Исследование кала на простейшие: Исследование кала на простейшие и яйца гельминтов методом обогащения (PARASEP)

Содержание

Исследование кала на простейшие (в кале) 

ОписаниеПодготовкаПоказанияИнтерпретация результатов

Исследование кала на простейшие – микроскопическое исследование, целью которого является обнаружение паразитов, которые инфицируют нижние отделы желудочно-кишечного тракта и могут быть обнаружены в стуле у больных.

Существует большое количество простейших, которые способны инфицировать человека, каждый из них имеет свой процесс созревания и жизненный цикл. Некоторые простейшие проводят часть жизни в организме промежуточного хозяева (например, овцы, улитки), прежде чем заразить человека. Большая часть паразитов проходит несколько стадий развития, а также зрелые формы и цисты. Инфицирование происходит через воду или пищу, которая содержит цисты простейших. Особенную опасность паразиты представляют для пожилых людей, пациентов с иммунодефицитными состояниями (например, пациенты с ВИЧ), детей. У таких больных простейшие могут вызвать серьезные клинические проявления, а также высока вероятность развития осложнений.

Сдать анализ кала на простейшие следует людям, которые часто путешествуют в другие страны (особенно в те страны, где вода очищается недостаточно, страны с теплым климатом), так как они входят в группу риска.

Для анализа на простейшие на предметное стекло забирается тонкий мазок кала, этот образец окрашивается. После этого простейшие или их цисты могут быть обнаружены под микроскопом. Вместе с анализом кала на простейшие могут использоваться серологические методы исследования, а также исследование кала на яйца гельминтов. Это позволит провести дифференциальную диагностику и поставить точный диагноз. Серологические методы позволяют выявить антигены паразитов, даже если в анализе кала на простейшие они не выявляются. Однако, они не способны заменить микроскопию кала, так как данное исследование выявляет большее число паразитов.

Наиболее часто в анализе кала на простейшие встречаются:

  • Entamoeba Histolytica. Вызывает заболевание амебиаз. Микроорганизм встречается в двух формах: тканевая форма (вызывает изъязвления стенок толстой кишки, характерна для острого заболевания) и просветная форма (выявляется в период реконвалесценции, у пациентов с хронической формой заболевания и у носителей)
  • Lamblia intestinalis. Паразитируют в тонкой кишке, желчевыводящих путях, желчном пузыре.
  • Balantidium coli. Паразитирует в кишечнике, вызывает различные по тяжести поражения кишечника.

Сдать анализ кала на простейшие следует в отдельный одноразовый контейнер, на котором следует указать ФИО, дату рождения, а также дату и время сбора биоматериала. Во время сбора необходимо избегать попадания различных примесей в кал (лекарственные вещества, моча, отделяемое половых органов и др.).

Сдать анализ кала на простейшие следует при подозрении на инфицирование, контроль лечения, а также в качестве «барьерного анализа» (при госпитализации или оформлении медицинской книжки)

Обнаружение простейших или их цист в образце кала является признаком инвазии, что подтверждает диагноз.

Если в исследовании кала на простейшие результат отрицательные, то это не всегда означает отсутствие их в организме, поэтому для полной уверенности тест рекомендуется повторить спустя 3-7 дней.

Исследование кала на простейшие со скидкой до 50%

Интерпретация результатов анализов носит информационный характер, не является диагнозом и не заменяет консультации врача. Референсные значения могут отличаться от указанных в зависимости от используемого оборудования, актуальные значения будут указаны на бланке результатов.

Микроскопическое исследование препаратов проводят после обогащения. При этом наиболее часто обнаруживают следующие цисты простейших:

  • Условно патогенных кишечных простейших: Trichomonas hominis, Lamblia intestinalis, Dientamoeba fragilis, Chilomastix mesnili.
  • Саркодовых: Entamoeba coli, Entamoeba hartmani, Entamoeba histolytica,Blastocistis hominis , Endolimax nana, Iodamoeba buetschlii.
  • Реснитчатых: Balantidium coli.
  • Споровиков – кокцидий: Cryptosporidium spp, Isospora belli, Isospora natalensis.

При отрицательном результате исследования в ответе указывается: «цисты простейших не обнаружены». При положительном результате исследования в ответе указывается, например: «обнаружены цисты Entamoeba histolytica».

Единица измерения: тест качественный

Референсные значения: не обнаружены

Лабораторные исследование и диагностика, цены на услуги

Анализ кала на яйца гельминтов – это микроскопическое исследование, используемое для обнаружения паразитов, инфицировавших нижние отделы пищеварительного тракта, откуда они и попадают в стул.


На предметном стекле делается тонкий мазок кала, который затем окрашивается, после чего паразиты и/или их яйца могут быть обнаружены и определены под микроскопом квалифицированным лаборантом.
Существует множество паразитов, способных инфицировать человека. Каждый тип имеет специфический жизненный цикл, процесс созревания и может жить как в одном, так и в большем количестве хозяев. Некоторые, прежде чем инфицировать человека, проводят часть жизни в промежуточных хозяевах, таких как овцы, коровы, улитки. Большинство имеют более одной формы развития, у некоторых есть личиночная фаза, которая является промежуточной между яйцом и зрелой формой. Яйца некоторое время могут существовать в окружающей среде вне хозяина и сохранять способность к инфицированию.

Большинство людей заражается через пищу. Яйца и паразиты выделяются со стулом инфицированного человека или животного и могут затем попасть в воду или продукты.
Паразитарная инфекция особенно опасна для определенных групп людей: детей, пожилых, пациентов с ослабленной иммунной системой, например, ВИЧ-инфицированных.

У них заражение паразитами может приводить к серьезным осложнениям.

Самые частые признаки паразитарной инфекции: продолжительная диарея, кровь и слизь в стуле, боль в животе и тошнота. У некоторых возникают головные боли и лихорадка, у других симптомов может быть мало или они вообще могут отсутствовать. Диарея продолжительностью дольше нескольких дней грозит потерей веса, обезвоживанием и дисбалансом электролитов.
Особенно велика вероятность заражения у тех, кто путешествует в развивающиеся страны, где теплый климат и система очистки питьевой воды неэффективна. Глистов, способных поразить пищеварительный тракт и другие части тела, очень много: анкилостомы, трематоды, аскариды, лентецы, острицы, трихинеллы, кошачьи сосальщики – лишь некоторые из них. Туристы обычно инфицируются через употребление пищи, содержащей яйца паразитов, но некоторые паразиты могут проникать через кожу, например через ступни, когда человек ходит босиком.

Используется анализ:

  • Для выяснения причины продолжительной диареи – чтобы определить, есть ли паразиты в нижних отделах пищеварительного тракта, и, если есть, идентифицировать их. Поскольку существует много других причин диареи, данный анализ часто назначается вместе с другими тестами, такими как посев кала, который позволяет обнаружить болезнетворные бактерии в стуле.
  • Для контроля эффективности антипаразитарной терапии.


Назначается анализ:

  • Если человек недавно употребил ручьевую или озерную воду, контактировал с тем, кто инфицирован паразитами, выезжал в развивающиеся страны.
  • В случае диагностированной паразитарной инфекции – для контроля за эффективностью лечения.
  • При подозрении, что человек принял загрязненную воду или пищу, о чём свидетельствуют такие симптомы, как:
  • продолжительная диарея;
  • боль в животе,
  • тошнота, рвота,
  • кровь, слизь в стуле.

Не требует подготовки. Исключить примесь мочи и отделяемого половых органов.

ИДЦ — Иркутский диагностический центр

Исследование кала на простейшие (качественный) 2Ж4002

Продолжительность: Готовность результатов: на следующий рабочий день, после 13:00

В большой группе паразитарных болезней, вызываемых возбудителями животного происхождения, важное место принадлежит заболеваниям, вызванным простейшими. Простейшие являются одноклеточными организмами. Не смотря на это, они существенно отличаются от других микроорганизмов (вирусов, бактерий) сложностью своей организации, в том числе сложностью своей антигенной структуры, способной вызывать серьезные нарушения в организме человека. Как правило, заболевания, вызванные простейшими, при отсутствии своевременной диагностики и лечения приобретают длительное, хроническое течение. Лямблиоз (инфекционное поражение двенадцатиперстной кишки, вызываемое лямблиями) распространен практически повсеместно. Лямблиоз также часто встречается среди людей со сниженным иммунитетом и может служить основной причиной кишечной патологии у этой группы лиц. Среди взрослых людей лямблиоз часто встречается у родителей инфицированных детей. Более чем у 65% инфицированных лиц лямблиоз может протекать бессимптомно. Современный подход к лаборатоной диагностике лямблиоза. Клинически выделяют две основные формы лямблиоза: первичная инвазия (острый лямблиоз) и затяжное рецидивирующее течение (хронический лямблиоз). В период острого лямблиоза специфическая диагностика, как правило, не проводится. В связи с выраженным преобладанием кишечных симптомов, больному выставляется диагноз «кишечная инфекция неясной этиологии», хотя заболевание на этой стадии легко поддается лечению. Острый период длится несколько дней. При отсутствии лечения он чаще всего переходит в хроническую стадию, которая протекает бессимптомно (у 25-28% больных), субклинически (49%) или клинически выраженно (13-43%). Для выраженной клинической картины характерны: полисимптоматика со стороны кожи, синдром раздраженной кишки, аллергия, вовлечение в патологический процесс нервной и сердечно-сосудистой системы.

В связи с возможным разнообразием клинических проявлений хронической стадии, часто диагноз лямблиоза оказывается последним в цепи дифференциально-диагностического мышления врача. Несмотря на широкое распространение в последнее время иммунологической диагностики, исследование проб фекалий является обязательным для окончательного подтверждения диагноза и назначения лечения. По данным исследований известно, что только у 4.7% больных лямблиозом цисты лямблий с фекалиями выделяются непрерывно. У подавляющего большинства больных (95.3%) имеет место волнообразное выделение цист с перерывами от нескольких дней до двух недель. Именно поэтому нельзя ограничиваться однократным исследованием материала, но, как правило, именно это и останавливает пациентов, которые не хотят целенаправленно и многократно собирать анализы и доставлять их в лабораторию. Для удобства пациентов и, в первую очередь, для повышения эффективности диагностики в Институте медицинской паразитологии и тропической медицины им. Е.И.Марциновского разработана специальная система диагностики кишечных паразитозов — КТ-ФЭО-МЦН (консервант Турдыева (КТ) — формалин-эфирное обогащение-модификация Циля-Нильсена). Сущность его заключается в следующем: фекалии трехкратно собирают в один и тот же контейнер с 5-6 мл КТ. Сбор проводится в течение трех дней, после чего материал доставляется в лабораторию. Метод доступен, экономичен и информативен, так как позволяет выявить в единой пробе трофозоиты, цисты, ооцисты простейших, яйца и личинки гельминтов. Поэтому этот метод одинаково хорошо может быть использован как для диагностики лямблиоза, так и для диагностики других кишечных паразитозов. В консерванте Турдыева трофозиты и цисты простейших сохраняют свой характерный вид. Обогащение формалин-эфирным методом позволяет выявить паразитов даже при незначительном их содержании в фекалиях. Для диагностик лямблиоза предварительно рекомендуется назначить по схеме употребление отвара кукурузных рылец, который обладает желчегонным действием. Желчь губительна для лямблий, поэтому создаются условия для их инцеститрования и, следовательно, для выделения с фекалиями. Схема сбора анализа. Отвар кукурузных рылец употребляется перед исследованием: в течение 2 дней (при нормальном стуле) или в течение 3 дней (если имеется склонность к запорам) по рекомендации указанной на упаковке. После этого пациент трехкратно собирает кал в контейнер с консервантом: на 3-4-5день (при нормальном стуле) или на 4-5-6 день (при склонности к запорам). Рекомендуемый объем фекалий с каждого стула – горошина. При добавлении в контейнер очередной порции, фекалии нужно тщательно перемешать с консервантом стеклянной палочкой. Амебиаз. Имеется 7 видов амеб, которые в естественных условиях паразитируют в ротовой полости и в кишечнике у человека; однако только дизентерийная амеба является патогенной. Амебиаз – это инфекционное поражение толстой кишки, вызываемое дизентерийной амебой. Протекая у большинства лиц в виде бессимптомного носительства, амебиаз иногда вызывает различные заболевания – от хронических легких форм диареи до тяжелых случаев дизентерии (у лиц с нарушенным иммунитетом). К внекишечным осложнениям инфекции чаще всего относится абсцесс печени, который может прорваться в брюшную, плевральную полость, в легкое или в околосердечную сумку. Балантидиаз. Балантидий — самый крупный паразит человека из группы простейших. Обитает в толстой кишке. Наряду со случаями бессимптомного носительства он вызывает зболевания от меренной рецидивирющей диареи, до молниеносного изъязвления и перфорации кишечника, приводящих к смерти больного. За исключением поражения печени, это заболевание во многом похоже на амебиаз по своим клиническим проявлениям

Подготовка

Для сдачи биоматериала обратиться в регистратуру клинико-диагностической лаборатории на 2 этаже. Правила сбора биоматериала (кал). Биоматериал собирается утром, в день доставки в лабораторию. Объем необходимый для исследования 2-5 см3. Контейнер для сбора кала выдается в регистратуре 2 этажа по предъявлении маршрутного листа. Можно использовать одноразовую пластиковую емкость с плотно закрывающейся крышкой объемом 50-100 мл. При сдаче материала крышку с банки не снимать! Кал, доставленный в лабораторию в любых иных приспособленных емкостях исследованию не подлежит. Хранение. Если пациент не может собрать кал утром, можно сделать это раньше. При этом собранный образец нужно хранить в холодильнике в течение не более 8 часов при температуре +3+8С, не допуская замораживания. Противопоказания. После клизм, рентгенологического исследования желудка и кишечника и колоноскопии, кал можно исследовать не ранее, чем через 2 дня. Перед исследованием кала нужно отменить следующие препараты: слабительные, активированный уголь, препараты висмута, железа и препараты, вводимые в ректальных свечах, приготовленных на жировой основе. ВНИМАНИЕ! Для детализации диагноза могут потребоваться дополнительные методы исследований. Пожалуйста, обратитесь к лечащему врачу. 

Анализ кала на яйца гельминтов и цисты простейших

Анализ кала на яйца гельминтов (глистов) — тест, позволяющий выявить в кале яйца червей, паразитирующих в организме человека. При заражении яйцами (личинками) глистов развиваются гельминтозы — специфические заболевания, чаще всего выражающиеся в нарушении обмена веществ, нервно-психического статуса, повреждении кишечной стенки, анемии, аллергических реакциях, снижении иммунитета. Чаще всего причиной гельминтозов становятся круглые (острицы) и плоские черви.
Тест дает возможность выявить наиболее распространенные гельминтозы (например, некаториоз, аскаридоз). В ходе исследования выявляются яйца паразитов. Существует большое количество паразитических червей, которые могут инфицировать человека и становятся причиной проблем со здоровьем. Каждый вид гельминтов характеризуется различным жизненным циклом и процессом созревания. Некоторые из них способны существовать в различных хозяевах. Ряд паразитов могут инфицировать человека только после развития до определенной формы в промежуточных хозяевах (например, в сельскохозяйственных животных). Яйца паразитов ряда видов могут сохранять способность к инфицированию в течение определенного времени, находясь вне своего хозяина.

Чаще всего заражение происходит при употреблении продуктов, которые плохо вымыты или не прошли достаточную термическую обработку. Сами гельминты или их яйца выделяются с калом инфицированных людей и животных, могут попадать в почву, загрязнять воду.
Инфицирование паразитами представляет повышенную опасность для лиц ряда категорий. В частности, они опасны для пожилых людей, детей, лиц со значительно ослабленным иммунитетом, в том числе, для ВИЧ-инфицированных. Заражение гельминтами у таких людей может стать причиной развития серьезных осложнений.

