Iga положительный igg положительный: Антитела к коронавирусу SARS‑CoV‑2 (COVID‑19), спайковый (S) белок, IgG, количественно и суммарные антитела IgA, IgM, IgG к SARS‑CoV‑2 (COVID‑19), cпайковый (S) белок, качественно

Содержание

Антитела к коронавирусу. Что важно знать.

Коронавирусная инфекция изменила жизнь почти всей планеты в целом и каждого из нас в частности. Инфекция часто протекает без симптомов или в лёгкой форме. Как узнать, переболел я или нет (ведь кашлял же зимой)? Являюсь ли безопасным для окружающих? Могу без страха навещать бабушку, маму, друзей? Эти и другие вопросы волнуют многих людей. Прошло достаточно времени чтобы появилась возможность ответить на них. Для оценки возможного иммунитета есть скрининговое исследование на антитела к коронавирусу (IgM и IgG).

Коронавирусная инфекция

«Имя» коронавируса, вызвавшего пандемию – CoV-2 (сокращённо от Corona Virus 2), или SARS-CoV-2 . Заболевание, вызванное CoV-2, называется COVID (от англ. COrona VIrus Disease). Опасен развитием двустороннего воспаления лёгких и острой дыхательной недостаточности. Проявления напоминают ОРВИ, но настораживает сухой кашель без отделения мокроты, боли в мышцах, одышка, чувство сдавления в груди.

При острых признаках заболевания исследуют мазки из зева методом ПЦР, который выявляет генетический материал возбудителя (РНК) и подтверждает диагноз.

Что такое антитела к коронавирусу?

Антитела, или иммуноглобулины – специальные белки, которые вырабатывает иммунная система в ответ на попадание любого инфекционного агента, в том числе CoV-2 в организм человека, даже если не было ярких признаков болезни. Антитела распознают коронавирус, обезвреживают и сохраняют информацию об инфекции на случай новой встречи с инфекцией.

Как образуются антитела?

На первой неделе заболевания начинают синтезироваться иммуноглобулины М (IgM). Они первыми встречаются с инфекцией, поэтому считаются маркерами острой первичной инфекции. Однако, тест на определение антител класса М может давать неспецифическую реакцию, что в ряде случаев приводит к ложноположительному результату. Поскольку на антитела класса М возложена ответственность первыми начать отражать инфекцию и сделать максимально быстро, то эти белки не очень специфичны и могут не очень точно улавливать вирус.

К неспецифической реакции с тест- системой могут привести процессы, связанные с воспалением в организме: острые и хронические воспалительные процессы, аутоиммунные заболевания, проблемы с щитовидной железой, беременность и так далее. Это называется «ложноположительный» результат.

При стандартном инфекционном заболевании (в том числе и при коронавирусной инфекции) обычно антитела IgM через месяц исчезают, заменяясь на более специфичные антитела IgG. Однако учёные выяснили, что при коронавирусе IgM могут сохраняться длительное время (до 1,5-3 месяцев от появления симптомов, когда уже сам вирус давно не обнаруживается).

Иммуноглобулины А (IgA) также вырабатываются в острый период инфекции. Их основная цель – защитить слизистые оболочки от коронавируса. IgA более избирательны (специфичны), вырабатываются строго на коронавирус. Их уровень снижается после выздоровления, примерно к 1,5- 2 месяцам после инфицирования.

Иммуноглобулины G (IgG) синтезируются последними, через 5-6 недель с момента попадания вируса в организм, и сохраняют информацию о коронавирусе. Обычно IgG являются архивом памяти перенесеных инфекций, в большинстве случаев пожизненно, либо на несколько лет. Механизмы развития иммунной реакции на коронавирус пока изучаются. Неясно, стойкий иммунитет формируется или нет. Это предстоит узнать. Но в любом случае, выявление IgG свидетельствует о факте попадания коронавируса в организм и иммунном ответе организма.

Лаборатория KDL представляет линейку тестов на определение антител к новой коронавирусной инфекции.

Кому они показаны?

  • Тем, кто хочет узнать, перенес он инфекцию или нет независимо от того, были признаки простуды или не было. Только следует понять, что если были подозрительные признаки, целесообразнее обследоваться на IgG спустя 5 недель от предполагаемого периода. Если признаков не было, сроки неважны, обследуйтесь в любое время.
  • Тем, кто подозревает течение коронавирусной инфекции сейчас или перенес в недавнее время, даже если проводили исследование мазка из зева методом ПЦР и он показал отрицательный результат. Иногда такое бывает.

Также возможно анонимное выполнение исследование на антитела к коронавирусу с указанием возраста и пола.

Давайте о каждом исследовании по порядку.

Антитела IgM/IgG к вирусу SARS-CoV-2.

Это комплексный тест, скрининговый. Одновременно определяет иммуноглобулины классов М и G, результат по каждому антителу. Выполняется иммунохроматографическим методом (ИХГА). Ответ выдаётся в формате «обнаружено/не обнаружено».

Как понимать результат исследования?

Если Ig M (+) обнаружены, IgG (-)не обнаружены:

  • Может быть признаком острой инфекции, особенно при наличии признаков заболевания.
  • Возможен ложноположительный результат (при хронических заболеваниях)

Поэтому целесообразно провести исследование мазка из зева методом ПЦР. Если результат ПЦР отрицательный или нет признаков болезни, повторить тест на антитела через 2-3 недели.

Если IgM (+) обнаружены, IgG (+) обнаружены:

  • Возможна текущая инфекция, начало выздоровления или недавно перенесенное заболевание

Если IgM (-) не обнаружены, IgG (+) обнаружены:

  • Свидетельствует о перенесенном ранее COVID-19

Если IgM (-) не обнаружены, IgG (-) не обнаружены:

  • Пациент еще не встречался с вирусом

Антитела IgA к коронавирусу SARS-CoV-2.

Тест выполняется методом ИФА на анализаторе, производитель Евроиммун, Германия. Результат выдается в виде цифрового значения (коэффициент позитивности = КП).

IgA – показатели ранней инфекции, являются более точными в отличие от IgM, поскольку более специфичны.

Как правильно прочитать результат?

Положительный результат – более 1,1. Говорит об обнаружении IgA и может означать:

  • Текущую инфекцию сейчас ( в частности, бессимптомное течение)
  • Если одновременно определяются IgG, то это период выздоровления или недавно перенесенная инфекция

Пограничный результат – в интервале 0,8 – 1,1. Требует повторного исследования через 2 недели, поскольку может означать:

  • Начальный период инфекции, когда не успели сформироваться антитела в достаточном количестве. Как правило, в таком случае есть признаки болезни и требуется подтверждение методом ПЦР (мазок из зева).  Тогда через 2 недели будет отмечаться нарастание IgA.

Отрицательный результат –менее 0,8. Означает отсутствие антител IgA, что возможно, если:

  • Пациент не встречался с коронавирусом SARS-CoV-2
  • Самое начало болезни, когда ещё нет иммунного ответа. При наличии проявлений правильно исследовать мазок из зева на ПЦР.

Антитела IgG к коронавирусу SARS-CoV-2.

Исследование выполняется на анализаторе методом ИФА, производитель Евроиммун, Германия. Результат в виде цифрового значения (коэффициент позитивности = КП).

Расшифровка результатов:

Положительный результат –более 1,1. IgG выявлены, а это может быть в следующих случаях:

  • Сформирован иммунитет после давно перенесенной инфекции. Тогда антитела IgM и IgA отсутствуют
  • Текущая инфекция в стадии выздоровления или недавно перенесенная –  если определяются одновременно IgA и/или IgM

Пограничный результат –в интервале  0,8 – 1,1.

Возможно, IgG ещё немного, что требует повторить исследование через 2 недели и возможно, когда:

  • Инфекция протекает менее 5-6 недель. Тогда есть признаки болезни, может быть положительный ПЦР и антитела IgM, IgA. Антитела IgG при повторном исследовании в таком случае возрастут.
  • Неспецифическая реакция иммунной системы (очень редко). Тогда повторно тест будет отрицательный.

Отрицательный результат –менее 0,8.

IgG не обнаружены, что может быть, если:

  • Не было встречи с SARS-CoV-2 (тогда нет IgA, IgM)
  • Острая инфекция. При наличии проявлений следует проверить IgA, IgM и мазок на ПЦР.

Обнаружение антител IgG к коронавирусу SARS-CoV-2.

Выполняется методом ИФА, методика автоматизированная, тест-системы российского производства. Заключение в виде цифры (коэффициент позитивности)

Референсные значения:

  • менее 0,9 – отрицательный результат
  • 0,9 – 1,0 – пограничный результат
  • более 1,0 – положительный результат

Выявление антител класса IgG говорит о наличии иммунного ответа на встречу с инфекцией в прошлом и является признаком перенесенного заболевания

Нужна ли специальная подготовка для определения антител к коронавирусу?

Подготовка не нужна. Для исследования сдаётся венозная кровь утром натощак или днём в часы работы медицинских офисов через 3 часа после еды. Чистую воду без газа пить можно.

Обращаю Ваше внимание, что все результаты исследований должен интерпретировать врач! Ведь полноценная картина складывается из данных истории болезни, осмотра, лабораторных и инструментальных данных. Будьте здоровы с лабораторией KDL, берегите себя и близких!

сдать анализ в Москве, цены и адреса клиник АО Семейный доктор

Когда нужен анализ на антитела к SARS-CoV-2 (коронавирусу COVID-19)

Исследование позволяет узнать, был ли у вас контакт с возбудителем, а если был, то как давно. С его помощью можно уточнить стадию заболевания, а также определить, сформировался ли иммунитет (как при естественном контакте с возбудителем, так и в случае вакцинации). 

Анализ на антитела обычно проводится как дополнительное исследование. Если есть подозрение на COVID-19 или вам нужен официальный документ об отсутствии заболевания (для выезда за рубеж, либо по возвращению из-за границы, либо для плановой госпитализации или в иных целях), то в этом случае необходимо сделать ПЦР-тест.

Что такое антитела и какими они бывают 

Антитела — это белки, вырабатываемые иммунной системой в ответ на проникновение возбудителя. Именно по ним определяют стадию развития инфекции. Также по ним  контролируют течение заболевания. Антитела разделяются на классы:

IgA. Образуются на ранней стадии заболевания в слизистых оболочках в ответ на местное воздействие инфекции. Они не формируют клеточную память, поэтому в формировании устойчивого иммунитета не участвуют. 

IgM. Иммуноглобулины этого класса первыми появляются в крови в ответ на внедрение чужеродного антигена в организм. Они тоже не формируют длительного иммунитета. Зато по наличию антител IgA и IgM можно определить, что болезнь находится в активной фазе (даже если внешние симптомы отсутствуют). 

IgG. Отвечают за длительную защиту организма после перенесенных инфекций и обеспечивают основной иммунный ответ. Уровень антител IgG повышается медленнее и достигает стабильного уровня в среднем через 15-20 дней после начала болезни.  

Учитывая специфику коронавирусной инфекции, чтобы понять, на какой стадии находится заболевание, нужно сдавать анализы двух типов: на определение антител IgА (или IgM) и IgG одновременно.

В случае положительного результата по антителам IgG исследование необходимо провести ещё раз. Сделать это рекомендуется через 14 дней, чтобы определить увеличение или снижение концентрации IgG. В случае если при повторном анализе уровень антител повысится или снизится, говорить о формировании иммунитета нельзя.

Если у пациента первый анализ не выявил IgM, а значение IgG было равно 10 и больше, а при повторной диагностике значение IgG не увеличилось,  можно говорить о том, что человек переболел как минимум месяц назад и с большой вероятностью имеет иммунитет к коронавирусу.

Впрочем, положительный результат на антитела к COVID-19 не может считаться стопроцентной гарантией неподверженности вирусу. Ученые еще не собрали достаточно данных, чтобы дать окончательный ответ, насколько долго сохраняется иммунитет.

Важный момент: особенностью иммунного ответа к новой коронавирусной инфекции является практически одновременное появление антител как класса IgM, так класса IgA. Однако антитела класса А сохраняются дольше и поэтому в совокупности с IgG имеют большее диагностическое значение.

Тестирование на антитела к вирусу SARS-CoV-2 (COVID-19) в Семейном докторе

Мы предлагаем воспользоваться высокоточной тест-системой от проверенного производителя (страна происхождения — Германия). Метод диагностики — ИФА. Система зарегистрирована в Роспотребнадзоре и одобрена FDA США. Состоит из тестов на выявление IgA и IgG. Рекомендуем сделать сразу оба. Специфичность тестов — 100%, чувствительность для IgG — 99%. Готовность результатов — 2  суток. Результаты будут доступны в вашем Личном кабинете на сайте или мобильном приложении. 

Вы также можете воспользоваться комплексным анализом (профилем), позволяющим получить количественную оценку антител IgM и IgG.  

Если вам необходимо получить результат максимально быстро, вы можете выбрать экспресс-тест с готовностью результатов в течение 15-20 минут. Одновременно выявляются иммуноглобулины IgM и IgG. Методика качественная (т.е. выявляется только факт наличия антител, без количественной оценки). Чувствительность составляет 87%.

Также возможен выбор других тест-систем.

Подготовка

  • Перед анализом методом ИФА  в течение 3-4 часов нельзя есть. Из питья допускается только негазированная вода.

  • Перед прохождением экспресс-теста рекомендуется не есть жирную, сладкую пищу, не курить за 12 часов до исследования, избегать чрезмерных физических и эмоциональных нагрузок. 

При сдаче анализа потребуется заполнить документы установленного образца. Чтобы минимизировать время на сдачу анализа, пожалуйста, скачайте бланки документов заранее (они доступны по этой ссылке>>>) и заполните их дома.

Как проходит диагностика?

  • Для анализа берётся кровь из вены или из пальца. 

  • Пациентам необходимо иметь при себе паспорт.

  • Рекомендуем приходить в масках и одноразовых перчатках.

  • Проводим с соблюдением всех правил санитарно-эпидемиологического режима.

  • Забор осуществляется во всех поликлиниках сети согласно графику их работы. 

Если у вас повышена температура, кашель, одышка, боль в мышцах, слабость и ощущение заложенности в грудной клетке, пожалуйста, оставайтесь дома и вызовите врача. 

Какова диагностическая точность тестов на антитела для выявления инфекции вирусом COVID-19?

Актуальность

COVID-19 — инфекционное заболевание, вызываемое вирусом SARS-CoV-2, которое легко распространяется между людьми подобно обычной простуде или «гриппу». Большинство людей с COVID-19 имеют респираторные заболевания легкой и умеренной степени тяжести, а некоторые могут не иметь никаких симптомов (бессимптомная инфекция). У других развиваются тяжелые симптомы, и они нуждаются в специализированном лечении и интенсивной терапии.

Иммунная система людей с COVID-19 реагирует на инфекцию, вырабатывая белки, которые могут атаковать вирус (антитела) в их крови. Тесты для обнаружения антител в крови людей могут показать, есть ли у них в настоящее время COVID-19 или был он у них ранее.

Почему важны точные тесты?

Точное тестирование позволяет выявить людей, которые могут нуждаться в лечении, или которые должны изолироваться, чтобы предотвратить распространение инфекции. Неспособность обнаружить людей с COVID-19 при его наличии (ложноотрицательный результат) может задержать лечение и создать риск дальнейшего распространения инфекции на других людей. Неправильная идентификация COVID-19 при его отсутствии (ложноположительный результат) может привести к ненужному дальнейшему тестированию, лечению и изоляции человека и его близких контактных лиц. Правильная идентификация людей, которые ранее имели COVID-19, важна для измерения распространения болезни, оценки успеха мероприятий общественного здравоохранения (например, изоляции) и, возможно, для идентификации лиц с иммунитетом (если в будущем будет доказано, что антитела указывают на иммунитет).

Для выявления ложноотрицательных и ложноположительных результатов сравнивают результаты теста на антитела у людей, в отношении которых известно, есть у них COVID-19 и нет. Участников исследования классифицируют на основании критериев, известных как «эталонный стандарт», на предмет наличия или отсутствия у них COVID-19. Во многих исследованиях для идентификации людей с COVID-19 используют образцы, взятые из полости носа и горла. Образцы подвергают тесту, называемому обратно-транскриптазной полимеразной цепной реакцией (RT-PCR). Этот процесс тестирования может иногда пропускать инфекцию (ложноотрицательный результат), но дополнительные тесты могут выявить инфекцию COVID-19 у людей с отрицательным RT-PCR результатом. Они включают измерение клинических симптомов, таких как кашель или высокая температура, или «визуализацию», например, рентгеновские снимки грудной клетки. Людей, в отношении которых известно, что у них не было COVID-19, иногда идентифицируют по образцам крови, взятым до появления COVID-19, или среди пациентов с респираторными симптомами, которые, были вызваны другими заболеваниями, и это было установлено.

Что было изучено в этом обзоре?

В исследованиях рассматривали три типа антител: IgA, IgG и IgM. Большинство тестов измеряют как IgG, так и IgM, но некоторые измеряют один тип антител или комбинацию из трех антител.

Уровни антител повышаются и понижаются в разное время после инфекции. Уровень IgG повышается в последнюю очередь, но это длится дольше всего. Уровень антител обычно самый высокий через несколько недель после инфекции.

Некоторые тесты на антитела требуют специального лабораторного оборудования. Другие используют одноразовые устройства, похожие на тесты на беременность. Эти тесты можно использовать в лабораториях или в любом другом месте (в месте оказания медицинской помощи), в больнице или на дому.

Мы хотели узнать, являются ли тесты на антитела:

— достаточно точными, чтобы диагностировать инфекцию у людей с или без симптомов COVID-19, и

— можно ли использовать тесты на антитела, чтобы узнать, перенёс ли уже человек COVID-19.

Что мы сделали?

