Лактобактерин как разводить новорожденному: Лактобактерин сухой инструкция по применению: показания, противопоказания, побочное действие – описание Lactobacterin dry лиофилизат д/приг. суспензии д/приема внутрь и местн. применения 4 млрд.КОЕ: 3 дозы или 5 доз фл. 10 шт. (36454)

Содержание

Биоамикус лактобактерии в каплях флакон-дозатор жидкость 5 мл

Понятие микрофлора кишечника утрачивает свою актуальность, так как в реальности это «микробиом», почти как отдельный орган человека, или уникальная совокупность бактерий, грибов и вирусов в кишечнике весом до 3 кг у взрослого человека.

Научно доказано, что с нарушенной микробиотой кишечника детей и взрослых могут быть ассоциированы пищевая аллергия, инфекции, диарея, язвенная болезнь, ожирение, кишечная колика, синдром раздраженного кишечника, бронхиальная астма, аутоиммунные заболевания, сахарный диабет 2-го типа, ранний детский аутизм, некоторые виды рака, воспалительные состояния кишечника.

Заселение незрелого кишечника ребенка бактериями происходит постепенно, обычно с преобладанием бифидо- и лактобактерий. Состав формирующейся микробиоты новорожденных детей будет определять их дальнейшее здоровье. Поэтому всегда чрезвычайно важно учитывать состав микроорганизмов при назначении пробиотиков детям с рождения.

Lactobacillus Reuteri является одной из самых наиболее хорошо изученных пробиотических лактобактерий в мире. Проведено более 150 клинических исследований с этими бактериями, где доказана их эффективность и безопасность. Это единственный вид Lactobacillus, который синтезирует противомикробное вещество Реутерин, обладающий широким спектром активности в отношении патогенных бактерий, в том числе клостридий, грибов и простейших.

Именно этот вид содержится в пробиотике нового поколения — БиоАмикус лактобактерии в каплях.

Какими свойствами должен обладать пробиотик близкий к идеальному для детей грудного возраста?

1. Безопасность — пробиотик последнего поколения БиоАмикус лактобактерии в каплях разработан в Канаде специально для детей с первых дней жизни и содержит уникальный штамм лактобактерий L. Reuteri NCIMB 30351. Он выделен из грудного молока матери и является естественным для кишечника ребенка. Инновационная формула не содержит казеин, лактозу, консерванты, ароматизаторы, подсластители или продукты ГМО — может применяться для детей с рождения, подверженным пищевой аллергии, а также с лактазной непереносимостью.

2. Эффективность — быстрый эффект. При соприкосновении с жидкой средой внутри человеческого организма бактерии сразу «оживают» и начинают размножаться. В отличии от порошков, особая форма хранения пробиотика в натуральном консерванте -подсолнечном масле позволяет бактериям быстро и безопасно преодолеть агрессивную кислую среду желудка, желчные кислоты и ферменты и закрепиться во всех отделах ЖКТ, начиная с ротовой полости. Дозировка подобрана таким образом, чтобы максимально ускорить эффект, который обычно проявляется уже на 2-3 день после приема пробиотика.

3. Удобство — не надо разводить или смешивать несколько компонентов. Работает по принципу: встряхнул — накапал — проглотил.

4. Качество — производится в Канаде по высшему международному стандарту качества и контроля производства GMP. Это означает гарантированную активность лактобактерий до конца срока годности, указанной на упаковке.

Отзывы о препарате Лактобактерин для новорожденных, как его разводить по инструкции к применению?

Желудок только что родившегося малыша полностью стерилен, он не содержит каких-либо бактерий. Но условием того, чтобы ЖКТ нормально сформировался, является поставка достаточного количества бактерий в организма малыша.

Именно благодаря им организм учится правильно перерабатывать питание.

Весь комплекс необходимых бактерий поступает с материнским молоком, но оно усваивается не до конца. Часть его оседает в кишечнике и начинает бродить, а выделившиеся в результате газы давят изнутри на кишечник и вызывают весьма болезненные ощущения.

В таком случае педиатры обычно назначают Лактобактерин для новорожденных. Следует упомянуть, что в Европе Лактобактерин входит в каждодневный комплекс питания, ведь в нем содержится свыше двух миллиардов необходимых малышу полезных бактерий.

Почему возникает дисбактериоз?

Чтобы ЖКТ работал правильно, он должен быть наполнен определенным количеством определенных бактерий

, полезных для малыша.

Однако в случае нарушения количественно-качественного состава бактерий возникает дисбактериоз. Причем он может развиваться и у здоровых детей.

Причины возникновения дисбактериоза:
  • истощение малыша, предшествующее недоеданием;
  • недостаток ферментов;
  • поглощение антибиотиков и различных других химических лекарств;
  • гормонотерапия;
  • воздействие вредных излучений.

Для чего применяется Лактобактерин?

Лактобактерин имеет в составе все необходимые бактерии. Поэтому при нарушении собственного состава бактерий малыша он дополняет его до нормального.

При этом он избавляет новорожденного от колик, заболевания Крона, воспаления в толстом кишечнике, синдрома возбужденного ЖКТ, энтероколита.

Также он помогает при воспалении и инфекции дыхательный путей.

Помимо этого Лактобактерин обычно выписывают при употреблении малышом антибиотиков. Поскольку антибиотики

разрушают нормальную сферу ЖКТ, необходимо, чтобы что-либо ее восстанавливало. В этом и помогает препарат.

Инструкция по применению препарата

Ни в коем случае не занимайтесь самолечением. Всегда перед началом лечения консультируйтесь с вашим лечащим врачом, не бойтесь задавать вопросы.

Возможно, в некоторых смесях, которые употребляет малыш, есть лактобактерии. У новорожденных этот препарат может вызвать аллергию, тошноту, рвоту, и еще несколько незначительных побочек.

Как разводить Лактобактерин для новорожденных?

Лактобактерин имеет вид жидкости. На один стакан с прокипяченной водой разводят одну чайную ложку лекарства.

Это – 1 доза Лактобактерина. Затем половину жидкости в стакане выливают назад в пузырек с лекарством, чтобы лекарство полностью растворилось и не образовало комочков.

Затем ждут 5 минут и переливают жидкость назад в стакан. Пьют лекарство (весь стакан) за 40 минут до еды, 2 или 3 раза в день. Иногда можно увидеть Лактобактерин

в таблетках или ампулах.

Одна таблетка равняется одной обычной дозе, а вот ампула равняется трем обычным дозам, поэтому ее нужно разделить на 3 части.

Ампулу также растворяют в воде и дают пить, при этом готовую смесь нужно употребить как можно быстрее, так как она быстро теряет полезные свойства.

Узнаем можно ли использовать Плантекс для новорожденных. Для чего нужен препарат?

Теперь рассмотрим причины шелушения кожи у новорожденного. Как бороться с недугом?

Как применяется череда для купания новорожденных, можно узнать по ссылке.

Как правильно принимать?

Смесь можно давать детям любого возраста, а вот таблетки можно давать только детям старше 3 лет. Если помимо Лактобактерина вам выписали витамины, то имеет смысл развести их вместе с Лактобактерином и выпить вместе.

При помощи микроорганизмов они будут лучше всасываться кишечником и быстрее попадут в кровь вашего малыша.

Всегда соблюдайте указания врача. Если он выписал пить пять доз вместо одной за раз, то нужно за раз разводить весь пузырек, и не стоит волноваться.

Если же нужно пить меньше дозы за раз, то нужно разделить лекарство из расчета, что в пузырьке содержится пять доз.

Однако хранить разведенный препарат нельзя, он потеряет все полезные свойства, поэтому не надо разводить весь пузырек в большом количестве воды.

Существуют некоторые противопоказания к применению данного препарата, например нельзя давать Лактобактерин недоношенным детям или тем, кто имеет родовую травму.

Очень редко бывает аллергическая реакция на препарат, но не стоит давать Лактобактерин детям, явно проявляющим аллергию при начале приема.

Отзывы родителей о препарате

Мы пьем лактобактерин утром и вечером, вместе с ним

бифидум жидкий. Начали пить еще до сдачи анализов, так как догадывались, что с малышом.

Анализы подтвердили – нехваток бифидо- и лактобактерий. Малыш плохо себя чувствовал, он все время тужился и старался пукнуть. Один раз его очень сильно вырвало – он отрыгнул почти весь обед.

После этого и начали пить лактобактерин, потом сдали анализы. Пьем уже месяц, теперь малыш нормально кушает и больше не тужится. Доктор сказал пить еще две недели, но уже все прошло. Но все равно пропьем, мало ли что. Теперь буду советовать лактобактерин знакомым – он действительно работает.

Мы поняли, что у нашего ребенка колики – он плакал и тужился постоянно. Мы сначала пытались справиться обычными способами – массаж, выкладывали на животик, но не помогало.

Сходили к доктору – он сказал, что почти у всех детей до 3-4 месяцев дисбаланс микроорганизмов в кишечнике.

Особенно если они на искусственном питании – а мы как раз держим нашего на искусственном.9 КОЕ

✓ Изученные, безопасные и высокоэффективные бактерии в составе

✓ Высокая выживаемость штаммов для доставки в нужные отделы кишечника

✓ Не содержит искусственных красителей и ГМО

✓ Упаковка гарантирует безопасность применения и сохранение всех свойств

✓ Всего 1 применение в сутки

Микрофлора кишечника — это миллиарды микроорганизмов, состоящих в симбиозе с человеком и выполняющих множество важных функций.

Они помогают организму расщеплять и переваривать пищу, способствуют усвоению витаминов, формируют защитный слой в кишечнике, препятствующий проникновению токсинов и микробов, продуцируют полезные витамины и необходимые организму кислоты.

Важная функция микрофлоры — иммуномодулирующая: кишечник — это место, где происходит постоянная «тренировка» иммунной системы через контакт с чужеродными микроорганизмами.

ЗДОРОВАЯ МИКРОФЛОРА —

ЭТО ЗАЛОГ ПРЕКРАСНОГО ЗДОРОВЬЯ, КРАСОТЫ, ВЫСОКОЙ ЭНЕРГИИ, ХОРОШЕГО САМОЧУВСТВИЯ И ОТЛИЧНОГО НАСТРОЕНИЯ.

Большая часть микрофлоры состоит из полезных бактерий. Основные бактерии, которые поддерживают здоровое пищеварение и помогают организму нормально функционировать, — это бифидобактерии и лактобактерии. Бифидо- и лактобактерии усиливают действие друг друга. Количество бактерий измеряется в единицах КОЕ: чем их больше в организме, тем лучше.

БИФИДОБАКТЕРИИ

создают естественный барьер в кишечнике и препятствуют проникновению болезнетворных микроорганизмов и токсинов.

✓ поддерживают здоровое пищеварение;
✓ укрепляют иммунитет;
✓ способствуют оптимизации иммунной функции.

ЛАКТОБАКТЕРИИ

угнетают рост гнилостных и условно-патогенных микроорганизмов.

✓ поддерживают уровень pH в кишечнике;
✓ производят ингибиторы, которые используются для защиты от патогенных микроорганизмов.

БАЛАНС МИКРОФЛОРЫ

Баланс полезных и вредных бактерий формирует нормальную, здоровую микрофлору.
Если преобладают вредные, а полезные бифидо- и лактобактерии находятся в меньшинстве, такое состояние называется дисбалансом микрофлоры и требует коррекции.

Симптомы дисбаланса:
различные расстройства ЖКТ;
ухудшение состояния волос, кожи и ногтей, нездоровый цвет лица, бесконтрольный набор веса;
повышенная чувствительность организма к аллергенам;
плохое настроение.

* В сравнении с другими продуктами Nutrilite™
** В соответствии с Приложением 2 к техническому регламенту Таможенного союза «Пищевая продукция в части ее маркировки» [ТР ТС 022/2011]

БАДы NUTRILITE™ НЕ ЯВЛЯЮТСЯ ЛЕКАРСТВЕННЫМИ СРЕДСТВАМИ

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ. ПРОКОНСУЛЬТИРУЙТЕСЬ СО СПЕЦИАЛИСТОМ

БАДы NUTRILITE™ предназначены только для личного использования. Любые иные способы использования и реализации БАД допускаются исключительно в случаях и при соблюдении требований, предусмотренных действующим законодательством РФ. БАДы NUTRILITE™ можно приобрести в Торговых центрах компании ООО «Амвэй». Адреса Торговых центров, а также наличие продукции можно уточнить на сайте www.amway.ru или позвонив по телефону +7 (495) 981-4000. Продукция прошла регистрацию в Роспотребнадзоре в рамках таможенного союза. Вся продукция соответствует требованиям ТР ТС 021/2011 «О безопасности пищевой продукции»; ТР ТС 022/2011 «Пищевая продукция в части ее маркировки».

Вопросы и Ответы (PDF)
Свидетельство о государственной регистрации
Приложение к свидетельству о государственной регистрации

В состав NUTRILITE™ BALANCE WITHIN™ ПРОБИОТИК входят бактерии B. lactis HN019™ и Lactobacillus acidophilus NCFM®.
Они способствуют:

✓ Поддержанию нормальной кишечной микрофлоры;

✓ Поддержанию и нормализации защитной функции кишечника;

✓ Активации иммунных процессов, повышению сопротивляемости организма;

✓ Улучшению здоровья кишечника.

Витамины В6 и В9 выступают кофакторами: усиливают действие пробиотика. Кроме того, это «витамины настроения», так как они вносят незаменимый вклад в нормальное функционирование психологических функций человека.

БАДы NUTRILITE™ НЕ ЯВЛЯЮТСЯ ЛЕКАРСТВЕННЫМИ СРЕДСТВАМИ

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ. ПРОКОНСУЛЬТИРУЙТЕСЬ СО СПЕЦИАЛИСТОМ

БАДы NUTRILITE™ предназначены только для личного использования. Любые иные способы использования и реализации БАД допускаются исключительно в случаях и при соблюдении требований, предусмотренных действующим законодательством РФ. БАДы NUTRILITE™ можно приобрести в Торговых центрах компании ООО «Амвэй». Адреса Торговых центров, а также наличие продукции можно уточнить на сайте www.amway.ru или позвонив по телефону +7 (495) 981-4000. Продукция прошла регистрацию в Роспотребнадзоре в рамках таможенного союза. Вся продукция соответствует требованиям ТР ТС 021/2011 «О безопасности пищевой продукции»; ТР ТС 022/2011 «Пищевая продукция в части ее маркировки».

ВНУТРИ ВАС — ЦЕЛЫЙ ОТДЕЛЬНЫЙ МИР!

В нашем кишечнике более 500 видов самых разных бактерий. Они бывают хорошими и плохими.

Хорошие бактерии все время работают для улучшения нашего самочувствия — регулируют функцию кишечника, обезвреживают токсины, расщепляют белки, углеводы, синтезируют витамины и работают над иммунитетом.

Плохие, вредные, бактерии находятся в «режиме ожидания», когда же хороших бактерий станет меньше. Стресс, простуда, неправильное питание — любой триггер способен вызвать дисбаланс в кишечнике в сторону болезнетворных.

Мы привыкли думать, что наши эмоциональные проявления и иммунитет зависят исключительно от сознательных усилий: работы над собой и физических упражнений.

Однако, это не всегда так…

Нашим настроением и состоянием могут управлять бактерии, живущие в загадочном мире микрофлоры кишечника!
Дисбаланс этих бактерий в кишечнике может привести к настоящей войне во всем организме.

Симптомы дисбаланса:

• различные расстройства ЖКТ;
• ухудшение состояния волос, кожи и ногтей, нездоровый цвет лица, бесконтрольный набор веса;
• повышенная чувствительность организма к аллергенам;
• плохое настроение.

Такие симптомы могут вызвать различные патогенные бактерии, если баланс полезных и патогенных бактерий нарушен в пользу последних.

Рассмотрим самые, казалось бы, банальные симптомы, которые могут говорить о том, что баланс Вашей микрофлоры нарушен.

Если ваш организм постоянно хочет спать, «на ручки» или кушать сладенькое — возможно, им завладели те самые ужасные плохие бактерии?

ЗНАКОМЬТЕСЬ, МОНСТРЫ, КОТОРЫЕ МОГУТ ТЕРРОРИЗИРОВАТЬ ВАШ ОРГАНИЗМ!

Далеко не все, но основные!

Демотиватор

Нет сил. Нет счастья.
С ним ваши идеи и начинания станут абсолютно никчемными.
Зачем вставать с утра, если всё равно ничего не получится.
Знакомо?

Исследования показывают*, что у людей с депрессией становится значительно больше бактерий Bacteroidetes и Protobacteria. Из-за них нарушается выработка гормона серотонина (гормона счастья), 95% которого образуется в кишечнике при хорошей микрофлоре.

Безсон

Безсон — причина ваших бессонных ночей.

Бактерии Corpococcus причастны к метаболизму нейромедиатора дофамина. Неправильная работа дофаминовой системы напрямую связана со сном. Все просто – где мало дофамина, там мало мелатонина, того самого гормона сна.
Если производство сладких снов внезапно приостановилось, то, скорее всего, Безсон руководит процессом.

Сладенький

Конфетку? Или пончик? Или и то, и другое вместе?
Знакомьтесь — Сладенький!

Избыток бактерий Akkermansia Muciniphila и Clostridium вызывают непреодолимую тягу к сладкому. Наелись мучного, а на утро высыпания и отечность? Доказано, что повышенное потребление сладкого приводит к воспалительным процессам в кишечнике и развитию плохих бактерий.
А количество бактерий из родов бифидо и лакто у людей с лишним весом значительно уменьшается.

НЕ БОЙТЕСЬ — БОРОТЬСЯ С «УЖАСТИКАМИ» МОЖНО И НУЖНО!

Сократите сахар, газированные напитки, количество потребляемого фастфуда и не забудьте о NUTRILITE™ BALANCE WITHIN™ ПРОБИОТИК.

В составе этого пробиотика есть не только достаточное количество лакто- и бифидобактерий, которые помогут привести баланс микрофлоры в норму, но и пиридоксин (витамин В6), который является важным элементом в обменных процессах. Вместе с фолиевой кислотой (витамин В9), которая тоже присутствует в составе, они отвечают за здоровые нервы, хороший метаболизм и вашу молодость.

Победите армию «ужастиков» с NUTRILITE™ BALANCE WITHIN™ ПРОБИОТИК!

Наталья Дюжая-Решетникова

Диетолог, нутрициолог, фуд-коуч, психолог (НПП).
Создатель более 10 авторских программ по похудению.

* Huang T-T, Lai J-B, Du Y-L, Xu Y, Ruan L-M and Hu S-H (2019) Current Understanding of Gut Microbiota in Mood Disorders: An Update of Human Studies. Front.
Genet. 10:98. doi: 10.3389/fgene.2019.00098. URL: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fgene.2019.00098/full

БАДы NUTRILITE™ НЕ ЯВЛЯЮТСЯ ЛЕКАРСТВЕННЫМИ СРЕДСТВАМИ

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ. ПРОКОНСУЛЬТИРУЙТЕСЬ СО СПЕЦИАЛИСТОМ

БАДы NUTRILITE™ предназначены только для личного использования. Любые иные способы использования и реализации БАД допускаются исключительно в случаях и при соблюдении требований, предусмотренных действующим законодательством РФ. БАДы NUTRILITE™ можно приобрести в Торговых центрах компании ООО «Амвэй». Адреса Торговых центров, а также наличие продукции можно уточнить на сайте www.amway.ru или позвонив по телефону +7 (495) 981-4000. Продукция прошла регистрацию в Роспотребнадзоре в рамках таможенного союза. Вся продукция соответствует требованиям ТР ТС 021/2011 «О безопасности пищевой продукции»; ТР ТС 022/2011 «Пищевая продукция в части ее маркировки».