Наиболее распространенными симптомами инфицирования паразитами являются длительная диарея, болевые ощущения в животе, тошнота. Возможно появление в кале слизи и крови. Инвазия паразитами также может сопровождаться лихорадкой, головными болями. Иногда симптомы выражены слабо либо полностью отсутствуют. Если диарея продолжается несколько дней, возможно обезвоживание, потеря веса, нарушение баланса электролитов.
Риск инфицирования паразитами повышен у путешественников, бывающих в развивающихся странах с теплым климатом. Как правило, в таких странах паразитами заражена большая часть населения, система водоочистки малоэффективна или полностью отсутствует, что способствует дальнейшему распространению гельминтов. Паразиты, определяемые в ходе исследования, составляют только небольшую часть всего разнообразия гельминтов, способных паразитировать в человеческом организме. Чаше всего инфицирование происходит при употреблении зараженной воды или пищи. Некоторые виды паразитов способны проникать в организм через кожу. Ими можно заразиться, если ходить босиком.

Анализ кала на яйца гельминтов назначается, чтобы выявить причину диареи, которая не прекращается долгое время. У нее могут быть различные причины, а не только заражение паразитами. Поэтому тест назначается в комплексе с другими анализами. На основании результатов обследования ставится точный диагноз и подбирается эффективное лечение. Также результаты теста позволяют оценить эффективность антипаразитарной терапии. Если в ходе теста паразиты не обнаружены, причина диареи в чем-то другом. В некоторых случаях тест не выявляет гельминтов, так как они или их яйца отсутствуют во взятой пробе, но имеются в организме. Поэтому для подтверждения результатов теста может потребоваться его повторное проведение.
Инвазия несколькими видами паразитов встречается редко, чаще всего выявляется только один вид паразитических червей. Методика лечения и его длительность напрямую зависят от вида паразитов, их количества.

Исследования кала — копрограмма, анализ на скрытую кровь, анализ на гельминтов. Где сделать платный срочный анализ кала в Москве?

Исследования кала

Исследования кала проводятся для выявления патологий желудочно-кишечного тракта. Общеклиническое исследование кала (копрологическое исследование или копрограмма) позволяет оценить способность органов ЖКТ переваривать пищу. В результате копрологического исследования могут быть обнаружены признаки нарушения функции печени, поджелудочной железы, тонкого кишечника и т. д. Другие виды исследований кала позволяют обнаружить паразитов. Востребованным видом исследования является анализ на скрытую кровь. Наличие скрытой крови в кале может указывать на желудочное или кишечное кровотечение.

Кал собирается в чистую и сухую посуду. Женщинам во время месячных сдавать анализ не рекомендуется. Кал должен быть получен без применения слабительных средств или клизмы, путем естественной дефекации. Иногда врач может назначить специальную диету, содержащую определенное содержание белков, жиров и углеводов, которой надо придерживаться в течение нескольких дней до сдачи анализа. При анализе на скрытую кровь за 3 дня до сдачи анализа следует исключить из диеты продукты, которые могут обусловить ложноположительный результат; это – мясо, рыба, зеленые овощи, помидоры, яйца. Если Вы принимаете какие-либо лекарственные препараты, сообщите об этом врачу, – возможно, Вам придется на время прекратить их приём или отложить сдачу анализа.

Сдать кал на исследование в Москве Вы можете в любой из поликлиник «Семейного доктора». Сделать срочный анализ кала (в режиме CITO) в Поликлинике № 15 (ст.м. Бауманская). Ниже указаны цены на исследования кала, выполняемые в собственной лаборатории «Семейного доктора».  

Есть вопросы?

Оставьте телефон –
и мы Вам перезвоним

Уважаемые пациенты!
Обращаем ваше внимание, что указанные цены не являются окончательной стоимостью приёма.
Если манипуляция оказывается на приёме врача, то к стоимости манипуляции добавляется стоимость приёма (соответственно, стоимость приёма увеличивается на стоимость выполненных манипуляций).

Анализ кала на яица гельминтов

Гельминты (глисты) – это паразитические черви, вызывающие гельминтоз. В большинстве случаев у людей выявляются круглые и плоские черты следующих классов: Nematoda, Cestoidea, Trematoda. Анализ кала на яйца гельминтов требуется для диагностирования гельминтоза. Обследование выявляет наличие или отсутствие в организме тех паразитов, которые встречаются чаще всего.

Показания к проведению анализа на яйца гельминтов

Обследование рекомендуется проводить регулярно. Оптимально – раз в год. Показания:

  • взаимодействие с небольшим количеством людей;

  • несоблюдение гигиены по вынужденным причинам;

  • включение в рацион речной рыбы или мяса без специальной обработки;

  • постоянный контакт с животными, птицами, задействованными в сельском хозяйстве, а также с собаками.

Обязательным становится анализ кала на простейшие и яйца гельминтов для получения медицинской справки, при посещении образовательных заведений или трудоустройстве, проведении медицинских осмотров.

Подготовка

Перед исследованием проводят подготовку. Для этого исключают прием слабительных препаратов, использование ректальных свечей, отказываются от препаратов, влияющих на ЖКТ. Это обязательно — до 72 часов до обследования.

За пару дней до анализа меняют рацион и отказываются от следующих продуктов:

  • печени;

  • грибов;

  • отрубей, злаков;

  • маринадов и консервация;

  • газированных напитков;

  • фруктов, ягод и овощей в свежем виде.

Такой подход предотвратит нежелательное влияние на ЖКТ, что позволит получить более достоверные результаты.

Как сдавать материал для исследования?

Важно учитывать, как сдавать анализ кала на яйца гельминтов.

  1. Для этого необходимо использовать одноразовый контейнер с закрывающейся крышкой и стерильной ложкой. Для анализа потребуется одна треть объема контейнера (не более).

  2. Запрещено отбирать материал для исследования из унитаза. Акт дефекации необходимо совершать на чистый лист бумаги, причем моча не должна попасть в массы.

  3. Обязательно нужно применять одноразовые стерильные перчатки для правильного сбора материалов.

  4. Полученный биоматериал хранят в холодильнике при температуре 4-8 градусов.

Где в Ростове сделать анализ на яйца гельминтов?

Анализ кала на яйца гельминтов в Ростове-на-Дону можно сдать в медицинском центре «ДА ВИНЧИ». Наши сотрудники соблюдают действующие стандарты диагностики, используют современное оборудование, что гарантирует эффективность исследования. К тому же цена анализа кала на яйца гельминтов будет оптимальной. Звоните по указанным телефонам, если необходима дополнительная информация.

  • Наименование услуги

    Цена
  • Анализ кала на яйца гельминтов

    300 pуб.

Отзывы об услуге

Лабораторные исследования, визуализирующие исследования, другие тесты

  • Matthys B, Bobieva M, Karimova G, Mengliboeva Z, Jean-Richard V, Hoimnazarova M, et al. Распространенность и факторы риска гельминтозов и кишечных протозойных инфекций среди детей начальных классов западного Таджикистана. Векторы-паразиты . 2011 7 окт. 4:195. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

  • Алюсефи Н.А., Махди М.А., Махмуд Р., Лим Ю.А. Факторы, связанные с высокой распространенностью кишечных протозойных инфекций среди пациентов в городе Сана, Йемен. PLoS Один . 2011. 6(7):e22044. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

  • Sargeaunt PG, Jackson TFGH, Simjee AE. Биохимическая однородность изолятов Entamoeba histolytica, особенно из абсцесса печени. Ланцет . 1982. 1:1386-8. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Карранса П.Г., Лухан ХД. Новое понимание биологии Giardia lamblia. Микробы заражают . 20 сентября 2009 г. [Ссылка на MEDLINE QxMD].

  • Мюллер Н., фон Аллмен Н.Недавние сведения о реакциях слизистых оболочек, связанных с инфекциями Giardia lamblia. Int J Parasitol . ноябрь 2005 г. 35:1339-47. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Каранис П., Куренти С., Смит Х. Передача простейших паразитов через воду: всемирный обзор вспышек и извлеченных уроков. J Здоровье воды . март 2007 г. 5:1-38. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Хантер Пр., Томпсон Р.Ц. Зоонозная передача Giardia и Cryptosporidium. Int j Parasitol . Октябрь 2005 г. 35:1181-90. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Хуан П., Вебер Дж. Т., Сосин Д. М. и др. Первая зарегистрированная вспышка диарейного заболевания, связанного с Cyclospora, в США. Энн Интерн Мед . 1995, 15 сентября. 123(6):409-14. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Кашьяп Б., Синха С., Дас С., Рустаги Н., Джамб Р. Эффективность диагностических методов для корреляции между распространенностью кишечных простейших паразитов и статусом ВИЧ / СПИДа — опыт больницы третичного уровня в Восточном Дели. J Паразит Дис . 2010 34 октября (2): 63-7. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

  • Ванденберг О. , Пик Р., Суайя Х. и др. Клинические и микробиологические особенности диентамебиаза у пациентов с подозрением на паразитарное заболевание желудочно-кишечного тракта: сравнение инфекций Dientamoeba fragilis и Giardia lamblia. Int J Infect Dis . 2006 май. 10(3):255-61. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Грачик Т.К., Шифф К.К., Таманг Л. и др. Ассоциация Blastocystis hominis и Endolimax nana с диарейным стулом у детей школьного возраста в Замбии. Паразитол Рез . 2005 г., декабрь 98 (1): 38–43. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Эртуг С., Каракас С., Окяй П., Эргин Ф., Онку С. Влияние Blastocystis hominis на рост детей. Med Sci Monit .Январь 2007 г. 13:CR40-3. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Лоуренс Д.Н., Нил Дж.В., Абади С.Х. и др. Эпидемиологические исследования среди индейского населения Амазонии. III. Кишечные паразитозы во вновь контактировавших и аккультурирующихся селах. Am J Trop Med Hyg . 1980 г. 29 июля (4): 530-7. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Арельяно Дж., Перес-Родригес М., Лопес-Осуна М. и др. Повышенная частота HLA-DR3 и комплотипа SCO1 у мексиканских детей-метисов с амебным абсцессом печени. Иммунол от паразитов . 1996 18 октября (10): 491-8. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Сарабия-Арсе С., Салазар-Линдо Э., Гилман Р.Х. и др. Исследование случай-контроль инфекции Cryptosporidium parvum у перуанских детей, госпитализированных по поводу диареи: возможная связь с недоеданием и внутрибольничной инфекцией. Pediatr Infect Dis J . 1990 г. 9 сентября (9): 627-31. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Wichro E, Hoelzl D, Krause R, et al. Микроспоридиоз при хронической диарее, связанной с поездками, у иммунокомпетентных пациентов. Am J Trop Med Hyg . 2005 авг. 73(2):285-7. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Osewe P, Addiss DG, Blair KA, et al. Криптоспоридиоз в Висконсине: исследование передачи вируса после вспышки методом случай-контроль. Эпидемиол Инфекция . 1996 г., октябрь 117 (2): 297–304. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Хантер П.Р., Хьюз С., Вудхаус С. и др. Медицинские последствия криптоспоридиоза человека у иммунокомпетентных пациентов. Клин Infect Dis . 2004 15 августа.39(4):504-10. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Бланшард С., Джексон А.М., Шансон Д.С., Фрэнсис Н., Газзард Б.Г. Криптоспоридиоз у ВИЧ-серопозитивных пациентов. Q J Med . 1992 ноябрь-декабрь. 85(307-308):813-23. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Эль-Шазли А.М., Абдель-Магид А.А., Эль-Бешбиши С.Н. и др. Blastocystis hominis среди лиц с симптомами и без симптомов в центре Талха, мухафаза Дакахлия, Египет. J Египет Soc Parasitol . 2005 авг.35(2):653-66. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Дагган С., Сантошам М., Гласс Р.И. Лечение острой диареи у детей: пероральная регидратация, поддерживающая терапия и диетотерапия. Центры по контролю и профилактике заболеваний. MMWR Recomm Rep . 1992 16 октября. 41 (RR-16): 1-20. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Россиньол Дж.Ф., Кабил С.М., Саид М., Самир Х., Юнис А.М. Эффект нитазоксанида при персистирующей диарее и энтерите, ассоциированном с Blastocystis hominis. Клин Гастроэнтерол Гепатол . октябрь 2005 г. 3:987-91. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • [Руководство] Служба общественного здравоохранения США и Американское общество инфекционных заболеваний. Руководство USPHS/IDSA 1999 г. по профилактике оппортунистических инфекций у лиц, инфицированных вирусом иммунодефицита человека. MMWR Recomm Rep . 1999, 20 августа. 48 (RR-10): 1–59, 61–6. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Manque PA, Tenjo F, Woehlbier U, Lara AM, Serrano MG, Xu P, et al.Идентификация и иммунологическая характеристика трех потенциальных вакциногенов против видов Cryptosporidium. Клин Вакцина Иммунол . 2011 18 ноября (11): 1796-802. [Ссылка QxMD MEDLINE]. [Полный текст].

  • Quach J, St-Pierre J, Chadee K. Будущее разработки вакцин против Entamoeba histolytica. . Hum Вакцина Иммунотер . 2014 Feb 6. 10(6):[QxMD MEDLINE Link].

  • Олсон М.Е., Кери Х., Морк Д.В. Прививка от лямблий. Паразитол Сегодня . 2000 май. 16(5):213-7. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Абубакар И., Алию С.Х., Арумугам С., Хантер П.Р., Усман Н.К. Профилактика и лечение криптоспоридиоза у пациентов с ослабленным иммунитетом. Кокрановская база данных Syst Rev . Январь 2007 г. 24:CD004932. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Сириони О., Джакометти А., Дренаджи Д. и др. Распространенность и клиническая значимость Blastocystis hominis в различных когортах пациентов. Евро J Эпидемиол .15 апреля 1999 г. (4): 389-93. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Коллинз Пенсильвания, Райт М.С. Возникающие кишечные простейшие: диагностическая дилемма. Clin Lab Sci . 1997 сентябрь-октябрь. 10(5):273-8. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Croft SL, Williams J, McGowan I. Кишечный микроспоридиоз. Семин Гастроинтест Дис . 1997 г., 8 января (1): 45–55. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Эриксон М.С., Ортега Ю.Р. Инактивация простейших паразитов в пищевых, водных и экологических системах. J Пищевая защита . ноябрь 2006 г. 69:2786-808. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Фартинг МДж. Варианты лечения эрадикации кишечных простейших. Nat Clin Pract Gastroenterol Hepatol . август 2006 г. 3: 436-45. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Фунг Х.Б., Доан Т.Л. Тинидазол: нитроимидазольный противопротозойный агент. Клин Тер . декабрь 2005 г. 27:1859-84. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Гудгейм RW. Понимание кишечных спорообразующих простейших: криптоспоридии, микроспоридии, изоспоры и циклоспоры. Энн Интерн Мед . 1996 г., 15 февраля. 124(4):429-41. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Grazioso CF, Митчелл Д.К. Паразитарные причины диареи у детей. Semin Pediatr Infect Dis . 1994. 5:191-201.

