Как правильно обработать рану перекисью водорода: первая помощь, средства для быстрого заживления

Содержание

Как обрабатывать перекисью водорода раны у детей

 

Перекись водорода – популярное дезинфицирующее, антисептическое и кровоостанавливающее средство. Используется для обработки и промывания различных ран, ссадин и царапин очень давно, но до сих пор не всегда верно.

 

Медицинский трёхпроцентный раствор перекиси не токсичен и не вызывает побочных эффектов, поэтому его применение возможно и у младенцев.

Важно

Для применения у маленьких детей перекись не следует разводить, чтобы сохранить её свойства.

Большим плюсом является отсутствие жжения при обработке раны перекисью. Хотя в очень редких случаях особо чувствительные дети пугаются шипения и ощущение лопающихся пузырьков путают с жжением.

Действие перекиси заключается в том, что при попадании на кожу вещество распадается, высвобождая большое количество атомарного кислорода (в этот момент жидкость шипит и пузырится), убивающего практически все контактирующие с ним микроорганизмы.

Факт

Аллергическая реакция на перекись водорода – единичный случай.

 

Как правильно обрабатывать раны перекисью

Если рана неглубокая (лёгкая царапина или ссадина), перекись водорода можно поливать непосредственно на повреждённый участок кожи.

А вот в случае открытых ран, глубоких порезов, проколов, ран большого размера обработка должна быть щадящей. Стерильный марлевый тампон необходимо хорошо смочить перекисью и при помощи пинцета, прикладывая тампон к ране, намочить всю повреждённую поверхность.

Напомним, что при контакте перекиси водорода с тканями организма образуются пузырьки. При поливе раствором открытой, глубокой раны есть вероятность попадания этих пузырьков в кровоток, что может создать реальную угрозу жизни.

 

Отрицательные эффекты использования перекиси водорода

Оказывается, раны, обработанные перекисью, заживают медленнее, так как вещество пересушивает ткани и нарушает естественные процессы их восстановления.

Пересушенные раны определяются по изменённому цвету и зуду.

 

Альтернатива перекиси водорода

Казалось бы небольшой недостаток перекиси водорода – пересушивание тканей – стал веской причиной для многих медиков отказаться от её использования. В качестве более безопасного и не менее эффективного метода предлагается:

  • промывать рану проточной водой с мылом (желательно детским — у него более правильный pH),
  • обсушить рану марлевой салфеткой,
  • продезинфицировать.

Далее используйте заживляющие мази, которые увлажняют ткани, помогая природным процессам (в аптеках предлагаются специальные заживляющие мази или гомеопатические «Арника» и «Календула»).

Совет

В качестве безопасного и не вызывающего жжения антисептика можно использовать фурацилин. Одна таблетка растворяется в 100 мл тёплой кипячёной воды.

 

Что ещё почитать:

Заноза у ребёнка: правильные и неправильные способы её удаления

преимущества и недостатки антисептика.

Правила обработки

Как перекисью водорода обрабатывать рану? Что это за лекарство такое? Ответы на эти и другие вопросы вы найдете в статье. В быту обработка ран перекисью водорода практикуется уже давно. Трудно отыскать девчонку или мальчишку, которым бы заботливые бабушки или мамы не очищали ссадины этим средством дезинфекции, ставшим действительно народным. Как перекисью водорода обрабатывать рану, выясним ниже.

Что это такое?

Не всем известно, как перекисью водорода обрабатывать рану. В будничном обиходе этот препарат именуют пероксидом водорода (Н2О2). Это дезинфицирующее средство с кровоостанавливающими и дезодорирующими качествами. Применяют перекись водорода для полосканий и промываний при воспалительных недугах (ангине, стоматите), остановки носовых кровотечений, обработки ран и прочего.

Сегодня это антисептическое средство в домашних аптечках является самым популярным. При его применении осуществляется химическая реакция окисления, в результате которой формуется атомарный кислород. Эта субстанция является мощнейшим антисептиком, но в природе его встретить можно весьма редко.

Пероксид водорода при соприкосновении с живой материей разлагается в считанные секунды, уничтожая при этом все микроорганизмы, оказавшиеся в его зоне действия.

Когда применять?

Раствор перекиси водорода – один из самых недорогих на сегодня антисептиков, которые продаются в аптеках. Его можно купить без рецепта, и используется он в следующих случаях:

  • для врачевания ангины;
  • для дезинфекции гнойных ран;
  • для обработки зон с омертвевшей тканью;
  • для ликвидации засохших сгустков крови;
  • при носовых кровотечениях;
  • для дезинфекции зон порезов, ожогов, царапин;
  • при врачевании стоматита, пародонтоза;
  • при гинекологических недугах;
  • при открытых капиллярных кровотечениях.

Техника использования

Как правильно перекисью водорода обработать рану? Известно, что высокая концентрация этого препарата может вызвать ожог слизистой оболочки и кожи. Именно поэтому в медицине применяют 3%-ный раствор, не имеющий запаха и цвета, или же таблетки, в которых перекись используется в сочетании с гидроперитом (мочевиной).

Для того чтобы продезинфицировать поверхностную рану, поврежденную зону промывают 3%-ной перекисью водорода. Причем возрастных ограничений концентрация раствора не имеет, то есть и для малышей, и для взрослых она должна быть идентична.

Так как перекисью водорода обрабатывать рану? Для этого нужно смочить раствором ватный тампон и легонько промокнуть им повреждение. При этом нужно следить, чтобы необработанных участков не осталось. Перекись лить прямо из бутылки на открытую рану запрещено, особенно если вам приходится обрабатывать глубокую рану.

Дело в том, что при разложении препарата на компоненты активно образуется атомарный кислород, о чем мы говорили выше. Эта субстанция представляет собой белые шипучие пузырьки. Именно они дезинфицируют и очищают рану. Но при глубоких порезах эти пузырьки могут попасть в кровеносную систему, что для жизни больного представляет большую опасность. Многие люди спрашивают: «Обрабатывают ли раны перекисью водорода?». Да, конечно. Теперь вы знаете, что обрабатывают.

Если перекись используется для полоскания ротовой полости (при врачевании стоматита, ангины и тому подобного), изготавливают, как правило, 0,25 % раствор. Для этого стаканом воды разбавляют столовую ложку перекиси.

Побочные эффекты

Вы до сих пор не знаете, можно ли перекисью водорода обрабатывать рану? Мы ранее уж дали утвердительный ответ на этот вопрос. Очень часто перекись применяют для размягчения и легкого снятия ватных тампонов и бинтов, присохших к ранам. Для этого нужно раствор перекиси набрать в шприц и ввести под бинт. Когда начнется реакция и появятся пузырьки, смело разбинтовывайте рану.

Перекись водорода в отличие от большинства нынешних заживляющих и дезинфицирующих снадобий побочных эффектов практически не имеет. Ее применение болезненными ощущениями не сопровождается, за исключением редчайших случаев аллергических реакций. Но здесь все ограничивается тягостным чувством жжения во время очистки раны, а при полоскании ротовой полости – распуханием и покраснением сосочков языка.

Кормящие мамочки и беременные женщины перекисью водорода могут пользоваться смело. Педиатры обрабатывают этим препаратом пупочную ранку у новорожденных. Очень часто врачи очищают им ранки перед применением бриллиантового зеленого (зеленки).

Минусы перекиси

Многие врачи говорят, что обрабатывать перекисью водорода рану можно. Ранее считалось, что этот медикамент имеет единственный недостаток – короткое время обеззараживающего воздействия. Но этот недочет предусмотреть запросто можно и далее следовать надлежащему графику антибактериального врачевания. Однако ученые совершенно недавно провели исследования и выяснили, что использование перекиси водорода процесс заживления замедляет.

Никто не сомневается в том, что это снадобье бактерии и грязь, попавшие в рану, уничтожает. Однако противники его применения утверждают, что перекись водорода имеет высокую абразивность, в том числе в виде раствора.

Поэтому здесь имеет место определенный парадокс: перекись великолепно обеззараживает и очищает рану, но природной регенерации клеток при этом препятствует. Такое замедление внешне проявляется зудом и трансформацией цвета тканей в ране и вокруг нее, их излишней сухостью.

В связи с этим медработники несколько трансформировали свой взгляд на безопасность использования перекиси для очищения ран. Они советуют промыть по возможности рану мыльной водой, а для обеззараживания применять антибиотические мази, так как они увлажняют кожу и мягко влияют на нее, ускоряя процесс заживления ран, а не затормаживая его.

При таком приеме обеззараживания раны ее нужно водой с мылом промывать минимум два раза в сутки до полного заживления. При применении антибиотических мазей необходимо строго следовать рекомендациям, изложенных в инструкциях к ним.

Плюсы антисептика

Однако не спешите выбрасывать перекись из домашней аптечки. Полный отказ от этого препарата – преждевременный и опрометчивый шаг. Мыло и чистая вода не всегда есть в наличии, а перекись водорода может стать единственным доступным снадобьем. Им можно надежно очистить рану от бактерий, земли и инородных тел. Также перекись будет незаменима, если нужно соскрести с царапины засохшую кровь.

Как часто обрабатывать рану перекисью водорода нужно? В экстренных случаях единоразовое очищение препаратом не вызовет значительных негативных последствий для повреждения, но позволит его содержать в чистоте до применения иных обеззараживающих средств. В любом случае самостоятельно врачевать и обрабатывать можно лишь маленькие царапины и раны.

Можно ли перекисью водорода обрабатывать открытую рану? Да, можно. Но если она большая и ее лечение не дает никакого эффекта, в течение 1-2 дней инфекцию из нее удалить полностью не получается, необходимо тотчас же обратиться за помощью к доктору.

Немедленно посетить врача нужно и тогда, когда вы получили колотую рану, к примеру, пробили ногу или руку гвоздем. Несмотря на крохотное наружное повреждение, такие раны представляют большую опасность, так как обычно бывают весьма глубокими. Кроме того, в них всегда заносится инфекция.

Перекись водорода – недорогое и компактное обеззараживающее средство. Но все же старайтесь не травмироваться и будьте осторожны.

Есть ли ограничения в использовании?

Противопоказаний к применению перекиси водорода нет. Единственной локализацией является запрет попадания капель перекиси на окклюзионные повязки и слизистые оболочки глаз. Применение снадобья болезненных ощущений не вызывает (мы об этом писали выше).

Почему перекись является отличным выбором

Перекись водорода применяется с 1920 годов в виде антисептика, так как она является эффективным средством истребления бактерий. Антисептик – это субстанция, останавливающая рост болезнетворных микроорганизмов.

Когда перекисью промывают рану, появляются боль и дискомфорт ввиду того, что медикамент активирует болевые рецепторы, когда убивает в ране бактерии. Это намного эффективнее и безопаснее, чем протирать царапины спиртом, часто используемым и не оставляющим следов, в отличие от йода.

Важность обработки ссадин и ран

Если вам нужно обработать перекисью водорода открытую рану, вы с этим теперь справитесь легко. Независимо от типа раны, которая у вас имеется – будь то порез, царапина, ссадина, ожог или прокол – очищать травму препаратом необходимо сразу же после ее появления, иначе в нее попадет инфекция и может произойти заражение крови. Быстрее всего заживают те повреждения, которые после появления были обработаны не позднее чем через 2 часа.

Особенно нужно тщательно обрабатывать те открытые раны, в которые попала грязь или какой-либо инородный предмет. Для того чтобы инфекция проникла в кровь, увечье необязательно должно быть большим и глубоким. Заражение может произойти через занозу, небольшой порез, прокол, укус зверя, растрескавшуюся кожу на пятках, ожоговую рану и так далее.

Если в раневую поверхность попадает загрязнение, у человека может появиться гангрена или столбняк.

Ликвидация вирусов

Для обработки ран многие люди и доктора применяют антибактериальные препараты. Это неправильно, так как антибиотики лишь с бактериями борются, а в ране также могут присутствовать грибки и вирусы. Именно поэтому для обеззараживания раны антибиотики малоэффективны.

Антисептик же влияет как на бактериальную флору, так и на грибковую, и вирусную. Кроме этого, со временем бактерии к антибактериальным препаратам вырабатывают иммунитет, а к антисептическим растворам остаются чувствительными.

Сама по себе перекись водорода заживление не ускоряет, однако патогенные микроорганизмы, замедляющие регенерацию, она убивает. Если неправильно применять антисептик, это ситуацию может лишь усугубить и заживление сделать более медленным.

Для обработки ран можно применять лишь 3%-ный раствор, так как большая концентрация может привести к ожогу. 6%-ный раствор перекиси, как правило, используется для хранения стерильных медицинских инструментов.

Правила обработки

Специалисты рекомендуют следующее:

  • Раневую поверхность лучше поливать струей, а не промакивать марлей или ватой. Если протирать ранение ватой, смоченной в перекиси, можно занести еще больше вирусов. Тем не менее, если рана имеет глубину больше чем 20 см, перекись нельзя на нее лить, так как раствор попадет внутрь.
  • Если рана уже начала заживать, не обрабатывайте ее перекисью, так как она молодую кожу может обжечь. В итоге заживление замедлится.
  • Запрещено использовать перекись на слишком глубоких ранах и заливать ее внутрь ран.
  • Если использовать перекись одновременно с йодом, то произойдет реакция, в результате которой появится свободный йод. В итоге человек получит химический ожог йодом.
  • Запрещено совмещать очищение перекисью с пенициллином, щелочами, кислотами.

Также вы должны знать, как сберегать антисептик так, чтобы он не потерял свои качества. Если баночка не открывалась еще ни разу, вы можете хранить ее 2 года при 8-15 °С в темном месте. Если вы уже открывали пузырек, сберегайте его в холодильнике не более месяца.

Помните, что перекись лечебным препаратом не является и терапию заменить не может. Обычно травму промывают водой с мылом, обрабатывают перекисью, а затем наносят на поврежденную поверхность мазь и накладывают стерильную повязку. Ранозаживляющие препараты назначаются доктором. Будьте здоровы!

15.03.2016

Йод, зелёнка или перекись водорода?

На первый, взгляд может показаться, что йод и зеленка очень схожи по своему действию, однако это заблуждение. У каждого из них есть свое предназначение, но оба они антисептики и предотвращают инфицирование поврежденной поверхности.

Йод сушит кожу, а в излишнем количестве легко может ее сжечь. Главное правило, которое нужно соблюдать при использовании йода, это не наносить йод на открытую рану. Только вокруг повреждения, для того чтобы преградить путь микробам, или на неповрежденную кожу. А способность йода стимулировать приток крови к мягким тканям объясняет его использование для обработки ушибов, вывихов, различных припухлостей и отечностей (рисуется «йодная сетка»).

Зеленка или раствор бриллиантового зеленого — это более щадящий антисептик. Он стимулирует заживление, но не сушит кожу. Именно потому уместно нанесение зеленки на открытую рану, ее же рекомендуют тем, чья кожа слишком чувствительна. Еще одним свойством зеленки, в чем состоит ее преимущество перед йодом, является предотвращение нагноений. Обработка раны зеленкой препятствует притоку к ней лимфы и прочей влаги, застой которой и становится основой гнойника.

Обработка раны растворами йода или зеленки несколько усложняется диагностику повреждений, а потому максимум, что нужно сделать до осмотра врача, это обработать рану перекисью водорода.

Перекись водорода справедливо используют и для обработки неглубоких повреждений, а после считают необходимым нанести все те же йод или зеленку.

Интересно отметить, что одной лишь перекиси водорода может быть достаточно, чтобы остановить кровотечение, продезинфицировать поверхность и позволить организму самостоятельно справиться с заживлением.

В отличие от йода и зеленки перекись водорода не содержит спирта и никоим образом не провоцирует ожог. Действие перекиси состоит в выделении свободного кислорода, в процессе чего вымывается загрязнение из раны, а высокая концентрация кислорода сделает жизнедеятельность патогенных микроорганизмов невозможной на обработанном участке.
Единственный недостаток перекиси водорода заключается в том, что ее действие не столь длительно, как йода или зеленки, а потому процедуру обработки нужно регулярно повторять, а рану прикрывать повязкой.

Будьте здоровы!

 

Перекись водорода инструкция по применению: показания, противопоказания, побочное действие – описание Hydrogen peroxide р-р д/местн. и наружн. прим. 3%: фл. 40 мл или 100 мл 1, 50 или 80 шт.; фл. 500 мл 12 шт.; фл. 1000 мл 8 шт. (33316)

Раствор для местного и наружного применения прозрачный, бесцветный, без запаха.

100 мл
водорода пероксид*3 г

* в виде субстанции-раствора перекиси водорода 3%.

Вспомогательные вещества: натрия бензоат — 0.05 г, вода очищенная — до 100 мл.

40 мл — флаконы стеклянные (1) — пачки картонные.
40 мл — флаконы стеклянные (1) — пленка полиэтиленовая.
40 мл — флаконы-капельницы стеклянные (1) — пачки картонные.
40 мл — флаконы-капельницы стеклянные (1) — пленка полиэтиленовая.
40 мл — флаконы полиэтиленовые (1) — пачки картонные.
40 мл — флаконы полиэтиленовые (1) — пленка полиэтиленовая.
100 мл — флаконы стеклянные (1) — пачки картонные.
100 мл — флаконы стеклянные (1) — пленка полиэтиленовая.
100 мл — флаконы-капельницы стеклянные (1) — пачки картонные.
100 мл — флаконы-капельницы стеклянные (1) — пленка полиэтиленовая.
100 мл — флаконы полиэтиленовые (1) — пачки картонные.
100 мл — флаконы полиэтиленовые (1) — пленка полиэтиленовая.
40 мл — флаконы стеклянные (80) — коробки картонные (для стационаров).
40 мл — флаконы стеклянные (80) — пленка полиэтиленовая (для стационаров)
40 мл — флаконы-капельницы стеклянные (80) — коробки картонные (для стационаров).
40 мл — флаконы-капельницы стеклянные (80) — пленка полиэтиленовая (для стационаров).
40 мл — флаконы полиэтиленовые (80) — коробки картонные (для стационаров).
40 мл — флаконы полиэтиленовые (80) — пленка полиэтиленовая (для стационаров).
100 мл — флаконы стеклянные (50) — коробки картонные (для стационаров).
100 мл — флаконы стеклянные (50) — пленка полиэтиленовая (для стационаров).
100 мл — флаконы-капельницы стеклянные (50) — пачки картонные (для стационаров).
100 мл — флаконы-капельницы стеклянные (50) — пленка полиэтиленовая (для стационаров).
100 мл — флаконы полиэтиленовые (50) — коробки картонные (для стационаров).
100 мл — флаконы полиэтиленовые (50) — пленка полиэтиленовая (для стационаров).
500 мл — флаконы полиэтиленовые (12) — коробки картонные (для стационаров).
500 мл — флаконы полиэтиленовые (12) — пленка полиэтиленовая (для стационаров).
1000 мл — флаконы полиэтиленовые (8) — коробки картонные (для стационаров).
1000 мл — флаконы полиэтиленовые (8) — пленка полиэтиленовая (для стационаров).

Как правильно обработать рану перекисью водорода

Перекись водорода – это антисептический препарат, который безболезненно очищает открытые раны. Долгое время средство считалось абсолютно безопасным и применялось очень широко. Однако перекись

подходит не для всех видов ран.

Фото 1. Перекись водорода используют для обработки ран во всем мире. Источник: Flickr (brelvidge).

Что такое перекись водорода

Правильно название средства звучит как пероксид водорода – h3O2. Это один из простейших представителей пероксидов: выглядит жидкостью, не имеющей цвета, с легким привкусом металла. Растворяется в воде, эфире и спирте.

Пероксид водорода – это мощный окислитель, мгновенно вступающий в реакцию со множеством веществ, включая и те, что имеют биологическое происхождение. Это свойство обусловливает использование препарата не только в медицине, но и в промышленности. Однако концентрированный раствор взрывоопасен.

А на ткани биологического происхождения пероксид действует как дезинфицирующее средство.

Можно ли обрабатывать раны перекисью

Доктора рекомендуют применять перекись водорода для дезинфекции незначительных повреждений, поскольку средство уничтожает вредные бактерии. Разрешается также использовать перекись для очищения кожи, если под рукой нет мыла, потому что она растворяет чужеродные организму частицы и грязь.

Помимо этого, пероксид водорода можно применять:

  • для дезинфицирования гноящихся ран, поскольку препарат угнетает размножение бактерий;
  • для остановки кровотечения, если оно поверхностное – пена, что образуется при контакте с кожей, как бы закупоривает поврежденные мелкие сосуды;
  • для обработки язв, потому что перекись останавливает рост бактерий в них и предотвращает развитие инфекции;
  • для отделения от кожи присохшего бинта или повязки: выходит безболезненно и эффективно.

Можно применять перекись для обработки слизистой рта, например, при стоматите или гнойной ангине.

Но использовать перекись для промывания пролежней или обработки кожи лежачего пациента нельзя. Дело в том, что препарат абразивен, т.е. он приостанавливает регенерацию в тканях и общее заживление ран. 

По этой же причине применять это средство слишком часто или долго тоже нельзя.

Фото 2. В случае сомнения насчет использования перекиси, лучше прийти на перевязку в больницу. Источник: Flickr (The Maternal and Child Survival Program).

Обратите внимание! Пероксид водорода обладает подсушивающим кожу свойством, и при частом использовании кожа вокруг раны чешется и меняет цвет.

Воздействие средства на раны

В тканях человеческого организма содержится фермент каталаза. Контактируя с ним, перекись водорода начинает мгновенно разлагаться, образуя молекулярный кислород. Это очень редкое вещество, которое почти не встречается в природе, но является мощнейшим антисептиком.

Молекулярный кислород окисляет органические компоненты клеток, уничтожая все микроорганизмы, что попали в зону его воздействия. А пена образуется от того, что при разложении раствора перекиси кислород выделяется очень энергично.

Пена, в свою очередь, механически очищает раневую поверхность: вместе с ней уходят частички грязи, омертвевших тканей, гной и т.д.

Как обработать раны перекисью водорода

Концентрированный раствор перекиси не только взрывоопасен, он вызывает ожоги слизистой и кожи. Поэтому в медицинских целях используются 3% растворы и таблетки, где пероксид водорода соединен с гидроперитом (35%). Для обработки ран применяют 3% раствор. Перед употреблением нужно тщательно вымыть руки.

Средство используют следующими способами:

  • Смачивают в растворе перекиси водорода ткань без ворсинок, чтобы они не остались внутри поврежденного участка (поэтому нельзя использовать с этой целью вату), и легкими касаниями промокают раневую поверхность. Важно, чтобы площадь раны была обработана вся.

Обратите внимание! Лить средство прямо из бутыли запрещается! Потому что если рана глубокая, атомарный кислород может проникнуть в кровь, а это опасно для жизни.

  • Если нужно обработать нагноения на горле при ангине или воспаленные участки при стоматите, раствор необходимо развести водой (1:11), чтобы на слизистой не осталось ожога.
  • Для отделения от кожи присохшей повязки, перекись шприцом вводят под бинты, а когда начнется реакция и пойдет пена, повязку снимают. После обработки, раневую поверхность необходимо прикрыть чистой повязкой и закрепить ее пластырем.

При использовании перекиси нельзя одновременно применять щелочи, кислоты или пенициллин. И запрещается смешивать перекись и йод, потому что в ходе реакции образуется свободный йод, который способен вызвать химический ожог.

Если рана уже начала затягиваться, обрабатывать ее раствором тоже не рекомендуется. Это не только замедлит регенерацию, но и может спровоцировать ожог молодой кожи.

Противопоказания к использованию

Не рекомендуется применять перекись водорода при обильных артериальных или венозных кровотечениях, поскольку в этом случае средство не даст эффекта. 

Если у пациента аллергия на препарат, от его использования лучше отказаться.

Для полоскания горла или рта перекись нельзя применять беременным, потому что нет данных о том, влияет ли при этом средство на плод. Но запрета обрабатывать мелкие раны беременным женщинам нет.

Нежелательно использовать средство детям, не достигшим 12 лет.

Обратите внимание! Ни в коем случае перекись нельзя принимать внутрь, поскольку газ, что выделяется при образовании молекулярного кислорода, закупоривает сосуды: это неизбежно ведет к смерти.

Аналоги

НазваниеСпособ применения
ФурацилинТаблетки для приготовления раствора (10 таблеток на литр воды), которым обрабатывают раны на коже и на слизистой. Раствор помогает убрать присохшие повязки, предотвращает нагноение и уничтожает гной, если он уже есть в ране.
Хлоргексидина диглюконатЭто раствор, который используют после того, как раневая поверхность была очищена той же перекисью. Хлоргексидин уничтожает вирусы, бактерии и грибки. Им можно лечить и гнойные раны. Раствор надо набрать в шприц и аккуратно опрыснуть травмированный участок.
СпиртЕсли предел концентрации спирта — от 40% до 70%, то он становится дезинфицирующим средством. Обрабатывают им края очищенной раны, но на слизистую наносить нельзя.
МарганцовкаСлабый раствор (цвет не ярче бледно-розового) используют и для первичной обработки раневой поверхности, и для уже нагноившихся ран. Однако перед обработкой требуется каждый раз делать свежий раствор. Применять можно и на коже, и на слизистой.
ЗеленкаЭто красящий раствор антисептика на спиртовой основе. Обладает подсушивающим действием, но замедляет заживление, может вызвать ожог. Поэтому обрабатывают лишь края раны и до того, как в ней появится рубцовая ткань.
ФукорцинТоже красящий раствор, который нужно наносить по краям раневой поверхности как на коже, так и на слизистой.
ЙодСпиртовой раствор, способный вызвать ожог, поэтому обрабатывать можно только края раны. Имеет противопоказания — проблемы со щитовидной железой, болезни почек, дерматиты и т.д.

как обработать рану и можно ли это делать

Для очищения раневой поверхности используется 1 — 3 % раствор препарата наружно. Промывание требует применения 1% концентрации, а лечение ангины и стоматитов — 0,25%.