Биологически активные веществаСодержание в суточной дозе
БАД к пище (1 пакетик в день)
% от рекомендуемого суточного потребления*
Витамин В61,4 мг70
Фолиевая кислота (витамин В9)200 мкг100
Бифидобактерии (Bifidobacterium animalis subsp. lactis (HN019™))5 x 109 КОЕ
Лактобактерии (Lactobacillus acidophilus (NCFM™))1 x 109 КОЕ

Биологически активные вещества

Витамин В6

Содержание в суточной дозе
БАД к пище (1 пакетик в день)

1,4 мг

% от рекомендуемого суточного потребления*

70

Фолиевая кислота (витамин В9)

Содержание в суточной дозе
БАД к пище (1 пакетик в день)

200 мкг

% от рекомендуемого суточного потребления*

100

Бифидобактерии (Bifidobacterium animalis subsp. lactis (HN019™))

Содержание в суточной дозе
БАД к пище (1 пакетик в день)

5 x 109 КОЕ

Лактобактерии (Lactobacillus acidophilus (NCFM™))

Содержание в суточной дозе
БАД к пище (1 пакетик в день)

1 x 109 КОЕ

Пищевая ценностьна порцию 1 пакетик-саше (1,5 г)
Энергетическая ценность12,10 кДж / 2,8905 ккал
Белки0,0285 г
Жиры0,0015 г
Углеводы1,344 г

Пищевая ценность

на порцию 1 пакетик-саше (1,5 г)

Энергетическая ценность

12,10 кДж / 2,8905 ккал

Белки

0,0285 г

Жиры

0,0015 г

Углеводы

1,344 г

СОСТАВ

Носитель: изомальт, бифидобактерии Bifidobacterium animalis subsp. lactis (HN019™), лактобактерии Lactobacillus acidophilus (NCFM™), агент антислеживающий: диоксид кремния аморфный, натуральная вкусоароматическая добавка Ваниль; носители: глицерин; фолиевая кислота; пиридоксина гидрохлорид.

ВНИМАНИЕ!

Содержит лактозу. Содержит подсластитель. При чрезмерном употреблении может (могут) оказывать слабительное действие.

БАДы NUTRILITE™ НЕ ЯВЛЯЮТСЯ ЛЕКАРСТВЕННЫМИ СРЕДСТВАМИ

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ. ПРОКОНСУЛЬТИРУЙТЕСЬ СО СПЕЦИАЛИСТОМ

БАДы NUTRILITE™ предназначены только для личного использования. Любые иные способы использования и реализации БАД допускаются исключительно в случаях и при соблюдении требований, предусмотренных действующим законодательством РФ. БАДы NUTRILITE™ можно приобрести в Торговых центрах компании ООО «Амвэй». Адреса Торговых центров, а также наличие продукции можно уточнить на сайте www.amway.ru или позвонив по телефону +7 (495) 981-4000. Продукция прошла регистрацию в Роспотребнадзоре в рамках таможенного союза. Вся продукция соответствует требованиям ТР ТС 021/2011 «О безопасности пищевой продукции»; ТР ТС 022/2011 «Пищевая продукция в части ее маркировки».

РЕКОМЕНДАЦИИ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

Пробиотик для кишечника от Nutrilite™ очень просто употреблять.
Взрослым одно саше один раз в день во время еды. Содержимое саше развести в стакане воды (сок, молоко, йогурт) или добавить в негорячую пищу. БАД также можно употреблять в неразбавленном виде: содержимое саше высыпать на язык, затем проглотить. Продолжительность приема — 1 месяц. При необходимости прием можно повторить.

ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ

В качестве биологически активной добавки к пище — источника пробиотических микроорганизмов (бифидобактерий и лактобактерий), а также витаминов В6 и фолиевой кислоты. Не является лекарством.

ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ

Индивидуальная непереносимость компонентов продукта. Перед применением рекомендуется проконсультироваться с врачом. Беременным и кормящим женщинам принимать под наблюдением врача.

УСЛОВИЯ ХРАНЕНИЯ

Хранить в плотно закрытой упаковке в сухом, недоступном для детей месте при температуре не выше 25˚C.
Не нужно хранить в холодильнике. Упаковка гарантирует безопасность применения и сохранение всех свойств.
Производство США в соответствии со стандартами GMP.

СРОК ГОДНОСТИ: 18 МЕСЯЦЕВ ОТ ДАТЫ ИЗГОТОВЛЕНИЯ

БАДы NUTRILITE™ НЕ ЯВЛЯЮТСЯ ЛЕКАРСТВЕННЫМИ СРЕДСТВАМИ

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ. ПРОКОНСУЛЬТИРУЙТЕСЬ СО СПЕЦИАЛИСТОМ

БАДы NUTRILITE™ предназначены только для личного использования. Любые иные способы использования и реализации БАД допускаются исключительно в случаях и при соблюдении требований, предусмотренных действующим законодательством РФ. БАДы NUTRILITE™ можно приобрести в Торговых центрах компании ООО «Амвэй». Адреса Торговых центров, а также наличие продукции можно уточнить на сайте www.amway.ru или позвонив по телефону +7 (495) 981-4000. Продукция прошла регистрацию в Роспотребнадзоре в рамках таможенного союза. Вся продукция соответствует требованиям ТР ТС 021/2011 «О безопасности пищевой продукции»; ТР ТС 022/2011 «Пищевая продукция в части ее маркировки».

границ | Микробиота кишечника новорожденных телят и влияние потенциальных пробиотиков на снижение диарейных заболеваний путем ингибирования колонизации патогенами

Введение

Новорожденные телята подвержены диарее, особенно в первый месяц жизни (Bendali et al., 1999). По оценкам Министерства сельского хозяйства США, от диареи в США ежегодно умирает от 4 до 25% телят, что приводит к огромным экономическим потерям в животноводстве (USDA, 2017).Диарею телят сложно смягчить из-за ее многофакторной этиологии, которая включает как инфекционные, так и неинфекционные факторы (Whon et al., 2021). Антибиотики обычно используются для лечения диареи телят, но эффективность лечения антибиотиками вызывает сомнения (Kim et al., 2021). Кроме того, использование антибиотиков не является целенаправленным, что может негативно сказаться на микробном составе кишечника телят (Ianiro et al., 2016; Ramirez et al., 2020).

Здоровая микробиота кишечника предотвращает колонизацию чужеродными патогенами (Pickard et al., 2017; Фан и др., 2019, 2020, 2021; Kim et al., 2021) и укреплять иммунную систему хозяина за счет взаимодействия между антигенами и иммунными клетками на ранних стадиях жизни (Zhao and Elson, 2018; Fan et al., 2020). Повышенная проницаемость кишечника и нарушение микробиоты кишечника являются ключевыми факторами, приводящими к патоген-индуцированной диарее. Связь диареи телят как с микробным составом, так и с функциональным дисбиозом проливает свет на улучшение состояния диареи за счет модулирования микробной экосистемы кишечника.В исследовании была предпринята попытка провести трансплантацию фекальной микробиоты (ТФМ) от здоровых доноров шести телятам корейского бурого рогатого скота, страдающим диареей, и были получены многообещающие результаты, в результате которых заболеваемость диареей значительно снизилась (Kim et al., 2021). Кроме того, пероральное введение пробиотиков может быть возможной профилактической или поддерживающей терапией при диарее телят. Было показано, что продолжительность диареи у телят сокращается за счет введения мультивидовых пробиотиков и дрожжевого болюса (Renaud et al., 2019). Чтобы разработать более эффективные пробиотики для смягчения последствий диареи, необходимо охарактеризовать микробиоту кишечника здоровых телят и телят, страдающих диареей. В нескольких исследованиях изучалась разница в микробном составе кишечника здоровых молочных телят и телят, страдающих диареей, и была показана решающая роль развития микробиоты в регулировании здоровья кишечника на ранней стадии (Gomez et al., 2017; Hennessy et al., 2021). Тем не менее, важные кишечные комменсалы, которые способствуют предотвращению диареи у новорожденного мясного скота, особенно выращиваемого на пастбищах, остаются плохо изученными.

В этом исследовании мы стремимся выяснить роль кишечной микробиоты в развитии диареи у месячных телят и определили несколько потенциальных пробиотиков, которые могут способствовать здоровью кишечника молодых телят за счет подавления диареегенных бактерий. Полученные данные помогут в будущей разработке диетических вмешательств, которые могут лечить или предотвращать кишечные и диарейные заболевания у молодых телят.

Материалы и методы

Управление животными

Телята перед отъемом, включенные в это исследование, принадлежали к одному поколению разнопородного стада ангус-брахманов (MAB) Университета Флориды.Телята родились естественным образом на пастбище во время родового сезона. Вес новорожденных измеряли в течение 24 часов после родов. Телята выращивались вместе с матерями во время предотъемного периода на пастбище в животноводческом комплексе Santa Fe River Ranch Beef Unit, Флорида, США.

Сбор проб фекалий, морфологическая категоризация и обработка проб

Образцы фекалий были взяты у 91 мясного теленка в возрасте от 21 до 35 дней. Вкратце, каждый образец фекалий собирали из ректально-анального соединения (RAJ) с помощью двух стерильных ватных тампонов.Во время сбора образцов наблюдали и регистрировали морфологию образцов фекалий на основе критериев Бристольской шкалы стула, особенно цвет, консистенцию и наличие крови (Koppen et al., 2016). Мазки с образцами фекалий помещали в коническую пробирку объемом 15 мл на льду и в течение 1 часа доставляли в лабораторию для дальнейшей обработки. Каждый образец мазка ресуспендировали в смеси 2 мл бульона Луриа-Бертани (LB) и 2 мл 30% глицерина, как описано ранее (Fan et al., 2020). Затем фекальный раствор разделяли на четыре пробирки по 2 мл и замораживали в морозильной камере сверхнизкой температуры при -80°C.

Секвенирование ампликона гена 16S рРНК

Образцы фекалий оттаивали на льду и гомогенизировали. Затем 1 мл каждого образца использовали для выделения ДНК с помощью набора QIAamp PowerFecal DNA в соответствии с инструкциями производителя (Qiagen, США). Чтобы понять бактериальное сообщество, была применена стратегия двойного индекса секвенирования (Kozich et al., 2013). Вкратце, область V4 гена 16S рРНК амплифицировали с помощью ПЦР с праймерами с двойным индексом (Kozich et al., 2013). Реакция ПЦР-амплификации включала 1 мкл праймера с прямым индексом (10 мМ), 1 мкл праймера с обратным индексом (10 мМ), 1 мкл матрицы ДНК 10 нг/мкл и 17 мкл мастер-микса Pfx AccuPrime (Invitrogen, США).Амплификацию начинали с денатурации в течение 5 мин при 95°С, затем следовали 30 циклов при 95°С в течение 30 с, отжиг при 55°С в течение 30 с и удлинение при 72°С в течение 1 мин с конечной элонгацией в течение 5 мин при 72°С. Затем ампликоны очищали и нормализовали с помощью набора для нормализации планшетов SequalPrep (Invitrogen, США). Для создания библиотеки ДНК было объединено одинаковое количество ампликонов V4 со штрих-кодом из каждого образца.

Анализ секвенирования ампликона гена 16S рРНК

Данные секвенирования гена 16S рРНК были проанализированы с использованием версии 2 конвейера Quantitative Insights in Microbial Ecology (QIIME 2) (Bolyen et al., 2019). Вкратце, были импортированы необработанные чтения с парными концами, и качество исходных оснований было оценено в соответствии с интерактивным графиком качества. Контроль качества последовательности выполнялся с помощью конвейера алгоритма шумоподавления Divisive Amplicon (DADA2), реализованного в QIIME 2, включая этапы фильтрации считываний низкого качества, считываний с шумоподавлением, слияния чтений с парными концами и удаления химерных чтений. Филогенетическое дерево было создано с использованием конвейера align-to-tree-mafft-fasttree из плагина q2-phylogeny QIIME 2.Глубина секвенирования была нормализована до 10 800 последовательностей на образец. Количество вариантов последовательности ампликона (ASV), индекс Шеннона и расстояние Брея-Кертиса рассчитывали филогенетическим методом основных показателей. Все ASV были классифицированы по бактериальной таксономии с использованием плагина q2-feature-classifier для QIIME 2 и базы данных SILVA 138.

Сетевой анализ совпадений

Для исследования бактериально-бактериальных взаимодействий в кишечном бактериальном сообществе одномесячных телят в сетевом интерфейсе оценивали случаи совместного появления основных родов бактерий, которые присутствовали не менее чем в 50% нормальных и аномальных образцов фекалий, соответственно. , используя попарные ранговые корреляции Спирмена ( r s ) на основе относительной численности согласно предыдущему исследованию (Fan et al., 2020). Ранговая корреляция Спирмена была проанализирована с помощью Hmisc в RStudio (версия 1.1456). Значимая ранговая корреляция между двумя родами бактерий ( r s >0,2 или r s <-0,2, значение p с поправкой на FDR <0,05) рассматривалась как событие одновременного возникновения. Сеть была визуализирована с использованием алгоритма Force Atlas в интерактивной платформе Gephi 0.9.2. В сети узлы представляли разные роды, а ребра указывали на значительную корреляцию между узлами.Размер узлов представлял степень связи, а толщина ребер указывала на силу корреляции.

Прогноз микробной функции

Функциональная способность кишечного микробного сообщества была предсказана с использованием онлайн-версии Galaxy для филогенетического исследования сообществ путем реконструкции ненаблюдаемых состояний (PICRUSt; http://galaxy.morganlangille.com/; Langille et al., 2013). Таблица закрытых эталонных операционных таксономических единиц (OTU) была создана путем сопоставления OTU с базой данных Greengenes от 13 августа 2013 года с использованием QIIME (версия 1.9.0). Нормализация количества копий, предсказание метагенома и категоризация функций на основе путей Киотской энциклопедии генов и геномов (KEGG) проводились в соответствии со стандартным процессом анализа.

Выделение

Lactobacillus spp. Штаммы и антимикробная активность

Нормальный и патологический кал после 10-кратного серийного разведения в фосфатно-солевом буфере (PBS) высевали на агар де Мана, Рогозы и Шарпа (MRS) (Difco, США) для определения концентрации молочнокислых бактерий (LAB ), затем планшеты инкубировали в анаэробных условиях при 37°С в течение 48 ч с использованием системы GasPak EZ Anaerobe System (BD, США).Чтобы выделить штамм Lactobacillus из нормальных фекалий, колонии с различной морфологией отбирали случайным образом и очищали на одной и той же твердой среде для выделения чистых колоний. Всего из образцов фекалий здоровых телят было выделено 79 колоний. Геномную ДНК выделенных колоний экстрагировали методом бисерной обработки, как описано ранее (Ma et al., 2021). Затем для специфичности изолятов амплифицировали ген 16S с использованием универсальной пары праймеров KCP812 (5′-CAG GCC TAA CAC ATG CAA GTC-3′) и KCP813 (5′-GGG CGG WGT GTA CAA GGC-3′; Marchesi и другие., 1998). Амплифицированные продукты ПЦР очищали с использованием набора для очистки ПЦР QIAquick (Qiagen, США). Очищенные продукты ПЦР секвенировали в Genewiz (Саут-Плейнфилд, США), а последовательности гена 16S рРНК идентифицировали с помощью поиска BLAST в базе данных последовательностей 16S рибосомной РНК Национального центра биотехнологической информации (NCBI).

Антимикробную активность изолятов Lactobacillus оценивали по сравнению с Escherichia coli KCJ2K2616, E.coli K88 KCJ4567 и Salmonella enterica Typhimurium KCJ187. Для определения антимикробной активности изолятов использовали метод диффузии в лунки агара с небольшой модификацией (Espeche et al., 2009; Boranbayeva et al., 2020). Вкратце, антимикробная активность стерилизованных на фильтре (0,22 мкм) супернатантов 18-часовых культур Lactobacillus spp. были протестированы против патогенов, описанных выше. Ночные культуры возбудителей (10 7 КОЕ) смешивали с мягкой агаризованной средой LB (0.75% агар) и затвердевали. Затем в лунку с агаром загружали 100 мкл супернатантов. После инкубации в течение ночи при 37°С измеряли диаметры зон ингибирования. Lactobacillus plantarum (ранее известный как Lactobacillus plantarum ) KCJ4051 использовали в качестве положительного контроля (Yu et al., 2021), и каждый штамм тестировали в трех повторностях.

Статистический анализ

Различия в альфа-разнообразии и антимикробной активности анализировали с использованием критерия Стьюдента t или однофакторного дисперсионного анализа с последующим F-критерием и критерием HSD Тьюки для попарного сравнения нескольких средних значений с использованием призмы GraphPad.Различия между расстояниями Брея-Кертиса были проанализированы с использованием перестановочного многомерного ANOVA (PERMANOVA) с командой бета-групповой значимости в конвейере QIIME 2.

Линейный дискриминантный анализ Размер эффекта (LEfSe) был применен для идентификации уникальных бактерий в нормальных и аномальных фекалиях на основе непараметрического факториального критерия суммы рангов Крускала-Уоллиса. Величина эффекта 2 считалась значимой разницей.

Результаты

Высокая распространенность аномального стула у месячных мясных телят

Одномесячные телята имели высокую распространенность аномального стула.Среди 91 образца фекалий 74 (81,3%) были твердыми и коричневатыми, которые были классифицированы как нормальные фекалии, тогда как 17 (18,7%) были аномальными, в том числе шесть слегка водянистыми, два очень водянистыми, восемь с незначительной примесью крови и один чрезвычайно водянистым. геморрагический (рис. 1А; дополнительная таблица 1). Двенадцать из 17 аномальных фекалий были от телок. Интересно, что масса тела при рождении с аномальным калом была значительно ниже, чем у телок с нормальным калом (31,86 ± 2,69 кг против 35,26 ± 4,50 кг, p = 0.0178, рис. 1B), предполагая, что масса тела при рождении может быть связана со здоровьем кишечника. Однако у быков такой закономерности не наблюдалось (38,44 ± 8,13 кг против 38,14 ± 5,17 кг; рис. 1C).

Рисунок 1 . Распределение нормальных и аномальных фекалий и его связь с массой тела при рождении телят перед отъемом. (A) Распространенность нормального и аномального стула у телят перед отъемом. (B) Разница в весе при рождении между телками с нормальным и ненормальным калом. (C) Разница в весе при рождении между быками с нормальным фекалиями и быками с аномальными фекалиями. На блочной диаграмме звездочка означает, что они значительно различаются ( p <0,05) на основе теста Стьюдента t .

Нормальные и аномальные фекалии молодых телят, несущие отличительную микробиоту

Для сравнения состава микробиоты нормальных и аномальных фекалий было проведено секвенирование участка V4 гена 16S. Всего было сгенерировано 2 172 004 (23 868 ± 455) необработанных считываний, и после удаления ошибок замещения и химер с использованием конвейера DADA2 было получено 1 703 949 (18 724 ± 367) высококачественных ASV (дополнительная таблица 2).

