами или животными неизбежен. Защита глаз должна использоваться там, где существует известный или потенциальный риск брызг(15).

      ДРУГИЕ МЕРЫ ПРЕДОСТОРОЖНОСТИ: Все процедуры, при которых могут образовываться аэрозоли или вовлекаются высокие концентрации или большие объемы, должны проводиться в боксе биологической безопасности (БББ).Использование игл, шприцев и других острых предметов должно быть строго ограничено(15). Дополнительные меры предосторожности следует учитывать при работе с животными или крупномасштабных мероприятиях.

      РАЗДЕЛ VIII. ОБРАЩЕНИЕ И ХРАНЕНИЕ

      РАЗЛИВЫ: ​​Позвольте аэрозолям осесть. Надев защитную одежду, осторожно накройте пятно бумажными полотенцами и нанесите соответствующее дезинфицирующее средство, начиная с периметра и двигаясь к центру. Подождите достаточное время контакта перед очисткой (15).

      УТИЛИЗАЦИЯ: Обеззараживание перед утилизацией — стерилизация паром, сжигание, химическая дезинфекция(15).

      ХРАНЕНИЕ: В герметичных контейнерах с соответствующей маркировкой(15).

      РАЗДЕЛ IX — НОРМАТИВНАЯ И ДРУГАЯ ИНФОРМАЦИЯ

      НОРМАТИВНАЯ ИНФОРМАЦИЯ: Импорт, транспортировка и использование патогенов в Канаде регулируется многими регулирующими органами, в том числе Агентством общественного здравоохранения Канады, Министерством здравоохранения Канады, Канадским агентством по надзору за продуктами питания, Министерством окружающей среды Канады и Министерством транспорта Канады. Пользователи несут ответственность за соблюдение ими всех соответствующих актов, правил, руководств и стандартов.

      ОБНОВЛЕНО: ноябрь 2010 г.

      ПОДГОТОВЛЕН: Управлением по борьбе с патогенами, PHAC.

      Хотя информация, мнения и рекомендации, содержащиеся в данном Паспорте безопасности патогенов, собраны из источников, считающихся надежными, мы не несем ответственности за точность, достаточность или надежность, а также за любые убытки или ущерб, возникшие в результате использования информации. Часто обнаруживаются недавно обнаруженные опасности, и эта информация может быть не совсем актуальной.

      Copyright © Агентство общественного здравоохранения Канады, 2010 г. Канада

      Этот документ MSDS/PSDS, предоставленный Агентством общественного здравоохранения Канады (PHAC), предлагается здесь в качестве БЕСПЛАТНОЙ общедоступной услуги для посетителей MSDSonline. Как указано в Условиях использования этого сайта, MSDOnline не несет ответственности за точность, содержание или любой аспект информации, содержащейся на нем.