  • Хашми Р. , Джента Р.М., Уайт-младший AC. Паразиты и диарея. I: Простейшие и диарея. J Travel Med . 1997 март 1. 4(1):17-31. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Хилл ДР. Лямблиоз. Проблемы диагностики и лечения. Infect Dis Clin North Am . 1993 г., 7 сентября (3): 503–525. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Хоффнер Р.Дж., Килагбиан Т., Эсекогву В.И., Хендерсон С.О. Общие проявления амебного абсцесса печени. Энн Эмерг Мед . 1999 сен. 34 (3): 351-5. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Хусейн Э.М., Эль-Моамли А.А., Дауд Х.А. и др. ПЦР в реальном времени и проточная цитометрия при обнаружении ооцист Cyclospora в образцах фекалий симптоматических и бессимптомных педиатрических пациентов. J Египет Soc Parasitol . 2007 г., 37 апреля (1): 151–70. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Ленгерих Э.Дж., Аддис Д.Г., Юранек Д.Д. Тяжелый лямблиоз в США. Клин Infect Dis . 1994 май.18(5):760-3. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Линдси Д.С., Дубей Д.П., Блэгберн Б.Л. Биология Isospora spp. от человека, нечеловеческих приматов и домашних животных. Clin Microbiol Rev . 1997 10 января (1): 19-34. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Martinez-Garcia MC, Munoz O, Garduno-Rodriguez G, et al. Патогенные и непатогенные зимодемы Entamoeba histolytica в сельской местности Мексики. Соответствие серологии. Arch Invest Med (Mex) .1990. 21 Приложение 1:147-52. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Moghaddam DD, Ghadirian E, Azami M. Blastocystis hominis и оценка эффективности метронидазола и триметоприма/сульфаметоксазола. Паразитол Рез . 2005 г., июнь 96 (4): 273-5. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Молбак К., Ааби П., Хойлинг Н., да Силва А.П. Факторы риска криптоспоридиозной диареи в раннем детстве: исследование случай-контроль в Гвинее-Бисау, Западная Африка. Am J Эпидемиол .1994 1 апреля. 139(7):734-40. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Mungthin M, Subrungruang I, Naaglor T, et al. Характер выделения спор Enterocytozoon bieneusi у бессимптомных детей. J Med Microbiol . 2005 май. 54 (часть 5): 473-6. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Несбитт Р.А., Моша Ф.В., Катки Х.А. и др. Амебиаз и сравнение микроскопии с методом ИФА при обнаружении Entamoeba histolytica и Entamoeba dispar. J Natl Med Assoc .2004 май. 96(5):671-7. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Ortega YR, Sterling CR, Gilman RH. Циклоспора каетанская. Ад Паразитол . 1998. 40:399-418. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Пикеринг Л.К., Энгелькирк П.Г. Лямблии лямблии. Pediatr Clin North Am . 1988 июнь 35 (3): 565-77. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Рамратнам Б., Фланиган Т.П. Криптоспоридиоз у лиц с ВИЧ-инфекцией. Постград Мед J .1997 ноябрь 73 (865): 713-6. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Шихан Д.Дж., Раучер Б.Г., МакКитрик Дж.К. Ассоциация Blastocystis hominis с признаками и симптомами заболеваний человека. Дж Клин Микробиол . 1986 24 октября (4): 548-50. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Шлим Д. Р., Хоге К.В., Раджа Р. и др. Является ли Blastocystis hominis причиной диареи у путешественников? Проспективное контролируемое исследование в Непале. Клин Infect Dis . 1995 г. 21 июля (1): 97-101. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Смит Х.В., Коркоран Г.Д. Новые препараты и методы лечения криптоспоридиоза. Curr Opin Infect Dis . 2004 г. 17 (6): 557-64 декабря. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Смит Л.А. Все еще вокруг и все еще опасны: Giardia lamblia и Entamoeba histolytica. Clin Lab Sci . 1997 сентябрь-октябрь. 10(5):279-86. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Тургай Н., Йоласигмаз А., Эрдоган Д.Д., Зейрек Ф.Ю., Унер А. Заболеваемость циклоспориозом у пациентов с желудочно-кишечными симптомами в западной Турции. Med Sci Monit . Январь 2007 г. 13:CR34-9. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Walzer PD, Judson FN, Murphy KB, et al. Вспышка балантидиаза в Труке. Am J Trop Med Hyg . 1973 г., 22 января (1): 33–41. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Вулф М.С. Лямблиоз. Clin Microbiol Rev .1992 5 января (1): 93-100. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Kiser JD, Paulson CP, Brown C. Клинические исследования. Какое самое эффективное лечение лямблиоза? Дж Фам Практ . 2008 апр. 57 (4): 270-2. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • Granados CE, Reveiz L, Uribe LG, Criollo CP. Препараты для лечения лямблиоза. Кокрановская база данных Syst Rev . 2012 12 декабря. 12:CD007787. [Ссылка QxMD MEDLINE].

  • CDC — DPDx — Процедуры диагностики

    Распределение простейших по консистенции стула

    1. Соберите кал в сухой, чистый, герметичный контейнер.Убедитесь, что в контейнер не попала моча, вода, земля или другие материалы.
    2. Изображение справа демонстрирует распределение простейших в зависимости от консистенции стула, и его следует учитывать при получении образцов.
    3. Свежий стул следует немедленно исследовать, обработать или сохранить. Исключением являются образцы, хранящиеся в холодильнике, когда консерванты недоступны; эти образцы подходят только для тестирования на антиген.
    4. Сохраните образец как можно скорее.При использовании коммерческого набора для сбора следуйте инструкциям набора. Если наборы недоступны, образец следует разделить и хранить в двух разных консервантах, 10% формалине и ПВА (поливиниловом спирте), используя подходящие контейнеры. Добавьте один объем образца стула к трем объемам консерванта.
    5. Убедитесь, что образец хорошо перемешан с консервантом. Сформированный кал необходимо хорошо раздробить.
    6. Убедитесь, что контейнеры с образцами хорошо закрыты.Армировать парапленкой или другим подходящим материалом. Вставьте контейнер в полиэтиленовый пакет.
    7. Определенные лекарства и соединения делают образцы стула неудовлетворительными для исследования. Образцы должны быть собраны до того, как эти вещества будут введены, или сбор должен быть отложен до тех пор, пока эффекты не пройдут. К таким веществам относятся: антациды, каолин, минеральное масло и другие маслянистые материалы, невсасывающиеся противодиарейные препараты, барий или висмут (7-10 дней, необходимых для устранения эффектов), противомикробные средства (2-3 недели) и красители для желчного пузыря (3). недели).
    8. Может потребоваться повторный сбор образцов, если первое исследование дало отрицательный результат. По возможности следует исследовать три образца, взятых с интервалом в 2-3 дня.

    Сохранение образцов  необходимо, когда образцы стула не могут быть исследованы в течение установленного интервала времени. Доступны различные консерванты (см. таблицу), два из которых наиболее часто используются: 10% водный раствор формалина и ПВС (поливиниловый спирт). Если требуется молекулярное обнаружение (ПЦР), обратитесь к разделу молекулярной диагностики , чтобы получить конкретную информацию о том, как собирать, сохранять и отправлять образцы.

    Консервант Преимущества Недостатки
    10% формалин
    • Универсальный фиксатор
    • Простота приготовления
    • Длительный срок хранения
    • Хорошая сохранность морфологии яиц гельминтов, личинок, цист простейших и кокцидий
    • Подходит для процедур концентрирования и УФ-флуоресцентной микроскопии
    • Подходит для кислотостойких, сафраниновых и хромотропных красителей
    • Совместимость с наборами для иммуноанализа и УФ-флуоресцентной микроскопией
    • Не подходит для некоторых перманентных мазков, окрашенных трихромом
    • Недостаточное сохранение морфологии простейших трофозоитов
    • Может мешать ПЦР, особенно после длительного времени фиксации
    MIF
    мертиолат-йод-формальдегид)
    • Компоненты, фиксирующие и окрашивающие микроорганизмы
    • Простота приготовления
    • Длительный срок хранения
    • Полезно для полевых исследований
    • Подходит для процедур концентрирования
    • Не подходит для некоторых перманентных мазков, окрашенных трихромом
    • Недостаточное сохранение морфологии простейших трофозоитов
    • Йод мешает другим красителям и флуоресценции
    • Йод может вызывать деформацию простейших
    LV-PVA
    (поливиниловый спирт низкой вязкости)
    • Хорошая сохранность морфологии простейших трофозоитов и цист
    • Простое приготовление перманентных мазков, окрашенных, например, трихромом (раствор сохраняет микроорганизмы и заставляет их прилипать к предметным стеклам)
    • Консервированные образцы остаются стабильными в течение нескольких месяцев
    • Недостаточная сохранность морфологии яиц и личинок гельминтов, кокцидий и микроспоридий
    • Содержит хлорид ртути
    • Сложно и дорого утилизировать
    • Трудно приготовить в лаборатории
    • Не подходит для процедур концентрирования
    • Нельзя использовать с наборами для иммуноанализа
    • Не подходит для кислотоустойчивых, сафраниновых и хромотропных красителей
    SAF
    (ацетат натрия-уксусная кислота-формалин)
    • Подходит как для процедур концентрирования, так и для подготовки мазков с перманентным окрашиванием
    • Простота приготовления
    • Длительный срок хранения
    • Подходит для кислотостойких, сафраниновых и хромотропных красителей
    • Совместим с наборами для иммуноанализа
    • Требуется добавка (например,г. , альбумин-глицерин) для приклеивания образцов к предметным стеклам
    • Стойкие пятна хуже, чем с ПВА или фиксатором Шаудина
    Фиксатор Шаудина
    • Хорошая сохранность морфологии простейших трофозоитов и цист
    • Простое приготовление перманентно окрашенных мазков
    • В меньшей степени подходит для процедур концентрирования
    • Содержит хлорид ртути
    • Недостаточная сохранность морфологии яиц и личинок гельминтов, кокцидий и микроспоридий
    • Плохая адгезия жидких или слизистых образцов к предметным стеклам
    Модифицированный ПВА
    медь или цинк
    • Можно сделать постоянные мазки и окрасить их трихромом
    • Цинк предпочтительнее меди
    • Без хлорида ртути
    • Неравномерное окрашивание
    • Морфология организма может быть плохой
    • Медь-морфология цист и трофозоитов плохая
    • Цинк — лучшая морфология, но не сравнимый с LV-PVA
    Фиксаторы в одном флаконе
    (такие как Ecofix, Parasafe, Unifix, Proto-fix, STF и другие, которые могут быть доступны)
    • Концентрат и перманентный мазок можно приготовить из одного флакона
    • Иммуноанализ можно проводить на большинстве
    • Без хлорида ртути
    • Некоторые фиксаторы в одном флаконе должны использовать определенные красители
    • Разница в цвете морилки
    • Окрашивание не всегда стабильное
    • Иногда дороже, чем формалин и LV-PVA

    Поскольку 10% формалин и ПВА имеют дополнительные преимущества (см. таблицу), рекомендуется разделить образец и сохранить его в обоих типах консервантов (добавьте один объем стула к трем объемам консерванта).Для этой цели доступны коммерческие наборы из двух флаконов. Законсервированные экземпляры могут храниться несколько месяцев.

    Для получения дополнительной информации о сборе стула позвоните в Отдел паразитарных заболеваний по телефону (404) 718-4110.

    CDC — DPDx — Процедуры диагностики

    Диагноз кишечных простейших человека зависит от микроскопического обнаружения различных стадий паразита в фекалиях, дуоденальной жидкости или образцах биопсии тонкой кишки. Поскольку исследование кала очень трудоемко и требует квалифицированного микроскописта, в качестве альтернативы были разработаны тесты на обнаружение антигена с использованием прямых флуоресцентных антител (DFA), иммуноферментного анализа (EIA) и быстрых тестов, подобных тест-полоскам.Методы обнаружения антигена могут быть выполнены быстро и не требуют опытного и квалифицированного морфолога. Была проделана большая работа по разработке тестов для обнаружения антигенов, в результате чего были получены коммерчески доступные реагенты для кишечных паразитов Cryptosporidium spp., Entamoeba histolytica , Giardia duodenalis и Trichomonas vaginalis . Кроме того, для Plasmodium и Wuchereria bancrofti доступны тесты на обнаружение антигена с использованием крови или сыворотки.

    Образцы для обнаружения антигена

    Свежие или консервированные образцы стула являются подходящими образцами для тестирования на обнаружение антигена с помощью большинства наборов, но обратитесь к рекомендуемым процедурам сбора, включенным в каждый конкретный набор.

    Амебиаз
    Имеются в продаже наборы ИФА

    для обнаружения фекальных антигенов для диагностики кишечного амебиаза. Организмы как патогенного штамма E. histolytica , так и непатогенного штамма Entamoeba dispar морфологически идентичны. В этих анализах используются моноклональные антитела, которые обнаруживают ингибирующий галактозу белок адгезии в патогенных E. histolytica . Основным недостатком этих анализов является необходимость свежих, неконсервированных образцов стула. В США доступно несколько наборов ИФА для обнаружения антигена группы E. histolytica / E. dispar , но только набор TechLab специфичен для E. histolytica .

    Криптоспоридиоз

    Иммунодетекция антигенов на поверхности организмов в образцах стула с использованием анализа DFA на основе моноклональных антител является в настоящее время тестом выбора для диагностики криптоспоридиоза и обеспечивает более высокую чувствительность по сравнению с модифицированными кислотоустойчивыми методами окрашивания.В США имеются коммерческие продукты (DFA, IFA, EIA и экспресс-тесты) для диагностики криптоспоридиоза. Несколько наборов представляют собой комбинированные тесты на Cryptosporidium , Giardia и E. histolytica . При выборе теста для отдельных лабораторий необходимо учитывать такие факторы, как простота использования, технические навыки и время, единичное тестирование по сравнению с пакетным и стоимость теста. Сообщается, что наиболее чувствительным (99%) и специфичным (100%) методом является тест DFA, который идентифицирует ооцисты в концентрированных или неконцентрированных образцах фекалий с использованием моноклональных антител, меченных флуоресцеинизотиоцианатом (FITC).Доступен комбинированный тест DFA для одновременного обнаружения ооцист Cryptosporidium и цист Giardia .

    Некоторые коммерческие тесты ИФА доступны в формате микропланшетов для обнаружения антигенов Cryptosporidium в свежих или замороженных образцах стула, а также в образцах стула, консервированных в формалине, или образцах стула, фиксированных ацетатом натрия-уксусной кислотой-формалином (SAF). Концентрированные или обработанные поливиниловым спиртом (ПВС) образцы непригодны для тестирования с помощью доступных наборов для обнаружения антигенов с помощью ИФА. Сообщается, что наборы превосходят микроскопию, особенно кислотоустойчивое окрашивание, и показывают хорошую корреляцию с тестом DFA. По сообщениям, чувствительность и специфичность набора варьируются от 93 до 100% при использовании в клинических условиях. Лаборатории, которые используют эти наборы для ИФА, должны быть осведомлены о потенциальных проблемах с ложноположительными результатами и принимать меры для мониторинга эффективности наборов.

    Доступны быстрые иммунохроматографические анализы для комбинированного обнаружения антигена Cryptosporidium и Giardia или Cryptosporidium , Giardia и E.гистолитика . Они предлагают преимущество короткого времени тестирования и получения нескольких результатов в одном реакционном устройстве. Первоначальные оценки указывают на сравнимую чувствительность и специфичность с ранее доступными тестами.

    Набор Meridian Merifluor DFA Kit для Cryptosporidium / Giardia , модифицированный кислотоустойчивый краситель для Cryptosporidium spp. или трихромный краситель Уитли для Giardia spp. используются в CDC для рутинной идентификации этих паразитов. Эти методы можно использовать для подтверждения подозрительных или противоречивых результатов диагностики.

    Лямблиоз

    Обнаружение антигенов на поверхности организмов в образцах стула в настоящее время является тестом выбора для диагностики лямблиоза и обеспечивает повышенную чувствительность по сравнению с более распространенными методами микроскопии. Коммерческие продукты (DFA, EIA и экспресс-тесты) доступны в Соединенных Штатах для иммунодиагностики лямблиоза. Можно приобрести тесты DFA, в которых используется моноклональное антитело, меченное FITC, для обнаружения цист Giardia отдельно или в комбинированном наборе для одновременного обнаружения цист Giardia и ооцист Cryptosporidium .Чувствительность и специфичность этих наборов составляли 100% по сравнению с микроскопией. Их можно использовать для количественного определения цист и ооцист и, таким образом, они могут быть полезны для эпидемиологических и контрольных исследований.

    Некоторые коммерческие тесты ИФА доступны в формате микропланшетов для обнаружения антигена Giardia в свежих или замороженных образцах стула, а также в образцах стула, консервированных в формалине, MIF или фиксаторах SAF. Концентрированные образцы или образцы ПВА не подходят для тестирования с помощью наборов для ИФА.Недавно сообщалось, что показатели чувствительности наборов для ИФА составляют от 94 до 100%, в то время как все показатели специфичности составляют 100%.