Мы провели поиск на предмет исследований, в которых измеряли точность тестов на антитела по сравнению с критериями эталонного стандарта для выявления текущей или перенесенной инфекции COVID-19. Исследования могли оценить любой тест на антитела по сравнению с любым эталонным стандартом. Людей можно было тестировать в больнице или по месту жительства. Исследования могли тестировать людей, у которых, был известно о наличии или отсутствии COVID-19, или у которых подозревали его наличие.

Характеристика исследований

Мы нашли 54 соответствующих исследования. Исследования были проведены в Азии (38), Европе (15), а также в США и Китае (по 1).

Сорок шесть исследований включали только людей, которые находились в больнице с предполагаемой или подтвержденной инфекцией COVID-19. В двадцати девяти исследованиях сравнили результаты тестов у людей с COVID-19 с результатами тестов у здоровых людей или людей с другими заболеваниями.

Не во всех исследованиях была представлена подробная информация о возрасте и поле участников. Часто мы не могли сказать, оценивали ли в исследованиях текущую или перенесенную инфекцию, так как лишь в немногих из них сообщали, выздоравливали ли участники. Мы не нашли ни одного исследования, которое проверяло бы только бессимптомных людей.

Основные результаты

Наши результаты получены в основном из 38 исследований, которые предоставили данные, основанные на времени, прошедшем с тех пор, как люди впервые заметили симптомы.

Тесты на антитела через неделю после появления первых симптомов выявили только 30% людей, имевших COVID-19. Точность повысилась на 2-й неделе с обнаружением 70%, и была самой высокой на 3-й неделе (обнаружено более 90%). Было мало данных на сроке после третьей недели. Тесты дали ложноположительные результаты в 2% случаев без COVID-19.

Результаты тестов IgG/IgM через три недели после начала симптомов показали, что если у 1000 человек были проведены тесты на антитела, и у 50 (5%) из них действительно был COVID-19 (как можно было бы ожидать в национальном скрининговом обследовании):

— то у 58 человек будет положительный тест на COVID-19. Из них у 12 человек (21%) не будет инфекции COVID-19 (ложноположительный результат).

— то у 942 человек будет отрицательный тест на COVID-19. Из них 4 человека (0.4%) будут на самом деле иметь COVID-19 (ложноотрицательный результат).

Если бы мы протестировали 1000 медицинских работников (в условиях повышенного риска), у которых были симптомы, и 500 (50%) из них действительно имели бы COVID-19:

— то у 464 человек будет положительный тест на COVID-19. Из них 7 человек (2%) не будут иметь COVID-19 (ложноположительный результат).

— то у 537 человек будет отрицательный тест на COVID-19. Из них 43 человека (8%) будут на самом деле иметь COVID-19 (ложноотрицательный результат).

Мы не нашли убедительных различий в точности разных типов тестов на антитела.

Насколько надежны результаты исследований в этом обзоре?

Наша уверенность в доказательствах ограничена по нескольким причинам. В целом исследования были небольшими, не использовали самых надежных методов и не сообщали о результатах в полном объеме. Часто они не включали пациентов с COVID-19, у которых мог быть ложноотрицательный результат теста PCR (ПЦР), и использовали их данные для людей без COVID-19 из записей анализов, сделанных до появления COVID-19. Это могло повлиять на точность теста, но невозможно определить, в какой степени.

К кому применимы результаты этого обзора?

Большинство участников находились в больнице с COVID-19, поэтому, скорее всего, у них было более тяжелое заболевание, чем у людей со слабыми симптомами, которые не были госпитализированы. Это означает, что мы не знаем, насколько точны тесты на антитела для людей с более легкой болезнью или без симптомов.

Более половины исследований оценивали разработанные ими самими тесты, большинство из которых были недоступны для приобретения. Многие исследования были быстро опубликованы в Интернете в виде «препринтов». Препринты не проходят обычную строгую проверку, необходимую для опубликованных исследований, поэтому мы не уверены, насколько они надежны.

Поскольку большинство исследований были проведены в Азии, мы не знаем, будут ли результаты тестов сходными в других странах мира.

Каково значение этого обзора?

Обзор показывает, что тесты на антитела могли бы сыграть полезную роль в обнаружении того, был ли у кого-то COVID-19, но большое значение имеет временная точка, когда тесты были проведены. Тесты на антитела могут помочь подтвердить инфекцию COVID-19 у людей, которые имели симптомы в течение более двух недель и не проходили тест RT-PCR или имели отрицательные результаты теста RT-PCR. Тесты лучше выявляют COVID-19 у людей через две и более недель после начала симптомов, но мы не знаем, насколько хорошо они работают более чем через пять недель после начала симптомов. Мы не знаем, насколько хорошо работают тесты для людей с более легкой болезнью или без симптомов, потому что исследования в обзоре в основном были проведены у людей, находившихся в больнице. Со временем мы узнаем, обеспечивает ли перенесенная людьми инфекция COVID-19 выработкой у них иммунитета к будущей инфекции.

Необходимы дальнейшие исследования по использованию тестов на антитела у людей, восстанавливающихся после инфекции COVID-19, и у людей, которые испытывали легкие симптомы или никогда не испытывали их.

Насколько актуален этот обзор?

Этот обзор включает данные, опубликованные к 27 апреля 2020 года. Поскольку в этой области публикуется много новых исследований, мы будем часто обновлять этот обзор.

Как правильно тестировать на коронавирус и насколько защищают антитела

Почему тесты на коронавирусную инфекцию показывают точный результат не всегда, причем он бывает как ложноположительным, так и ложноотрицательным; что происходит с иммунным ответом и как долго защищают антитела? Эти и другие важные вопросы диагностики COVID-19 обсудили участники открытой конференции, организованной клиникой «Хадасса Москва».

Тестирование необходимо, чтобы установить факт инфицирования коронавирусом SARS-Cov-2, отслеживать динамику заболевания и, наконец, сделать вывод о том, что пациент выздоровел. Для этого используют различные виды тестов: как прямые методы детекции вируса по фрагментам генома — различные модификации метода ПЦР, так и косвенные методы выявления антител, которые формируются в качестве иммунного ответа на SARS-Cov-2. Определяют уровень нескольких классов специфических антител — IgG, IgM, IgA, используя метод иммуноферментного анализа (ИМА), иммунохроматографические методы и их аналоги. Каждый из подходов имеет свои плюсы и минусы, ограничения, особенности интерпретации и использования в зависимости от стадии заболевания, констатировали участники конференции.

«Преимущество анализа методом ПЦР — положительный результат при его проведении неоспоримо подтверждает, что пациент инфицирован, — говорит руководитель лабораторной службы «Хадасса Москва», вице-президент Российской Ассоциации медицинской лабораторной диагностики (РАМЛД) Любовь Станкевич. — При этом интерпретация отрицательных результатов ПЦР-тестов на коронавирус представляет собой проблему. Дело в том, что отрицательный результат может означать в равной степени и отсутствие инфекции, и очень раннюю или, наоборот, позднюю стадию заболевания. Таким образом, отрицательный результат не может исключить возможность наличия вируса в организме и COVID-19″. Ошибки в интерпретации результатов тестирования могут приводить к неверным клиническим выводам в отношении конкретного больного, а если смотреть в целом, — неправильной эпидемиологической оценке ситуации, — отметила эксперт.

«Ложноотрицательные результаты методом ПЦР могут быть получены по нескольким причинам, — пояснила Любовь Станкевич. — Во-первых, обычно для такого тестирования берется материал верхних дыхательных путей (соскоб эпителия со слизистой ротоглотки, носоглотки), тогда как более точный результат дает биоматериала нижних дыхательных путей (мокрота, бронхоальвеолярный лаваж), но брать такие мазки технически сложнее. Дело в том, что в материале верхних дыхательных путей вирус можно обнаружить только в период «транзиторного окна», то есть довольно непродолжительное время. Вторая причина ложноотрицательных результатов — качество биоматериала, собранного для анализа. Пациент должен за 3-4 часа до исследования не пить, не употреблять пищу, не курить, не чистить зубы, не полоскать рот, не принимать лекарства, не использовать жевательную резинку. К сожалению, пациенты не всегда строго соблюдают эти правила».

Вероятность ошибочного теста еще более возрастает, когда пациент берет мазок самостоятельно, что практикуют некоторые лаборатории, обслуживая пациентов на дому.

Для диагностики заболевания также используют иммунологические тесты, выявляющие в крови пациента специфические антитела, которые образуются в организме в ответ на попадание вируса. Антитела класса IgM появляются в среднем через 5-7 дней от момента инфицирования, класса IgG — в среднем с 14-го дня от момента инфицирования независимо от факта развития заболевания. Помимо этого, также формируются антитела класса IgA, так как входными воротами при инфицировании являются слизистые оболочки.

Основное преимущество иммунологического тестирования — это выявление бессимптомных носителей, что важно для оценки эпидемической ситуации, эффективности мер по социальному дистанцированию.

«Чтобы прогнозировать длительность карантинных мероприятий, необходимо знать, какой процент населения уже имеет защиту от коронавируса в виде антител — так называемый коллективный иммунитет. Клиника «Хадасса Москва» была первой, кто еще весной предложил использовать тесты на антитела к коронавирусу для выявления и наблюдения пациентов с подозрением на инфицирование, — рассказала Любовь Станкевич. — наша лаборатория приступила к серологическому тестированию на коронавирус с середины апреля 2020 года. За первые месяцы такого тестирования были накоплены уникальные данные по формированию антительного ответа к коронавирусу у населения. Мы получили данные о динамике накопления антител IgG и IgM у населения. При этом за время первых месяцев наблюдения не было выявлено признаков формирования значительного иммунитета в популяции. Еще один важный вывод — характер иммунного ответа при коронавирусной инфекции отличается от классических представлений о сроках выработки антител в ответ на инфицирование. Кроме того, в настоящее время наша клиника первой приступила к оценке концентрации антител в абсолютных значениях в крови заболевших пациентов, и мы уже получили подтверждение изменения концентрации во времени».

«В нашем исследовании, получившем поддержку фонда «Сколково», мы выделяли антитела из сыворотки крови переболевших пациентов COVID-19, — рассказал директор Института онкологии «Хадасса Москва» Илья Тимофеев. — На этапе скрининга была проанализирована кровь 18 доноров, у которых ранее был положительный тест ПЦР. Антитела в крови через месяц после выздоровления были обнаружены только у двух пациентов. Один пациент имел выраженные симптомы болезни, у другого — течение было легким».

Исследователи также попытались понять, насколько антитела, сформировавшиеся во время первого заражения, могут защитить от повторного заболевания COVID-19. «Мы исследовали наличие антител, блокирующих самый важный фрагмент вируса — ту часть, которой вирус прилипает к клетке человека, — рассказал Илья Тимофеев. — Образец антител класса IgG пациента с тяжелым течением болезни продемонстрировал их высокую активность в отношении коронавируса. При этом антитела пациента с легким течением болезни, к сожалению, имели совсем низкую активность».

«В контексте коронавируса много говорят об антителах. Но гораздо важнее — это клеточный ответ организма. Основным героем саги борьбы с коронавирусом являются Т-клетки. Антитела образуют B-лимфоциты, но активируют их Т-хелперы. Кроме того, Т-лимфоциты также уничтожают вирус. Интересным было бы оценить их активность у пациентов после вакцинации», — считает руководитель отдела трансплантации костного мозга и иммунотерапии детей и взрослых медицинского центра «Хадасса» в Иерусалиме, профессор Полина Степенски.

По мнению профессора Степенски, по имеющимся к настоящему моменту данным нельзя исключить вторичное инфицирование коронавирусом. При этом течение болезни может быть легким, так как на момент повторного заражения в организме уже есть лимфоциты и клетки памяти, которые знакомы с вирусом и его белками, им будет легче найти и уничтожить вирус. «Что касается ответа у особых групп пациентов, например, у онкологических больных, то, мне кажется, скомпрометированной иммунной системе понадобится время, чтобы адекватно ответить», — считает эксперт.

Участники конференции пришли к выводу: оптимальным решением для клинических задач может быть комбинация лабораторных методов диагностики COVID-19 — исследование материала дыхательных путей методом ПЦР и исследование крови на антитела к коронавирусу. Такая практика поможет своевременно диагностировать COVID-19, определить тактику ведения пациента (изоляция, госпитализация, мотивированный выбор оптимальной терапии). Что касается риска повторного заболевания, ученые его не исключают, — эта тема требует дальнейшего исследования. При этом эксперты возлагают большие надежды на формирование клеточного иммунитета.

Иммунохимические методы диагностики COVID-19 / КонсультантПлюс

Иммунохимические методы диагностики COVID-19

Выявление антигенов SARS-CoV-2 проводится иммунохроматографическими методами (ИФА, ИХЛ или иммунохроматографии). Экспресс-тесты для определения антигенов (с применением иммунохроматографии) позволяют получить результат за 10 — 30 минут. Диагностическая чувствительность и специфичность экспресс-тестов на антиген SARS-CoV-2 могут быть ниже, чем у тестов на основе МАНК.

Положительные результаты тестов на антиген SARS-CoV-2 могут ожидаться в тот же период развития заболевания, что и выявление РНК вируса: за 2 дня до и на протяжении 5 — 7 дней после появления симптомов. Положительный результат теста может рассматриваться как подтверждение диагноза COVID-19, отрицательный результат не позволяет исключить COVID-19.

Иммунохроматографические тесты могут применяться для экспресс-диагностики COVID-19 в ситуациях, когда проведение молекулярно-генетического тестирования МАНК невозможно, в том числе в удаленных и малонаселенных регионах. Необходимо иметь в виду, что тест на антиген SARS-CoV-2 при малой распространенности заболевания имеет более низкую прогностическую ценность положительного результата.

Выявление антител к SARS-CoV-2 проводится с помощью методов ИФА, ИХЛ или иммунохроматографии. Разработанные методы ИФА и ИХЛ позволяют получать качественные, полуколичественные (коэффициент позитивности) и количественные результаты. Для определения уровней иммуноглобулинов к SARS-CoV-2 необходимо использовать наборы реагентов для количественного определения антител, а результаты исследований представлять с использованием условных единиц измерения BAU/мл (binding antibody units, «единицы связывающих антител»).

Иммунохроматографические методы — быстрые диагностические тесты, рассматриваются как тесты «у постели больного» (время получения результата — 10 — 30 минут). Иммунохроматографические тесты являются качественными тестами и позволяют определить наличие антител к SARS-CoV-2 (IgM, IgG, суммарные антитела).

С помощью выявления отдельных классов антител к SARS-CoV-2 (IgA/IgM, IgG) возможно определение различных фаз инфекционного процесса:

— серонегативная фаза — антитела могут не выявляться в первичном образце, но выявляются во взятых через несколько дней образцах;

— активная фаза — при определении диагностически значимого уровня IgA и/или IgM в одном образце или значимого нарастания уровня IgG в парных сыворотках, взятых с интервалом в 2 — 4 недели;

— фаза реконвалесценции — концентрация IgA и IgM, как правило, существенно снижается (падение титра в 2 — 4 раза) во время выздоровления, при сохраняющихся IgG через 2 недели после курса лечения и позднее;

— перенесенная инфекция — персистенция IgG без роста его уровня в парных сыворотках и отсутствие IgA и IgM.

Определение IgG к SARS-CoV-2 через 4 недели после вакцинации позволяет подтвердить наличие поствакцинального иммунитета. Длительность периода детектируемого наличия антител не определена, но в настоящее время рассматривается как период не менее 3 месяцев.

Открыть полный текст документа

Mycoplasma hominis, IgA, титр: исследования в лаборатории KDLmed

Антитела класса IgA к возбудителю урогенитального микоплазмоза (Mycoplasma hominis) – специфические иммуноглобулины, вырабатывающиеся в организме человека в период выраженных клинических проявлений микоплазмоза и являющиеся серологическим маркером этого заболевания.

Синонимы русские

Антитела класса IgA к Mycoplasma hominis, иммуноглобулины класса A к Mycoplasma hominis.

Синонимы английские

M. hominis Antibodies, IgA, Mycoplasma hominis Specific IgA, Anti-Mycoplasma hominis – IgA.

Метод исследования

Иммуноферментный анализ (ИФА).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Подробнее об исследовании

Mycoplasma hominis относятся к классу микоплазм, занимая промежуточное положение между вирусами, бактериями и простейшими. Они паразитируют на клеточных мембранах и являются условно патогенными микроорганизмами (в определённых количествах входят в состав нормальной микрофлоры слизистых мочеполового тракта). При увеличении количества микоплазм могут развиваться воспалительные заболевания мочеполового тракта.

Микоплазменные инфекции органов мочеполовой системы в настоящее время занимают ведущее место среди инфекций, передающихся половым путем. Часто они сочетаются с гонококками, уреаплазмами, трихомонадами, хламидиями.

Источником инфекции являются как больные, так и носители. Заражение происходит половым путем. Инфекция может протекать латентно, а затем под действием различных факторов (изменение гормонального фона, сопутствующие инфекции, снижение иммунитета) переходить в острую, хроническую или рецидивирующую форму. Симптомы могут быть различными. В большинстве случаев у мужчин заболевание протекает в форме уретрита, простатита и проявляется зудом, жжением, частыми позывами к мочеиспусканию и болезненностью при нём в области уретры, у женщин – в форме вагинита, цервицита и сопровождается выделениями из половых путей, дискомфортом, зудом, жжением в области половых путей и/или нижней части живота, болезненностью во время половых контактов. Длительная хроническая инфицированность Mycoplasma hominis может вызвать бесплодие, выкидыши и преждевременные роды.

Вероятно заражение плода от матери через плаценту или при родах. В этих случаях инфекция у новорождённых может проявляться в виде менингита, респираторных инфекций или септицемии.

В ответ на инфицирование Mycoplasma hominis иммунная система вырабатывает специфические иммуноглобулины: IgA, IgM и IgG.

Одними из первых производятся IgA, что защищает слизистые оболочки. IgA сохраняются в течение длительного периода, пока присутствует микоплазма (при хроническом течении – годами). Концентрация IgA напрямую зависит от выраженности воспалительного процесса.