      Энтерококковые инфекции: основы практики, фон, патофизиология

    • de Perio MA, Yarnold PR, Warren J, et al.Факторы риска и исходы, связанные с энтерококковой бактериемией, не связанной с Enterococcus faecalis, non-Enterococcus faecium. Infect Control Hosp Epidemiol . 2006 27 января (1): 28-33. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • О’Дрисколл Т., Крэнк CW. Ванкомицинрезистентные энтерококковые инфекции: эпидемиология, клинические проявления и оптимальное лечение. Заражение лекарственной устойчивостью . 2015. 8:217-30. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Курвалин П.Устойчивость к ванкомицину грамположительных кокков. Клин Заражение Дис . 2006 г., 1 января. 42 Приложение 1: S25-34. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Sievert DM, Ricks P, Edwards JR, Schneider A, Patel J, Srinivasan A, et al. Устойчивые к противомикробным препаратам патогены, связанные с инфекциями, связанными со здравоохранением: сводка данных, представленных в Национальную сеть безопасности здравоохранения в Центрах по контролю и профилактике заболеваний, 2009–2010 гг. Infect Control Hosp Epidemiol . 2013 янв.34 (1):1-14. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Дешпанде Л.М., Фриче Т.Р., Моэт Г.Дж. и др. Устойчивость к противомикробным препаратам и молекулярная эпидемиология устойчивых к ванкомицину энтерококков из Северной Америки и Европы: отчет программы антимикробного надзора SENTRY. Диагностика микробиол Инфект Дис . 2007 июнь 58 (2): 163-70. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Клиби Н., Бен Слама К., Саенс Ю. и др. Обнаружение факторов вирулентности в устойчивых к гентамицину изолятах Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium из тунисской больницы. Банка J Microbiol . 2007 март 53(3):372-9. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Лонг Дж.К., Чуейри Т.К., Холл Г.С., Эйвери Р.К., Секерес М.А. Даптомицин-резистентный Enterococcus faecium у больного острым миелоидным лейкозом. Mayo Clin Proc . 2005 г., сентябрь 80 (9): 1215-6. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Смит Дж.Р., Барбер К.Е., Раут А., Абуталеб М., Сакулас Г., Рыбак М.Дж. Комбинации β-лактамов с даптомицином обеспечивают синергизм против устойчивых к ванкомицину Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium. J Антимикроб Химический . 2015 июнь 70 (6): 1738-43. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Hindler JA, Wong-Beringer A, Charlton CL, Miller SA, Kelesidis T, Carvalho M, et al. Активность даптомицина in vitro в комбинации с β-лактамами, гентамицином, рифампином и тигециклином в отношении нечувствительных к даптомицину энтерококков. Антимикробные агенты Chemother . 2015 г. 59 июля (7): 4279-88. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Центры по контролю и профилактике заболеваний (CDC).Устойчивый к ванкомицину Staphylococcus aureus — New York, 2004. MMWR Morb Mortal Wkly Rep . 2004 23 апреля. 53 (15): 322-3. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Chang S, Sievert DM, Hageman JC, Boulton ML, Tenover FC, Downes FP, et al. Инфицирование устойчивым к ванкомицину Staphylococcus aureus, содержащим ген устойчивости vanA. N Английский J Med . 3 апреля 2003 г. 348 (14): 1342-7. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Лимбаго Б.М., Каллен А.Дж., Чжу В., Эггерс П., Макдугал Л.К., Альбрехт В.С.Отчет о 13-м изоляте золотистого стафилококка, устойчивого к ванкомицину, из США. Дж Клин Микробиол . 2014 март 52 (3): 998-1002. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Сакка В., Циодрас С., Галани Л. и др. Факторы риска и предикторы смертности у больных, колонизированных ванкомицинрезистентными энтерококками. Clin Microbiol Infect . 2008 14 января (1): 14-21. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Schmidt-Hieber M, Blau IW, Schwartz S, et al.Усиленные стратегии контроля устойчивых к ванкомицину энтерококков у пациентов с ослабленным иммунитетом. Int J Hematol . 2007 авг. 86(2):158-62. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Андерсон А.С., Йонас Д., Хубер И., Каригианни Л., Вёльбер Дж., Хеллвиг Э. и другие. Enterococcus faecalis из продуктов питания, клинических образцов и участков полости рта: преобладание факторов вирулентности в связи с образованием биопленки. Передний микробиол . 2015. 6:1534. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Wisplinghoff H, Bischoff T, Tallent SM, Seifert H, Wenzel RP, Edmond MB.Внутрибольничные инфекции кровотока в больницах США: анализ 24 179 случаев из проспективного общенационального эпиднадзора. Клин Заражение Дис . 2004 1 августа. 39(3):309-17. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Браш Дж.Л. Микробиология инфекционного эндокардита и клинические корреляты: грамположительные микроорганизмы. Браш Дж.Л., изд. Инфекционный эндокардит: лечение в эпоху внутрисосудистых устройств . Информа Здравоохранение; 2007.