    Быстрые иммунохроматографические анализы доступны для комбинированного обнаружения антигена либо Cryptosporidium и Giardia , либо Cryptosporidium , Giardia и E. histolytica . Они предлагают преимущество короткого времени тестирования и получения нескольких результатов в одном реакционном устройстве. Первоначальные оценки указывают на сравнимую чувствительность и специфичность с ранее доступными тестами.

    Набор Meridian Merifluor DFA Kit для Cryptosporidium / Giardia , модифицированный кислотоустойчивый краситель для Cryptosporidium spp. или трихромный краситель Уитли для Giardia spp. используются в CDC для рутинной идентификации этих паразитов. Эти методы можно использовать для подтверждения подозрительных или противоречивых результатов диагностики.

    Трихомониаз

    Трихомониаз, инфекция, вызываемая Trichomonas vaginalis , является распространенным заболеванием, передающимся половым путем.Диагноз ставится при обнаружении трофозоитов в вагинальном секрете или образцах из уретры при микроскопии влажного препарата, окрашивании образцов DFA или посевах. Чувствительность анализов составила 60% для влажных препаратов и 86% для DFA по сравнению с культурами. Для обнаружения целых паразитов в жидкостях доступен набор, в котором используются моноклональные антитела, меченные FITC или ферментами, для использования в процедурах DFA или EIA. Доступен тест латекс-агглютинации для обнаружения антигена в образцах вагинальных мазков; оценка производителя показала хорошую чувствительность и специфичность.

    Организм Название комплекта Производитель – дистрибьютор и Тип испытания b
    Крипто CELISA Селлабс ОВОС
    PARA-TECT™ Антиген криптоспоридий 96 Медицинская химическая корпорация ОВОС
    ПроСпект Рапид Ремель ОВОС
    ПРОСПЕКТ Ремель ОВОС
    Криптоспоридии ТехЛаб ОВОС
    Криптоспоридии Вампол ОВОС
    Крипто CEL Селлабс ИФА
    XPect Crypto Ремель Рапид
    PARA-TECT™ Cryptosporidium/Giardia DFA 75 Медицинская химическая корпорация ДФА
    Мерифлюор Меридиан ДФА
    ПРОСПЕКТ Ремель ОВОС
    Crypto/Giardia CEL Целлабс ИФА
    ColorPAC* Бектон Дикинсон Рапид
    ImmunoCard STAT!* Меридиан Рапид
    XPect Ремель Рапид
    Сортировка Биосайт Рапид
    Энтамёба CELISA Целлабс ОВОС
    Э. гистолитика Вампол ОВОС
    E. histolytica II ТехЛаб ОВОС
    ПРОСПЕКТ Ремель ОВОС
    Лямблии CELISA Целлабс ОВОС
    PARA-TECT™ Антиген Giardia 96 Медицинская химическая корпорация ОВОС
    ПРОСПЕКТ Ремель ОВОС
    Джардия II ТехЛаб ОВОС
    Лямблии Вампол ОВОС
    GiardiaEIA Антитела, Inc. ОВОС
    Giardia CEL Целлабс ИФА
    ПРОСПЕКТ Ремель Рапид
    Простое чтение Giardia Медицинская химическая корпорация Рапид
    Филяриоз CELISA Целлабс ОВОС
    1. Antibodies, Inc., P O Box 1560, Davis, CA 95617-1560
      Becton Dickinson, 1 Becton Dr., Franklin Lakes, NJ 07417
      BioSite, 11030 Roselle St., San Diego, CA
      Cellabs, PO Box 421, Brookvale, NSW 2100, Australia
      Genzyme Virotech, Gmbh, Lowenplatz 5, 66248, Russelheim, Germany
      Medical Chemical Corporation , 19430 Van Ness Avenue, Torrance, CA
      Meridian Bioscience, Inc. , 3471 River Hills Dr., Cincinnati, OH 45244
      Novocastra, 30 Ingold Rd., Burlingame, CA 94010
      Remel, 12076 Santa Fe Drive, Lenexa, KS 66215
      TechLab, исследовательский парк VPI, 1861 Pratt Dr., Blacksburg, VA 24060
      Wampole Laboratories, P O Box 1001, Cranbury, NJ 08512
    2. ИФА = иммуноферментный анализ; Rapid = иммунохроматографический картридж; DFA = прямой иммунофлуоресцентный анализ; IFA = непрямой иммунофлуоресцентный анализ.

    Быстрая диагностика кишечных паразитарных простейших с акцентом на Entamoeba histolytica

    Entamoeba histolytica представляет собой инвазивное кишечное патогенное паразитическое простейшее, вызывающее амебиаз. Его следует отличать от Entamoeba dispar и E.мошковский , непатогенные комменсальные паразиты просвета кишечника человека , морфологически идентичные E. histolytica . Обнаружение специфических антигенов E. histolytica в стуле — это быстрый и чувствительный метод, который следует рассматривать как метод выбора. ПЦР кала в реальном времени является высокочувствительным и специфичным методом, но его высокая стоимость делает его непригодным для использования в эндемичных районах, где существуют экономические ограничения. Серология является важным компонентом диагностики кишечного и особенно внекишечного амебиаза, поскольку это чувствительный тест, дополняющий обнаружение антигенов или ДНК паразита.Циркулирующие лектиновые антигены Gal/GalNac могут быть обнаружены в сыворотке пациентов с нелеченым амебным абсцессом печени. На горизонте находятся мультиплексные ПЦР в реальном времени, которые позволяют идентифицировать множественные энтеропатогены с высокой чувствительностью и специфичностью.

    1. Введение

    Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) ставит диарейные заболевания на второе место среди причин заболеваемости и смертности среди детей в развивающихся странах [1–3]. Одним из случаев диарейных заболеваний у детей являются кишечные простейшие.Кишечные простейшие передаются фекально-оральным путем и имеют жизненные циклы, состоящие из стадии цисты и стадии трофозоита. Кисты имеют резистентную стенку и выделяются с калом. Стенка кисты выполняет функцию защиты организма от высыхания во внешней среде. Антисанитарные условия способствуют передаче большинства простейших. Традиционно паразитов идентифицировали с помощью простой микроскопии и серологических методов. Новые подходы включают обнаружение антигена и ПЦР [4–7].

    2. Кишечные паразиты:
    Cryptosporidium, Cyclospora, Entamoeba spp., Giardia, Isospora
    2.1.
    Cryptosporidium

    Род Cryptosporidium был идентифицирован у мышей Эдвардом Тиззером в 1907 г. [3]. Он был обнаружен как патоген для человека в 1976 году. Многие виды заражают людей и широкий круг животных. Cryptosporidium parvum и Cryptosporidium hominis являются наиболее распространенными видами, вызывающими заболевания у людей [8].Криптоспоридиоз человека также встречается у C. felis, C. meleagridis, C. canis, C. suis, и C. muris [9–11]. В развивающихся странах Cryptosporium spp. инфекции возникают в основном у детей в возрасте до пяти лет, чаще всего в возрасте до двух лет [12, 13]. C. hominis — это род, который заражает только людей, тогда как C. parvum заражает людей и крупный рогатый скот [11]. Недавняя литература показывает, что C. hominis является наиболее распространенным штаммом, обнаруживаемым в стуле человека [9, 14].Каждая ооциста имеет размеры около микрометров и содержит четыре инфекционных спорозоита. Недавнее субгенотипирование C. hominis показало, что инфекции включают широкий спектр подтипов, состоящий из трех семейств подтипов (Ia, Ib и Id) [3].

    2.2.
    Cyclospora

    Cyclospora cayetanensis представляет собой спорообразующее паразитическое простейшее, поражающее верхний отдел тонкого кишечника. Он был идентифицирован как патоген, передающийся как через пищу, так и через воду, эндемичный во многих развивающихся странах.Заболевание впервые привлекло внимание врачей в 1970-х годах [15]. Он является важным возбудителем диареи путешественников в развитых странах и стал причиной многочисленных вспышек пищевого происхождения в Соединенных Штатах и ​​Канаде в конце 1990-х годов. Приблизительно 1500 человек в 1996 г. заболели диареей Cyclospora cayetanensis из-за гватемальской малины. Эта эпидемия повторилась в 1997 г., подчеркнув риски для мировой экономики и снабжения продовольствием [16]. Рибосомная ДНК C. cayetanensis и трех других видов демонстрирует высокую степень гомологии друг с другом.Гомология Cyclospora и отсутствие данных о его последовательности от других видов затрудняют методы идентификации [17]. Частота заражения Cyclospora высока в теплое время года. Установлено, что циклоспороз связан с владением домашними животными, особенно птицами, морскими свинками и кроликами [18]. Многие аспекты этого заболевания и пути его передачи до сих пор остаются загадкой.

    2.3.
    Entamoeba spp.
    2.3.1.
    Entamoeba dispar

    E.dispar существует в просвете толстой кишки в виде безвредного сапрофита [19]. E. dispar и E. histolytica морфологически идентичны и филогенетически близкородственны (98% идентичности последовательностей рРНК). Оба вида имеют сходный круг хозяев, но обладают совершенно разными свойствами в отношении патогенности in vivo [20]. И E. histolytica , и E. dispar способны колонизировать человека, но только E. histolytica способен вызывать инвазивное заболевание (колит и внекишечные проявления).Разрушение тканей не наблюдается при использовании E. dispar in vivo. Ранее группа исследователей пришла к выводу, что колонизация E. dispar никогда не приводила к инвазивным заболеваниям у людей, поэтому паразит не требует лечения [21–23].

    2.3.2.
    Entamoeba histolytica

    Основной целью выявления и дифференциации видов E. histolytica в образцах стула является обнаружение возбудителя амебной дизентерии.Ежегодно около 40–50 миллионов человек заболевают клиническими проявлениями амебиаза, что приводит к гибели до 100 000 человек [24]. Возбудителем амебного колита и абсцесса печени является E. histolytica . Непатогенные паразиты E. dispar и E. moshkovsky встречаются чаще и внешне идентичны E. histolytica [25, 26]. Инвазивные штаммы E. histolytica могут вызывать летальный исход; значение (выше) распространенности E. histolytica является завышенным, поскольку оно датируется до выделения возбудителя E.histolytica из непатогена E. dispar [26]. Кроме того, существует шесть дополнительных видов амеб ( Entamoeba coli, Entamoeba hartmanni, Entamoeba polecki, Entamoeba chattoni, Iodamoeba butschlii и Endolimax nana ), которые заражают человека [27–37]. Есть и другие амебы, заражающие человека, то есть акантамебы, вызывающие у человека кишечные инфекции. E. nana и I. butschlii колонизируют кишечник человека и не являются патогенными [38].Инфекция, вызванная E. dispar , в развитых странах встречается в 10 раз чаще, чем E. histolytica [39–43]. Точно так же даже в развивающейся стране E. histolytica и E. dispar могут быть одинаково распространены [35]. E. histolytica и E. dispar имеют почти 90% геномную идентичность, а E. moshkovsky также близко генетически связан [44].

    2.3.3.
    Entamoeba moshkovsky

    Свободноживущая и паразитическая амеба Entamoeba moshkovsky неотличима по цисте и трофозоитам от E.histolytica и E. dispar . Недавно было показано, что E. moshkovsky является обычной инфекцией людей на Индийском субконтиненте. Ранние изоляты E. moshkovsky были получены из сточных вод [45]. E. moshkovsky является осмотолерантным и идентифицируется по росту при комнатной температуре и методом рибопечати [45–48]. Человеческие изоляты E. moshkovsky поступили из Северной Америки, Южной Африки, Бангладеш и Италии [49, 50]. Патогенная роль E.мошковский еще не определен. Чтобы свести к минимуму путаницу с E. histolytica / E. dispar , необходим диагностический инструмент. Распространенность E. moshkovsky позволяет предположить, что инфекция распространена среди детей [50].

    2.4.
    Giardia

    Giardia — двуядерное жгутиковое простейшее, открытое Ван Левенгуком в 1681 г. Лямблиоз — наиболее частая причина небактериальной диареи во всем мире [51].Каждый год регистрируется 500 000 новых случаев, и примерно у 200 миллионов человек развивается симптоматический лямблиоз [52]. Эти паразиты могут быть обнаружены у млекопитающих и других животных, включая рептилий и птиц. Giardia lamblia (syn. duodenalis или кишечная ) имеет два передних ядра одинакового размера, которые содержат полные копии генома [53]. Паразит имеет вентральный адгезивный диск, состоящий из микротрубочек. Есть четыре пары жгутиков (одна передняя пара, две задние пары) и каудальная пара, которая выходит из диска.Комплексная работа уникального цитоскелета Giardia была рассмотрена [54]. Цисты Giardia устойчивы к хлорированию и озонолизу и могут сохранять жизнеспособность в течение нескольких недель, особенно в холодных поверхностных водах. Заражение Giardia чаще всего происходит при проглатывании кисты с загрязненной водой или пищей. Даже мухи могут распространять жизнеспособные цисты Giardia lamblia на своем экзоскелете, который они приобрели естественным путем из негигиеничных источников [55].Существует два различных генотипа G. lamblia , которые заражают людей, обычно называемые наборами A и B. Молекулярный анализ показал, что генетическая дисперсия между двумя наборами больше, чем та, которая используется для разграничения других видов простейших [56]. . Кроме того, было высказано предположение, что между группами могут существовать фенотипические различия. Одно исследование показало связь между перемежающейся диареей и комплексом А и между стойкой диареей и комплексом В [57].Другие исследования показали, что у детей со сборкой А чаще проявлялись симптомы [58]. Недавнее исследование показало, что большинство инфекций G. lamblia в общине на северо-востоке Бразилии относились к группе B [59].

    2.5.
    Isospora

    Изоспороз — кишечное заболевание человека, вызываемое паразитом Isospora belli . Встречается по всему миру, особенно в тропических и субтропических районах. Впервые это было задокументировано в 1915 году. Инфекция чаще всего наблюдается у людей с ослабленным иммунитетом. I. belli представляет собой кокцидийное простейшее из типа Apicomplexa, паразитирующее на эпителии верхних отделов тонкой кишки человека и вызывающее диарейное заболевание. Весь жизненный цикл Isospora состоит из бесполого развития и полового размножения, которые происходят в одном и том же хозяине. Передача ооцист I. belli , по-видимому, ограничивается антропонозным циклом, поскольку единственным известным естественным хозяином является человек [60]. Ооцистам I. belli обычно требуется от одного до нескольких дней, чтобы завершить спорогоническое развитие и стать инфекционными [61, 62].

    3. Методические подходы с акцентом на диагностику амебиаза
    3.1. Микроскопический

    При амебиазе микроскопия не позволяет отличить E. histolytica от более распространенных паразитов E. dispar и E. moshkovsky . Таким образом, это устаревший подход к диагностике амебиаза, но он все еще применяется в большинстве стран мира, где современные диагностические подходы не прижились. Для микроскопии каждый образец кала следует разделить на две порции.Прямую микроскопию следует проводить путем смешивания небольшого количества образца с 0,9% раствором хлорида натрия (влажное мазок) или раствором Люголя. Это позволяет обнаружить подвижные трофозоиты Entamoeba histolytica/dispar , а также может предоставить информацию о содержимом стула, то есть о наличии лейкоцитов и эритроцитов. Затем вторую порцию образца стула окрашивают трихромом и/или йодом для выявления трофозоитов и цист. Требуется три отрицательных образца стула, прежде чем можно будет принять сообщение об отсутствии амебной инфекции [63].Трофозоиты, содержащие проглоченные эритроциты, чаще встречаются у E. histolytica , чем у E. dipar [64–66]. Чувствительность микроскопии составляет менее 60%, и ее результаты путают с вводящими в заблуждение результатами из-за неправильной идентификации макрофагов как трофозоитов (полиморфноядерных лейкоцитов), полиморфноядерных лейкоцитов как кист (особенно, когда дольчатые ядра полиморфных ядер распадаются) и других « видов Entamoeba » [1]. 64, 66–70].