Перекись водорода успешно применяется для обеззараживания ран с возможным наличием гнойного содержимого. Это связано с тем, что во время взаимодействия средства со слизистыми и поврежденной тканью происходит высвобождение кислорода. Процесс вызывает очищение поврежденного участка и уничтожение органических соединений (белков, крови и гноя). Однако следует заметить, что Перекись водорода не проявляет стерилизующие свойства, поэтому во время ее использования концентрации патогенной флоры в ране снижается лишь временно.

Препарат не входит в список наркотичных и психотропных веществ.

Когда следует применять Перекись водорода

Перекись водорода относится к жизненно важным лекарственным препаратам и должна находиться в каждой домашней аптечке. Открытые раны, ссадины и порезы лучше всего сразу обработать. При таких повреждениях Перекись водорода не только продезинфицирует пораженную кожу, но и поможет остановить кровь. При ангине, тонзиллите и стоматите лекарство поможет обеззаразить слизистые и уничтожить патогенные организмы.

Перекись водорода используется в следующих случаях:

  • промывания, полоскания и орошения при стоматологических заболеваниях и тонзиллите;
  • обеззараживание ран;
  • остановка капиллярных кровотечений;
  • кровотечения из носа;
  • в гинекологии для спринцевания.

Когда нельзя использовать средство

Обработка раны Перекисью водорода не проводится при наличии у пациента индивидуальной непереносимости к составу препарата.

Повышенную осторожность следует соблюдать при использовании средства в случае наличия у пациентов декомпенсированных почечных и печеночных нарушений, гиперфункции щитовидной железы, а также дерматита герпетиформного типа.

Применение

Перекись водорода следует применять только наружным способом. Для обработки раны чаще всего применяется раствор препарата в концентрации от 1 до 3%.

Стерильный перевязочный материал смачивают в растворе с нужной концентрацией и обрабатывают рану. Во избежание загрязнения, тампон рекомендуется держать не пальцами, а пинцетом.

При необходимости разрешается струйное орошение раны медицинским препаратом.

Для приготовления 1% раствора для обработки раны, следует развести Перекись водорода (3%) с водой, в соотношении 1:3. То есть, взять одну часть 3% перекиси и к ней добавить две части воды.

Полоскания, орошения и спринцевания слизистой оболочки проводят с помощью 0,25 % раствора. Для этого необходимо смешать 3% Перекись водорода в пропорции 1:11 с водой.

Пациентам следует знать, что при полоскании горла Перекисью водорода, нельзя проглатывать лекарство.

Обработка ран, полоскание и орошение должно проводиться только свежеприготовленным раствором и с соблюдением стерильности всего процесса.

Побочные эффекты

Обработка ран Перекисью водорода может вызывать ощущение жжения и аллергические реакции, в частности: покраснение кожи и зуд. При развитии негативных проявлений рекомендуется прервать использование препарата и обратиться за консультацией к лечащему врачу, который заменит лекарственное средство эффективным аналогом.

Передозировка

При дезинфекции поврежденных слизистых дыхательной системы Перекисью водорода в высокой дозе может возникать повреждение слизистых (включая ожог) и развитие ларинго — и бронхоспазмов.

При случайном проникновении лекарства в пищевод возможно повреждение поверхности желудочно-кишечного тракта, патологический гемолиз, гемоглобинурия (наличие гемоглобина в моче).

Если внутрь организма попадает более 3 г Перекиси водорода, то исход может быть летальным. Поэтому при проведении процедур необходимо четко придерживаться инструкции. Для полоскания и орошения горла использовать только 0,25% раствор препарата.

Для терапии передозировки следует промыть желудок препаратами: тиосульфат натрия (0,5%) или гидрокарбонат натрия, а также внутривенно ввести тиосульфат натрия (30%) в количестве не превышающем 300 мл.

Особенности использования

Не следует использовать Перекись водорода для обработки ран совместно с окклюзионной (герметичной) повязкой даже в минимальной концентрации. В этом случае повышается риск развития побочных эффектов и ожога. Именно поэтому запрещается использование препарата для орошения и промывания полостей.

Следует помнить, что Перекисью водорода обработать рану можно только при отсутствии противопоказаний к лекарству. Процедуру следует проводить, соблюдая правила антисептики. После окончания срока хранения препарат использовать не разрешается, его необходимо утилизировать.

При полоскании средством ротовой полости возможно окисление зубных коронок и пломб.

Перекись водорода становится нестабильной в среде со щелочным показателем, при взаимодействии с металлами и некоторыми окислителями, а также при повышении температуры и освещенности.

Во время проведения процедур важно, чтобы средство не попадало в глаза и в пищеварительные пути, поскольку это может вызывать поражения слизистой, включая ожог.

При очищении ран и ротовой полости Перекисью водорода следует четко соблюдать инструкцию. Употребление средства в повышенной дозе может вызвать негативные побочные эффекты.

Применение Перекиси водорода не может гарантировать полное обеззараживание раны от инфекции, в частности от столбняка.

При повреждении тканей необходимо рану обработать препаратом Перекись водорода как можно быстрее. Это поможет продезинфицировать пораженную область и остановить кровь.

Лекарство не оказывает влияния на моторные функции человеческого организма и не вызывает головокружения.

Перекись водорода в концентрации 3% может применяться как антидот при отравлении марганцовкой (перманганатом калия). В этом случае используется комбинация препарата с уксусной кислотой (3%).

Использование в период беременности

Беременным и кормящим пациенткам разрешается применять Перекись водорода для проведения процедур промывания, обработки ран и полоскания горла только в том случае, если положительное воздействие будет превышать возможную опасность для внутриутробного развития плода и новорожденного.

Форма выпуска

Перекись водорода выпускается во флаконах 20 мл, 40 мл, 50 мл и 100 мл, а также в канистрах с объемом: 0,5л, 1 л, 3 л, 5 л, 10 л, 20 л — для стационарных медицинских учреждений.

Заключение

Перекись водорода — незаменимое средство для дезинфекции порезов, ссадин и ранок. Если ей обработать свежие царапины, которые кровоточат, то благодаря гемостатическому воздействию можно остановить кровь.

Такие препараты как Перекись водорода и йод должны находиться в каждой домашней аптечке. Поскольку мелкие бытовые травмы: царапины от домашних животных и ссадины у детей — достаточно частое явление.

Как же действует Перекись водорода на рану? При попадании лекарственного вещества на пораженные слизистые и кожу высвобождается активный кислород, что способствует образованию большого количества пены. Это дает возможность не только продезинфицировать поврежденную поверхность, но и размягчить пораженные ткани и отделить зоны с некрозом, во время обработки эти участки удаляются, что способствует скорейшему заживлению.

Перекись прекрасно проявляет себя не только для обеззараживания ран, в домашних условиях ее можно использовать для лечения тонзиллита, стоматита и других заболеваний ротовой полости и горла. В этом случае используется минимальная концентрация средства: 0,25%. Для обработки ротоглотки следует развести 3% раствор лекарства с водой, в соотношении 1:11, где 1 часть препарата следует размешать в 11 частях воды. Приготовленным средством следует полоскать горло несколько раз в день.

Для каждого использования необходимо готовить свежий раствор, поскольку он быстро теряет свои свойства.

Если у пациента возникают побочные эффекты в виде аллергических проявлений необходимо прервать проведение процедур и обратиться за консультацией к лечащему врачу.

Исходя из вышеописанного, можно сказать, что Перекись водорода универсальна. Но это совсем не так. Если применять Перекись водорода с раной, которая долго заживает, например, с трофическими язвами, то можно получить совершенно противоположный ожидаемому эффект.

Такая ситуация связана с тем, что при использовании препарата в высокой концентрации (3%) могут разрушаться вновь образованные клетки. Это значит, что скорость заживления тканей значительно снизится и повысится вероятность образования рубцов.

Хранение

Сроком годности препарата является период, равный 24 месяцам со дня производства. Средство необходимо хранить в местах, защищенных от солнечных лучей. При не соблюдении правил хранения Перекись водорода запрещается применять для дезинфекции ран и обработки ротоглотки, поскольку это не принесет пользы, но может вызвать негативные проявления со стороны организма пациента.

Источники:

Видаль: https://www.vidal.ru/drugs/hydrogen_peroxide__36359
ГРЛС: https://grls.rosminzdrav.ru/Grls_View_v2.aspx?routingGuid=598c3f69-91b2-45a1-8970-19bdc77500f8&t=

Нашли ошибку? Выделите ее и нажмите Ctrl + Enter

Страница не найдена — Портал Продуктов Группы РСС

Сообщите нам свой адрес электронной почты, чтобы подписаться на рассылку новостного бюллетеня. Предоставление адреса электронной почты является добровольным, но, если Вы этого не сделаете, мы не сможем отправить Вам информационный бюллетень. Администратором Ваших персональных данных является Акционерное Общество PCC Rokita, находящееся в Бжег-Дольном (ул. Сенкевича 4, 56-120 Бжег-Дольный, Польша ). Вы можете связаться с нашим инспектором по защите личных данных по электронной почте: .

Мы обрабатываем Ваши данные для того, чтобы отправить Вам информационный бюллетень — основанием для обработки является реализация нашей законодательно обоснованной заинтересованности или законодательно обоснованная заинтересованность третьей стороны – непосредственный маркетинг наших продуктов / продуктов группы PCC .

Как правило, Ваши данные мы будем обрабатывать до окончания нашего с Вами общения или же до момента, пока Вы не выразите свои возражения, либо если правовые нормы будут обязывать нас продолжать обработку этих данных, либо мы будем сохранять их дольше в случае потенциальных претензий, до истечения срока их хранения, регулируемого законом, в частности Гражданским кодексом.

В любое время Вы имеете право:

  • выразить возражение против обработки Ваших данных;
  • иметь доступ к Вашим данным и востребовать их копии;
  • запросить исправление, ограничение обработки или удаление Ваших данных;
  • передать Ваши персональные данные, например другому администратору, за исключением тех случаев, если их обработка регулируется законом и находится в интересах администратора;
  • подать жалобу Президенту Управления по защите личных данных.

Получателями Ваших данных могут быть компании, которые поддерживают нас в общении с Вами и помогают нам в ведении веб-сайта, внешние консалтинговые компании (такие как юридические, маркетинговые и бухгалтерские) или внешние специалисты в области IT, включая компанию Группы PCC .

Больше о том, как мы обрабатываем Ваши данные Вы можете узнать из нашего Полиса конфиденциальности.

Как правильно его использовать – Кливлендская клиника

Кто может забыть ощущение жжения, которое возникает, когда ваши родители наносят перекись водорода на поцарапанное колено?

Клиника Кливленда — некоммерческий академический медицинский центр. Реклама на нашем сайте помогает поддерживать нашу миссию. Мы не поддерживаем продукты или услуги, не принадлежащие Cleveland Clinic. Политика

Найденная в коричневой бутылке перекись водорода представляет собой антисептическую жидкость, которая в прошлом обычно использовалась для лечения порезов или других кожных ран, а также для уничтожения микробов.Однако перекись часто используется в немедицинских ситуациях, в том числе для очистки, дезинфекции и удаления пятен.

На самом деле перекись водорода имеет множество применений, некоторые из которых удивительны. Врач семейной медицины Сара Пикеринг Бирс, доктор медицинских наук, объясняет, почему перекись водорода полезно иметь под рукой.

Что такое перекись водорода?

Перекись водорода – это вода (h3O) с дополнительной молекулой кислорода (h3O2).

«Дополнительная молекула кислорода окисляется, и именно так перекись получает свою силу», — говорит доктор.Пиво. «Это окисление убивает микробы и обесцвечивает пористые поверхности, такие как ткани».

Когда вы используете перекись, используйте перекись медицинского назначения, крепость которой составляет 3%. Это означает, что это 97% воды и 3% перекиси. «Медицинский класс достаточно крепок для домашнего использования», — говорит доктор Бирс.

Вы также можете купить более концентрированную форму перекиси водорода, называемую пищевой перекисью, с концентрацией до 35%. Он называется «пищевым», потому что пищевая промышленность использует его для нескольких целей, таких как обработка и отбеливание определенных продуктов.

Однако доктор Бирс говорит пропустить это.

«Пищевая перекись может быть токсичной, если вы ее вдохнете или попадете на кожу. И эта высокая прочность не нужна для очистки и дезинфекции».

Когда не следует использовать перекись водорода

Перекись водорода можно использовать везде, от кухни до ванной. Но держите его подальше от ран и прыщей.

Не используйте перекись водорода на ранах

Пора увольнять перекись с дежурства по оказанию первой помощи.Давайте все вместе вздохнем с облегчением.

«Перекись водорода потеряла популярность в качестве очистителя ран», — говорит доктор Бирс. «Исследования показали, что он раздражает кожу. Это может помешать заживлению раны, принеся больше вреда, чем пользы».

Так чем вы пользуетесь при царапинах или порезах? «Хорошее мытье с мылом и большое количество чистой воды — это все, что вам нужно», — говорит доктор Бирс. После мытья промокните насухо чистым полотенцем. Затем нанесите мазь с антибиотиком и накройте повязкой.

Обратитесь за медицинской помощью при больших ранах и порезах, сильном кровотечении или если в ране застрял мусор.

Не наносите перекись водорода на прыщи

Пероксид убивает микробы, и вы можете лечить акне, содержащие бензоилпероксид. Но перекись водорода и перекись бензоила — это не одно и то же. Не используйте перекись водорода для лечения прыщей.

Как объясняет доктор Бирс, «перекись водорода может вызывать раздражение, что может усугубить угревую сыпь. И растворяется в воде.Таким образом, эффект уничтожения микробов на коже длится недолго». Бензоилпероксид образует пленку на коже, поэтому он может проникать в поры и продолжать бороться с бактериями акне в течение нескольких часов.

Используйте продукты с перекисью бензоила или салициловой кислотой при угревой сыпи. Если высыпания по-прежнему не проходят, обратитесь к врачу.

Способы применения перекиси водорода

Приготовьтесь к чудесному миру h302 — вы можете использовать перекись водорода, чтобы:

Дезинфекция

Перенесите свою перекись из аптечки в шкаф для чистки.Это отличная альтернатива отбеливателю, и ваш дом не будет пахнуть, как бассейн.

Используйте перекись в хорошо проветриваемом помещении и наденьте перчатки. «Есть вероятность токсичности при вдыхании, и это может вызвать раздражение кожи и глаз», — говорит доктор Бирс.

 Для дезинфекции сначала очистите область от видимой грязи или копоти с помощью простого мыла и воды. Затем опрыскайте поверхности смесью 50/50 перекиси и воды. Оставьте на пять минут или дольше. Промойте поверхности, которые соприкасаются с едой, например разделочные доски, но дайте другим поверхностям высохнуть на воздухе.

Перекись водорода отлично уничтожает микробы:

  • Ванны, раковины и души.
  • Счетчики.
  • Разделочные доски.
  • Дверные ручки.
  • Мусорные баки.
  • Зеркала.
  • Холодильники.
  • Туалеты.
  • Игрушки.

«Перекись убивает бактерии, грибки и вирусы», — объясняет доктор Бирс. «Это может пригодиться, если у вас нет дезинфицирующих салфеток или отбеливателя. Только будьте осторожны, чтобы не испачкать одежду или мебель, иначе они могут отбелиться.

Продукты для стирки

Ищете дешевый и эффективный способ удаления микробов и пестицидов с фруктов и овощей? Перекись может помочь.

Наполните большую миску или чистую раковину водой и добавьте четверть стакана перекиси. Промойте продукцию в смеси воды и перекиси, тщательно промойте чистой водой и высушите. Бонус: очистка продуктов перекисью может продлить срок их хранения.

Не применяйте этот метод очистки с помощью бытовых дезинфицирующих спреев или салфеток.Они содержат химические вещества, которые небезопасны для пищевых продуктов.

Удаление бытовых пятен

Пероксид обладает сильным отбеливающим эффектом, что делает его эффективным пятновыводителем. Но не используйте его на цветных вещах. И всегда сначала проверяйте его в скрытом месте.

Вот несколько способов, которыми перекись позволяет избавиться от надоедливых пятен и пятен:

  • Отбеливает ковер:  Если у вас белый или почти белый ковер, распылите перекись водорода непосредственно на пятна на ковре. Слегка потрите чистой тканью.
  • Удаляет пятна с одежды:  Замочите белую или не совсем белую одежду в ведре воды, смешанной с 1 чашкой перекиси, на 30 минут. Вы также можете добавить перекись непосредственно в отсек для отбеливателя в стиральной машине. Предупреждение: не пробуйте это на цветных тканях или винтажной одежде!
  • Осветляет затирку для плитки:  Распылите перекись непосредственно на затирку и оставьте на несколько минут. Потрите жесткой щеткой. При необходимости повторите.
  • Придает блеск керамической посуде:  Посыпьте кастрюли и сковородки пищевой содой и обрызгайте их перекисью.Оставьте их на 10 минут, промойте и высушите.

Чистые косметические инструменты и ногти

Пероксид не является продуктом для ухода за кожей, но он содержится в некоторых обычных продуктах, таких как отбеливающая зубная паста или жидкость для полоскания рта. «Перекись также входит в состав многих отбеливателей для зубов», — говорит доктор Бирс. Тем не менее, поговорите со своим стоматологом, прежде чем использовать отбеливающие средства, так как они могут вызвать повышенную чувствительность зубов.

Вы также можете использовать его для:

  • Санитарная обработка косметических инструментов и инструментов для ухода за ногтями: Используйте перекись для очистки кусачек для ногтей, пинцетов и щипцов для завивки ресниц.
  • Устранение пятен на ногтях:  Этот модный черный лак для ногтей оставил неприглядные пятна на ваших ногтях? Налейте миску с теплой водой, добавьте 3 столовые ложки перекиси и замочите ногти на три минуты.
  • Приготовьте жидкость для полоскания рта:  Полощите горло разбавленной перекисью, чтобы убить ежедневные микробы во рту, или купите жидкость для полоскания рта, которая содержит перекись (и, возможно, вкуснее). Не глотай! Прекратите использовать его, если заметите раздражение во рту.
  • Держите зубную щетку в чистоте:  Ограниченные исследования подтверждают это использование, но вы можете очистить зубную щетку, окунув ее в перекись на пять минут, чтобы убить микробы, а затем тщательно промыть водой.Если вы выберете этот метод, обязательно меняйте перекись каждый день и обязательно меняйте зубную щетку не реже одного раза в шесть месяцев.

Как безопасно и правильно хранить перекись водорода

Перекись водорода является химическим веществом. Это может вызвать серьезные побочные эффекты, если его проглотить. Храните его в закрытом шкафу в недоступном для детей и домашних животных месте.

Перед использованием перекиси проверьте срок годности. «Дополнительный кислород со временем распадается», — говорит доктор Бирс. «Как только он теряет свои пузыри, вы в основном остаетесь с водой.Храните перекись в ее оригинальной коричневой бутылке или темной бутылке с распылителем, чтобы не подвергать ее воздействию света. Если он больше не пенится, вылейте его в раковину и купите новую бутылку.

И будьте спокойны, зная, что вам больше никогда не придется терпеть его укусы.

Потенциальная терапевтическая мишень для ран?

Медицинская практика. 2017 авг; 26(4): 301–308.

Отделение ожоговой и пластической хирургии, больница Жуйцзинь, Медицинский факультет Шанхайского университета Цзяо Тонг, Шанхай, Китай

*Ивэнь Ню, отделение ожоговой и пластической хирургии, больница Жуйцзинь, Медицинский факультет Шанхайского университета Цзяо Тонг, Шанхай (Китай) , Электронная почта мок[email protected]

Получено 24 октября 2016 г .; Принято 5 апреля 2017 г.

Эта статья была процитирована другими статьями в PMC.

Abstract

Перекись водорода (H 2 O 2 ) представляет собой местный антисептик, используемый при очистке ран, который убивает патогены за счет окислительного взрыва и местного производства кислорода. Сообщалось, что H 2 O 2 представляет собой реактивную биохимическую молекулу, синтезируемую различными клетками, которая влияет на биологическое поведение посредством множества механизмов: изменения мембранного потенциала, образования новых молекул и изменения внутриклеточного окислительно-восстановительного баланса, что приводит к активации или инактивация различных путей передачи сигналов.Вопреки традиционной точке зрения, что H 2 O 2 , вероятно, повреждает ткани из-за своих высоких окислительных свойств, надлежащий уровень H 2 O 2 считается важным условием для нормального заживления ран. Хотя текущее клиническое применение H 2 O 2 по-прежнему ограничивается устранением микробного загрязнения, а иногда и гемостаза, лучшее понимание стерилизующей способности и регулирующей функции поведения клеток H 2 O 2 в ранах будет увеличить потенциал экзогенно увеличивать и манипулировать исцелением.

Ключевые слова: Перекись водорода, Заживление ран, Терапевтическая мишень

Значимость исследования

• В настоящее время эффективное и практическое лечение хронических ран все еще остается клинической проблемой. Основное клиническое применение перекиси водорода (H 2 O 2 ) заключается в очистке ран для дезинфекции в концентрации 3%. Сообщалось, что благодаря достижениям в исследованиях H 2 O 2 на уровне мкМ действует как сигнальная молекула, которая управляет окислительно-восстановительными сигнальными механизмами для улучшения заживления кожных ран.В этом обзоре обсуждалась роль H 2 O 2 в заживлении кожных ран и его будущее использование для лечения хронических ран.

Введение

Среди различных активных форм кислорода (АФК) перекись водорода (H 2 O 2 ) является относительно слабореактивной, что позволяет ей мигрировать дальше от места образования, чтобы служить сигнальной молекулой или второй посланник [1]. При повреждении кожи концентрация H 2 O 2 в окружающих тканях сразу возрастает, затем достигает пика и исчезает [2].Такое динамическое изменение уровня H 2 O 2 сопровождает ход заживления раны, и концентрация H 2 O 2 в ткани раны в определенной степени влияет на исход.

Заживление ран — это строго контролируемый процесс, в котором H 2 O 2 выполняет несколько функций. Помимо уничтожения микроорганизмов, H 2 O 2 также служит сигнальной молекулой или вторичным мессенджером, который доставляет сообщение о повреждении и стимулирует эффекторные клетки к ответу [3].H 2 O 2 регулирует экспрессию генов несколькими способами: синтез дополнительных факторов транскрипции; ингибирование комплекса убиквитин-Е3-лигазы или уменьшение факторов транскрипции, связанных с ним, для повышения стабильности фактора транскрипции; обнаружение/маскирование сигналов ядерной локализации; и модулирование сродства факторов транскрипции к дезоксирибонуклеиновой кислоте, коактиваторам или репрессорам [4]. Факторы транскрипции, которые получают модуляцию H 2 O 2 , разнообразны, включая Escherichia coli OxyR, NF-κB, активаторный белок-1, фактор, индуцируемый гипоксией-1, и т. д.Эти разнообразные действия могут объяснить широкое влияние H 2 O 2 [4].

Биологическое действие H 2 O 2 зависит от дозы в процессе заживления ран. Например, в относительно высоких концентрациях H 2 O 2 проявляет сильную окислительную и провоспалительную способность для дезинфекции раневой ткани; однако в сравнительно низких концентрациях H 2 O 2 способствует удалению остатков клеток и патогенов и способствует секреции цитокинов, способствующих регенерации тканей [5, 6, 7].Следовательно, в этом обзоре обсуждается роль H 2 O 2 в заживлении кожных ран и его потенциал в качестве средства для заживления хронических ран.

Продукция эндогенной перекиси водорода после повреждения кожи

H 2 O 2 вырабатывается в аэробных клетках как побочный продукт аэробного дыхания или результат ферментативных реакций в митохондриях, пероксисомах или других клеточных компартментах [8, 9]. Продукция H 2 O 2 поддерживается на низком уровне в основных условиях из-за его реакции с внутриклеточными антиоксидантными системами, включающими аскорбиновую кислоту, глутатион, каталазу и другие антиоксиданты [10].

При появлении кожной раны, согласно эксперименту, проведенному на рыбке данио путем механического повреждения ее хвостового плавника, было обнаружено устойчивое повышение концентрации H 2 O 2 на краю раны сразу после травмы [2]. Градиент H 2 O 2 привлекал лейкоциты к месту ранения, достигая пика примерно через 20 мин после повреждения, а затем постепенно снижаясь [2]. Следовательно, H 2 O 2 , образующийся после травмы, является хемотаксическим сигналом, а также инициатором воспаления.

Продуцирование H 2 O 2 после повреждения в основном опосредовано никотинамидадениндинуклеотидфосфат (NADPH) оксидазой, ферментом, который имеет не менее 7 изомеров (NOX 1 , NOX 2 , NOX 9015 , NOX 4 , NOX 5 , DUOX 1 , DUOX 2 ) [3, 11]. Он экспрессируется в основном на плазматической мембране и субклеточных мембранах, таких как мембрана митохондрий и эндоплазматического ретикулума [12, 13]. Активацию НАДФН-оксидазы могут вызывать множество факторов, таких как механическое повреждение, атака патогенов и воспалительные цитокины [11, 14].После активации НАДФН-оксидаза превращает одну молекулу кислорода в супероксид-анион (O 2 ), который быстро превращается в H 2 O 2 под действием супероксиддисмутазы [9].

Регуляторная роль перекиси водорода в заживлении ран

Стадия гемостаза

В кожных ранах часто появляются сосудистые разрушения, приводящие к кровопотере и уклонению от патогенов. Следовательно, гемостаз является первым шагом к восстановлению объема крови и уменьшению инфекции.H 2 O 2 способствует гемостазу с помощью нескольких вероятных механизмов, которые включают активацию латентного тканевого фактора клеточной поверхности, агрегацию тромбоцитов, стимуляцию активации тромбоцитарного фактора роста и регуляцию сократительной способности и барьерной функции эндотелиальных клеток [15].