Выявление IgA к Mycoplasma hominis в крови свидетельствует об остром заболевании, хронической или персистирующей форме инфекции.

Для чего используется исследование?

  • Для подтверждения текущей или хронической инфекции, вызванной Mycoplasma hominis.
  • Для дифференциальной диагностики микоплазменной инфекции и других инфекционных заболеваний мочеполовых путей, например вызванных хламидиями или трихомонадами.
  • При планировании беременности для исключения инфицирования Mycoplasma hominis.
  • Для контроля за эффективностью лечения заболеваний, возбудителем которых является Mycoplasma hominis.

 Когда назначается исследование?

  • При симптомах заболевания, вызванного микоплазмой: зуде, жжении, боли в области уретры при мочеиспускании, частых позывах к мочеиспусканию, выделениях из половых путей, дискомфорте в области половых путей и/или нижней части живота, боли во время половых контактов.
  • При подозрении на хроническую или персистирующую форму инфицирования Mycoplasma hominis, которая может быть причиной бесплодия, патологий беременности.

Что означают результаты?

Референсные значения

Результат: отрицательно.

КП (коэффициент позитивности): 0 — 0,84.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие инфицирования,
  • слишком ранний срок инфицирования, когда не выработался иммунный ответ.

Причины положительного результата:

  • текущая микоплазменная инфекция,
  • хроническая микоплазменная инфекция,
  • неэффективность проведённого лечения.

Что может влиять на результат?

  • Нарушения со стороны иммунной системы, аутоиммунные заболевания, ВИЧ.
  • Инфекционные заболевания, вызванные микоплазмами других видов, уреаплазмой.

Важные замечания

  • Обследование на Mycoplasma hominis должно быть комплексным, включать в себя данные анамнеза, клинической картины и других анализов. Обязательно определение иммуноглобулинов класса G.
  • Если у пациента выявлено инфицирование, ему необходимо поставить в известность сексуального партнера, чтобы он тоже проверился.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Гинеколог, уролог, терапевт, педиатр.

Антитело — личное дело. От чего зависит стойкость иммунитета к ковиду

https://ria.ru/20210423/antitela-1729494022.html

Антитело — личное дело. От чего зависит стойкость иммунитета к ковиду

Антитело — личное дело. От чего зависит стойкость иммунитета к ковиду — РИА Новости, 23.04.2021

Антитело — личное дело. От чего зависит стойкость иммунитета к ковиду

О том, как долго сохраняются антитела к коронавирусу и сколько их нужно, говорят разное. Одни исследователи отводят антительному иммунитету от ковида только три РИА Новости, 23.04.2021

2021-04-23T08:00

2021-04-23T08:00

2021-04-23T08:03

наука

прививки

испания

австрия

инсбрук

российский медицинский университет имени н. и. пирогова

здоровье

биология

/html/head/meta[@name=’og:title’]/@content

/html/head/meta[@name=’og:description’]/@content

https://cdnn21.img.ria.ru/images/07e4/08/0d/1575733797_0:190:2967:1858_1920x0_80_0_0_85e1dc684039e6fa9511f37632043a3b.jpg

МОСКВА, 23 апр — РИА Новости, Альфия Еникеева. О том, как долго сохраняются антитела к коронавирусу и сколько их нужно, говорят разное. Одни исследователи отводят антительному иммунитету от ковида только три месяца, другие — полгода. Однако, как выяснили недавно сингапурские ученые, спорить тут не о чем. Дважды в один коронавирусПервые данные о продолжительности иммунитета к COVID-19 опубликовали в середине марта прошлого года. Тогда группа китайских ученых специально заразила SARS-CoV-2 четырех макак-резусов, вылечила их, а потом попыталась инфицировать снова. Ничего не вышло: животных защищали антитела. Правда, весь эксперимент занял не больше месяца, а между первой и второй попытками инфицирования прошло лишь 28 дней.Примерно в то же время в разных странах мира подтвердили: антитела к SARS-CoV-2 возникают и в крови переболевших людей. Тесты выявляли их уже на десятый день после первых симптомов. Однако концентрация у пациентов была разная, и насколько долгим был иммунитет, ученые не знали. Чуть позже немецкие инфекционисты выделили из крови заболевших 255 типов антител, 28 из них блокировали вирус. Их называют вирус-нейтрализующими. “У вируса сложная структура, и его проникновение в клетку сопровождается выработкой антител как против шипикового S-белка, так и к другим его компонентам. Антитела против S-белка облепляют вирус и не позволяют ему проникать в клетки. Одновременно они могут цепляться за уже инфицированные клетки, если человек заразился, и помогать иммунной системе их нейтрализовать. Таким образом предотвращается масштабное развитие процесса. Другие антитела действуют иначе. Сформированный гуморальный иммунитет обеспечивают только вирус-нейтрализующие антитела”, — поясняет в разговоре с РИА Новости Иван Коновалов, доцент кафедры инфекционных болезней у детей РНИМУ имени Н. И. Пирогова. Именно такие антитела в центре внимания ученых всего мира. Как правило, речь идет об иммуноглобулинах класса G (IgG) — они считаются более специфичными и дольше сохраняются в организме. А вот IgM, хотя и синтезируются в организме практически с первыми симптомами инфекции, не очень улавливают вирус и достаточно быстро исчезают — за несколько недель после выздоровления. Третий тип иммуноглобулинов IgA во многом похож на IgM — они также вырабатываются в острый период болезни, а затем их уровень стремительно снижается. Однако IgA более избирательны и защищают от SARS-CoV-2 слизистые оболочки. Предполагали, что IgG сохраняются в организме около полугода. Однако в июле 2020-го в журнале Lancet вышла статья, авторы которой утверждали, что у 14 процентов пациентов эти антитела полностью исчезают уже через два месяца после выздоровления. Кроме того, пытаясь определить, сколько человек в Испании переболели ковидом бессимптомно, исследователи выяснили: вирус-нейтрализующие антитела вырабатываются не у всех. Похожие данные и у китайцев. Изучив анализы 74 пациентов, переболевших ковидом, они выяснили, что IgG и другие вирус-нейтрализующие антитела остаются в организме на срок от месяца до трех. И меньше всего их у тех, кто перенес болезнь бессимптомно.Сроки удлиняютсяОднако американские инфекционисты из медицинского центра Маунт-Синай, наблюдавшие за 30 тысячами пациентов, обнаруживали вирус-нейтрализующие антитела и пять месяцев спустя после выздоровления. Как правило, у переболевших в легкой или умеренной форме. Этого было достаточно, чтобы защитить от повторного инфицирования или ослабить действие вируса, если человек заразится вновь. По мнению британских исследователей, срок еще дольше — минимум полгода. Они проанализировали данные более 20 тысяч человек, чьи биоматериалы хранились в UK Biobank — большой базе генетических и медицинских сведений. Выяснилось, что у 99% переболевших COVID-19 в первую волну, антитела сохранялись минимум три месяца после выздоровления, у 88% их обнаруживали и спустя полгода. Специалисты Медицинского университета Инсбрука (Австрия) в апреле попросили около девятисот добровольцев сдать тест на антитела к SARS-CoV-2. В ноябре анализ повторили, и у 90 процентов результат был положительным. Шведские ученые из Каролинского института оценивали антительный иммунитет у 256 сотрудников клиники Дандерюда, которые контактировали с коронавирусными пациентами и сами перенесли инфекцию. У 96% антитела не исчезали в течение девяти месяцев после выздоровления. При этом рецидив наблюдался менее чем у одного процента. Значит, шансы повторного заражения крайне малы.Правы всеТочку в спорах о стойкости нейтрализующих антител совсем недавно поставили сингапурские ученые. Изучив данные примерно пятисот человек, переболевших ковидом в первую волну, они поняли, что все предыдущие выводы верны. Во-первых, IgG и другие вирус-нейтрализующие антитела действительно полностью исчезают в течение двух месяцев после выздоровления, но только у четверти пациентов. Во-вторых, уровень таких иммуноглобулинов практически не меняется на протяжении полугода, и это характерно для большинства. В исследовании сингапурцев подобная картина наблюдалась у двух третей участников. Как отмечают авторы работы, уровень антител и их стойкость чаще всего коррелировали с возрастом и тем, насколько тяжело протекала болезнь. Как правило, у более молодых и относительно здоровых людей иммунитет был слабее и короче. “Дольше всего в организме циркулируют иммуноглобулины класса G. Они в среднем сохраняются в организме три-шесть месяцев, но у некоторых пациентов действительно уходят раньше, особенно при легких формах заболевания. И предсказать динамику невозможно. Иными словами, у нас нет данных о том, какой уровень антител сильно защитный или слабо защитный. Просто клинически описаны случаи повторного заражения спустя примерно три-шесть месяцев после перенесенной инфекции”, — отметил Иван Коновалов. И подчеркнул: исчезновение вирус-нейтрализующих антител в крови не означает, что человек полностью беззащитен. Тем более что случаи повторного инфицирования, как правило, редки. “Помимо гуморального иммунитета, который представлен антителами, существует клеточный иммунитет, тестами на антитела никак не определяемый. Это специализированные иммунные клетки, “обученные” и готовые к встрече с инфекционным агентом. Если коронавирус снова проникнет в организм, они очень быстро сами начнут производить защитные антитела, а также дадут команду лимфоцитам-киллерам, чтобы они распознавали и уничтожали инфицированные клетки”, — объяснил он. Действительно, когда сингапурские специалисты сравнили Т-клеточный иммунитет между группами участников, серьезных различий не обнаружили. Значит, даже при исчезновении вирус-нейтрализующих антител из организма человек защищен от ковида. Так же и с прививками. Как уточнил Иван Коновалов, вакцины активируют и гуморальный, и клеточный иммунитет. И если оценить эффективность последнего пока довольно сложно и затратно, то относительно вирус-нейтрализующих антител доказано: после вакцинации их чаще всего значительно больше, чем после перенесенной болезни.

https://ria.ru/20201224/immunitet-1590714315.html

https://ria.ru/20201009/koronavirus-1578985280.html

https://ria.ru/20210313/kovid-1600996928.html

испания

австрия

инсбрук

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

2021

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

Новости

ru-RU

https://ria.ru/docs/about/copyright.html

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

https://cdnn21.img.ria.ru/images/07e4/08/0d/1575733797_118:0:2847:2047_1920x0_80_0_0_2e9d39892212b9fe93ad88f6694d8a35.jpg

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

РИА Новости

[email protected]

7 495 645-6601

ФГУП МИА «Россия сегодня»

https://xn--c1acbl2abdlkab1og.xn--p1ai/awards/

прививки, испания, австрия, инсбрук, российский медицинский университет имени н. и. пирогова, здоровье, биология, иммунитет, коронавирус covid-19, коронавирус в россии, антитела, igg (антитела), igm (антитела)

МОСКВА, 23 апр — РИА Новости, Альфия Еникеева. О том, как долго сохраняются антитела к коронавирусу и сколько их нужно, говорят разное. Одни исследователи отводят антительному иммунитету от ковида только три месяца, другие — полгода. Однако, как выяснили недавно сингапурские ученые, спорить тут не о чем.

Дважды в один коронавирус

Первые данные о продолжительности иммунитета к COVID-19 опубликовали в середине марта прошлого года. Тогда группа китайских ученых специально заразила SARS-CoV-2 четырех макак-резусов, вылечила их, а потом попыталась инфицировать снова. Ничего не вышло: животных защищали антитела. Правда, весь эксперимент занял не больше месяца, а между первой и второй попытками инфицирования прошло лишь 28 дней.Примерно в то же время в разных странах мира подтвердили: антитела к SARS-CoV-2 возникают и в крови переболевших людей. Тесты выявляли их уже на десятый день после первых симптомов. Однако концентрация у пациентов была разная, и насколько долгим был иммунитет, ученые не знали. Чуть позже немецкие инфекционисты выделили из крови заболевших 255 типов антител, 28 из них блокировали вирус. Их называют вирус-нейтрализующими. 24 декабря 2020, 12:35НаукаПолучены точные данные о длительности иммунитета к COVID-19“У вируса сложная структура, и его проникновение в клетку сопровождается выработкой антител как против шипикового S-белка, так и к другим его компонентам. Антитела против S-белка облепляют вирус и не позволяют ему проникать в клетки. Одновременно они могут цепляться за уже инфицированные клетки, если человек заразился, и помогать иммунной системе их нейтрализовать. Таким образом предотвращается масштабное развитие процесса. Другие антитела действуют иначе. Сформированный гуморальный иммунитет обеспечивают только вирус-нейтрализующие антитела”, — поясняет в разговоре с РИА Новости Иван Коновалов, доцент кафедры инфекционных болезней у детей РНИМУ имени Н. И. Пирогова.

Именно такие антитела в центре внимания ученых всего мира. Как правило, речь идет об иммуноглобулинах класса G (IgG) — они считаются более специфичными и дольше сохраняются в организме. А вот IgM, хотя и синтезируются в организме практически с первыми симптомами инфекции, не очень улавливают вирус и достаточно быстро исчезают — за несколько недель после выздоровления. Третий тип иммуноглобулинов IgA во многом похож на IgM — они также вырабатываются в острый период болезни, а затем их уровень стремительно снижается. Однако IgA более избирательны и защищают от SARS-CoV-2 слизистые оболочки.

Предполагали, что IgG сохраняются в организме около полугода. Однако в июле 2020-го в журнале Lancet вышла статья, авторы которой утверждали, что у 14 процентов пациентов эти антитела полностью исчезают уже через два месяца после выздоровления. Кроме того, пытаясь определить, сколько человек в Испании переболели ковидом бессимптомно, исследователи выяснили: вирус-нейтрализующие антитела вырабатываются не у всех. Похожие данные и у китайцев. Изучив анализы 74 пациентов, переболевших ковидом, они выяснили, что IgG и другие вирус-нейтрализующие антитела остаются в организме на срок от месяца до трех. И меньше всего их у тех, кто перенес болезнь бессимптомно.

Сроки удлиняются

Однако американские инфекционисты из медицинского центра Маунт-Синай, наблюдавшие за 30 тысячами пациентов, обнаруживали вирус-нейтрализующие антитела и пять месяцев спустя после выздоровления. Как правило, у переболевших в легкой или умеренной форме. Этого было достаточно, чтобы защитить от повторного инфицирования или ослабить действие вируса, если человек заразится вновь. По мнению британских исследователей, срок еще дольше — минимум полгода. Они проанализировали данные более 20 тысяч человек, чьи биоматериалы хранились в UK Biobank — большой базе генетических и медицинских сведений. Выяснилось, что у 99% переболевших COVID-19 в первую волну, антитела сохранялись минимум три месяца после выздоровления, у 88% их обнаруживали и спустя полгода. 9 октября 2020, 11:43НаукаУченые выяснили, сколько сохраняется иммунитет к коронавирусуСпециалисты Медицинского университета Инсбрука (Австрия) в апреле попросили около девятисот добровольцев сдать тест на антитела к SARS-CoV-2. В ноябре анализ повторили, и у 90 процентов результат был положительным. Шведские ученые из Каролинского института оценивали антительный иммунитет у 256 сотрудников клиники Дандерюда, которые контактировали с коронавирусными пациентами и сами перенесли инфекцию. У 96% антитела не исчезали в течение девяти месяцев после выздоровления. При этом рецидив наблюдался менее чем у одного процента. Значит, шансы повторного заражения крайне малы.

Правы все

Точку в спорах о стойкости нейтрализующих антител совсем недавно поставили сингапурские ученые. Изучив данные примерно пятисот человек, переболевших ковидом в первую волну, они поняли, что все предыдущие выводы верны.

Во-первых, IgG и другие вирус-нейтрализующие антитела действительно полностью исчезают в течение двух месяцев после выздоровления, но только у четверти пациентов. Во-вторых, уровень таких иммуноглобулинов практически не меняется на протяжении полугода, и это характерно для большинства. В исследовании сингапурцев подобная картина наблюдалась у двух третей участников.

Как отмечают авторы работы, уровень антител и их стойкость чаще всего коррелировали с возрастом и тем, насколько тяжело протекала болезнь. Как правило, у более молодых и относительно здоровых людей иммунитет был слабее и короче.

“Дольше всего в организме циркулируют иммуноглобулины класса G. Они в среднем сохраняются в организме три-шесть месяцев, но у некоторых пациентов действительно уходят раньше, особенно при легких формах заболевания. И предсказать динамику невозможно. Иными словами, у нас нет данных о том, какой уровень антител сильно защитный или слабо защитный. Просто клинически описаны случаи повторного заражения спустя примерно три-шесть месяцев после перенесенной инфекции”, — отметил Иван Коновалов.

И подчеркнул: исчезновение вирус-нейтрализующих антител в крови не означает, что человек полностью беззащитен. Тем более что случаи повторного инфицирования, как правило, редки.

13 марта 2021, 08:00НаукаЖдать нельзя вакцинироваться. Как долго сохраняется иммунитет к ковиду

“Помимо гуморального иммунитета, который представлен антителами, существует клеточный иммунитет, тестами на антитела никак не определяемый. Это специализированные иммунные клетки, “обученные” и готовые к встрече с инфекционным агентом. Если коронавирус снова проникнет в организм, они очень быстро сами начнут производить защитные антитела, а также дадут команду лимфоцитам-киллерам, чтобы они распознавали и уничтожали инфицированные клетки”, — объяснил он.

Действительно, когда сингапурские специалисты сравнили Т-клеточный иммунитет между группами участников, серьезных различий не обнаружили. Значит, даже при исчезновении вирус-нейтрализующих антител из организма человек защищен от ковида.

Так же и с прививками. Как уточнил Иван Коновалов, вакцины активируют и гуморальный, и клеточный иммунитет. И если оценить эффективность последнего пока довольно сложно и затратно, то относительно вирус-нейтрализующих антител доказано: после вакцинации их чаще всего значительно больше, чем после перенесенной болезни.

Анализ крови: иммуноглобулины (IgA, IgG, IgM) (для родителей)

Что такое анализ крови?