    • Qin X, Singh KV, Weinstock GM, Murray BE.Влияние генов fsr Enterococcus faecalis на продукцию желатиназы и сериновой протеазы и вирулентность. Заразить Иммуном . 2000 май. 68(5):2579-86. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Lee do K, Kim Y, Park KS и др. Противомикробная активность мупироцина, даптомицина, линезолида, хинупристина/далфопристин и тигециклина в отношении ванкомицин-резистентных энтерококков (VRE) из клинических изолятов в Корее (1998 и 2005). J Биохим Мол Биол . 2007 30 ноября.40(6):881-7. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Ceci M, Delpech G, Sparo M, Mezzina V, Sánchez Bruni S, Baldaccini B. Клинические и микробиологические особенности бактериемии, вызванной Enterococcus faecalis. J Заражение попыток разработчиков . 2015 30 ноября. 9 (11): 1195-203. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • DiazGranados CA, Zimmer SM, Klein M, et al. Сравнение смертности, связанной с ванкомицин-резистентными и ванкомицин-чувствительными энтерококковыми инфекциями кровотока: метаанализ. Клин Заражение Дис . 2005 1 августа. 41(3):327-33. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Erlandson KM, Sun J, Iwen PC, et al. Влияние более сильнодействующих антибиотиков хинупристин-дальфопристин и линезолид на показатели исхода у пациентов с резистентной к ванкомицину бактериемией Enterococcus. Клин Заражение Дис . 2008 1 января. 46 (1): 30-6. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Батлер К.М. Энтерококковая инфекция у детей. Semin Pediatr Infect Dis .2006 г. 17 июля (3): 128–39. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Стивенс М.П., ​​Эдмонд М.Б. Эндокардит, вызванный устойчивыми к ванкомицину энтерококками: клинический случай и обзор литературы. Клин Заражение Дис . 2005 15 октября. 41(8):1134-42. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • McDonald JR, Olaison L, Anderson DJ и др. Энтерококковый эндокардит: 107 случаев из объединенной базы данных международного сотрудничества по эндокардиту. Am J Med . 2005 июль.118(7):759-66. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Хан З., Сиддики Н., Саиф М.В. Enterococcus Faecalis Инфекционный эндокардит и колоректальная карцинома: случай новой ассоциации, набирающей силу. Гастроэнтерология Res . 2018 11 июня (3): 238-240. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Перикас Х.М., Корредойра Х., Морено А., Гарсия-Паис М.Дж., Фальсес К., Рабуньял Р. и др. Взаимосвязь между инфекционным эндокардитом Enterococcus faecalis и колоректальным новообразованием: предварительные результаты когорты из 154 пациентов. Rev Esp Cardiol (Engl Ed) . 2017 июнь 70 (6): 451-458. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Чаттерджи И., Иределл Дж. Р., Вудс М. и др. Последствия энтерококков для отделения интенсивной терапии. Критическая помощь . 2007 9 марта (1): 69-75. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Берк С.Л., Вергезе А., Хольцкло С.А., Смит Дж.К. Энтерококковая пневмония. Возникновение у пациентов, получающих антибиотики широкого спектра действия и энтеральное питание. Am J Med . 1983 янв. 74(1):153-4. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Claeys KC, Zasowski EJ, Lagnf AM, Rybak MJ. Сравнение результатов между пациентами с одним и несколькими положительными культурами крови на энтерококк: инфекция или иллюзия? Am J Инфекционный контроль . 2016 1 января. 44 (1): 47-9. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Буза Э., Кестлер М., Бека Т., Марискаль Г., Родригес-Креиксемс М., Бермехо Дж. и др. Шкала NOVA: предложение снизить потребность в чреспищеводной эхокардиографии у пациентов с энтерококковой бактериемией. Клин Заражение Дис . 2015 15 февраля. 60 (4): 528-35. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Berge A, Krantz A, Östlund H, Nauclér P, Rasmussen M. Шкала DENOVA позволяет эффективно выявлять пациентов с мономикробной бактериемией, вызванной Enterococcus faecalis, когда эхокардиография не требуется. Инфекция . 2019 Фев. 47 (1): 45-50. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Peterson SC, Lau TTY, Ensom MHH. Комбинация цефтриаксона и ампициллина для лечения энтерококкового эндокардита: качественный систематический обзор. Энн Фармакотер . 2017 июнь 51 (6): 496-503. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Фернандес-Идальго Н., Альмиранте Б., Гавальда Х., Гургуи М., Пенья К., де Аларкон А. и др. Ампициллин плюс цефтриаксон так же эффективен, как ампициллин плюс гентамицин, для лечения инфекционного эндокардита, вызванного энтерококками. Клин Заражение Дис . 2013 май. 56(9):1261-8. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Гавальда Х., Лен О., Миро Х.М., Муньос П., Монтехо М., Аларкон А. и др.Краткое сообщение: лечение эндокардита, вызванного Enterococcus faecalis, ампициллином плюс цефтриаксон. Энн Интерн Мед . 2007 17 апреля. 146(8):574-9. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Беганович М., Лютер М.К., Райс Л.Б., Ариас К.А., Рыбак М.Дж., ЛаПланте К.Л. Обзор комбинированной антимикробной терапии инфекций кровотока, вызванных Enterococcus faecalis, и инфекционного эндокардита. Клин Заражение Дис . 2018 2 июля. 67 (2): 303-309. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Смит Дж.Р., Барбер К.Е., Раут А., Абуталеб М., Сакулас Г., Рыбак М.Дж.Комбинации β-лактамов с даптомицином обеспечивают синергизм против устойчивых к ванкомицину Enterococcus faecalis и Enterococcus faecium. J Антимикроб Химический . 2015. 70 (6): 1738-43. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Hindler JA, Wong-Beringer A, Charlton CL, Miller SA, Kelesidis T, Carvalho M, et al. Активность даптомицина in vitro в комбинации с β-лактамами, гентамицином, рифампином и тигециклином в отношении нечувствительных к даптомицину энтерококков. Антимикробные агенты Chemother .2015 г. 59 июля (7): 4279-88. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Senneville E, Caillon J, Calvet B, Jehl F. К определению оптимальной дозы даптомицина: уроки, извлеченные из экспериментальных и клинических данных. Противомикробные агенты Int J . 2016 47 января (1): 12-9. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Рамасвами Д.П., Амодио-Гротон М., Шоланд С.Дж. Использование даптомицина в лечении ванкомицин-резистентных энтерококковых инфекций мочевыводящих путей: краткая серия случаев. БМС Урол . 2013 16 июля. 13(1):33. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Гавальда Дж., Лен О., Миро Дж.М. и др. Краткое сообщение: лечение эндокардита, вызванного Enterococcus faecalis, ампициллином плюс цефтриаксон. Энн Интерн Мед . 2007 17 апреля. 146(8):574-9. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Фалагас М.Э., Вулуману Э.К., Самонис Г., Вардакас К.З. Фосфомицин. Clin Microbiol Rev . 2016 29 апреля (2): 321-47. [Ссылка QxMD MEDLINE].[Полный текст].