Стадия воспалительной реакции

Воспалительная дезинфекция раневой ткани для подготовки подходящей среды для пролиферации клеток. H 2 O 2 в раневой ткани значительно увеличивается на стадии воспалительной реакции, действуя как мощный инициатор и стимулятор воспаления [16].

Первыми иммунными клетками, достигающими места раны, являются нейтрофилы и макрофаги. Они обладают мощной способностью поглощать ускользающие микроорганизмы и уничтожать их с помощью протеаз и эластазы в гранулах [17]. И АФК, и протеаза важны для эффективности уничтожения фагоцитов [18]. Генерация АФК вызывает приток ионов калия (К + ) в фагоцитарную вакуоль с сопутствующим повышением рН до уровня, оптимального для активности гранулярных протеаз [19].H 2 O 2 также индуцирует экспрессию мРНК макрофагального воспалительного белка-1α, макрофагального воспалительного белка-2 и макрофагального хемокинового белка-1, который действует как хемоаттрактант для рекрутирования фагоцитов [20, 21, 22]. Молекулы клеточной адгезии, такие как молекула межклеточной адгезии-1 и антиген-1, ассоциированный с функцией лейкоцитов, могут способствовать эндотелиальной адгезии лейкоцитов и способствовать лейкоцитоплании. Их экспрессия также повышается в присутствии H 2 O 2 [23, 24].Привлечение фагоцитов является важным шагом для инициации воспаления, в то время как недостаточная сборка фагоцитов часто приводит к инфекции, которая препятствует процессу заживления раны [25].

H 2 O 2 помогает в производстве некоторых молекул с более высоким окислительным потенциалом и более сильной бактерицидной способностью. Например, H 2 O 2 окисляет псевдогалогенидтиоцианат (SCN-) с образованием гипотиоцианита (HOSCN) под действием лактопероксидазы [26].Он также реагирует с ионами хлора с образованием хлорноватистой кислоты (HOCl) в присутствии миелопероксидазы [27]. И HOSCN, и HOCl весьма цитотоксичны. H 2 O 2 окисляет ион двухвалентного железа (Fe 2+ ) с образованием иона трехвалентного железа ( Fe 3+ ), гидроксильного радикала и гидроксильного аниона в реакции Фентона [28]. Гидроксильные радикалы обладают высокой агрессивностью и способны вызывать окисление клеточных макромолекул [29, 30].

Нейтрофильная внеклеточная ловушка (НЭТ) представляет собой эффективный бактерицидный механизм, первый этап которого зависит от АФК, образующихся в результате активации НАДФН-оксидазы [31, 32].У мышей с мутацией нейтрофильного цитозольного фактора 1 (неотъемлемый компонент комплекса NOX 2 ) отсутствовало образование NET, когда у них развился артрит [33]. Стадия праймирования доменов NACHT, LRR и PYD, содержащих инфламмасомную экспрессию белка 3 (NLRP3), также требует АФК [34]. NET и инфламмасома NLRP3 являются двумя эффективными механизмами защиты хозяина нейтрофилами. Как наиболее распространенная АФК, H 2 O 2 может быть участником.

H 2 O 2 способен усиливать экспрессию генов, связанных с воспалением, и синтез провоспалительных цитокинов.Экспрессия мРНК TNF-α в эпителиальных клетках среднего уха человека была значительно увеличена при обработке H 2 O 2 в концентрациях более 100 мкМ [35]. Внутрижелудочное введение 5% H 2 O 2 значительно повышало экспрессию мРНК TNF-α, IL-1β и IL-5 [36]. Он также индуцирует секрецию провоспалительных молекул TNF-α, макрофагального хемокинового белка-1, IL-8 и IFN-α в эпителиальных клетках дозозависимым образом [37].

Пациенты с хронической гранулематозной болезнью гиперчувствительны к различным бактериальным и грибковым инфекциям из-за нарушения активности НАДФН-оксидазы.Неспособность фагоцитов убивать проглоченные патогены или подвергаться апоптозу из-за отсутствия H 2 O 2 приводит к накоплению бактериосодержащих фагоцитов и развитию гранулем [38, 39]. Дефектное поколение H 2 O 2 способствует длительному воспалению и предполагает, что H 2 O 2 играет существенную роль в регуляции воспаления.

Стадия пролиферации клеток

После удаления инфекционных источников и клеточных фрагментов восстановление отсутствующей ткани становится последующей задачей, состоящей в основном из двух форм: реэпителизация и формирование грануляционной ткани.Чтобы началась реэпителизация, кератиноциты должны изменить свою способность к адгезии и подвижности, чтобы мигрировать из окружающей ткани в место раны и затем пролиферировать. Модель с царапинами, полученная из культуры кератиноцитов, показала, что H 2 O 2 способствует подвижности кератиноцитов при низкой концентрации около 500 мкМ без какой-либо потери жизнеспособности клеток [40]. Кератиноциты, обработанные H 2 O 2 в низкой концентрации, обладают усиленной активацией рецепторов эпидермального фактора роста и фосфорилированием ERK1/2, что объясняет их более высокий миграционный потенциал [6, 40].

Ангиогенез является ключевым этапом формирования грануляционной ткани. При местном нанесении 10 мМ H 2 O 2 на эксцизионные раны у крыс скорость закрытия ран значительно увеличивалась за счет сильного стимулирования ангиогенеза и регенерации соединительной ткани [5]. Продукты, производные циклооксигеназы, особенно простагландин E 2 , играют важную роль в миграции эндотелиальных клеток [41, 42], тогда как H 2 O 2 увеличивает синтез белка циклооксигеназы-2 в эндотелиальных клетках человека [43].In vitro H 2 O 2 может стимулировать макрофаги [44], кератиноциты сетчатки [45] и гладкомышечные клетки сосудов [46] к высвобождению фактора роста эндотелия сосудов, который обладает сильной способностью стимулировать ангиогенез.

У рыбок данио H 2 O 2 , полученные из клеток поврежденной кожи, усиливали индуцированную повреждением регенерацию периферических сенсорных аксонов, что помогает иннервировать заживающую кожу [47]. Аналогично, H 2 O 2 в концентрациях менее 500 мкМ усиливал высвобождение белка теплового шока (HSP70, HSP90) и фактора роста фибробластов из культивируемых астроцитов крысы, что способствует выживанию нейронов, росту нейритов и ангиогенезу [7]. ].Следовательно, H 2 O 2 , вероятно, благоприятен как для структурного, так и для функционального восстановления кожной раны.

Фаза ремоделирования тканей

Кожа плода на ранних сроках гестации может пройти безрубцовую репарацию при отсутствии фазы воспаления [48]. Таким образом, влияние, оказываемое H 2 O 2 на фазу воспаления, может оказывать влияние на ремоделирование тканей.

H 2 O 2 нарушает баланс между матриксными металлопротеиназами и тканевыми ингибиторами матриксных металлопротеиназ [49].Исследование с использованием мышиной модели заживления ран плода показало, что H 2 O 2 повышает экспрессию трансформирующего фактора роста (TGF)-1 и усиливает пролиферацию фибробластов [50]. Установлено, что NOX 2 участвует в дифференцировке дермальных фибробластов человека в миофибробласты в ответ на TGF-1 [51]. Также сообщается, что NOX 4 участвует в отложении коллагена из-за его стимулирующего эффекта TGF-β 1 [52] (рис. 1).

Роль перекиси водорода (H 2 O 2 ) в процессе заживления ран.ТФ, тканевой фактор; VEGF, фактор роста эндотелия сосудов; Цокс-2, циклооксигеназа-2; EFGR, рецептор эпидермального фактора роста; TGF-β 1 , трансформирующий фактор роста-β 1 .

Текущее клиническое использование перекиси водорода

Для клинического орошения H 2 O 2 обычно составляет 3% (975 мкМ), что одновременно окисляет белок, нуклеиновую кислоту, липиды нормальных здоровых клеток и микроорганизмов. [53]. Использование H 2 O 2 для дезинфекции ран продолжается и сегодня, но в литературе не было замечено положительного эффекта 3% H 2 O 2 для ускорения заживления ран [16, 54].Кроме того, способность H 2 O 2 убивать патогенные бактерии, такие как Pseudomonas aeruginosa , сомнительна, поскольку сообщается, что в их телах существуют каталазы [55]. H 2 O 2 также регулярно используется для подготовки костного ложа при эндопротезировании с использованием цемента, а также для достижения гемостаза в нейрохирургии [56, 57]. Он также является кровоостанавливающим средством в дополнение к местному адреналину у пациентов с известной дисфункцией тромбоцитов после иссечения ожога [58]. Не менее важно, что он имеет неотъемлемый риск образования фатальной кислородной эмболии [59, 60].

Были разработаны некоторые препараты, содержащие H 2 O 2 , для лечения кожных инфекций. В состав крема LHP®, 1% H 2 O 2 включен в стабилизированной форме, что обеспечивает медленную деградацию и пролонгированное действие [61]. Крем H 2 O 2 (Crystacide; Мифарм, Милан, Италия) представляет собой другую форму стабилизированного крема H 2 O 2 1%, которая показала хороший противомикробный эффект и переносимость кожей [62].Проспективное клиническое исследование показало, что промывание ран 2% H 2 O 2 на хронически колонизированных ожоговых ранах в течение 5 минут с последующей промывкой физиологическим раствором и трансплантацией повышает вероятность успешного приживления трансплантата по сравнению с традиционным методом обработки ран. и пересадка кожи [63].

Перекись водорода: значение для лечения хронических ран

Хронические раны характеризуются хроническим воспалением, которое также проявляется при многих хронических воспалительных заболеваниях, таких как сахарный диабет, ревматоидный артрит, заболевания пародонта, сердечно-сосудистые заболевания и воспалительные заболевания кишечника.Правильный баланс между образованием H 2 O 2 и механизмом детоксикации должен поддерживаться должным образом, чтобы избежать окислительных повреждений [64]. Дефектный апоптоз лейкоцитов и последующее удаление апоптотических клеток фагоцитами считается важным для инициации и распространения хронического воспаления. На модели антиген-индуцированного артрита сообщалось о роли производной NADPH-оксидазы H 2 O 2 в индукции апоптоза фагоцитов и разрешении воспаления [65].Эту функцию H 2 O 2 можно использовать для регулирования патогенного воспаления в хронических ранах.

Изменение концентрации H 2 O 2 в ткани раны влияет на скорость заживления. В мышиной модели заживления ран местное применение 50 мМ H 2 O 2 способствовало закрытию раны, в то время как 3% H 2 O 2 (980 мМ) замедляло заживление [16]. В мышиной модели эксцизионных ран 10 мМ H 2 O 2 способствовали закрытию ран, но 166 мМ замедляли его по сравнению с контрольными мышами [5].H 2 O 2 может проходить через плазматическую мембрану через специфический аквапорин, экспрессируемый на клеточных мембранах [8]. Пентафторбензолсульфонилфлуоресцеин (HPF), селективный химический сенсор H 2 O 2 , показал повышенный внутриклеточный окислительно-восстановительный уровень после экзогенной обработки H 2 O 2 [66]. При обработке личинок рыбок данио дикого типа в отсутствие повреждений 3 мМ H 2 O 2 и последующем сравнении их мРНК с необработанной группой было обнаружено, что 414 транскриптов значительно активируются, а 256 транскриптов значительно подавляются [66].Следовательно, применение экзогенных H 2 O 2 может привести к изменению клеточного поведения. По-видимому, заживление ран H 2 O 2 может быть в основном основано на моделях острого повреждения. Статей [37, 67] о поведении H 2 O 2 в хронических ранах немного. Аномальное воспаление, лежащее в основе хронической раны, может нарушать динамическое образование и клиренс H 2 O 2 в месте раны.

Гипоксия является ключевым признаком многих хронических ран.Сообщалось, что парциальное давление кислорода (PO 2 ) в неуточненных хронических ранах находится в диапазоне 5–20 мм рт. ст., тогда как типичные значения в здоровых тканях составляют 30–50 мм рт. ст. [68]. Продукция АФК, опосредованная НАДФН-связанной оксигеназой, является сильно зависимым от кислорода процессом: полумаксимальная скорость (км) для НАДФН-связанной оксигеназы с кислородом в качестве субстрата составляет значение PO 2 , равное 40–80 мм рт. ст. [67]. ]. Уровень АФК очень важен для антибактериальной активности нейтрофилов, поскольку он отвечает за респираторный взрыв нейтрофилов.Было показано, что in vitro нейтрофилы теряют способность к уничтожению бактерий при уровне PO 2 ниже 40 мм рт. ст. [67]. Эта потеря может быть связана с уменьшением АФК. Снижение антибактериальной активности нейтрофилов способствует инфицированию, что может частично объяснить значительную бактериальную колонизацию гипоксических хронических ран. Следовательно, длительная гипоксия может привести к снижению АФК. В качестве наиболее распространенной АФК уменьшение количества H 2 O 2 отрицательно повлияет на заживление ран, например, обострение инфекции, снижение секреции цитокинов и аномальное воспаление.

Некоторые виды лечения, вызывающие низкую концентрацию H 2 O 2 , в определенной степени ускоряют заживление ран. Нетепловая атмосферная плазма (НАП) использовалась в клинических условиях для ускорения заживления ран [69]. Некоторые изменения, вызванные NAP, были устранены каталазой, и ответы клеток на обработку NAP аналогичны инкубации в H 2 O 2 в аналогичной концентрации [69, 70], что подтверждается индуцированной плазмой глубокой внеклеточной ловушкой. образование (NET), которое может быть ингибировано присутствием каталазы.Однако добавление эквивалентной концентрации H 2 O 2 не может вызвать НЭО [71]. Формирование NET может включать другие компоненты, индуцированные плазмой, но H 2 O 2 является обязательным. В клинической практике применение NAP позволяет добиться значительного снижения бактериальной нагрузки на хронические раны и успешно удалить биопленку [72, 73]. Его стерилизующий эффект не зависит от вида возбудителя и может противостоять даже бактериям с множественной лекарственной устойчивостью [74].В некоторых сообщениях указывается, что NAP может повышать скорость пролиферации базальных кератиноцитов и эндотелиальных клеток [75, 76]. 350 подавленных и 400 активированных транскриптов кератиноцитов после обработки NAP подчеркнули его мощную способность влиять на экспрессию генов [77].

Современные лицензированные перевязочные материалы, содержащие медицинский мед, такие как Surgihoney® и Revamil®, вызвали новый интерес в связи с их клиническим потенциалом для обычного ухода за ранами [78, 79]. Лабораторные исследования показали, что низкие концентрации H 2 O 2 обычно образуются в этих медах при их разбавлении.Глюкозооксидаза (фермент, выделяемый в мед рабочими пчелами) окисляет глюкозу до глюконовой кислоты с выделением H 2 O 2 [78]. Противомикробной способности меда отчасти способствует H 2 O 2 . В исследовании, проверяющем антимикробную активность и максимальный выход H 2 O 2 среди 3 прототипов меда, между ними была линейная зависимость. Чем больше H 2 O 2 производит мед, тем сильнее он обладает антимикробной способностью [79].Сообщалось также, что некоторые виды биологически модифицированного меда стимулируют моноциты к секреции цитокинов, таких как TNF-α, IL-1β и IL-6, и это может быть связано с H 2 O 2 [80].

Перекись водорода может быть мишенью для лечения ран

Одним из приоритетов лечения хронических ран является формирование благоприятной микросреды, восприимчивой к терапии. Терапия, корректирующая H 2 O 2 до соответствующего уровня, может способствовать заживлению ран за счет улучшения окислительно-восстановительной среды в ране.

Однако для подтверждения этой гипотезы необходимы более фундаментальные эксперименты и клинические испытания. Во-первых, следует выяснить, есть ли отклонения в распределении и концентрации H 2 O 2 в хронических ранах. Во-вторых, новые методы регулирования H 2 O 2 более стабильно и точно должны быть дополнительно исследованы, чтобы сделать лечение более стандартизированным.

Возможное использование в будущем

Неконтролируемое производство или разложение H 2 O 2 может привести к повреждению тканей и связано с повышенной восприимчивостью к заболеваниям из-за несбалансированного окислительно-восстановительного гомеостаза.Дальнейшее изучение критической роли H 2 O 2 в инициации, развитии и разрешении воспаления может помочь в точной регуляции прогрессирования воспаления. Терапевтический эффект H 2 O 2 может не ограничиваться только хроническими ранами, но и применяться при других заболеваниях, характеризующихся патологическим воспалением.

Заключение

Нормальное заживление ран представляет собой тщательно контролируемый баланс деструктивных процессов, необходимых для удаления поврежденной ткани, и восстановительных процессов, ведущих к образованию новой ткани.Динамическое изменение H 2 O 2 в раневой ткани способствует сохранению баланса в процессе заживления раны. H 2 O 2 способствует окислительному стрессу, а также устраняет воспаление, что делает его двунаправленным регулятором воспаления. Неконтролируемое образование H 2 O 2 приведет к хроническому воспалению, которое способствует замедлению заживления ран. Благодаря дальнейшим исследованиям его иммунорегуляторной функции можно разработать некоторые методы лечения, использующие H 2 O 2 в качестве мишени для ускорения заживления хронических ран.

Заявление о раскрытии информации

Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов.

Благодарность

Мы хотели бы поблагодарить Фонд естественных наук Китая (81272111, 81671917) за их финансовую поддержку.

Примечания

Гуанья Чжу и Ци Ван внесли равный вклад в эту работу.