Анализ крови — это исследование образца крови в лаборатории. Врачи назначают анализы крови, чтобы проверить такие вещи, как уровень глюкозы, гемоглобина или лейкоцитов. Это может помочь им найти такие проблемы, как болезнь или состояние здоровья. Иногда анализы крови могут помочь им увидеть, насколько хорошо работает тот или иной орган (например, печень или почки).

Что такое тест на иммуноглобулин?

Тест на иммуноглобулин (im-yeh-no-GLOB-yeh-len) измеряет уровень типов антител в крови.Иммунная система вырабатывает антитела для защиты организма от бактерий, вирусов и аллергенов.

Организм вырабатывает различные антитела или иммуноглобулины для борьбы с разными вещами. Например, антитело от ветрянки — это не то же самое, что антитело от мононуклеоза. Иногда организм может даже ошибочно вырабатывать антитела против самого себя, рассматривая здоровые органы и ткани как чужеродные захватчики. Это называется аутоиммунным заболеванием .

Типы антител:

  • Иммуноглобулин А (IgA): Он содержится в оболочках дыхательных путей и пищеварительной системы, а также в слюне (слюне), слезах и грудном молоке.
  • Иммуноглобулин G (IgG): Это наиболее распространенное антитело. Он содержится в крови и других жидкостях организма и защищает от бактериальных и вирусных инфекций. Для образования IgG может потребоваться время после инфекции или иммунизации.
  • Иммуноглобулин M (IgM): Содержится главным образом в крови и лимфатической жидкости. Это первое антитело, которое организм вырабатывает при борьбе с новой инфекцией.
  • Иммуноглобулин Е (IgE): Обычно обнаруживается в небольших количествах в крови.Их может быть больше, когда организм чрезмерно реагирует на аллергены или борется с инфекцией от паразита.
  • Иммуноглобулин D (IgD): Это наименее изученное антитело, присутствующее в крови лишь в небольшом количестве.

Зачем проводятся тесты на иммуноглобулин?

Врачи могут проверить уровень иммуноглобулина, чтобы узнать, есть ли у человека инфекция или защищен ли он от заражения ( невосприимчив к ней). Врачи также используют тесты на иммуноглобулин для диагностики иммунодефицита (когда иммунная система не работает должным образом).Врачи могут заподозрить иммунодефицит у ребенка, который переносит много инфекций или необычные инфекции.

Тесты могут проводиться как часть оценки аллергии или аутоиммунных состояний, таких как ювенильный идиопатический артрит, волчанка и глютеновая болезнь.

Как мы должны подготовиться к тесту на иммуноглобулин?

Дети могут нормально есть и пить, за исключением случаев, когда они предварительно проходят другие тесты, требующие голодания. Расскажите своему врачу о любых лекарствах, которые принимает ваш ребенок, потому что некоторые лекарства могут повлиять на результаты анализов.

Если вы наденете на тест футболку или рубашку с короткими рукавами, вашему ребенку будет легче, и вы также можете взять с собой игрушку или книгу, чтобы отвлечься.

Как делается тест на иммуноглобулин?

Для большинства анализов крови берется небольшое количество крови из вены. Для этого медицинский работник сделает:

  • Очистить кожу.
  • Наложите эластичную ленту (жгут) над участком, чтобы вены набухли от крови.
  • Вставьте иглу в вену (обычно в руку с внутренней стороны локтя или на тыльную сторону кисти).
  • Наберите образец крови во флакон или шприц.
  • Снимите резинку и извлеките иглу из вены.

Иногда тесты на иммуноглобулины можно проводить с помощью теста «из пальца». Медицинский работник очистит палец вашего ребенка, а затем уколет его кончик крошечной иглой (или ланцетом), чтобы собрать кровь.

У младенцев забор крови иногда проводится как «сбор пяточной палочки». После очистки области медицинский работник уколет пятку вашего ребенка крошечной иглой (или ланцетом), чтобы взять небольшой образец крови.

Сбор образца крови доставляет дискомфорт только временно и может ощущаться как быстрый укол булавкой.

Могу ли я оставаться с ребенком во время теста на иммуноглобулин?

Обычно родители могут оставаться с ребенком во время анализа крови. Поощряйте ребенка расслабляться и оставаться неподвижным, потому что напряжение мышц может затруднить взятие крови. Ваш ребенок может захотеть отвернуться, когда игла будет вставлена ​​и будет взята кровь.Помогите ребенку расслабиться, делая медленные глубокие вдохи или напевая любимую песню.

Сколько времени занимает тест на иммуноглобулин?

Большинство анализов крови занимает всего несколько минут. Иногда может быть трудно найти вену, поэтому медицинскому работнику может потребоваться несколько попыток.

Что происходит после теста на иммуноглобулин?

Медицинский работник снимет резинку и иглу и накроет пораженный участок ватой или повязкой, чтобы остановить кровотечение.После этого могут быть легкие синяки, которые должны пройти через несколько дней.

Когда готовы результаты теста на иммуноглобулин?

Получение результатов может занять несколько дней. Если результаты теста показывают признаки проблемы, врач может назначить другие тесты, чтобы выяснить, в чем проблема и как ее лечить.

Существуют ли какие-либо риски от тестов на иммуноглобулины?

Тест на иммуноглобулин — безопасная процедура с минимальными рисками. Некоторые дети могут почувствовать слабость или головокружение после теста.Некоторые дети и подростки испытывают сильный страх перед иглами. Если ваш ребенок беспокоится, поговорите с врачом перед тестом о том, как его облегчить.

Небольшой синяк или умеренная болезненность вокруг места проведения анализа крови являются обычным явлением и могут сохраняться в течение нескольких дней. Обратитесь за медицинской помощью для вашего ребенка, если дискомфорт усиливается или длится дольше.

Если у вас есть вопросы по поводу теста на иммуноглобулин, поговорите со своим врачом или медицинским работником, проводящим забор крови.

Иммунизация вашего ребенка (для родителей)

Младенцы рождаются с защитой от некоторых болезней, потому что их матери передают им антитела (белки, вырабатываемые организмом для борьбы с болезнями) до рождения.Дети, находящиеся на грудном вскармливании, продолжают получать больше антител с грудным молоком. Но в обоих случаях защита временная.

Иммунизация (вакцинация) – способ создания иммунитета (защиты от) некоторых заболеваний. Иногда для этого используют небольшое количество убитого или ослабленного микроба, вызывающего заболевание. В других случаях вакцина представляет собой просто небольшой кусочек микроба, такой как белок или часть его генетического материала.

Микробами могут быть вирусы (например, вирус кори) или бактерии (например, пневмококк).Вакцины стимулируют иммунную систему реагировать так, как если бы это была настоящая инфекция. Он парирует «инфекцию» и помнит зародыш. Затем он может бороться с микробом, если он попадет в организм позже.

Какие существуют типы вакцин?

Существует несколько различных типов вакцин:

  • Аттенуированные (ослабленные) живые микроорганизмы: Они используются в некоторых вакцинах, таких как вакцины против кори, эпидемического паротита и краснухи (MMR) и ветряной оспы.
  • Убитые (инактивированные) микробы: Они используются в некоторых вакцинах, таких как прививка от гриппа или инактивированная вакцина против полиомиелита.
  • Токсоидные вакцины: Они содержат инактивированный токсин (вредный химикат), вырабатываемый микроорганизмами. Например, вакцины против дифтерии и столбняка представляют собой анатоксинные вакцины.
  • Конъюгированные вакцины: Содержат небольшие кусочки зародыша в сочетании с белками, которые помогают вызвать сильный иммунный ответ. Таким образом производятся многие широко используемые вакцины, в том числе защищающие от гепатита В, ВПЧ, коклюша и менингита.
  • Вакцины мРНК (информационная РНК): В них используется фрагмент РНК зародыша, который является частью его генетического материала. Некоторые вакцины против COVID-19 относятся к этому типу.

Американская академия педиатрии (AAP) рекомендует, чтобы дети получали комбинированные вакцины (а не отдельные вакцины), когда это возможно. Многие вакцины предлагаются в комбинации, чтобы помочь сократить количество прививок, получаемых ребенком. Было показано, что это очень безопасно. Со дня рождения ребенка его иммунная система ежедневно подвергается воздействию бесчисленных микробов.Еще несколько в комбинированной вакцине очень легко справляются с иммунной системой.

Какие вакцины нужны детям?

AAP рекомендует следующие прививки и графики. Некоторые отклонения являются нормальными, и рекомендации меняются по мере разработки новых вакцин. Ваш врач поговорит с вами о правильных прививках и графике прививок для вашего ребенка.

Рекомендуемые прививки:

Опасения по поводу вакцин

Некоторые родители не решаются вакцинировать своих детей.У них есть вопросы или опасения, что у ребенка может быть серьезная реакция или болезнь, которую предотвращает вакцинация. Но компоненты вакцин ослаблены или убиты. В некоторых случаях используются только части зародыша. Так что вряд ли они вызовут какое-то серьезное заболевание.

Некоторые вакцины могут вызывать легкие реакции, такие как болезненность в месте укола или лихорадка. Но серьезные реакции редки. Риски прививок малы по сравнению с рисками для здоровья от болезней, которые они призваны предотвращать.

Иммунизация — один из лучших способов защитить свою семью от инфекционных заболеваний.

Иммуноглобулины (IgA, IgG, IgM) — Понимание теста и ваших результатов

Иммуноглобулины играют ключевую роль в иммунной системе организма. Это белки, вырабатываемые специфическими иммунными клетками, называемыми плазматическими клетками, в ответ на бактерии, вирусы и другие микроорганизмы, а также на воздействие других веществ, которые распознаются организмом как «чужие» вредные антигены.Этот тест измеряет количество иммуноглобулинов A, G и M (IgA, IgG, IgM) в крови и, при определенных обстоятельствах, в спинномозговой жидкости (ЦСЖ) или слюне.

Когда человек впервые заражается или иным образом подвергается воздействию чужеродного вещества (антигена), его иммунная система распознает микроорганизм или вещество как «чужое» и стимулирует плазматические клетки к выработке специфических иммуноглобулинов, также называемых антителами, которые могут связать и нейтрализовать угрозу. При последующих воздействиях иммунная система «запоминает» встреченный антиген, что позволяет быстро вырабатывать больше антител и, в случае микроорганизмов, помогает предотвратить повторное заражение.

Существует пять классов иммуноглобулинов и несколько подклассов. Каждый класс представляет собой группу антител и играет несколько иную роль. Классы иммуноглобулинов включают:

  • Иммуноглобулин M (IgM) – антитела IgM вырабатываются в качестве первой реакции организма на новую инфекцию или на новый «чужой» антиген, обеспечивая кратковременную защиту. Они увеличиваются в течение нескольких недель, а затем снижаются, когда начинается продукция IgG.
  • Иммуноглобулин G (IgG) – около 70-80% иммуноглобулинов в крови представляют собой IgG.Специфические антитела IgG вырабатываются во время первоначальной инфекции или воздействия другого антигена, их количество повышается через несколько недель после начала, затем снижается и стабилизируется. В организме сохраняется каталог IgG-антител, которые могут быстро воспроизводиться при воздействии одного и того же антигена. Антитела IgG составляют основу долговременной защиты от микроорганизмов. У людей с нормальной иммунной системой вырабатывается достаточное количество IgG для предотвращения повторного заражения. Прививки используют этот процесс для предотвращения начальных инфекций и добавления к каталогу антител IgG, подвергая человека воздействию ослабленного живого микроорганизма или антигена, который стимулирует распознавание микроорганизма.IgG — единственный иммуноглобулин, который может проникать через плаценту. Антитела IgG матери обеспечивают защиту плода во время беременности и ребенка в течение первых нескольких месяцев его жизни. Существует четыре подкласса IgG: IgG 1 , IgG 2 , IgG 3 и IgG 4 .
  • Иммуноглобулин А (IgA) – IgA составляет около 15% от общего количества иммуноглобулинов в крови, но также обнаруживается в слюне, слезах, респираторном и желудочном секрете и грудном молоке.IgA обеспечивает защиту от инфекций на слизистых оболочках таких участков тела, как дыхательные пути (носовые пазухи и легкие) и желудочно-кишечный тракт (желудок и кишечник). При передаче от матери ребенку во время грудного вскармливания помогает защитить желудочно-кишечный тракт ребенка. Значительное количество IgA вырабатывается ребенком только после 6-месячного возраста, поэтому любой IgA, присутствующий в крови ребенка до этого возраста, поступает из материнского молока. Существует два подкласса IgA: IgA 1 и IgA 2 .
  • Иммуноглобулин D (IgD) — роль IgD полностью не изучена, и IgD обычно не измеряется.
  • Иммуноглобулин Е (IgE) – IgE связан с аллергией, аллергическими заболеваниями и паразитарными инфекциями. Он почти всегда измеряется как часть анализа крови на аллергию, но обычно не включается в количественный тест на иммуноглобулины.

Тестирование иммуноглобулинов измеряет общее количество каждого первичного класса иммуноглобулинов, IgA, IgM и IgG, без различия между подклассами.Отдельное тестирование может быть выполнено для измерения подклассов иммуноглобулинов и/или для обнаружения и измерения специфических антител.

Различные состояния могут вызывать повышение (гипергаммаглобулинемия) или снижение (гипогаммаглобулинемия) продукции иммуноглобулинов. Некоторые вызывают избыток или дефицит всех классов иммуноглобулинов, тогда как другие влияют только на один класс. Некоторые состояния передаются от одного поколения к другому (наследуются), а другие приобретаются.

Реакции IgA, IgM и IgG в сыворотке при COVID-19

В настоящее время определение РНК SARS-CoV-2 является стандартным подходом к диагностике COVID-19.Однако существует острая необходимость в надежных и быстрых серологических методах диагностики для скрининга людей, инфицированных SARS-CoV-2, включая тех, у кого нет явных симптомов. В большинстве новых исследований описываются серологические тесты, основанные на обнаружении специфичных для SARS-CoV-2 IgM и IgG. 1,2,3,4 Хотя об обнаружении IgA, специфичного для SARS-CoV-2, в сыворотке сообщалось в нескольких работах, 5,6 анализы уровней IgA у большего числа пациентов с COVID-19 все еще отсутствуют .

В этом исследовании приняли участие в общей сложности 87 пациентов с подтвержденным COVID-19 (дополнительная таблица 1), которые были госпитализированы в Первую дочернюю больницу больницы USTC или Первую дочернюю больницу Аньхойского медицинского университета в период с 26 января по 5 марта 2020 года.Их образцы крови были собраны во время обычного клинического тестирования. Во всех зарегистрированных случаях инфекция SARS-CoV-2 была подтверждена с помощью стандартного анализа RT-qPCR на образцах мазков из зева из дыхательных путей. Для всех зарегистрированных пациентов дата начала заболевания, клиническая классификация тяжести, результаты тестирования РНК в течение периода госпитализации и личная демографическая информация были получены из историй болезни.

Высокоочищенный рецептор-связывающий домен (RBD) спайкового белка SARS-CoV-2 (дополнительная рис.1) экспрессировали в клетках 293F человека и использовали для создания набора наборов для химической люминесценции для обнаружения присутствия RBD-специфических IgA, IgM и IgG соответственно. Для оценки диагностической способности этих наборов использовали 216 сывороток от 87 пациентов, инфицированных SARS-CoV-2, и в общей сложности 483 контрольных сыворотки, включая 330 сывороток здоровых, 138 «мешающих» сывороток пациентов другого типа и 15 сывороток от ранее инфицированных. были проверены случаи с подозрением на пневмонию. Относительные световые единицы (RLU) обнаруженных сигналов для каждого из изотипов RBD-специфических антител были нанесены на график (фиг.1а–в). Наборы RBD-специфических IgA, IgM и IgG показали диагностическую чувствительность 98,6%, 96,8% и 96,8% и специфичность 98,1%, 92,3% и 99,8% соответственно (дополнительная рис. 2a–c). Чувствительность, специфичность и общая согласованность наборов IgA, IgM или IgG, специфичных для RBD, и их комбинаций также приведены в дополнительной таблице 2. При объединении наборов RBD IgA и IgG чувствительность, специфичность и общая согласованность повышаются до 99,1%, 100% и 99,7% соответственно.Это лучше, чем те, когда наборы IgM и IgG объединяются с использованием наших данных или предыдущих данных, показанных другими. 1,2,3,4

Рис. 1

Анализ RBD-специфических антител IgA, IgM и IgG к SARS-CoV-2 у 87 пациентов с COVID-19. Результаты тестирования наборов RBD-специфических IgA ( a ), IgM ( b ) и IgG ( c ) с использованием 330 сывороток здоровых людей, 138 сывороток пациентов другого типа, которые могут мешать тесту, 15 сывороток пациентов с подозрением на пневмонию и 216 сывороток 87 пациентов с COVID-19, подтвержденных с помощью КПЦР.Относительные световые единицы RLU. Черная полоса указывает средние значения. Пунктирная линия указывает пороговое значение для обнаружения каждого изотипа антител. d Чувствительность определения RBD-специфических IgA, IgM и IgG в образцах сыворотки, полученных в разные сроки после начала заболевания. Была проанализирована кинетика уровней анти-RBD IgA, IgM и IgG в сыворотке пациентов с COVID-19 в разные временные окна ( и ). Наносили медианные значения RLU для каждого изотипа трех антител.Столбцы указывают медиану с межквартильными диапазонами. f h Были проанализированы уровни сывороточных антител у здоровых и трех различных групп пациентов с COVID-19. Здоровые: 330 сывороток; Легкая: 7 сывороток; Умеренная: 44 сыворотки; и тяжелая: 21 сыворотка. Тяжелобольные были включены в группу тяжелого течения. Использовались только данные об уровне антител в сыворотке через 16–25 дней после начала заболевания у пациентов с COVID-19

временные окна сбора после начала заболевания (рис.1г). Через 4-10 дней после появления симптомов набор IgA продемонстрировал самую высокую положительную диагностическую частоту — 88,2% (15/17), в то время как набор IgM и IgG показал частоту обнаружения 76,4% (13/17) и 64,7% (11/17). ), соответственно. 2 сыворотки, диагностированные как отрицательные в группе 4–10 дней с помощью набора IgA, были собраны на 4-й день после начала заболевания, все остальные сыворотки включают 2 на 6-й день, 3 на 7-й день, 1 на 8-й день, 6 на 8-й день. на 9-й день и 3 на 10-й день от начала заболевания были положительными. В группе 11–41 дней после появления симптомов как RBD IgA, так и набор IgG показали одинаковую положительную диагностическую частоту 99.5% (198/199). Напротив, набор IgM каким-то образом показал относительно более низкую положительную диагностическую частоту — 98,5% (196/199). Эти результаты свидетельствуют о том, что включение IgA в тест обеспечивает лучший диагностический результат на ранних стадиях. В целом среднее время сероконверсии для IgA, IgM и IgG составляет 4–6, 4–6 и 5–10 дней после появления симптомов, соответственно, при тестировании с помощью наборов RBD, описанных в этом исследовании. Несмотря на то, что, как правило, это соответствует типичной временной шкале сероконверсии и смены класса иммуноглобулина, наши наборы обеспечивают решение для ранней диагностики благодаря высокой чувствительности.