    3.2. Серология

    Комбинация серологии и анализа стула на антиген более чувствительна и специфична, чем микроскопия, для диагностики инфекции Entamoeba histolytica [42].Тестами выбора для серологии являются непрямой флуоресцентный тест на антитела (IFAT), встречный иммуноэлектрофорез (CIEP) или твердофазный иммуноферментный анализ (ELISA). Серологические тесты положительны во время клинических проявлений амебиаза в 60–90% случаев, при этом положительные серологические тесты наблюдаются в общей популяции эндемичных районов в 5–10% (возникает вопрос как ложноположительных, так и ложноотрицательных результатов при серологических исследованиях). ).

    3.2.1. Измерительная полоска

    Тесты в месте оказания медицинской помощи для выявления амебиаза были бы подходящей технологией для развивающихся стран.Есть как минимум два таких теста, которые находятся на ранних стадиях разработки [71, 72].

    3.2.2. Быстрое определение антигена

    Исследование ооцист кала и паразитов (O&Ps) не позволяет морфологически различить три близкородственных обыкновенных амебы: патогенную E. histolytica и комменсальную E. dispar и E. moshkovsky . Дифференциация E. histolytica от E. dispar практически может быть осуществлена ​​путем обнаружения антигена.В настоящее время имеется несколько коммерчески доступных тестов для обнаружения антигенов для диагностики in vitro. Тест TechLab E. histolytica II обнаруживает исключительно E. histolytica [73, 74]. Коммерческие иммуноферментные анализы от Merlin и Alexon не различают E. histolytica и E. dispar [75, 76]. Басс и др. пришли к выводу, что два ИФА, использованные в их исследовании, были относительно быстрыми и простыми в выполнении, но Techlab E.histolytica II ELISA превзошла тест R-Biopharm Ridascreen Entamoeba [77]. Чувствительность и специфичность набора TechLab изучались во всем мире, а именно. Бангладеш [73], Канада [42], Нидерланды [78], Великобритания [79] и Индия [80].

    Инфекция E. histolytica также может быть обнаружена с помощью лектинового антигена Gal/GalNAc в сыворотке. Преимущество заключается в том, что это более чувствительный метод, чем обнаружение антилектиновых антител для ранней диагностики амебного абсцесса печени (АЛА).Он также более специфичен и использует четко определенный антиген, лектин Gal/GalNAc. Его также можно, в отличие от тестов на обнаружение антител, использовать в качестве теста на лечение [81]. Недостатком этого метода является то, что чувствительность этого метода значительно снижается у больных АЛА после начала антиамебной терапии.

    Антиген слюны также тестировался в качестве предиктора инвазивного заболевания. В одном из исследований было установлено, что присутствие лектина в слюне имело умеренную чувствительность (65.8%) и высокой специфичностью (97,4%) при ранних инфекциях (1-недельный амебный колит). Хотя неинвазивный сбор образцов является преимуществом, чувствительность этого анализа оказывается ниже, чем у обнаружения сывороточного антигена [82].

    3.3. ПКР
    3.3.1. Обычная ПЦР

    Диагностика E. histolytica с помощью ПЦР началась в начале 1990-х годов. Дифференцировка E. histolytica от E. dispar с помощью анализа рестрикционных фрагментов одного гена, амплифицированного in vitro, была впервые описана в 1991 г. [83].Подходы на основе ПЦР были одобрены ВОЗ и в развитых странах нашли применение в клинических и эпидемиологических исследованиях [84–87]. Идентификация E. histolytica может быть выполнена из различных клинических образцов, таких как кал, ткани и аспират печени [70]. Хотя ПЦР 18S рДНК стоит дорого, она столь же чувствительна, как и методы ИФА [88–93]. Методы ПЦР оказались высокочувствительными и специфичными для обнаружения ДНК паразита в образцах, положительных при микроскопии, с использованием как ручных, так и автоматизированных методов [94–101].Анализы ПЦР, нацеленные на 18S рДНК, широко используются для обнаружения и дифференциации видов Entamoeba . Это можно легко обнаружить по фрагменту ДНК однокопийного гена или по мультикопийным внехромосомным плазмидам амеб [102]. Было установлено, что амплификация фрагментов ДНК E. histolytica и E. dispar из стула человека с помощью традиционной ПЦР является чувствительным и специфичным методом ее обнаружения [100]. Выделение ДНК проводили непосредственно из кала и амплифицировали с использованием праймеров, амплифицирующих внехромосомную кольцевую ДНК [100, 101, 103].Микроскопически положительные E. histolytica положительные клинические 27/30 (90%) фекальных образцов и 3/30 (10%) аспиратов абсцесса печени из больниц Pharmongkutklao и Ramathibodi в Бангкоке, Таиланд, оценивали с помощью ПЦР. Все образцы были признаны положительными в отношении цист Entamoeba или трофозоитов при микроскопическом исследовании. После тестирования с помощью родоспецифичной ПЦР [35] 25/30 (83%) образцов оказались положительными в отношении Entamoeba spp. тогда как 5/30 (16,6%) образцов были отрицательными.С помощью разработанного ПЦР-теста успешно идентифицировано 10/30 (33,3%) протестированных клинических образцов: 4/10 (40%) были положительными для E. histolytica 6/10 (60%) для E. dispar. Такие же результаты были получены при использовании ранее описанных E. histolytica--специфичных и E. dispar--специфичных праймеров [104]. Амплификации E. moshkovsky не наблюдалось ни на одном образце [85].

    Для одновременного обнаружения и дифференциации E.histolytica и E. dispar из ДНК, выделенной из образцов фекалий, выделенных под микроскопом (свежих и фиксированных формалином), была разработана мультиплексная ПЦР с заявленной чувствительностью и специфичностью 94% и 100% соответственно [86, 105, 106]. Хак и др. идентифицировали E. moshkovsky в образцах фекалий методом рибопечати [49]. Был разработан ПЦР-тест для идентификации E. moshkovsky в образцах фекалий, который показал высокую чувствительность и специфичность с использованием ДНК, экстрагированной непосредственно из образцов стула с помощью набора для выделения стула QIAGEN [106, 107].Более простой инструмент молекулярного обнаружения ПЦР, разработанный Ali et al. для диагностики инфекций, вызванных E. moshkovsky , использовали для обнаружения паразита непосредственно в кале. Из 109 исследованных образцов стула детей дошкольного возраста в Бангладеш методом ПЦР E. histolytica был обнаружен у 17/109 (15,6%), E. dispar у 39/109 (35,8%), E. moshkovsky у 23/109 (21,1%), смешанная инфекция E. histolytica и E. dispar у 17 (73,9%), и E.коинфекция dispar и E. moshkovsky у 11/23 (48%) [50]. Высокая степень ассоциации E. moshkovsky с E. dispar могла затруднить его идентификацию в предыдущих исследованиях.

    3.3.2. ПЦР в реальном времени

    Преимущество недавно разработанной методики ПЦР в реальном времени (кПЦР) для лабораторной диагностики инфекционных заболеваний заключается в том, что она более чувствительна, чем обычная ПЦР, более быстра, сокращает время обработки и имеет меньший риск контаминации ампликона лабораторными средами и снижает затраты на реагенты [108].Происходит специфическое обнаружение ампликона, что позволяет осуществлять непрерывный мониторинг образования ампликона (продукта ПЦР) на протяжении всей реакции. По сравнению с обычной ПЦР, ПЦР в реальном времени более чувствительна, а также является количественной. Было разработано несколько методов количественной ПЦР [109–111]. Клинические образцы могут содержать примеси, которые могут ингибировать ферментативную амплификацию нуклеиновых кислот. Следовательно, использование внутренних контролей (ВК) для рутинной диагностической ПЦР гарантирует, что клинические образцы успешно амплифицируются и обнаруживаются.

    Для одноплексной ПЦР в реальном времени обнаружения E. histolytica, Qvarnstrom et al. использовали зонды TaqMan, нацеленные на ген 18S рРНК, с подходом SYBR Green, предлагающим хорошую альтернативу (но не зависящую от последовательности) анализу TaqMan [109].

    Verweij et al. разработали мультиплексный анализ количественной ПЦР для обнаружения трех различных кишечных паразитов E. histolytica , G. lamblia и C. parvum . Их исследование показало 100% (20/20) амплификацию E.histolytica и ДНК G. lamblia в микроскопически положительных изолятах. Кроме того, в 20 образцах, в которых модифицированное кислотоустойчивое окрашивание выявило ооцист Cryptosporidium , и в 4/7 (57%) образцах от ребенка с ослабленным иммунитетом с жалобами на диарею ДНК C. parvum была обнаружена с помощью количественной ПЦР [111]. ]. Вервей и др. мультиплексная ПЦР показала 100% специфичность и чувствительность для E. histolytica и G. lamblia, и C.парвум [112] .

    Позже Haque et al. произвели мультиплексный анализ ПЦР в реальном времени для обнаружения E. histolytica , G. lamblia и C. parvum . Предел обнаружения для мультиплексной ПЦР в реальном времени составил 1 трофозоит E. histolytica на экстракцию (100  л), 10 трофозоитов G. enteralis на экстракцию и 100 ооцист Cryptosporidium на экстракцию [21]. Мультиплексный анализ кПЦР показал 83/97 (85%) совпадение с микроскопией для Giardia со специфичностью для E.histolytica и G. lamblia, и C. parvum 98%, 97% и 100% соответственно [21].

    В другом исследовании кПЦР для E. histolytica была положительной в 20/23 (87%) образцах гноя абсцесса печени, при этом 3 отрицательных образца были взяты у пациентов, которые уже получали антиамебную терапию [108]. Результаты были высокоспецифичными и чувствительными [40].

    Строуп и др. разработали видоспецифический зонд Cryptosporidium qPCR, который является чувствительным и простым в выполнении.Анализ был проведен на 123 образцах стула человека из Бангладеш и Танзании и показал чувствительность и специфичность 91% по сравнению с микроскопией. Cryptosporidium parvum-специфичный для и Cryptosporidium meleagridis -специфичный для скорпиона количественный ПЦР-анализ обеспечил 100% точное видообразование по сравнению с анализом Vspl RFLP и секвенированием [113].

    КолПЦР-анализ Isospora belli был проведен с 21 положительным и 120 отрицательным образцами стула и достиг 100% специфичности и чувствительности.ПЦР может дополнить клинико-лабораторную диагностику изоспороза, в частности, у пациентов с диареей в анамнезе, развившейся во время или сразу после поездки в развивающиеся страны [114].

    4. Будущие подходы

    Бремя кишечных протозойных инфекций настолько велико в развитых и развивающихся странах, что существует потребность в более совершенных диагностических тестах. Явно приоритетными являются производство тестов для обнаружения антигенов с боковым потоком в виде «полосок» и высокопроизводительных скрининговых тестов, основанных на обнаружении антигена или ПЦР.

    5. Выводы

    В клинических лабораториях при диагностике кишечного амебиаза следует использовать комбинацию обнаружения паразита путем обнаружения антигена или ПЦР (с использованием специфических тестов E. histolytica ) и серологического тестирования, и/или путем колоноскопии и биопсия кишечных амебных поражений, а в случае амебного абсцесса печени — комбинация серологии и дренирования абсцесса печени с исследованием жидкости на наличие паразита, в идеале с помощью ПЦР. Разработка молекулярных инструментов, включая обнаружение антигена и ПЦР и количественную ПЦР, для обнаружения E.histolytica, E. dispar , E. moshkovsky , Giardia spp. и Cryptosporidium spp. ДНК в образцах стула или абсцесса печени обещает обеспечить большие успехи. Объединение многих новых технологий в диагностическую лабораторию станет проблемой для всех, но может привести к лучшему пониманию проблем общественного здравоохранения, связанных с этими заболеваниями.

    Благодарности

    А. Сингх выражает благодарность Программе стипендий Фулбрайта Совета по международному обмену учеными (CIES), США, за предоставление ей постдокторской стипендии в Департаменте инфекционного и международного здравоохранения системы здравоохранения Университета Вирджинии.Она также благодарна Центральному отделу микробиологии Университета Трибхуван, Киртипур, Катманду, Непал, за предоставленный ей учебный отпуск для этого исследования. Работа лабораторий авторов была поддержана грантом NIH AI043596.

    Влияние массового исследования стула и массового лечения на снижение уровня кишечных гельминтозов и протозойных инфекций у боливийских детей: перекрестное исследование

    Abstract

    Боливия является одной из стран с высокой заболеваемостью кишечными гельминтами и простейшими.Несмотря на высокую распространенность паразитарной инфекции, общенациональные профилактические меры для боливийских детей до сих пор не реализованы. Мы оценили эффект массового исследования стула и лечения как стратегии снижения уровня инфекции. Это исследование проводилось в период с 2013 по 2015 год у детей в возрасте от 2 до 18 лет. Всего было собрано и исследовано методом формалин-эфирной медицинской седиментации 2033 пробы стула (575 в 2013 г., 815 в 2014 г. и 642 в 2015 г.). В качестве антигельминтного средства нитазоксанид назначался всем инфицированным детям в течение 2 месяцев после обследования ежегодно.Эффект массового исследования стула и лечения оценивали по изменению показателей общей или индивидуальной паразитарной инвазии за период исследования. Общий уровень паразитарной зараженности значительно снизился с 65,2% в 2013 г. до 43,0% в 2015 г.; снижение на 22,2 процентных пункта (P<0,001). Протозойная инфекция составляла большую часть паразитарных инфекций со следующими показателями: 62,4% в 2013 г., 49,3% в 2014 г. и 41,0% в 2015 г. Уровень наиболее распространенного гельминтоза, Hymenolepis nana , значительно снизился по сравнению с 9.от 0% в 2013 г. до 6,4% в 2014 г. и до 3,4% в 2015 г. (P<0,001). Распространенность наиболее распространенной патогенной протозойной инфекции, Entamoeba histolytica , значительно снизилась с 19,0% в 2013 г. до 3,0% в 2015 г. (P<0,001). Наоборот, уровень Giardia кишечной палочки значительно увеличился с 16,5% в 2013 г. до 21,2% в 2015 г. (P<0,01). Массовое исследование стула и лечение кишечных гельминтозов и протозойных инфекций были эффективны для снижения общей частоты паразитарных инфекций в исследуемой популяции, за исключением Giardia кишечная .Необходимы дальнейшие исследования долгосрочного эффекта массового исследования стула и лечения для снижения уровня всех кишечных паразитарных инфекций у боливийских детей.

    Резюме автора

    Кишечные гельминтозы и протозойные (паразитарные) инфекции встречаются в основном в районах с теплым влажным климатом и во многих развивающихся странах. Боливия в настоящее время имеет высокий уровень заражения паразитами, в том числе кишечными гельминтами и протозойными инфекциями. Несмотря на высокую распространенность паразитарных инфекций, общенациональные профилактические меры для боливийских детей до сих пор не реализованы.Уровень заражения гельминтами, передающимися через почву, в Японии резко снизился благодаря санитарному просвещению, массовому исследованию стула и лечению. Мы исследовали влияние массового исследования стула и лечения на частоту паразитарных инфекций у боливийских детей. В период с 2013 по 2015 г. проведено массовое исследование кала методом формалин-эфирной медицинской оседания, всем инфицированным детям в течение 2 мес после обследования были назначены антигельминтные препараты. В течение периода исследования общий уровень заражения значительно снизился, но уровень заражения Giardia кишечной палочкой увеличился.Возможно, это связано с интервалом между лечением и обследованием. Чтобы снизить уровень заражения всеми паразитами, лечение следует проводить один или два раза в год. Наши результаты показывают, что программа массового обследования стула и лечения может эффективно снизить общий уровень заражения паразитами у боливийских детей.