Анализ альфа-разнообразия был впервые проведен для сравнения богатства и разнообразия бактериального сообщества между нормальным и аномальным фекалиями с использованием показателей альфа-разнообразия, числа ASV и индекса Шеннона соответственно. Аномальные фекалии имели значительно меньшее количество ASV по сравнению с нормальными фекалиями ( p = 0,017, рис. 2А), что указывает на более низкое бактериальное богатство кишечника у телят с аномальными фекалиями. Однако мы не наблюдали явной разницы в индексе Шеннона между группами ( p = 0.2841, рис. 2В), обозначая сопоставимые уровни видового разнообразия. Кроме того, визуализация различий в структуре кишечной микробиоты между аномальными и нормальными фекальными группами через график анализа основных координат (PCoA) не показала существенной разницы ( p = 0,214) между группами на основе расстояния Брея-Кертиса, оцененного с помощью PERMANOVA. (Рисунок 2С). В обоих фекалиях преобладали Firmicutes , Bacteroidota и Proteobacteria phyla (рис. 2D; дополнительная таблица 3).Чтобы дифференцировать важные бактериальные таксоны между фекальными группами, была создана кладограмма на основе LefSe. Аномальный кал таил выше, относительное обилие Negativicutes , в то время как нормальные фекалии были выше, относительное обилие комменсалов, в том числе Rikenellaceae , Tannerellaceae , Erysipelatoclostridiaceae , Christensenellaceae , Oscillospiraceae и Anaerovoraceae семьей (рис 2Е). Чтобы понять влияние различной микробиоты на функциональные свойства микробов, был применен PICRUSt для прогнозирования относительного обилия бактериальных генов.Бактериальные гены, участвующие в метаболизме кофакторов и витаминов, клеточных процессах и передаче сигналов, были обогащены в аномальных фекалиях, тогда как те, которые участвуют в подвижности клеток, имели более высокое относительное количество в нормальных фекалиях (рис. 2F).

Рисунок 2 . Характеристики микробиоты нормальных и аномальных фекалий. (A) Количество вариантов последовательности ампликона (ASV) в нормальных и аномальных фекалиях. (B) Индекс Шеннона нормального и патологического кала. (C) График PCoA, основанный на расстояниях Брея-Кертиса, сравнивающих состав микробиоты между нормальным и аномальным фекалиями. Разницу в расстоянии Брея-Кертиса анализировали с помощью перестановочного многомерного дисперсионного анализа (PERMANOVA). (D) Распределение большого количества типов бактерий в нормальных и аномальных фекалиях. (E) Таксономическая кладограмма, полученная в результате анализа величины эффекта линейного дискриминантного анализа (LEfSe), показывающая уникальные бактериальные таксоны в нормальных и аномальных фекалиях. (F) Результаты анализа LEfSe, показывающие, что микробная функция значительно различается между нормальным и аномальным калом.

Вариации микробиоты аномальных фекалий различной морфологии

После сравнения состава кишечной микробиоты у телят с аномальными фекалиями и телят с нормальными фекалиями группа аномальных фекалий была разделена на подкатегории на основе различных морфологий (слабая водянистость, выраженная водянистость, легкая геморрагия и тяжелая геморрагия) для дальнейшего анализа.Количество ASV было ниже в водянистых фекалиях и зависело от степени водянистости (рис. 3A). Среднее количество ASV для нормального, умеренно водянистого и сильно водянистого кала составило 124,3, 102,2 и 78,00 соответственно. Фекалии с небольшим количеством крови содержали несколько более низкий уровень ASV (114,4) по сравнению с нормальными фекалиями, но фекалии с выраженной геморрагией содержали гораздо меньше ASV (81,0). Аналогичная, но менее очевидная картина наблюдалась для индекса Шеннона (рис. 3В). Результаты показывают постепенное уменьшение видового богатства и разнообразия бактерий с увеличением степени тяжести как геморрагических, так и водянистых фекалий.Однако не наблюдалось существенной разницы в общей структуре микробиоты между тяжелыми водянистыми фекалиями и тяжелыми геморрагическими фекалиями с нормальными фекалиями в соответствии с графиком PCoA, основанным на расстоянии Брея-Кертиса (рис. 3C).

Рисунок 3 . Характеристики микробиоты фекалий различной морфологии. (А) Количество АСВ фекалий различной морфологии. (B) Индекс Шеннона фекалий различной морфологии. (C) График PCoA, основанный на расстояниях Брея-Кертиса, сравнивающих состав микробиоты между фекалиями различной морфологии. (D) Роды бактерий, которые показали либо самую высокую относительную численность, либо самую низкую относительную численность в нормальных фекалиях по сравнению с другими морфологиями. (E) Роды бактерий, которые постепенно менялись в зависимости от степени выраженности фекальной водянистой морфологии. (F) Роды бактерий, которые постепенно менялись по мере тяжести геморрагической морфологии.

Далее мы выявили ключевые различия в составе микробиоты фекалий различной морфологии.Микробиота на уровне типов была одинаковой среди нормальных фекалий, умеренных водянистых фекалий и легких геморрагических фекалий, в то время как тяжелые водянистые фекалии содержали в 20 раз больше Fusobacteriota по сравнению с нормальными фекалиями, а тяжелые геморрагические фекалии имели гораздо меньший уровень Verrucomicrobiota (дополнительное приложение). Фигура 1). На родовом уровне, нормальные фекалии, укрывали наибольшее отношение Barnesiellaella и Barnesielella и , _UCG-014, Colidextribacter и ucillospiraceae_ ucg_005, но самые низкие относительные обилия [ RUMICOCCUS ] _ Torques _Group и Tyzzerella к фекалиям с другими морфологиями (рис. 3D; дополнительная таблица 4).Более того, относительные изобилия Parabacteroides , Lactobacillus , неслоссифицированные осциллосхема и Gallibacterium и Gallibacterium , и Gallibacterium , и Gallibacterium были постепенно снижены с увеличением степени тяжести водянной морфологии, тогда как относительные изобилия Phascolarctobacterium , Lachnoclostridium , Lachnospiraceae _UCG-004, Veillonella и Parasutterella были повышены, что указывает на то, что эти бактерии были чувствительны к водянистой морфологии фекальных масс (рис. 3E; дополнительная таблица 5).Что касается геморрагической морфологии, Butyricicoccus и неклассифицированный Oscillospiraceae постепенно обогащались в фекалиях с усилением тяжести (рис. 3F; дополнительная таблица 6).

Профиль микробиоты тяжелых водянистых и геморрагических фекалий

Далее мы извлекли отдельные образцы сильно водянистых и геморрагических фекалий и охарактеризовали их структуру микробиоты, поскольку они представляют больший риск для здоровья кишечника телят. Все тяжелые аномальные образцы фекалий имели гораздо меньшее бактериальное богатство в соответствии с количеством ASV (рис. 4A) и немного более низкое бактериальное разнообразие в соответствии с индексом Шеннона (рис. 4B).Что касается состава микробиоты, то в одном из тяжелых водянистых фекалий (Severe Watery # 1) относительная численность Fusobacterium (26,56%), Peptostreptococcus (3,23%), Campylobacter (2,96%) выше. , Parasutterella (2,25%) и Tyzzerella (1,18%) по сравнению с нормальными фекалиями (0,61, 0,01, 0,34, 0,36 и 0,22%), а другой (тяжелая водянистая № 2) содержал больше Tyzzerella (13,27%), Veillonella (10.52%), Lachnospiraceae _UCG-004 (6,94%), [ Ruminococcus ]_ торки _group (4,53%), чем нормальный кал (0,22, 1,37, 0,57 и 0,8%; рис. 4C). Что касается тяжелых геморрагических фекалий, то относительная численность Tyzzerella (2,5%) и примерно в 5 раз больше Veillonella (6,06%), чем нормальные фекалии (0,22 и 1,37%; рисунок 4C).

Рисунок 4 . Особенности микробиоты обильных водянистых или геморрагических фекалий. (А) Количество АСВ подгруппы фекалий. (Б) Индекс Шеннона подгруппы кала. (C) Точечный график, показывающий относительное обилие родов в фекалиях подгруппы.

Бактериально-бактериальные взаимодействия, предсказанные сетью совместных событий

Чтобы выяснить, существуют ли различия в бактериально-бактериальных взаимодействиях в кишечных микробных экосистемах, сети совместной встречаемости были проанализированы с использованием 59 и 54 основных родов бактерий, которые присутствовали более чем в 50% нормальных и аномальных образцов фекалий соответственно. .Нормальные фекалии имели восемь уникальных основных бактериальных родов, включающих Actinomyces , Christensenellaceae R-7 Group, Collinsella , COPROCCUS , erysipelatocloStridiaceae UCG-004, INCERTAE SEDIS , ECKILLOSPIRACEAE NK4A214, RF39, и Rhodospirillales некультивированные, тогда как аномальные фекалии содержали только четыре уникальных основных рода бактерий, включая Coprobacter , Intestinimonas , Streptococcus и Tyzzerella .Нормальные фекалии имели больше взаимодействий между бактериями ( n = 656) по сравнению с аномальными фекалиями ( n = 272) на основе корреляций Спирмена ( P Adjust<0,05, r s >0,2, или r с <−0,2). Для нормальных фекалий сеть была сгруппирована в три модуля в соответствии с внутренними взаимодействиями между узлами (рис. 5А). В модуле 1 Oscillospira , который имел более высокую относительную численность в нормальных фекалиях (рис. 2E), был центром среди 22 основных родов бактерий, имеющих 38 значимых корреляций с другими бактериями (рис. 5A).Примечательно, что Oscillospira отрицательно ассоциировалась с Campylobacter , который показал высокую относительную численность в сильно водянистых фекалиях, и Escherichia-Shigella , которые содержат несколько патогенных видов, которые могут вызывать диарею у молодых телят. В модуле 2 Oscillospiraceae UCG-005 был центром среди 20 основных бактерий, имеющих 38 корреляций с другими бактериями. Oscillospiraceae UCG-005 показал отрицательную связь с Veillonella , которая была обогащена водянистыми фекалиями (рис. 3E), а также с Campylobacter в модуле 1.В модуле 3 Lachnospiraceae UCG-004, связанный с водянистыми фекалиями, был центром среди 17 основных бактерий и отрицательно коррелировал с группой Christensenellaceae R-7 в модуле 1, которая принадлежала к уникальным основным бактериям нормальный кал. Важно отметить, что значительная отрицательная корреляция также наблюдалась между полезными бактериями Lactobacillus и Escherichia-Shigella .

Рисунок 5 . Бактериально-бактериальные взаимодействия, предсказанные совместными сетями. (A) Сеть сочетанного присутствия бактерий в нормальных фекалиях. (B) Бактериальная сеть сочетанного возникновения в патологических фекалиях. Сети сосуществования, предсказывающие взаимодействия между бактериями среди основных родов бактерий (присутствующих в более чем 50% нормальных или аномальных образцов фекалий) в фекалиях телят. Связи были обнаружены на основе ранговых корреляций Спирмена ( r s >0,2 или r s <-0,2, FDR с поправкой p значение <0,05).Размеры точек представляют количество связей с другими таксонами. Толщина линий представляет силу родства. Модули были обозначены на основе алгоритма обнаружения сообщества.

Для аномальных фекалий сеть бактериально-бактериального взаимодействия также была сгруппирована в три модуля, причем модуль 1 был доминирующим, но количество узлов и корреляций было значительно меньше по сравнению с нормальными фекалиями (рис. 5B). Группа [ Eubacterium ] coprostanoligenes была центром среди 38 основных бактерий с 26 значительными корреляциями с другими бактериями.Примечательно, что негативные ассоциации между потенциальными полезными бактериями, Oscillospira и Lactobacillus , и условно-патогенными микроорганизмами, Campylobacter и Escherichia-Shigella , которые были обнаружены в нормальных фекалиях, не наблюдались в аномальных фекалиях, что позволяет предположить, что полезные бактерии могут подавлять диареегенные патогены в нормальной здоровой микробиоте кишечника.

Идентификация

Lactobacillus spp. Штаммы и их антимикробная активность

Поскольку мы обнаружили более высокое содержание Lactobacillus в нормальных фекалиях (3.12%) по сравнению с легким водянистым калом (2,02%) и сильным водянистым калом (1,82%), а также отрицательные корреляции между Lactobacillus и Escherichia-Shigella в нормальных фекалиях, мы выделили штаммов Lactobacillus и оценили их противомикробное действие. активность против патогенов, чтобы проверить, могут ли эти штаммы способствовать здоровью желудочно-кишечного тракта. Количество молочнокислых бактерий в нормальных фекалиях было значительно больше, чем в аномальных фекалиях ( p = 0,0198; рис. 6А), что позволяет предположить, что концентрации молочнокислых бактерий могут быть связаны со здоровьем кишечника у телят.Кроме того, 79 Lactobacillus spp. штаммы были выделены из нормальных фекалий и идентифицированы как Limosilactobacillus reuteri (ранее известный как Lactobacillus reuteri ), который был наиболее преобладающим видом в нормальных фекалиях (рис. 6В). Мы также идентифицировали Lactobacillus johnsonii , Lactobacillus amylovorus и Ligilactobacillus animalis (ранее известный как Lactobacillus animalis ) в нормальных фекалиях (рис. 6B).Чтобы проверить, могут ли эти штаммы подавлять патогенные штаммы, как показано на рисунке 5, мы измерили антимикробную активность этих штаммов в отношении E. coli и S . Typhimurium, который может вызывать диарею у телят (Boranbayeva et al., 2020). Все Lactobacillus spp. штаммы ингибировали рост трех патогенов (рис. 6C-E). Примечательно, что L. reuteri и L. johnsonii продемонстрировали явное ингибирование, аналогичное хорошо известному пробиотическому штамму L.plantarum против всех тестовых патогенов. Lactobacillus reuteri и L. johnsonii были наиболее многочисленными и вторыми по распространенности видами Lactobacillus у здоровых телят (рис. 6B), что позволяет предположить, что эти Lactobacillus spp. может положительно повлиять на здоровье кишечника, подавляя колонизацию патогенных бактерий в кишечнике телят перед отъемом.

Рисунок 6 . Выделение штаммов Lactobacillus и их антимикробная активность. (A) Концентрация молочнокислых бактерий (МКБ) в нормальном и патологическом фекалиях. На гистограмме звездочка означает, что они существенно различаются ( p <0,05) на основе теста Стьюдента t . (B) Номер Lactobacillus spp. выделены из здоровых телят и идентифицированы с помощью секвенирования гена 16S рРНК. (C-E) Антимикробная активность Lactobacillus spp. против патогенных штаммов. Столбцы с разными буквами указывают на значительную разницу ( p <0.05) на основе однофакторного ANOVA с последующим тестом F и тестом HSD Тьюки для попарного сравнения нескольких средних значений.

Обсуждение

Диарея является основной причиной смерти мясных и молочных телят в первый месяц их жизни (Caffarena et al., 2021). Гомеостаз кишечных микробных экосистем имеет центральное значение для поддержания функций желудочно-кишечного тракта телят перед отъемом (Virginio Junior and Bittar, 2021). Тем не менее, существует ограниченное количество исследований, сообщающих о взаимосвязи между кишечной микробиотой и диареей у молодняка мясного скота.В этом исследовании мы исследовали состав фекальной микробиоты одномесячных мясных телят, выращенных на пастбищах, на основе их морфологии фекалий. Было идентифицировано множество бактерий, чтобы отличить нормальный твердый кал от аномального водянистого или геморрагического кала, которые имели отрицательную корреляцию с диареегенными патогенами.

Наиболее очевидным паттерном аномальной фекальной микробиоты является низкое бактериальное богатство. Количество видов бактерий в кале резко уменьшалось по мере тяжести водянистого или геморрагического явления.Разнообразный кишечный микробиом состоит из в 100 раз большего количества генов, чем хозяин, и служит функциональным расширением геномов хозяина (Zhu et al., 2010). Снижение бактериального богатства кишечника может привести к ограничению функции микробиоты, включая пищеварение, обучение иммунной системы и подавление патогенов (Nicholson et al., 2012; Pickard et al., 2017; Schluter et al., 2020). Потеря микробного богатства может быть связана с большим распространением патогенных бактерий, таких как Fusobacterium и Campylobacter .Примечательно, что мы обнаружили значительно более низкую массу тела при рождении у телок с аномальным калом по сравнению с теми, у которых был нормальный кал, что позволяет предположить, что развитие плода, вероятно, влияет на созревание микробиоты кишечника молодых телят.

В этом исследовании мы провели скрининг потенциальных патогенных и полезных бактерий в соответствии с морфологией фекалий. Бактерии, обогащенные в ненормальном кале включают Negativicutes , Tyzzerella , [Ruminococcus] _torques_group , Parasutterella , Veillonella , Lachnospiraceae _UCG-004, Lachnoclostridium , Butyricicoccus , Fusobacterium , и Кампилобактер . Campylobacter , включая C. jejuni , C. hyointestinalis и C. fetus , способны вызывать раздражение желудочно-кишечного тракта телят и вызывать диарею (Firehammer and Myers, 1981; Diker et al., 1990). ). В предыдущих исследованиях сообщалось, что Negativicutes , Veillonella и Fusobacterium были более распространены у поросят, страдающих диареей, по сравнению со здоровыми поросятами-отъемытами (Huang et al., 2019; Karasova et al., 2021). В исследованиях на людях Tyzzerella способствуют нейровоспалению, и его увеличение связано с диареей (Nakajima et al., 2020). Parasutterella связана с развитием и прогрессированием СРК (Chen et al., 2018). Однако в нескольких исследованиях сообщается о роли этих бактерий в диарее телят.

Мы также определили несколько потенциальных полезных бактерий, которые показали более высокое относительное изобилие в нормальных фекалиях, в том числе Christensenellaceae , CLOSCILLOSCIRACEAE ( COLIDEXTRIBACTER и Occilloshrase ), Barnesiellaella , Parabacteroides и Lactobacillus .Хотя во многих исследованиях было показано положительное влияние перорального введения штаммов Lactobacillus на уменьшение диареи у свиней и телят, лишь в нескольких исследованиях измерялось изменение численности Lactobacillus между больным диареей и здоровым мясным скотом (Hou et al., 2015; Фернандес и др., 2020). В этом исследовании мы дополнительно выделили штамм Lactobacillus от здоровых телят с нормальным калом, в том числе L. reuteri , L. johnsonii , L.amylovorus и L.animalis . В частности, наиболее распространенные виды Lactobacillus от здоровых телят в нашем анализе, L. reuteri и L. johnsnii , вводятся в качестве потенциальных пробиотиков и улучшают здоровье желудочно-кишечного тракта у телят перед отъемом (Fernandez et al., 2020). Джиа и др. (2021) предложили L. animalis с высокой антибактериальной активностью в отношении кишечных патогенов в качестве противодиарейного пробиотика для свиней (Jia et al., 2021). Интересно, что все четыре вида Lactobacillus , выделенные от телят в этом исследовании, проявляли антибактериальную активность против патогенных бактерий, которые обычно вызывают диарею у крупного рогатого скота, что позволяет предположить, что высокое содержание комменсалов Lactobacillus у здоровых телят полезно для предотвращения колонизации патогенов.

В предыдущем исследовании Kim et al. (2021) применили FMT для эффективного облегчения диареи телят и обнаружили увеличение относительной численности Christensenellaceae и Parabacteroides (Kim et al., 2021). Другое исследование показало значительное снижение Oscillospira у крупного рогатого скота на откормочных площадках с геморрагической диареей по сравнению со здоровым скотом (Zeineldin et al., 2018). Наше исследование в соответствии с другими результатами указывает на важную роль этих бактерий в поддержании здоровья кишечника крупного рогатого скота. Хотя функция Barnesiella у крупного рогатого скота в значительной степени неизвестна, она продемонстрировала влияние на облегчение колита, вызванного DSS, у мышей (Yang et al., 2020). Более того, поскольку мы обнаружили сильную корреляцию между этими потенциальными полезными бактериями и патогенными бактериями, будущие исследования будут направлены на изучение их конкурентных взаимодействий.

Заявление о доступности данных

Данные секвенирования ампликона гена 16S рРНК, полученные в ходе текущего исследования, были представлены в NCBI в рамках BioProject PRJNA751859.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Университета Флориды.