Чтобы лучше понять тенденции уровней антител у всех 87 пациентов с COVID-19 (некоторые из них предоставили несколько образцов), мы нанесли на график среднее значение RLU в соответствии с временными окнами, когда были собраны сыворотки (рис. 1e). Обнаружение IgA показывает наибольшую чувствительность в течение примерно 4–25 дней после начала заболевания. Медиана RLU RBD-специфического IgA достигла пика в течение 16–20 дней после начала заболевания, а затем начала снижаться, но оставалась на относительно высоком уровне до 31–41 дня.Среднее RLU RBD-специфического IgG было самым низким на ранних стадиях заболевания, но повышалось через 15 дней после начала заболевания, IgG достигало своего пика в течение 21–25 дней после начала заболевания и оставалось на относительно высоком уровне до 31–41 дня. , предполагая, что IgG эффективен для диагностики на более поздних стадиях. Хотя IgM достиг своего пика на ранних стадиях, показания RLU были ниже, чем у IgA или IgG.

Далее мы разделили 87 пациентов на три группы тяжести на основе установленных клинических классификаций.В соответствии с предыдущим отчетом 7 мы обнаружили, что тяжесть COVID-19 положительно коррелирует с возрастом в нашей когорте (дополнительный рисунок 3). Пациенты с тяжелыми симптомами были значительно старше (средний возраст 62,5 года), чем пациенты с умеренными (средний возраст 46 лет) и легкими симптомами (средний возраст 30 лет), как и ожидалось. Мы использовали данные уровней антител в период 16–25 дней после начала заболевания, когда все три изотипа достигли или были близки к своим пикам (рис. 1д). Если точек данных несколько, берется среднее значение.Уровни IgM и IgG в сыворотке у пациентов с COVID-19 средней и тяжелой степени были значительно выше, чем у пациентов с легкой формой, в то время как между пациентами с тяжелой и средней степенью тяжести не наблюдалось существенной разницы (рис. 1g, h). Однако мы обнаружили, что уровни IgA в тяжелых случаях были значительно выше, чем в легких или умеренных случаях (рис. 1f). Молекулярный механизм этого наблюдения требует будущих исследований.

В текущей форме этого исследования есть некоторые ограничения. В этом исследовании мы использовали 216 образцов сыворотки от 87 пациентов с подтвержденным COVID-19, и образцы сыворотки не были доступны каждый день для каждого пациента.Самая ранняя сыворотка была собрана на 4-й день, а последняя — на 41-й день после начала болезни. Только в 17 случаях образцы сыворотки были собраны в течение первых 10 дней после начала заболевания; что, соответственно, повлияло на точность. Точно так же было всего 23 случая взятия образцов сыворотки через 30 дней после начала заболевания, что затруднило анализ долгосрочных уровней антител у выздоровевших пациентов. В настоящее время мы наблюдаем за некоторыми из 87 выздоравливающих пациентов с COVID-19, которые готовы участвовать в дальнейшем исследовании.Тем не менее, это исследование предоставляет ценную информацию о серологическом тестировании COVID-19 и реакциях сероконверсии, особенно в отношении антител IgA.

Ссылки

  1. Zhang, W. et al. Молекулярное и серологическое исследование пациентов, инфицированных 2019-nCoV: значение множественных путей выделения. Аварийный. микробы заражают. 9 , 386–389 (2020).

    КАС Статья Google ученый

  2. То, К.К.-В. и другие. Временные профили вирусной нагрузки в образцах слюны из задней части ротоглотки и ответы сывороточных антител во время инфекции SARS-CoV-2: наблюдательное когортное исследование. Ланцет Заражение. Дис. 20 , 565–574 (2020).

    КАС Статья Google ученый

  3. Чжао, Дж. и др. Реакция антител на SARS-CoV-2 у пациентов с новым коронавирусным заболеванием, 2019 г. Clin. Заразить. Дис . ciaa344.https://doi.org/10.1093/cid/ciaa344 (2020 г.).

  4. Li, Z. et al. Разработка и клиническое применение экспресс-теста на комбинированные антитела IgM-IgG для диагностики инфекции SARS-CoV-2. J. Med. Вирол . https://doi.org/10.1002/jmv.25727 (2020 г.).

  5. Guo, L. et al. Профилирование раннего гуморального ответа для диагностики нового коронавирусного заболевания (COVID-19). клин. Заразить. Дис . ciaa310. https://doi.org/10.1093/cid/ciaa310 (2020 г.).

  6. Падоан А.и другие. Ответ IgA-Ab на шиповидный гликопротеин SARS-CoV-2 у пациентов с COVID-19: продольное исследование. клин. Чим. Acta 507 , 164–166 (2020).

    КАС Статья Google ученый

  7. Wolfel, R. et al. Вирусологическая оценка госпитализированных пациентов с COVID-2019. Природа. https://doi.org/10.1038/s41586-020-2196-x (2020 г.).

Скачать ссылки

Благодарности

Мы признательны за финансовую поддержку Программы приоритетных стратегических исследований Китайской академии наук (XDB204), Национального фонда естественных наук Китая (гранты No.: 31870731 и U1732109), фонды фундаментальных исследований для центральных университетов (WK2070000108), специальный грант для борьбы с COVID-19, поддерживаемый Больницей клинических исследований Китайской академии наук (Хефэй) (YD2070002017 и YD2070002001), и новый фонд медицинских наук USTC (WK2070000130).

Информация об авторе

Примечания автора
  1. Эти авторы внесли равный вклад: Huan Ma, Weihong Zeng, Hongliang He

Принадлежности

  1. Отделение акушерства и гинекологии, The First A Gynecology Медицина, Университет науки и технологий Китая, Хэфэй, 230001, Аньхой, Китай

    Huan Ma & Weihong Zeng

  2. Хэфэй Национальная лаборатория физических наук в микромасштабе, Лаборатория структурной иммунологии, Ключевая лаборатория врожденного иммунитета и хронических заболеваний CAS Болезни, Отделение наук о жизни и медицины, Университет науки и технологии Китая, Хэфэй, 230027, Аньхой, Китай

    Хуан Ма, Вейхун Цзэн и Дэн Чжао

  3. Отделение инфекционных заболеваний, Первая дочерняя больница USTC, Отделение наук о жизни и медицины Китайского университета науки и технологий, Хэфэй, 230001, Аньхой, Чи Na

    Hungliang He

  4. Kangrun Biotech Ltd, Гуанчжоу, 511400, Гуандун, Китай

    Dehua Jiang

  5. Департамент статистики, Университет Висконсин-Мэдисон, Мэдисон, WI, 53706, США

    Peigen Zhou

  6. Отделение наук о жизни и медицины Китайского университета науки и технологии, Хэфэй, 230027, Аньхой, Китай

    Linzhao Cheng и Tengchuan Jin

  7. Медицинский факультет Университета Джона Хопкинса, Колумбия, Мэриленд, США

    4 Linzhao Cheng

  8. Отделение клинической лаборатории, Первая дочерняя больница Аньхойского медицинского университета, Хэфэй, 230032, Китай

    Yajuan Li

  9. Отделение лабораторной медицины, Первая дочерняя больница USTC, Отделение наук о жизни и Медицина, Университет науки и технологий Китая, Хэфэй, 230001, Аньхой, Китай

    Сяолин Ма

Авторы переписки

Переписка с Яцзюань Ли, Сяолин Ма или Тэнчуань Джин.

Декларации этики

Конкурирующие интересы

Дэхуа Цзян — сотрудник Kangrun Biotech LTD (Гуанчжоу, Китай). Tengchuan Jin, Huan Ma, Weihong Zeng из USTC и Dehua Jiang подали заявку на совместный патент, относящийся к наборам для обнаружения антител. Другие авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Дополнительная информация

Права и разрешения

Открытый доступ Эта статья находится под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 Международная лицензия, которая разрешает использование, совместное использование, адаптацию, распространение и воспроизведение на любом носителе или в любом формате при условии, что вы укажете первоначальных авторов и источник, предоставите ссылку на лицензию Creative Commons и укажете если были внесены изменения. Изображения или другие сторонние материалы в этой статье включены в лицензию Creative Commons для статьи, если иное не указано в кредитной строке материала. Если материал не включен в лицензию Creative Commons статьи, а ваше предполагаемое использование не разрешено законом или превышает разрешенное использование, вам необходимо получить разрешение непосредственно от правообладателя.Чтобы просмотреть копию этой лицензии, посетите http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/.

Перепечатки и разрешения

Об этой статье

Цитировать эту статью

Ma, H., Zeng, W., He, H. et al. Сывороточные ответы IgA, IgM и IgG при COVID-19. Cell Mol Immunol 17, 773–775 (2020). https://doi.org/10.1038/s41423-020-0474-z

Скачать цитату

Поделиться этой статьей

Любой, с кем вы поделитесь следующей ссылкой, сможет прочитать этот контент:

Получить общую ссылку

Извините, общедоступная ссылка в настоящее время недоступна для этой статьи.

Предоставлено инициативой Springer Nature SharedIt по обмену контентом.

Анализ изотипических антител IgM, IgA и IgG, направленных против шиповидного гликопротеина SARS-CoV-2 и ORF8 при COVID-19

Количество исследований, оценивающих иммуноанализы SARS-CoV-2, неуклонно растет. Однако иммуноанализы не дают информации о контаминации или перекрестной реактивности, что может привести к ложно высокой чувствительности и более низкой специфичности.Поэтому мы исследовали сыворотку 12 пациентов с COVID-19 методом иммуноблоттинга на наличие антител изотипов IgM, -A и -G, направленных против белков S, R, S1 и O SARS-CoV-2.

Наиболее поразительным результатом нашего исследования было то, что мы не обнаружили корреляции между наличием антител изотипа IgA, IgM и IgG и будущим течением заболевания. Например, у пациента в группе с легкими симптомами не было реактивности антител против какого-либо изотипа, тогда как у пациента в группе с тяжелыми симптомами, который в конечном итоге умер, были антитела изотипов IgA, IgM и IgG против белков SARS-CoV-2.Еще одним поразительным результатом иммуноблот-анализа стало небольшое количество пациентов с положительным результатом на антитела изотипа IgA, направленные против белков SARS-CoV-2. Это может быть связано с тем, что сыворотка не является основным местом локализации секретируемых антител зрелого изотипа IgA. Однако недавнее исследование показало, что ответы IgG, IgM и, в меньшей степени, IgA на шип и RBD в сыворотке положительно коррелируют с соответствующими образцами слюны 12 . Тем не менее, наши результаты могут также указывать на общее отсутствие антител изотипа IgA в иммунной защите.Отсутствие антител изотипа IgA в дыхательных путях может быть причиной повторного заражения SARS-CoV-2 13,14 . С другой стороны, небольшое количество пациентов с положительным результатом на антитела изотипа IgA в нашем исследовании противоречит отчетам, в которых описывается обилие антител изотипа IgA, направленных против S-белка SARS-CoV-2 у пациентов с COVID-19; отчеты, которые показали, что IgA имеет более высокие титры, чем антитела изотипа IgM или даже IgG 15,16 . Однако это противоречие можно объяснить нашей установкой, поскольку в этом анализе пациент определялся как положительный или отрицательный в отношении антител изотипа IgA в соответствии с уровнями антител изотипа IgA, обнаруженными в контроле.Наличие антител изотипа IgA против SARS-CoV-2 в контроле, вероятно, является результатом перекрестной реактивности из-за предыдущих инфекций другими коронавирусами или случайных антител. У большинства пациентов было обнаружено меньше антител к изотопу IgA, чем в контроле, и, следовательно, эти пациенты считались отрицательными; тем не менее, в сыворотке пациентов присутствовали антитела изотипа IgA с реактивностью против белков SARS-CoV-2. В какой степени эти антитела поддерживают иммунитет против вируса SARS-CoV-2, неясно, и на него можно ответить только с помощью функциональных анализов ингибирования на основе клеток.Это верно не только для IgA, но и для антител изотипов IgM и IgG. Основываясь на результатах нашего иммуноблот-анализа, мы предполагаем, что даже у пациентов, перенесших COVID-19 или вакцинацию, может быть отрицательный результат иммуноанализа при оценке по порогу, определенному у контрольной группы, у которой есть иммунитет к вирусу через существующие антитела.

Еще одним интересным результатом нашего исследования является то, что антитела изотипов IgM и -A преимущественно распознают продукт деградации белка S (S low).Возможно, этот продукт деградации представлен комплексом MHC II, что приводит к более высокой выработке антител против него. Интересно, что белки S и S1 выявлялись чаще, чем белок R. Объяснение может заключаться в том, что RBD спайкового белка SARS-CoV-2 обычно недоступен, так как он маскируется остальной частью белка 17 . Хотя антитела против RBD могут эффективно подавлять проникновение вируса в клетки и могут быть пригодны в качестве вакцинного антигена 18 , сам по себе RBD не подходит в качестве антигена для диагностических целей.Напротив, белок ORF8 хорошо выявляется с помощью антител IgM, но не с помощью антител IgA или IgG. Функция ORF8 все еще исследуется 19 . Однако есть сообщения о том, что он участвует в подавлении иммунного ответа хозяина за счет подавления комплексов MHC I 20 и подавления интерферона типа I 21 . Таким образом, ORF8 является перспективной фармацевтической мишенью, но не подходит для обнаружения антител IgA и -G.

Нами обнаружены различия между результатами иммуноблоттинга и ИФА-анализа антител изотипа IgG, направленных против белка S1.Иногда антитела выявлялись с помощью иммуноблота, но не с помощью ИФА, и наоборот. Белки вируса денатурируют для иммуноблота, тогда как в ИФА используется их нативная форма; следовательно, ELISA обнаруживает трехмерные эпитопы, тогда как иммуноблот обнаруживает линейные эпитопы, что может привести к различным результатам. Согласно иммуноблот-анализу, белок S1 не обязательно является лучшим антигеном для выявления антител изотипа IgM, так как большее количество пациентов были положительными на антитела, направленные против белка S.Использование комбинации белка S и белка O может оказаться лучшим для обнаружения антител изотипа IgM, поскольку белок O является мощным антигеном для выявления пациентов с COVID-19 на ранних и поздних стадиях инфекции 22 . При обнаружении антител изотипа IgG наши данные свидетельствуют о том, что использование белка S должно быть достаточным для выявления положительных пациентов. Однако есть доказательства того, что использование домена S1 вместо полноразмерного белка S приводит к меньшей перекрестной реактивности 23 .

Основываясь на наших результатах, мы задались вопросом, может ли наличие антител помочь стратифицировать пациентов, но мы не смогли обнаружить никакой корреляции между наличием антител против SARS-CoV-2 и течением заболевания. Мы обнаружили высокие уровни воспалительных параметров СРБ и ИЛ-6, но не количества лейкоцитов или ПКТ, и обнаружили повышение уровня ЛДГ с тяжестью заболевания. В контексте заболевания COVID-19 может возникнуть чрезмерная воспалительная реакция, также называемая гипервоспалительным синдромом.Пациентам с гипервоспалительным синдромом может помочь терапия, нацеленная на синдром цитокинового шторма. Недавно был предложен набор клинических критериев гипервоспалительного синдрома, связанного с COVID-19 24 . Кроме того, мы наблюдали корреляцию между CRP и IL-6, а также количеством лимфоцитов и реактивностью антител. В течение одной недели уровни СРБ и ИЛ-6 снизились, а количество лимфоцитов и реактивность антител увеличились у пациентов 1–11. Наоборот, у P12, у которого не было иммуносупрессии и не было реактивности антител, количество лимфоцитов уменьшилось, а уровни CRP и IL-6 увеличились.Однако мы не можем дать какое-либо объяснение тому, почему у пациентов в когорте с тяжелой формой были более низкие значения СРБ и IL-6, чем у пациентов в когортах со средней и легкой степенью тяжести. Возможно, более низкие значения являются результатом компенсаторной противовоспалительной реакции.