    Образец цитирования: Асаи Т., Кордова Видаль С., Штраус В., Икома Т., Эндох К., Ямамото М. (2016) Влияние массового исследования стула и массового лечения на снижение уровня кишечных гельминтов и протозойных инфекций у боливийских детей: поперечное сечение Изучать.PLoS Negl Trop Dis 10(12): e0005147. https://doi.org/10.1371/journal.pntd.0005147

    Редактор: Алисса Э. Барри, Институт Уолтера и Элизы Холл, АВСТРАЛИЯ

    Поступила в редакцию: 23 июня 2016 г.; Принято: 29 октября 2016 г.; Опубликовано: 6 декабря 2016 г.

    Авторское право: © 2016 Asai et al. Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе.

    Финансирование: Это исследование было частично поддержано грантом в поддержку Фонда Ротари (www.rotary.org), глобальными грантами #GG1411458 и для перспективных исследований Университета здравоохранения и социального обеспечения Ниигаты (www.nuhw .ac.jp), 2015 #h37C21. Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

    Введение

    Кишечные паразитарные инфекции, вызванные микроорганизмами, включая гельминты и простейшие, относятся к наиболее распространенным инфекциям в мире [1]. Согласно данным, предоставленным Центрами по контролю и профилактике заболеваний США (CDC) в 2013 году, большая часть населения мира инфицирована передающимися через почву гельминтами, такими как Ascaris lumbricoides ( A . lumbricoides ), Trichuris trichiura ( T . trichiura ), и Necator americanus или Ancylostoma duodenale (анкилостомы) [2]. Число инфицированных A . lumbricoides , по оценкам, составляли от 807 до 1121 миллиона человек, от 604 до 795 миллионов были инфицированы T . trichiura и от 576 до 740 миллионов заражены анкилостомозом. Что касается эндемичных районов, CDC сообщил, что самые высокие показатели паразитарной инфекции наблюдаются в теплых и влажных районах Латинской Америки, Африки и Азии [3].Эти инфекции редко встречаются в Австралии, Канаде, Европе, Японии, Новой Зеландии и США [4].

    Заболеваемость кишечными гельминтозами, особенно вызванными гельминтами, передающимися через почву, высока у детей в возрасте 1–14 лет [5]. По этой причине ВОЗ рекомендует периодическое лечение антигельминтными препаратами без предварительного исследования стула всем людям из группы риска, включая детей дошкольного возраста, детей школьного возраста и женщин детородного возраста, проживающих в эндемичных районах.Это лечение рекомендуется один раз в год, когда распространенность инфекций в обществе превышает 20%, и два раза в год, когда распространенность превышает 50% [6]. Кишечные протозойные инфекции также широко распространены в странах или на территориях с неудовлетворительными санитарно-гигиеническими условиями [7]. Эти инфекции передаются преимущественно фекально-оральным путем. Кишечные протозойные инфекции распространены у детей школьного возраста в развивающихся странах, но даже в Соединенных Штатах сообщалось, что наиболее распространенным кишечным паразитарным заболеванием, поражающим людей, является инфекция Giardia [8].По данным эпиднадзора за инфекцией Giardia , проведенного в США в 2011 и 2012 гг., наибольшее число случаев и самый высокий среднегодовой уровень заболеваемости зарегистрированы среди детей раннего возраста в возрасте 1–9 лет [9]. Эти данные свидетельствуют о необходимости постоянной и систематической работы по профилактике кишечных гельминтозов и протозойных инфекций у детей.

    В Многонациональном Государстве Боливия (Боливия) широко распространены кишечные паразитарные инфекции.Насколько нам известно, данные о распространенности паразитарных инфекций в Боливии отсутствуют. Предыдущие исследования показали следующие общие показатели паразитарной инфекции у боливийских детей: 77,2% (гельминты, 76,1%; простейшие, 56,5%) [10], 65,1% (гельминты, 30,6%; простейшие, 20,8%, гельминты и простейшие, 13,7%). ) [11], 69,0% (гельминты, 4,1%; простейшие, 61,6%; гельминты и простейшие, 3,3%) [12] в низменной Боливии и 18,0% (только гельминты) [13] или 43,8% (гельминты, 1,8% ; простейшие 39,1%; гельминты и простейшие 2.9%) [14] в высокогорном районе Ла-Паса, столицы Боливии. Эти результаты показывают, что уровень кишечных паразитарных инфекций выше в низменной Боливии, чем в Ла-Пасе, высокогорном районе. Было показано, что протозойная инфекция высока как в низинных, так и в высокогорных районах. Поэтому протозойным инфекциям следует уделять такое же внимание, как и гельминтозам. Учитывая эти показатели инфицирования и стратегию ВОЗ по борьбе с передающимися через почву гельминтозами, боливийских детей следует лечить антигельминтными препаратами один или два раза в год.Однако, насколько нам известно, детей, проживающих в районе нашего исследования, еще не лечили антигельминтными препаратами, и не было опубликовано ни одного исследования о влиянии лечения антигельминтными препаратами.

    В начале 20 го века в Японии был высокий уровень заражения гельминтами, передающимися через почву. Согласно годовому отчету Токийской ассоциации здравоохранения, общий уровень инфицирования среди жителей Токио в 1950 г. составлял 61,4%, после чего уровень инфицирования снизился в результате санитарного просвещения, массового исследования стула и массового лечения.В период с 1967 по 2000 год сообщалось, что уровень заболеваемости составлял менее 1%, а с 2002 года массовые исследования стула на гельминтов, передающихся через почву, не проводились [15]. Среди факторов, снижающих паразитарную инфекцию в Японии, были массовые исследования стула и лечение. Одним из факторов, способствовавших успеху деятельности по борьбе с паразитами, было то, что она проводилась по всей Японии посредством трехстороннего сотрудничества между государственными служащими, учеными и частным сектором по борьбе с паразитами (добровольные организации, Японская ассоциация борьбы с паразитами, частные организации и лаборатории, филиалы Японской ассоциации борьбы с паразитами) [16].Затем эта активность распространилась на другие азиатские страны и привела к снижению уровня заражения гельминтами, передающимися через почву, в Корее [17], Тайване [18] и Индонезии [19]. Если бы деятельность по борьбе с паразитами осуществлялась в рамках трехстороннего сотрудничества в Боливии, уровень заражения кишечными гельминтами и простейшими значительно снизился бы.

    Таким образом, мы провели это исследование, чтобы оценить эффект массового исследования стула и лечения как меры по снижению уровня кишечных паразитарных инфекций у боливийских детей.Мы предположили, что уровень паразитарной инфекции у боливийцев резко снизится за счет массового исследования стула и лечения.

    Методы

    Изучаемый регион

    Это исследование было проведено в районе Мекапака (16°43’0” ю.ш., 67°59’0” з.д.), расположенном в 30 км к югу от Ла-Паса, который является столицей Боливии и административным центром правительства Боливии. Этот район имеет общую площадь 533 км 2 и находится на высоте около 2800 метров. По состоянию на 2012 г. население составляло 17 925 человек [20].Средние температуры в этом районе колеблются от максимума 14–17°C до минимума -4–4°C [21].

    субъектов

    Это исследование было проведено при активном сотрудничестве с местной школой, в которую входят учащиеся детского сада, начальной, средней и старшей школы. Ежегодно в школе обучалось около 1000 детей в возрасте от 1 до 19 лет.

    Сбор проб кала, массовое исследование кала и лечение

    Всего у участников исследования было собрано 2033 образца стула: 575 в 2013 г., 816 в 2014 г. и 642 в 2015 г.Пробы исследовали медицинским общелабораторным методом (формалин-эфирный метод медицинской седиментации) [22]. Осадок исследовали с помощью светового микроскопа. Раствор йода использовали для идентификации цист простейших, которые окрашивались в бледно-желтый или коричневый цвет. Классификацию паразитов проводили на основе контурных изображений из специальной книги [23]. Для контроля качества все образцы были исследованы как боливийскими, так и японскими исследователями, и результаты совпали.

    Во-первых, чтобы предоставить исходные данные, мы провели исследование стула у 575 детей в сентябре 2013 года.Данные за 2013 год были использованы в качестве исходных данных для исследования, поскольку это исследование должно было провести перекрестный анализ исходных данных. После обследования всем инфицированным детям в период с октября по ноябрь 2013 г. был назначен нитазоксанид (как антигельминтный препарат). Через 4 и 5 месяцев после введения и все инфицированные дети получали нитазоксанид в период с апреля по май 2014 года.Дальнейшее исследование стула было проведено для всех детей через 16–17 месяцев после введения препарата в 2014 г. В период с октября по ноябрь 2015 года инфицированным детям вводили антигельминтные препараты.

    Детям в возрасте 12 лет и старше нитазоксанид назначали в дозе 500 мг с водой или пищей; Сироп по 7,5 мл детям до 11 лет 1 раз в сутки.

    Заявление об этике

    Процедура исследования была рассмотрена и одобрена Комитетом по этике Ниигатского университета здоровья и социального обеспечения (№17298–120125) и проводилась в соответствии с принципами, изложенными в Хельсинкской декларации 1964 года. Перед началом исследования 2013–2015 гг. боливийский исследователь предоставил информацию о цели и процедуре исследования родителям или опекунам детей; риски и преимущества обследования и лечения; риски и преимущества непрохождения обследования и лечения. Впоследствии исследователь запросил устное информированное согласие родителей или опекунов от имени их детей.Контейнер с порядковым номером для сбора образцов стула передавался родителям (родителям) или опекунам детей, которые согласились участвовать в исследовании. Мы посчитали, что родитель(и) или опекун(ы) дали информированное согласие от имени детей, когда они сдавали образцы кала своих детей.

    Статистический анализ

    Эффект обследования и лечения массового стула оценивали по изменению показателей паразитарной инфекции в течение периода исследования. В предыдущих исследованиях, проведенных в Боливии [12–14] или в других странах [24,25], не было выявлено существенных гендерных различий в общем уровне инфицирования, поэтому мы не оценивали разницу в уровне инфицирования между мальчиками и девочками.Все статистические анализы были выполнены с использованием программного обеспечения для анализа данных и статистики Stata (STATA 14; StataCorp, Колледж-Стейшн, Техас, США). Изменения показателей паразитарной инфекции в период с 2013 по 2015 г. анализировали с помощью тренд-теста Кокрана–Армитиджа [26–28]. Значения P менее 0,05 (двусторонние) рассматривались как указывающие на статистическую значимость.

    Результаты

    В таблице 1 показаны изменения частоты кишечных паразитарных инфекций в течение периода исследования. Общая паразитарная зараженность составила 65.2% в первый год. Из 575 детей, сдавших пробы кала в 2013 г., у 16 ​​(2,8%) были обнаружены гельминтозы, у 316 (54,9%) – протозойные инфекции, у 43 (7,5%) – обе инфекции. После лечения нитазоксанидом у всех инфицированных детей показатели снизились до 51,6% в 2014 г. и 43,0% в 2015 г. Общий уровень инфицирования значительно снизился с 65,2% в 2013 г. до 43,0% в 2015 г., т.е. на 22,2 процентных пункта (P<0,001). . Достоверной разницы в частоте детей с только гельминтозной инфекцией за исследуемый период выявлено не было.На протозойные инфекции (простейшие и комбинированные гельминто-протозойные инфекции) приходилось большая часть паразитарных инфекций со следующими показателями: 62,4% в 2013 г., 49,3% в 2014 г. и 41,0% в 2015 г.

    В таблице 2 показаны изменения количества видов гельминтов или простейших, обнаруженных у боливийских детей в течение периода исследования. Моновидовая инфекция была наиболее распространенной формой у детей — 34,6% в 2013 г., 37,0% в 2014 г. и 31,0% в 2015 г., но существенно не изменялась по годам (P = 0.16). Доля детей, инфицированных двумя-четырьмя видами паразитов, значительно уменьшилась (P<0,001). Показатели двухвидовой инфекции снизились с 19,1% в 2013 г. до 11,1% в 2015 г., трехвидовой инфекции снизились с 8,3% в 2013 г. до 0,9% в 2015 г., а четырехвидовой инфекции снизились с 3,0% в 2013 г. до 0 % в 2015 г.

    В таблице 3 показаны изменения показателей заражения гельминтами и простейшими у боливийских детей за период исследования. Мы обнаружили следующие шесть гельминтов: Hymenolepis nana ( H . нана ), А . люмбрикоиды , Т . trichiura , анкилостомоз, Taenia saginata/solium и Enterobius vermicularis . Частота наиболее распространенных гельминтозов, H . нана значительно снизились с 9,0% в 2013 г. до 6,5% в 2014 г. и до 3,4% в 2015 г. (P<0,001). Т . trichiura была выявлена ​​у трех детей в 2013 г., но ни у одного из них в 2014 и 2015 гг. частота инфицирования не показала достоверного снижения за период исследования (P = 0.02). Существенных изменений в частоте инфицирования A не произошло. lumbricoides , анкилостомы, Taenia saginata/solium и Enterobius vermicularis в течение периода исследования.

    Кроме того, мы нашли следующие шесть простейших: Entamoeba Histolytica ( E . Histolytica ), Giardia intestinalis ( г . intestinalis ), Entamoeba coli ( E . Coli ), Endolimax nana ( E . nana ), Chilomastix mesnili ( C . mesnili ) и Iodamoeba buetschlii ( I . buetschlii ). Е . coli была наиболее распространенной протозойной инфекцией. Из шести обнаруженных простейших E . гистолитика , E . кишечная палочка , Е . нана и C . меснили значительно снизились с 2013 по 2015 год (P<0,001).Скорость G . кишечная инфекция значительно увеличилась с 16,5% в 2013 году до 21,2% в 2015 году (P = 0,01). Не было обнаружено существенной разницы в частоте заражения I. buetschlii в течение периода исследования (P = 0,08).

    Обсуждение

    В этом исследовании выявлены изменения частоты кишечных паразитарных инфекций после введения антигельминтных средств боливийским детям, инфицированным гельминтами и простейшими. Наша процедура была эффективной для снижения общего уровня паразитарной инфекции, но мы не увидели значительного снижения среди всех подопытных паразитов в течение периода исследования.Из шести гельминтов, обнаруженных в этом исследовании, частота заражения составляет H . нана и Т . trichiura значительно снизилась за этот период. У простейших обнаружены показатели E . гистолитика , E . кишечная палочка , Е . нана и C . меснили значительно уменьшились, а G . интестиналис значительно увеличилось в течение периода исследования.

    Предыдущие исследования также изучали частоту кишечных паразитарных инфекций у боливийцев, но результаты были противоречивыми из-за различий во времени, местности, субъектах и ​​методах. Флорес и др. [13] исследовали 2723 образца стула, собранных у 2521 ребенка и 201 сообщества в Ла-Пасе с 1992 по 1997 год, с использованием метода Като-Каца, и частота заражения гельминтами составила 18,0% у детей и 23,8% в сообществах. Таннер и др. [10] исследовали 92 образца стула, взятых у детей, проживающих в низменной Боливии, с помощью метода концентрации эфира-ацетата формалина, который выявил 70 гельминтов (76.1%) и 52 протозойные (56,5%) инфекции. В нашем предыдущем исследовании, проведенном в высокогорном районе Ла-Паса в 2012 г., 274 образца стула, взятые у жителей Ла-Паса в возрасте от 1 года до 71 года, были исследованы с использованием общемедицинского лабораторного метода. Выявлено 5 гельминтозов (1,8%), 107 протозойных (39,1%) и 8 гельминто-протозойных (2,9%) инфекций [14]. Результаты, полученные в настоящем исследовании, были аналогичны результатам нашего предыдущего исследования; заболеваемость гельминтами была ниже, чем зараженность простейшими.Считается, что это различие связано с уникальными погодными условиями в районе исследования. Районы наших исследований располагались на высоте 3800 м (район Асиса) и 2800 м (район Мекапака) над уровнем моря, где среднегодовая температура ниже 15°С. Как правило, яйца гельминтов выделяются из организма вместе с фекалиями человека, а затем развиваются в инфекционную личинку при подходящих условиях температуры и влажности. Подходящей температурой для развития яиц Ascaris считается 15–34°С [29].Кишечные гельминтозы вызываются проглатыванием инфекционной личинки. Яйца гельминта дольше развиваются в инвазионную личинку при температуре ниже 15°C. Основная причина низкой заболеваемости гельминтами детей, живущих в Ла-Пасе, заключается в том, что яйца не могут развиться в инфекционную личинку при таких низких температурах. Кисты простейших являются устойчивыми формами, сохраняющими инфекционность в условиях низких температур и являющимися инфекционными причинами протозойной инфекции. Снижение уровня протозойных инфекций крайне необходимо для защиты здоровья детей в этой области.Несмотря на высокую распространенность паразитарных инфекций, профилактические мероприятия для детей в этой области до сих пор не проводились. Требуются эффективные и устойчивые профилактические меры для детей в этой области.