    • Кунья Б.А. Антимикробная терапия мультирезистентных Streptococcus pneumoniae, ванкомицинрезистентных энтерококков и метициллинрезистентных Staphylococcus aureus. Med Clin North Am . 2006 ноябрь 90(6):1165-82. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Смит П.Ф., Букер Б.М., Огунделе А.Б. и др. Сравнительная активность даптомицина, линезолида и хинупристина/далфопристин in vitro в отношении изолятов грамположительных бактерий из крупного онкологического центра. Диагностика микробиол Инфект Дис . 2005 г., июль 52 (3): 255-9. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Плоскер Г.Л., Фиггитт Д.П. Линезолид: фармакоэкономический обзор его применения при серьезных грамположительных инфекциях. Фармакоэкономика . 2005. 23(9):945-64. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Велиссариу ИМ. Линезолид у детей: последние патенты и достижения. Недавние патенты на диске с противоинфекционными препаратами . 2007 янв. 2 (1): 73-7. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Кайнер М.А., Девасия Р.А., Джонс Т.Ф. и соавт. Реакция на возникающую инфекцию, приводящую к вспышке резистентных к линезолиду энтерококков. Возникновение инфекции . 2007 г. 13 июля (7): 1024-30. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Pogue JM, Paterson DL, Pasculle AW, et al. Определение факторов риска, связанных с выделением резистентных к линезолиду штаммов ванкомицинрезистентных энтерококков. Infect Control Hosp Epidemiol . 28 декабря 2007 г. (12): 1382-8.[Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Пуциака Д.Д., Скиффингтон С., Миллер К.Б. и др. Даптомицин в лечении ванкомицин-резистентной бактериемии Enterococcus faecium у пациентов с нейтропенией. J Заразить . 2007 июнь 54 (6): 567-71. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Бритт Н.С., Поттер Э.М., Патель Н., Стид М.Э. Сравнение эффективности и безопасности линезолида и даптомицина при ванкомицин-резистентной энтерококковой инфекции кровотока: национальное когортное исследование пациентов по делам ветеранов. Клин Заражение Дис . 2015 15 сентября. 61 (6): 871-8. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Ариас К.А., Панессо Д., МакГрат Д.М., Цинь Х., Мохика М.Ф., Миллер С. и др. Генетическая основа резистентности энтерококков к даптомицину in vivo. N Английский J Med . 8 сентября 2011 г. 365 (10): 892-900. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Vouillamoz J, Moreillon P, Giddey M, et al. Эффективность даптомицина при лечении экспериментального эндокардита, вызванного чувствительными и полирезистентными энтерококками. J Антимикроб Химический . 2006 г., декабрь 58 (6): 1208-14. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Carugati M, Bayer AS, Miró JM, Park LP, Guimarães AC, Skoutelis A, et al. Терапия высокими дозами даптомицина при левостороннем инфекционном эндокардите: проспективное исследование международного сотрудничества по эндокардиту. Антимикробные агенты Chemother . 2013 Декабрь 57 (12): 6213-22. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Драги, округ Колумбия, Бентон Б.М., Краузе К.М., Торнсберри С., Столп С., Сам Д.Ф.Сравнительное эпиднадзорное исследование активности телаванцина в отношении недавно собранных грамположительных клинических изолятов со всех концов Соединенных Штатов. Антимикробные агенты Chemother . 2008 г., июль 52 (7): 2383-8. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Kosowska-Shick K, Clark C, Pankuch GA, McGhee P, Dewasse B, Beachel L. Активность телаванцина против стафилококков и энтерококков, определяемая исследованиями MIC и отбора резистентности. Антимикробные агенты Chemother .2009 Октябрь 53 (10): 4217-24. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Кори Г.Р., Каблер Х., Мехра П., Гупта С., Оверкэш Дж.С., Порвал А. и др. Однократная доза оритаванцина при лечении острых бактериальных инфекций кожи. N Английский J Med . 2014 5 июня. 370(23):2180-90. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Prokocimer P, De Anda C, Fang E, Mehra P, Das A. Тедизолид фосфат против линезолида для лечения острых бактериальных инфекций кожи и кожных структур: рандомизированное исследование ESTABLISH-1. ЯМА . 2013 13 февраля. 309(6):559-69. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Moran GJ, Fang E, Corey GR, Das AF, De Anda C, Prokocimer P. Тедизолид в течение 6 дней по сравнению с линезолидом в течение 10 дней при острых бактериальных инфекциях кожи и кожных структур (ESTABLISH-2): рандомизированное, двойное слепое, фаза 3, исследование не меньшей эффективности. Ланцет Infect Dis . 5 июня 2014 г. [Ссылка на MEDLINE QxMD].