Ограничением нашего исследования является небольшое количество пациентов и контрольной группы. Включение большего количества пациентов и лучшее совпадение возраста пациентов (средний возраст 59 лет) и контрольных доноров (средний возраст 38 лет) увеличили бы статистическую мощность этого исследования.В нашем исследовании мы не обнаружили корреляции между наличием антител и дальнейшим течением заболевания. Мы не можем исключить возможность того, что корреляция может быть замечена, если мы включим больше пациентов. Тем не менее, мы смогли показать, что только наличие или отсутствие антител не является решающим для течения болезни. Кроме того, исследование с большим количеством пациентов наверняка подтвердило бы тенденцию антител изотипов IgM и IgG чаще проявлять реактивность против белка полноразмерного шипа (S), чем против субъединицы 1 (S1) или домена, связывающего рецептор. Р) (табл. 3).Кроме того, даже в нашей небольшой популяции пациентов белок О менее иммуногенен, чем белок S (таблица 3), и весьма вероятно, что эта тенденция будет подтверждена при увеличении числа пациентов. Влияние включения большего количества контролей показано в случае антител изотипа IgA. Здесь один контроль (NC3; дополнительный рис. S3) показал выраженную реакцию антител, направленную против белка S и O. Таким образом, порог, используемый для определения пациента как положительного для антител изотипа IgA, был намного выше, чем для антител изотипа IgM и IgG.Соответственно, меньше пациентов были определены как положительные на IgA, чем на антитела IgM и IgG. Это также приводит к несоответствию между нашим исследованием и другими исследованиями, в которых сообщается о большем количестве пациентов, положительных на антитела изотипа IgA 15,16 . С включением большего количества контролей некоторые контроли будут демонстрировать выраженную реактивность антител изотипов IgG и IgM против белков SARS-CoV-2, что повысит порог и приведет к меньшему количеству пациентов, определенных как положительные для антител изотипов IgM и IgG.Независимо от статистической силы нашего исследования, мы смогли показать наличие предварительно сформированных и/или перекрестно реагирующих изотипических антител IgM, IgA и IgG против белков SARS-CoV-2. Кроме того, отрицательный результат теста на антитела, направленные против белков SARS-CoV-2, не означает полного отсутствия антител. Человек с отрицательным результатом иммунологического анализа может по-прежнему иметь антитела к SARS-CoV-2 и, следовательно, обладает иммунитетом или, по крайней мере, частичным иммунитетом против вируса.

В заключение мы обнаружили доказательства наличия предварительно сформированных антител или перекрестной реактивности антител, что ставит под сомнение надежность отрицательных результатов иммунологических анализов, обнаруживающих антитела против SARS-CoV-2 в образцах сыворотки.Тем не менее, для обнаружения антител IgG к SARS-CoV-2 наши данные свидетельствуют о том, что использование белка S в иммуноанализах должно быть достаточным для выявления положительных пациентов. Использование комбинации белка S и белка O может оказаться лучшим методом выявления пациентов с положительным результатом на антитела IgM к SARS-CoV-2. Неожиданно мы не обнаружили корреляции между наличием антител и дальнейшим течением заболевания. Для оценки тяжести инфекции SARS-CoV-2 следует обратить внимание на параметры СРБ, ИЛ-6 и ЛДГ.

Границы | Мультиплексный анализ антител IgM, IgA и IgG к SARS-CoV-2 в слюне и сыворотке инфицированных детей и их близких контактов

Введение

больше, чем взрослые или пожилые люди (1, 2), хотя исследования также показали, что дети и взрослые инфицированы в одинаково низкой степени (3). Клиническая картина инфекции SARS-CoV-2 у детей протекает мягче, с большей долей бессимптомных случаев (1, 4–6).Одной из гипотез более низкой тяжести COVID-19 является защитный эффект, который антитела человеческих коронавирусов простуды (HCoV), которые более распространены у детей, могут оказывать на контроль SARS-CoV-2, учитывая перекрестную реактивность между ними. (7, 8). У детей также может быть более низкая вирусная нагрузка, отчасти из-за более низкой экспрессии ACE2, рецептора коронавируса (9). Это означает, что для точной диагностики могут потребоваться высокочувствительные методы.

В этом контексте большой интерес представляет вопрос о том, могут ли инфицированные дети быть менее эффективными переносчиками для своих непосредственных контактов (10), поскольку это имеет важные последствия для борьбы со вспышками в школах, внеклассных мероприятиях и лагерях отдыха , особенно когда дети не являются приоритетными для кампаний по вакцинации.Таким образом, наличие диагностических инструментов, развертываемых в полевых условиях, для мониторинга динамики инфекционности в школьной среде очень актуально с точки зрения общественного здравоохранения.

Присутствие вируса в образцах из носа или носоглотки может быть обнаружено с помощью полимеразной цепной реакции в реальном времени (RT-PCR) и чувствительных методов на основе антигенов, в то время как предшествующее воздействие необходимо оценивать путем обнаружения антител к антигенам SARS-CoV-2. . Последнее обычно осуществляется путем измерения специфических иммуноглобулинов в образцах сыворотки или плазмы, что требует получения образцов крови с помощью венозных или капиллярных пункций, менее поддающихся большим полевым исследованиям.Существует несколько коммерческих экспресс-тестов (ДЭТ), которые можно использовать в качестве наборов для оказания медицинской помощи, но они могут быть ограничены своей чувствительностью и специфичностью в случае бессимптомных инфекций, которые обычно индуцируют более низкие уровни антител (11, 12). Ряд лабораторных серологических анализов (ELISA, CLIA) также широко используются и дают хорошие результаты (13). Совокупная чувствительность ИФА, измеряющих IgG или IgM, составляет 84,3% (95% доверительный интервал от 75,6% до 90,9%), а ИФА — 97%.8% (от 46,2% до 100%). Объединенная специфичность варьировала от 96,6% до 99,7%. Точно так же мультиплексные анализы, сочетающие несколько антигенных специфичностей одновременно и пригодные для тестирования с высокой пропускной способностью, предлагают еще больший потенциал для обеспечения максимальной чувствительности для выявления ответов низкого уровня в более молодых популяциях.

Будучи респираторным патогеном, иммунитет слизистых оболочек имеет ключевое значение, поэтому роль IgA в борьбе с вирусом становится все более важной (14). Таким образом, слюна представляет собой привлекательную матрицу образцов для разработки неинвазивных серологических тестов для применения в полевых условиях, которые легко применимы в педиатрических исследованиях (15–17).Действительно, антитела в слюне были обнаружены у пациентов с COVID-19 и коррелируют с антителами в плазме (18). Следовательно, наличие высокочувствительных и специфичных анализов антител для иммунологического профилирования важно как для иммунно-эпидемиологических исследований, так и для лучшего понимания защитного иммунитета к SARS-CoV-2 (19). Кроме того, серология слюны позволила бы узнать серологический диагноз после вакцинации для определения уровней иммунитета на индивидуальном уровне и в популяции и могла бы быть действительно полезной при скрининге населения для определения серопревалентности SARS-CoV-2 в популяциях детей.

В этом исследовании мы адаптировали и оценили три анализа антител на основе Luminex для количественного определения уровней IgM, IgA и IgG против нескольких антигенов SARS-CoV-2 в образцах слюны и сравнили их с уровнями антител, полученными с использованием сыворотки/плазмы. образцы от тех же людей, у которых был положительный или отрицательный диагноз ОТ-ПЦР в течение пятинедельного периода наблюдения. Мы проверили применимость анализов слюны Luminex у детей и взрослых добровольцев с разными демографическими характеристиками и клиническими проявлениями, участвуя в исследовании контактов и инфекционности после первого пика пандемии COVID-19 летом 2020 года в Барселоне.

Материалы и методы

Дизайн исследования, люди и образцы

Мы сравнили уровни антител к SARS-CoV-2 у субъектов с положительным диагнозом с помощью назофарингеальной RT-PCR и/или ELISA SARS-CoV-2 IgG, IgM теста (Euroimmune Architect – Abbott) независимо от наличия симптомов, совместимых с COVID-19, и субъектов с отрицательным результатом назофарингеальной RT-PCR (20) и серологических исследований с помощью RDT (SureScreen). Подходящие субъекты вошли в исследование по трем путям набора: (i) активное наблюдение в 22 летних школах, как сообщалось ранее (21), (ii) пассивное выявление случаев, происходящих из других школьных сред, направленных каталонским надзором за здоровьем. системный вызов и (iii) отдельные случаи, переданные из объявления о зачислении детей с положительной ОТ-ПЦР за предыдущие 5 дней.Дети с симптомами были определены как дети с острой респираторной инфекцией, включая лихорадку, кашель, головную боль, желудочно-кишечные симптомы, ринорею или заложенность носа, аносмию или агевзию, одышку и миалгию. Было завербовано 70 взрослых (25 мужчин и 45 женщин) и 52 ребенка (26 мужчин и 26 женщин). За участниками наблюдали в течение 5 недель в течение июля 2020 года с еженедельным сбором образцов крови и слюны и тестированием ОТ-ПЦР, что позволило точно определить инфицированные положительные и отрицательные группы.Образцы слюны собирали с помощью устройств Oracol (Malvern Medical Development, Великобритания) для оптимального сбора десневой жидкости, обогащенной сывороточными антителами (22, 23). Образцы крови собирали путем венепункции, а плазму или сыворотку отделяли центрифугированием и замораживали в тот же день или в виде высушенных пятен крови (DBS) для облегчения логистики полевых исследований. Пробирки с ЭДТА хранили в холодильнике до центрифугирования при 1721 g в течение 10 мин для отделения фракции плазмы. DBS хранили при -20°C до дня выделения сыворотки, когда их доводили до комнатной температуры и смешивали с элюирующим буфером (буфер Luminex с 0.05% Tween-20) при 4°C в течение ночи при перемешивании со скоростью 600 об/мин. На следующий день пробирки центрифугировали при 10000 об/мин в течение 10 мин для сбора сыворотки. Образцы элюата плазмы и сыворотки DBS хранили при -80°C до проведения серологического анализа. Устройства Oracol хранили и доставляли в лабораторию в холодильнике в тот же день для центрифугирования в криопробирке при 1500g в течение 10 минут, инактивации нагреванием при 55°C в течение 30 минут и замораживания при -20°C до измерения антител. Тридцать шесть допандемических образцов плазмы здоровых взрослых использовали в качестве отрицательного контроля и для расчета порогового значения серопозитивности для сыворотки/плазмы.После обращения в национальные биобанки образцов слюны до пандемии не было.

Измерение антител

Методы количественной суспензионной матрицы (qSAT) для измерения IgM, IgA и IgG против SARS-CoV-2 были адаптированы из наших предыдущих стандартизированных протоколов сыворотки/плазмы (24) к матрице слюны для SARS-CoV-2. 2 оценка антител. Антигены включали нуклеокапсид (N) полной длины (FL) и С-конец (аминокислотные остатки 340-416, CT) (25), шип (S) FL, произведенный в CRG, S2, приобретенный у SinoBiologicals, и RBD, подаренный Ф.Краммер (Маунт-Синай, Нью-Йорк). Вкратце, белки, связанные с магнитными микросферами (Luminex Corporation, Остин, Техас), инкубировали с образцами сыворотки/плазмы (разведение 1/500) или слюны (разведения 1/5 или 1/10, рис. S1) или холостыми контролями в 384-луночных тарелки. Разведение слюны 1/10 показало более высокую чувствительность и было выбрано для дальнейших анализов. Влияние тепловой инактивации ранее было проверено в сыворотке/плазме и слюне (рис. S2) со снижением уровней IgM к RBD и S в слюне. Сыворотку элюировали из DBS 200 мкл PBS-BN (отфильтрованный PBS с 1% BSA и 0.05% азида натрия, MilliporeSigma, Сент-Луис, США) + 0,05% Tween20. Принимая во внимание гематокрит 50%, мы получаем концентрацию элюируемого белка, эквивалентную разведению сыворотки/плазмы 1:50, которое впоследствии разбавляли до 1:500 для анализа. Антитела в сыворотке, элюированной из DBS и из образцов сыворотки/плазмы, показаны вместе, поскольку в имеющихся парных образцах плазмы и DBS не наблюдалось никаких различий. После того как антиген-связанные шарики инкубировали с образцами, планшеты промывали и добавляли меченные фикоэритрином вторичные антитела (античеловеческие IgG, IgM или IgA, Moss).Наконец, шарики промывали, ресуспендировали и собирали в приборе FlexMap 3D xMAP ® . Необработанные средние значения интенсивности флуоресценции (MFI) и фоновой флуоресценции из пустых лунок экспортировали с использованием программного обеспечения xPONENT.

Анализ данных

Для проверки распределения данных был применен критерий Шапиро-Уилка. Для сравнения уровней (log 10 MFI) каждой пары антитело/антиген между исследуемыми группами использовали непараметрические U-критерии Манна-Уитни. Радарные диаграммы использовали для сравнения медианы log 10 MFI всех антител вместе между исследуемыми группами с помощью U-критерия Манна-Уитни.Тепловые карты с иерархической кластеризацией (евклидов метод) использовались для оценки паттернов ответов на индивидуальном уровне в зависимости от клинических и демографических переменных. Из-за отсутствия образцов слюны до пандемии мы исследовали расчет пороговых значений серопозитивности по среднему значению плюс 3 стандартных отклонения (SD) пандемических отрицательных образцов для сыворотки/плазмы и образцов слюны (рис. S3). Все анализы были выполнены на уровне значимости 5% с использованием программного обеспечения R версии 4.0.2. Пакет ggplot2 использовался для создания блочных диаграмм (26).

Результаты

Показаны основные демографические характеристики инфицированных SARS-CoV-2 (n=62, в том числе 42 ребенка) и неинфицированных (n=60) лиц, у которых были проанализированы образцы слюны и/или сыворотки/плазмы в таблице 1. Полная база данных, включенная в это исследование, доступна в таблице S1.

Таблица 1 Характеристики участников исследования, образцы которых были проанализированы.

Уровни антител в соответствии со статусом RT-PCR SARS-CoV-2

Мы сравнили уровни (log 10 MFI) антител IgM, IgA и IgG к пяти антигенам SARS-CoV-2 в образцах слюны и сыворотки/плазмы от RT-PCR положительных и отрицательных лиц.Уровни IgG ко всем антигенам в слюне были статистически значимо выше (p<0,05 для N CT и p<0,001 для остальных) у положительных по ОТ-ПЦР лиц, чем у отрицательных (рис. 1A, B). Уровни IgM и IgA к антигенам S (FL, S2 и RBD), но не антигенам N (FL, CT) в слюне были статистически значимо выше у положительных по ОТ-ПЦР лиц, чем у отрицательных (p<0,001). В образцах сыворотки/плазмы от одних и тех же людей все изотипы Ig были значительно выше у положительных, чем у отрицательных людей (p<0,0.05 для IgM к N и p<0,001 для остальных). Величина ответов антител была значительно ниже в слюне, чем в образцах сыворотки/плазмы, несмотря на то, что они были измерены при более высокой концентрации (1/10 против 1/500), а уровни перекрывались между положительными и отрицательными людьми в большей степени в слюне, чем в сыворотке/плазме. образцы (рисунок S3).

Рисунок 1 Уровни антител согласно статусу ОТ-ПЦР SARS-CoV-2. (A) Коробчатые диаграммы, показывающие log 10 уровней антител MFI.Образцы слюны тестировали инактивированными нагреванием и в разведении 1/10, а сыворотку (из образцов плазмы или сухих пятен крови) — в разведении 1/500. (B) Радарные диаграммы, представляющие медиану log 10 антител MFI в плазме и слюне. TS-: Отрицательный тестовый образец, представленный синим цветом. TS+: Положительный тестовый образец, показан красным цветом. (C) Коробчатые диаграммы, показывающие log 10 уровней антител MFI в зависимости от времени с момента положительной ОТ-ПЦР. Медиана log 10 Уровни MFI сравнивали с помощью U-критерия Манна-Уитни.Статистически значимые необработанные p-значения выделены звездочками. ***р <0,001, **р <0,01, *р <0,05, NS, несущественно.

Мы оценили, были ли более поздние инфекции у лиц с положительной реакцией на ОТ-ПЦР, но отрицательных по антителам. Стратифицированные по времени с момента постановки диагноза, уровни IgG против S в слюне и против RBD в сыворотке/плазме были выше в образцах, собранных >2 недель после положительной ОТ-ПЦР (p<0,05) (рис. 1C). Напротив, уровни IgM к S и S2 в слюне были ниже в образцах, собранных более чем через 2 недели после положительной ОТ-ПЦР (p<0,0.05).

Уровни антител в зависимости от возраста и пола согласно SARS-CoV-2 RT-PCR Status

Среди инфицированных детей у детей были значительно более высокие уровни IgG в сыворотке/плазме к RBD и S (p<0,01), а также значительно более высокие уровни в слюне IgM к RBD и S, чем у взрослых (p<0,05) (рис. 2). Напротив, у инфицированных взрослых уровень IgA к NFL в слюне был значительно выше, чем у инфицированных детей (p<0,05). Инфицированные дети мужского пола также имели более высокие уровни IgG в слюне к N CT, N FL и RBD, чем дети женского пола (p<0,0.05) (Рисунок S4). Среди лиц с отрицательным результатом ОТ-ПЦР на SARS-CoV-2 дети по сравнению со взрослыми имели значительно более высокие уровни IgG в сыворотке/плазме к N FL (p<0,05).

Рисунок 2 Уровни антител в зависимости от статуса RT-PCR SARS-CoV-2 и по возрасту. (A) Коробчатые диаграммы, показывающие log 10 Уровни антител MFI в образцах слюны, инактивированной нагреванием, при разведении 1/10, а также в сыворотке (из образцов плазмы или сухих пятен крови) при разведении 1/500. (B) Радарные диаграммы, сравнивающие медианы уровней антител (в журнале 10 MFI) между образцами плазмы и слюны детей и взрослых Взрослые представлены синим цветом, а дети — красным.Медиана log 10 Уровни антител MFI сравнивали с помощью U-критерия Манна-Уитни. Статистически значимые необработанные p-значения выделены звездочками. ***p < 0,001, ** p < 0,01, * p < 0,05, NS, не значимо.

Уровни антител в зависимости от наличия/отсутствия симптомов

Среди лиц с положительной реакцией на ОТ-ПЦР уровни IgG к RBD и S были значительно выше в сыворотке/плазме у бессимптомных субъектов, чем у субъектов с симптомами (p<0,01) (рис. 3A). В целом уровни IgG и IgA, но не IgM, как правило, были ниже в слюне и сыворотке/плазме инфицированных SARS-CoV-2 субъектов, у которых развились симптомы (рис. 3B).При стратификации по времени с момента появления симптомов сывороточные IgA и IgG к RBD и IgG к S были выше через 14 дней после появления симптомов (p<0,01). Напротив, IgM к RBD, S и S2 в слюне были ниже через 14 дней после появления симптомов (p<0,05) (рис. 3C).