Ссылки

1. Appenzeller-Herzog C, Bánhegyi G, Bogeski I, et al. Транзит H 2 O 2 через мембрану эндоплазматического ретикулума не является вялым.Свободный Радик Биол Мед. 2016;94:157–160. [PubMed] [Google Scholar] 2. Niethammer P, Grabher C, Look AT и др. Тканевой градиент перекиси водорода способствует быстрому обнаружению ран у рыбок данио. Природа. 2009; 459:996–999. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 3. ван дер Влит А., Янссен-Хайнингер Ю.М. Перекись водорода как сигнал повреждения при повреждении и воспалении тканей: убийца, медиатор или мессенджер? J Cell Biochem. 2014; 115:427–435. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 4. Мариньо Х.С., Реал С., Кирн Л. и др.Восприятие перекиси водорода, передача сигналов и регуляция факторов транскрипции. Редокс Биол. 2014;2:535–562. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 5. Лу А.Е., Вонг Ю.Т., Хо Р. и др. Влияние перекиси водорода на заживление ран у мышей в связи с окислительным повреждением. ПЛОС Один. 2012;7:e49215. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]6. Loo AE, Halliwell B. Эффекты перекиси водорода в модели совместного культивирования кератиноцитов и фибробластов при заживлении ран. Biochem Biophys Res Commun. 2012; 423: 253–258.[PubMed] [Google Scholar] 7. Ито Дж., Нагаясу Ю., Хошикава М. и др. Усиление высвобождения FGF-1 вместе с цитозольными белками из астроцитов крыс под действием перекиси водорода. Brain Res. 2013;1522:12–21. [PubMed] [Google Scholar] 8. Bienert GP, Schjoerring JK, Jahn TP, et al. Мембранный транспорт перекиси водорода. Biochim Biophys Acta. 2006; 1758: 994–1003. [PubMed] [Google Scholar] 9. Маршалл Р., Тудзынски П. Активные формы кислорода в развитии и инфекционных процессах. Semin Cell Dev Biol. 2016; 57: 138–146.[PubMed] [Google Scholar] 10. Эспиноза-Диез С., Миге Л.В., Меннерих Д. и др. Антиоксидантные реакции и клеточные приспособления к окислительному стрессу. Редокс Биол. 2015;6:183–197. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 11. Пандай А., Саху М.К., Осорио Д. и др. НАДФН-оксидазы: обзор от структуры до патологий, связанных с врожденным иммунитетом. Cell Mol Immunol. 2015;12:5–23. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]12. Грэм К.А., Кулавец М., Оуэнс К.М. и соавт. НАДФН-оксидаза 4 представляет собой онкобелок, локализованный в митохондриях.Рак Биол Тер. 2010;10:223–231. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 13. Лауриндо Ф.Р., Араужо Т.Л., Абрахао Т.Б. и др. Nox-НАДФН-оксидазы и эндоплазматический ретикулум. Антиоксидный окислительно-восстановительный сигнал. 2014;20:2755–2775. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 14. Эль-Бенна Дж., Данг П.М., Гугеро-Посидало М.А. Примирование активации NADPH-оксидазы нейтрофилов: роль фосфорилирования p47phox и мобилизации NOX2 на плазматической мембране. Семин иммунопатол. 2008; 30: 279–289. [PubMed] [Google Scholar] 17.Ким М.Х., Ким М.Х., Лю В. и др. Динамика инфильтрации нейтрофилов при заживлении и инфицировании кожных ран с использованием флуоресцентной томографии. J Invest Dermatol. 2008; 128:1812–1820. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 18. Сегал А.В., Гейсов М., Гарсия Р. и соавт. Респираторный взрыв фагоцитирующих клеток связан с повышением рН вакуолей. Природа. 1981; 290:406–409. [PubMed] [Google Scholar] 19. Ривз Э.П., Лу Х., Джейкоб Х.Л. и др. Киллерная активность нейтрофилов опосредована активацией протеаз потоком К + .Природа. 2002; 416: 291–297. [PubMed] [Google Scholar] 20. Ши М.М., Чонг И., Годлески Дж.Дж. и др. Регуляция экспрессии гена воспалительного белка-2 макрофагов окислительным стрессом в альвеолярных макрофагах крысы. Иммунология. 1999; 97: 309–315. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 21. Ши М.М., Годлески Дж.Дж., Паулаускис Дж.Д. и др. Регуляция мРНК воспалительного белка-1альфа макрофагов окислительным стрессом. J Biol Chem. 1996; 271:5878–5883. [PubMed] [Google Scholar] 22. Джарамилло М., Оливье М. Перекись водорода индуцирует транскрипцию гена хемокина мышиного макрофага через регулируемые внеклеточным сигналом киназо- и циклический аденозин-5′-монофосфат (цАМФ) пути: участие NF-каппа B, активаторного белка 1 и ответного элемента цАМФ связывающий белок.Дж Иммунол. 2002; 169:7026–7038. [PubMed] [Google Scholar] 23. Fraticelli A, Serrano CV, Jr, Bochner BS, et al. Перекись водорода и супероксид модулируют экспрессию молекул адгезии лейкоцитов и эндотелиальную адгезию лейкоцитов. Biochim Biophys Acta. 1996; 1310: 251–259. [PubMed] [Google Scholar] 24. Лу Х., Юкер К., Баллантайн С. и др. Перекись водорода индуцирует LFA-1-зависимую адгезию нейтрофилов к сердечным миоцитам. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2000; 278:H835–H842. [PubMed] [Google Scholar] 25.Мохд Насир Н., Ли Б.К., Яп С.С. и др. Инактивация холодной плазмой хронических раневых бактерий. Arch Biochem Biophys. 2016; 605:76–85. [PubMed] [Google Scholar] 26. Вейкстрем-Фрей С., Эль-Чемали С., Али-Рачеди Р. и др. Лактопероксидаза и защита дыхательных путей человека. Am J Respir Cell Mol Biol. 2003; 29: 206–212. [PubMed] [Google Scholar] 27. Шремл С., Ландталер М., Шеферлинг М. и др. Новая звезда на H 2 O 2 ризоне заживления ран? Exp Dermatol. 2011;20:229–231. [PubMed] [Google Scholar] 28.Товмасян А., Шэн Х., Вейтнер Т. и др. Дизайн, механизм действия, биодоступность и терапевтические эффекты окислительно-восстановительных модуляторов на основе Mn-порфирина. Медицинская практика. 2013;22:103–130. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 29. Канта Дж. Роль перекиси водорода и других активных форм кислорода в заживлении ран. Acta Medica (Градец Кралове) 2011; 54:97–101. [PubMed] [Google Scholar] 30. Шафер М., Вернер С. Окислительный стресс при нормальном и поврежденном заживлении ран. Pharmacol Res. 2008; 58: 165–171.[PubMed] [Google Scholar] 31. Купер П.Р., Палмер Л.Дж., Чаппл И.Л. Нейтрофильные внеклеточные ловушки как новая парадигма врожденного иммунитета: друг или враг? Пародонтология 2000. 2013;63:165–197. [PubMed] [Google Scholar] 32. Муньос-Каро Т., Ленднер М., Даугшис А. и др. NADPH-оксидаза, MPO, NE, ERK1/2, p38 MAPK и приток Ca 2+ необходимы для образования NET, индуцированного Cryptosporidium parvum . Дев Комп Иммунол. 2015;52:245–254. [PubMed] [Google Scholar] 33. Холмдал Р., Сарейла О., Олссон Л.М. и др.Полиморфизм Ncf1 выявляет окислительную регуляцию аутоиммунного хронического воспаления. Immunol Rev. 2016; 269: 228–247. [PubMed] [Google Scholar] 34. Бауэрнфайнд Ф., Барток Э., Ригер А. и др. Передовой опыт: ингибиторы активных форм кислорода блокируют праймирование, но не активацию инфламмасомы NLRP3. Дж Иммунол. 2011; 187: 613–617. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 35. Сонг Джей Джей, Лим Х.В., Ким К. и др. Влияние фенетилового эфира кофейной кислоты (CAPE) на индуцированные H 2 O 2 окислительные и воспалительные реакции в эпителиальных клетках среднего уха человека.Int J Pediatr Оториноларингол. 2012; 76: 675–679. [PubMed] [Google Scholar] 36. Цуй З., Инь Дж., Ван Л. и др. Эффекты экспрессии провоспалительных цитокинов и антиоксидантов в тощей кишке мышей, индуцированные перекисью водорода. Int Immunopharmacol. 2016;31:9–14. [PubMed] [Google Scholar] 37. Брайан Н., Ахсвин Х., Смарт Н. и др. Активные формы кислорода (АФК) — семейство определяющих судьбу молекул, играющих ключевую роль в конструктивном воспалении и заживлении ран. Eur Cell Mater. 2012; 24: 249–265. [PubMed] [Google Scholar] 40.Лу А.Е., Хо Р., Холливелл Б. Механизм миграции кератиноцитов, вызванной перекисью водорода, в модели с царапинами. Свободный Радик Биол Мед. 2011; 51:884–892. [PubMed] [Google Scholar]41. Кувано Т., Накао С., Ямамото Х. и др. Циклооксигеназа 2 является ключевым ферментом ангиогенеза, индуцированного воспалительными цитокинами. FASEB J. 2004; 18:300–310. [PubMed] [Google Scholar] 42. Рао Р., Редха Р., Масиас-Перес И. и др. Рецептор простагландина E2-EP4 способствует миграции эндотелиальных клеток посредством активации ERK и ангиогенеза in vivo.J Biol Chem. 2007; 282:16959–16968. [PubMed] [Google Scholar] 43. Элигини С., Ареназ И., Барбьери С.С. и др. Циклооксигеназа-2 опосредует заживление ран, вызванное перекисью водорода, в эндотелиальных клетках человека. Свободный Радик Биол Мед. 2009;46:1428–1436. [PubMed] [Google Scholar]44. Чо М., Хант Т.К., Хуссейн М.З. и др. Перекись водорода стимулирует высвобождение фактора роста эндотелия сосудов макрофагов. Am J Physiol Heart Circ Physiol. 2001; 280:h3357–h3363. [PubMed] [Google Scholar]45. Браухле М., Фанк Дж. О., Кинд П. и др.Ультрафиолет B и H 2 O 2 являются мощными индукторами экспрессии сосудистого эндотелиального фактора роста в культивируемых кератиноцитах. J Biol Chem. 1996; 271:21793–21797. [PubMed] [Google Scholar] 46. Рюф Дж., Ху З.И., Инь Л.И. и др. Индукция фактора роста эндотелия сосудов в поврежденных баллоном артериях бабуинов. Новая роль активных форм кислорода при атеросклерозе. Circ Res. 1997; 81: 24–33. [PubMed] [Google Scholar]47. Ригер С., Сагасти А. Перекись водорода способствует регенерации периферических сенсорных аксонов в коже рыбок данио, вызванных травмами.PLoS биол. 2011;9:e1000621. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 48. Longaker MT, Whitby DJ, Adzick NS и др. Исследования по заживлению ран плода, VI. Раны плода во втором и начале третьего триместра демонстрируют быстрое отложение коллагена без образования рубца. J Pediatr Surg. 1990; 25: 63–68. обсуждение 68–69. [PubMed] [Google Scholar]49. Hemmerlein B, Johanns U, Halbfass J, et al. Баланс между ММП-2/-9 и ТИМП-1/-2 смещается в сторону ММП при почечно-клеточном раке и может еще больше нарушаться перекисью водорода.Int J Oncol. 2004; 24:1069–1076. [PubMed] [Google Scholar]50. Wilgus TA, Bergdall VK, Dipietro LA, et al. Перекись водорода нарушает бесрубцовое заживление ран плода. Восстановление ран. 2005; 13: 513–519. [PubMed] [Google Scholar] 51. Чжан Г.Ю., Ву Л.К., Дай Т. и др. НАДФН-оксидаза-2 является ключевым регулятором дермальных фибробластов человека: потенциальная терапевтическая стратегия для лечения фиброза кожи. Exp Dermatol. 2014;23:639–644. [PubMed] [Google Scholar] 52. Чан Э.К., Пешавария Х.М., Лю Г.С. и др. Nox4 модулирует выработку коллагена, стимулируемую трансформирующим фактором роста β 1 in vivo и in vitro.Biochem Biophys Res Commun. 2013; 430:918–925. [PubMed] [Google Scholar] 53. Ямада Ю., Мокудай Т., Накамура К. и др. Местная обработка полости рта и поврежденной кожи новой системой дезинфекции с использованием фотолиза перекиси водорода у крыс. J Toxicol Sci. 2012; 37: 329–335. [PubMed] [Google Scholar]54. Копье М. Очищение ран: решения и методы. Пласт Сур Нурс. 2011;31:29–31. [PubMed] [Google Scholar] 55. Томас Г.В., Раэль Л.Т., Бар-Ор Р. и др. Механизмы замедления заживления ран обычно используемыми антисептиками.J Trauma. 2009;66:82–90. обсуждение 90–81. [PubMed] [Google Scholar] 56. Кольт Д.Д., Робин Д.А., Карр А.М. и др. Безопасность реинфузии аутологичной дренажной крови после тотального эндопротезирования коленного сустава, приготовленной с перекисью водорода. Колено. 2007; 14:12–18. [PubMed] [Google Scholar]57. Экленд Д.С., Яп В., Экленд М.Л. и др. Пульс-лаважная чистка щеткой с последующей марлевой повязкой перекиси водорода для подготовки костного ложа при цементном тотальном эндопротезировании тазобедренного сустава: модель на быке. J Orthop Surg (Гонконг) 2009; 17: 296–300. [PubMed] [Google Scholar] 58.Potyondy L, Lottenberg L, Anderson J, et al. Применение перекиси водорода для достижения кожного гемостаза после иссечения ожога у больного с тромбоцитарной дисфункцией. J Burn Care Res. 2006; 27: 99–101. [PubMed] [Google Scholar] 59. Битти С., Гарри Л.Э., Гамильтон С.А. и др. Остановка сердца после промывания раны груди перекисью водорода. J Plast Reconstr Aestet Surg. 2010; 63:e253–e254. [PubMed] [Google Scholar] 60. Мут М., Йемиши М., Гурсой-Оздемир Ю. и др. Инсульт, вызванный перекисью водорода: выяснение механизма in vivo.Дж Нейрохирург. 2009; 110: 94–100. [PubMed] [Google Scholar]61. Тот Т., Брострём Х., Баверуд В. и др. Оценка крема LHP(R) (1% перекиси водорода) по сравнению с вазелином и необработанным контролем на открытых ранах у здоровых лошадей: рандомизированное слепое контрольное исследование. Acta Vet Scand. 2011;53:45. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]62. Капицци Р., Ланди Ф., Милани М. и др. Переносимость кожей и эффективность комбинированной терапии кремом, стабилизированным перекисью водорода, и гелем адапалена по сравнению с кремом бензоилпероксида и гелем адапалена при распространенных акне.Рандомизированное, замаскированное исследователем, контролируемое исследование. Бр Дж Дерматол. 2004; 151:481–484. [PubMed] [Google Scholar]63. Мохаммади А.А., Сейед Джафари С.М., Киасат М. и др. Эффективность санации и промывания раны 2% перекисью водорода на трансплантате при хронически-колонизированных ожоговых ранах; рандомизированное контролируемое клиническое исследование. Бернс. 2013;39:1131–1136. [PubMed] [Google Scholar]64. De Deken X, Corvilain B, Dumont JE и др. Роль перекиси водорода, опосредованной DUOX, в метаболизме, защите хозяина и передаче сигналов.Антиоксидный окислительно-восстановительный сигнал. 2014;20:2776–2793. [PubMed] [Google Scholar]65. Лопес Ф., Коэльо Ф.М., Коста В.В. и др. Разрешение нейтрофильного воспаления с помощью H 2 O 2 при антиген-индуцированном артрите. Ревматоидный артрит. 2011;63:2651–2660. [PubMed] [Google Scholar]66. Лиссе Т.С., Кинг Б.Л., Ригер С. Сравнительное транскриптомное профилирование сигнальных сетей перекиси водорода в кератиноцитах рыбок данио и человека: значение для сохранения, миграции и заживления ран. Научный доклад 2016; 6: 20328.[Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]67. Schreml S, Szeimies RM, Prantl L, et al. Кислород при заживлении острых и хронических ран. Бр Дж Дерматол. 2010; 163: 257–268. [PubMed] [Google Scholar] 68. Кендалл А.С., Whatmore JL, Winyard PG и др. Гипербарическая оксигенация снижает адгезию нейтрофилов к эндотелию при хронических раневых состояниях за счет S-нитрозирования. Восстановление ран. 2013;21:860–868. [PubMed] [Google Scholar]69. Бекешус С., Шмидт А., Велтманн К.-Д. и соавт. Плазменная струя KINPen – мощное средство для заживления ран.Клин Плазма Мед. 2016;4:19–28. [Google Академия]70. Бекешус С., Колата Дж., Винтерборн С. и др. Перекись водорода: центральный игрок в окислительном стрессе, вызванном физической плазмой, в клетках крови человека. Free Radic Res. 2014; 48: 542–549. [PubMed] [Google Scholar]71. Бекешус С., Винтерборн С.С., Колата Дж. и др. Образование нейтрофильных внеклеточных ловушек вызывается в ответ на холодную физическую плазму. J Leukoc Biol. 2016; 100:791–799. [PubMed] [Google Scholar]72. Исбари Г., Хайнлин Дж., Симидзу Т. и др. Успешное и безопасное использование 2-минутной холодной атмосферной аргоновой плазмы при хронических ранах: результаты рандомизированного контролируемого исследования.Бр Дж Дерматол. 2012; 167:404–410. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 73. Фрике К., Кобан И., Тресп Х. и др. Плазма атмосферного давления: высокоэффективный инструмент для эффективного удаления биопленок. ПЛОС Один. 2012;7:e42539. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]74. Daeschlein G, Scholz S, Ahmed R, et al. Обеззараживание кожных покровов низкотемпературной плазменной струей атмосферного давления и плазмой диэлектрического барьерного разряда. Джей Хосп заражает. 2012; 81: 177–183. [PubMed] [Google Scholar]75. Хассе С., Дуонг Тран Т., Хан О. и др.Индукция пролиферации базальных эпидермальных кератиноцитов холодной плазмой атмосферного давления. Клин Эксп Дерматол. 2016;41:202–209. [PubMed] [Google Scholar]76. Калгатги С., Фридман Г., Фридман А. и др. Пролиферация эндотелиальных клеток усиливается низкой дозой нетермической плазмы за счет высвобождения фактора роста фибробластов-2. Энн Биомед Инж. 2010; 38: 748–757. [PubMed] [Google Scholar] 77. Шмидт А., Дитрих С., Штойер А. и др. Нетепловая плазма активирует кератиноциты человека путем стимуляции антиоксидантных путей и путей фазы II.J Biol Chem. 2015; 290:6731–6750. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar] 78. Купер Р. Мед как эффективное антимикробное средство для лечения хронических ран: есть ли ему место в современной медицине? Рез. по лечению хронических ран. 2014;1:15. [Google Академия] 79. Кук Дж., Драйден М., Паттон Т. и др. Антимикробная активность модифицированных прототипов меда, которые генерируют активные формы кислорода (АФК) — перекись водорода. BMC Res Notes. 2014;8:20. [Бесплатная статья PMC] [PubMed] [Google Scholar]80. Тонкс А.Дж., Купер Р.А., Джонс К.П. и др.Мед стимулирует выработку воспалительных цитокинов моноцитами. Цитокин. 2003; 21: 242–247. [PubMed] [Google Scholar]

перекись водорода: потенциальная терапевтическая мишень для ран — Полный текст — Медицинские принципы и практика 2017, Vol. 26, № 4

Абстрактные

Перекись водорода (H 2 O 2 ) представляет собой местный антисептик, используемый для очистки ран, который убивает патогены за счет окислительного взрыва и местного производства кислорода.Сообщалось, что H 2 O 2 представляет собой реактивную биохимическую молекулу, синтезируемую различными клетками, которая влияет на биологическое поведение посредством множества механизмов: изменения мембранного потенциала, образования новых молекул и изменения внутриклеточного окислительно-восстановительного баланса, что приводит к активации или инактивация различных путей передачи сигналов. Вопреки традиционной точке зрения, что H 2 O 2 , вероятно, повреждает ткани из-за своих высоких окислительных свойств, надлежащий уровень H 2 O 2 считается важным условием для нормального заживления ран.Хотя текущее клиническое применение H 2 O 2 по-прежнему ограничивается устранением микробного загрязнения, а иногда и гемостаза, лучшее понимание стерилизующей способности и регулирующей функции поведения клеток H 2 O 2 в ранах будет увеличить потенциал экзогенно увеличивать и манипулировать исцелением.

© 2017 S. Karger AG, Базель


Значимость исследования

• В настоящее время эффективное и практическое лечение хронических ран по-прежнему представляет собой клиническую проблему.Основное клиническое применение перекиси водорода (H 2 O 2 ) заключается в очистке ран для дезинфекции в концентрации 3%. Сообщалось, что благодаря достижениям в исследованиях H 2 O 2 на уровне мкМ действует как сигнальная молекула, которая управляет окислительно-восстановительными сигнальными механизмами для улучшения заживления кожных ран. В этом обзоре обсуждалась роль H 2 O 2 в заживлении кожных ран и его будущее использование для лечения хронических ран.

Введение

Среди различных активных форм кислорода (АФК) перекись водорода (H 2 O 2 ) является относительно слабореактивной, что позволяет ей мигрировать дальше от места образования, чтобы служить сигнальной молекулой или второй посланник [1].При повреждении кожи концентрация H 2 O 2 в окружающих тканях сразу возрастает, затем достигает пика и исчезает [2]. Такое динамическое изменение уровня H 2 O 2 сопровождает ход заживления раны, и концентрация H 2 O 2 в ткани раны в определенной степени влияет на исход.

Заживление ран — это строго контролируемый процесс, в котором H 2 O 2 выполняет несколько функций.Помимо уничтожения микроорганизмов, H 2 O 2 также служит сигнальной молекулой или вторичным мессенджером, который доставляет сообщение о повреждении и стимулирует эффекторные клетки к ответу [3]. H 2 O 2 регулирует экспрессию генов несколькими способами: синтез дополнительных факторов транскрипции; ингибирование комплекса убиквитин-Е3-лигазы или уменьшение факторов транскрипции, связанных с ним, для повышения стабильности фактора транскрипции; обнаружение/маскирование сигналов ядерной локализации; и модулирование сродства факторов транскрипции к дезоксирибонуклеиновой кислоте, коактиваторам или репрессорам [4].Факторы транскрипции, которые получают модуляцию H 2 O 2 , разнообразны, включая Escherichia coli OxyR, NF-κB, активаторный белок-1, фактор-1, индуцируемый гипоксией, и т. д. Эти разнообразные действия могут объяснить широкое воздействие H 2 O 2 [4].

Биологическое действие H 2 O 2 зависит от дозы в процессе заживления ран. Например, в относительно высоких концентрациях H 2 O 2 проявляет сильную окислительную и провоспалительную способность для дезинфекции раневой ткани; однако в сравнительно низких концентрациях H 2 O 2 способствует удалению остатков клеток и патогенов и способствует секреции цитокинов, которые способствуют регенерации тканей [5,6,7].Следовательно, в этом обзоре обсуждается роль H 2 O 2 в заживлении кожных ран и его потенциал в качестве средства для заживления хронических ран.

Продукция эндогенной перекиси водорода после повреждения кожи

H 2 O 2 вырабатывается в аэробных клетках как побочный продукт аэробного дыхания или результат ферментативных реакций в митохондриях, пероксисомах или других клеточных компартментах [8, 9]. Продукция H 2 O 2 поддерживается на низком уровне в основных условиях из-за его реакции с внутриклеточными антиоксидантными системами, включающими аскорбиновую кислоту, глутатион, каталазу и другие антиоксиданты [10].

При появлении кожной раны, согласно эксперименту, проведенному на рыбке данио путем механического повреждения ее хвостового плавника, было обнаружено устойчивое повышение концентрации H 2 O 2 на краю раны сразу после травмы [2]. Градиент H 2 O 2 привлекал лейкоциты к месту ранения, достигая пика примерно через 20 мин после повреждения, а затем постепенно снижаясь [2]. Следовательно, H 2 O 2 , образующийся после травмы, является хемотаксическим сигналом, а также инициатором воспаления.

Продуцирование H 2 O 2 после повреждения в основном опосредуется никотинамидадениндинуклеотидфосфат (NADPH) оксидазой, ферментом, имеющим не менее 7 изомеров (NOX 1 , NOX 2 , 5 NOX 3011 , NOX 4 , NOX 5 , DUOX 1 и DUOX 2 ) [3,11]. Он экспрессируется в основном на плазматической мембране и субклеточных мембранах, таких как мембрана митохондрий и эндоплазматического ретикулума [12,13]. Активацию НАДФН-оксидазы могут вызывать несколько факторов, таких как механическое повреждение, атака патогенов и воспалительные цитокины [11,14].После активации НАДФН-оксидаза превращает одну молекулу кислорода в супероксид-анион (О 2 ), который под действием супероксиддисмутазы быстро превращается в Н 2 О 2 [9].

Регуляторная роль перекиси водорода в заживлении ран

Стадия гемостаза

В кожных ранах часто появляются сосудистые разрушения, приводящие к кровопотере и уклонению от патогенов. Следовательно, гемостаз является первым шагом к восстановлению объема крови и уменьшению инфекции.H 2 O 2 способствует гемостазу с помощью нескольких вероятных механизмов, которые включают активацию латентного тканевого фактора клеточной поверхности, агрегацию тромбоцитов, стимуляцию активации тромбоцитарного фактора роста и регуляцию сократительной способности и барьерной функции эндотелиальных клеток [15].

Стадия воспалительной реакции

Воспалительная дезинфекция раневой ткани для подготовки подходящей среды для пролиферации клеток. H 2 O 2 в раневой ткани значительно увеличивается на стадии воспалительной реакции, действуя как мощный инициатор и стимулятор воспаления [16].

Первыми иммунными клетками, достигающими места раны, являются нейтрофилы и макрофаги. Они обладают мощной способностью поглощать ускользающие микроорганизмы и уничтожать их с помощью протеаз и эластазы в гранулах [17]. И АФК, и протеаза важны для эффективности уничтожения фагоцитов [18]. Генерация АФК вызывает приток ионов калия (К + ) в фагоцитарную вакуоль с сопутствующим повышением рН до уровня, оптимального для активности гранулярных протеаз [19].H 2 O 2 также индуцирует экспрессию мРНК макрофагального воспалительного белка-1α, макрофагального воспалительного белка-2 и макрофагального хемокинового белка-1, который действует как хемоаттрактант для рекрутирования фагоцитов [20,21,22]. Молекулы клеточной адгезии, такие как молекула межклеточной адгезии-1 и антиген-1, ассоциированный с функцией лейкоцитов, могут способствовать эндотелиальной адгезии лейкоцитов и способствовать лейкоцитоплании. Их экспрессия также повышается в присутствии H 2 O 2 [23,24].Привлечение фагоцитов является важным шагом для инициации воспаления, в то время как недостаточная сборка фагоцитов часто приводит к инфекции, которая препятствует процессу заживления раны [25].

H 2 O 2 помогает в производстве некоторых молекул с более высоким окислительным потенциалом и более сильной бактерицидной способностью. Например, H 2 O 2 окисляет псевдогалогенидтиоцианат (SCN-) с образованием гипотиоцианита (HOSCN) под действием лактопероксидазы [26].Он также реагирует с ионами хлора с образованием хлорноватистой кислоты (HOCl) в присутствии миелопероксидазы [27]. И HOSCN, и HOCl весьма цитотоксичны. H 2 O 2 окисляет ион двухвалентного железа (Fe 2+ ) с образованием иона трехвалентного железа ( Fe 3+ ), гидроксильного радикала и гидроксильного аниона в реакции Фентона [28]. Гидроксильные радикалы очень агрессивны и способны вызывать окисление клеточных макромолекул [29,30].

Нейтрофильная внеклеточная ловушка (НЭТ) представляет собой эффективный бактерицидный механизм, первый этап которого зависит от АФК, образующихся в результате активации НАДФН-оксидазы [31,32].У мышей с мутацией нейтрофильного цитозольного фактора 1 (неотъемлемый компонент комплекса NOX 2 ) отсутствовало образование NET, когда у них развился артрит [33]. Стадия праймирования доменов NACHT, LRR и PYD, содержащих инфламмасомную экспрессию белка 3 (NLRP3), также требует АФК [34]. NET и инфламмасома NLRP3 являются двумя эффективными механизмами защиты хозяина нейтрофилами. Как наиболее распространенная АФК, H 2 O 2 может быть участником.

H 2 O 2 способен усиливать экспрессию генов, связанных с воспалением, и синтез провоспалительных цитокинов.Экспрессия мРНК TNF-α в эпителиальных клетках среднего уха человека была значительно увеличена при обработке H 2 O 2 в концентрациях более 100 мкМ [35]. Внутрижелудочное введение 5% H 2 O 2 значительно повышало экспрессию мРНК TNF-α, IL-1β и IL-5 [36]. Он также индуцирует секрецию провоспалительных молекул TNF-α, макрофагального хемокинового белка-1, IL-8 и IFN-α в эпителиальных клетках дозозависимым образом [37].

Пациенты с хронической гранулематозной болезнью гиперчувствительны к различным бактериальным и грибковым инфекциям из-за нарушения активности НАДФН-оксидазы.Неспособность фагоцитов убивать проглоченные патогены или подвергаться апоптозу из-за отсутствия H 2 O 2 приводит к накоплению бактериосодержащих фагоцитов и развитию гранулем [38,39]. Дефектное поколение H 2 O 2 способствует длительному воспалению и предполагает, что H 2 O 2 играет существенную роль в регуляции воспаления.

Стадия пролиферации клеток

После удаления инфекционных источников и клеточных фрагментов восстановление отсутствующей ткани становится последующей задачей, состоящей в основном из двух форм: реэпителизация и формирование грануляционной ткани.Чтобы началась реэпителизация, кератиноциты должны изменить свою способность к адгезии и подвижности, чтобы мигрировать из окружающей ткани в место раны и затем пролиферировать. Модель с царапинами, полученная из культуры кератиноцитов, показала, что H 2 O 2 способствует подвижности кератиноцитов при низкой концентрации около 500 мкМ без какой-либо потери жизнеспособности клеток [40]. Кератиноциты, обработанные H 2 O 2 в низкой концентрации, имеют усиленную активацию рецептора эпидермального фактора роста и фосфорилирование ERK1/2, что объясняет его более высокий потенциал миграции [6,40].

Ангиогенез является ключевым этапом формирования грануляционной ткани. При местном нанесении 10 мМ H 2 O 2 на эксцизионные раны у крыс скорость закрытия ран значительно увеличивалась за счет сильного стимулирования ангиогенеза и регенерации соединительной ткани [5]. Продукты, производные циклооксигеназы, особенно простагландин E 2 , играют важную роль в миграции эндотелиальных клеток [41,42], в то время как H 2 O 2 увеличивает синтез белка циклооксигеназы-2 в эндотелиальных клетках человека [43].In vitro H 2 O 2 может стимулировать макрофаги [44], кератиноциты сетчатки [45] и гладкомышечные клетки сосудов [46] к высвобождению фактора роста эндотелия сосудов, который обладает сильной способностью стимулировать ангиогенез.

У рыбок данио H 2 O 2 , полученные из клеток поврежденной кожи, усиливали индуцированную повреждением регенерацию периферических сенсорных аксонов, что помогает иннервировать заживающую кожу [47]. Аналогично, H 2 O 2 в концентрациях менее 500 мкМ усиливал высвобождение белка теплового шока (HSP70, HSP90) и фактора роста фибробластов из культивируемых астроцитов крысы, что способствует выживанию нейронов, росту нейритов и ангиогенезу [7]. ].Следовательно, H 2 O 2 , вероятно, благоприятен как для структурного, так и для функционального восстановления кожной раны.

Фаза ремоделирования тканей

Кожа плода на ранних сроках гестации может подвергаться бесрубцовой репарации при отсутствии фазы воспаления [48]. Таким образом, влияние, оказываемое H 2 O 2 на фазу воспаления, может оказывать влияние на ремоделирование тканей.

H 2 O 2 нарушает баланс между матриксными металлопротеиназами и тканевыми ингибиторами матриксных металлопротеиназ [49].Исследование с использованием мышиной модели заживления ран плода показало, что H 2 O 2 повышает экспрессию трансформирующего фактора роста (TGF)-1 и усиливает пролиферацию фибробластов [50]. Установлено, что NOX 2 участвует в дифференцировке дермальных фибробластов человека в миофибробласты в ответ на TGF-1 [51]. Также сообщается, что NOX 4 участвует в отложении коллагена из-за его стимулирующего эффекта TGF-β 1 [52] (рис. 1).

Рис. 1

Роль перекиси водорода (H 2 O 2 ) в процессе заживления ран.ТФ, тканевой фактор; VEGF, фактор роста эндотелия сосудов; Цокс-2, циклооксигеназа-2; EFGR, рецептор эпидермального фактора роста; TGF-β 1 , трансформирующий фактор роста-β 1 .

Текущее клиническое использование перекиси водорода

Для клинического орошения H 2 O 2 обычно составляет 3% (975 мкМ), что одновременно окисляет белок, нуклеиновую кислоту, липиды нормальных здоровых клеток и микроорганизмов. [53]. Использование H 2 O 2 для дезинфекции ран продолжается и сегодня, но в литературе не было замечено положительного эффекта 3% H 2 O 2 в ускорении заживления ран [16,54].Кроме того, способность H 2 O 2 убивать патогенные бактерии, такие как Pseudomonas aeruginosa , сомнительна, поскольку сообщается, что в их телах существуют каталазы [55]. H 2 O 2 также регулярно используется для подготовки костного ложа при эндопротезировании с использованием цемента, а также для достижения гемостаза в нейрохирургии [56,57]. Он также является кровоостанавливающим средством в дополнение к местному адреналину у пациентов с известной дисфункцией тромбоцитов после иссечения ожога [58]. Не менее важно, что он имеет неотъемлемый риск образования фатальной кислородной эмболии [59,60].