Вклад авторов

PF и KJ разработали исследование. Джей Ди управлял животными. PF, GL, MK, YZ и TL собрали и обработали образцы.PF, MK и GL проанализировали данные. PF, MK, GL и KJ составили рукопись. PF, MK и KJ завершили эту рукопись. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Финансирование

Это исследование финансировалось грантом для аспирантов исследований и образования в области устойчивого сельского хозяйства на юге страны, GS19-206, при поддержке Национального института продовольствия и сельского хозяйства, Министерства сельского хозяйства США, PF и KJ. MK был частично поддержан Программой фундаментальных исследований Национального исследовательского фонда Кореи, Министерства образования (2020R1A6A3A03038510).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Примечание издателя

Все претензии, изложенные в этой статье, принадлежат исключительно авторам и не обязательно представляют претензии их дочерних организаций или издателя, редакторов и рецензентов. Любой продукт, который может быть оценен в этой статье, или претензии, которые могут быть сделаны его производителем, не гарантируются и не поддерживаются издателем.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2021.772863/full#supplementary-material

.

Сноски

Ссылки

Бендали Ф., Санаа М., Бише Х. и Шелчер Ф. (1999). Факторы риска, связанные с диареей у новорожденных телят. Вет. Рез. 30, 509–522.

Реферат PubMed | Академия Google

Болиен, Э., Rideout, J.R., Dillon, M.R., Bokulich, N.A., Abnet, C.C., Al-Ghalith, G.A., et al. (2019). Воспроизводимая, интерактивная, масштабируемая и расширяемая наука о микробиомах с использованием QIIME 2. Nat. Биотехнолог. 37, 852–857. doi: 10.1038/s41587-019-0209-9

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Боранбаева Т., Карахан А. Г., Тулемиссова З., Мыктыбаева Р. и Озкая С. (2020). Свойства нового пробиотика-кандидата и лактобактерина-ТК(2) против диареи у телят. Пробиотики Антимикроб. Белки 12, 918–928. doi: 10.1007/s12602-020-09649-4

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Caffarena, R.D., Casaux, M.L., Schild, C.O., Fraga, M., Castells, M., Colina, R., et al. (2021). Причины диареи новорожденных телят и смертности в пастбищных молочных стадах в Уругвае: исследование случай-контроль на фермах. Браз. Дж. Микробиол. 52, 977–988. doi: 10.1007/s42770-021-00440-3

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Чен Ю.J., Wu, H., Wu, S.D., Lu, N., Wang, Y.T., Liu, H.N., et al. (2018). Parasutterella в сочетании с синдромом раздраженного кишечника и хроническим воспалением кишечника. Дж. Гастроэнтерол. Гепатол. 33, 1844–1852 гг. doi: 10.1111/jgh.14281

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Дайкер, К.С., Дайкер, С., и Озлем, М.Б. (1990). Диарея крупного рогатого скота, связанная с campylobacter hyointestinalis . Центральный бл. Ветеринары.Б 37, 158–160. doi: 10.1111/j.1439-0450.1990.tb01040.x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Espeche, M.C., Otero, M.C., Sesma, F., and Nader-Macias, M.E.F. (2009). Скрининг поверхностных свойств и продукции антагонистических веществ молочнокислыми бактериями, выделенными из молочной железы здоровых и больных маститом коров. Вет. микробиол. 135, 346–357. doi: 10.1016/j.vetmic.2008.09.078

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Вентилятор, с., Bian, B.L., Teng, L., Nelson, C.D., Driver, J., Elzo, M.A., et al. (2020). Генетические эффекты хозяина на раннюю кишечную микробиоту в модели крупного рогатого скота с градуированным спектром генетической изменчивости. ISME J. 14, 302–317. doi: 10.1038/s41396-019-0529-2

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Фан, П., Нельсон, К.Д., Драйвер, Дж.Д., Эльзо, М.А., и Чон, К.С. (2019). Породный состав животных связан со структурой микробиоты задней кишки и резистентностью к бета-лактамам в разнопородном ангусско-брахманском стаде. Фронт. микробиол. 10:1846. doi: 10.3389/fmicb.2019.01846

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Фан, П., Нельсон, К.Д., Драйвер, Дж.Д., Эльзо, Массачусетс, Пенагарикано, Ф., и Чон, К.С. (2021). Генетика хозяина оказывает пожизненное влияние на микробиоту задней кишки и ее связь с ростом и иммунитетом крупного рогатого скота. ISME J. 15, 2306–2321. doi: 10.1038/s41396-021-00925-x

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Фернандес, С., Фрага М., Кастельс М., Колина Р. и Зунино П. (2020). Эффект введения lactobacillus spp. штаммов на неонатальную диарею, иммунные параметры и обилие патогенов у телят до отъема. Бенефик. Микробы 11, 477–488. дои: 10.3920/BM2019.0167

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Файрхаммер, Б.Д., и Майерс, Л.Л. (1981). Campylobacter fetus subsp jejuni : его возможное значение при кишечных заболеваниях телят и ягнят. утра. Дж. Вет. Рез. 42, 918–922.

Реферат PubMed | Академия Google

Гомес, Д. Э., Арройо, Л. Г., Коста, М. К., Виэль, Л., и Виз, Дж. С. (2017). Характеристика фекальной бактериальной микробиоты здоровых и страдающих диареей молочных телят. Дж. Вет. Стажер Мед. 31, 928–939. doi: 10.1111/jvim.14695

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хеннесси, М., Индугу, Н., Веккиарелли, Б., Реддинг, Л., Бендер, Дж., Паппалардо, К., и другие. (2021). Краткое сообщение: сравнение фекальных бактериальных сообществ у молочных телят, страдающих и не страдающих диареей, на нескольких фермах в юго-восточной Пенсильвании. J. Dairy Sci. 104, 7225–7532. doi: 10.3168/jds.2020-19108

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хоу, С.Л., Цзэн, X.Ф., Ян, Ф.Дж., Лю, Х., и Цяо, С.Ю. (2015). Исследование и применение пробиотика lactobacillus reuteri у свиней: обзор. Дж. Аним.науч. Биотехнолог. 6:14. doi: 10.1186/s40104-015-0014-3

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Хуан А., Цай Р., Ван К., Ши Л., Ли К. и Ян Х. (2019). Динамическое изменение микробиоты кишечника при заражении вирусом эпидемической диареи свиней у поросят-сосунов. Фронт. микробиол. 10:322. doi: 10.3389/fmicb.2019.00322

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Цзя Д., Ван Ю., Ван Дж. Х., Liu, J.L., Li, H.H., Liu, A.H., et al. (2021). Lactobacillus animalis pZL8a: потенциальный пробиотик, выделенный из фекалий свиней для дальнейших исследований. 3 Биотех. 11:132. doi: 10.1007/s13205-021-02681-3

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Карасова Д., Црханова М., Бабак В., Джерабек М., Брзобогаты Л., Матесова З. и соавт. (2021). Развитие микробиоты кишечника поросят во время отъема влияет на развитие диареи после отъема — полевое исследование. Рез. Вет. науч. 135, 59–65. doi: 10.1016/j.rvsc.2020.12.022

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Kim, H.S., Whon, T.W., Sung, H., Jeong, Y.S., Jung, E.S., Shin, N.R., et al. (2021). Продольная оценка трансплантации фекальной микробиоты для облегчения диареи телят и улучшения показателей роста. Нац. коммун. 12:161. doi: 10.1038/s41467-020-20389-5

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Коппен, И.Дж. Н., Веласко-Бенитес, К. А., Беннинга, М. А., Ди Лоренцо, К., и Сапс, М. (2016). Использование Бристольской шкалы стула и отчета родителей о консистенции стула как части Римских критериев III функционального запора у младенцев и детей ясельного возраста. J. Педиатр. 177, 44–48. doi: 10.1016/j.jpeds.2016.06.055

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Козич, Дж. Дж., Весткотт, С. Л., Бакстер, Н. Т., Хайлендер, С. К., и Шлосс, П. Д. (2013). Разработка стратегии секвенирования с двойным индексом и конвейера курирования для анализа данных последовательности ампликона на платформе секвенирования MiSeq Illumina. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 79, 5112–5120. doi: 10.1128/AEM.01043-13

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Langille, M.G.I., Zaneveld, J., Caporaso, J.G., McDonald, D., Knights, D., Reyes, J.A., et al. (2013). Прогностическое функциональное профилирование микробных сообществ с использованием последовательностей маркерных генов 16S рРНК. Нац. Биотехнолог. 31, 814–821. doi: 10.1038/nbt.2676

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

млн лет назад, З., Lee, S., Fan, P., Zhai, Y., Lim, J., Galvao, K.N., et al. (2021). Разнообразные устойчивые к бета-лактамным антибиотикам бактерии и микробное сообщество в молоке маститных коров. Заяв. микробиол. Биотехнолог. 105, 2109–2121. doi: 10.1007/s00253-021-11167-4

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Marchesi, J.R., Sato, T., Weightman, A.J., Martin, T.A., Fry, J.C., Hiom, S.J., et al. (1998). Разработка и оценка полезных праймеров для ПЦР, специфичных для бактерий, которые амплифицируют гены, кодирующие бактериальную 16S рРНК. Заяв. Окружающая среда. микробиол. 64, 795–799. doi: 10.1128/AEM.64.2.795-799.1998

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Накадзима Х., Такеваки Ф., Хасимото Ю., Кадзияма С., Мадзима С., Окада Х. и другие. (2020). Влияние метформина на микробиоту кишечника у пациентов с диабетом 2 типа: двухцентровое квазиэкспериментальное исследование. Образ жизни 10:195. doi: 10.3390/life100

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Николсон, Дж.К., Холмс Э., Кинросс Дж., Бурселин Р., Гибсон Г., Цзя В. и др. (2012). Метаболические взаимодействия микробиоты кишечника-хозяина. Наука 336, 1262–1267. doi: 10.1126/science.1223813

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Пикард, Дж. М., Зенг, М. Ю., Карузо, Р., и Нуньес, Г. (2017). Микробиота кишечника: роль в колонизации патогенов, иммунных реакциях и воспалительных заболеваниях. Иммунол. Ред. 279, 70–89. doi: 10.1111/imr.12567

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Рамирес, Дж., Гарнер Ф., Фернандес Л.Б., Маруй А., Сдепанян В.Л. и Коэн Х. (2020). Антибиотики как основные разрушители микробиоты кишечника. Фронт. Клетка. Заразить. микробиол. 10:572912. doi: 10.3389/fcimb.2020.572912

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Рено, Д. Л., Келтон, Д. Ф., Виз, Дж. С., Ноубл, К., и Даффилд, Т. Ф. (2019). Оценка мультивидового пробиотика в качестве поддерживающего лечения диареи у молочных телят: рандомизированное клиническое исследование. J. Dairy Sci. 102, 4498–4505. doi: 10.3168/jds.2018-15793

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Schluter, J., Peled, J.U., Taylor, B.P., Markey, K.A., Smith, M., Taur, Y., et al. (2020). Микробиота кишечника связана с динамикой иммунных клеток у человека. Природа 588, 303–307. doi: 10.1038/s41586-020-2971-8

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

долларов США (2017 г.). Потеря смерти в СШАкрупного рогатого скота и телят из-за хищников и нехищников.

Академия Google

Вирджинио Младший, Г.Ф., и Биттар, К.М.М. (2021). Микробная колонизация желудочно-кишечного тракта молочных телят — обзор ее важности и связи со здоровьем и продуктивностью. Аним. Здоровье Рез. Ред. 1–12. doi: 10.1017/S1466252321000062 [Epub перед печатью]

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

Whon, T.W., Kim, H.S., Shin, N.R., Sung, H., Kim, M.S., Kim, J.Y., et al. (2021). Диарея телят, вызванная длительной экспансией автохтонных кишечных энтеробактерий и их литических бактериофагов. msystems 6, e00816–e00820. doi: 10.1128/mSystems.00816-20

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Ян Л., Лин К., Хан Л., Ван З., Луо М., Канг В. и др. (2020). Пищевые волокна соевой шелухи уменьшают воспаление у мышей BALB/C, модулируя микробиоту кишечника и подавляя сигнальный путь TLR-4/NF-kappaB. Функц. 11, 5965–5975. дои: 10.1039/D0FO01102A

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Yu, H., Ma, Z., Meng, S., Qiao, S., Zeng, X., Tong, Z., et al. (2021). Новый наногибридный антимикробный препарат на основе наночастиц хитозана и антимикробного пептида микроцина J25 с низкой токсичностью. Углевод. Полим. 253:117309. doi: 10.1016/j.carbpol.2020.117309

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Зейнельдин М., Олдридж, Б., и Лоу, Дж. (2018). Дисбиоз фекальной микробиоты у откормочного скота с геморрагической диареей. Микроб. Патог. 115, 123–130. doi: 10.1016/j.micpath.2017.12.059

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

Микробиота кишечника новорожденных телят и влияние потенциальных пробиотиков на снижение диарейных заболеваний путем ингибирования колонизации патогенами

Front Microbiol. 2021; 12: 772863.

, 1 , 2 , , 1 , 2 , , 1 , 2 , 1 , 2 , 1 , 2 , 2 и 1 , 2 , *

Peixin Fan

1 Институт новых патогенов, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США

2 Департамент зоотехники, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США

Миджу Ким

1 Институт новых патогенов, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США

2 Департамент зоотехники, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США

Грейс Лю

1 Институт новых патогенов, Университет of Florida, Gainesville, FL, United States

2 Департамент зоотехники, University of Florida, Gainesville, FL, United States

Yuting Zhai

1 Институт новых патогенов, University of Florida, Gainesville, FL, США

2 Факультет зоотехники, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США

Ting Liu

1 Институт новых патогенов, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США

2 Департамент зоотехники, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США

Джозеф Дэнни Драйвер

9006 2 Факультет зоотехники Университета Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США

Кванчхоль К.Jeong

1 Институт новых патогенов, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США

2 Департамент зоотехники, Университет Флориды, Гейнсвилл, Флорида, США

1 Институт новых патогенов, Университетский институт of Florida, Gainesville, FL, United States

2 Факультет зоотехники, University of Florida, Gainesville, FL, United States

Под редакцией: Si Hong Park, Oregon State University, United States

Рецензирование: Hyun Джун Ким, Национальный университет Мокпо, Южная Корея; Raies Mir, Министерство сельского хозяйства США (USDA), США

Эти авторы в равной степени внесли свой вклад в эту работу

Эта статья была отправлена ​​в Microorganisms in Vertebrate Digestive Systems, раздел журнала Frontiers in Microbiology

Поступило 8 сентября 2021 г .; Принято 30 сентября 2021 г.

Copyright © 2021 Fan, Kim, Liu, Zhai, Liu, Driver and Jeong.

Это статья с открытым доступом, распространяемая на условиях лицензии Creative Commons Attribution License (CC BY). Использование, распространение или воспроизведение на других форумах разрешено при условии указания оригинального автора(ов) и владельца(ей) авторских прав и при условии цитирования оригинальной публикации в этом журнале в соответствии с общепринятой академической практикой. Запрещается использование, распространение или воспроизведение без соблюдения этих условий.

Abstract

Диарея телят является одной из наиболее серьезных проблем, с которыми сталкиваются как молочное, так и мясное животноводство. Поддержание здоровой микробиоты кишечника имеет важное значение для предотвращения желудочно-кишечных расстройств. Здесь мы наблюдали значительно меньшее количество бактерий в аномальных фекалиях с водянистой или геморрагической морфологией по сравнению с нормальными твердыми фекалиями. Нормальные твердые фекалии показали высокие относительные изобилия Osllospiraceae , Christensenellaceae , BarnesiellaeLae и Lactobacillus , в то время как ненормальные фекалии содержали больше бактериальных таксонов негативиков , Tyzzerella , Parasterella , Veellonella 60916, , Fusobacterium и Campylobacter .Здоровые телята имели обширные бактериально-бактериальные корреляции с отрицательной корреляцией между Lactobacillus и потенциально диареегенными Escherichia coli-Shigella , но не в аномальном фекалиях. Мы выделили видов Lactobacillus ( L. reuteri , L. johnsonii , L. amylovorus и L. animalis ), причем L. reuteri являются наиболее многочисленными из микробиоты здорового кишечника. Выделенные штаммы Lactobacillus ингибировали патогенные штаммы, в том числе E.coli K88 и Salmonella Typhimurium. Эти результаты указывают на важность разнообразной кишечной микробиоты для здоровья новорожденных телят и обеспечивают множество потенциальных пробиотиков, которые подавляют колонизацию патогенов в желудочно-кишечном тракте для предотвращения диареи телят.

Ключевые слова: кишечная микробиота, диарея, новорожденные телята, Lactobacillus , пробиотики, 1999). По оценкам Министерства сельского хозяйства США, от диареи в США ежегодно умирает от 4 до 25% телят, что приводит к огромным экономическим потерям в животноводстве (USDA, 2017). Диарею телят сложно смягчить из-за ее многофакторной этиологии, которая включает как инфекционные, так и неинфекционные факторы (Whon et al., 2021). Антибиотики обычно используются для лечения диареи телят, но эффективность лечения антибиотиками вызывает сомнения (Kim et al., 2021).Кроме того, использование антибиотиков не является целенаправленным, что может негативно сказаться на микробном составе кишечника телят (Ianiro et al., 2016; Ramirez et al., 2020).

Здоровая микробиота кишечника предотвращает колонизацию чужеродными патогенами (Pickard et al., 2017; Fan et al., 2019, 2020, 2021; Kim et al., 2021) и укрепляет иммунную систему хозяина за счет взаимодействия между антигенами и иммунными клетками во время ранней стадии жизни (Zhao and Elson, 2018; Fan et al., 2020). Повышенная проницаемость кишечника и нарушение микробиоты кишечника являются ключевыми факторами, приводящими к патоген-индуцированной диарее.Связь диареи телят как с микробным составом, так и с функциональным дисбиозом проливает свет на улучшение состояния диареи за счет модулирования микробной экосистемы кишечника. В исследовании была предпринята попытка провести трансплантацию фекальной микробиоты (ТФМ) от здоровых доноров шести телятам корейского бурого рогатого скота, страдающим диареей, и были получены многообещающие результаты, в результате которых заболеваемость диареей значительно снизилась (Kim et al., 2021). Кроме того, пероральное введение пробиотиков может быть возможной профилактической или поддерживающей терапией при диарее телят.Было показано, что продолжительность диареи телят сокращается за счет введения мультивидовых пробиотиков и дрожжевого болюса (Renaud et al., 2019). Чтобы разработать более эффективные пробиотики для смягчения последствий диареи, необходимо охарактеризовать микробиоту кишечника здоровых телят и телят, страдающих диареей. В нескольких исследованиях изучалась разница в микробном составе кишечника здоровых молочных телят и телят, страдающих диареей, и указывалось на критическую роль развития микробиоты в регулировании здоровья кишечника на ранней стадии (Gomez et al., 2017; Хеннесси и др., 2021). Тем не менее, важные кишечные комменсалы, которые способствуют предотвращению диареи у новорожденного мясного скота, особенно выращиваемого на пастбищах, остаются плохо изученными.

В этом исследовании мы стремимся выяснить роль микробиоты кишечника в развитии диареи у месячных телят и определили несколько потенциальных пробиотиков, которые могут способствовать здоровью кишечника молодых телят за счет подавления диареегенных бактерий. Полученные данные помогут в будущей разработке диетических вмешательств, которые могут лечить или предотвращать кишечные и диарейные заболевания у молодых телят.