Рисунок 3 Уровни антител по симптомам у лиц с положительным результатом на SARS-CoV-2. (A) Коробчатые диаграммы, показывающие log 10 Уровни антител MFI в образцах слюны, инактивированной нагреванием, при разведении 1/10, а также в сыворотке (из образцов плазмы или сухих пятен крови) при разведении 1/500. (B) Радарные диаграммы, сравнивающие медианы уровней антител (в журнале 10 MFI) в сыворотке/плазме и слюне у лиц с симптомами (синий) и без симптомов (красный). (C) Коробчатые диаграммы, показывающие log 10 уровней антител MFI в образцах слюны и плазмы по времени с момента появления симптомов. Медиана log 10 Уровни антител MFI сравнивали с помощью U-критерия Манна-Уитни. Статистически значимые необработанные p-значения отмечены звездочками. ***р < 0,001, **р < 0.01, *p < 0,05, NS: не значимо.

Корреляция уровней антител между образцами слюны и сыворотки/плазмы

Характер ответа антител в образцах сыворотки/плазмы по сравнению с образцами слюны варьировался в зависимости от изотипа Ig и антигена (Рисунок 4A). Относительные уровни антител у ОТ-ПЦР-положительных лиц были выше в сыворотке/плазме, чем в образцах слюны, но у ОТ-ПЦР-отрицательных лиц уровни IgA были выше в слюне, чем в образцах сыворотки/плазмы. Выявлена ​​статистически значимая корреляция между уровнями в сыворотке/плазме и слюне всех изотипов антител против S-антигенов (p<0.01), а также для IgG и IgM к НФЛ (p<0,05) (Фигура 4B). Самые сильные корреляции были для IgG и IgA с S, затем следуют IgG с S2 и IgA и IgM с RBD.

Рисунок 4 Сравнение уровней антител в образцах сыворотки/плазмы и слюны. (A) Радарные диаграммы, сравнивающие медианы уровней антител (в журнале 10 MFI) в сыворотке/плазме (красный) и слюне (синий), в целом и по статусу ОТ-ПЦР. (B) Корреляции уровней пары изотип-антиген между образцами плазмы и слюны.Ось X показывает уровни слюны при разведении 1/10, инактивированные; По оси Y показаны уровни в сыворотке/плазме при разведении 1/500, не инактивированные. Медиана log 10 Уровни антител MFI сравнивали с помощью U-критерия Манна-Уитни. Статистически значимые необработанные p-значения выделены звездочками. ***р < 0,001, **р < 0,01.

Мультимаркерный анализ ответов антител

Объединив все ответы изотипов антител и антигенов на образец (Рисунок 5A) и на человека (Рисунок 5B), а также с учетом статуса RT-PCR, возраста и симптомов, иерархический кластерный анализ тепловой карты выявил различные закономерности .Большинство образцов от лиц с положительным результатом ОТ-ПЦР группировались вместе (рис. 5A, B), а также наблюдались кластеры по типу образцов (слюна или сыворотка/плазма) (рис. 5A). ОТ-ПЦР-положительные лица, как правило, имеют более широкий спектр высокоуровневых ответов антител (справа), особенно интенсивные анти-S и анти-RBD-ответы в образцах сыворотки/плазмы, но кластеры высоких ответов также картируются у ОТ-ПЦР-отрицательных лиц. , включая некоторых респондеров N FL, N CT и S2 IgG и IgM в сыворотке/плазме (центральный рисунок 5A) или слюне IgA (левый рисунок 5A).Интенсивность ответов обычно была ниже для IgM, особенно в слюне, что могло быть связано с инактивацией. Не наблюдалось четкой кластеризации симптомов, в то время как более высокие ответы преобладали у детей, чем у взрослых.

Рис. 5 Тепловая карта с иерархической кластеризацией. Образцы слюны тестировали инактивированными нагреванием и в разведении 1/10, а сыворотку (из образцов плазмы или сухих пятен крови) — в разведении 1/500. (A) На образец (каждый столбец) (B) На человека (каждый столбец).Светло-серый представляет отсутствующие данные, поскольку на S и RBD было протестировано больше образцов, чем на остальные антигены.

Обсуждение

Мы показали, что с помощью наших высокопроизводительных мультиплексных анализов qSAT можно измерить значительно более высокие уровни антител к SARS-CoV-2 в слюне у пациентов с подтвержденным ОТ-ПЦР, чем у лиц с отрицательным результатом ОТ-ПЦР. Большинство ответов антител значительно коррелировали между образцами слюны и сыворотки/плазмы, но коэффициенты Спирмена были умеренными/умеренно-высокими (rho<0.7) и зависели от изотипа Ig и пары антигенов. Эти переменные корреляции указывают на различную динамику ответов антител в крови по сравнению со слизистыми тканями (18, 27, 28). Это говорит о том, что ответы, которые могут не обнаруживаться в сыворотке/плазме, могут проявляться в слюне, и наоборот (29). Это делает анализ антител в слюне актуальным и дополняющим серологические анализы. Тот факт, что уровни антител в слюне были намного ниже, чем уровни в крови, но с учетом того, что слюна является неинвазивным и простым в использовании подходом в полевых условиях по сравнению с мазками из носа или проколами крови, представляет собой компромисс между точностью и более быстрой и широкой применимостью, что делает это ценно для педиатрических исследований.

Мы изучили потенциальные причины меньшего различия между инфицированными и неинфицированными субъектами в слюне, чем в образцах сыворотки/плазмы. С одной стороны, низкие уровни антител у некоторых инфицированных лиц могут быть связаны с отсутствием реакции (30) или со слишком недавним контактом, о чем свидетельствуют более высокие уровни IgG через две недели после постановки диагноза ОТ-ПЦР. Низкие уровни в слюне не могут быть объяснены неправильным отбором образцов, поскольку мы использовали устройства Oracol, которые дают более высокие титры общих антител по сравнению с другими методами отбора проб слюны/ротовой жидкости (31) и хорошо принимаются в разных возрастных группах (32).Однако термическая инактивация могла повлиять на количество измеренных уровней антител (18), поэтому предпочтительны другие методы, основанные на инкубации Triton X-100. С другой стороны, средне-высокие уровни Ig в образцах слюны от отрицательных по ОТ-ПЦР и/или серонегативных по сыворотке/плазме лиц могут свидетельствовать о предыдущем или текущем контакте с SARS-CoV-2, который не был обнаружен с помощью ОТ-ПЦР или серология (проведенная менее чувствительными методами ДЭТ), т.е. ложноотрицательные результаты. В самом деле, поскольку исследование включало контакты пациентов с положительной реакцией на ОТ-ПЦР, вполне разумно, что серология слюны может быть более чувствительной для выявления инфекций с низкой или быстроразрешающейся вирусной нагрузкой, которые могут индуцировать только локальный ответ слизистой оболочки, способный контролировать виремию без необходимость вызвать системный ответ (33).В этих случаях титры сывороточного IgA, специфичного для SARS-CoV-2, могут сохраняться короче, тогда как титры сывороточного IgG могут оставаться отрицательными или становиться положительными позже после появления симптомов, в то время как IgA слизистых оболочек могут быть более явными. Таким образом, в дополнение к сывороточным IgA и IgG следует рассмотреть возможность измерения специфического для SARS-CoV-2 IgA в слюне, чтобы лучше оценить процент людей, перенесших коронавирусную инфекцию (34). В качестве альтернативы, обнаружение антител к SARS-CoV-2 в слюне людей с отрицательным результатом ОТ-ПЦР может быть связано с перекрестной реактивностью к простуде HCoV, которая чаще встречается у детей, чем у взрослых.Более высокие уровни ранее существовавших IgG к HCoV были предложены в качестве одного из возможных объяснений более низкой заболеваемости COVID-19 у детей (7, 8). Мы видели, что антитела к N FL, за которыми следует S2, больше присутствуют в образцах до пандемии и более перекрестно реагируют (25). Эти антитела также могут быть более распространены в слюне, чем в сыворотке/плазме.

Мы исследовали другие факторы, которые могут быть связаны с реакцией антител в слюне. Мы наблюдали модели, отличные от того, что сообщается в перекрестных популяционных исследованиях, где взрослые и лица с симптомами, как правило, имеют более высокие уровни антител, чем дети и бессимптомные лица, соответственно.Это может быть связано с изучаемой популяцией, которая в основном состоит из детей, инфицированных и контактировавших с ними. Более высокие уровни анти-S IgG среди бессимптомных людей могут указывать на защиту от заболевания у инфицированных людей, а более высокие уровни IgG и IgM у детей также могут быть связаны с более сильным иммунитетом. Высокие титры антител в слюне вакцинированных людей связаны с более низким потенциалом передачи (35). Уровни антител по отношению к дням после положительной ОТ-ПЦР или дням с момента появления симптомов отражают кинетику, при которой IgM слюны появляются и распадаются первыми, а IgA и IgG сыворотки увеличиваются позже.Более низкая вирусная нагрузка была связана с более быстрой кинетикой антител (36). Что касается пола, более высокие уровни IgG к N и RBD в слюне у детей мужского пола с положительным результатом ОТ-ПЦР, чем у детей женского пола, могут отражать связанные с полом различия в вирусной нагрузке (маркер воздействия) или способности индуцировать лучший иммунитет (маркер защиты). ). Эта закономерность контрастирует с серологическими исследованиями у взрослых, которые не обнаружили различий у мужчин и женщин с легкими симптомами или без них (37), и снова могут отражать несопоставимую динамику реакций слизистых оболочек по сравнению с системными реакциями, потенциально зависящими от пола.

Значительная роль иммунитета слизистых оболочек и, в частности, секреторных и циркулирующих антител IgA при COVID-19 становится все более очевидной, и ее можно использовать в полезных диагностических, терапевтических или профилактических целях (вакцины) (14). Это подтверждает важность скрининга антител в слюне в дополнение к сыворотке. Появляется все больше свидетельств в пользу ключевой роли IgA в ранней нейтрализации вируса (38): (i) в ранних ответах, специфичных для SARS-CoV-2, обычно преобладает изотип IgA, (ii) периферическая экспансия IgA-плазмобластов с проникновение в слизистую оболочку вскоре после появления симптомов и пик в течение третьей недели заболевания, и (iii) IgA может в гораздо большей степени способствовать нейтрализации вируса по сравнению с IgG (28, 39).

Ограничением исследования было то, что пороговые значения серопозитивности нельзя было оценить с помощью образцов слюны, взятых до пандемии, из-за отсутствия доступа к ним, и, таким образом, нельзя было установить чувствительность и специфичность анализов слюны стандартными методами. Использование ОТ-ПЦР-отрицательных пандемических образцов было несколько полезным для образцов сыворотки/плазмы, но в случае со слюной уровни антител у инфицированных и неинфицированных людей существенно перекрывались. Кроме того, будучи образцами пандемии, мы не можем удостовериться, что они ранее не подвергались воздействию низких уровней, и поэтому такой подход не является оптимальным.Это ограничение может быть преодолено в последующих исследованиях путем оценки сероконверсии в последовательных образцах с расчетом кратности увеличения уровней (например, ≥4) за определенный период исследования (21, 28) и, в будущем, доступа к предпандемическим образцам в международных биобанки будут искать. Наконец, размер выборки был ограничен для установления надежной связи между факторами, влияющими на уровни антител, и мог быть некоторый дисбаланс между возрастом и инфекцией, который мог повлиять на результаты, поэтому данные следует интерпретировать с осторожностью и их необходимо подтверждать в более крупных исследованиях.Тем не менее, мы проанализировали влияние возрастной стратификации по инфекционному статусу, чтобы принять во внимание возможные дисбалансы.

В заключение, уровни антител в слюне, измеренные с помощью наших высокопроизводительных анализов qSAT, в значительной степени коррелировали с уровнями антител в сыворотке/плазме людей с подтвержденным диагнозом инфекции SARS-CoV-2 с помощью ОТ-ПЦР, но степень корреляции зависела от изотипа и антиген. Более высокие уровни антител, обнаруживаемые у бессимптомных людей и у детей, особенно у мужчин, могут указывать на защиту от болезней и более сильный иммунитет.Этот неинвазивный скрининг на антитела в полевых условиях может быть полезен для определения процента людей, подвергшихся воздействию SARS-CoV-2, в ходе эпидемиологических исследований, а также для оценки долговременного поддержания уровня антител (40), особенно у детей, которые изначально не были инфицированы. приоритет в 2021 году для вакцинации против COVID-19. Кроме того, учитывая значительную корреляцию между уровнями антител к S в слюне и сыворотке/плазме, это также может быть привлекательным инструментом для мониторинга индукции и поддержания ответа на вакцину, в том числе на вызывающие озабоченность варианты, в рамках крупномасштабных кампаний иммунизации (35). , 41–43).

Заявление о доступности данных

Первоначальные материалы, представленные в исследовании, включены в статью/дополнительный материал. Дальнейшие запросы можно направлять соответствующим авторам.

Заявление об этике

Исследования с участием людей были рассмотрены и одобрены Наблюдательным советом учреждения и Комитетом по этике больницы Сан-Хуан-де-Деу (ссылка PIC 153-20) и комитетом по этике больницы-клиники (ссылка CEIC-7455). Письменное информированное согласие на участие в этом исследовании было предоставлено законным опекуном/ближайшим родственником участников.

Вклад авторов

CD и SAl написали первый черновик рукописи. RA, GM и IJ внесли свой вклад в написание рукописи. NR, CC и LI продуцировали белки для иммуноанализа. Образцы, управляемые DB, LP и AC. MV, AJ, RR и SAl проводили анализы на антитела. RA, GM и CD координировали иммунологию и анализ данных. RS и SAl выполнили анализ данных. CMA провел микробиологические анализы. GP, MM, MH, MG-A, AG-M, EB-C, JC, MC, CF, VF, QB, BB, PM-M, SAj, NB, SAr, MF, EG, JG-G и IJ проведены клинико-эпидемиологические исследования.Все прочитавшие утвердили окончательный вариант рукописи.

Финансирование

Проект финансируется Фондом Ставроса Ниархоса (SNF), Banco Santander и другими частными спонсорами KidsCorona, а также Fundació Privada Daniel Bravo Andreu. RR получил поддержку Министерства здравоохранения Каталонии (PERIS SLT017/20/000224). Разработка реагентов для SARS-CoV-2 была частично поддержана контрактом HHSN272201400008C Центров передового опыта NIAID по исследованиям и эпиднадзору за гриппом (CEIRS).ISGlobal получает поддержку от Министерства науки и инноваций Испании в рамках программы «Centro de Excelencia Severo Ochoa 2019-2023» (CEX2018-000806-S) и поддержку от Generalitat de Catalunya в рамках программы CERCA. CISM поддерживается правительством Мозамбика и Испанским агентством международного развития (AECID).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Примечание издателя

Все утверждения, изложенные в этой статье, принадлежат исключительно авторам и не обязательно представляют претензии их дочерних организаций или издателя, редакторов и рецензентов. Любой продукт, который может быть оценен в этой статье, или претензии, которые могут быть сделаны его производителем, не гарантируются и не поддерживаются издателем.

Благодарности

Мы благодарны Biobanc de l’Hospital Infantil Sant Joan de Déu per a la Investigació за получение образцов и данных.Некоторые образцы сыворотки/плазмы были протестированы против белка RBD, продуцируемого лентивирусом, лабораторией P. Santamaria, IDIBAPS и Jordi Chi, внесшим вклад в производство белков N (посредством гранта PID2019-110810RB-I00 для LI). 1. Мехта , Mytton OT, Mullins EWS, Fowler TA, Falconer CL, Murphy OB, et al.SARS-Cov-2 (COVID-19): что мы знаем о детях? Систематический обзор. Clin Infect Dis (2020) 71(9):2469–79. doi: 10.1093/cid/ciaa556

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

2. Smith BK, Janowski AB, Danis JE, Harvey IB, Zhao H, Dai Y-N, et al. Серопревалентность антител к SARS-Cov-2 у детей и взрослых в Сент-Луисе, штат Миссури, США. mSphere (2021) 6(1):e01027–20. doi: 10.1128/mSphere.01207-20

CrossRef Полный текст | Академия Google

3.Rytter MJH, Nygaard U, Mandic IN, Glenthøj JP, Schmidt LS, Cortes D, et al. Распространенность антител к SARS-Cov-2 у датских детей и взрослых. Pediatr Infect Dis J (2021) 40(4):e157–9. doi: 10.1097/INF.0000000000003048

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

4. Waterfield T, Watson C, Moore R, Ferris K, Tonry C, Watt A, et al. Серопревалентность антител к SARS-Cov-2 у детей: проспективное многоцентровое когортное исследование. Arch Dis Child (2021) 106 (7): 680–6.doi: 10.1136/archdischild-2020-320558

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

5. Zinszer K, McKinnon B, Bourque N, Pierce L, Saucier A, Otis A, et al. Серопревалентность антител к SARS-Cov-2 среди детей в школе и детских садах в Монреале, Канада. JAMA (2021) 4(11):e2135975. doi: 10.1001/jamanetworkopen.2021.35975

Полный текст CrossRef | Google Scholar

6. Циммерманн П., Кертис Н. COVID-19 у детей, беременных и новорожденных: обзор эпидемиологических и клинических особенностей. Pediatr Infect Dis J (2020) 39(6):469–77. doi: 10.1097/INF.0000000000002700

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

7. Khan T, Rahman M, Al AF, SSY H, Ata M, Zhang Q, et al. Различные репертуары антител против эндемичных коронавирусов человека у детей и взрослых. JCI Insight (2021) 6(4):e144499. doi: 10.1172/jci.insight.144499

Полный текст CrossRef | Google Scholar

8. Ногради Б. Как иммунная система детей может избежать COVID [Интернет]. Национальная Англия (2020) 588:382. doi: 10.1038/d41586-020-03496-7

CrossRef Полный текст | Google Scholar

9. Pavel AB, Wu J, Renert-Yuval Y, Del Duca E, Glickman JW, Miller RL, et al. Экспрессия белка ACE2 рецептора SARS-Cov-2 в сыворотке в значительной степени связана с возрастом. Аллергия (2020) 76(3):875–8. doi: 10.1111/all.14522. Дания.