Были разработаны некоторые препараты, содержащие H 2 O 2 , для лечения кожных инфекций. В состав крема LHP®, 1% H 2 O 2 включен в стабилизированной форме, что обеспечивает медленную деградацию и пролонгированное действие [61]. Крем H 2 O 2 (Crystacide; Мифарм, Милан, Италия) представляет собой другую форму стабилизированного крема H 2 O 2 1%, которая показала хороший противомикробный эффект и переносимость кожей [62].Проспективное клиническое исследование показало, что промывание ран 2% H 2 O 2 на хронически колонизированных ожоговых ранах в течение 5 минут с последующей промывкой физиологическим раствором и трансплантацией повышает вероятность успешного приживления трансплантата по сравнению с традиционным методом обработки ран. и пересадка кожи [63].

Перекись водорода: значение для лечения хронических ран

Хронические раны характеризуются хроническим воспалением, которое также проявляется при многих хронических воспалительных заболеваниях, таких как сахарный диабет, ревматоидный артрит, заболевания пародонта, сердечно-сосудистые заболевания и воспалительные заболевания кишечника.Правильный баланс между образованием H 2 O 2 и механизмом детоксикации должен поддерживаться должным образом, чтобы избежать окислительных повреждений [64]. Дефектный апоптоз лейкоцитов и последующее удаление апоптотических клеток фагоцитами считается важным для инициации и распространения хронического воспаления. На модели антиген-индуцированного артрита сообщалось о роли производной NADPH-оксидазы H 2 O 2 в индукции апоптоза фагоцитов и разрешении воспаления [65].Эту функцию H 2 O 2 можно использовать для регулирования патогенного воспаления в хронических ранах.

Изменение концентрации H 2 O 2 в ткани раны влияет на скорость заживления. В мышиной модели заживления ран местное применение 50 мМ H 2 O 2 способствовало закрытию раны, в то время как 3% H 2 O 2 (980 мМ) замедляло заживление [16]. В мышиной модели эксцизионных ран 10 мМ H 2 O 2 способствовали закрытию ран, но 166 мМ замедляли его по сравнению с контрольными мышами [5].H 2 O 2 может проходить через плазматическую мембрану через специфический аквапорин, экспрессируемый на клеточных мембранах [8]. Пентафторбензолсульфонилфлуоресцеин (HPF), селективный химический сенсор H 2 O 2 , показал повышенный внутриклеточный окислительно-восстановительный уровень после экзогенной обработки H 2 O 2 [66]. При обработке личинок рыбок данио дикого типа в отсутствие повреждений 3 мМ H 2 O 2 и последующем сравнении их мРНК с необработанной группой было обнаружено, что 414 транскриптов значительно активируются, а 256 транскриптов значительно подавляются [66].Следовательно, применение экзогенных H 2 O 2 может привести к изменению клеточного поведения. По-видимому, заживление ран H 2 O 2 может быть в основном основано на моделях острого повреждения. Есть несколько статей [37,67] о поведении H 2 O 2 в хронических ранах. Аномальное воспаление, лежащее в основе хронической раны, может нарушать динамическое образование и клиренс H 2 O 2 в месте раны.

Гипоксия является ключевым признаком многих хронических ран.Сообщается, что парциальное давление кислорода (PO 2 ) в неуточненных хронических ранах находится в диапазоне 5–20 мм рт. ст., в то время как типичные значения в здоровых тканях составляют 30–50 мм рт. ст. [68]. Продукция АФК, опосредованная НАДФН-связанной оксигеназой, является сильно зависимым от кислорода процессом: полумаксимальная скорость (км) для НАДФН-связанной оксигеназы с кислородом в качестве субстрата составляет значение PO 2 , равное 40-80 мм рт.ст. [67]. ]. Уровень АФК очень важен для антибактериальной активности нейтрофилов, поскольку он отвечает за респираторный взрыв нейтрофилов.Было показано, что in vitro нейтрофилы теряют способность к уничтожению бактерий при уровне PO 2 ниже 40 мм рт. ст. [67]. Эта потеря может быть связана с уменьшением АФК. Снижение антибактериальной активности нейтрофилов способствует инфицированию, что может частично объяснить значительную бактериальную колонизацию гипоксических хронических ран. Следовательно, длительная гипоксия может привести к снижению АФК. В качестве наиболее распространенной АФК уменьшение количества H 2 O 2 отрицательно повлияет на заживление ран, например, обострение инфекции, снижение секреции цитокинов и аномальное воспаление.

Некоторые виды лечения, вызывающие низкую концентрацию H 2 O 2 , в определенной степени ускоряют заживление ран. Нетепловая атмосферная плазма (НАП) использовалась в клинических условиях для ускорения заживления ран [69]. Некоторые изменения, вызванные NAP, были устранены каталазой, и ответы клеток на обработку NAP аналогичны инкубации в H 2 O 2 в аналогичной концентрации [69, 70], что подтверждается индуцированной плазмой глубокой внеклеточной ловушкой. образование (NET), которое может быть ингибировано присутствием каталазы.Однако добавление эквивалентной концентрации H 2 O 2 не может вызвать НЭО [71]. Формирование NET может включать другие компоненты, индуцированные плазмой, но H 2 O 2 является обязательным. В клинической практике применение NAP позволяет добиться значительного снижения бактериальной нагрузки на хронические раны и успешно удалить биопленку [72,73]. Его стерилизующий эффект не зависит от вида возбудителя и может противостоять даже бактериям с множественной лекарственной устойчивостью [74].В некоторых сообщениях указывается, что NAP может повышать скорость пролиферации базальных кератиноцитов и эндотелиальных клеток [75,76]. 350 подавленных и 400 активированных транскриптов кератиноцитов после обработки NAP подчеркнули его мощную способность влиять на экспрессию генов [77].

Современные лицензированные повязки, содержащие мед медицинского назначения, такие как Surgihoney® и Revamil®, вызвали новый интерес в связи с их клиническим потенциалом для обычного ухода за ранами [78,79]. Лабораторные исследования показали, что низкие концентрации H 2 O 2 обычно образуются в этих медах при их разбавлении.Глюкозооксидаза (фермент, выделяемый в мед рабочими пчелами) окисляет глюкозу до глюконовой кислоты с выделением H 2 O 2 [78]. Противомикробной способности меда отчасти способствует H 2 O 2 . В исследовании, проверяющем антимикробную активность и максимальный выход H 2 O 2 среди 3 прототипов меда, между ними была линейная зависимость. Чем больше H 2 O 2 производит мед, тем сильнее он обладает антимикробной способностью [79].Сообщалось также, что некоторые виды биологически модифицированного меда стимулируют моноциты к секреции цитокинов, таких как TNF-α, IL-1β и IL-6, и это может быть связано с H 2 O 2 [80].

Перекись водорода может быть мишенью для лечения ран

Одним из приоритетов лечения хронических ран является формирование благоприятной микросреды, восприимчивой к терапии. Терапия, корректирующая H 2 O 2 до соответствующего уровня, может способствовать заживлению ран за счет улучшения окислительно-восстановительной среды в ране.

Однако для подтверждения этой гипотезы необходимы более фундаментальные эксперименты и клинические испытания. Во-первых, следует выяснить, есть ли отклонения в распределении и концентрации H 2 O 2 в хронических ранах. Во-вторых, новые методы регулирования H 2 O 2 более стабильно и точно должны быть дополнительно исследованы, чтобы сделать лечение более стандартизированным.

Возможное использование в будущем

Неконтролируемое производство или разложение H 2 O 2 может привести к повреждению тканей и связано с повышенной восприимчивостью к заболеваниям из-за несбалансированного окислительно-восстановительного гомеостаза.Дальнейшее изучение критической роли H 2 O 2 в инициации, развитии и разрешении воспаления может помочь в точной регуляции прогрессирования воспаления. Терапевтический эффект H 2 O 2 может не ограничиваться только хроническими ранами, но и применяться при других заболеваниях, характеризующихся патологическим воспалением.

Заключение

Нормальное заживление ран представляет собой тщательно контролируемый баланс деструктивных процессов, необходимых для удаления поврежденной ткани, и восстановительных процессов, ведущих к образованию новой ткани.Динамическое изменение H 2 O 2 в раневой ткани способствует сохранению баланса в процессе заживления раны. H 2 O 2 способствует окислительному стрессу, а также устраняет воспаление, что делает его двунаправленным регулятором воспаления. Неконтролируемое образование H 2 O 2 приведет к хроническому воспалению, которое способствует замедлению заживления ран. Благодаря дальнейшим исследованиям его иммунорегуляторной функции можно разработать некоторые методы лечения, использующие H 2 O 2 в качестве мишени для ускорения заживления хронических ран.

Благодарность

Мы хотели бы поблагодарить Фонд естественных наук Китая (81272111, 81671917) за их финансовую поддержку.

Заявление о раскрытии информации

Авторы сообщают об отсутствии конфликта интересов.

Список литературы

  1. Appenzeller-Herzog C, Bánhegyi G, Bogeski I и др.: Транзит H 2 O 2 через мембрану эндоплазматического ретикулума не является вялым.Free Radic Biol Med 2016; 94: 157-160.
  2. Niethammer P, Grabher C, Look AT и др.: Градиент перекиси водорода в тканях способствует быстрому обнаружению ран у рыбок данио. Природа 2009;459:996-999.
  3. ван дер Влит А., Янссен-Хайнингер Ю.М.: Перекись водорода как сигнал повреждения при повреждении и воспалении тканей: убийца, медиатор или посланник? J Cell Biochem 2014; 115:427-435.
  4. Marinho HS, Real C, Cyrne L и др.: Определение перекиси водорода, передача сигналов и регулирование факторов транскрипции. Редокс Биол 2014;2:535-562.
  5. Лу А.Е., Вонг Ю.Т., Хо Р. и др.: Влияние перекиси водорода на заживление ран у мышей в связи с окислительным повреждением.PLoS One 2012;7:e49215.
  6. Loo AE, Halliwell B: Эффекты перекиси водорода в модели совместного культивирования кератиноцитов и фибробластов на заживление ран. Biochem Biophys Res Commun 2012;423:253-258.
  7. Ito J, Nagayasu Y, Hoshikawa M, et al: Повышение высвобождения FGF-1 вместе с цитозольными белками из астроцитов крыс с помощью перекиси водорода.Мозг Res 2013; 1522: 12-21.
  8. Бинерт Г.П., Шьёрринг Дж.К., Ян Т.П. и др.: Мембранный транспорт перекиси водорода. Биохим Биофиз Акта 2006;1758:994-1003.
  9. Маршалл Р., Тудзынски П.: Активные формы кислорода в процессах развития и инфекции.Semin Cell Dev Biol 2016; 57: 138-146.
  10. Espinosa-Diez C, Migue lV, Mennerich D, et al: Антиоксидантные реакции и клеточная адаптация к окислительному стрессу. Редокс Биол 2015;6:183-197.
  11. Пандей А., Саху М.К., Осорио Д. и др.: НАДФН-оксидазы: обзор от структуры до патологий, связанных с врожденным иммунитетом.Селл Мол Иммунол 2015;12:5-23.
  12. Грэм К.А., Кулавец М., Оуэнс К.М. и др.: НАДФН-оксидаза 4 представляет собой онкопротеин, локализованный в митохондриях. Cancer Biol Ther 2010; 10:223-231.
  13. Лауриндо Ф.Р., Араужо Т.Л., Абрахао Т.Б. и др.: Nox-НАДФН-оксидазы и эндоплазматический ретикулум.Antioxid Redox Signal 2014;20:2755-2775.
  14. El-Benna J, Dang PM, Gougerot-Pocidalo MA: Запуск активации NADPH-оксидазы нейтрофилов: роль фосфорилирования p47phox и мобилизации NOX2 на плазматической мембране. Семин Иммунопатол 2008;30:279-289.
  15. Сен К.К., Рой С.: Окислительно-восстановительные сигналы при заживлении ран.Биохим Биофиз Акта 2008;1780:1348-1361.
  16. Рой С., Ханна С., Наллу К. и др.: Заживление кожных ран зависит от окислительно-восстановительного контроля. Мол Тер 2006; 13:211-220.
  17. Ким М.Х., Ким М.Х., Лю В. и др.: Динамика нейтрофильной инфильтрации во время заживления кожных ран и инфекции с использованием флуоресцентной визуализации.J Invest Dermatol 2008;128:1812-1820.
  18. Сегал А.В., Гейсов М., Гарсия Р. и др. Респираторный выброс фагоцитирующих клеток связан с повышением рН вакуолей. Природа 1981;290:406-409.
  19. Reeves EP, Lu H, Jacob HL и др.: Убийственная активность нейтрофилов опосредована активацией протеаз потоком K + .Природа 2002;416:291-297.
  20. Ши М.М., Чонг И., Годлески Дж.Дж. и др.: Регуляция экспрессии гена воспалительного белка-2 макрофагов окислительным стрессом в альвеолярных макрофагах крыс. Иммунология 1999;97:309-315.
  21. Ши М.М., Годлески Дж.Дж., Паулаускис Дж.Д. и др.: Регуляция мРНК воспалительного белка-1альфа макрофагов окислительным стрессом.J Biol Chem 1996; 271:5878-5883.
  22. Джарамилло М., Оливье М.: Перекись водорода индуцирует транскрипцию гена хемокина мышиного макрофага через регулируемые внеклеточным сигналом киназо- и циклический аденозин-5′-монофосфат (цАМФ) пути: участие NF-каппа В, активаторного белка 1 и ответного элемента цАМФ связывающий белок.J Immunol 2002; 169:7026-7038.
  23. Fraticelli A, Serrano CV Jr, Bochner BS и др.: Перекись водорода и супероксид модулируют экспрессию молекул адгезии лейкоцитов и эндотелиальную адгезию лейкоцитов. Биохим Биофиз Акта 1996; 1310:251-259.
  24. Лу Х., Юкер К., Баллантайн С. и др.: Перекись водорода индуцирует LFA-1-зависимую адгезию нейтрофилов к сердечным миоцитам.Am J Physiol Heart Circ Physiol 2000;278:H835-H842.
  25. Мохд Насир Н., Ли Б.К., Яп С.С. и др.: Инактивация холодной плазмой хронических раневых бактерий. Arch Biochem Biophys 2016; 605: 76-85.
  26. Вийкстрем-Фрей С., Эль-Чемали С., Али-Рачеди Р. и др.: Лактопероксидаза и защита дыхательных путей человека.Am J Respir Cell Mol Biol 2003;29:206-212.
  27. Шремл С., Ландталер М., Шеферлинг М. и др.: Новая звезда в зоне заживления ран H 2 O 2 ? Exp Dermatol 2011; 20:229-231.
  28. Товмасян А., Шэн Х., Вейтнер Т. и др.: Дизайн, механизм действия, биодоступность и терапевтические эффекты окислительно-восстановительных модуляторов на основе Mn-порфирина.Медицинская практика 2013; 22:103-130.
  29. Канта Дж.: Роль перекиси водорода и других активных форм кислорода в заживлении ран. Acta Medica (Градец Кралове) 2011;54:97-101.
  30. Шафер М., Вернер С.: Окислительный стресс при нормальном и нарушенном заживлении ран.Pharmacol Res 2008;58:165-171.
  31. Купер П.Р., Палмер Л.Дж., Чаппл И.Л.: Нейтрофильные внеклеточные ловушки как новая парадигма врожденного иммунитета: друг или враг? Пародонтол 2000 2013;63:165-197.
  32. Muñoz-Caro T, Lendner M, Daugschies A и др.: NADPH-оксидаза, MPO, NE, ERK1/2, p38 MAPK и приток Ca 2+ необходимы для образования NET, индуцированного Cryptosporidium parvum .Dev Comp Immunol 2015; 52: 245-254.
  33. Holmdahl R, Sareila O, Olsson LM, et al: полиморфизм Ncf1 выявляет окислительную регуляцию аутоиммунного хронического воспаления. Immunol Rev 2016; 269:228-247.
  34. Bauernfeind F, Bartok E, Rieger A, et al: Передний край: ингибиторы активных форм кислорода блокируют праймирование, но не активацию воспалительной реакции NLRP3.Дж. Иммунол 2011; 187:613-617.
  35. Сонг Дж. Дж., Лим Х. В., Ким К. и др.: Влияние фенетилового эфира кофейной кислоты (CAPE) на H 2 O 2 , индуцированные окислительными и воспалительными реакциями в эпителиальных клетках среднего уха человека. Int J Pediatr Otorhinolaryngol 2012;76:675-679.
  36. Цуй З., Инь Дж., Ван Л. и др.: Эффекты экспрессии провоспалительных цитокинов и антиоксидантов в тощей кишке мышей, вызванные перекисью водорода. Int Immunopharmacol 2016;31:9-14.
  37. Брайан Н., Ахсвин Х., Смарт Н. и др.: Активные формы кислорода (АФК) — семейство молекул, определяющих судьбу, играющих ключевую роль в конструктивном воспалении и заживлении ран.Eur Cell Mater 2012; 24: 249-265.
  38. Roos D: Хроническая гранулематозная болезнь. Бр. Med Bull 2016; 118:50-63.
  39. Фридович I: Кислород: как мы его переносим? Медицинская практика 2013; 22:131-137.
  40. Лу А.Е., Хо Р., Холливелл Б.: Механизм миграции кератиноцитов, вызванной перекисью водорода, в модели с царапинами. Free Radic Bio Med 2011;51:884-892.
  41. Кувано Т., Накао С., Ямамото Х. и др.: Циклооксигеназа 2 является ключевым ферментом ангиогенеза, индуцированного воспалительными цитокинами.FASEB J 2004; 18:300-310.
  42. Rao R, Redha R, Macias-Perez I и др.: Рецептор простагландина E2-EP4 способствует миграции эндотелиальных клеток посредством активации ERK и ангиогенеза in vivo. J Biol Chem 2007; 282:16959-16968.
  43. Элигини С., Ареназ И., Барбьери С.С. и др.: Циклооксигеназа-2 опосредует заживление ран, вызванное перекисью водорода, в эндотелиальных клетках человека.Free Radic Biol Med 2009;46:1428-1436.
  44. Чо М., Хант Т.К., Хуссейн М.З. и др.: Перекись водорода стимулирует высвобождение фактора роста эндотелия сосудов макрофагов. Am J Physiol Heart Circ Physiol 2001;280:h3357-h3363.
  45. Brauchle M, Funk JO, Kind P и др.: Ultraviolet B и H 2 O 2 являются мощными индукторами экспрессии сосудистого эндотелиального фактора роста в культивируемых кератиноцитах.J Biol Chem 1996; 271:21793-21797.
  46. Ruef J, Hu ZY, Yin LY и др.: Индукция фактора роста эндотелия сосудов в поврежденных баллоном артериях бабуинов. Новая роль активных форм кислорода при атеросклерозе. Цирк Res 1997; 81: 24-33.
  47. Ригер С., Сагасти А.: Перекись водорода способствует регенерации периферических сенсорных аксонов в коже рыбок данио, вызванных повреждением.PLoS Biol 2011;9:e1000621.
  48. Longaker MT, Whitby DJ, Adzick NS и др.: Исследования заживления ран плода, VI. Раны плода во втором и начале третьего триместра демонстрируют быстрое отложение коллагена без образования рубца. J Pediatr Surg 1990; 25:63-68; обсуждение 68-69.
  49. Hemmerlein B, Johanns U, Halbfass J и др.: Баланс между MMP-2/-9 и TIMP-1/-2 смещается в сторону MMP при почечно-клеточном раке и может быть дополнительно нарушен перекисью водорода.Int J Oncol 2004; 24:1069-1076.
  50. Вилгус Т.А., Бергдалл В.К., Дипьетро Л.А. и др.: Перекись водорода нарушает заживление ран плода без рубцов. Восстановление ран 2005; 13: 513-519.
  51. Чжан Г.Ю., Ву Л.К., Дай Т. и др.: НАДФН-оксидаза-2 является ключевым регулятором дермальных фибробластов человека: потенциальная терапевтическая стратегия для лечения фиброза кожи.Exp Dermatol 2014; 23:639-644.
  52. Чан Э.К., Пешавария Х.М., Лю Г.С. и др.: Nox4 модулирует выработку коллагена, стимулируемую трансформирующим фактором роста β 1 in vivo и in vitro. Biochem Biophys Res Commun 2013;430:918-925.
  53. Ямада И., Мокудай Т., Накамура К. и др.: Местное лечение полости рта и поврежденной кожи с помощью новой системы дезинфекции с использованием фотолиза перекиси водорода у крыс.J Toxicol Sci 2012;37:329-335.
  54. Spear M: Очищение ран: решения и методы. Пласт Сург Нурс 2011;31:29-31.
  55. Томас Г.В., Раэль Л.Т., Бар-Ор Р. и др.: Механизмы замедленного заживления ран обычно используемыми антисептиками.J Травма 2009;66:82-90; обсуждение 90-81.
  56. Кольт Д.Д., Робин Д.А., Карр А.М. и др.: Безопасность реинфузии аутологичной дренажной крови после тотального эндопротезирования коленного сустава, приготовленного с перекисью водорода. Колено 2007; 14:12-18.
  57. Экланд Д.К., Яп В., Экланд М.Л. и др.: Чистка щеткой с пульсирующим лаважем, за которой следует марлевая повязка с перекисью водорода для подготовки костного ложа при цементном тотальном эндопротезировании тазобедренного сустава: модель на быке.J Orthop Surg (Гонконг) 2009; 17:296-300.
  58. Потенди Л., Лоттенберг Л., Андерсон Дж. и др.: Использование перекиси водорода для достижения кожного гемостаза после иссечения ожога у пациента с дисфункцией тромбоцитов. J Burn Care Res 2006; 27:99-101.
  59. Битти С., Гарри Л.Э., Гамильтон С.А. и др.: Остановка сердца после промывания раны груди перекисью водорода.J Plast Reconstr Aestet Surg 2010;63:e253-e254.
  60. Mut M, Yemisci M, Gursoy-Ozdemir Y и др. Инсульт, вызванный перекисью водорода: выяснение механизма in vivo. Дж. Нейросург 2009; 110:94-100.
  61. Toth T, Broström H, Båverud V и др.: Оценка крема LHP(R) (1% перекиси водорода) по сравнению с вазелином и необработанным контролем при открытых ранах у здоровых лошадей: рандомизированное слепое контрольное исследование.Acta Vet Scand 2011; 53:45.
  62. Capizzi R, Landi F, Milani M, et al: Переносимость кожей и эффективность комбинированной терапии кремом, стабилизированным перекисью водорода, и гелем адапалена по сравнению с кремом бензоилпероксида и гелем адапалена при распространенных акне. Рандомизированное, замаскированное исследователем, контролируемое исследование.Бр Дж. Дерматол 2004; 151:481-484.
  63. Мохаммади А.А., Сейед Джафари С.М., Киасат М. и др.: Эффективность санации и очистки ран с помощью 2% перекиси водорода на трансплантате при хронических колонизированных ожоговых ранах; рандомизированное контролируемое клиническое исследование. Бернс 2013; 39:1131-1136.
  64. De Deken X, Corvilain B, Dumont JE и др.: Роль перекиси водорода, опосредованной DUOX, в метаболизме, защите хозяина и передаче сигналов.Antioxid Redox Signal 2014;20:2776-2793.
  65. Лопес Ф., Коэльо Ф.М., Коста В.В. и др.: Разрешение нейтрофильного воспаления с помощью H 2 O 2 при антиген-индуцированном артрите. Arthritis Rheum 2011;63:2651-2660.
  66. Лиссе Т.С., Кинг Б.Л., Ригер С.: Сравнительное транскриптомное профилирование сигнальных сетей перекиси водорода в кератиноцитах рыбок данио и человека: значение для сохранения, миграции и заживления ран.Научный представитель 2016; 6: 20328.
  67. Шремл С., Сеймис Р. М., Прантл Л. и др.: Кислород при заживлении острых и хронических ран. Бр Дж Дерматол 2010;163:257-268.
  68. Kendall AC, Whatmore JL, Winyard PG и др.: Гипербарическая оксигенация снижает адгезию нейтрофилов к эндотелию при хронических раневых состояниях за счет S-нитрозирования.Восстановление ран 2013; 21:860-868.
  69. Бекешус С., Шмидт А., Велтманн К.-Д. и др.: Плазменная струя kINPen — мощное средство для заживления ран. Clin Plasma Med 2016; 4:19-28.
  70. Бекешус С., Колата Дж., Винтерборн С. и др.: Перекись водорода: центральный игрок в окислительном стрессе, вызванном физической плазмой, в клетках крови человека.Free Radic Res 2014; 48: 542-549.
  71. Bekeschus S, Winterbourn CC, Kolata J, et al: образование нейтрофильных внеклеточных ловушек вызывается в ответ на холодную физическую плазму. J Leukoc Biol 2016;100:791-799.
  72. Исбари Г., Хайнлин Дж., Симидзу Т. и др.: Успешное и безопасное использование 2-минутной холодной атмосферной аргоновой плазмы при хронических ранах: результаты рандомизированного контролируемого исследования.Бр Дж Дерматол 2012;167:404-410.
  73. Фрике К., Кобан И., Тресп Х. и др.: Плазма атмосферного давления: высокоэффективный инструмент для эффективного удаления биопленок. PLoS One 2012;7:e42539.
  74. Дэшляйн Г., Шольц С., Ахмед Р. и др.: Обеззараживание кожи низкотемпературной плазменной струей атмосферного давления и плазмой диэлектрического барьерного разряда.J Hosp Infect 2012;81:177-183.
  75. Хассе С., Дуонг Тран Т., Хан О. и др.: Индукция пролиферации базальных эпидермальных кератиноцитов холодной плазмой атмосферного давления. Clin Exp Dermatol 2016;41:202-209.
  76. Калгатги С., Фридман Г., Фридман А. и др.: Пролиферация эндотелиальных клеток усиливается низкой дозой нетепловой плазмы за счет высвобождения фактора роста фибробластов-2.Энн Биомед Инг 2010; 38:748-757.
  77. Шмидт А., Дитрих С., Штойер А. и др.: Нетепловая плазма активирует кератиноциты человека путем стимуляции антиоксидантных путей и путей фазы II. J Biol Chem 2015; 290:6731-6750.
  78. Купер Р.: Мед как эффективное антимикробное средство для лечения хронических ран: есть ли ему место в современной медицине? Res 2014; 1:15.
  79. Кук Дж., Драйден М., Паттон Т. и др.: Антимикробная активность модифицированных прототипов меда, которые генерируют перекись водорода активных форм кислорода (АФК). Примечания BMC Res 2014; 8:20.
  80. Тонкс А.Дж., Купер Р.А., Джонс К.П. и др.: Мед стимулирует выработку воспалительных цитокинов моноцитами.Цитокин 2003;21:242-247.