    Стратегия ВОЗ по борьбе с передающимися через почву гельминтозами заключается в предотвращении инфекции и контроле заболеваемости путем периодического лечения групп риска, проживающих в эндемичных районах [16]. Когда результаты нашего исследования за 2013 год были проверены на соответствие критериям ВОЗ для медикаментозного лечения, лечение не потребовалось, поскольку уровень заражения гельминтами составлял всего 10.3%. Однако уровень заражения гельминтами плюс патогенные простейшие составил 46,4%, как показано в таблице 3. Наши результаты показывают, что лечение детей антигельминтными препаратами следует назначать один или два раза в год.

    Ранее в Японии наблюдался высокий уровень заражения гельминтами, передающимися через почву. Массовое исследование стула и лечение являются одними из факторов, которые успешно снизили уровень инфекции [16]. Поэтому мы предположили, что массовое исследование стула и лечение могут также снизить уровень инфицирования у боливийцев.В нашем исследовании общий уровень паразитарной инфекции значительно снизился с 65,2% в 2013 г. до 43,0% в 2015 г. (22,2 процентных пункта) после нашей программы лечения (P<0,001). Наши данные демонстрируют эффективность массового исследования стула и лечения для снижения общего уровня инфицирования. Тем не менее, еще одним интересным открытием было значительное увеличение уровня инфицирования G . интестиналис , несмотря на введение антигельминтных препаратов инфицированным детям. Инфицированность G . интестиналис в 2013 г. составил 16,5%; после применения антигельминтных препаратов этот показатель снизился до 7,1% в 2014 г., но увеличился до 21,2% в 2015 г. Возможная причина такого увеличения – продолжительность времени между приемом антигельминтных препаратов и исследованием кала. Если в 2014 г. исследование кала проводилось через 4–5 мес после лечения, то в 2015 г. оно проводилось через 16–17 мес после лечения. Короче говоря, повторное заражение или новое заражение G . кишечный , появился у некоторых детей в период с 2014 по 2015 год. Г . кишечная инфекция вызывается главным образом попаданием цист в зараженную воду, пищу или и то, и другое, или фекально-оральным путем передачи от человека к человеку [30]. Фактически, в 2015 году более 40% детей в трех определенных классах школы были инфицированы G . enteralis (8/20, 40%; 15/34, 44%; 20/32, 63%), что указывает на вспышку среди этих классов. CDC рекомендует «мыть руки с мылом и теплой водой перед тем, как прикасаться к пище» в качестве одного из методов предотвращения паразитарной инфекции [31].В районе Мекапаки многие люди зарабатывают на жизнь сельским хозяйством, но в этом районе всегда не хватает пригодной для использования воды. Поскольку в школе нет воды для мытья рук, школьники живут в условиях плохой санитарии. Поэтому дети не приучены мыть руки перед едой. Кроме того, известно, что Giardia является очень распространенным кишечным паразитом домашних животных, включая домашний скот, собак, кошек и диких животных [32]. Поэтому люди, имеющие контакт с этими животными, могут заразиться Giardia .Однако риск заражения людей Giardia от этих животных низок, потому что точный тип Giardia , который заражает людей, обычно отличается от того же типа, который заражает собак и кошек [33, 34]. У нас нет данных о частоте контактов между детьми в нашем исследовании и животными, однако полученные данные свидетельствуют о том, что заражение Giardia чаще происходило через зараженную воду, пищу или фекально-оральным путем, чем при непосредственном физическом контакте с животными.Самая важная мера для предотвращения G . кишечной инфекции является хорошая гигиена рук, например, мытье рук перед контактом с едой. Таким образом, вероятно, паразитарные инфекции у детей развивались фекально-оральным путем при отсутствии мытья рук. Самый важный метод снижения риска заражения — научить детей соблюдать правила гигиены рук. Кроме того, поддержание и улучшение водоснабжения необходимо для снижения уровня паразитарной инфекции у детей.

    Т . Инфекция trichiura значительно снизилась в течение периода исследования. Однако в 2013 году яйцо было обнаружено только у трех детей. С 2014 года не было зарегистрировано ни одного случая заболевания, но по-прежнему необходимо продолжение эпиднадзора за этим гельминтом.

    В этом исследовании мы сосредоточились на нитазоксаниде для лечения в качестве альтернативы бензимидазолу. Это произошло по ряду причин: (1) уровень заражения простейшими был выше, чем уровень заражения гельминтами в базовом исследовании в 2013 г.; (2) Н .Инфекция nana была самой высокой среди гельминтов, обнаруженных нами в этом исследовании; (3) уровень заражения гельминтами, передающимися через почву, A . люмбрикоиды , Т . trichiura и анкилостомы были не такими высокими. Нитазоксанид является эффективным средством для лечения инфекций, вызванных простейшими и гельминтами, такими как E . гистолитика , H . нана и А . lumbricoides , поэтому мы использовали его для снижения уровня заражения.Таблетку назначали по инструкции детям в возрасте 12 лет и старше. Однако сироп давали детям в возрасте 11 лет и младше, поскольку детям младшего возраста было трудно проглотить таблетку с водой или пищей. Нам потребовалось два месяца, чтобы вылечить всех инфицированных детей после исследования кала.

    В этом исследовании есть некоторые ограничения. Во-первых, школу ежегодно посещают около 1000 детей в возрасте от 1 до 19 лет. Во время нашего обучения каждый год появлялись новые абитуриенты детского сада и выпускники средней школы.Таким образом, во время исследования стула субъекты, имеющие право на участие в исследовании, менялись каждый год. Полученные уровни заражения могут не отражать должным образом точные различия, поскольку мы не смогли сравнить показатели, полученные у детей в одной и той же популяции. Тем не менее, мы исследовали образцы стула, собираемые примерно у 60–85% всех детей каждый год, поэтому мы можем с уверенностью предположить, что наши данные отражают тенденцию заболеваемости паразитарными инфекциями среди детей. Во-вторых, использовались образцы кала, фиксированные 10% формалином, поэтому мы не смогли найти Blastocystis hominis в образцах, потому что этих простейших трудно увидеть в концентрированных влажных препаратах [35].Если бы эти простейшие были обнаружены, наши результаты могли бы показать более высокие показатели инфицирования простейшими.

    Таким образом, частота кишечных паразитарных инфекций значительно снизилась из-за массового обследования стула и лечения, но G . кишечная инфекция значительно увеличилась. Этот повышенный уровень инфицирования мог быть результатом длительного периода между лечением и исследованием стула. Хотя наши результаты необходимо сравнивать с изменениями частоты паразитарной инфекции после введения антигельминтных средств каждые 6 месяцев, они демонстрируют влияние массового исследования стула и лечения на снижение частоты паразитарной инфекции у боливийских детей.Существует потенциал для более быстрого снижения уровня заражения паразитами, если инфраструктура водоснабжения и канализации будет улучшена в школе и домах в этом районе.

    Благодарности

    Мы в долгу перед доктором Хирохо Секикавой из Университета Ниигата, доктором Кикуо Икегами из Университета здоровья и социального обеспечения Ниигаты и г-жой Дзюнко Кадзима из Токийской ассоциации здравоохранения за их помощь в исследовании паразитов, а также г-ну Юкио Хасэгаве и Ротари-клуб Чукиаго-Марка и Mr.Тосихико Ватанабэ и Ротари-клуб Ниигата Минами за помощь в проведении этого исследования.

    Авторские вклады

    1. Задумал и спроектировал эксперименты: Т.А. М.Ю.
    2. Проведены эксперименты: CCV WS.
    3. Проанализированы данные: ТИ КЭ.
    4. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты для анализа: CCV.
    5. Написал бумагу: Т.А. МЫ.

    Каталожные номера

    1. 1.Савиоли Л., Альбонико М., Энгельс Д., Монтрезор А. (2004) Прогресс в профилактике и борьбе с шистосомозом и передающимся через почву гельминтозом. Паразитол Инт 53: 103–113.
    2. 2. Центры по контролю и профилактике заболеваний (2013 г.) Паразиты, гельминты, передающиеся через почву (ПГП). http://www.cdc.gov/parasites/sth/.
    3. 3. Fenwick A (2012)Глобальное бремя забытых тропических болезней. Общественное здравоохранение 126: 233–236. пмид:22325616
    4. 4.Burd EM, Hirichs BH (2016)Молекулярная патология и клиническая практика. Спрингер, стр. 728–732.
    5. 5. Всемирная организация здоровья. Кишечные гельминты, эпидемиология, географическое распространение. http://www.who.int/intestinal_worms/epidemiology/.
    6. 6. Всемирная организация здоровья. Кишечные черви, Стратегия, Стратегия ВОЗ. http://www.who.int/intestinal_worms/strategy/.
    7. 7. Аль-Харази Т., Гани М.К., Отман Х. Формат (2013)Распространенность кишечных протозойных инфекций среди школьников оранг-асли в Пос-Сендеруте, Паханг, Малайзия.J Egypt Soc Parasitol 43: 561–568. пмид:24640856
    8. 8. Каппус К.Д., Лундгрен Р.Г. младший, Джуранек Д.Д., Робертс Дж.М., Спенсер Х.К. (1994)Кишечный паразитизм в Соединенных Штатах. Am J Trop Med Hyg 50: 705–713. пмид:8024063
    9. 9. Пейнтер Дж. Э., Гаргано Дж. В., Коллиер С. А., Йодер Дж. С. (2015) Надзор за лямблиозом — США, 2011–2012 гг. Центры по контролю и профилактике заболеваний, MMWR Suppl. 64:15–25. пмид:25928582
    10. 10. Таннер С., Леонард В.Р., МакДейд Т.В., Рейес-Гарсия В., Годой Р. и другие.(2009)Влияние гельминтозов на состояние питания детей в низменной Боливии. Am J Hum Biol 21: 651–656. пмид:19402038
    11. 11. Мартин М., Блэквелл А.Д., Гурвен М., Каплан Х. (2013) Завести новых друзей и сохранить старых? Паразитарная коинфекция и коморбидность у Homo sapiens. Приматы, патогены и эволюция: стр. 363–387.
    12. 12. Маккиони Ф., Сегундо Х., Габриэлли С., Тотино В., Гонсалес П.Р. и др. (2015) Резкое снижение распространенности гельминтов, передающихся через почву, и новое понимание кишечных простейших у детей, живущих в регионе Чако, Боливия.Am J Trop Med Hyg 92: 794–796. пмид:25711609
    13. 13. Флорес А., Эстебан Дж.Г., Энглс Р., Мас-Кома С. (2001)Гельминтные инфекции, передающиеся через почву, на очень большой высоте в Боливии. Trans R Soc Trop Med Hyg 95: 272–277. пмид:114
    14. 14. Икегами К., Цутия Ю., Ниши Ю., Гонсалес С.Х., Ояма Т. и др. (2013) Паразитарные инфекции среди людей, живущих в высокогорном районе Ла-Пас, Боливия. Журнал здоровья и благосостояния Ниигата 13: 51–56.
    15. 15. Токийская ассоциация служб здравоохранения.Исследование паразитов (2015 г.) Годовой отчет 2015 г. 44: 59–63. (на японском)
    16. 16. Yokogawa M (1986)Ликвидация кишечных паразитозов в Японии. PDP/EC/WP/86.23 ВОЗ. 1–8, http://apps.who.int/iris/bitstream/10665/61294/1/PDP_EC_WP_86.23.pdf
    17. 17. Hong ST, Chai JY, Choi MH, Huh S, Rim HJ и др. (2006) Успешный опыт борьбы с передаваемыми через почву гельминтами в Республике Корея. Корейский J Parasitol 44: 177–185. пмид:16969055
    18. 18.Chen ER, Hsieh HC, Tseng PT, Chou CH, Wang CM, et al. (1986) Исследование по борьбе с аскаридами среди детей на Тайване. Сборник документов по борьбе с гельминтозами, передающимися через почву, Азиатской организацией по борьбе с паразитами. Том. III: 153–156.
    19. 19. Маргоно С.С., Исмид И.С., Рукмоно Б. (1989) Эффект борьбы с передающимися через почву гельминтозами в пригороде Джакарты, Индонезия. Сборник документов по борьбе с гельминтозами, передающимися через почву, Азиатской организацией по борьбе с паразитами.Том. IV: 95–104.
    20. 20. Мекапака (муниципалитет) Население. http://www.citypopulation.de/php/bolivia-admin.php?adm2id=020103
    21. 21. Погода в мире онлайн. Среднемесячный климат Мекапаки, Боливия. http://www.worldweatheronline.com/mecapaca-weather-averages/la-paz/bo.aspx
    22. 22. Ричи Л.С., Пан С., Хантер Г.В. (1953) Сравнение техники сульфата цинка и эфира формалина (406 th MGL). Мед Булл США. 1: 111–113. пмид:13062832
    23. 23.Эш ЛР, Орихель ТЦ. (2007) Атлас паразитологии человека Эша и Орихеля (5 -е изд. ). Американское общество клинической патологии Press. Чикаго, Иллинойс, США.
    24. 24. Бейли С., Лопес С., Камеро А., Тайкири С., Аруай Ю. и др. (2013) Факторы, связанные с паразитарной инфекцией среди беспризорных детей в детских домах Лимы, Перу. Патог Глоб Здоровье 107: 52–57. пмид:23683330
    25. 25. Kuete T, Yameli FLS, Essono Mvoa E, Nkoa T, Moyou Somo R, et al.(2015)Распространенность и факторы риска заражения кишечными гельминтами и простейшими в городских условиях Камеруна: случай Дуалы. Американский журнал эпидемиологии и инфекционных заболеваний 3: 36–44.
    26. 26. Cochran WG (1954) Некоторые методы усиления обычных тестов хи-квадрат. Биометрия. 10: 417–451.
    27. 27. Armitage P (1955) Тесты на линейные тенденции в пропорциях и частотах. Биометрия 11: 375–386.
    28. 28. Цзян X, Ма Дж, Хоу Ф, Ли Дж, Ли Р и др.(2016) Профилактика нейрохирургических инфекций: опыт одного института. Тюрк Нейрохирург 26: 234–239. пмид:26956819
    29. 29. Ким М.К., Пё К.Х., Хван Ю.С., Пак К.Х., Хван И.Г. и др. (2012)Влияние температуры на развитие яиц Ascaris suum в климатической камере. Корейский J Parasitol 50: 23–242.
    30. 30. Центры по контролю и профилактике заболеваний (2013 г.) DPDx, лямблиоз, патоген и окружающая среда, возбудитель. http://www.cdc.com.gov/dpdx/лямблиоз/
    31. 31. Центры по контролю и профилактике заболеваний (2013 г.) Паразиты, гельминты, передающиеся через почву (ПГП), аскариды, профилактика и контроль. https://www.cdc.gov/parasites/ascariasis/prevent.html
    32. 32. Feng Y, Xiao L (2011)Зоонозный потенциал и молекулярная эпидемиология видов Giardia и лямблиоза. Clin Microbiol Rev 24: 110–140. пмид:21233509
    33. 33. Блэк Р.Е., Дайкс А.С., Синклер С.П., Уэллс Дж.Г. (1977) Лямблиоз в детских садах: свидетельство передачи от человека к человеку.Педиатрия 60: 486–491. пмид:4
    34. 34. Беррилли Ф., Ди Кейв Д., Де Либерато С., Франко А., Скарамоццино П. и др. (2004) Характеристика генотипа изолятов Giardia duodenalis от домашних и сельскохозяйственных животных с помощью секвенирования гена SSU-рРНК. Вет Паразитол 122: 193–199. пмид:15219360
    35. 35. Центры по контролю и профилактике заболеваний (2013 г.) Лабораторная диагностика инфекции Blastocystis hominis, Blastocystis hominis. DPDx — Лабораторная идентификация паразитов, представляющих опасность для общественного здравоохранения.http://www.cdc.gov/dpdx/resources/pdf/benchAids/blasto_benchaid.pdf.