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

10. Posfay-Barbe KM, Wagner N, Gauthey M, Moussaoui D, Loevy N, Diana A, et al.COVID-19 у детей и динамика заражения в семьях. Педиатрия (2020) 146(2):e20201576. doi: 10.1542/peds.2020-1576

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

11. Long Q-X, Tang X-J, Shi Q-L, Li Q, Deng H-J, Yuan J и др. Клиническая и иммунологическая оценка бессимптомных инфекций SARS-Cov-2. Nat Med (2020) 26(8):1200–4. doi: 10.1038/s41591-020-0965-6

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

12.Гроссберг А.Н., Коза Л.А., Ледрё А., Прусмак С., Кришнамурти Х.К., Джаяраман В. и соавт. Мультиплексный хемилюминесцентный иммуноанализ для серологического профилирования пациентов с симптомами и бессимптомным течением COVID-19. Нацкоммуна (2021) 12(1):740. doi: 10.1038/s41467-021-21040-7

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

13. Lisboa Bastos M, Tavaziva G, Abidi SK, Campbell JR, Haraoui LP, Johnston JC, et al. Диагностическая точность серологических тестов на Covid-19: систематический обзор и метаанализ. BMJ (2020) 370: m2516. doi: 10.1136/bmj.m2516

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

14. Рассел М.В., Молдовяну З., Огра П.Л., Местецки Дж. Иммунитет слизистых оболочек при COVID-19: забытый, но критический аспект инфекции SARS-Cov-2. Фронт Иммунол (2020) 11:3221. doi: 10.3389/fimmu.2020.611337

CrossRef Full Text | Google Scholar

15. Писаник Н., Рэндад П.Р., Кручински К., Манабе Ю.К., Томас Д.Л., Пекош А. и др. Серология COVID-19 в популяционном масштабе: ответы антител, специфичных для SARS-Cov-2, в слюне. J Clin Microbiol (2020) 59(1):e02204–20. doi: 10.1128/JCM.02204-20

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

16. Heinzel C, Pinilla YT, Elsner K, Friessinger E, Mordmüller B, Kremsner PG, et al. Неинвазивная оценка антител в слюне для определения воздействия SARS-Cov-2 на детей младшего возраста. Фронт Иммунол (2021) 12:4203. doi: 10.3389/fimmu.2021.753435

CrossRef Full Text | Google Scholar

17. To KK-W, Tsang OT-Y, Leung W-S, Tam AR, Wu T-C, Lung DC, et al.Временные профили вирусной нагрузки в образцах слюны из задней части ротоглотки и ответы сывороточных антител при заражении SARS-Cov-2: наблюдательное когортное исследование. Lancet Infect Dis (2020) 20(5):565–74. doi: 10.1016/S1473-3099(20)30196-1

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

18. Isho B, Abe KT, Zuo M, Jamal AJ, Rathod B, Wang JH, et al. Стойкость ответов антител сыворотки и слюны на спайк-антигены SARS-Cov-2 у пациентов с COVID-19. Sci Immunol (2020) 5(52):eabe5511.doi: 10.1126/sciimmunol.abe5511

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

19. Heaney CD, Pisanic N, Randad PR, Kruczynski K, Howard T, Zhu X, et al. Сравнительная эффективность мультиплексных анализов слюны и коммерчески доступных серологических анализов для обнаружения SARS-Cov-2 Igg и титров нейтрализации. J Clin Virol (2021) 145:104997. doi: 10.1016/j.jcv.2021.104997

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

20. Jordan I, de Sevilla MF, Fumado V, Bassat Q, Bonet-Carne E, Fortuny C, et al.Передача инфекции SARS-Cov-2 среди детей в летних школах с применением строгих мер контроля в Барселоне, Испания. Clin Infect Dis (2021) 74(1):66–73. doi: 10.1093/cid/ciab227

Полный текст CrossRef | Google Scholar

21. Добаньо С., Алонсо С., Фернандес де Севилья М., Видаль М., Хименес А., Понс Томас Г. и др. Показатели конверсии антител к SARS-Cov-2 в слюне детей, посещающих летние школы в Барселоне, Испания. BMC Med (2021) 19(1):309.doi: 10.1186/s12916-021-02184-1

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

22. Нишанян П., Азиз Н., Чанг Дж., Детелс Р., Фэйи Дж.Л. Пероральные жидкости как альтернатива сыворотке для измерения маркеров иммунной активации. Clin Diagn Lab Immunol (1998) 5(4):507–12. doi: 10.1128/CDLI.5.4.507-512.1998

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

24. Добаньо С., Видаль М., Сантано Р., Хименес А., Чи Дж., Барриос Д. и др. Высокочувствительные и специфичные мультиплексные анализы антител для количественного определения иммуноглобулинов M, a и G против антигенов SARS-Cov-2. J Clin Microbiol (2020) 59(2):e01731–20. doi: 10.1128/JCM.01731-20

CrossRef Полный текст | Google Scholar

25. Добаньо С., Сантано Р., Хименес А., Видал М., Чи Дж., Родриго Мелеро Н. и др. Иммуногенность и перекрестная реактивность антител к нуклеокапсидному белку SARS-Cov-2: полезность и ограничения в исследованиях серопревалентности и иммунитета. Перевод Res (2021), S1931–5244 (21) 00029-3. doi: 10.1016/j.trsl.2021.02.006

CrossRef Полный текст | Академия Google

27.Гриффин С.М., Чен И.М., Фут Г.С., Уэйд Т.Дж., Егоров А.И. Разработка мультиплексного иммуноанализа микросфер для количественного определения иммунного ответа слюны на отдельные патогены, передающиеся через воду. J Immunol Methods (2011) 364(1–2):83–93. doi: 10.1016/j.jim.2010.11.005

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

28. Wade TJ, Griffin SM, Egorov AI, Sams E, Hudgens E, Augustine S, et al. Применение мультиплексного иммуноанализа слюны для выявления спорадических норовирусных инфекций. Научный представитель (2019) 9(1):19576. doi: 10.1038/s41598-019-56040-7

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

29. Faustini SE, Jossi SE, Perez-Toledo M, Shields A, Allen JD, Watanabe Y, et al. Обнаружение антител к гликопротеину шипа SARS-Cov-2 как в сыворотке, так и в слюне улучшает обнаружение инфекции. MedRxiv (2020). doi: 10.1101/2020.06.16.20133025

CrossRef Полный текст | Google Scholar

30. Овед К., Олмер Л., Шемер-Авни Ю., Вольф Т., Супино-Росин Л., Прайгрод Г. и др.Многоцентровое общенациональное сравнение семи серологических анализов выявило серонегативную субпопуляцию, не отвечающую на SARS-Cov-2. EClinicalMedicine-The Lancet (2020), 29:100651. doi: 10.1016/j.eclinm.2020.100651

CrossRef Полный текст | Google Scholar

31. Вайс А.Дж., Коэн Б.Дж., Рамзи М.Е. Сравнение устройств для сбора пероральной жидкости для использования в эпиднадзоре за вирусными заболеваниями у детей. Общественное здравоохранение (2001) 115(3):201–7. doi: 10.1016/S0033-3506(01)00444-9

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

32.Nokes DJ, Enquselassie F, Vyse A, Nigatu W, Cutts FT, Brown DW. Оценка устройств для сбора ротовой жидкости для определения статуса антител к краснухе в сельской общине Эфиопии. Trans R Soc Trop Med Hyg (1998) 92(6):679–85. doi: 10.1016/S0035-9203(98)-2

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

33. Tosif S, Neeland MR, Sutton P, Licciardi PV, Sarkar S, Selva KJ, et al. Иммунный ответ на SARS-Cov-2 у трех детей родителей с симптомами COVID-19. Нацкоммуна (2020) 11(1):5703. doi: 10.1038/s41467-020-19545-8

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

34. Cervia C, Nilsson J, Zurbuchen Y, Valaperti A, Schreiner J, Wolfensberger A, et al. Системные и слизистые реакции антител, характерные для SARS-Cov-2, при легкой и тяжелой формах COVID-19. J Allergy Clin Immunol (2021) 147(2):545–57. doi: 10.1016/j.jaci.2020.10.040

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

35.Беккер М., Дулович А., Юнкер Д., Руэтало Н., Кайзер П.Д., Пинилла Ю.Т. и др. Иммунный ответ на вызывающие беспокойство варианты SARS-Cov-2 у вакцинированных лиц. Нацкоммуна (2021) 12(1):3109. doi: 10.1038/s41467-021-23473-6

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

36. Silva J, Lucas C, Sundaram M, Israelow B, Wong P, Klein J, et al. Вирусная нагрузка слюны является динамическим объединяющим коррелятом тяжести и смертности от COVID-19. MedRxiv (2021). дои: 10.1101/2021.01.04.21249236

CrossRef Полный текст | Google Scholar

37. Zeng F, Dai C, Cai P, Wang J, Xu L, Li J и др. Сравнительное исследование антител Igg к SARS-Cov-2 у пациентов мужского и женского пола с COVID-19: возможная причина, лежащая в основе различий между полами. MedRxiv (2020). doi: 10.1101/2020.03.26.20040709

CrossRef Полный текст | Google Scholar

38. Стерлин Д., Матиан А., Мияра М., Мор А., Анна Ф., Клаер Л. и др. Iga доминирует в раннем ответе нейтрализующих антител на SARS-Cov-2. Sci Transl Med (2021) 13(577):eabd2223. doi: 10.1126/scitranslmed.abd2223

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

39. Zeng W, Ma H, Ding C, Yang Y, Sun Y, Huang X и другие. Характеристика SARS-Cov-2-специфических антител у пациентов с COVID-19 выявила сильнодействующий нейтрализующий Iga. Природа (2021) 6(1):35. doi: 10.1038/s41392-021-00478-7

CrossRef Full Text | Google Scholar

40. Alkharaan H, Bayati S, Hellström C, Aleman S, Olsson A, Lindahl K, et al.Сохранение Igg слюны против SARS-Cov-2 через 9 месяцев после легкой формы COVID-19: дополнительный подход к опросам населения. J Infect Dis (2021) 224(3):407–14. doi: 10.1093/infdis/jiab256

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

41. Pinilla YT, Heinzel C, Caminada L-F, Consolaro D, Esen M, Kremsner PG, et al. Антитела к SARS-Cov-2 сохраняются в слюне более 15 месяцев после заражения и резко увеличиваются после вакцинации. Фронт Иммунол (2021) 12:5146.doi: 10.3389/fimmu.2021.798859

CrossRef Full Text | Google Scholar

42. Ketas TJ, Chaturbhuj D, Cruz-Portillo VM, Francomano E, Golden E, Chandrasekhar S, et al. Реакция антител на вакцины против мРНК SARS-Cov-2 обнаруживается в слюне. BioRxiv (2021). doi: 10.1101/2021.03.11.434841

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

43. Sano K, Bhavsar D, Singh G, Floda D, Srivastava K, Gleason C, et al. Эффективный ответ слизистых оболочек антителами на вакцинацию против SARS-Cov-2 индуцируется у ранее инфицированных людей. MedRxiv (2021). doi: 10.1101/2021.12.06.21267352

CrossRef Полный текст | Google Scholar

Анализ крови на антитела к Chlamydia Trachomatis IgG, IgA, IgM

Анализ крови на антитела к Chlamydia Trachomatis IgG, IgA, IgM Национальный лидер в области доступных лабораторных испытаний непосредственно для потребителей

  • Шаг 1
    Заказ

    Ваши тесты
  • Шаг 2
    Отправляйтесь в

    Лабораторию
  • Шаг 3
    Получите результат

  • Шаг 1

    Заказать
    Ваши тесты

  • Шаг 2

    Отправляйтесь в
    Лабораторию

  • Шаг 3

    Получите результаты

Этот тест недоступен в LabCorp


Примечание. Время обработки результатов является приблизительным и не гарантируется.Нашей референс-лаборатории может потребоваться дополнительное время из-за погодных условий, праздников, подтверждения/повторного тестирования или технического обслуживания оборудования.

Категории:


Анализ крови на антитела к хламидиозу


Код теста: 36581

Тип образца: Кровь

Описание:

Анализ крови на антитела к хламидии трахоматис IgG, IgA, IgM

Этот тест ищет несколько типов антител к Chlamydia Trachomattis в крови.Chlamydia Trachomattis, более известная как Chlamydia , представляет собой распространенную бактериальную инфекцию , которая в основном распространяется половым путем. Многие генитальные хламидийные инфекции протекают бессимптомно. Некоторые люди испытывают жжение во время мочеиспускания, ненормальные выделения, зуд, раздражение или боль в области гениталий, но эти симптомы могут проявиться только через несколько недель после первоначального воздействия. Если не лечить, хламидиоз может привести к более серьезным осложнениям со здоровьем, включая воспалительные заболевания органов малого таза (ВЗОМТ), бесплодие и повышенную восприимчивость к другим инфекциям, включая ВИЧ.

Анализ крови на хламидиоз обычно не назначают, но в некоторых случаях он может быть полезен. Хотя хламидиоз не передается через кровь, иммунная система организма вырабатывает антитела в ответ на инфекцию, и эти антитела можно обнаружить в крови. Этот тест ищет 3 типа антител: IgM, IgA и IgG.

  • Антитела IgM: Они обычно появляются вскоре после заражения и со временем исчезают. Наличие антител IgM может указывать на недавнюю инфекцию, но не является надежным индикатором для постановки диагноза.Положительные результаты должны быть подтверждены другим методом тестирования.
  • Антитела IgA: Они обычно находятся на самом высоком уровне во время активной инфекции. Не у всех разовьются обнаруживаемые уровни антител IgA, поэтому отрицательные результаты не являются окончательным доказательством отсутствия инфекции.
  • Антитела IgG: Эти антитела начинают вырабатываться примерно в то же время, когда снижается уровень антител IgM. Антитела IgG часто остаются обнаруживаемыми даже после успешного лечения.Наличие этих антител может указывать на то, что человек болел хламидиозом в прошлом, но не может определить, есть ли он у него в настоящее время.

Хотя анализ крови на хламидиоз обычно не используется для диагностики инфекции, этот тип теста может быть полезен для подтверждения инфекции у тех, у кого есть симптомы, но есть неубедительные результаты более распространенных методов тестирования, таких как анализ мочи на генитальный хламидиоз. Его также можно использовать для определения причины таких состояний, как ВЗОМТ или проблемы с фертильностью, которые могут возникнуть в результате хронических хламидийных инфекций.

Срок выполнения этого теста обычно составляет 2–4 рабочих дня.

Примечание. Время обработки результатов является приблизительным и не гарантируется. Нашей референс-лаборатории может потребоваться дополнительное время из-за погодных условий, праздников, подтверждения/повторного тестирования или технического обслуживания оборудования.

Обзор хламидиоза

Категории:


Этот тест недоступен
в ЛабКорп

Анализ крови на антитела к хламидиозу

Код теста: 36581

Тип образца: Кровь

Описание:

Анализ крови на антитела к хламидии трахоматис IgG, IgA, IgM

Этот тест ищет несколько типов антител к Chlamydia Trachomattis в крови.Chlamydia Trachomattis, более известная как Chlamydia , представляет собой распространенную бактериальную инфекцию , которая в основном распространяется половым путем. Многие генитальные хламидийные инфекции протекают бессимптомно. Некоторые люди испытывают жжение во время мочеиспускания, ненормальные выделения, зуд, раздражение или боль в области гениталий, но эти симптомы могут проявиться только через несколько недель после первоначального воздействия. Если не лечить, хламидиоз может привести к более серьезным осложнениям со здоровьем, включая воспалительные заболевания органов малого таза (ВЗОМТ), бесплодие и повышенную восприимчивость к другим инфекциям, включая ВИЧ.

Анализ крови на хламидиоз обычно не назначают, но в некоторых случаях он может быть полезен. Хотя хламидиоз не передается через кровь, иммунная система организма вырабатывает антитела в ответ на инфекцию, и эти антитела можно обнаружить в крови. Этот тест ищет 3 типа антител: IgM, IgA и IgG.

  • Антитела IgM: Они обычно появляются вскоре после заражения и со временем исчезают. Наличие антител IgM может указывать на недавнюю инфекцию, но не является надежным индикатором для постановки диагноза.Положительные результаты должны быть подтверждены другим методом тестирования.
  • Антитела IgA: Они обычно находятся на самом высоком уровне во время активной инфекции. Не у всех разовьются обнаруживаемые уровни антител IgA, поэтому отрицательные результаты не являются окончательным доказательством отсутствия инфекции.
  • Антитела IgG: Эти антитела начинают вырабатываться примерно в то же время, когда снижается уровень антител IgM. Антитела IgG часто остаются обнаруживаемыми даже после успешного лечения.Наличие этих антител может указывать на то, что человек болел хламидиозом в прошлом, но не может определить, есть ли он у него в настоящее время.

Хотя анализ крови на хламидиоз обычно не используется для диагностики инфекции, этот тип теста может быть полезен для подтверждения инфекции у тех, у кого есть симптомы, но есть неубедительные результаты более распространенных методов тестирования, таких как анализ мочи на генитальный хламидиоз. Его также можно использовать для определения причины таких состояний, как ВЗОМТ или проблемы с фертильностью, которые могут возникнуть в результате хронических хламидийных инфекций.

Срок выполнения этого теста обычно составляет 2–4 рабочих дня.

Примечание. Время обработки результатов является приблизительным и не гарантируется.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.