    • Manley KJ, Fraenkel MB, Mayall BC, et al.Лечение пробиотиками устойчивых к ванкомицину энтерококков: рандомизированное контролируемое исследование. Med J Aust . 2007 г., 7 мая. 186(9):454-7. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • [Руководство] Wilson W, Taubert KA, Gewitz M, et al. Профилактика инфекционного эндокардита: рекомендации Американской кардиологической ассоциации: рекомендации Комитета по ревматической лихорадке, эндокардиту и болезни Кавасаки Американской кардиологической ассоциации, Совета по сердечно-сосудистым заболеваниям у молодых и Совета по клинической кардиологии, Совета по сердечно-сосудистой хирургии и анестезии , а также Междисциплинарная рабочая группа по исследованию качества медицинской помощи и результатов. Тираж . 2007 9 октября. 116(15):1736-54. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • [Рекомендации] Strausbaugh LJ, Siegel JD, Weinstein RA. Профилактика передачи бактерий с множественной лекарственной устойчивостью в медицинских учреждениях: рассказ о двух рекомендациях. Клин Заражение Дис . 2006 15 марта. 42(6):828-35. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Сингх Н., Леже М.М., Кэмпбелл Дж. и др. Контроль ванкомицинрезистентных энтерококков в отделении интенсивной терапии новорожденных. Infect Control Hosp Epidemiol . 2005 г. 26 июля (7): 646-9. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Huskins WC, Huckabee CM, O’Grady NP, et al. Вмешательство для снижения передачи резистентных бактерий в отделениях интенсивной терапии. N Английский J Med . 2011 14 апреля. 364(15):1407-18. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Гульельмо Б.Дж., Дудас В., Маевал I и др. Влияние ряда мероприятий по назначению ванкомицина на использование и распространенность энтерококков, устойчивых к ванкомицину. Jt Comm J Qual Patient Safe . 2005 г. 31 августа (8): 469-75. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • де Брюин М.А., Райли Л.В. Влияет ли назначение ванкомицина на ванкомицин-резистентную энтерококковую инфекцию и колонизацию в больницах? Систематический обзор. BMC Infect Dis . 2007 10 апр. 7:24. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Drees M, Snydman DR, Schmid CH, et al. Предшествующее загрязнение окружающей среды увеличивает риск приобретения устойчивых к ванкомицину энтерококков. Клин Заражение Дис . 2008 1 марта. 46(5):678-85. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Экштейн BC, Адамс Д.А., Экштейн EC, и др. Снижение загрязнения поверхностей окружающей среды Clostridium Difficile и устойчивыми к ванкомицину энтерококками после вмешательства, направленного на улучшение методов очистки. BMC Infect Dis . 2007 21 июня. 7:61. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Вернон М.О., Хейден М.К., Трик В.Е. и др. Хлоргексидина глюконат для очистки пациентов в отделении интенсивной терапии: эффективность контроля источника для снижения бионагрузки устойчивых к ванкомицину энтерококков. Медицинский стажер Arch . 2006 13 февраля. 166(3):306-12. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Фридкин С.К., Эдвардс Дж.Р., Курваль Дж.М. и др. Влияние ванкомицина и цефалоспоринов третьего поколения на распространенность ванкомицин-резистентных энтерококков в 126 отделениях интенсивной терапии для взрослых в США. Энн Интерн Мед . 2001 7 августа. 135(3):175-83. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Альджефри Д.М., Аведиссян С.Н., Родс Н.Дж., Постельник М.Дж., Нгуен К., Шитц М.Х. Зона ванкомицина под кривой и острое повреждение почек: метаанализ. Клин Заражение Дис . 2019 13 ноября. 69 (11): 1881-1887. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

    • Baddour LM, Wilson WR, Bayer AS, et al. Инфекционный эндокардит у взрослых: диагностика, антимикробная терапия и лечение осложнений: научное заявление для медицинских работников от Американской кардиологической ассоциации. Тираж . 2015 13 окт. 132 (15): 1435-86. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • Mazuski JE, Tessier JM, May AK, Sawyer RG, Nadler EP, Rosengart MR, et al.Пересмотренные рекомендации Общества хирургических инфекций по ведению внутрибрюшных инфекций. Surg Infect (Larchmt) . 2017 18 января (1): 1-76. [Ссылка QxMD MEDLINE].

    • .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.