Автор Контакты

Yiwen Niu

Отделение ожоговой и пластической хирургии

Больница Ruijin, Шанхайский медицинский факультет университета Цзяо Тонг

Шанхай (Китай)

E-Mail [email protected]


Подробности статьи / публикации

Предварительный просмотр первой страницы

Получено: 24 октября 2016 г.
Принято: 05 апреля 2017 г.
Опубликовано онлайн: 05 апреля 2017 г.
Дата выпуска выпуска: август 2017 г.

Количество печатных страниц: 8
Количество фигурок: 1
Количество столов: 0

ISSN: 1011-7571 (печать)
eISSN: 1423-0151 (онлайн)

Для дополнительной информации: https: // www.karger.com/MPP


Лицензия открытого доступа / Дозировка лекарства / Заявление об ограничении ответственности

Лицензия открытого доступа: это статья в открытом доступе под лицензией Creative Commons Attribution-NonCommercial 3.0 Unported (CC BY-NC) (www.karger.com/OA-license), применимой к онлайн-версии только статья. Распространение разрешено только в некоммерческих целях.
Дозировка лекарства: авторы и издатель приложили все усилия, чтобы гарантировать, что выбор и дозировка лекарства, указанные в этом тексте, соответствуют текущим рекомендациям и практике на момент публикации.Тем не менее, ввиду продолжающихся исследований, изменений в правительственных постановлениях и постоянного потока информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на них, читателю настоятельно рекомендуется проверять листок-вкладыш для каждого препарата на предмет любых изменений показаний и дозировки, а также дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендованным средством является новое и / или редко применяемое лекарство.
Отказ от ответственности: утверждения, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и соавторам, а не издателям и редакторам.Появление в публикации рекламы и / или ссылок на продукты не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности. Издатель и редактор (-ы) не несут ответственности за любой ущерб, причиненный людям или имуществу в результате любых идей, методов, инструкций или продуктов, упомянутых в контенте или рекламе.

Уход за ранами, царапинами, порезами и ожогами

Правда или ложь? Вам нужно использовать перекись водорода или медицинский спирт для очистки раны?

Чистить раны перекисью водорода или спиртом? Ложь

Существует распространенное заблуждение, что на рану следует наносить перекись водорода или спирт.Они могут нанести вред тканям и препятствовать заживлению. Лучшее лечение порезов и царапин включает в себя первую очистку раны мягким мылом и пресной водой. Промывать рану в течение нескольких минут. Это помогает удалить мусор, грязь и бактерии. Немедленно обратитесь к врачу в случае глубоких, зияющих, больших ран или ран, которые не останавливают кровотечение после приложения давления в течение нескольких минут.

Правда или ложь? Раны нужно держать во влажном состоянии

Следует ли увлажнять раны? Правда

Влажные раны заживают быстрее, чем невлажные.Используйте мазь с антибиотиком для порезов и царапин, чтобы они оставались влажными. Кремы и мази также помогают предотвратить прилипание повязок к ране. Следуйте инструкциям вашего врача по уходу за раной. Нанесите тонкий слой мази с антибиотиком на рану, чтобы сохранить ее влажной и снизить риск инфицирования.

Правда или ложь? Скребки для выпуска воздуха

Держите порезы и царапины незакрытыми? Ложь

Еще одно распространенное заблуждение, что ранам нужно дать проветриться.Чем намазать порезы и царапины? Сначала промойте рану водой с мылом и нанесите тонкий слой мази с антибиотиком. Затем наложите повязку на порез или царапину, чтобы предотвратить попадание грязи и бактерий. Повязка также предохраняет заживающую рану от натирания одеждой. Повязки, наложенные по ширине пореза, могут помочь скрепить края во время заживления раны. Вы можете использовать более одной повязки «бабочка», чтобы края разреза оставались вместе.

Правда или ложь? Повязку лучше снимать медленно

Медленно снимать повязку? Правда

Нельзя быстро срывать повязку.Делая так много, вы травмируете кожу, сдирая струп или снова открывая рану. Безопаснее и лучше снимать повязку осторожно и медленно. Если кажется, что повязка прилипла к струпу, смочите пораженный участок теплой водой, чтобы смягчить струп. Повязка также может вырвать волосы вокруг раны. Чтобы свести к минимуму боль, медленно стягивайте повязку в том же направлении, что и рост волос.

Правда или ложь? Нанесите масло на ожоги

Масло полезно при ожогах? Ложь

Ожог кожи деликатный, поэтому нельзя прикладывать к нему лед или масло.Это может увеличить повреждение тканей. Масло удерживает тепло в коже, усугубляя травму. Лучшее, что можно сделать при незначительных ожогах, — это подержать пораженный участок под прохладной проточной водой, чтобы снизить температуру и облегчить боль. Используйте стерильную марлевую повязку и антипригарную повязку, чтобы закрыть кожу с волдырями. Используйте легкое прикосновение и свободно оберните повязку, чтобы свести к минимуму риск ее прилипания к обожженному участку.

Источники:

ИЗОБРАЖЕНИЯ ПРЕДОСТАВЛЕНЫ:

  1. Стив Помберг / WebMD
  2. Стив Помберг / WebMD
  3. Изображение100
  4. Изображение100
  5. Фрэнсис Твитти / iStock Exclusive
  6. Фрэнсис Твитти / iStock Exclusive
  7. Грим Монтгомери / Стоун
  8. Грим Монтгомери / Стоун
  9. Brain Hagiwara / Brand X Pictures
  10. Brain Hagiwara / Brand X Pictures

РЕФЕРЕНЦИИ:

  • Американская академия семейных врачей: «Первая помощь: порезы, царапины и швы».«
  • Американский колледж врачей скорой помощи: «Правильный уход за ранами».
  • Американский семейный врач: «Уход за порезами, царапинами и ранами».
  • Кливлендская клиника: «Следует ли перевязать порез или рану или дать ей проветриться?»
  • KidsHealth.org: «История о шрамах».
  • Клиника Майо: «Вопросы и ответы в клинике Майо: лечение ожогов».
  • Детская больница Райли: «Шрамы: когда обращаться к пластическому хирургу».

© 2005-2022 ООО «ВебМД».Все права защищены.

Уход за порезами и царапинами в центрах ухода за ранами Summa Health

Уход за порезами и царапинами в центрах ухода за ранами Summa Health Перейти к основному содержанию.

Вот несколько основных рекомендаций по уходу за порезом или царапиной в домашних условиях:

  • Надавите на пораженный участок салфеткой, марлевым тампоном или чистой тканью, чтобы остановить кровотечение.Кровотечение должно прекратиться через несколько минут, но если оно пропитывает марлю или ткань, добавьте больше марли или надавите сильнее. Не снимайте марлю до тех пор, пока вы не прижмете ее в течение нескольких минут. Слишком быстрое удаление ткани приведет к разрыву формирующегося сгустка. Если из раны брызжет кровь или кровотечение не останавливается после 10-минутного надавливания, обратитесь за медицинской помощью; вам могут понадобиться швы.
  • После остановки кровотечения тщательно промойте порез прохладной водой.
  • Очистите кожу вокруг раны мягким мылом и мягкой тканью.Никогда не используйте перекись водорода или йод.
  • Используйте пинцет, промытый спиртом, чтобы удалить гравий, грязь, стекло или другие инородные тела, оставшиеся в ране.
  • Если рана была грязной, нанесите мазь с антибиотиком, чтобы предотвратить инфекцию, и держите рану влажной, чтобы ускорить процесс заживления.
  • Оставьте порез или царапину незакрытыми, чтобы они оставались сухими и быстрее заживали. Если порез или царапина находятся в месте, которое может быть загрязнено или раздражено одеждой, заклейте его клейкой лентой.
  • Если используется повязка, меняйте ее ежедневно или чаще, если она становится грязной или влажной, чтобы рана оставалась чистой и сухой.

Большинство порезов и царапин можно безопасно лечить дома, но в некоторых случаях может потребоваться медицинская помощь, чтобы уменьшить инфекцию и ускорить процесс заживления.

Вот несколько советов, как определить, требуется ли немедленная медицинская помощь при порезе или царапине:

  • Рана от укуса человека или животного.
  • Достаточно глубоко, чтобы увидеть жир, мышцы или кости.
  • У него зубчатые края или края, которые далеко друг от друга; или края зияют.
  • Это длинный порез или из него струится кровь.
  • На лице, запястье, руке или пальце; и суставы не работают.
  • Трудно удалить грязь, попавшую в порез или царапину.
  • Порез становится болезненным, воспаляется или выделяется густая кремообразная сероватая жидкость.
  • У вас поднялась температура выше 100,4° по Фаренгейту (38° по Цельсию).
  • Онемение области вокруг пореза.
  • Рядом с разрезом образуются красные полосы.
  • Колотая рана или глубокий порез, и вам не делали прививку от столбняка в течение последних 5 лет.

Благодарим вас за подписку на информационный бюллетень Vitality  .

К сожалению, при обработке вашего запроса произошла ошибка.Пожалуйста, попробуйте еще раз.

Получайте электронный информационный бюллетень Summa Health, чтобы получать последние советы, рекомендации и обновления для здоровья.

Управление подписками на электронную почту

[{«RootId»:»ba198066-3078-4dcd-8e69-28251bebb940″,»RootUrl»:»/глоссарий/»}]

Если у вас экстренная ситуация, позвоните по номеру 911.

4 шага для лечения ссадин в домашних условиях

Незначительные порезы и царапины являются частью повседневной жизни, особенно для маленьких активных детей.Как правило, ссадина — это тип раны, при которой соскабливается или стирается первый слой кожи, и иногда они требуют большего, чем просто объятия и поцелуи от мамы или папы. Эти раны, хотя и поверхностные, требуют надлежащего лечения, чтобы предотвратить инфекцию и быстро зажить.

Ссадины обычно можно безопасно лечить в домашних условиях, следуя этим четырем шагам:

  1. Оценка раны
  • В тяжелых случаях — если рана сильно кровоточит и вы не можете остановить кровотечение после 10 минут прямого давления — позвоните по телефону 911 или обратитесь в ближайшее отделение неотложной помощи
  • Не вынимать предмет, если он проник в тело; оставьте его на месте и позвоните по номеру 911
  • .
  • Если рана поверхностная, переходите к следующему шагу
  • Очистите пораженный участок
    • Мойте руки водой с мылом, прежде чем прикасаться к открытым ранам
    • Очистите рану прохладной или теплой водой с мягким мылом. Не обрабатывать рану перекисью водорода или спиртом. Использование перекиси водорода или медицинского спирта для обработки раны может нанести вред ткани и замедлить заживление
    • Аккуратно удалите грязь, камни или мусор и постарайтесь не тереть рану
  • Остановить слабое кровотечение
    • Наложите стерильную марлю или чистое полотенце на рану и надавите ладонью
    • Если марля промокнет, оставьте ее на месте и добавьте сверху
    • Продолжайте давление в течение минуты или двух после остановки кровотечения
  • Перевязать рану
    • Нанесите на рану тонкий слой антибактериальной мази, такой как Неоспорин или Бацитрацин
    • Если рана незначительная, вы можете оставить ее открытой до заживления
    • Если рана находится в таком месте, как руки или ноги, она с большей вероятностью испачкается и может быть покрыта простой повязкой
    • Меняйте повязку каждый день; меняйте его чаще, если он загрязняется

    Если вы начинаете замечать покраснение, выделения (гной) или усиливающуюся боль в этой области, немедленно обратитесь за медицинской помощью, так как это признаки инфекции.

    Когда рана начинает заживать

    Небольшие порезы и царапины в течение нескольких дней образуют струпья. Струп помогает защитить рану от грязи и микробов во время роста новой кожи. После образования струпа повязку можно больше не использовать. Несмотря на то, что заживающая рана или струпья будут чесаться, убедитесь, что дети не царапают и не ковыряют их. Струп отпадет сам по себе без вашей помощи, обнажив новую здоровую кожу под ним.

    Влияние перекиси водорода на заживление ран у мышей в связи с окислительным повреждением

    Abstract

    Установлено, что низкие концентрации перекиси водорода (H 2 O 2 ) образуются в ранах и необходимы для оптимального заживления.В то же время есть доказательства того, что чрезмерное окислительное повреждение коррелирует с плохо заживающими ранами. В этой статье мы стремимся определить, может ли местное применение H 2 O 2 модулировать заживление ран и связаны ли его эффекты с окислительным повреждением. Используя модель эксцизионной раны у мышей C57BL/6, было обнаружено, что H 2 O 2 усиливает ангиогенез и закрытие раны при 10 мМ, но замедляет закрытие раны при 166 мМ. Задержка в закрытии также была связана со снижением образования соединительной ткани, увеличением MMP-8 и стойкой нейтрофильной инфильтрацией.Было обнаружено, что ранение увеличивает окислительное повреждение липидов, измеренное с помощью F 2 -изопростанов, и нитратное повреждение белка, измеренное с помощью 3-нитротирозина. Однако лечение H 2 O 2 не приводило к значительному увеличению окислительного и нитратного повреждения даже при концентрациях, замедляющих заживление ран. Следовательно, пагубные эффекты H 2 O 2 могут не включать окислительное повреждение исследуемых молекул-мишеней.

    Образец цитирования: Loo AEK, Wong YT, Ho R, Wasser M, Du T, Ng WT, et al.(2012) Влияние перекиси водорода на заживление ран у мышей в связи с окислительным повреждением. ПЛОС ОДИН 7(11): е49215. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215

    Редактор: Хуан Састре, Университет Валенсии, Испания

    Поступила в редакцию: 17 августа 2012 г.; Принято: 4 октября 2012 г.; Опубликовано: 13 ноября 2012 г.

    Авторские права: © 2012 Loo et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

    Финансирование: Эта работа финансировалась Национальным советом по медицинским исследованиям Сингапура (NMRC 1205/2009, http://www.nmrc.gov.sg/) и Столетним профессором Тан Чин Туан (http://www. tanfoundation.com.sg). Финансирующие организации не играли никакой роли в дизайне исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

    Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

    Введение

    Различные группы показали, что H 2 O 2 играет важную роль в заживлении ран.Было показано, что нефагоциты продуцируют H 2 O 2 после ранения, которые могут привлекать нейтрофилы [1], а также способствовать реиннервации периферических сенсорных аксонов [2] в модели заживления ран у рыбок данио. H 2 O 2 и O 2 .- также были обнаружены в ранах мышей [3], [4]. Сообщалось, что удаление H 2 O 2 путем избыточной экспрессии каталазы у мышей задерживает закрытие раны и тормозит ангиогенез [3].

    Неудивительно, что были предположения, что применение низких концентраций H 2 O 2 может быть полезным для заживления ран [5]. Было обнаружено, что повязки из коллагеновой пленки, содержащие глюкозооксидазу, способствуют заживлению ран в модели диабета у крыс, по-видимому, за счет повышения уровня активных форм кислорода (АФК) в ранах [6]. Глюкозооксидаза — фермент, окисляющий глюкозу до глюконовой кислоты с образованием H 2 O 2 в качестве побочного продукта.Мед медицинского качества, который, как утверждается, способствует заживлению хронических ран [7], также содержит H 2 O 2 , возможно, снова под действием глюкозооксидазы [8].

    С другой стороны, считается, что избыточное количество АФК участвует в патогенезе хронических ран [9]. АФК могут вызывать повреждения, реагируя с нуклеиновыми кислотами, белками и липидами, вызывая потерю функции и повреждение тканей. Поскольку АФК, в том числе H 2 O 2 , по своей природе являются повреждающими, возможно, низкие концентрации H 2 O 2 будут способствовать заживлению, действуя как сигнальная молекула, в то время как высокие концентрации будут замедлять заживление, вызывая окислительное повреждение.Хотя эта гипотеза кажется привлекательной и простой, она никогда не подвергалась тщательной проверке. На самом деле, влияние окислительного повреждения на заживление ран полностью не исследовано.

    Хотя известно, что АФК продуцируются после ранения, мало что известно об изменениях окислительного повреждения во время заживления ран. Клинические исследования показали, что жидкости из хронических ран имеют более высокие уровни F 2 -изопростана, установленного маркера перекисного окисления липидов, чем жидкости из острых ран [10].Окисление белков, измеренное карбонилами белков, также было измерено в раневых жидкостях, но не было никакой разницы в абсолютном содержании карбонилов белков в остром и хроническом раневом экссудате. Однако было обнаружено, что хронические раневые жидкости имеют более низкое содержание белка, поэтому нормализованное содержание карбонила белка в хронических ранах оказалось на 15% выше [11]. Это подчеркивает серьезные методологические проблемы, связанные с измерением окислительного повреждения в раневых жидкостях, поскольку их состав может значительно варьироваться в зависимости от состояния гидратации пациента.Эти исследования раневых жидкостей также не дают ответа на фундаментальный вопрос о том, вызывает ли ранение окислительное повреждение.

    Используя вещества, реагирующие с тиобарбитуровой кислотой (TBARS) в качестве биомаркера перекисного окисления липидов, ранние исследования фактически обнаружили снижение перекисного окисления липидов в ранах по сравнению с неповрежденной кожей [12], [13]. Однако следует отметить, что измерение TBARS является плохим маркером перекисного окисления липидов и подвержено артефактам [14]. Другие авторы показали увеличение окислительного повреждения между ранами на моделях мышей дикого типа и с дефицитом пероксиредоксинов-VI, но уровни окислительного повреждения в интактной коже не сообщались [9], [15].

    В настоящем исследовании мы преследуем две основные цели. Во-первых, мы стремились измерить изменения окислительного повреждения с течением времени в модели полнослойной раны с иссечением. Во-вторых, мы модулировали уровень АФК путем местного применения H 2 O 2 , чтобы определить, может ли чрезмерное окислительное повреждение способствовать плохому заживлению ран. Три биомаркера окислительного повреждения, а именно F 2 -изопростаны, карбонилы белка и 3-нитротирозин, использовали для определения изменений уровня окислительного повреждения.

    Материалы и методы

    Материалы

    Буфер для анализа радиоиммунопреципитации (RIPA) был приобретен у Cell Signaling Technology (Danvers, MA, USA). Крысиные анти-ММР-8 (кат. №: 2145-1) были приобретены у Epitomics (Берлингейм, Калифорния, США). Кроличьи анти-CD31 (кат. №: ab28364) и кроличьи анти-ММР-9 (кат. №: ab38898) были приобретены у Abcam (Кембридж, Великобритания). Крысиные моноклональные антимышиные антитела F4/80 и 7/4 были приобретены у Serotec (Raleigh, NC, USA). Крысиные антитела против TIMP-1 (Cat#: MAB980) были приобретены у R&D systems (Миннеаполис, Миннесота, США).Среда Prolong-gold с защитой от выцветания и DAPI была приобретена у Life Technologies. Смесь ингибиторов фосфатазы PhosSTOP и смесь ингибиторов протеазы Complete mini-EDTA были приобретены у компании Roche (Базель, Швейцария). Набор Vectorstain Peroxidase Avidin Biotin Complex (ABC) был приобретен у Vector Labs (Берлингейм, Калифорния, США). Используемым гематоксилином был Shandon Instant Haematoxylin, приобретенный у Thermofisher (Waltham, MA, USA). Козье антикроличье вторичное антитело, конъюгированное с пероксидазой хрена (Cat 0031460), козье антимышиное вторичное антитело, конъюгированное с пероксидазой хрена (Cat 0031430), субстрат для усиленной хемилюминесценции и N,O-бис(триметилсилил)трифторацетамид +1% триметилхлорсилан (BSTFA+TMCS) силилирующий агент были получены от Pierce Chemicals (Рокфорд, Иллинойс, США).Набор для обнаружения окисления белка оксиблотом, набор для ELISA с 3-нитротирозином и набор для ELISA с суспензионной матрицей для обнаружения мышиных CXCL1, CXCL5, CCL2 и CCL3 были приобретены у Millipore (Billerica, MA, USA). Все остальные химикаты были приобретены у Sigma-aldrich (Сент-Луис, Миссури, США).

    Обращение с животными и модель раны для иссечения

    Восьминедельные мыши C57/BL6 были получены из Центра по уходу за лабораторными животными NUS. Метод создания разреза и последующего мониторинга был одобрен Институциональным комитетом по уходу и использованию животных NUS (NUS 095/09).Животных кормили стандартным рационом питания и содержали в отдельном помещении, свободном от патогенов. Мышей акклиматизировали в течение недели до ранения. Операция проводилась под наркозом, индуцированным изофлураном. С помощью 5-мм дермального перфоратора было создано четыре разреза на всю толщину. Размер ран немедленно отслеживали на кусочке стерильного прозрачного пластикового листа. Затем в рану осторожно добавляли 15 мкл PBS или H 2 O 2 , разведенных в PBS (рис. 1А).Мыши находились под анестезией еще 5 мин, чтобы H 2 O 2 впиталась в рану. Затем на шею надевали мышиный ошейник елизаветинской эпохи, чтобы мыши не кусали и не зализывали раны. Мышей также содержали поодиночке, чтобы они не кусали и не зализывали раны друг друга. 0,1 мг/кг бупренорфина вводили подкожно сразу после ранения, а также каждые 24 ч в течение 4 дней после ранения для обезболивания.

    Рисунок 1.Низкие концентрации H 2 O 2 способствовали закрытию раны, но высокие концентрации замедляли ее закрытие.

    (A) У каждой мыши были созданы четыре иссеченные раны полной толщины, и в полость раны было добавлено 15 мкл H 2 O 2 , как показано на рисунке. Левая панель представляет собой репрезентативную картину полученных ран. На правой панели показано, как H 2 O 2 наносится на раны. (B) Влияние различных концентраций H 2 O 2 на скорость закрытия раны.Размер ран от 6 до 8 мышей отслеживали в течение 6 и 10 дней соответственно перед их эвтаназией. Показанный график представляет собой среднее значение ± SEM. объединенных результатов. Для анализа размера раны использовали однофакторный дисперсионный анализ. Различия между 166 мМ H 2 O 2 и контролем (p<0,05) или 10 мМ H 2 O 2 (p<0,01) были статистически значимыми на 6-й день. Различия между 10 мМ H 2 O 2 и контроль (p<0,05) были статистически значимы на 8 и 10 день.Различия между 10 мМ и 166 мМ H 2 O 2 также были статистически значимыми на 8-й день (p<0,05), но не на 10-й день.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215.g001

    Для мониторинга размера раны мышей подвергали анестезии, и размер раны измеряли, нанося их на кусок стерильного прозрачного пластикового листа, как описано в предыдущем разделе. Затем на рану повторно наносили PBS или H 2 O 2 . Для сбора тканей мышей подвергали эвтаназии путем удушения CO 2 , а раневые ткани удаляли с помощью 10-миллиметрового кожного перфоратора.Ткани обрабатывали в зависимости от анализов, которые должны были быть выполнены.

    Подготовка гистологических срезов

    Свежесрезанные раневые образцы разрезали пополам и обрабатывали либо парафином, либо криосрезом. Образцы для парафиновых срезов сразу после забора фиксировали в 10% забуференном фосфатом формалине (pH 7,4). Образцы обычно обезвоживали, очищали и заключали в парафин. Парафиновые срезы толщиной 5 мкм готовили на клейких предметных стеклах.Свежесобранные раневые образцы для криосрезов были помещены в компаунд с оптимальной температурой резания (OCT) и заморожены с использованием сухого льда и взвеси изопентана. Криосрезы толщиной 6–8 мкм готовили на клейких предметных стеклах.

    Трихромный краситель Массона

    Парафиновые срезы

    депарафинизировали, регидратировали и окрашивали с использованием набора для окрашивания трихромом Masson-Goldner в соответствии с инструкциями производителя. Микрофотографии были сделаны с объективом 20X при ярком освещении с использованием микроскопа Olympus BX 51.Изображение всей области раны было получено путем соединения нескольких полей вместе с помощью Adobe Photoshop CS5. Количество зеленых пикселей в неодермисе определяли количественно и выражали как часть размера области раны. Неодермис относится к новообразованной грануляционной ткани под гиперпролиферирующим эпидермисом и/или струпом, лишенным волосяных фолликулов.

    Для количественной оценки количества зеленых пикселей мы разработали специальное программное обеспечение для сегментации цветных изображений, которое было реализовано в виде подключаемого модуля ImageJ.Программу можно бесплатно загрузить по адресу http://web.bii.a-star.edu.sg/archive/colseg/. Описание программного обеспечения и руководство пользователя приведены в дополнительной информации (Руководство S1).

    Иммуногистохимическое окрашивание CD31

    CD31 окрашивали иммуногистохимическим методом. Парафиновые срезы депарафинизировали и регидратировали. Срезы кипятили в 10 мМ цитратно-натриевом буфере с рН 6,0 в течение 15 мин. Затем образцы обрабатывали набором для амплификации пероксидазы ABC с некоторыми изменениями протокола производителя.Срезы блокировали в 1,5% козьей сыворотке в трис-буферном солевом растворе (TBS) в течение ночи при 4°C. После блокировки срезы инкубировали с кроличьим поликлональным анти-CD31, разведенным в 1,5% козьей сыворотке в разведении 1∶50, в течение 1 часа. Затем предметные стекла промывали в TBS перед инкубацией с биотинилированным вторичным антителом против кролика в разведении 1∶200 в течение 1 часа. Затем слайды промывали и инкубировали с кассетным реагентом авидин-биотин в течение 30 мин. Активность пероксидазы окрашивали диаминобензидином с использованием DAB+ по протоколу производителя в течение 30 мин с последующей отмывкой в ​​ТБС и контрастным окрашиванием гематоксилином.Предметные стекла обезвоживали, очищали и монтировали с помощью монтажной среды DPX.