    008623: Исследование яйцеклеток и паразитов

    Амебы и некоторые другие паразиты не могут быть обнаружены в стуле, содержащем барий. Амебные кисты, цисты Giardia и яйца гельминтов часто выделяют из сформированных фекалий. Мягкий или жидкий стул (нормально выделяемый или полученный при мочеиспускании) часто дает трофозоиты. Очистка не увеличивает выход Giardia .Формалин сохранит цисты и личинки простейших и яйца гельминтов. Используется для концентрационных процедур. ПВС сохранит трофозоитную стадию простейших. Мазок, окрашенный трихромом, можно приготовить из материала, фиксированного ПВА. ПВС нельзя концентрировать; поэтому они всегда должны сопровождаться частью образца в формалине.

    Паразиты, обычно выявляемые в стуле больных СПИДом, включают Cryptosporidium, Isospora, Entamoeba histolytica, и Giardia lamblia.

    Патогенная природа Blastocystis hominis, , который обычно наблюдается в стуле здоровых и симптоматических пациентов, является спорной. Обзор литературы, проведенный Миллером и Миншью, показал, что не было убедительных доказательств причинно-следственной связи между B hominis и симптомами, что не было корреляции между исчезновением симптомов при терапии или исчезновением организма из стула и что лечение, направленное по показаниям B hominis , не показано. 4

    Doyle et al. наблюдали роль Blastocystis в остром и хроническом гастроэнтерите, но не смогли сделать вывод, является ли эта роль ассоциативной или причинно-следственной. 5

    При исследовании внутрибольничной диареи в крупной детской больнице были обнаружены ротавирус, C difficile и кишечный аденовирус. Кал на яйца и паразитов и бактериальные культуры стула не выявили патогенов. 6 Оптимальный диагностический результат достигается при исследовании свежего теплого стула опытным лаборантом.Формалин сохранит цисты и личинки простейших и яйца гельминтов. Используется для концентрационных процедур. ПВС сохранит трофозоитную стадию простейших. Мазок, окрашенный трихромом, можно приготовить из материала, фиксированного ПВА. Образцы, представленные в PVA, не могут быть сконцентрированы; поэтому они всегда должны сопровождаться частью образца в формалине. Сформированный кал можно хранить в формалине или охлаждать в надежном контейнере до тех пор, пока его нельзя будет добавить в контейнер с формалином и ПВА для транспортировки в лабораторию.

    Копроскопия и молекулярный скрининг для выявления кишечных простейших | Паразиты и переносчики

    Взаимосвязь между обнаружением положительных результатов с помощью копроскопии и с помощью ПЦР

    Согласно оценке с помощью ОТ-ПЦР, количество обнаруженных положительных результатов у большинства видов было значительно выше, чем при обнаружении, основанном на количестве фекальных цист с помощью копроскопии (таблица 1). . Однако некоторые положительные результаты были обнаружены только при копроскопии (таблица 2).

    Таблица 1 Распространенность % (CL 95 ) кишечных простейших, на основании обнаружения с помощью копроскопии и ОТ-ПЦР Таблица 2. Сравнение количества образцов, положительных на кишечных простейших паразитов, обнаруженных при подсчете фекальных цист с помощью микроскопии (копроскопии) и ОТ-ПЦР ( n  = 735 для всех видов)
    Entamoeba histolytica

    Хотя количество образцов, положительных на E.histolytica с использованием копроскопии и ОТ-ПЦР был очень похож, только два образца были идентифицированы как положительные обоими методами, что свидетельствует о плохой согласованности между методами (таблица 2). Однако это не было существенной разницей (критерий Макнемара, х 2 1  = 0,24, P  = 0,63). Среднее количество фекальных цист, зарегистрированное для двух образцов, которые были положительными обоими методами, составило 499,5 ± 366,5 цист/г фекалий, и это было почти в два раза выше, чем среднее значение семи образцов, которые не удалось обнаружить с помощью ПЦР (267.3 ± 85,5 цист/г фекалий), четыре из которых превышали 200 цист/г фекалий, а один достигал 686 цист/г фекалий.

    Дуоденальная лямблия

    Для этого вида, в то время как копроскопия выявила 21 положительный результат, ОТ-ПЦР выявила 105, поэтому неудивительно, что вероятность обнаружения положительных результатов у одних и тех же субъектов каждым методом была низкой (критерий Макнемара, х ). 2 1  = 67.5, P  < 0,001). Копроскопия выявила девять положительных результатов, которые не были идентифицированы с помощью ОТ-ПЦР, и для двух из них было зарегистрировано большое количество цист (3873 и 4533 цист/г фекалий). Однако разница между средним количеством цист у 12 субъектов, обнаруженных обоими методами (1332,5 ± 211,5 цист/г фекалий), и у девяти пациентов с положительным результатом при копроскопии, но не обнаруженных с помощью ПЦР, была незначительной (1267,9 ± 568,0 цист/г фекалий). .

    Бластоцистис хоминис

    Для Б.hominis наблюдалось еще большее несоответствие между положительными результатами, обнаруженными с помощью копроскопии и ОТ-ПЦР (критерий Макнемара, х ). 2 1  = 405,7, P  < 0,001). Оба метода согласовали только 48 положительных образцов, но ОТ-ПЦР выявила еще 431 положительный результат. Для этого вида среднее количество цист в образцах, которые были положительными при копроскопии, но не были обнаружены с помощью ОТ-ПЦР (635,5 ± 292,7 цист/г фекалий), было выше, чем в 48 образцах, признанных положительными обоими методами (433.9 ± 69,4 цист/г фекалий).

    Важность ингибирования в получении ложноотрицательных результатов с помощью ОТ-ПЦР

    Как показано в таблице 2, некоторые положительные образцы были обнаружены только с помощью копроскопии, а не с помощью ОТ-ПЦР. Для E. histolytica из семи образцов в Таблице 2 только пять были доступны для повторной оценки с помощью модифицированного метода ОТ-ПЦР, который уменьшил вероятность фекального ингибирования результата ПЦР. ПЦР оставалась отрицательной для пяти образцов даже после устранения ингибирования путем включения в тест БСА.Для G. duodenalis из девяти образцов, которые первоначально были признаны положительными при копроскопии, но отрицательными при ПЦР (таблица 2), только шесть все еще были доступны для повторной оценки. При повторном проведении ОТ-ПЦР и нейтрализации ингибирования добавлением БСА амплификация наблюдалась во всех шести образцах. Для B. hominis только четыре из исходных восьми образцов были доступны для повторной оценки, и с нейтрализованным фекальным ингибированием три дали положительный сигнал в ОТ-ПЦР, и амплификация не удалась только в одном образце.

    Факторы, влияющие на распространенность инфекции на основе обнаружения с помощью ОТ-ПЦР

    Значения распространенности на основе ОТ-ПЦР на каждом уровне в пределах подобранных пояснительных факторов показаны в Таблице 3.

    Таблица 3 Влияние пола, возраста, региона происхождения и год отбора проб по распространенности % (CL 95 ) инфекции на основе ОТ-ПЦР
    Entamoeba histolytica

    Ни один из факторов существенно не повлиял на распространенность E.histolytica по оценке с помощью ОТ-ПЦР, хотя наиболее близким к значимости было значение для пола хозяина (ПОЛ × ИНФЕКЦИЯ, х 2 1  = 3,04, P  = 0,081), значение распространенности в три раза выше среди женщин.

    Дуоденальная лямблия

    Распространенность этого вида была значительно выше у мужчин (таблица 3; ПОЛ × ИНФЕКЦИЯ, х 2 1  = 16.9, P  < 0,001) и значительно снизился с течением времени (таблица 3; ГОД × ИНФЕКЦИЯ, х 2 2  = 35,3, P  < 0,001), падение на 37,2% в период с 2012 по 2014 год.

    Бластоцистис хоминис

    Распространенность B. hominis была очень одинаковой во всех четырех возрастных группах и среди представителей обоих полов (таблица 3). Однако распространенность значительно различалась в зависимости от региона происхождения субъектов (РЕГИОН × ИНФЕКЦИЯ, х ). 2 3  = 29.1, P  < 0,001), самое высокое значение было зарегистрировано среди субъектов из стран Африки к югу от Сахары и, за одним исключением, самые низкие значения среди двух азиатских групп в каждый год исследования (таблица 3). Исключение составил 2013 г., когда размер выборки для региона Африки к югу от Шарана был очень низким ( n  = 2). Распространенность также значительно различалась в зависимости от года отбора проб (ГОД × ИНФЕКЦИЯ, х 2 2  = 9,5, P  = 0.009), с самым высоким значением, зарегистрированным в 2013 г., и самым низким в 2014 г. (Таблица 3), но между этими двумя объясняющими факторами (РЕГИОН × ГОД × ИНФЕКЦИЯ, χ ) наблюдалась слабая, хотя и значимая взаимосвязь. 2 6 = 13,3, P = 0,039). Данные, представленные на рис. 1, показывают, что значения распространенности оставались относительно стабильными в течение 3 лет среди субъектов как из Западной, так и из Восточной Азии с более низкими значениями, но более динамично менялись среди субъектов из Африки.

    Рис. 1

    Распространенность Blastocystis hominis у субъектов из четырех регионов в каждый из трех лет исследования. Широкие доверительные интервалы для субъектов из стран Африки к югу от Сахары в 2013 г. объясняются очень небольшим размером выборки из этого региона в том же году ( n  = 2). Точки данных для субъектов из разных регионов немного смещены, чтобы не скрывать планки погрешностей

    .
    Диентамёба ломкая

    Регион происхождения значительно влиял на распространенность D.fragilis (ОБЛАСТЬ × ИНФЕКЦИЯ, × 2 3 = 8,52, P = 0,036), и это в основном связано с относительно низким значением среди субъектов из стран Африки к югу от Сахары в отличие от очень похожих значений среди трех других региональных групп (таблица 3). . Распространенность очень мало различалась между четырьмя возрастными классами и между полами (таблица 3), однако существовало значительное взаимодействие между полами и возрастными классами (рис.2; ПОЛ × ВОЗРАСТ × ИНФЕКЦИЯ, х 2 3 = 9,74, P = 0,021). Это произошло из-за того, что распространенность была очень низкой среди женщин в самой младшей возрастной группе, но незначительно более высокая распространенность среди женщин наблюдалась во всех старших возрастных группах.

    Рис. 2

    Распространенность Dientamoeba fragilis у мужчин и женщин в каждом из четырех возрастных классов. Точки данных для двух полов немного смещены, чтобы не скрывать планки погрешностей

    .

    Сравнение распространенности инфекции между заявителем, впервые подавшим заявку, и повторным заявителем

    В модели, которая также учитывала значительное влияние пола хозяина и года отбора проб (см. выше), распространенность инфекции G.duodenalis был выше среди заявителей, подавших заявку впервые, по сравнению с заявителями, подавшими заявку на продление (таблица 4), но разница не была статистически значимой (ИММИГРАЦИОННЫЙ СТАТУС × ИНФЕКЦИЯ, х 2 1 = 3,1, P = 0,079). Когда 47 субъектов, подавших заявку на продление, были дополнительно изучены, распространенность была фактически выше, хотя и незначительно ( P  = 0,44), среди тех, кто подал заявку на продление впервые ( n  = 13; 15.4% [CL 95 = 2,81–43,39]) по сравнению с 14,5 % (таблица 4) среди новых заявителей. Наши данные содержали только 34 субъекта, которые обращались за продлением своих разрешений более чем в первый раз (со 2-го по 12-й раз), и среди них распространенность была еще ниже (8,8% [CL 95 = 3,08–20,92]).

    Таблица 4 Распространенность % (CL 95 ) инфекций на основе ОТ-ПЦР и иммиграционного статуса субъектов

    Для B. hominis распространенность была незначительно выше среди подавших заявку на продление (таблица 4) и снова незначительно отличалась от впервые подавших заявку (в модели, которая включала ГОД и РЕГИОН, для ИММИГРАЦИОННЫЙ СТАТУС × ИНФЕКТОН, х 2 1  = 0.68, P = 0,41).

    Однако распространенность D. fragilis значительно различалась между заявителями, подавшими заявку впервые, и заявителями на продление (ИММИГРАЦИОННЫЙ СТАТУС × ИНФЕКЦИЯ, х 2 1  = 4,87, P  = 0,027), а данные в таблице 4 показывают, что распространенность была чуть меньше половины среди последних по сравнению с первой группой субъектов. Однако в модели, которая также включала пол хозяина, возраст и регион происхождения субъектов, были обнаружены два важных взаимодействия.Первый был связан с сексом хозяина (СЕКС × ИММИГРАЦИОННЫЙ СТАТУС × ИНФЕКЦИЯ, х ). 2 1 = 6,6, P = 0,010). Разница в распространенности между женщинами, подавшими заявку впервые и повторными заявками (таблица 5; 32,3%), была меньше, чем среди мужчин (56,7%). Чтобы изучить влияние региона происхождения субъектов, был также проведен анализ базы данных меньшего размера, из которой были исключены африканские субъекты, поскольку не было претендентов на продление среди 42 жителей Северной Африки и только один среди африканцев к югу от Сахары.Это показало, что имело место значительное взаимодействие с регионом происхождения субъектов (РЕГИОН × ИММИГРАЦИОННЫЙ СТАТУС × ИНФЕКЦИЯ, х 2 1 = 9,6, P = 0,002). Распространенность D. fragilis была на 37,6% ниже среди подавших заявки на продление из Западной Азии по сравнению с заявками, подавшими заявку впервые (таблица 5), но среди выходцев из Восточной Азии она составила 100%, хотя размер выборки был небольшим.

    Таблица 5. Распространенность % (CL 95 ) Dientamoeba fragilis среди мужчин и женщин из Западной Азии и Восточной Азии, субъекты

    Влияние семьи работы на распространенность инфекции на основе ОТ-ПЦР

    Во-первых, все статистические модели были основаны на подгонке только СЕМЕЙСТВА ПРОФЕССИОНАЛОВ и ИНФЕКЦИИ (таблица 6).Только распространенность G. duodenalis значительно различалась между рабочими семьями (см. Таблицу 6; РАБОЧАЯ СЕМЬЯ × ИНФЕКЦИЯ, х ). 2 3  = 13,4, P  = 0,004), поэтому в этом случае была также подобрана модель, которая включала значительные эффекты из первого раунда анализа выше, включая ПОЛ, ГОД, РАБОЧУЮ СЕМЬЮ и ИНФЕКЦИЮ. Единственный термин, который включал РАБОЧУЮ СЕМЬЮ и ИНФЕКЦИЮ, также включал ГОД, поэтому также были значительные различия между годами (ГОД × РАБОЧАЯ СЕМЬЯ × ИНФЕКЦИЯ, χ 2 6  = 13.6, P = 0,035). При более тщательном изучении этого в 2012, 2013 и 2014 годах распространенность была относительно стабильной в течение этого периода среди розовых/белых воротничков (11,5%, 9,1% и 13,8% соответственно), умеренно снижалась со временем среди домработниц (16,7%, 8,5% и 5,8% соответственно), причем более резко как среди рабочих (52,0%, 11,7% и 13,7% соответственно), так и среди работников пищевой промышленности (33,3%, 21,4% и 0% соответственно).

    Таблица 6 Влияние семьи работы на распространенность % (CL 95 ) инфекции на основе RT-PCR .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.