Материалы и методы

Управление животными

Телята перед отъемом, включенные в это исследование, были из одного поколения разнопородного стада ангус-брахманов (MAB) Университета Флориды. Телята родились естественным образом на пастбище во время родового сезона. Вес новорожденных измеряли в течение 24 часов после родов. Телята выращивались вместе с матерями во время предотъемного периода на пастбище в животноводческом комплексе Santa Fe River Ranch Beef Unit, Флорида, США.

Сбор образцов фекалий, морфологическая категоризация и обработка образцов

Образцы фекалий были собраны у 91 мясного теленка в возрасте от 21 до 35 дней. Вкратце, каждый образец фекалий собирали из ректально-анального соединения (RAJ) с помощью двух стерильных ватных тампонов. Во время сбора образцов наблюдали и регистрировали морфологию образцов фекалий на основе критериев Бристольской шкалы стула, особенно цвет, консистенцию и наличие крови (Koppen et al., 2016). Мазки с образцами фекалий помещали в коническую пробирку объемом 15 мл на льду и в течение 1 часа доставляли в лабораторию для дальнейшей обработки.Каждый образец мазка ресуспендировали в смеси 2 мл бульона Луриа-Бертани (LB) и 2 мл 30% глицерина, как описано ранее (Fan et al., 2020). Затем фекальный раствор разделяли на четыре пробирки по 2 мл и замораживали в морозильной камере сверхнизкой температуры при -80°C.

Секвенирование ампликона гена 16S рРНК

Образцы фекалий оттаивали на льду и гомогенизировали. Затем 1 мл каждого образца использовали для выделения ДНК с помощью набора QIAamp PowerFecal DNA в соответствии с инструкциями производителя (Qiagen, США).Чтобы понять бактериальное сообщество, была применена стратегия двойного индекса секвенирования (Kozich et al., 2013). Вкратце, область V4 гена 16S рРНК амплифицировали с помощью ПЦР с праймерами с двойным индексом (Kozich et al., 2013). Реакция ПЦР-амплификации включала 1 мкл праймера с прямым индексом (10 мМ), 1 мкл праймера с обратным индексом (10 мМ), 1 мкл матрицы ДНК 10 нг/мкл и 17 мкл мастер-микса Pfx AccuPrime (Invitrogen, США). Амплификацию начинали с денатурации в течение 5 мин при 95°С, затем следовали 30 циклов при 95°С в течение 30 с, отжиг при 55°С в течение 30 с и удлинение при 72°С в течение 1 мин с конечной элонгацией в течение 5 мин при 72°С.Затем ампликоны очищали и нормализовали с помощью набора для нормализации планшетов SequalPrep (Invitrogen, США). Для создания библиотеки ДНК было объединено одинаковое количество ампликонов V4 со штрих-кодом из каждого образца.

Анализ для секвенирования ампликона гена 16S рРНК

Данные секвенирования гена 16S рРНК были проанализированы с использованием версии 2 конвейера Quantitative Insights in Microbial Ecology (QIIME 2) (Bolyen et al., 2019). Вкратце, были импортированы необработанные чтения с парными концами, и качество исходных оснований было оценено в соответствии с интерактивным графиком качества.Контроль качества последовательности выполнялся с помощью конвейера алгоритма шумоподавления Divisive Amplicon (DADA2), реализованного в QIIME 2, включая этапы фильтрации считываний низкого качества, считываний с шумоподавлением, слияния чтений с парными концами и удаления химерных чтений. Филогенетическое дерево было создано с использованием конвейера align-to-tree-mafft-fasttree из плагина q2-phylogeny QIIME 2. Глубина секвенирования была нормализована до 10 800 последовательностей на образец. Количество вариантов последовательности ампликона (ASV), индекс Шеннона и расстояние Брея-Кертиса рассчитывали филогенетическим методом основных показателей.Все ASV были классифицированы по бактериальной таксономии с использованием плагина q2-feature-classifier для QIIME 2 и базы данных SILVA 138. 1

Сетевой анализ совместной встречаемости

Для изучения бактериально-бактериальных взаимодействий в бактериальном сообществе кишечника одномесячных телят, событий совместной встречаемости основных родов бактерий, которые присутствовали не менее чем в 50% нормальных и аномальные образцы фекалий оценивались в сетевом интерфейсе, соответственно, с использованием парных ранговых корреляций Спирмена ( r s ) на основе относительной численности согласно предыдущему исследованию (Fan et al., 2020). Ранговая корреляция Спирмена была проанализирована с помощью Hmisc в RStudio (версия 1.1456). Значимая ранговая корреляция между двумя родами бактерий ( r s >0,2 или r s <-0,2, значение p с поправкой на FDR <0,05) рассматривалась как событие одновременного возникновения. Сеть была визуализирована с использованием алгоритма Force Atlas в интерактивной платформе Gephi 0.9.2. 2 В сети узлы представляли разные роды, а ребра указывали на значительные корреляции между узлами.Размер узлов представлял степень связи, а толщина ребер указывала на силу корреляции.

Microbial Function Prediction

Функциональная способность кишечного микробного сообщества была предсказана с использованием онлайн-версии Galaxy филогенетического исследования сообществ путем реконструкции ненаблюдаемых состояний (PICRUSt; http://galaxy.morganlangille.com/; Langille et al., 2013). Таблица закрытых эталонных операционных таксономических единиц (OTU) была создана путем сопоставления OTU с базой данных Greengenes от 13 августа 2013 года с использованием QIIME (версия 1.9.0). Нормализация количества копий, предсказание метагенома и категоризация функций на основе путей Киотской энциклопедии генов и геномов (KEGG) проводились в соответствии со стандартным процессом анализа.

Выделение

Lactobacillus spp. Штаммы и антимикробная активность

Нормальный и патологический кал после 10-кратного серийного разведения в фосфатно-солевом буфере (PBS) высевали на агар де Мана, Рогозы и Шарпа (MRS) (Difco, США) для определения концентрации молочнокислые бактерии (МКБ), затем планшеты инкубировали в анаэробных условиях при 37°С в течение 48 ч с использованием системы GasPak EZ Anaerobe System (BD, США).Чтобы выделить штаммов Lactobacillus из нормальных фекалий, колонии с различной морфологией отбирали случайным образом и очищали на одной и той же твердой среде для выделения чистых колоний. Всего из образцов фекалий здоровых телят было выделено 79 колоний. Геномную ДНК выделенных колоний экстрагировали методом бисерной обработки, как описано ранее (Ma et al., 2021). Затем для специфичности изолятов амплифицировали ген 16S с использованием универсальной пары праймеров KCP812 (5′-CAG GCC TAA CAC ATG CAA GTC-3′) и KCP813 (5′-GGG CGG WGT GTA CAA GGC-3′; Marchesi и другие., 1998). Амплифицированные продукты ПЦР очищали с использованием набора для очистки ПЦР QIAquick (Qiagen, США). Очищенные продукты ПЦР секвенировали в Genewiz (Саут-Плейнфилд, США), а последовательности гена 16S рРНК идентифицировали с помощью поиска BLAST в базе данных последовательностей 16S рибосомной РНК Национального центра биотехнологической информации (NCBI).

Антимикробную активность изолятов Lactobacillus оценивали в отношении Escherichia coli KCJ2K2616, E.coli K88 KCJ4567 и Salmonella enterica Typhimurium KCJ187. Для определения антимикробной активности изолятов использовали метод диффузии в лунки агара с небольшой модификацией (Espeche et al., 2009; Boranbayeva et al., 2020). Вкратце, антимикробная активность стерилизованных на фильтре (0,22 мкм) супернатантов 18-часовых культур Lactobacillus spp. были протестированы против патогенов, описанных выше. Ночные культуры возбудителей (10 7 КОЕ) смешивали с мягкой агаризованной средой LB (0.75% агар) и затвердевали. Затем в лунку с агаром загружали 100 мкл супернатантов. После инкубации в течение ночи при 37°С измеряли диаметры зон ингибирования. Lactobacillus plantarum (ранее известный как Lactobacillus plantarum ) KCJ4051 использовали в качестве положительного контроля (Yu et al., 2021), и каждый штамм тестировали в трех повторностях.

Статистический анализ

Различия в альфа-разнообразии и противомикробной активности анализировали с использованием критерия Стьюдента t или однофакторного дисперсионного анализа с последующим F-критерием и критерием HSD Тьюки для попарного сравнения нескольких средних с использованием призмы GraphPad.Различия между расстояниями Брея-Кертиса были проанализированы с использованием перестановочного многомерного ANOVA (PERMANOVA) с командой бета-групповой значимости в конвейере QIIME 2.

Линейный дискриминантный анализ Анализ размера эффекта (LEfSe) был применен для идентификации уникальных бактерий в нормальных и аномальных фекалиях на основе непараметрического факториального критерия суммы рангов Крускала-Уоллиса. Величина эффекта 2 считалась значимой разницей.

Результаты

Высокая распространенность аномального стула у месячных мясных телят

Одномесячные телята имели высокую распространенность аномального стула.Среди 91 образца кала 74 (81,3%) были твердыми и коричневатыми, которые были классифицированы как нормальные фекалии, тогда как 17 (18,7%) были аномальными, в том числе шесть слегка водянистыми, два очень водянистыми, восемь с небольшим количеством крови и один чрезвычайно водянистым. геморрагический (; дополнительная таблица 1). Двенадцать из 17 аномальных фекалий были от телок. Интересно, что масса тела при рождении с аномальным калом была значительно ниже, чем у телок с нормальным калом (31,86 ± 2,69 кг против 35,26 ± 4,50 кг, p = 0,0178, ), что позволяет предположить, что масса тела при рождении может быть связана со здоровьем кишечника.Однако у быков такой закономерности не наблюдалось (38,44 ± 8,13 кг против 38,14 ± 5,17 кг; ).

Распределение нормальных и аномальных фекалий и его связь с массой тела при рождении телят до отъема. (A) Распространенность нормального и аномального стула у телят перед отъемом. (B) Разница в весе при рождении между телками с нормальным и ненормальным калом. (C) Разница в весе при рождении между быками с нормальным фекалиями и быками с аномальными фекалиями.На блочной диаграмме звездочка означает, что они значительно различаются (90 915 p 90 916 <0,05) на основе теста Стьюдента 90 915 t 90 916.

Нормальные и аномальные фекалии молодых телят с отличительной микробиотой

Для сравнения состава микробиоты нормальных и аномальных фекалий было проведено секвенирование области V4 гена 16S. Всего было сгенерировано 2 172 004 (23 868 ± 455) необработанных считываний, и после удаления ошибок замещения и химер с использованием конвейера DADA2 было получено 1 703 949 (18 724 ± 367) высококачественных ASV (дополнительная таблица 2).

Анализ альфа-разнообразия был впервые проведен для сравнения богатства и разнообразия бактериального сообщества между нормальным и аномальным фекалиями с использованием показателей альфа-разнообразия, числа ASV и индекса Шеннона соответственно. Аномальные фекалии имели значительно меньшее количество ASV по сравнению с нормальными фекалиями ( p = 0,017, ), что указывает на более низкое бактериальное богатство кишечника у телят с аномальными фекалиями. Однако мы не наблюдали явной разницы в индексе Шеннона между группами ( p = 0.2841, ), обозначая сопоставимые уровни видового разнообразия. Кроме того, визуализация различий в структуре кишечной микробиоты между аномальными и нормальными фекальными группами 90 915 через 90 916 график анализа основных координат (PCoA) не показала существенной разницы (90 915 p 90 916 = 0,214) между группами на основе расстояния Брея-Кертиса, оцененного с помощью PERMANOVA. (). В обоих фекалиях преобладали Firmicutes , Bacteroidota и Proteobacteria phyla (; Дополнительная таблица 3).Чтобы дифференцировать важные бактериальные таксоны между фекальными группами, была создана кладограмма на основе LefSe. Ненормальные фекалии укрывали более высокие относительные изобилия негативируемых , в то время как нормальные фекалии имели более высокое относительное количество компенсалов, в том числе Rikenellaceae , Tannerellaceae , , Christensenellaceae , Ecsilloshenellaceae , Anaerovoraceae и Anaerovoraceae . Чтобы понять влияние различной микробиоты на функциональные свойства микробов, был применен PICRUSt для прогнозирования относительного обилия бактериальных генов.Бактериальные гены, участвующие в метаболизме кофакторов и витаминов, а также клеточных процессах и передаче сигналов, были обогащены в патологических фекалиях, тогда как гены, участвующие в подвижности клеток, имели большее относительное количество в нормальных фекалиях (4).

Характеристики микробиоты нормальных и патологических фекалий. (A) Количество вариантов последовательности ампликона (ASV) в нормальных и аномальных фекалиях. (B) Индекс Шеннона нормального и патологического кала. (C) График PCoA, основанный на расстояниях Брея-Кертиса, сравнивающих состав микробиоты между нормальным и аномальным фекалиями.Разницу в расстоянии Брея-Кертиса анализировали с помощью перестановочного многомерного дисперсионного анализа (PERMANOVA). (D) Распределение большого количества типов бактерий в нормальных и аномальных фекалиях. (E) Таксономическая кладограмма, полученная в результате анализа величины эффекта линейного дискриминантного анализа (LEfSe), показывающая уникальные бактериальные таксоны в нормальных и аномальных фекалиях. (F) Результаты анализа LEfSe, показывающие, что микробная функция значительно различается между нормальным и аномальным калом.

Различия в микробиоте аномальных фекалий с различной морфологией

После сравнения состава микробиоты кишечника телят с аномальными фекалиями и телят с нормальными фекалиями группа аномальных фекалий была разделена на подкатегории на основе различных морфологий (слабо водянистые, сильно водянистые, легкие геморрагические, и тяжелая геморрагическая) для дальнейшего анализа. Количество вирусов ASV было ниже в водянистых фекалиях и зависело от степени водянистости (1). Среднее количество ASV для нормального, умеренно водянистого и сильно водянистого кала составило 124.3, 102,2 и 78,00 соответственно. Фекалии с небольшим количеством крови содержали несколько более низкий уровень ASV (114,4) по сравнению с нормальными фекалиями, но фекалии с выраженной геморрагией содержали гораздо меньше ASV (81,0). Аналогичная, но менее очевидная закономерность наблюдалась для индекса Шеннона (1). Результаты показывают постепенное уменьшение видового богатства и разнообразия бактерий с увеличением степени тяжести как геморрагических, так и водянистых фекалий. Тем не менее, не наблюдалось существенной разницы в общей структуре микробиоты между тяжелым водянистым калом и тяжелым геморрагическим калом с нормальным калом в соответствии с графиком PCoA, основанным на расстоянии Брея-Кертиса ().

Характеристики микробиоты фекалий различной морфологии. (А) Количество АСВ фекалий различной морфологии. (B) Индекс Шеннона фекалий различной морфологии. (C) График PCoA, основанный на расстояниях Брея-Кертиса, сравнивающих состав микробиоты между фекалиями различной морфологии. (D) Роды бактерий, которые показали либо самую высокую относительную численность, либо самую низкую относительную численность в нормальных фекалиях по сравнению с другими морфологиями. (E) Роды бактерий, которые постепенно менялись в зависимости от степени выраженности фекальной водянистой морфологии. (F) Роды бактерий, которые постепенно менялись по мере тяжести геморрагической морфологии.

Далее мы выявили ключевые различия в составе микробиоты фекалий различной морфологии. Микробиота на уровне типов была одинаковой среди нормальных фекалий, умеренных водянистых фекалий и легких геморрагических фекалий, в то время как тяжелые водянистые фекалии содержали в 20 раз больше Fusobacteriota по сравнению с нормальными фекалиями, а тяжелые геморрагические фекалии имели гораздо меньший уровень Verrucomicrobiota (дополнительная информация). Фигура 1).На уровне рода, нормальные фекалии, укрывалось высшим относительным обилием Barnesiellaella и CLASTTRIDIA _UCG-014, CLODEXTRIBACTER и OCLIDEXTRIBIRACEAE_ UCG_005, но самые низкие относительные обилия [ RUMESCOCCUS ] _ Torques _Group и Tyzzerella по сравнению к фекалиям с другой морфологией (; Дополнительная таблица 4). Более того, относительные изобилия парабатеров , Lactobacillus , неслоссифицированные осциллоспируса и Gallibacterium и Gallibacterium были постепенно снижены с увеличением тяжести воды водянистой морфологии, тогда как относительные изобилия Phascolarctobacterium , Lachnoclostridium , Lachnospiraceae _UCG-004, Veillonella и Parasutterella были повышены, что указывает на то, что эти бактерии были чувствительны к водянистой морфологии фекальных масс (; дополнительная таблица 5).Что касается геморрагической морфологии, Butyricicoccus и неклассифицированный Oscillospiraceae постепенно обогащались в фекалиях с усилением тяжести (; Дополнительная таблица 6).

Профиль микробиоты сильно водянистых и геморрагических фекалий

Мы дополнительно извлекли отдельные образцы сильно водянистых и геморрагических фекалий и охарактеризовали их структуру микробиоты, поскольку они представляют больший риск для здоровья кишечника телят. Все тяжелые аномальные образцы фекалий имели гораздо меньшее бактериальное богатство в соответствии с количеством ASV () и немного более низкое бактериальное разнообразие в соответствии с индексом Шеннона ().Что касается состава микробиоты, то в одном из тяжелых водянистых фекалий (Severe Watery # 1) относительная численность Fusobacterium (26,56%), Peptostreptococcus (3,23%), Campylobacter (2,96%) выше. , Parasutterella (2,25%) и Tyzzerella (1,18%) по сравнению с нормальным калом (0,61, 0,01, 0,34, 0,36 и 0,22%), а другой (тяжелая водянистая № 2) содержал больше Tyzzerella (13,27%), Veillonella (10.52%), Lachnospiraceae _UCG-004 (6,94%), [ Ruminococcus ]_ торки _group (4,53%), чем нормальный кал (0,22, 1,37, 0,57 и 0,8%; ). Что касается тяжелых геморрагических фекалий, то относительная численность Tyzzerella (2,5%) и примерно в 5 раз больше Veillonella (6,06%), чем нормальные фекалии (0,22 и 1,37%; ).

Характеристики микробиоты сильно водянистого или геморрагического кала. (А) Количество АСВ подгруппы фекалий. (Б) Индекс Шеннона подгруппы кала. (C) Точечный график, показывающий относительное обилие родов в фекалиях подгруппы.

Бактериально-бактериальные взаимодействия, предсказанные сетью совместной встречаемости

Чтобы выяснить, существуют ли различия во взаимодействиях бактерий и бактерий в микробных экосистемах кишечника, сети совместной встречаемости были проанализированы с использованием 59 и 54 основных родов бактерий, которые присутствовали в более 50% нормальных и патологических образцов кала соответственно.Нормальные фекалии имели восемь уникальных основных бактериальных родов, включая Actinomyces , Christensenellaceae R-7 Group, Collinsella , COPROCOCCUS , ererysipelatocloStridiaceae UCG-004, Incerdae Sedis , Group, RF39, и Rhodospirillales некультивированные, тогда как аномальные фекалии содержали только четыре уникальных основных рода бактерий, включая Coprobacter , Intestinimonas , Streptococcus и Tyzzerella .В нормальных фекалиях было больше взаимодействий между бактериями ( n = 656) по сравнению с аномальными фекалиями ( n = 272) на основе корреляций Спирмена ( P Adjust<0,05, r s >0,2, или r с <−0,2). Для нормальных фекалий сеть была сгруппирована в три модуля в соответствии с внутренними взаимодействиями между узлами (). В модуле 1 Oscillospira , который имел более высокую относительную численность в нормальных фекалиях (), был центром среди 22 основных родов бактерий, имея 38 значимых корреляций с другими бактериями ().Примечательно, что Oscillospira отрицательно ассоциировалась с Campylobacter , которая показала высокую относительную численность в тяжелых водянистых фекалиях, и Escherichia-Shigella , которые содержат несколько патогенных видов, которые могут вызывать диарею у молодых телят. В модуле 2 Oscillospiraceae UCG-005 был центром среди 20 основных бактерий, имеющих 38 корреляций с другими бактериями. Oscillospiraceae UCG-005 показал отрицательную связь с Veillonella , которая была обогащена водянистыми фекалиями (), а также Campylobacter в Модуле 1.В модуле 3 Lachnospiraceae UCG-004, связанные с водянистыми фекалиями, были центральными среди 17 основных бактерий и отрицательно коррелировали с группой Christensenellaceae R-7 в модуле 1, которая принадлежала к уникальным основным бактериям нормальный кал. Важно отметить, что значительная отрицательная корреляция также наблюдалась между полезными бактериями Lactobacillus и Escherichia-Shigella .

Бактериально-бактериальные взаимодействия, предсказанные с помощью сетей совместного возникновения. (A) Сеть сочетанного присутствия бактерий в нормальных фекалиях. (B) Бактериальная сеть сочетанного возникновения в патологических фекалиях. Сети сосуществования, предсказывающие взаимодействия между бактериями среди основных родов бактерий (присутствующих в более чем 50% нормальных или аномальных образцов фекалий) в фекалиях телят. Связи были обнаружены на основе ранговых корреляций Спирмена ( r с >0,2 или r с <-0,2, значение FDR с поправкой p <0,05).Размеры точек представляют количество связей с другими таксонами. Толщина линий представляет силу родства. Модули были обозначены на основе алгоритма обнаружения сообщества.

Для аномальных фекалий сеть бактериально-бактериального взаимодействия также была сгруппирована в три модуля, причем модуль 1 был доминирующим, но количество узлов и корреляций было значительно меньше по сравнению с нормальными фекалиями (). Группа [ Eubacterium ] coprostanoligenes была центром среди 38 основных бактерий с 26 значительными корреляциями с другими бактериями.Примечательно, что негативные ассоциации между потенциальными полезными бактериями, Oscillospira и Lactobacillus , и условно-патогенными микроорганизмами, Campylobacter и Escherichia-Shigella , которые были обнаружены в нормальных фекалиях, не наблюдались в аномальных фекалиях, что позволяет предположить, что полезные бактерии могут подавлять диареегенные патогены в нормальной здоровой микробиоте кишечника.

Идентификация

Lactobacillus spp. Штаммы и их антимикробная активность

Поскольку мы обнаружили более высокое содержание Lactobacillus в нормальных фекалиях (3.12%) по сравнению с легким водянистым калом (2,02%) и сильным водянистым калом (1,82%), а также отрицательные корреляции между Lactobacillus и Escherichia-Shigella в нормальных фекалиях, мы выделили штаммов Lactobacillus и оценили их противомикробное действие. активность против патогенов, чтобы проверить, могут ли эти штаммы способствовать здоровью желудочно-кишечного тракта. Количество молочнокислых бактерий в нормальных фекалиях было значительно больше, чем в аномальных фекалиях ( p = 0,0198;), что позволяет предположить, что концентрация молочнокислых бактерий может быть связана со здоровьем кишечника у телят.Кроме того, 79 Lactobacillus spp. штаммы были выделены из нормальных фекалий, и они были идентифицированы как Limosilactobacillus reuteri (ранее известный как Lactobacillus reuteri ), который был наиболее преобладающим видом в нормальных фекалиях (). Мы также идентифицировали Lactobacillus johnsonii , Lactobacillus amylovorus и Ligilactobacillus animalis (ранее известный как Lactobacillus animalis ) в нормальных фекалиях ().Чтобы проверить, могут ли эти штаммы подавлять патогенные штаммы, как это было предложено в , мы измерили антимикробную активность этих штаммов в отношении E. coli и S . Typhimurium, который может вызывать диарею у телят (Boranbayeva et al., 2020). Все Lactobacillus spp. штаммы ингибировали рост трех патогенов (–). Примечательно, что L. reuteri и L. johnsonii продемонстрировали явное ингибирование, аналогичное ингибированию хорошо известного пробиотического штамма L. plantarum в отношении всех испытуемых патогенов. Lactobacillus reuteri и L. johnsonii были самыми и вторыми по распространенности видами Lactobacillus у здоровых телят (), что позволяет предположить, что эти Lactobacillus spp. может положительно повлиять на здоровье кишечника, подавляя колонизацию патогенных бактерий в кишечнике телят перед отъемом.

Выделение штаммов Lactobacillus и их антимикробная активность. (A) Концентрация молочнокислых бактерий (МКБ) в нормальном и патологическом фекалиях.На гистограмме звездочка означает, что они существенно различаются (90 915 p 90 916 <0,05) на основе теста Стьюдента 90 915 t 90 916. (B) Количество Lactobacillus spp. выделены из здоровых телят и идентифицированы с помощью секвенирования гена 16S рРНК. (C-E) Антимикробная активность Lactobacillus spp. против патогенных штаммов. Столбцы с разными буквами указывают на значимое различие ( p <0,05) на основе однофакторного дисперсионного анализа с последующим тестом F и критерием HSD Тьюки для попарного сравнения нескольких средних значений.

Обсуждение

Диарея является основной причиной смерти мясных и молочных телят в первый месяц их жизни (Caffarena et al., 2021). Гомеостаз кишечных микробных экосистем имеет центральное значение для поддержания функций желудочно-кишечного тракта телят перед отъемом (Virginio Junior and Bittar, 2021). Тем не менее, существует ограниченное количество исследований, сообщающих о взаимосвязи между кишечной микробиотой и диареей у молодняка мясного скота. В этом исследовании мы исследовали состав фекальной микробиоты одномесячных мясных телят, выращенных на пастбищах, на основе их морфологии фекалий.Было идентифицировано множество бактерий, чтобы отличить нормальный твердый кал от аномального водянистого или геморрагического кала, которые имели отрицательную корреляцию с диареегенными патогенами.

Наиболее очевидным паттерном аномальной фекальной микробиоты является низкое бактериальное богатство. Количество видов бактерий в кале резко уменьшалось по мере тяжести водянистого или геморрагического явления. Разнообразный микробиом кишечника состоит из генов, в 100 раз превышающих количество генов хозяина, и служит функциональным расширением геномов хозяина (Zhu et al., 2010). Снижение бактериального богатства кишечника может привести к ограничению функции микробиоты, включая пищеварение, обучение иммунной системы и подавление патогенов (Nicholson et al., 2012; Pickard et al., 2017; Schluter et al., 2020). Потеря микробного богатства может быть связана с большим распространением патогенных бактерий, таких как Fusobacterium и Campylobacter . Примечательно, что мы обнаружили значительно более низкую массу тела при рождении у телок с аномальным калом по сравнению с теми, у которых был нормальный кал, что позволяет предположить, что развитие плода, вероятно, влияет на созревание микробиоты кишечника молодых телят.

В этом исследовании мы провели скрининг на наличие потенциально патогенных и полезных бактерий в соответствии с морфологией фекалий. Бактерии, обогащенные ненормальными фекалиями, включают Negativicutes , Tyzzerella , [RUMUMOCOCCUS] _TORQUES_GROUP , ParasterellaLELLELL , Veellonellae , Lachnospiraceae _UCG-004, Lachnoclostridium , Butyricicoccus , Fusobacterium Кампилобактер . Campylobacter , включая C.jejuni , C. hyointestinalis и C. fetus способны вызывать раздражение желудочно-кишечного тракта телят и вызывать диарею (Firehammer and Myers, 1981; Diker et al., 1990). В предыдущих исследованиях сообщалось, что Negativicutes , Veillonella и Fusobacterium были более распространены у поросят с диареей по сравнению со здоровыми поросятами-отъемытами (Huang et al., 2019; Karasova et al., 2021). В исследованиях на людях Tyzzerella способствуют нейровоспалению, и его увеличение связано с диареей (Nakajima et al., 2020). Parasutterella связана с развитием и прогрессированием СРК (Chen et al., 2018). Однако в нескольких исследованиях сообщается о роли этих бактерий в диарее телят.

Мы также определили несколько потенциальных полезных бактерий, которые показали более высокое относительное изобилие в нормальных фекалиях, в том числе Christensenellaceae , Colidextribacter и Ocolidextribacter ), Barnesiellaels , ParabacteroDes и Lactobacillus .Хотя во многих исследованиях было показано положительное влияние перорального введения штаммов Lactobacillus на уменьшение диареи у свиней и телят, лишь в нескольких исследованиях измерялось изменение численности Lactobacillus между больным диареей и здоровым мясным скотом (Hou et al., 2015; Фернандес и др., 2020). В этом исследовании мы дополнительно выделили штаммов Lactobacillus от здоровых телят с нормальным калом, в том числе L. reuteri , L. johnsonii , L.amylovorus и L.animalis . В частности, наиболее распространенные виды Lactobacillus от здоровых телят в нашем анализе, L. reuteri и L. johnsnii , вводятся в качестве потенциальных пробиотиков и улучшают здоровье желудочно-кишечного тракта у телят перед отъемом (Fernandez et al., 2020). Джиа и др. (2021) предложили L. animalis с высокой антибактериальной активностью в отношении кишечных патогенов в качестве противодиарейного пробиотика для свиней (Jia et al., 2021). Интересно, что все четыре вида Lactobacillus , выделенные от телят в этом исследовании, проявляли антибактериальную активность против патогенных бактерий, которые обычно вызывают диарею у крупного рогатого скота, что позволяет предположить, что высокое содержание комменсалов Lactobacillus у здоровых телят полезно для предотвращения колонизации патогенов.

В предыдущем исследовании Kim et al. (2021) применили ТФМ для эффективного облегчения диареи телят и обнаружили увеличение относительной численности Christensenellaceae и Parabacteroides (Kim et al., 2021). Другое исследование показало значительное снижение Oscillospira у крупного рогатого скота на откормочных площадках с геморрагической диареей по сравнению со здоровым скотом (Zeineldin et al., 2018). Наше исследование в соответствии с другими результатами указывает на важную роль этих бактерий в поддержании здоровья кишечника крупного рогатого скота. Хотя функция Barnesiella у крупного рогатого скота в значительной степени неизвестна, она продемонстрировала влияние на облегчение колита, вызванного DSS, у мышей (Yang et al., 2020). Более того, поскольку мы обнаружили сильную корреляцию между этими потенциальными полезными бактериями и патогенными бактериями, будущие исследования будут направлены на изучение их конкурентных взаимодействий.

Заявление о доступности данных

Данные секвенирования ампликона гена рРНК 16S, полученные в ходе текущего исследования, были представлены в NCBI в рамках BioProject PRJNA751859.

Заявление об этике

Исследование на животных было рассмотрено и одобрено Институциональным комитетом по уходу и использованию животных Университета Флориды.

Вклад авторов

PF и KJ разработали исследование. Джей Ди управлял животными. PF, GL, MK, YZ и TL собрали и обработали образцы.PF, MK и GL проанализировали данные. PF, MK, GL и KJ составили рукопись. PF, MK и KJ завершили эту рукопись. Все авторы внесли свой вклад в статью и одобрили представленную версию.

Финансирование

Это исследование финансировалось Южным грантом для аспирантов исследований и образования в области устойчивого сельского хозяйства, GS19-206, при поддержке Национального института продовольствия и сельского хозяйства, Министерства сельского хозяйства США для PF и KJ. MK был частично поддержан Программой фундаментальных исследований Национального исследовательского фонда Кореи, Министерства образования (2020R1A6A3A03038510).

Конфликт интересов

Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

Примечания издателя

Все утверждения, изложенные в этой статье, принадлежат исключительно авторам и не обязательно представляют претензии их дочерних организаций, издателя, редакторов и рецензентов. Любой продукт, который может быть оценен в этой статье, или претензии, которые могут быть сделаны его производителем, не гарантируются и не поддерживаются издателем.

Ссылки

  • Бендали Ф., Санаа М., Бише Х., Шелчер Ф. (1999). Факторы риска, связанные с диареей у новорожденных телят. Вет. Рез. 30, 509–522. PMID: [PubMed] [Google Scholar]
  • Bolyen E., Rideout J.R., Dillon M.R., Bokulich N.A., Abnet C.C., Al-Ghalith G.A., et al. . (2019). Воспроизводимая, интерактивная, масштабируемая и расширяемая наука о микробиомах с использованием QIIME 2. Nat. Биотехнолог. 37, 852–857. doi: 10.1038/s41587-019-0209-9, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Боранбаева Т., Карахан А.Г., Тулемиссова З., Мыктыбаева Р., Озкая С. (2020). Свойства нового пробиотика-кандидата и лактобактерина-ТК(2) против диареи у телят. Пробиотики Антимикроб. Белки 12, 918–928. doi: 10.1007/s12602-020-09649-4, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Caffarena R.D., Casaux M.L., Schild C.O., Fraga M., Castells M., Colina R., et al. . (2021). Причины диареи новорожденных телят и смертности в пастбищных молочных стадах в Уругвае: исследование случай-контроль на фермах.Браз. Дж. Микробиол. 52, 977–988. doi: 10.1007/s42770-021-00440-3, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Chen YJ, Wu H., Wu SD, Lu N., Wang YT, Liu HN , и другие. . (2018). Parasutterella в сочетании с синдромом раздраженного кишечника и хроническим воспалением кишечника. Дж. Гастроэнтерол. Гепатол. 33, 1844–1852 гг. doi: 10.1111/jgh.14281, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Дайкер К.С., Дайкер С., Озлем М.Б. (1990). Диарея крупного рогатого скота, связанная с campylobacter hyointestinalis .Центральный бл. Ветеринары. Б 37, 158–160. doi: 10.1111/j.1439-0450.1990.tb01040.x, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Espeche MC, Otero MC, Sesma F., Nader-Macias ME F. (2009). Скрининг поверхностных свойств и продукции антагонистических веществ молочнокислыми бактериями, выделенными из молочной железы здоровых и больных маститом коров. Вет. микробиол. 135, 346–357. doi: 10.1016/j.vetmic.2008.09.078, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fan P., Bian B.L., Teng L., Nelson C.D., Driver J., Elzo M.A., et al. . (2020). Генетические эффекты хозяина на раннюю кишечную микробиоту в модели крупного рогатого скота с градуированным спектром генетической изменчивости. ИСМЕ Дж. 14, 302–317. doi: 10.1038/s41396-019-0529-2, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fan P., Nelson C.D., Driver J.D., Elzo MA., Jeong K.C. (2019). Породный состав животных связан со структурой микробиоты задней кишки и резистентностью к бета-лактамам в разнопородном ангусско-брахманском стаде.Передний. микробиол. 10:1846. doi: 10.3389/fmicb.2019.01846, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fan P., Nelson C.D., Driver JD, Elzo MA, Penagaricano F., Jeong K.C. (2021). Генетика хозяина оказывает пожизненное влияние на микробиоту задней кишки и ее связь с ростом и иммунитетом крупного рогатого скота. ИСМЕ Дж. 15, 2306–2321. doi: 10.1038/s41396-021-00925-x, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Fernandez S., Fraga M., Castells M., Колина Р., Зунино П. (2020). Эффект введения lactobacillus spp. штаммов на неонатальную диарею, иммунные параметры и обилие патогенов у телят до отъема. Благоприятный. микробы 11, 477–488. doi: 10.3920/BM2019.0167, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Firehammer BD, Myers L.L. (1981). Campylobacter fetus subsp jejuni : его возможное значение при кишечных заболеваниях телят и ягнят. Являюсь. Дж. Вет. Рез. 42, 918–922. PMID: [PubMed] [Google Scholar]
  • Гомес Д.Э., Арройо Л.Г., Коста М.К., Виль Л., Виз Дж.С. (2017). Характеристика фекальной бактериальной микробиоты здоровых и страдающих диареей молочных телят. Дж. Вет. Стажер Мед. 31, 928–939. doi: 10.1111/jvim.14695, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Hennessy M., Indugu N., Vecchiarelli B., Redding L., Bender J., Pappalardo C. , и другие. . (2021). Краткое сообщение: сравнение фекальных бактериальных сообществ у молочных телят, страдающих и не страдающих диареей, на нескольких фермах в юго-восточной Пенсильвании.Дж. Молочная наука. 104, 7225–7532. doi: 10.3168/jds.2020-19108, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Hou C.L., Zeng X.F., Yang F.J., Liu H., Qiao S.Y. (2015). Изучение и применение пробиотика lactobacillus reuteri у свиней: обзор. Дж. Аним. науч. Биотехнолог. 6:14. doi: 10.1186/s40104-015-0014-3, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Huang A., Cai R., Wang Q., Shi L., Li C. , Ян Х. (2019). Динамическое изменение микробиоты кишечника при заражении вирусом эпидемической диареи свиней у поросят-сосунов.Передний. микробиол. 10:322. doi: 10.3389/fmicb.2019.00322, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Яниро Г., Тилг Х., Гасбаррини А. (2016). Антибиотики как глубинные модуляторы микробиоты кишечника: между добром и злом. кишки 65, 1906–1915. doi: 10.1136/gutjnl-2016-312297, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Jia D., Wang Y., Wang J. H., Liu J. L., Li H. H., Liu A. H., et al. . (2021). Lactobacillus animalis pZL8a: потенциальный пробиотик, выделенный из фекалий свиней для дальнейших исследований.3 Биотех. 11:132. doi: 10.1007/s13205-021-02681-3, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Карасова Д., Црханова М., Бабак В., Жерабек М., Брзобогаты Л. , Матесова З. и др. . (2021). Развитие микробиоты кишечника поросят во время отъема влияет на развитие диареи после отъема — полевое исследование. Рез. Вет. науч. 135, 59–65. doi: 10.1016/j.rvsc.2020.12.022, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Kim H. S., Whon T. W., Sung H., Jeong Y.С., Юнг Э.С., Шин Н.Р. и соавт. . (2021). Продольная оценка трансплантации фекальной микробиоты для облегчения диареи телят и улучшения показателей роста. Нац. коммун. 12:161. doi: 10.1038/s41467-020-20389-5, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Koppen IJN, Velasco-Benitez CA, Benninga MA, Di Lorenzo C., Saps M. (2016). Использование Бристольской шкалы стула и отчета родителей о консистенции стула как части Римских критериев III функционального запора у младенцев и детей ясельного возраста.Дж. Педиатр. 177, 44–48. doi: 10.1016/j.jpeds.2016.06.055, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Козич Дж. Дж., Весткотт С. Л., Бакстер Н. Т., Хайлендер С. К., Шлосс П. Д. (2013). Разработка стратегии секвенирования с двойным индексом и конвейера курирования для анализа данных последовательности ампликона на платформе секвенирования MiSeq Illumina. заявл. Окружающая среда. микробиол. 79, 5112–5120. doi: 10.1128/AEM.01043-13, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Langille M.Г.И., Заневельд Дж., Капорасо Дж.Г., Макдональд Д., Найтс Д., Рейес Дж.А. и соавт. . (2013). Прогностическое функциональное профилирование микробных сообществ с использованием последовательностей маркерных генов 16S рРНК. Нац. Биотехнолог. 31, 814–821. doi: 10.1038/nbt.2676, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Ma Z., Lee S., Fan P., Zhai Y., Lim J., Galvao KN, и другие. . (2021). Разнообразные устойчивые к бета-лактамным антибиотикам бактерии и микробное сообщество в молоке маститных коров. заявл. микробиол.Биотехнолог. 105, 2109–2121. doi: 10.1007/s00253-021-11167-4, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Marchesi J.R., Sato T., Weightman A.J., Martin T.A., Fry J.C., Hiom S.J., et al. . (1998). Разработка и оценка полезных праймеров для ПЦР, специфичных для бактерий, которые амплифицируют гены, кодирующие бактериальную 16S рРНК. заявл. Окружающая среда. микробиол. 64, 795–799. doi: 10.1128/AEM.64.2.795-799.1998, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Nakajima H., Takewaki F., Хашимото Ю., Кадзияма С., Мадзима С., Окада Х. и др. . (2020). Влияние метформина на микробиоту кишечника у пациентов с диабетом 2 типа: двухцентровое квазиэкспериментальное исследование. Образ жизни 10:195. doi: 10.3390/life100, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Nicholson JK, Holmes E., Kinross J., Burcelin R., Gibson G., Jia W., et al. . . (2012). Метаболические взаимодействия микробиоты кишечника-хозяина. Наука 336, 1262–1267. doi: 10.1126/science.1223813, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Пикард Дж.М., Зенг М.Ю., Карузо Р., Нуньес Г. (2017). Микробиота кишечника: роль в колонизации патогенов, иммунных реакциях и воспалительных заболеваниях. Иммунол. преп. 279, 70–89. doi: 10.1111/imr.12567, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Рамирес Дж., Гарнер Ф., Фернандес Л.Б., Маруй А., Сдепанян В.Л., Коэн Х. (2020 ). Антибиотики как основные разрушители микробиоты кишечника. Передний. Клетка. Заразить. микробиол. 10:572912. doi: 10.3389/fcimb.2020.572912, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Renaud D.Л., Келтон Д. Ф., Виз Дж. С., Ноубл К., Даффилд Т. Ф. (2019). Оценка мультивидового пробиотика в качестве поддерживающего лечения диареи у молочных телят: рандомизированное клиническое исследование. Дж. Молочная наука. 102, 4498–4505. doi: 10.3168/jds.2018-15793, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Schluter J., Peled J. U., Taylor B. P., Markey K. A., Smith M., Taur Y., et al. . (2020). Микробиота кишечника связана с динамикой иммунных клеток у человека. Природа 588, 303–307. doi: 10.1038/s41586-020-2971-8, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • USDA (2017).Потери крупного рогатого скота и телят в США по причинам, связанным с хищниками и нехищниками.
  • Вирджинио Джуниор Г.Ф., Биттар К.М.М. (2021). Микробная колонизация желудочно-кишечного тракта молочных телят — обзор ее важности и связи со здоровьем и продуктивностью. Аним. Здоровье Рез. преп. 1–12. doi: 10.1017/S1466252321000062 [Epub перед печатью] [PubMed] [CrossRef]
  • Whon T.W., Kim H.S., Shin N.R., Sung H., Kim M.S., Kim J.Y., et al. . (2021). Диарея телят, вызванная длительной экспансией автохтонных кишечных энтеробактерий и их литических бактериофагов.msystems 6, e00816–e00820. doi: 10.1128/mSystems.00816-20, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Yang L., Lin Q., Han L., Wang Z., Luo M., Kang В. и др. . (2020). Пищевые волокна соевой шелухи уменьшают воспаление у мышей BALB/C, модулируя микробиоту кишечника и подавляя сигнальный путь TLR-4/NF-kappaB. Функция питания 11, 5965–5975. doi: 10.1039/D0FO01102A, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Yu H., Ma Z., Meng S., Qiao S., Zeng X., Тонг З. и др. . (2021). Новый наногибридный антимикробный препарат на основе наночастиц хитозана и антимикробного пептида микроцина J25 с низкой токсичностью. углевод. Полим. 253:117309. doi: 10.1016/j.carbpol.2020.117309, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Зейнельдин М., Олдридж Б., Лоу Дж. (2018). Дисбиоз фекальной микробиоты у откормочного скота с геморрагической диареей. микроб. Патог. 115, 123–130. doi: 10.1016/j.micpath.2017.12.059, PMID: [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Zhao Q., Элсон CO (2018). Адаптивное иммунное образование антигенами кишечной микробиоты. Иммунология 154, 28–37. doi: 10.1111/imm.12896, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]
  • Zhu B., Wang X., Li L. (2010). Микробиом кишечника человека: второй геном человеческого организма. Белковая клетка 1, 718–725. doi: 10.1007/s13238-010-0093-z, PMID: [бесплатная статья PMC] [PubMed] [CrossRef] [Google Scholar]

Смерть новорожденных не остановит программу разведения зоопарка Колумбуса


Потеря слона, детеныши жирафа демонстрируют риски, но чиновники не находят ошибок

Алисса Видман Низ | [email protected]

Очаровательный слоненок, покрытый опилками, и шаткий детеныш жирафа со сложенными губами были одними из самых ожидаемых новорожденных в зоопарке и аквариуме Колумбуса за последние годы.

Они были первыми детёнышами своего вида в зоопарке за 10 и 20 лет, соответственно, и покорили сердца жителей центрального Огайо своими фотографиями с дня рождения и видеотрансляциями в прямом эфире. Мгновенные обновления ожидаются в эпоху цифровых технологий, и официальные лица говорят, что они обеспечивают прозрачность и помогают сплотить больше сторонников сохранения животных.

Это не меняется, когда случаются неожиданные вещи, в том числе когда умирают новорожденные животные.

Подводя итоги последних двух месяцев, представители зоопарка заявляют, что главным приоритетом является предоставление общественности как можно большего количества информации о неожиданной смерти двух трехнедельных телят: азиатской слонихи Элли и масайского жирафа Убумве, которые заразились несвязанными инфекциями. .

Смерти, произошедшие с разницей примерно в месяц, были усугублены дополнительной потерей: невиданным ранее врожденным дефектом, в результате которого второй детеныш жирафа родился мертвым и деформированным.Шестилетняя мать этого жирафа, Ками, не смогла родить и умерла через пять дней после операции кесарева сечения, рискованной процедуры, от которой выжили только три жирафа во всем мире.

Те, кто помогает организовывать программы разведения с участием общенационального консорциума аккредитованных зоопарков, говорят, что трагические смерти не должны помешать зоопарку разводить больше животных в будущем.

Чиновники зоопарка говорят, что сделали все возможное, чтобы предотвратить несвязанные смерти, и будут продолжать задавать вопросы, чтобы информировать людей.

«Раньше мы никогда не объявляли о детях, пока им не исполнилось 30 дней, а теперь они объявляются в тот же день», — сказал доктор Рэнди Юнг, вице-президент зоопарка Колумбуса по здоровью животных и ветеринар с 33-летним стажем, который недавно ответил на вопрос. вопросы общественности в прямом эфире на Facebook.

«Вы хотите получить нужную информацию как можно быстрее», — продолжил Юнге. «Я думаю, что люди принимают это и ценят, потому что чувствуют, что мы честны с ними.»

Оглядываясь назад

Они бесчисленное количество раз прокручивали в голове сценарии. шанс, они не сделали бы ничего другого, чтобы попытаться спасти животных

Дело Ками, в частности, было сложной, безвыходной ситуацией, как они сказали

Зоопарк обратился к доктору Энди Нихаусу, хирургу крупных животных и давний партнер зоопарка с Ветеринарным медицинским центром Университета штата Огайо для проведения кесарева сечения.4, процесс 2 часа 30 минут.

Любая операция опасна для жирафов, сказал Баподра-Виллаверде.

Их необычная анатомия и размер (Кэми весила 1850 фунтов) делают их склонными к травмам, когда анестезия подействует или выйдет из организма. Справиться с их болью во время выздоровления сложно, потому что они непостоянные дикие животные, которые естественным образом скрывают симптомы проблем со здоровьем в качестве защиты.

После попытки руками переместить мертворожденного теленка в положение, позволяющее родить естественным путем, Нейхаус понял, что рискованная процедура — его единственный выход.

«Это как если бы вы представили себе большую игру в Твистер, с двумя задними ногами, одной передней ногой и головой на одной точке», — сказал он. «Так не выйдет».

У Убумве, родившейся от 8-летнего жирафа Зури, вирусная инфекция воспалила кишечник. Когда ее команда круглосуточного ухода заметила изменения в поведении, ветеринары немедленно начали лечение и подтвердили с помощью компьютерной томографии, что хирургическое вмешательство не требуется. С этим согласны эксперты штата Огайо. Она умерла на следующий день, 17 ноября.

В целом детеныши жирафов имеют высокий уровень смертности: около 50 процентов в дикой природе и 25 процентов в неволе.

«Всякий раз, когда вы получаете мертвое животное, вы всегда думаете: «Есть ли что-то, что можно было бы сделать по-другому?», — сказал Юнге. «Но когда мы проходим каждый шаг того, что мы сделали, нет вопиющей ошибки».

Слоненок, который умер в среду, рожденный 31-летней Фиби, вероятно, имел бактериальную инфекцию, которая также воспалила ее кишечник, но не показывала тревожных признаков, сказала пресс-секретарь зоопарка Пэтти Питерс. Она умерла в течение нескольких часов.

Ожидаются результаты полной аутопсии (аутопсии животных) для всех животных, хотя первоначальная аутопсия показала, что она перенесла септический шок, сказал Петерс.

После гибели животных официальные лица зоопарка уведомили Службу инспекции здоровья животных и растений Министерства сельского хозяйства США, агентство, которому поручено проверять благополучие животных в зоопарках страны.

Их последний визит был плановой инспекцией в октябре, сказал Петерс.

Взгляд в будущее

Сотрудники зоопарка говорят, что душевная боль, которую они испытали, не помешает им снова разводить животных.

В его стаде из 14 жирафов есть две опытные матери, сказал Баподра-Виллаверде.До этого недавнего рождения Фиби без проблем вырастила двух слонят.

Если животные в зоопарке Колумбуса размножаются, то только потому, что это рекомендовано комитетом представителей каждого зоопарка, в котором содержатся виды, из Ассоциации зоопарков и аквариумов, некоммерческой группы, объединяющей более 230 аккредитованных учреждений в Соединенных Штатах и ​​за рубежом. Учитываются такие факторы, как генетика и выставочная площадь зоопарка.

Размножение жирафов и всех животных зоопарка должно продолжаться, чтобы сохранить их генетическое разнообразие, сказала Шери Хоришны, координатор плана ассоциации по выживанию видов жирафов.По ее словам, в ассоциативных зоопарках содержится 127 жирафов масаи, но 150 жирафов лучше поддерживают популяцию животных, находящихся под угрозой исчезновения.

«Крайне прискорбно для любого зоопарка потерять двух жирафов за короткий промежуток времени, независимо от того, телята они или нет», — сказала она.

Однако это не противоречит статистике населения, сказала она.

В пятницу не удалось связаться с координатором Плана выживания слонов.

Некоторые критики, такие как Марк Бекофф, бывший профессор экологии и эволюционной биологии в Университете Колорадо в Боулдере, говорят, что недавние смерти в зоопарке Колумбуса иллюстрируют, почему зоопарки должны прекратить программы разведения, которые существуют только для того, чтобы содержать больше животных в неволе. .

Он сказал, что зоопарки должны сосредоточиться исключительно на сохранении естественной среды обитания.

«Я не умаляю зоопарк, потому что я уверен, что они изо всех сил старались, чтобы роды были успешными», — сказал Бекофф. «Это трагедия повсюду. К сожалению, подобные случаи пробуждают общественность и действительно ставят под сомнение эти программы разведения».

Но на каждую неудачу, по словам Юнге, приходится бесчисленное множество других побед.

Например, Коло, первая горилла, родившаяся в неволе, прожила 60 лет в зоопарке Колумбуса и стала самой старой известной гориллой в мире.

«Мы склонны зацикливаться на неудачах и думать: «Что мы могли сделать по-другому?» — сказал Юнге. «Но мне нравится думать, что у нас гораздо больше успехов, чем неудач, и я думаю, что это верно для зоопарков в целом».

Размножаться или не размножаться?

Рост политического экстремизма в стране и за рубежом. Пандемия, унесшая жизни более пяти миллионов человек. Тысячелетние наводнения, стершие с лица земли города Западной Европы. Лесные пожары на Западном побережье, которые каждое лето становятся все более невообразимыми.Столкнувшись с такими тревожными новостями, некоторые будущие родители задаются вопросом: насколько вредным может быть попадание ребенка в эту (в прямом и переносном смысле) среду?

Дженне Росс, 36-летней гончарке, которая живет недалеко от Фредериктона в Нью-Брансуике, Канада, ее решение остаться бездетным в мире, которому угрожает изменение климата, проистекает из инстинкта защиты. «Использование любви, которую я испытываю к моему нерожденному гипотетическому ребенку, утешает меня, избавляя их от негостеприимного будущего», — сказала она. «Таким образом, мой выбор ощущается как акт любви.”

Такие взгляды не всегда пересекаются с географическими, политическими или социальными границами, особенно потому, что изменение климата часто изображается на политической арене как пристрастная, а не научная проблема. В опросе New York Times 2018 года люди, которые назвали изменение климата причиной того, что у них меньше детей, значительно чаще имели высшее образование и были демократами, и немного чаще были белыми, нерелигиозными и высокооплачиваемыми.

Образованные специалисты также имеют более широкий доступ к аборту и контролю над рождаемостью, а также к экономическим средствам выбора любого образа жизни, хотя, например, недавние ограничения на аборты в Техасе также усложняют расчет деторождения.

Несмотря на это, такие вопросы прокрадываются в культурный диалог в манере, напоминающей «экологическое» движение эпохи хиппи, когда «Популяционная бомба», сейсмический бестселлер 1968 года, написанный биологом из Стэнфордского университета Полом Р. Эрлихом, предсказал бесплодная, истощенная планета, где сотни миллионов людей умрут от голода в 1970-х годах.

Сенатор Берни Сандерс и представитель Александрия Окасио-Кортес поднимали этот вопрос в последние годы, и г-жа Окасио-Кортес утверждала «научный консенсус в отношении того, что жизнь детей будет очень трудной», в прямом эфире Instagram 2019 года, что приводит к тому, что «у молодых людей возникает закономерный вопрос: нормально ли иметь детей?»

Ухаживание — грандиозный термин для того, что на самом деле является довольно раздражительным и, казалось бы, утомительным занятием.

( Пэт Моррис, Новая книга ежа )

Ежи достигают половой зрелости на втором году жизни и после этого могут размножаться каждый год до самой смерти. Они размножаются в период с апреля по сентябрь, но период наибольшей активности, «гон» , приходится на май и июнь в Великобритании.

Самцы пытаются ухаживать за самками в длительных встречах, которые включают много кружений, ритмичное фырканье и пыхтение.Волнение привлекает на сцену соперничающих самцов, и, таким образом, ухаживание может быть прервано, поскольку нарушители сталкиваются, а соперничающие самцы примиряются друг с другом; удары головой и погони не редкость. Так что не волнуйтесь, если вы услышите шум, доносящийся из сада, это могут быть ежи!

Как ежики спариваются? (Это не шутка!)

Сам процесс спаривания — деликатная операция. Самка принимает особое положение тела со сплющенными шипами, когда самец садится сзади.Исследования по радиослежению показали, что ежи неразборчивы в связях. И самцы, и самки часто имеют несколько разных партнеров за один сезон.

Разведение ежей, фото Стива Бёрка из Дорсета

Детенышей ёжиков называют кабанчиками

Ежи обычно рожают в июне и июле, хотя сезон детенышей может начаться ранней весной после мягкой зимы и растянуться до осени. Средний размер помета составляет четыре или пять детенышей, хотя может быть и семь. Однако обычно они успешно отлучают только двух или трех.Мать может бросить или даже съесть поросят, если ее потревожить. Иногда она переносит их во рту на новое место — поведение, которое можно увидеть на видео ниже.

Молодые ежи покидают гнездо в возрасте трех-четырех недель, чтобы отправиться на поиски пищи со своей матерью. Примерно через десять дней поиска пищи со своей матерью детеныши уходят сами по себе.

Самки способны приносить второй помет в конце сентября или октябре, но у этих детенышей меньше шансов пережить зиму.

Эксперты считают маловероятным, что самки ежей в Британии могут успешно вырастить два помета за сезон. Свинятам из второго помета нужно очень быстро набрать вес, чтобы подготовиться к зимней спячке, и часто они не могут набрать достаточно веса, чтобы пережить этот период. Эти поздние пометы могут привести к тому, что «осенние сироты» все еще будут кормить до зимы, иногда в дневное время, и часто будут выглядеть с недостаточным весом.

Морская свинка: размеры, описание с фото и рекомендации по уходу

Размер морской свинки зависит не только от возраста, породы и пола питомца.Условия содержания также влияют на рост и вес животного. Недостаток питательных веществ в рационе приводит к задержке роста. Серьезный вред организму также наносят перекармливание и лишний вес. Каких размеров может вырасти питомец в домашних условиях? И как правильно ухаживать за свинкой, чтобы она нормально развивалась и росла? Эти вопросы будут рассмотрены в статье.

Различия между дикими и домашними животными

Каких размеров достигают морские свинки в дикой природе? Самые крупные особи могут вырастать до 35 см.Дикие свиньи внешне отличаются от домашних питомцев. Животным, живущим в естественных условиях, приходится самостоятельно добывать себе пищу и прятаться от хищников. Поэтому они имеют более мускулистое тело и меньший вес, чем домашние. Дикие животные очень выносливы и способны к длительным гонкам.

Давно шло скрещивание разных видов морских свинок. Это помогло животным сохранить свою популяцию в естественных условиях. При этом крупные породы животных скрещивали с мелкими.Поэтому у домашних морских свинок размеры могут варьироваться от 15 до 30 см. Во многом это зависит от размера их диких предков. В процессе селекции домашние свиньи лишились хвоста. У них более округлое тело, чем у их сородичей, живущих в естественной среде.

О чем говорит размер животного

На размер морской свинки влияют следующие факторы:

  • возраст;
  • этаж;
  • порода;
  • уход за животными.

Зачем владельцу знать нормальный размер питомца? В первую очередь о здоровье животного говорят рост и вес. Знание нормальных размеров свинки также помогает правильно ориентироваться при покупке питомца. По этому показателю можно судить об ожидаемом возрасте и чистоте породы животного.

Далее подробно рассмотрим факторы, влияющие на рост и вес морских свинок.

Этаж

До каких размеров вырастает самец морской свинки? Взрослые самцы могут достигать длины тела до 35 см.Весят они до 1,5 кг. Половозрелые самки обычно намного мельче, их рост не превышает 25 см, а вес редко превышает 1 кг.

Порода

Размеры морских свинок во многом зависят от породы. В процессе селекции скрещивались особи разного роста и веса, поэтому есть как миниатюрные, так и крупные животные. Самые большие размеры следующих пород домашних морских свинок:

  • Абиссинский;
  • корона;
  • черепаха;
  • английский рекс;
  • риджбек;
  • Тедди;
  • Куи;
  • гималайский;
  • перуанский.

Эти животные часто весят более 1–1,5 кг.

Новорожденные

Также интересно узнать, какого размера должна быть морская свинка при рождении. Новорожденные малыши вырастают от 5 до 10 см. У мелких пород вес обычно не превышает 45–50 г, а у крупных достигает 100–120 г

Многое зависит от количества новорожденных в помете. Чем больше детенышей вынашивает самка, тем меньше размеры каждого из них. Последовательность рождения также играет свою роль.Особи, родившиеся первыми, обычно крупнее остальных.

Размер детенышей также зависит от течения беременности у самки. Если морская свинка здорова, то она может родить трех крупных детенышей, которые при рождении будут весить не менее 100-120 г.

Детеныши считаются новорожденными до 7-дневного возраста. В этот период они практически не растут.

Возраст до 1 года

В возрасте от 8 дней до 1 месяца размеры морской свинки быстро увеличиваются.Молодняк активно растет и ежедневно прибавляет в весе по 4–5 г. К 30 дню от рождения их рост достигает 14–19 см, а масса тела 200–400 г.

К трем месяцам размеры морской свинки увеличиваются еще на 5–6 см, а вес становится в 10 раз больше, чем при рождении.

К шестимесячному возрасту становятся заметны половые различия в размерах. Самцы выглядят крупнее и пухлее. В 6 месяцев морские свинки вырастают до размеров 20–25 см. Однако в этот период прибавка в весе и росте несколько замедляется.

Период от 6 до 12 месяцев не характеризуется активным ростом. В это время животное уже считается половозрелым. Он достигает полного физического развития и способен давать потомство. Однако торопиться с разведением питомцев не стоит. Следует дождаться возраста 10–12 месяцев, когда организм молодняка окрепнет.

У морских свинок в возрасте 6–12 месяцев выработка гормона роста значительно снижена. Однако длина тела питомца может увеличиться на несколько сантиметров.

Когда рост прекращается

В возрасте 1,5 лет морская свинка перестает расти. Животное считается взрослым и достигает максимального размера. Если питомец старше 15 месяцев, то ожидать прибавки в росте нельзя.

При правильном питании у взрослых свиней не наблюдается значительных колебаний массы тела. В норме вес самца составляет от 1 до 1,8 кг, а самки — от 0,7 до 1 кг. Если масса тела питомца превышает эти показатели, следует срочно пересмотреть рацион.Ожирение очень опасно для этих подвижных и активных животных.

В возрасте 4 лет свинка начинает стареть. Репродуктивная функция животного постепенно угасает, исчезает прежняя активность, изменяется обмен веществ. В пожилом возрасте животные часто теряют в весе. Это естественное явление. Однако при слишком резкой потере веса следует обратить внимание на здоровье животного.

При хорошем уходе продолжительность жизни животных в домашних условиях составляет от 6 до 8 лет. Короткошерстные грызуны обычно живут дольше, чем длинношерстные и лысые (гипоаллергенные) породы.

Уход

Размеры взрослой морской свинки во многом зависят от условий ее содержания в детстве. Основную роль здесь играет рацион животного. Ведь необходимые для роста вещества питомец получает с пищей.

Чтобы свинка достигла максимального размера, необходимо придерживаться следующих рекомендаций по уходу:

  1. В возрасте 20 дней молодняк питается материнским молоком. Не следует искусственно укорачивать период грудного вскармливания.Малыши, рано разлученные с матерями, хуже развиваются и растут.
  2. Кормящим морским свинкам следует регулярно давать жирное коровье или козье молоко, а также сливки. Это особенно необходимо в случае многоплодия. Такое питание улучшит продуктивность и качество молока, а в дальнейшем обеспечит хороший рост молодняка.
  3. В рацион растущих морских свинок следует регулярно включать овощи и фрукты, а также сухое сено. В клетке всегда должны быть корнеплоды и ветки кустарников.Такая пища обогатит организм молодняка необходимыми для роста питательными веществами.
  4. Молодым морским свинкам полезно давать специальные добавки с витамином С. Этот микроэлемент практически не вырабатывается в их организме. Недостаток аскорбиновой кислоты приводит к замедлению роста животных.

Очень важно следить за тем, чтобы животное не переедало. Ведь морские свинки довольно прожорливы. С полугодовалого возраста питомца необходимо периодически выпускать из клетки. Прогулки по дому и подвижные игры помогут предотвратить чрезмерное увеличение веса.

Самые большие морские свинки

Крупнейших размеров достигают морские свинки породы Куи. Раньше их разводили как сельскохозяйственных животных. В настоящее время в домашних условиях содержатся огромные грызуны.

Размер морской свинки Куи может достигать до 50 см, а вес — до 4 кг. Таких размеров они достигают к шестимесячному возрасту. Однако содержание этих животных достаточно сложное. Грызуны имеют нервный характер и чувствительны к любому стрессу. Кроме того, они бездействуют и малоподвижны.Куи имеют слабое здоровье, а продолжительность жизни составляет всего 3-4 года.

Можно сделать вывод, что не всегда нужно стремиться к тому, чтобы питомец достиг крупных размеров. Необходимо помнить, что чрезмерно крупные животные часто имеют проблемы со здоровьем.

Британская короткошерстная кошка: фото, описание породы, характер

Каждый человек, собирающийся завести домашнего питомца, изучает особенности породы. Большинство любят кошек, и на сегодняшний день одной из самых популярных пород являются британцы.В этой статье будет представлена ​​основная информация о британской короткошерстной кошке. Вы сможете ознакомиться с характером, повадками, окрасами, стандартами телосложения и правилами ухода за этим прекрасным животным. Мы познакомим вас со стандартами «стейт» (прямые уши) и «шотландской вислоухой» — британской короткошерстной вислоухой кошкой. Начнем со стандарта породы — «Стрий».

История происхождения

Британская короткошерстная кошка, с фото которой можно ознакомиться в этой статье, является одной из древнейших пород.История этого животного начинается с первого века нашей эры, но пользоваться своей популярностью оно стало с конца девятнадцатого века, когда предстало перед всем миром во всей красе. Порода британских короткошерстных любима не только на своей родине – в Великобритании, но и во всем мире. Лучшие особи этой породы зарегистрированы и продолжают регистрироваться по сей день в специальной племенной книге.

История британской короткошерстной кошки началась не в Великобритании, а еще в Древнем Египте и Риме.Существует множество исторических документов, описывающих людей, которых сопровождали огромные коренастые кошки с серо-голубой шерстью и очень острыми клыками. Именно поэтому ученые считают, что эта порода пришла к нам из тех стран.

римских легионера сопровождали этих красивых кошек и, посетив Британские острова, оставили животных. Те, в свою очередь, стали скрещиваться с местными лесными кошками, и их потомство полюбилось англичанам за аристократическую внешность, отменное здоровье, выносливость и особую ловкость во время охоты.

В 19 веке в Англии было принято решение вывести настоящую породу британской короткошерстной кошки. Для этих целей были отобраны самые красивые особи, а Харрисон Вейер создал стандарты этой породы и вскоре провел первую выставку «истинных британцев». Как самостоятельная порода эта кошка была официально зарегистрирована лишь сто лет назад.

Основные окрасы британской короткошерстной кошки

Цвет изначально был один — синий.Вот как мы узнали эту красивую кошку. На сегодняшний день существует несколько стандартных цветов, и каждый может выбрать тот, который ему больше нравится:

  1. Однотонные — кошки, имеющие однотонный окрас без различных пятен, не допускаются даже мелкие точки. Конечно, фаворитом этого типа цвета является синий.
  2. Черепаховые кошки — это кошки, шерсть которых окрашена в несколько цветов. Самые популярные сочетания – красный и черный, кремовый и синий.
  3. Дымчатый — контрастный цвет. У таких кошек светлый подшерсток и насыщенный цвет кончиков шерсти.
  4. Тэбби — британская короткошерстная кошка, окрашенная в «мраморный», ярко выраженные широкие полосы или пятна. Чем четче картинка, тем ценнее порода. Еще одна особенность — буква «М» должна располагаться на лбу.
  5. Колорный, или сиамский окрас кошек — один из самых редких на сегодняшний день. Обладательницы этого цвета интересны тем, что могут менять оттенок в зависимости от погодных условий. Тело этой кошки белое, а морда, уши, лапы и хвост имеют другой цвет.
  6. Биколор — это окрас, состоящий из двух цветов.Один из них белый, но его не должно быть больше половины.

В любом из окрасов британская короткошерстная невероятно великолепна! Фото этой красавицы докажет вам это. Чем же так привлекает любителей кошек это животное? Давайте посмотрим на внешнее описание британской короткошерстной кошки.

Стандарты породы

Как и у любой породы, у этой кошки есть определенные стандарты, отклонение от которых будет говорить о браке. Если вы хотите купить настоящую британскую короткошерстную кошку, единственным правильным решением будет питомник.Профессиональные заводчики не отступают от принятых норм, и на продажу выставляются только лучшие экземпляры. Итак, каким должен быть «настоящий британец»?

  1. Голова британской короткошерстной кошки правильной круглой формы. Можно услышать такую ​​легенду, которая гласит, что родоначальником этой породы является чеширский кот. Именно «улыбка чеширского кота» и крылья обязательно должны присутствовать в породе. Морда этого животного тоже должна быть максимально круглой.
  2. У этой кошки широкий, прямой и короткий нос, а на носу у него всегда небольшое углубление.
  3. Уши маленькие, поставлены широко и низко.
  4. Глаза напоминают круглые блюдца, эти коты похожи на сов! Стандартный цвет — золотой (оранжевый). Но если это «шиншилла», то глаза могут быть зелеными и лавандовыми, если окрас пойнтовый, то в обязательном порядке глаза должны быть голубыми. Тусклая кайма, окаймляющая зрачок британской короткошерстной кошки, говорит о браке в породе.
  5. Тело этого животного должно быть мускулистым, ширококостным и крепким. Спина у такой кошки широкая, массивная, туловище такое же.Хвост короткий и толстый, сужающийся к кончику. Передние лапы красавиц британских кошек всегда неуклюжи, как бы широко расставлены. Кошки намного больше кошек, их вес может достигать восьми килограммов. Кошки, хотя физически и столь же массивны, весят в основном 4-6 килограммов. Котята быстро растут, но о полной зрелости можно говорить только к четырем годам их жизни, а до этого они будут капризничать, играть и даже пакостничать.
  6. Есть две ветви породы — британская короткошерстная и британская длинношерстная.Оба вида прекрасны! Сегодня речь пойдет о первом представителе. Шерсть короткая – до 2,5 мм, напоминает плюшевую, очень приятная на ощупь, мягкая и нежная.
  7. Каждый британец должен соответствовать стандартам цвета. Например, если вы выбрали однотонный цвет, то он должен быть равномерным, без «добавок». Допускаются только небольшие помутнения и переливы.

Недостатки стандартов породы

Часто встречаются чистокровные британские короткошерстные кошки с явными дефектами внешности.Это не брак, это их особенность, которую некоторые считают недостатком. Что может присутствовать?

  1. Пароварки могут быть слишком ярко выражены.
  2. У некоторых особей на носу имеется небольшая горбинка, которая определенным образом меняет пропорции морды.
  3. Бывает, что котята рождаются со слегка суженной мордочкой.
  4. У некоторых британцев неправильный прикус.

Чаще всего такие особенные котята так и не находят своих хозяев, и их приговор — провести всю жизнь в питомнике или приюте.

Это британские короткошерстные кошки. Описание персонажа — еще один пункт нашей статьи.

Британский символ

Эта порода наделена своим, отличным от других кошек, особым характером. Никакая другая порода не может конкурировать с британцами в независимости. Если вы любите, чтобы животное сидело и мурлыкало у вас на руках, то британская короткошерстная – не ваш выбор. Она терпеть не может, когда ее берут на руки даже хозяева, что уж говорить о гостях, которые так и норовят ее потискать! Именно из-за этой черты у породы есть не только поклонники, но и ненавистники.

Британский кот не любит излишних ласк. Она убежит, спрячется от смотрителя, а если он ее поймал — убегать, уворачиваться, может даже больно укусить!

Это самодостаточная и гордая кошка. Она никогда не пойдет за своим хозяином и не подаст голос с просьбой наполнить чашу. Она в молчаливом терпении ждет еды, может долго сидеть, глядя на своего кормильца.

Это достаточно наглые представители семейства кошачьих. Они даже головы не повернут кис-кис, только откликнутся на свое имя!

Характер у этой красавицы далеко не сахар, рассмотрим ее основные черты.

Особенности характера британской кошки

Это гордая и независимая порода. Она терпит одиночество и даже любит его. Если вы занятой человек, часто путешествуете. Это ваш выбор. Главное — не забывайте кормить, иначе кот может и отомстить!

Порода достаточно уравновешенная. Она не будет вести себя неприлично, бегая по квартире за бантиком! Играть со взрослой британской кошкой практически невозможно.

Может выйти из себя, проявляя трудный нрав, но в редких случаях.Например: ее поймали и насильно погладили. Но в основном ему не свойственна агрессия.

британцам необходимо личное пространство, ограничение которого непростительно. Он также не любит, когда его ругают и оскорбляют.

Представители этой породы непреклонны. Если вас что-то не устраивает в питомце, есть нетерпимые привычки, то исправить их вряд ли получится. Например, мне понравилось, что кот рвет шторы, ворует и прячет вещи или даже ходит по лотку в нужде — смирись с этим!

Поведение британской кошки

Чтобы воспитать британскую короткошерстную кошку, основные черты характера которой приведены выше, вам понадобится целых год! Именно в этот период вы можете ее дрессировать, приучать к порядку, моделям поведения, корректировать некоторые нюансы поведения, которые вас не устраивают.Через год кошачьей жизни ничего не изменится. Если есть какие-то проблемы в поведении — это недостаток воспитания в детстве.

Британцы очень ленивые коты и коты. Они могут спать долго, иногда — весь день! В состоянии покоя нельзя тревожить это животное, иначе оно может проявлять агрессию, а остаток дня будет раздражительным.

Британцы — благородные кошки. Очень щепетильно относятся к своему внешнему виду, много времени уделяют уходу за собой, вылизыванию.

Несмотря на то, что почти во всем эта порода хороша, в ее характере есть и недостатки, которыми недовольны некоторые владельцы таких котов и котов. Что больше всего раздражает?

  1. Очень любят носить и разбрасывать разные предметы и вещи. Конечно, в детстве это довольно мило — котенок играет. Но по мере взросления кошки начинают ронять цветочные горшки, крупные и хрупкие вещи. От такого поведения котенка необходимо отучать, обрабатывая понравившиеся предметы специальными смесями, которые продаются в магазине.Как было сказано выше, взрослое животное нельзя ничему научить и от чего-то отучить.
  2. Не приучайте котенка играть вашими ногами, бросаясь на них, и руками. Взрослое животное может сильно поранить конечности своими острыми зубами.
  3. Британцы невероятно любопытны. Они залезают в шкафы, сумки и различные тайники в доме.
  4. Если британцу что-то в вас не понравилось или вы задели его чувства, возможно, у него неразбериха в личных вещах.Измените в этом случае отношение к животному или что-то в своем поведении.

Вот такой сложный характер у британских короткошерстных кошек. Эта порода подходит не всем, да и не каждый сможет справиться с таким уникальным в природе животным. Предлагаем перейти к ближайшему родственнику британского короткошерстного «страйта» — «Скоттиш фолд», вислоухому представителю.

Происхождение породы

Как таковой британская короткошерстная вислоухая кошка не является, многие ошибочно ее так называют.Это шотландская вислоухая кошка, визитной карточкой которой является интересная форма ушей.

В 1796 году были обнаружены первые почти вислоухие кошки. В это время в Китае были зафиксированы экземпляры с интересными приплюснутыми ушами.

На ферме Уильяма Россо, ставшего основоположником породы, в 1961 году появились интересные вислоухие котята. Это уже произошло на территории Шотландии. Не понимая, в чем дело, фермер обратился за консультацией к ветеринару, который выявил в этой форме генную мутацию – дефект костной и хрящевой ткани.Фермер много лет скрещивал экземпляры, добиваясь разных окрасов и длины шерсти. Но признали породу только спустя 15 лет, и произошло это уже в Америке.

Особенности породы

Главной особенностью породы являются свисающие вниз и вперед кончики ушей. Они плотно прилегают к голове, повторяя ее форму и закрывая ушные отверстия.

Глаза огромные, круглые, могут иметь разный цвет, но только определенный стандартом. Благодаря этим глазам и висячим ушам кошки имеют неповторимый внешний вид, некоторые люди сравнивают их с совами.

Стандарты породы:

  1. Тело шотландских вислоухих кошек, как и у британцев, крепкое, массивное, мускулистое. Вес взрослой особи может достигать десяти килограммов.
  2. Лапы, как у англичан — крепкие, толстые, округлые. В идеале у кошки на пятках между пальцами должны быть шерстяные пучки.
  3. Хвост средней длины, толстый, на конце сужается.
  4. Голова круглая, слегка приплюснутая. Подушки, из которых растут усы, пухлые, четкие и круглые — добавляют дополнительный шарм!
  5. Уши, как было сказано ранее, свисающие – вниз и вперед, а не по бокам.
  6. Глаза выразительные, круглые, глубоко посаженные. Их цвет зависит от цвета.
  7. Нос короткий и широкий, почти никогда не имеет четкого перехода от переносицы к кончику.
  8. Шерсть плюшевая, короткая, мягкая. Но он может меняться в зависимости от времени года и места рождения. Окрасы такие же, как у британских короткошерстных.

Поскольку шотландские вислоухие кошки являются результатом генной мутации, у них могут быть некоторые дефекты. Он связан с костной и хрящевой тканью.Чаще всего встречаются такие недостатки как:

  • неправильное количество пальцев;
  • утолщение задних ног;
  • неправильная форма уха;
  • проблемы с позвоночником;
  • деформация хвоста.

Персонаж Складной Кот

Эти кошки признаны одной из лучших пород, подходящих для дома. Они прекрасно адаптируются на новом месте, привязываются к своим хозяевам, любят дом, хорошо ладят с другими домашними животными и детьми.

Эта порода отличается от британцев тем, что любит сопровождать своего хозяина, хорошо относится к ласкам. Она не гиперактивна, но и не такая клерка, как англичане. Он любит играть — в меру. Если вы устали или просто не в настроении, то кошку лучше не беспокоить. Нет, она не будет проявлять агрессию, как это делают британцы, а уйдет из привычного места в темный угол, чтобы ее больше не беспокоили, и выйдет оттуда только тогда, когда захочет, никакие уговоры не выдергивать .

Нрав покладистый и легкий, легко идет на контакт не только с хозяевами, но и с незнакомыми людьми. Толерантен к детям, станет для них отличным компаньоном, так что для семей это отличный выбор!

Забота о британцах и шотландцах

Как и за любым животным, за кошкой нужно ухаживать. Уход и за британцем, и за шотландцем схож и достаточно прост. Какие правила нужно соблюдать?

  1. Купание рекомендуется раз в месяц.На дно ванной постелите полотенце, чтобы кошачьи лапы не скользили. Идеальная температура для купания 35-37 градусов. Для мытья следует использовать профессиональный шампунь для кошек, «человеческий» не моет! Уши должны быть защищены от попадания воды; для этого вставьте в них шарики ваты.
  2. Если кошка не гуляет на улице, а живет только в квартире, то стричь ей когти нужно раз в месяц. Если кошка любит погулять на улице, то у нее сами когти стачиваются, стричь их уже не нужно.
  3. Приучать кошку к расчесыванию нужно с раннего возраста. Для этих целей используйте специальную перчатку или щетку из натуральной шерсти. Если есть колтуны, то их нужно подрезать.
  4. Особенно нуждаются в уходе за ушами вислоухих кошек, их необходимо чистить раз в месяц. Для британцев с прямыми ушами чистка ушей также обязательна, но раз в два месяца. Для чистки используются ватные палочки или тампоны, которые следует смочить в мыльной воде.
  5. Глаза тоже нужно протирать. Используйте ватные диски, смоченные в слабом растворе борной кислоты или в крепко заваренном чае.
  6. Не забывайте о необходимых прививках для каждого животного. Их нужно делать каждый год, график выдаст ветеринар после первой прививки.
  7. Даже если кошка домашняя, на улицу не ходит, ошейник от паразитов ей нужен. Вы сами можете принести домой клеща, который визжит на незащищенную кошку. А блохи даже при должном уходе могут напасть совершенно неожиданно!

Мы говорили о породе британских короткошерстных кошек. Фото этой красавицы есть в этой статье.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.