    Микрофотографии срезов были сделаны с объективом с увеличением 20X и яркопольным освещением с использованием микроскопа Olympus BX 51. Изображение всей области раны было получено путем объединения нескольких полей вместе с помощью Adobe Photoshop CS5. Количество кровеносных сосудов в неодерме подсчитывали и нормализовали относительно площади поперечного сечения каждого среза. Подсчет был проведен вслепую двумя членами лаборатории, и результаты являются средними для обоих их подсчетов.Средняя разница между подсчетами каждого пользователя и средним значением составляет 14,8%.

    Иммунофлуоресцентное окрашивание

    Замороженные срезы фиксировали в 4% параформальдегиде в течение 20 мин. Срезы блокировали усилителем сигнала Image-iT FX на 2 часа. Затем их инкубировали с первичными антителами, антимышиными F4/80 или анти-7/4, в течение 2 ч при комнатной температуре при 1∶1000 в TBS. В качестве вторичного антитела использовали козье антикрысиное антитело Alexa Fluor 594 в разведении 1∶1000 в TBS в течение 30 минут при комнатной температуре.Предметные стекла монтировали с помощью препятствующей выцветанию монтажной среды, содержащей DAPI, и оставляли для отверждения на плоской поверхности в темноте в течение ночи. Слайды визуализировали и фотографировали с использованием микроскопа Olympus BX 51 с постоянным временем экспозиции. Изображение всего неодермиса было получено путем объединения нескольких полей вместе с помощью Adobe Photoshop CS5. Анализ изображения проводили с помощью ImageJ (NIH). Сначала изображения были разделены на каналы RGB. Коррекция фона выполнялась с помощью катящегося шарика радиусом 50 пикселей.Затем измеряли интенсивность флуоресценции неодермиса. Отрицательные контроли без инкубации с первичными антителами не показали флуоресцентного окрашивания.

    Экстракция белка

    Ткани раны для анализа белка были заморожены в сухом льду сразу после сбора и хранились при температуре -80°C до анализа. Для экстракции белка две раневые ткани (примерно 100 мг) животного разрезали на мелкие кусочки и добавляли 500 мкл охлажденного льдом буфера RIPA со смесью ингибиторов протеазы и фосфатазы.Образцы обрабатывали ультразвуком с помощью высокоинтенсивного ультразвукового датчика (Sonics Vibra-Cell, Ньютаун, Коннектикут, США), а затем центрифугировали в течение 10 мин при 10 000 g, 4°C. Супернатант собирали и использовали для вестерн-блоттинга, ELISA с 3-нитротирозином, мультиплексного анализа цитокинов и анализа карбонила белка.

    Вестерн-блот-анализ

    Тридцать микрограммов белка подвергали электрофорезу в 10% SDS-полиакриламидном геле для анализа ERK1/2, p38 MAPK, MMP-8, MMP-9 и TIMP-1. Гели переносили влажным способом на нитроцеллюлозные мембраны.Мембраны блокировали 5% обезжиренным молоком в ТБСТ в течение 1 ч при комнатной температуре, а затем инкубировали с антителами в течение ночи при 4°С. Разведения для всех антител были 1∶1000, за исключением p-ERK1/2, который был разбавлен 1∶2000. Блоты визуализировали с помощью хемилюминесценции с использованием системы визуализации Chemidoc XRS (Bio-Rad, Милан, Италия). Денситометрию проводили с помощью ImageJ.

    3-нитротирозин ИФА

    Анализ проводили согласно инструкции производителя. На лунку загружали 300 мкг белка.Стандартная кривая была построена в GraphPad Prism путем подгонки к пятипараметрическому логистическому уравнению. Уровни 3-нитротирозина в образцах определяли с помощью функции интерполяции в программном обеспечении.

    Мультиплексный цитокиновый анализ

    Анализ проводили в соответствии с инструкциями производителя. На лунку загружали 75 мкг белка. Анализ проводили на системе Millipore Milliplex, а результаты анализировали с использованием аналитического программного обеспечения Milliplex.

    F

    2 — Извлечение и анализ изопростанов

    Раневые ткани для анализа F 2 -изопростана замораживали в сухом льду сразу после сбора и хранили при -80°C до анализа.F 2 -изопростаны анализировали с использованием ранее опубликованных методов с небольшой модификацией [16], [17]. Липиды экстрагировали из 2 целых ран (примерно 100 мг). Раны гомогенизировали в 0,5 мл PBS (pH 7,4) и 1 мл смеси органических растворителей Folch (CHCl 3 :метанол, 2∶1 по объему, +0,005% BHT) при 4°C. После центрифугирования при 2300 g в течение 10 мин нижний органический слой осторожно перенесли в стеклянную пробирку и высушили под током N 2 .Высушенный липидный экстракт ресуспендировали в 0,25 мл деионизированной воды и добавляли 0,25 мл 1 М КОН (в чистом метаноле) для гидролиза липидов. Тяжелый изотоп F 2 -изопростан и внутренние стандарты арахидоновой кислоты (0,5 нг IPF 2a — VI-d 4 , 0,25 нг 8-iso-PGF 2a -d 4 , 0,25 нг 8-iso-PGF 2a -d 4 , 0,5 нг -IV-d 4 и 1,0 мкг арахидоновой кислоты -d 8 в 20 мкл этанола).

    N 2 Газ вводили в каждую пробирку для проб, которую затем закрывали крышкой для предотвращения дальнейшего окисления.Гидролиз проводили в течение ночи при температуре окружающей среды в темноте. После гидролиза добавляли 1 мл деионизированной воды и 1 мл 40 мМ уксусной кислоты. рН образцов доводили до 4,5 с помощью 6 М HCl.

    60 мг MAX (смешанный ионный обмен, Waters) Колонки для ТФЭ предварительно кондиционировали 2 мл метанола, а затем 2 мл 40 мМ муравьиной кислоты (pH 4,5). Затем липидный экстракт загружали в колонку, и колонку промывали 2 мл смеси метанол:20 мМ муравьиной кислоты, рН 4,0 (3∶7). В колонку вводили 2 мл гексана, а затем еще 2 мл смеси ацетон:гексан (3∶7).Наконец, арахидоновую кислоту и F 2 -изопростаны элюировали из колонки для ТФЭ 1,8 мл смеси ацетон:метанол (4∶1), собирали и сушили в атмосфере газа N 2 .

    Образцы

    дериватизировали 12,5 мкл DIPEA (10% об./об. ацетонитрила) и 25 мкл PFBBr (10% об./об. ацетонитрила) при комнатной температуре в течение 30 мин и сушили в атмосфере азота. К высушенным образцам добавляли 12,5 мкл ацетонитрила и 25 мкл БСТФА + ТМХС, реакционные смеси инкубировали при комнатной температуре в течение 1 ч силилирования и затем сушили.Производные образцы восстанавливали в 30 мкл изооктана и инкубировали при комнатной температуре в течение 2 минут перед анализом ГХ-МС.

    Производные образцы анализировали с помощью масс-селективного (МС) детектора Hewlett-Packard 5973N (Agilent Technologies), соединенного с газовым хроматографом (ГХ) Hewlett-Packard 6890 (Agilent Technologies), оснащенного автоматическим пробоотборником и компьютерной рабочей станцией. Температура порта ввода и интерфейса ГХ-МС поддерживалась при 270 и 300°C соответственно. Масс-спектрометр использовали в режиме отрицательной химической ионизации (НХИ) с источником ионов и квадруполем при 150 и 106°С соответственно, скорость потока метана устанавливали на 2 мл/мин.Хроматографическое разделение проводили на капиллярной колонке из плавленого кварца (30 м × 0,2 мм, внутренний диаметр), покрытой сшитым 5% фенилметилсилоксаном (толщина пленки 0,33 мкм) (Agilent Technologies). Газ-носитель, гелий, устанавливали на скорость потока 1 мл/мин. Производные образцы (1 мкл) вводили без деления в порт ввода ГХ. Температуру колонки поддерживали на уровне 180°С в течение 0,75 мин, затем повышали до 275°С со скоростью 40°С/мин и затем поддерживали на уровне 275°С в течение 9 мин. Наконец, температуру повышали до 300°С со скоростью 40°С/мин и выдерживали в течение 10 мин.Мониторинг отдельных ионов проводили для мониторинга карбоксилат-иона (M-181: потеря пентафторбензила, CH 2 C 6 F 5 ) при ионах m/z 569 для 8-iso-PGF и при m/z 573 для меченных дейтерием (8-iso-PGF -d 4 и IPF -VI-d 4 ) внутренних стандартов. Количественное определение проводилось путем соотнесения площади пиков всех F 2 -IsoP с суммой пиков внутреннего стандарта двух различных F 2 -IsoP (8-iso-PGF -d 4 и IPF -VI-d 4 ).Приведенные значения представляют собой сумму 8-изо-PGF , IPF -VI и IPF -IV.

    Арахидонат также анализировали с помощью ГХ-МС-NCI с использованием того же прибора и условий колонки, что и описанные выше, за исключением следующего: скорость потока гелия устанавливали на 1 мл/мин, а дериватизированные образцы (1 мкл) вводили без деления в порт ввода ГХ. Температуру колонки поддерживали на уровне 180°С в течение 0,75 мин, затем повышали до 310°С со скоростью 40°С/мин и затем поддерживали в течение 8 мин.Ионы-мишени и квалификаторы были выбраны для выбранного режима мониторинга ионов ГХ-МС для мониторинга карбоксилат-иона (M-181: потеря пентафторбензила, CH 2 C 6 F 5 ) при ионах m/z 303 для арахидоната и m/z 311 для меченой дейтерием арахидоновой кислоты-d8 внутреннего стандарта. Количественное определение проводили путем соотнесения площади пика общего арахидоната с пиком внутреннего стандарта. Время удерживания для 8-изо-PGF , IPF -VI, IPF -IV и арахидоновой кислоты составляло 11.3, 11,3, 11,50 и 5,2 мин соответственно.

    Определение карбонила белка

    Карбонилы белков определяли с помощью набора для окисления белков OxyBlot. После гомогенизации ткани 25 мкл лизата ткани смешивали с 10 мкл 12% SDS и 20 мкл 20 мМ 2,4-динитрофенилгидразина (ДНФГ). После 15 мин инкубации при комнатной температуре добавляли 15 мкл нейтрализующего раствора (2 М Трис, 30% глицерин). Затем объем, эквивалентный 3,8 мкг белка, загружали в аппарат для слот-блоттинга (Bio-Rad, Hercules, США) и переносили на нитроцеллюлозную мембрану под вакуумом.Мембраны блокировали 5% обезжиренным молоком в TBST в течение 1 часа перед зондированием антителом против DNPH (1∶150) и конъюгированным с HRP антителом против кроличьего IgG (1∶300) в течение 1 часа каждым. Блоты визуализировали с помощью хемилюминесценции с использованием системы визуализации Chemidoc XRS.

    Результаты

    10 мМ H

    2 O 2 Способствует закрытию раны, но 166 мМ замедляет его

    Было обнаружено, что местное применение H 2 O 2 в концентрации 166 мМ замедляет заживление ран (рис. 1B) по сравнению с контрольными мышами.Эта концентрация доставит 2,5 мкмоль H 2 O 2 на рану. Фармакологически эта концентрация также эквивалентна 0,5% раствору H 2 O 2 , что аналогично концентрациям, обычно используемым для дезинфекции (от 0,5 до 3%). Несмотря на то, что H 2 O 2 при 166 мМ первоначально задерживает закрытие раны, скорость закрытия раны увеличивается во время последней части процесса заживления, и не было различий в размере раны на 8 и 10 день по сравнению с контрольными мышами. .H 2 O 2 в концентрации 10 мМ несколько увеличивал скорость закрытия ран (рис. 1В) по сравнению с контрольными мышами.

    Похоже, что местное применение H 2 O 2 в концентрации 166 мМ задержало первоначальный процесс заживления у мышей. Поэтому мы решили подробно изучить процесс заживления на 6-й день после ранения, то есть в середине процесса заживления. Образование соединительной ткани измеряли с помощью окраски трихромом по Массону [18]. Трихромная окраска по Массону по-разному окрашивает соединительные ткани, преимущественно коллаген, поскольку они менее пористые по сравнению с другими тканевыми компонентами.Ангиогенез оценивали с использованием иммуногистохимического окрашивания CD31, маркера клеточной поверхности эндотелиальных клеток.

    Раны, обработанные 166 мМ H 2 O 2 , показали снижение образования соединительной ткани, на что указывает уменьшение площади, окрашенной в зеленый цвет, по сравнению с контролем. 10 мМ H 2 O 2 не влияли на образование соединительной ткани (рис. 2). 166 мМ H 2 O 2 не влияли на ангиогенез, но 10 мМ H 2 O 2 сильно его стимулировали (рис. 3).Эти результаты для соединительной ткани и иммунного окрашивания CD31 соответствовали нашему наблюдению, что 166 мМ H 2 O 2 задерживают закрытие раны, но 10 мМ H 2 O 2 способствуют этому.

    Рисунок 2. Высокие концентрации H 2 O 2 замедляют образование соединительной ткани.

    Парафиновые срезы ран на 6-й день окрашивали трихромным красителем Массона-Голднера, как описано в материале и методе. Соединительные ткани окрашиваются в зеленый цвет.Фибрин, струп и цитоплазма окрашиваются в красный цвет. Ядра окрашены в темно-коричневый цвет. Показаны репрезентативные изображения для контрольных (A, D) 10 мМ (B, E) и 166 мМ (C, F) обработанных ран. Изображения A-C имеют 100-кратное увеличение, а D-F — 200-кратное увеличение. (G) Количественная оценка доли пикселей, окрашенных в зеленый цвет. Количество пикселей, окрашенных в зеленый цвет в неодермисе при 100-кратном увеличении, определяли количественно с использованием специального программного обеспечения. Определяемая площадь обведена пунктирной линией. Результаты были проанализированы с использованием одностороннего дисперсионного анализа с последующим тестом множественного сравнения Даннета с контролем.Показанный график представляет собой среднее значение ± SEM. п = 6–7, *** р<0,001.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215.g002

    Рисунок 3. Низкие концентрации H 2 O 2 повышали ангиогенез в ране.

    Парафиновые срезы ран на 6-й день окрашивали на CD31 иммуногистохимическим методом. Показаны репрезентативные микрофотографии (A) контроля, (B) 166 мМ H 2 O 2 и (C) 10 мМ H 2 O 2 обработанных ран.(D) Количество коричневых люменоподобных структур в неодерме было подсчитано одним слепым методом и проанализировано с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим тестом множественного сравнения Даннетта с контролем. Показанный график представляет собой среднее значение ± SEM, n = 6–7, *** p<0,001.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215.g003

    H

    2 O 2 Повышает уровень MMP-8 в ранах

    Повышение ММП-8 и 9 наблюдалось в хронических ранах [26].Поэтому мы предположили, что H 2 O 2 может повышать уровни MMP-8 и 9 в ранах и, возможно, приводить к уменьшению отложения соединительной ткани. Уровни MMP-8 и 9 в ранах измеряли с помощью Вестерн-блоттинга (Фигура 4).

    Рисунок 4. Высокие концентрации H 2 O 2 повышают уровень MMP-8 в ранах.

    Вестерн-блот-анализ лизата раневой ткани, собранного через 6 дней после ранения. Каждая дорожка представляет образец от другого животного.(A) Представитель пятно MMP-8. (B) Денситометрический анализ MMP-8, нормализованный по отношению к α-тубулину, повторно исследованный из их соответствующего блота. Результаты являются средними ± SEM. (n = 4) и были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа с последующим множественным сравнением Тьюки среди всех столбцов. ** p<0,01 (C) Репрезентативный блот MMP-9. (D) Денситометрический анализ MMP-9, нормализованный по отношению к α-тубулину, повторно исследованный из их соответствующего блота. Результаты являются средними ± SEM. (n = 4), значения p для однофакторного ANOVA составляют p = 0,13.

    https://дои.org/10.1371/journal.pone.0049215.g004

    Вестерн-блоты ММР-8 имели сильно иммунореактивную полосу около 57 кДа, что соответствует активированной форме ММР-8, полученной из полиморфноядерных клеток. Слабая иммунореактивность также наблюдалась при молекулярной массе 21 кДа, которая, как ранее сообщалось, является расщепленным фрагментом ММП-8 [19]. Слабая иммунореактивность также наблюдалась в полосах 45 и 55 кДа, которые могли быть MMP-8, происходящими из неполиморфноядерных клеток [20].

    Анализ результатов денситометрии

    полосы 57 кДа показан на рисунке 4B.Было обнаружено, что местное применение 166 мМ H 2 O 2 повышало уровни белка активированной ММП-8 в ранах, но 10 мМ не влияло на уровни белка ММП-8 (р<0,01). Денситометрический анализ был также проведен для фрагмента 21 кДа, и было обнаружено, что он следует той же тенденции, что и иммунореактивная полоса при 57 кДа, что указывает на то, что степень деградации пропорциональна количеству ММП-8 (данные не показаны).

    Мышиная про-ММП-9 проявляется в виде полосы размером 105 кДа на SDS-PAGE, в то время как активированная ММП-9 появляется в виде полосы размером 97 кДа [21].Мы наблюдали полосы с сильной иммунореактивностью с молекулярной массой, которые соответствуют зимогену, но не расщепленным активным формам. Было обнаружено, что H 2 O 2 повышает уровень про-ММР-9, но это увеличение не было статистически значимым. p -значение для однофакторного дисперсионного анализа составило 0,1329.

    Также было измерено влияние H 2 O 2 на уровни тканевого ингибитора металлопротеиназы 1 (TIMP-1) (рис. S1). Две полосы наблюдались примерно при 28 кДа, что могло быть связано с разными гликозилированными изоформами [22].По результатам денситометрического анализа было обнаружено, что H 2 O 2 не вызывает каких-либо изменений уровней TIMP-1, независимо от используемой концентрации.

    Высокие концентрации H

    2 O 2 Увеличение инфильтрации нейтрофилов

    Влияние H 2 O 2 на инфильтрацию нейтрофилов и макрофагов также оценивали с помощью иммунофлуоресцентного окрашивания (рис. 5). У контрольных мышей мы наблюдали сильное иммунофлуоресцентное окрашивание нейтрофилов на 1-й день после ранения, которое уменьшалось по мере заживления раны, что было похоже на тенденции, описанные в литературе [23].Однако раны, обработанные 166 мМ H 2 O 2 , показали более сильное иммунофлуоресцентное окрашивание на 1 и 6 день по сравнению с контрольными ранами. Это указывает на то, что H 2 O 2 вызывал большую инфильтрацию нейтрофилов, которая также сохранялась в течение более длительного периода времени. С другой стороны, инфильтрация нейтрофилов в ранах, обработанных 10 мМ H 2 O 2 , не изменилась (рис. S2). Обе концентрации H 2 O 2 не влияли на инфильтрацию макрофагов (рис. S3).

    Рисунок 5. 166 мМ H 2 O 2 увеличивали инфильтрацию нейтрофилов в ранах на 1 и 6 день.

    Интенсивность флуоресценции неодермиса была количественно определена с помощью ImageJ. Определяемая площадь обведена пунктирной линией. Показанные результаты являются средними значениями ± SEM, n = 6-7. Показан репрезентативный раздел от каждого лечения. ЭС – Эшар; ГЭ – гиперпролиферирующий эпидермис; ND – неодермис.*p<0,05.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215.g005

    Высокие концентрации H

    2 O 2 Повышение фосфорилирования ERK1/2 и p38

    Ранее мы обнаружили, что H 2 O 2 может улучшать заживление ран путем активации пути MAPK в модели царапины кератиноцитов [24]. Поэтому мы приступили к исследованию того, влияет ли H 2 O 2 на путь MAPK в этой модели in vivo заживления ран. Вестерн-блот-анализ, сравнивающий неповрежденную кожу с тканями края раны, показал, что ранение активирует передачу сигналов как ERK1/2, так и p38, и увеличение фосфорилирования наблюдалось через 30 минут после ранения.(Рисунок 6). Также было замечено, что обработка 166 мМ H 2 O 2 дополнительно увеличивает уровень фосфорилирования. Однако сигнал фосфорилирования ослаблялся через 4 часа после ранения, и не наблюдалось различий в фосфорилировании между кожей, контрольными ранами и обработанными H 2 O 2 ранами (рис. S4). Это контрастирует с постоянным (не менее 8 часов) сигналом ERK1/2 и p38, который мы наблюдали в кератиноцитах, обработанных H 2 O 2 в клеточной культуре [24].

    Рисунок 6. Повреждение увеличивает фосфорилирование ERK1/2 и p38, которое может быть дополнительно усилено обработкой 166 мМ H 2 O 2 .

    (A) Репрезентативные пятна лизата тканей раны, собранные через 30 минут после ранения. Кожа обозначает кожу нераненых животных, тогда как контроль относится к ранам, обработанным PBS. (B) Плотность фосфорилированных ERK и pan-ERK и (C) фосфорилированных p38 и pan p38 нормализовали по отношению к α-тубулину, повторно исследованному из их соответствующего блота.Показанные результаты являются средними значениями ± SEM. (n = 4). Результаты денситометрии анализировали с помощью одностороннего дисперсионного анализа, а критерий значимости между всеми столбцами определяли с использованием апостериорного критерия Тьюки. Только сравнение между обработанными 166 мМ ранами и кожей было статистически значимым как для B, так и для C. ** p<0,01.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215.g006

    166 мМ H

    2 O 2 Отсрочка заживления без увеличения окислительного повреждения

    Из наших результатов видно, что 166 мМ H 2 O 2 замедляли заживление ран, создавая более протеолитическую среду.Однако имеется мало информации о том, может ли H 2 O 2 в высоких концентрациях, таких как 166 мМ, вызывать окислительное повреждение в ранах. Уровни F 2 -изопростана в ранах использовали в качестве надежного индикатора перекисного окисления липидов [25]. Уровни F 2 -изопростанов обычно нормализуют по отношению к арахидоновой кислоте, жирной кислоте-предшественнику изопростанов. Однако такая нормализация может быть спорной [26], поэтому мы решили показать уровни F 2 -изопростанов с нормализацией и без нормализации по арахидоновой кислоте.Суммарные уровни изопростанов типа III, IV и VI суммировали и выражали на единицу арахидоновой кислоты (фиг. 7А) и на единицу веса ткани (фиг. 7В).

    Рисунок 7. Ранение увеличивает перекисное окисление липидов и нитратное повреждение, но не карбонилирование белка.

    Уровни F 2 -isoprostanes в коже и ранах сравнивали путем нормализации относительно арахидоновой кислоты (A) или веса ткани (B). Показанные результаты являются средними ± SEM, n   =   5. Раны сравнивали с кожей с использованием однофакторного дисперсионного анализа с апостериорным критерием Даннетта.Звездочки обозначают уровень значимости по сравнению с кожей. Контрольные раны и раны H 2 O 2 также сравнивали друг с другом с использованием двухстороннего дисперсионного анализа, но различия не были статистически значимыми. (C) Уровни арахидоновой кислоты в коже и тканях раны. Показанные результаты являются средними ± SEM, n   =   5. Раны сравнивали с кожей с использованием однофакторного дисперсионного анализа с апостериорным критерием Даннетта. Звездочки обозначают уровень значимости по сравнению с кожей. Контрольные раны и раны H 2 O 2 также сравнивали друг с другом с использованием двухстороннего дисперсионного анализа, но различия не были статистически значимыми.(D) Уровни карбонилов белков в ранах сравнивали с неповрежденной кожей и выражали в виде кратности изменения. Показанные результаты представляют собой среднее кратное изменение ± SEM. Никакой разницы в уровнях карбонила белка не наблюдалось в контрольных ранах и ранах, обработанных 166 мМ H 2 O 2 . (E) Сравнение уровня 3-нитротирозина в коже и ранах. Показанные результаты являются средними значениями ± SEM, n  =   5. Уровни 3-нитротирозина в коже сравнивали с контрольными ранами или H 2 O 2 обработанными ранами и анализировали с помощью однофакторного дисперсионного анализа с последующим апостериорным тестом Даннета.Уровни 3-нитротирозина были значительно выше на 6-й день после ранения. Уровни 3-нитротирозина в контроле и в ранах, обработанных 166 мМ H 2 O 2 , также сравнивали с использованием двухфакторного ANOVA, и различия не были статистически значимыми. *р<0,05, **р<0,01, ***р<0,001.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215.g007

    Как показано на рисунке 7A, при ранении сильно повышались уровни F 2 -изопростана через 1 день после ранения как для контрольной группы, так и для H 2 O 2 обработанные раны.Повышение уровня F 2 -изопростана на 6-й день H 2 O 2 и на 10-й день в контрольных ранах также было статистически значимым по сравнению с неповрежденной кожей. Хотя увеличение F 2 -изопростанов для других временных точек не было статистически значимым, следует отметить, что их 95% доверительные интервалы (не показаны) не перекрываются с таковыми для интактной кожи. Таким образом, увеличение содержания F 2 -изопростанов на 3 и 6 день все еще может быть биологически важным.Уровни F 2 -изопростана в контроле и обработанных H 2 O 2 ранах также сравнивали с использованием двухфакторного дисперсионного анализа, но различия не были статистически значимыми. Это свидетельствует о том, что нанесенный H 2 O 2 не вызывал дополнительного перекисного окисления липидов.

    Мы также показали нормированный относительно массы ткани уровень F 2 -изопростана вместо арахидоновой кислоты. Результаты показали тенденцию, аналогичную уровням F 2 -изопростанов, нормализованным по отношению к арахидоновой кислоте, но с большей стандартной ошибкой для всех точек данных (фиг. 7B).Это означает, что нормализация по арахидоновой кислоте может быть важна для учета изменений в тканях. Интересно, что мы также обнаружили, что количество арахидоновой кислоты было выше в ранах по сравнению с неповрежденной кожей, при этом разница была статистически значимой между неповрежденной кожей, контрольными ранами на 3-й день и обработанными ранами на 6-й день (рис. 7C). ). Это повышает вероятность того, что увеличение F 2 -изопростана может быть смешано с увеличением его предшественника.Однако следует отметить, что увеличение арахидоновой кислоты (увеличивается с 3-го дня) отстает от увеличения F 2 -изопростана (повышается с 1-го дня). Поэтому мы полагаем, что увеличение F 2 -изопростанов не может быть просто связано с повышением уровня исходного субстрата. Мы также сравнили уровни арахидоновой кислоты между контрольными и обработанными H 2 O 2 ранами с использованием двухфакторного дисперсионного анализа и не обнаружили существенных различий.

    АФК также могут вызывать окисление белка, что можно оценить путем измерения уровня присутствующих карбонилов белка [27].Был использован метод слот-блоттинга для измерения карбонилов белков, и плотности полос из ран сравнивали с плотностью полос неповрежденной кожи и выражали как кратное изменение (рис. 7D). Было обнаружено, что уровни карбонилов белков, присутствующих в ранах, были сопоставимы с уровнями в неповрежденной коже. 166 мМ H 2 O 2 также не вызывали дальнейшего увеличения уровней карбонилов белков по сравнению с контрольными ранами.

    Мы также оценили уровень активных форм азота в ранах путем измерения уровня 3-нитротирозина, биомаркера нитратного повреждения [28].Также было обнаружено, что ранение увеличивает уровень 3-нитротирозина (рис. 7E). В отличие от F 2 -изопростанов, было обнаружено, что уровни 3-нитротирозина максимально увеличиваются на 6-й день, а не на 1-й день. H 2 O 2 также не увеличивает повреждение нитратами.

    Обсуждение

    Ранее сообщалось, что местное применение 50 мМ H 2 O 2 может способствовать закрытию раны в мышиной модели заживления ран, сопровождающейся усилением ангиогенеза.Однако было обнаружено, что 3% H 2 O 2 (980 мМ) задерживает заживление [3]. Также было показано, что 3% H 2 O 2 задерживает заживление в модели заживления ран на свиньях вместе с уменьшением толщины дермы [29].

    В наших результатах 10 мМ H 2 O 2 способствовали закрытию раны и ангиогенезу, тогда как 166 мМ H 2 O 2 (0,5%) вызывали снижение образования соединительной ткани и замедляли закрытие раны. Однако в предыдущих исследованиях не изучалось влияние H 2 O 2 на уровень окислительного повреждения.В нашем исследовании мы обнаружили, что высокие концентрации H 2 O 2 замедляют заживление ран без увеличения окислительного и нитратного повреждения. Это означает, что H 2 O 2 может вызывать плохое заживление с помощью других механизмов, помимо окисления этих биологических субстратов.

    Мы обнаружили, что возможный механизм, с помощью которого H 2 O 2 может задерживать заживление, заключается в уменьшении образования соединительной ткани, возможно, за счет повышения уровня ММП.Было высказано предположение, что чрезмерный протеолиз может быть причиной плохого заживления хронических ран [30], [31]. В нашем исследовании мы наблюдали статистически значимое увеличение уровней ММР-8 и меньшее, незначительное увеличение ММР-9 для ран, обработанных H 2 O 2 . MMP-8 является преобладающей коллагеназой в острых и хронических ранах [32], тогда как MMP-9 является наиболее распространенной желатиназой в хронических ранах [31]. MMP-8 расщепляет тройной спиральный коллаген в определенных местах, что приводит к самоденатурации коллагена в желатин, который может быть далее расщеплен желатиназами, такими как MMP-9 [33], [34].Как и ожидалось, избыточная экспрессия MMP-8 или -9 приводит к плохому заживлению [35], [36]. Однако также было показано, что истощение MMP-8 или -9 задерживает заживление [37], [38]. Похоже, что ММР-8 и -9 должны присутствовать на оптимальном уровне в течение нужного периода времени для достижения эффективного заживления, и что местное применение H 2 O 2 может нарушить физиологический баланс.

    TIMP-1 образует комплекс 1∶1 с металлопротеиназами для ингибирования их активности [39].Было замечено, что хронические раны, как правило, имеют более низкие уровни TIMP-1, и это может быть причиной повышенного протеолиза в хронических ранах [31]. Однако мы не наблюдали различий в уровнях TIMP-1 между ранами, обработанными различными концентрациями H 2 O 2 в нашей модели.

    Существует несколько возможных причин повышенной нейтрофильной инфильтрации, наблюдаемой в ранах, обработанных 166 мМ H 2 O 2 . H 2 O 2 может действовать как хемоаттрактант для нейтрофилов.Было показано, что ранение у рыбок данио индуцирует продукцию H 2 O 2 , которая, в свою очередь, привлекает нейтрофилы [1]. Мы показали, что H 2 O 2 увеличивает фосфорилирование ERK1/2, которое также недавно было показано как важное в H 2 O 2 , индуцированном хемотаксисе нейтрофилов [40]. Таким образом, представляется правдоподобным, что повторное нанесение хемоаттрактанта нейтрофилов на раны может привести к усилению воспаления.

    Другим возможным механизмом повышенной инфильтрации нейтрофилов является высвобождение молекул молекулярного паттерна, ассоциированного с повреждением (DAMP).Поврежденные клетки могут высвобождать различные молекулы, такие как ядерный белок HMGB1 и митохондриальная ДНК, которые не только привлекают нейтрофилы, но и активируют их [41]. Было показано, что H 2 O 2 индуцирует высвобождение этих сигналов опасности макрофагами и моноцитами в моделях in vitro [42].

    Также возможно, что H 2 O 2 может увеличивать выработку хемокинов, которые могут привлекать нейтрофилы. Мы исследовали эту возможность, измеряя CXCL1 (KC), CXCL5 (LIX), CCL2 (MCP-1) и CCL3 (MIP-1α) с помощью метода мультиплексного ELISA, но обнаружили, что при ранении сильно увеличивается продукция этих хемокинов, H 2 O 2 не изменяет профили секреции (рис. S5).Однако недостатком этого метода является невозможность определения биоактивности этих хемокинов. Интересно, что MMP-8 также расщепляет CXCL-8 и его мышиный гомолог CXCL5, и полученные фрагменты проявляют более сильные хемотазные свойства нейтрофилов [43]. Это может быть еще одним возможным механизмом повышенной нейтрофильной инфильтрации, которую мы наблюдали в обработанных H 2 O 2 ранах.

    Чрезмерная нейтрофильная инфильтрация может вызвать повреждение тканей за счет продукции АФК и различных протеаз.Поэтому было высказано предположение, что чрезмерная нейтрофильная инфильтрация может быть причиной плохого заживления ран [44]. Однако проблема представляется комплексной. Например, было показано, что в ранах мышей с диабетом, лишенных лептина, имеется стойкая инфильтрация нейтрофилами. Системное введение лептина улучшает заживление и уменьшает нейтрофильную, но не макрофагальную инфильтрацию у этих мышей [45]. С другой стороны, местное применение GM-CSF улучшило закрытие ран и неоваскуляризацию у мышей со стрептозоцин-индуцированным диабетом, моделью диабета I типа.Однако это улучшение заживления также было связано с повышенной нейтрофильной и макрофагальной инфильтрацией [46]. Разные группы показали, что истощение нейтрофилов ускоряет [47] или замедляет заживление [48]. Возможно, эффекты устойчивой нейтрофильной инфильтрации различаются в разных моделях заживления ран.

    Интересно, что хотя мы наблюдали повышенную нейтрофильную инфильтрацию, мы не наблюдали повышенного окислительного повреждения с точки зрения перекисного окисления липидов и нитрования белков.Это означает, что нейтрофилы, возможно, не продуцировали избыточного количества АФК или увеличение количества АФК было эффективно улучшено эндогенной системой антиоксидантной защиты. С другой стороны, мы наблюдали повышенный уровень MMP-8, который преимущественно продуцируется нейтрофилами [19].

    Ранее мы показали, что H 2 O 2 индуцирует стойкое фосфорилирование ERK1/2 и p38 в модели культуры клеток кератиноцитов [24]. Далее мы показали, что постоянное фосфорилирование ERK1/2 необходимо для его пролиферативных эффектов.Однако мы обнаружили, что H 2 O 2 не вызывает стойкого фосфорилирования ERK1/2 и p38 в наших ранах in vivo . Похоже, что экзогенно нанесенный H 2 O 2 оказывает различное воздействие на клетки в условиях in vivo и in vitro .

    Насколько нам известно, это первое исследование, в котором систематически отслеживаются изменения уровней окислительного повреждения в процессе заживления. Уровни перекисного окисления липидов были максимальными через 1 сутки после ранения, но снижались и стабилизировались на протяжении всего периода заживления.Было обнаружено, что F 2 -изопростаны являются отличными маркерами окислительного повреждения при заживлении ран. Их уровни были низкими, но определяемыми в нераненой коже, но увеличивались в 9 раз через 1 сутки после ранения. Также было замечено, что уровни арахидоновой кислоты также увеличиваются по мере заживления раны. Это согласуется с сообщениями о более высоких уровнях арахидоновой кислоты наряду с другими полиненасыщенными жирными кислотами в гипертрофических рубцах по сравнению с нормальной кожей [49]. Эти изменения могут быть связаны с изменениями биосинтеза жирных кислот в кератиноцитах и ​​фибробластах в ответ на сигналы воспаления и пролиферации.Они также могут быть связаны с изменениями клеточного состава ран, когда воспалительные клетки инфильтрируют раны, и разные типы клеток могут быть по-разному чувствительны к H 2 O 2 [50]. Потребуются дальнейшие исследования, чтобы определить причину изменения состава жирных кислот во время заживления ран.

    Уровни нитратного повреждения были самыми высокими на 6-е сутки после ранения с увеличением в 2 раза. С другой стороны, нам не удалось обнаружить каких-либо изменений в карбониле белка.Похоже, что F 2 -изопростаны являются более чувствительными биомаркерами окислительного повреждения, чем маркеры окисленного белка, поэтому мы рекомендуем использовать F 2 -изопростаны для использования в будущих исследованиях заживления ран.

    В соответствии с предыдущими исследованиями мы обнаружили, что раны демонстрируют двухфазный ответ на местное применение H 2 O 2 , где более низкие концентрации способствуют заживлению, а более высокие концентрации задерживают заживление.Однако задержка заживления не связана с усилением перекисного окисления липидов, окисления белков или нитратного стресса, что измеряется с помощью F 2 -изопростанов, карбонилов белков и 3-нитротирозинов.

    Дополнительная информация

    Рисунок S1.

    H 2 O 2 не влиял на уровни ТИМП-1 в ранах. тканей раны на 6-й день лизировали и количество TIMP-1 измеряли с помощью вестерн-блоттинга. (A) Представитель пятно TIMP-1. (B) Денситометрический анализ обеих полос, нормализованный по отношению к α-тубулину.Показанные результаты являются средним значением ± SEM. (n = 4). Результаты были проанализированы с использованием однофакторного дисперсионного анализа, и различия не были значительными. (р = 0,35)

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215.s001

    (TIF)

    Рисунок S2.

    166 мМ H 2 O 2 повышает инфильтрацию нейтрофилов, а 10 мМ H 2 O 2 — нет. Показанные результаты являются средними значениями ± SEM, n = 6–7. Показан репрезентативный раздел от каждого лечения. ЭС – Эшар; ГЭ – гиперпролиферирующий эпидермис; НД – неодермис.*р<0,05

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215.s002

    (TIF)

    Рисунок S4.

    Фосфорилирование ERK и p38 ослабляется на 4 часа. (A) Репрезентативные пятна лизата тканей раны, собранные через 30 минут после ранения. Кожа обозначает кожу нераненых животных, тогда как контроль относится к ранам, обработанным PBS. (B) Плотность фосфорилированных ERK и pan-ERK и (C) фосфорилированных p38 и pan p38 нормализовали относительно α-тубулина. Показанные результаты являются средними ± S.Э. М. (n = 4). Результаты денситометрии были проанализированы с помощью однофакторного дисперсионного анализа и не были статистически значимыми.

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215.s004

    (TIF)

    Рисунок S5.

    Ранение повышает уровень хемокинов в ранах, но 166 мМ H 2 O 2 не увеличивает его дальше. раневых тканей на 6-й день лизировали и анализировали с использованием метода массива суспензий на основе шариков. Кожей обозначали кожу, полученную от нераненых животных. (А) CXCL1 а.к.а. KC, (B) CXCL5, также известный как LIX, (C) CCL2, также известный как MCP-1, и (D) MIP-1α сильно повышались после ранения, но не подвергались воздействию обработки 166 мМ h3O2. Показанные результаты представляют собой среднее кратное изменение ± SEM. п = 5

    https://doi.org/10.1371/journal.pone.0049215.s005

    (TIF)

    Благодарности

    Мы благодарим профессоров Фан Тоан Танг и Сит Ким Пинг за содержательные обсуждения и доктора Тан Сун Ю за его помощь на начальном этапе проекта.

    Вклад авторов

    Идея и разработка экспериментов: AEKL YTW. Проведены эксперименты: AEKL YTW RH. Проанализированы данные: AEKL YTW RH. Предоставленные реагенты/материалы/инструменты для анализа: MW TD WTN. Написал статью: AEKL YTW BH.

    Каталожные номера

    1. 1. Niethammer P, Grabher C, Look AT, Mitchison TJ (2009)Градиент перекиси водорода в масштабе ткани способствует быстрому обнаружению ран у рыбок данио. Природа 459: 996–999.
    2. 2. Ригер С., Сагасти А. (2011)Перекись водорода способствует регенерации периферических сенсорных аксонов, вызванной повреждением, в коже рыбок данио.PLoS Биол 9: e1000621.
    3. 3. Рой С., Ханна С., Наллу К., Хант Т.К., Сен К.К. (2006)Заживление кожных ран зависит от окислительно-восстановительного контроля. Мол Тер 13: 211–220.
    4. 4. Оджа Н., Рой С., Хе Г., Бисвас С., Велаютам М. и др. (2008)Оценка окислительно-восстановительной среды в месте раны и значение Rac2 в заживлении кожи. Free Radic Biol Med 44: 682–691.
    5. 5. Шремл С., Ландталер М., Шаферлинг М., Бабилас П. (2011) Новая звезда в области заживления ран H(2)O(2)? Опыт Дерматол 20: 229–231.
    6. 6. Арул В., Масиламони Дж. Г., Джесудасон Э. П., Джаджи П. Дж., Инаятулла М. и др.. (2011) Коллагеновые матрицы, включающие оксидазу глюкозы, для восстановления кожных ран на моделях крыс с диабетом: биохимическое исследование. J Биоматер Appl.
    7. 7. Бенханифия М.Б., Букраа Л., Хаммуди С.М., Сулейман С.А., Маниваннан Л. (2011)Недавние патенты на местное применение меда при лечении ран и ожогов. Recent Pat Inflamm Allergy Drug Discov 5: 81–86.
    8. 8. Kwakman PH, Te Velde AA, de Boer L, Vandenbroucke-Grauls CM, Zaat SA (2011) Два основных лекарственных меда имеют разные механизмы бактерицидной активности.PLoS One 6: e17709.
    9. 9. Шафер М., Вернер С. (2008)Окислительный стресс при нормальном и поврежденном заживлении ран. Фармакол рез. 58: 165–171.
    10. 10. Yeoh-Ellerton S, Stacey MC (2003)Уровни железа и 8-изопростана в острых и хронических ранах. J Invest Dermatol 121: 918–925.
    11. 11. Мозли Р., Хилтон Дж. Р., Уоддингтон Р. Дж., Хардинг К. Г., Стивенс П. и др. (2004)Сравнение профилей биомаркеров окислительного стресса в условиях острой и хронической раны.Восстановление ран и регенерация 12: 419–429.
    12. 12. Шукла А., Расик А.М., Патнаик Г.К. (1997)Истощение восстановленного глутатиона, аскорбиновой кислоты, витамина Е и ферментов антиоксидантной защиты при заживлении кожной раны. Free Radic Res 26: 93–101.
    13. 13. Расик А.М., Шукла А. (2000) Антиоксидантный статус при замедленном заживлении ран. Int J Exp Pathol 81: 257–263.
    14. 14. Halliwell B, Gutteridge JMC (2007) Свободные радикалы в биологии и медицине. Оксфорд; Нью-Йорк: Издательство Оксфордского университета.851 с. п.
    15. 15. Кмин А., Шафер М., Эпп Н., Буньон П., Борн-Берклаз С. и др. (2007) Пероксиредоксин 6 необходим для целостности кровеносных сосудов в поврежденной коже. J Cell Biol 179: 747–760.
    16. 16. Дженнер А., Рен М., Раджендран Р., Нин П., Хуат Б.Т. и др. (2007) Добавка цинка ингибирует перекисное окисление липидов и развитие атеросклероза у кроликов, получающих диету с высоким содержанием холестерина. Free Radic Biol Med 42: 559–566.
    17. 17. Lee CY, Huang SH, Jenner AM, Halliwell B (2008) Измерение F2-изопростанов, гидроксиэйкозатетраеновых продуктов и оксистеролов в одном образце плазмы.Free Radic Biol Med 44: 1314–1322.
    18. 18. Goldner J (1938) Модификация метода трихрома Массона для рутинных лабораторных целей. Ам Дж. Патол 14: 237–243.
    19. 19. Hasty KA, Hibbs MS, Kang AH, Mainardi CL (1986)Секретируемые формы коллагеназы нейтрофилов человека. J Biol Chem 261: 5645–5650.
    20. 20. Hanemaaijer R, Sorsa T, Konttinen YT, Ding Y, Sutinen M, et al. (1997) Матриксная металлопротеиназа-8 экспрессируется в ревматоидных синовиальных фибробластах и ​​эндотелиальных клетках.Регуляция фактором некроза опухоли-альфа и доксициклином. J Biol Chem 272: 31504–31509.
    21. 21. Ван Х, Юнг Дж, Асахи М, Чванг В, Руссо Л и др. (2000)Влияние нокаута гена матриксной металлопротеиназы-9 на морфологические и двигательные исходы после черепно-мозговой травмы. J Neurosci 20: 7037–7042.
    22. 22. Kirk TZ, Mark ME, Chua CC, Chua BH, Mayes MD (1995) Миофибробласты кожи со склеродермией синтезируют повышенные уровни коллагена и тканевого ингибитора металлопротеиназы (TIMP-1) с двумя формами TIMP-1.J Biol Chem 270: 3423–3428.
    23. 23. Agaiby AD, Dyson M (1999)Динамика иммуновоспалительных клеток во время заживления кожных ран. J Анат 195 (часть 4): 531–542.
    24. 24. Лу А.Е., Хо Р., Холливелл Б. (2011)Механизм миграции кератиноцитов, вызванной перекисью водорода, в модели царапины. Free Radic Biol Med 51: 884–892.
    25. 25. Морроу Д.Д., Хилл К.Е., Берк Р.Ф., Наммур Т.М., Бадр К.Ф. и др. (1990) Ряд соединений, подобных простагландину F2, продуцируется in vivo у людей нециклооксигеназным механизмом, катализируемым свободными радикалами.Proc Natl Acad Sci U S A 87: 9383–9387.
    26. 26. Halliwell B, Lee CY (2009)Использование изопростанов в качестве биомаркеров окислительного стресса: некоторые редко рассматриваемые вопросы. Антиоксидно-редокс-сигнал 13: 145–156.
    27. 27. Suzuki YJ, Carini M, Butterfield DA (2010)Карбонилирование белков. Антиоксидно-редокс-сигнал 12: 323–325.
    28. 28. Бекман Дж. С., Коппенол В. Х. (1996) Окись азота, супероксид и пероксинитрит: хорошие, плохие и уродливые. Am J Physiol 271: C1424–1437.
    29. 29. Беннетт Л.Л., Розенблюм Р.С., Перлов С., Дэвидсон Дж.М., Бартон Р.М. и др. (2001) Сравнение местных средств для заживления ран in vivo. Plast Reconstr Surg 108: 675–687.
    30. 30. Лобманн Р., Амброш А., Шульц Г., Вальдманн К., Шивек С. и соавт. (2002)Экспрессия матриксных металлопротеиназ и их ингибиторов в ранах пациентов с диабетом и без него. Диабетология 45: 1011–1016.
    31. 31. Тренгов Н.Дж., Стейси М.К., Маколи С., Беннетт Н., Гибсон Дж. и др.(1999) Анализ острой и хронической раневой среды: роль протеаз и их ингибиторов. Восстановление ран 7: 442–452.
    32. 32. Nwomeh BC, Liang HX, Cohen IK, Yager DR (1999) MMP-8 является преобладающей коллагеназой в заживающих ранах и незаживающих язвах. J Surg Res 81: 189–195.
    33. 33. Миллер Э.Дж., Харрис Э.Д.-младший, Чанг Э., Финч Дж.Э.-младший, МакКроскери П.А. и другие. (1976) Расщепление коллагенов типа II и III коллагеназой млекопитающих: место расщепления и первичная структура в Nh3-концевой части меньшего фрагмента, высвобождаемого из обоих коллагенов.Биохимия 15: 787–792.
    34. 34. Murphy G, McAlpine CG, Poll CT, Reynolds JJ (1985)Очистка и характеристика костной металлопротеиназы, которая разрушает желатин и коллаген типов IV и V. Биохим Биофиз Акта 831: 49–58.
    35. 35. Danielsen PL, Holst AV, Maltesen HR, Bassi MR, Holst PJ, et al. (2011)Сверхэкспрессия матриксной металлопротеиназы-8 предотвращает правильное восстановление тканей. Хирургия 150: 897–906.
    36. 36. Reiss MJ, Han YP, Garcia E, Goldberg M, Yu H, et al.(2010)Матричная металлопротеиназа-9 задерживает заживление ран в мышиной модели раны. Хирургия 147: 295–302.
    37. 37. Кириакидес Т.Р., Вулсин Д., Скокос Э.А., Флекман П., Пирроне А. и соавт. (2009)Мыши, у которых отсутствует матриксная металлопротеиназа-9, демонстрируют замедленное заживление ран, связанное с замедленной реэпителизацией и нарушением фибриллогенеза коллагена. Матрица Биол 28: 65–73.
    38. 38. Гутьеррес-Фернандес А., Инада М., Балбин М., Фуэйо А., Питиот А.С. и соавт. (2007) Повышенное воспаление задерживает заживление ран у мышей с дефицитом коллагеназы-2 (ММР-8).FASEB J 21: 2580–2591.
    39. 39. Мерфи Г., Хубрехтс А., Кокетт М.И., Уильямсон Р.А., О’Ши М. и соавт. (1991) N-концевой домен тканевого ингибитора металлопротеиназ сохраняет ингибирующую металлопротеиназную активность. Биохимия 30: 8097–8102.
    40. 40. Yoo SK, Starnes TW, Deng Q, Huttenlocher A (2011) Lyn представляет собой окислительно-восстановительный датчик, который опосредует притяжение лейкоцитов к ране in vivo. Природа 480: 109–112.
    41. 41. Принц Л.Р., Уайт М.К., Сабро И., Паркер Л.С. (2011)Роль TLR в активации нейтрофилов.Curr Opin Pharmacol 11: 397–403.
    42. 42. Тан Д., Ши И., Кан Р., Ли Т., Сяо В. и др. (2007) Перекись водорода стимулирует макрофаги и моноциты к активному высвобождению HMGB1. J Leukoc Biol 81: 741–747.
    43. 43. Тестер А.М., Кокс Дж.Х., Коннор А.Р., Старр А.Е., Дин Р.А. и соавт. (2007) Реагирование на ЛПС и хемотаксис нейтрофилов in vivo требуют активности PMN MMP-8. PLoS One 2: e312.
    44. 44. Брубейкер А.Л., Шнайдер Д.Ф., Ковач Э.Дж. (2011)Нейтрофилы и натуральные Т-клетки-киллеры как негативные регуляторы заживления ран.Эксперт Рев Дерматол 6: 5–8.
    45. 45. Горен И., Кампфер Х., Подда М., Пфайлшифтер Дж., Франк С. (2003)Лептин и воспаление раны у мышей ob/ob с диабетом: дифференциальная регуляция притока нейтрофилов и макрофагов и потенциальная роль струпа как поглотителя воспалительных клеток и медиаторов . Диабет 52: 2821–2832.
    46. 46. Fang Y, Shen J, Yao M, Beagley KW, Hambly BD и др. (2009)Гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий фактор усиливает заживление ран при диабете за счет усиления провоспалительных цитокинов.Бр. Дж. Дерматол 162: 478–486.
    47. 47. Dovi JV, He LK, DiPietro LA (2003)Ускоренное закрытие ран у мышей с истощением нейтрофилов. J Leukoc Biol 73: 448–455.
    48. 48. Nishio N, Okawa Y, Sakurai H, Isobe K (2008)Истощение нейтрофилов задерживает заживление ран у старых мышей. Возраст (Дордр) 30: 11–19.
    49. 49. Номура Т., Тераши Х., Омори М., Сакураи А., Сунагава Т. и др. (2007)Анализ липидов нормальной дермы и гипертрофических рубцов. Восстановление ран 15: 833–837.
    50. 50. Loo AE, Halliwell B (2012)Влияние перекиси водорода на модель совместного культивирования кератиноцитов и фибробластов на заживление ран. Biochem Biophys Res Commun 423: 253–258.
    .

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *