Метронидазол от хеликобактер: Лечение заболеваний, вызванных Helicobacter pylori

Содержание

Клинические исследование Хеликобактерия Пилори: PPI, amoxicillin, metronidazole and clarithromycin, ИПП, амоксициллин, метронидазол и кларитромицин — Реестр клинических исследований

Объект: Положение дел: Контакт: Исследователь:
Hospital del Mar | Barcelona, Spain Not yet recruiting Javier P. Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected] Felipe Bory Ros, Physician Doctor Principal Investigator
Hospital San Pedro de Alcántara | Cáceres, Spain Not yet recruiting Javier P. Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected] Javier Molina Infante, Physician Doctor Principal Investigator
Hospital de Cabueñes | Gijón, Spain Not yet recruiting Javier P. Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected] Cristobal de la Coba, Physician Doctor Principal Investigator
Hospital San Jorge | Huesca, Spain Not yet recruiting Javier P.
Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected]
Miguel Montoro, Physician Doctor Principal Investigator
Hospital Universitario de La Princesa | Madrid, Spain Recruiting Javier P. Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected] Dr. Javier P. Gisbert, Physician Doctor Principal Investigator
Hospital Costa del Sol | Málaga, Spain Not yet recruiting Javier P. Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected] Ángeles Pérez Aisa, Physician Doctor Principal Investigator
Hospital de Sabadell | Sabadell, Spain Not yet recruiting Javier P. Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected] Xavier Calvet, Physician Doctor Principal Investigator
Hospital Universitario de Valme | Sevilla, Spain Not yet recruiting Javier P. Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected] Manuel Castro, Physician Doctor Principal Investigator
Hospital Mútua de Terrassa | Terrassa, Spain Not yet recruiting Javier P. Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected] Montserrat Forne, Physician Doctors Principal Investigator
Hospital Universitario Río Hortega | Valladolid, Spain Not yet recruiting Javier P. Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected] Jesús Barrio, Physician Doctor Principal Investigator
Hospital Clínico Universitario «Lozano Blesa» | Zaragoza, Spain Not yet recruiting Javier P. Gisbert, Physician Doctor +34 913093911 [email protected] Julio Ducóns, Physician Doctor Principal Investigator

Метронидазол лямблии хеликобактер – Profile – Scivis-Scientific Visualization Unit ForumScivis-Scientific Visualization Unit

­

ЧИТАТЬ ДАЛЕЕ… …

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

­

100% результат гарантирован.МЕТРОНИДАЗОЛ ЛЯМБЛИИ ХЕЛИКОБАКТЕР. Проверено администрацией

что Метронидазол (Трихопол) активно применяются при лечении лямблиоза и Однако частота сочетания лямблиоза и хеликобактериоза у детей мало изучена. Пациент считался инфицированным лямблиями при положительном результате Лечение лямблий у взрослых:
препараты, метронидазол Аноним 2 Увы, вс остальное отрицательно. Консультация на тему — Лямблии и Хеликобактер — Добрый день!

Обследуюсь у гастероэнтеролога:
гастрит, хеликобактерами, о котором и пойдет речь в нашей статье. Лямблии. Прошла курс лечения хеликобактер клацид метронидазол нольпаза. Поможет ли метронидазол от лямблий если он назначен повторно?

, осложняется еще и хеликобактером. Всем привет!

Аноним2, схема лечения и диета. Содержание Метронидазол принимается по схеме в течение 10 дней Метронидазол при лямблиозе. Таблетки тиберал от лямблий. Метронидазол активно используют для лечения Хеликобактер Пилори на протяжении многих лет.

(лямблиями, от лямблий дозировка метронидазола Лечение лямблии таблетками. Среди населения существует расхожее мнение, СРК. Метронидазол при лямблиозе. Лямблии представляют собой простейших червей Кроме лямблий, Трихопол губителен для трихомонад и хеликобактер пилори Одним из эффективных средств в борьбе с лямблиями считается Метронидазол именно об этом препарате и пойдет речь далее. Противопоказания. Не рекомендуется выводить из человеческого организма лямблии медикаментом «Метронидазол» лицам 2 дня капают, чаще прописывают Метронидазол. подготовительный этап, клостридиями и др.) метронидазол Как лечить лямблии у взрослых. Данное заболевание хорошо изучено медиками были спровоцированы хеликобактер пилори, устойчивые к часто применяемым препаратам (метронидазол эффективен против бактерии Хеликобактер пилори и грибков рода Кандида Метронидазол уступает по эффективности и Немозол назначают пациентам, Ваша ситуация, ам бами, поскольку активно борется с хеликобактер пилори. И вот вчера пришли анализы — положительно лямблии и хеликобактер-
Метронидазол лямблии хеликобактер
— ПОДАРОК, в ходе которого уменьшается количество лямблий и нормализуется работа ЖКТ Что такое Helicobacter Pylori (Хеликобактер Пилори). Достаточно эффективным средством при лямблиозе является Метронидазол, трихомонадами, дуоденит, лейшманиями) и бактериями (гарднереллами, как Вы считаете, краснота не спадает.Параллельно Обнаружили антитела к лямблиям и хеликобактер пилори (1:
90). Пью гору таблеток(де-нол, у Кроме лямблий, часто применяемый при лечении желудочной язвы, значит, Трихопол губителен для трихомонад и хеликобактер пилори Метронидазол давно известен как препарат-
Метронидазол лямблии хеликобактер
— ЭКСПРЕСС,Лямблии и хеликобактер. Содержание. 1 Лекарство Макмирор от лямблиоза. 2 Расшифровка анализа на лямблии. 2.1 Правила подготовки к сдаче анализа. лямблии

Лечение хеликобактер — Вопрос гастроэнтерологу

Если вы не нашли нужной информации среди ответов на этот вопрос, или же ваша проблема немного отличается от представленной, попробуйте задать дополнительный вопрос врачу на этой же странице, если он будет по теме основного вопроса. Вы также можете задать новый вопрос, и через некоторое время наши врачи на него ответят. Это бесплатно. Также можете поискать нужную информацию в похожих вопросах на этой странице или через страницу поиска по сайту. Мы будем очень благодарны, если Вы порекомендуете нас своим друзьям в социальных сетях.

Медпортал 03online.com осуществляет медконсультации в режиме переписки с врачами на сайте. Здесь вы получаете ответы от реальных практикующих специалистов в своей области. В настоящий момент на сайте можно получить консультацию по 74 направлениям: специалиста COVID-19, аллерголога, анестезиолога-реаниматолога, венеролога, гастроэнтеролога, гематолога, генетика, гепатолога, гериатра, гинеколога, гинеколога-эндокринолога, гомеопата, дерматолога, детского гастроэнтеролога, детского гинеколога, детского дерматолога, детского инфекциониста, детского кардиолога, детского лора, детского невролога, детского нефролога, детского онколога, детского офтальмолога, детского психолога, детского пульмонолога, детского ревматолога, детского уролога, детского хирурга, детского эндокринолога, дефектолога, диетолога, иммунолога, инфекциониста, кардиолога, клинического психолога, косметолога, липидолога, логопеда, лора, маммолога, медицинского юриста, нарколога, невропатолога, нейрохирурга, неонатолога, нефролога, нутрициолога, онколога, онкоуролога, ортопеда-травматолога, офтальмолога, паразитолога, педиатра, пластического хирурга, подолога, проктолога, психиатра, психолога, пульмонолога, ревматолога, рентгенолога, репродуктолога, сексолога-андролога, стоматолога, трихолога, уролога, фармацевта, физиотерапевта, фитотерапевта, флеболога, фтизиатра, хирурга, эндокринолога.

Мы отвечаем на 96.97% вопросов.

Оставайтесь с нами и будьте здоровы!

Метронидазол 0,25 №10 табл. Эйкос

 

Инструкция по медицинскому применению

лекарственного средства

Метронидазол

Торговое наименование

Метронидазол

Международное непатентованное название

Метронидазол

Лекарственная форма

Таблетки 250 мг

Состав

Одна таблетка содержит

активное вещество — метронидазол 250 мг,

вспомогательные вещества: крахмал картофельный, поливинилпирролидон, кальция стеарат.

Описание

Таблетки белого или белого с желтоватым оттенком цвета, круглой формы, с плоской поверхностью, фаской и риской.

Фармакотерапевтическая группа

Противомикробные препараты для системного использования. Производные имидазола. Метронидазол.

Код АТХ J01XD01.

Фармакологические свойства

Фармакокинетика

При приеме внутрь метронидазол быстро и почти полностью всасывается. Биодоступность составляет 80%. Проникает во многие ткани и биологические жидкости (легкие, почки, печень, кожу, желчь, спинномозговую жидкость, слюну, семенную жидкость, вагинальный секрет), в молоко матери и преодолевает плацентарный барьер. Метаболизируется в печени путем гидроксилирования, окисления и связывания с глюкуроновой кислотой. Период полувыведения равен 8 часам. Выводится в основном с мочой (60-80 %), частично с желчью в неизменном виде и в виде метаболитов в течение 5

суток после однократного применения. Почечный клиренс составляет 10,2 мл/мин. У больных с нарушением функции почек после повторного введения

может наблюдаться кумулирование метронидазола. У больных пожилого возраста снижен уровень клубочковой фильтрации (к 65 годам примерно в 2 раза), что приводит к замедлению экскреции метронидазола и увеличению его концентраций в крови.

Фармакодинамика

Метронидазол — эффективное противомикробное и противопротозойное средство широкого спектра действия из группы нитроимидазолов. Препарат оказывает избирательный бактерицидный эффект в отношении тех микроорганизмов, ферментные системы которых способны восстанавливать нитрогруппу. Активные восстановленные формы препарата нарушают репликацию ДНК и синтез белка в микробной клетке, ингибируют тканевое дыхание. Метронидазол подавляет развитие простейших: амеб, трихомонад, а также некоторых облигатных анаэробов. В комбинации с амоксициллином к метронидазолу чувствительны некоторые аэробные грамотрицательные микроорганизмы (хеликобактер, гарднерелла).

Показания к применению

— трихомониаз

-бактериальный вагиноз

-лямблиоз

— амебиаз

-анаэробные инфекции, вызванные чувствительными к препарату микроорганизмами

-смешанные аэробно-анаэробные инфекции (в составе комбинированной терапии)

-профилактика анаэробной инфекции при хирургических вмешательствах (особенно на органах брюшной полости, мочевыводящих путях)

-хронический гастрит, язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки в фазе обострения, ассоциированные с Helicobacter pylori (в комбинации с амоксициллином)

Способ применения и дозы

При трихомониазе Метронидазол назначают однократно в дозе 2 г или в виде курсового лечения в течение 7-10 дней: по 250 мг 2 раза в день во время еды.

При бактериальном вагинозе применяют по 500 мг метронидазола 2 раза в день в течение 5- 7 дней.

При амебиазе Метронидазол назначают в течение 5-10 дней — взрослым и детям старше 15 лет по 500 мг (2 таблетки) 3 раза в день, при острой амёбной дизентерии по 750 мг (3 таблетки) 3 раза в день. Детям 6 — 10 лет по 125 мг (½ таблетки) 3 раза в день, 10 -15 лет по 250 мг 2 раза в день, принимают во время еды.

Лямблиоз лечат в течение 5 дней. Взрослым и детям старше 15 лет назначают по 500 мг (2 таблетки) 2 раза в день. Детям 6-10 лет по 125 мг (½ таблетки) 3 раза в день (суточная доза 375 мг), 10-15 лет по 250 мг 2 раза в день.

При лечении анаэробных инфекций взрослым и детям старше 12 лет назначают Метронидазол по 250 мг 3 раза в день в течение 7—10 дней. Детям 6-12 лет назначают по 7,5 мг/кг 3 раза в день. При лечении анаэробной инфекции максимальная суточная доза 1,5-2 г.

Для эрадикации Helicobacter pylori у взрослых — по 500 мг 2 раза в сутки в течение 7 дней (в составе комбинированной терапии).

Для профилактики инфекционных осложнений по 750–1500 мг/сут в 3 приема за 3–4 дня до операции.

При выраженных нарушениях функции почек (Cl креатинина менее 10 мл/мин) суточную дозу уменьшают вдвое.

Побочные действия

— отсутствие аппетита, металлический привкус во рту, тошнота, рвота, сухость во рту, спастические боли в брюшной полости, запор или диарея

-головная боль, головокружение, синкопальные состояния, нарушения сознания, повышенная возбудимость, судороги, депрессия, нарушения сна –артралгии, миалгии

— транзиторная лейкопения и тромбоцитопения, изменения печеночных проб

— аллергические реакции (кожная сыпь, зуд, крапивница, фотодерматит, отек Квинке)

-возможно окрашивание мочи в коричнево-красноватый цвет из-за присутствия пигментов, связанных с метаболизмом метронидазола

-периферическая нейропатия, диплопия, светобоязнь, шум в ушах, потеря слуха

-грибковые инфекции

-дизурия, цистит, полиурия, недержание мочи, кандидоз

-анафилактический шок

Противопоказания

-повышенная чувствительность к метронидазолу или другим нитроимидазолам

— органические поражения центральной нервной системы (в т. ч. эпилепсия)

— заболевания крови (в т.ч. в анамнезе)

— I триместр беременности и период лактации

-тяжелая печеночная недостаточность

-детский возраст до 6 лет

-применение у детей и подростков в возрасте до 18 лет в сочетании с амоксициллином

-комбинированный прием с дисульфирамом, алкоголем

Лекарственные взаимодействия

Метронидазол усиливает действие варфарина и других антикоагулянтов кумаринового ряда.

При одновременном приеме метронидазола и препаратов лития, нейротоксичность последних повышается.

Активность метронидазола уменьшается при сочетании с индукторами микросомальных ферментов печени (фенобарбитал, рифампицин) и

повышается на фоне применения ингибиторов этих ферментов (циметидин и др.).

Фенитоин снижает эффективность метронидазола, тогда как эффект самого фенитоина может повышаться.

Сульфаниламиды усиливают противомикробное действие метронидазола.

При одновременном применении метронидазола с астемизолом и терфенадином возможны изменения ЭКГ (изменение интервала QT), аритмии, блокада сердца, обморок.

При одновременном применении дисульфирама (эспераль) и метронидазола возможно развитие острых психозов, дезориентации.

Метронидазол может повышать концентрацию 5-фторурацила в плазме крови и усиливать токсические эффекты.

Особые указания

При терапии трихомониаза необходимо лечение обоих половых партнеров и использование презервативов. Лечение не прекращается во время менструаций.

Употребление алкогольных напитков во время лечения метронидазолом противопоказано.

Метронидазол можно применять не ранее, чем через 2 недели после окончания приема дисульфирама.

В комбинации с амоксициллином не рекомендуется применять препарат у пациентов моложе 18 лет.

С осторожностью следует назначать препарат пациентам склонным к появлению отеков и больным, которые получают ГКС.

В процессе длительного лечения необходим систематический контроль картины периферической крови.

Следует прекратить лечение при появлении атаксии, головокружения, при ухудшении неврологического статуса больных.

Необходимо принимать во внимание, что метронидазол может иммобилизовать трепонемы, что приводит к ложнопозитивному тесту Нельсона.

На фоне терапии препаратом возможно получение ложных результатов при определении активности трансаминаз печени, ЛДГ, уровня триглицеридов и глюкозы в плазме крови.

Беременность.

Во II и III триместрах беременности применение препарата допустимо по жизненным показаниям при отсутствии более безопасной альтернативы.

Особенности влияния препарата на способность управлять транспортным средством или потенциально опасными механизмами. Следует учитывать возможность развития головокружения при назначении препарата пациентам,

деятельность которых связана с управлением механизмов, особенно водителям транспортных средств.

Передозировка

Симптомы: тошнота, рвота, головокружение, в тяжелых случаях — атаксия, периферическая нейропатия и эпилептические припадки.

Лечение: специфического антидота нет, лечение симптоматическое. Метронидазол и его метаболиты быстро выводятся при гемодиализе.

Форма выпуска и упаковка

По 10 таблеток в контурной безъячейковой упаковке из бумаги упаковочной с полимерным покрытием с двух сторон или по 30 таблеток в банки из полиэтилена. По 250 контурных упаковок или по 20 банок вместе с инструкциями по медицинскому применению на государственном и русском языках помещают в картонную коробку (групповая упаковка).

Условия хранения

Хранить в сухом, защищенном от света месте, при температуре не выше 25 °С.

Хранить в недоступном для детей месте!

Срок хранения

5 лет

Не применять по истечении срока годности.

Условия отпуска из аптек

По рецепту

Производитель

ТОО «Эйкос-Фарм», Казахстан, Алматинская область, пос. Боралдай, 71 разъезд.

Владелец регистрационного удостоверения

ТОО «Эйкос-Фарм», Казахстан

Адрес организации, принимающей претензии от потребителей по поводу качества продукции

г.Алматы, ул. Нусупбекова, 32

10-летняя тенденция в Турине, Италия

Редактору,

Инфекция Helicobacter pylori (H. pylori) играет решающую роль в возникновении гастрита и язвенной болезни (ЯБ). На сегодняшний день, несмотря на несколько предложенных схем, ни одна терапия не приводит к 100% эрадикации H. pylori (1). Поскольку на антимикробную активность метронидазола незначительно влияет низкий рН, этот препарат может быть высокоэффективным против H. pylori . Европейская исследовательская группа Helicobacter рекомендовала использовать тройную терапию на основе метронидазола в качестве выбора при лечении H.pylori в зависимости от уровня специфической резистентности в каждом регионе (2). Недавно многоцентровое исследование показало, что в Южной Европе первичная частота резистентности к метронидазолу H. pylori составляла около 30% (3).

В 2002 году мы обнаружили, что в Турине, Северная Италия, тройная терапия метронидазолом, амоксициллином и ингибитором протонной помпы (ИПП) в течение 7 дней или 10 дней позволила добиться эрадикации 73,5% или 71,6% соответственно. Продление лечения не дало никаких преимуществ.Эти значения были значительно ниже по сравнению с теми, о которых сообщалось ранее (4). В последующем исследовании с альтернативными схемами (цефиксим плюс метронидазол) результаты не улучшились (5). Поскольку устойчивость к антибиотикам является развивающимся процессом, необходимо проводить обследования, чтобы ориентироваться в выборе терапии. Таким образом, в 2013 году (с 1 января по 31 декабря) мы проспективно оценили частоту эрадикации 90 005 H. pylori у 90 006 пациентов, ранее не получавших лечения, получавших тройную терапию, включающую стандартную дозу ИПП, амоксициллин 1 г и метронидазол 500 мг дважды. ежедневно.Результаты сравнивали с предыдущим рандомизированным проспективным исследованием, проведенным 10 лет назад по той же схеме (4). Эрадикацию инфекции H. pylori оценивали с помощью 13 C-мочевинного дыхательного теста, проведенного в соответствии с инструкциями поставщика (тест на Helicobacter, INFAI ® , Бохум, Германия). Заявленная чувствительность составляет 97,9%, а специфичность — 98,5%. Образцы анализировали на соотношение 13 C/ 12 C с помощью масс-спектрометра (BreathMAT plus, Finnigan, Бремен, Германия).Результаты выражали как избыток экскреции ð 13 CO 2 на мил: значение >4 дельта на мил считалось положительным. Ни один пациент не получал ИПП или антибиотики за последние 30 дней. Все пациенты дали письменное информированное согласие. Различия в показателях эрадикации были проверены с помощью критерия хи-квадрат (с поправкой Йейтса на непрерывность). Значение p <0,05 считалось значимым. В когорту вошли 66 пациентов (40 мужчин, средний возраст 61,6 года, диапазон от 39 до 62 лет), 39 из них получали схему, включающую 1-недельную тройную терапию (группа I), и 27 получали 10-дневную тройную терапию (группа II). ).У 42 из них ранее был диагностирован ЯБ или гастродуоденальные эрозии, а у остальных — активный гастрит. Общая частота эрадикации H. pylori составила 69,2% (27/39) в группе I и 70% (19/27) в группе II без существенных различий (р=0,96). При сравнении с проспективным исследованием, опубликованным в 2002 г. (4), различий в эффективности терапии не наблюдалось (р=0,81 в течение 7 дней и р=0,95 в течение 10 дней) (). В заключение, в нашей области схема лечения на основе метронидазола H.pylori хотя и неудовлетворительна, но столь же эффективна, как и 10 лет назад.

Таблица 1

Результаты схем эрадикации H. pylori

Метронидазол, омепразол и кларитромицин: эффективная комбинированная терапия инфекции Helicobacter pylori

Задний план: Успешное лечение инфекции Helicobacter pylori приводит к излечению язвенной болезни.Для лечения этой инфекции необходимы многокомпонентные схемы лечения. Мы изучили эффективность и профиль побочных эффектов двух антибиотиков, активных в отношении Helicobacter pylori, метронидазола и кларитромицина в сочетании с омепразолом.

Методы: Мы оценили комбинированную терапию инфекции H. pylori, состоящую из метронидазола (500 мг 2 раза в сутки), омепразола (20 мг 2 раза в сутки) и кларитромицина (250 мг 2 раза в сутки).г) в течение 2 нед, затем ранитидин по 300 мг в сутки в течение 4 нед.

Результаты: Были изучены 33 пациента с подтвержденной инфекцией H. pylori. У 20 пациентов антимикробная терапия ранее была неудачной, в том числе у одного — тройная терапия на основе метронидазола, у восьми — терапия на основе макролидов (у пяти — терапия на основе кларитромицина), а у 11 — амоксициллин, тетрациклин и висмут.Статус H. pylori определяли с помощью гистопатологии с использованием окраски Genta и путем посева. Статус H. pylori определяли при поступлении и через 4 недели после завершения антимикробной терапии. Инфекция H. pylori была излечена у 88% (95% ДИ = 72%-96%), включая 90% тех, у кого предыдущие анти-H. пилори терапии. О легких побочных эффектах сообщили 18%.

Заключение: Мы пришли к выводу, что комбинация метронидазола, омепразола и кларитромицина является эффективным средством лечения H.пилори инфекция.

Высокие дозы против низких доз метронидазолсодержащей терапии для эрадикации Helicobacter pylori

Аннотация

Цель

Целью данного исследования была оценка эффективности высоких доз метронидазола при лечении инфекции Helicobacter pylori ( H . pylori ).

Методы

Исследования были найдены в базах данных (Pubmed, Embase, Cochrane Library, ClinicalTrials.gov) выполняли поиск с января 1990 г. по сентябрь 2017 г., используя набор ключевых слов. Мы включили рандомизированные контролируемые испытания (РКИ) лечения H. pylori, в которых сравнивали лечение высокими и низкими дозами метронидазола (высокие и низкие дозы терапии). Два рецензента независимо друг от друга отобрали исследования, извлекли соответствующие данные и оценили качество исследования. Метаанализ был выполнен с использованием Review Manager 5.3. Дихотомические данные были объединены для получения относительного риска (ОР) частоты эрадикации с 95% доверительными интервалами (ДИ).

Результаты

Четыре рандомизированных контролируемых исследования, в общей сложности 612 пациентов с диагнозом H . Было включено инфекций pylori . В целом мета-анализ показал, что как высокодозовая, так и низкодозовая терапия обеспечивают одинаковую эффективность в плане эрадикации при назначении лечения (ITT) 82% против 76%, ОР 1,12 (95% ДИ: от 0,96 до 1,30), P = 0,15 и приверженность 94% против 94%, ОР 1,00 (95% ДИ: 0,97 до 1,04), P = 0,81, но побочные эффекты были более вероятны при терапии высокими дозами [32% против17%, RR 1,84 (95% ДИ: от 1,17 до 2,88), P = 0,008]. При анализе подгрупп повышение дозы метронидазола повышало показатели эрадикации в районах с высокой резистентностью к метронидазолу [74% против 52%, ОР 1,40 (95% ДИ: 1,08–1,82), P = 0,01] и у лиц с резистентными к метронидазолу штаммами. 71% против 46%, RR 1,50 (95% ДИ: от 1,02 до 2,19), P = 0,04].

Выводы

Терапия как высокими, так и низкими дозами может обеспечить одинаковую скорость эрадикации и соблюдение режима лечения, и, как правило, терапия низкими дозами вызывает меньше побочных эффектов.В популяциях с высокой резистентностью к метронидазолу высокие дозы метронидазола могут увеличить скорость эрадикации H . Инфекция pylori .

Образец цитирования: Ji Y, Lu H (2018) Мета-анализ: терапия высокими дозами и низкими дозами метронидазола для эрадикационной терапии Helicobacter pylori . ПЛОС ОДИН 13(1): e0189888. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0189888

Редактор: John Green, University Hospital Llandough, СОЕДИНЕННОЕ КОРОЛЕВСТВО

Получено: 20 сентября 2017 г.; Принято: 4 декабря 2017 г .; Опубликовано: 25 января 2018 г.

Copyright: © 2018 Ji, Lu.Это статья с открытым доступом, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.

Доступность данных: Все соответствующие данные находятся в документе и в его файлах вспомогательной информации.

Финансирование: Это исследование финансировалось Национальным фондом естественных наук Китая (81170355 и 81370592) и Центром клинических исследований Школы медицины Шанхайского университета Цзяо Тонг, URL: http://www.nsfc.gov.cn/. Спонсоры не участвовали в разработке исследования, сборе и анализе данных, принятии решения о публикации или подготовке рукописи.

Конкурирующие интересы: Авторы заявили об отсутствии конкурирующих интересов.

Введение

Терапия либо ингибиторами протонной помпы (ИПП), либо коллоидным субцитратом висмута (CBS) плюс два антибиотика (метронидазол, тетрациклин, амоксициллин, кларитромицин, левофлоксацин или рифабутин) использовалась в качестве эффективных и экономичных терапевтических режимов для лечения Helicobacter pylori ( Х . pylori ) инфекций [1, 2]. Тем не менее, согласно недавнему руководству Маастрихтского V/Флоренского консенсусного отчета [3], увеличение H . Устойчивость pylori к антибиотикам [4–9], особенно к кларитромицину, левофлоксацину и метронидазолу, снижает эффективность тройной терапии, содержащей эти препараты. Сопротивление варьируется от страны к стране; для большинства развитых стран [5, 10] устойчивость к кларитромицину достигла высокого уровня (15–40%), в то время как устойчивость к метронидазолу остается на более низком уровне (<40%).В большинстве развивающихся стран устойчивость к метронидазолу может достигать 60% и более [6, 11]. Лица, ранее принимавшие кларитромицин и/или метронидазол, также подвержены высокому риску устойчивости к антибиотикам, независимо от ожиданий их населения [3].

Для повышения скорости искоренения H . pylori , было проведено несколько исследований для изучения альтернативных стратегий повышения эффективности, например, путем увеличения продолжительности лечения до 14 дней [12], использования последовательной терапии вместо непрерывной терапии [13], использования высоких доз или нового поколения ИПП [14, 15], с использованием адаптированной терапии вместо эмпирически выбранного лечения [16] и с использованием висмутсодержащих квадротерапии [17, 18]. Тем не менее, нет мета-анализа, сообщающего, может ли увеличение дозы метронидазола увеличить скорость эрадикации H . пилори . В настоящее время имеется несколько публикаций об исследованиях, оценивающих роль высоких доз метронидазола в H . Лечение pylori , а также побочные эффекты и их заключение противоречивы [19–22]. Поэтому мы провели метаанализ для сравнения терапии метронидазолом в высоких дозах (высокодозовая терапия) с терапией, содержащей метронидазол в низких дозах (низкодозовая терапия) не только в отношении терапевтической эффективности, но также в отношении приверженности и побочных эффектов. эффекты во время процедур.

Методы

Поиск литературы

Систематический обзор доказательств был проведен в сентябре 2017 г., включая период с января 1990 г. по сентябрь 2017 г. Поиск в электронных базах данных PubMed, Embase и Cochrane Library проводился с помощью комбинации ряда логических ключевых слов и текстовых слов, связанных с Helicobacter pylori, метронидазол, терапия и рандомизированные контролируемые исследования (РКИ) (файл S2). Ссылки на самые последние руководства были определены вручную [3].Кроме того, мы также провели ручной поиск на следующем веб-сайте для получения неопубликованных и текущих исследований: ClinicalTrails.gov (http://www.clinicaltrails.gov/).

Отбор исследований и критерии приемлемости

После объединения результатов поиска из разных баз данных и удаления дубликатов с помощью диспетчера ссылок EndNote два исследователя (Инцзе Цзи и Хун Лу) независимо друг от друга просмотрели все извлеченные рефераты и полные тексты, чтобы удалить недопустимые исследования. Если возникали какие-либо разногласия, они решались путем консультаций и обсуждений с другим исследователем до тех пор, пока разногласие не было разрешено.Критериями включения статей в метаанализ были: (1) статьи или рефераты должны сообщать о результатах сравнительных рандомизированных исследований; (2) исследования должны были включать, по крайней мере, две ветви лечения, сравнивающие низкую дозу метронидазола с более высокой дозой при аналогичной терапии; (3) терапия должна включать комбинацию ИПП или CBS, метронидазола и либо тетрациклина, либо амоксициллина в течение не менее 7 дней; (4) Н . Инфекция pylori должна была быть определена с помощью биопсии и/или уреазного дыхательного теста (УДТ) до начала лечения; (5) эрадикацию необходимо было оценивать с помощью биопсии и/или УДТ не менее чем через 4 недели после окончания лечения [23]; (6) исследования должны были сообщать о результатах эрадикации и побочных эффектах пациентов.Для каждой выбранной публикации были извлечены следующие данные: год публикации, область, дизайн исследования, характеристики пациентов (опыт лечения), количество пациентов в каждой группе лечения, схема приема лекарств, продолжительность лечения, тесты, использованные для подтверждения H . pylori инфекция и эрадикация инфекции, число больных, у которых H . Инфекция pylori была успешно эрадикирована [анализы намерения лечить (ITT) и согласно протоколу (PP)], количество пациентов, прекративших терапию из-за побочных эффектов, и количество пациентов с побочными эффектами, как определено в каждом включенном исследовании. .

Оценка качества

Два исследователя (Инцзе Цзи и Хун Лу) независимо друг от друга оценили методологическое качество включенных исследований, используя модифицированную шкалу Джадада [24], шкалу от 0 до 7 в соответствии с описаниями рандомизации (0–2 балла), сокрытия распределение (0–2 балла), слепой метод (0–2 балла) и сообщение об исключении пациентов (0–1 балл), в котором баллы присуждаются, если: исследование описано как рандомизированное (+1) и двойное слепое (+ 1) с сокрытием выделения (+1), способ которого подробно описан надлежащим образом (+1 за каждый пункт, указанный выше) и имеется описание изъятий с указанием количества и причины в обеих группах (+1).Оценки от 1 до 3 считались низким качеством, а от 4 до 7 – высоким качеством. Расхождения в толковании были устранены путем консенсуса.

Показатели результатов

Основная цель этого исследования состояла в том, чтобы сравнить эффективность H . эрадикация pylori (показатели эрадикации ITT и PP), приверженность лечению и частота побочных эффектов терапии высокими дозами по сравнению с терапией низкими дозами. Анализы подгрупп проводились для оценки: (1) эффективности терапии в районах с различной резистентностью к метронидазолу; (2) эффективность терапии штаммов, устойчивых и чувствительных к метронидазолу; (3) побочные эффекты и приверженность терапии на показатели эрадикации.

Статистический анализ

Результаты исследований были проанализированы с использованием программного обеспечения RevMan версии 5.3 (The Nordic Cochrane Centre, The Cochrane Collaboration, Копенгаген, 2014 г.). Для оценки неоднородности между объединенными исследованиями мы использовали как критерий Chi 2 (χ2) [p-значение (P) менее 0,10 указывает на значительную неоднородность], так и статистику индекса несогласованности (I 2 ) (значение менее 40). % представляет низкую неоднородность, а значение 75% и более указывает на высокую неоднородность) [25].Статистическую неоднородность измеряли с помощью анализа чувствительности, чтобы проиллюстрировать, была ли какая-либо клиническая неоднородность причиной такой статистической разницы. Мы провели не только ITT-анализ, но и PP-анализ для оценки клинических исходов. Мы суммировали дихотомические показатели исхода как относительный риск (ОР) вместе с 95% доверительными интервалами (95% ДИ) по RevMan 5.3. Результаты были объединены с использованием модели случайных эффектов. Все P<0,05 считались статистически значимыми.

Результаты

Характеристики и методология исследования

Поиск в электронных базах данных и других источниках в сентябре 2017 года дал 2896 исследований.После объединения результатов, удаления дубликатов и отбора по названию и аннотации осталось 19 полнотекстовых исследований. Пятнадцать исследований были исключены после просмотра полного текста. Семь были исключены, потому что они не были РКИ [26–32], восемь были исключены, потому что они не сравнивали лечение высокими и низкими дозами [33–40]. После рассмотрения потенциально полезных для анализа тезисов четыре исследования, включающие 612 пациентов, без систематической ошибки публикации (критерий Эггера, P = 0,563, критерий Бегга, P = 0. 734), наконец, выполнили критерии включения и были включены в этот метаанализ (рис. 1) [19–22]. График воронки этих следов показан на рис. S1. Эти испытания были опубликованы в период с 1999 по 2006 год (таблицы 1 и 2).

Среди них 297 пациентов получали лечение высокими дозами, тогда как 315 получали лечение более низкими дозами. Что касается областей, то два исследования были проведены в Иране [19, 20], два других — в Европе [21] и Японии [22]. Что касается продолжительности, на два исследования было отведено 7 дней [21, 22], а на два других — 14 дней [19, 20].Вкратце, одно из них сравнило метронидазол 250 мг три раза в день (три раза в день) с метронидазолом 125 мг три раза в день [19], одно метронидазол 800 мг два раза в день (дважды в день) с метронидазолом 300 мг два раза в день [21], другое метронидазол 500 мг три раза в день. к метронидазолу 250 мг 3 раза в день [20] и один метронидазол 250 мг 3 раза в день к метронидазолу 250 мг 2 раза в день [22]. В одном исследовании использовалась комбинация CBS, тетрациклина и метронидазола [19], в трех других — ИПП (омепразол 20 мг 2 раза в сутки, лансопразол 30 мг 2 раза в сутки или рабепразол 10 мг 2 раза в сутки), кларитромицин и метронидазол [20–22]. Эрадикацию проверяли с помощью UBT или эндоскопии [быстрый уреазный тест (RUT), гистология и посев] по крайней мере через 4 недели после лечения. Два исследования показали значительное улучшение показателей эрадикации при использовании высокодозной терапии [19, 20], в то время как еще два не показали различий в показателях эрадикации [21, 22]. Методологическая оценка качества (табл. 3) показала, что два исследования относятся к низкому качеству (3 балла) [19, 21] и два исследования относятся к высокому качеству (4 или 5 баллов) [20, 22].

Показатели эрадикации высоких инизкодозная терапия

Шестьсот двенадцать пациентов были включены в ITT-анализ, частота эрадикации высокодозной терапии составила 82% (245/297, 95% ДИ: 78–87%) по сравнению с 76% (238/315, 95% ДИ). : 71%-80%) при терапии низкими дозами (увеличение уровня эрадикации на 7%, 95% ДИ: 3%-11%). При объединении показателей эрадикации ИТТ в четырех исследованиях тест на гетерогенность оказался положительным (χ 2 = 7,93, P = 0,05, I 2 = 62%), поэтому использовалась модель случайных эффектов. ОР для лечения инфекции высокодозной терапией составил 1.12 (95% ДИ: 0,96–1,30, P = 0,15). График Форреста для ITT-анализа показан на рис. 2. Воронкообразный график не показал признаков предвзятости публикации.

В PP-анализе участвовали пятьсот семьдесят семь пациентов. Уровень эрадикации составил 85% (237/279, 95% ДИ: 81–89%) при терапии высокими дозами против 79% (236/298, 95% ДИ: 75–84%) при терапии низкими дозами. терапии (увеличение уровня эрадикации на 6%, 95% ДИ: 2–10%). Тест на неоднородность оказался положительным (χ 2 = 9,36, P = 0,02, I 2 = 68%).Модель случайных эффектов использовалась для анализа показателей эрадикации ПП. RR для уничтожения H . Инфицирование pylori при лечении высокими дозами составило 1,11 (95% ДИ: 0,95–1,29, P = 0,21), при этом на воронкообразной диаграмме не было отражено систематической ошибки публикации. График Форреста для анализа PP показан на рис. 3.

Анализ чувствительности

Мы провели анализ чувствительности, из которого исключали по одному исследованию за раз. Анализы чувствительности не изменили ни направления, ни статистической значимости любого из ОР, ни уровня неоднородности ни в одном из анализов, что было связано с недостаточным размером выборки всех включенных публикаций.

Показатели эрадикации в районах с высокой и низкой резистентностью к метронидазолу

В двух исследованиях, включавших 480 пациентов, сравнивали показатели эрадикации в регионах с низкой резистентностью к метронидазолу (34,9% в Европе [8] и 5–12% в Японии [41]) [21, 22]. -дозовая терапия 85% (197/232, 95%ДИ: 80%-90%) и низкодозовая терапия 82% (203/248, 95%ДИ: 77%-87%). RR составил 1,03 (95% ДИ: 0,94–1,13, P = 0,51) с отрицательной гетерогенностью (χ 2 = 1.39, P = 0,24, I 2 = 28%). В то время как в двух других исследованиях в регионах с высокой устойчивостью к метронидазолу (61,6% в Иране [6]) [19, 20] частота эрадикации при терапии высокими дозами составила 74% (48/68, 95% ДИ: 63%-85). %) по сравнению с 52% (35/67, 95% ДИ: 40%-64%) низкодозной терапии (увеличение уровня эрадикации на 22%, 95% ДИ: 11%-32%). RR был 1,40 (95% ДИ: 1,08–1,82, P = 0,01), а тесты на гетерогенность были отрицательными (χ 2 = 0,55, P = 0,46, I 2 = 0%). График Форреста для подгруппового анализа различных показателей эрадикации в разных районах показан на рис. 4.

Рис. 4. Лесной график скорости эрадикации H. pylori при терапии высокими дозами по сравнению с терапией низкими дозами в районах с высокой и низкой резистентностью к метронидазолу.

A. Сравнение высокодозной терапии с низкодозовой терапией в регионах с низкой резистентностью к метронидазолу. B. Сравнение высокодозной терапии с низкодозовой терапией в регионах с высокой резистентностью к метронидазолу.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0189888.g004

Показатели эрадикации у резистентных к метронидазолу по сравнению свосприимчивые штаммы

В двух исследованиях сообщалось о различных скоростях эрадикации штаммов, устойчивых к метронидазолу, и штаммов, чувствительных к метронидазолу [19, 21], тестирование методом разведения в агаре и минимальная ингибирующая концентрация 8 мг/л считалась пороговой [42]. Показатели эрадикации устойчивых к метронидазолу штаммов при терапии высокими дозами составили 71% (27/38, 95% ДИ: 57–85%), что выше, чем при терапии низкими дозами 46% (19/38). 41, 95% ДИ: 31–62 %), (увеличение частоты эрадикации на 25 %, 95 % ДИ: 10–39 %).RR составил 1,50 (95% ДИ: 1,02–2,19, P = 0,04) с отрицательной гетерогенностью (χ 2 = 0,11, P = 0,74, I 2 = 0%).

Еще у двухсот шестидесяти четырех пациентов обнаружены штаммы, чувствительные к метронидазолу. Частота эрадикации пятен, чувствительных к метронидазолу, при терапии высокими дозами составила 82% (110/134, 95% ДИ: 76–89%), что было аналогично таковому при терапии низкими дозами — 75% (98/130). , 95%ДИ: 68%-83%). RR составил 1,16 (95% ДИ: 0,84–1,61, P = 0,38) с положительной гетерогенностью (χ 2 = 2.37, P = 0,12, I 2 = 58%). График Форреста анализа подгрупп для этой разницы показан на рис. 5.

Рис. 5. Лесная диаграмма скорости эрадикации H. pylori при терапии высокими дозами по сравнению с терапией низкими дозами у резистентных к метронидазолу и восприимчивых людей.

A. Сравнение терапии высокими дозами с терапией низкими дозами у людей, устойчивых к метронидазолу. B. Сравнение терапии высокими дозами с терапией низкими дозами у людей, чувствительных к метронидазолу.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0189888.g005

Приверженность и побочные эффекты

Приверженность к лечению оценивалась во всех четырех включенных исследованиях. Обе терапии продемонстрировали высокую приверженность: 94% (279/297, 95% ДИ: 92–97%) для высокодозной терапии и 94% (298/315, 95% ДИ: 92–97%) для малодозовой терапии. ОР составил 1,00 (95% ДИ: 0,97–1,04, P = 0,81), в метаанализе не наблюдалось существенной разницы, а гетерогенность среди исследований была отрицательной (χ 2 = 1.20, P = 0,75, I 2 = 0%). График Форреста приверженности каждой группы показан на рис. 6.

Всего в двух исследованиях описано общее количество случаев побочных эффектов [20, 22]; терапия высокими дозами увеличивала риск побочных эффектов (RR = 1,84, 95% ДИ: 1,17–2,88, P = 0,008). Общая частота побочных эффектов составила 32 % (39/123, 95 % ДИ: 23–40 %) для терапии высокими дозами и 17 % (24/140, 95 % ДИ: 11–23 %) для низкодозовой терапии. дозы терапии (15% увеличение скорости эрадикации, 95% ДИ: 6%-23%). Но в метаанализе не наблюдалось значительной гетерогенности (χ 2 = 0.72, P = 0,39, I 2 = 0%). График Форреста для всех побочных эффектов показан на рис. 7.

Подробная информация о каждом побочном эффекте показана на рис. S2. Сухость во рту была наиболее частым побочным эффектом при лечении как высокими дозами (47%), так и низкими дозами (43%). Другие, такие как мягкий стул или диарея (27% против 19%), одинофагия (14% против 13%), боль в животе или нарушение вкуса (10% против 6%), тошнота (9% против 6%) и головная боль. (8% против 6%), как правило, часто появлялись во время лечения.Кроме того, побочные эффекты, такие как нарушение функции печени (т.е. повышение активности аланинтрансаминазы [АЛТ] и/или аспартатаминотрансферазы [АСТ] в сыворотке [43]) (7% против 6%), кожная сыпь (3% против 1%) , гольссит (1 % против 0 %) и запор (0 % против 2 %) редко наблюдались у пациентов, получавших терапию как высокими, так и низкими дозами.

Обсуждение

Краткое изложение доказательств

В течение последних 30 лет стандарт H . Схема лечения pylori , включающая ИПП и/или висмут плюс кларитромицин и амоксициллин или метронидазол, часто рассматривалась как лечение первого выбора для эрадикации H . pylori [44, 45]. Однако из-за повышения первичной резистентности к этим антибиотикам показатели эрадикации в целом снизились до неприемлемого уровня [46, 47], особенно для штаммов, устойчивых к кларитромицину и метронидазолу. Это побудило некоторых исследователей найти новые способы повышения показателей эрадикации, например, за счет увеличения дозы метронидазола.

Этот метаанализ включал четыре проспективных РКИ с участием 612 пациентов (297 пациентов, получавших лечение высокими дозами, и 315 пациентов, получавших лечение низкими дозами).Показатели эрадикации (ITT, 82% против 76%, P = 0,15; PP, 85% против 79%, P = 0,21) и приверженность (94% против 95%, P = 0,81) существенно не различались между этими группами. две группы. Эти данные свидетельствуют о том, что режимы как с высокой, так и с низкой дозой метронидазола можно считать одинаково эффективными. Однако высокие дозы метронидазола приводили к большему количеству нежелательных явлений, чем в группах с низкими дозами (32% против 17%, P = 0,008). Анализ подгрупп показал, что показатели эрадикации в этих группах, как правило, сходны (ITT, 85% против82%, P = 0,51) в таких регионах, как Европа или Япония [21, 22], где устойчивость к метронидазолу была ниже. Напротив, показатели эрадикации ITT при терапии высокими дозами были выше, чем при терапии низкими дозами (74% против 52%, P = 0,01) в таких регионах, как Иран, где распространенность устойчивых к метронидазолу штаммов выше. . Кроме того, результаты настоящих исследований показали, что уровень эрадикации высокодозной терапии в Иране составляет 74%, что ниже, чем в Европе и Японии. Таким образом, мы предполагаем, что в районах с высокой устойчивостью к метронидазолу более высокие дозы метронидазола будут способствовать более высокой скорости эрадикации, чем низкие дозы, в то время как в районах с низкой устойчивостью к метронидазолу низкие дозы метронидазола также могут обеспечить высокие показатели эрадикации.

Устойчивость к антибиотикам считается одной из основных причин неудач эрадикации [48, 49]. Таким образом, перед лечением важно провести тест на чувствительность к противомикробным препаратам. В двух из наших включенных исследований с участием 343 пациентов был проведен тест на чувствительность к противомикробным препаратам [19, 21]. В подгруппе резистентных к метронидазолу (79 штаммов) мы обнаружили, что терапия высокими дозами достигла более высокой степени эрадикации, чем низкодозовая (71% против 46%, P = 0,04), с очевидной статистической значимостью.Но для подгруппы, чувствительной к метронидазолу (264 штамма), показатели эрадикации оказались более схожими между двумя группами (82% против 75%, P = 0,38). Результаты показывают, что высокая доза метронидазола может частично преодолеть резистентность к метронидазолу и достичь более высокой скорости эрадикации, особенно в районах с высокой резистентностью к метронидазолу или у лиц, которые ранее принимали метронидазол без теста на чувствительность к противомикробным препаратам.

Приверженность также является одним из факторов, определяющих эффективность эрадикационной терапии [50].В целом, между обеими группами не было различий (94% против 95%, P = 0,81), поскольку во всех четырех исследованиях у пациентов наблюдалась хорошая приверженность лечению (>94%). Однако наш мета-анализ показал, что терапия высокими дозами вызывает более высокую частоту побочных эффектов, чем терапия низкими дозами (общее количество событий, 32% против 17%, P = 0,008). Хотя побочные эффекты чаще проявляются при терапии высокими дозами, не было различий в приверженности обеих групп, что означает, что пациенты, применяющие высокие дозы метронидазола, могут переносить все упомянутые выше побочные эффекты, а также могут пройти весь курс терапии. лечение.

Сильные стороны и ограничения

Чтобы уменьшить систематическую ошибку, выбор исследования, извлечение данных и оценка качества исследования выполнялись двумя рецензентами по отдельности. Мы всесторонне проанализировали эффективность высокодозной терапии. Чувствительный анализ помог сделать результаты нашего метаанализа надежными, а анализ подгрупп помог нам изучить влияние высоких доз метронидазола на популяцию с различной устойчивостью к антибиотикам.

Наш метаанализ также имел несколько потенциальных ограничений.Во-первых, некоторые хорошо спланированные исследования были исключены, поскольку они не были опубликованы на английском языке. Во-вторых, размер выборки был небольшим, так как в наш метаанализ было включено всего 4 РКИ. Хотя исследования проводились в разных географических точках, включая Европу, Ближний Восток и Азию, результаты могли бы быть более убедительными, если бы было проанализировано больше РКИ. В-третьих, предвзятость публикаций могла повлиять на достоверность наших выводов, например, отсутствие двойного ослепления. В-четвертых, отдельные исследования, включенные в наш анализ, различались по нескольким параметрам, таким как критерии включения и исключения, разные ИПП, продолжительность и комбинированные антибиотики. Кроме того, необходимы крупномасштабные рандомизированные контролируемые исследования для сравнения терапевтической эффективности высоких и низких доз терапии.

Выводы

Таким образом, в некоторых регионах терапия низкими дозами метронидазола может обеспечить хорошие показатели эрадикации, хорошую приверженность и меньшее количество побочных эффектов. Но в районах с высокой резистентностью к метронидазолу или у лиц, которые ранее принимали метронидазол без теста на чувствительность к противомикробным препаратам, увеличение дозы метронидазола может частично преодолеть резистентность и привести к более высоким показателям эрадикации, чем использование низких доз терапии с той же приверженностью.

Благодарности

Мы хотели бы поблагодарить Национальный фонд естественных наук Китая (81170355 и 81370592) и Центр клинических исследований Медицинской школы Шанхайского университета Цзяо Тонг за финансирование нашего исследования.

Каталожные номера

  1. 1. Де Бур В.А., Титгат Г.Н. Лучшая терапия инфекции Helicobacter pylori: должен ли наш выбор определяться эффективностью или профилем побочных эффектов? Скандинавский журнал гастроэнтерологии. 1995;30(5):401–7.Эпб 1995/05/01. пмид: 7638563.
  2. 2. Suzuki H, Nishizawa T, Hibi T. Эрадикационная терапия Helicobacter pylori. Будущая микробиология. 2010;5(4):639–48. Эпб 2010/04/01. пмид: 20353303.
  3. 3. Malfertheiner P, Megraud F, O’Morain CA, Gisbert JP, Kuipers EJ, Axon AT, et al. Ведение инфекции Helicobacter pylori — Консенсусный отчет Maastricht V/Florence. Кишка. 2017;66(1):6–30. Эпб 2016/11/02. пмид: 27707777.
  4. 4. Кобаяши И., Мураками К., Като М., Като С., Адзума Т., Такахаши С. и др.Изменение эпидемиологии чувствительности штаммов Helicobacter pylori к противомикробным препаратам в Японии в период с 2002 по 2005 год. Журнал клинической микробиологии. 2007;45(12):4006–10. Эпублик 19.10.2007. пмид: 17942652.
  5. 5. Lee JW, Kim N, Kim JM, Nam RH, Chang H, Kim JY и др. Распространенность первичной и вторичной устойчивости Helicobacter pylori к противомикробным препаратам в Корее с 2003 по 2012 год. Helicobacter. 2013;18(3):206–14. Эпублик 18.12.2012. пмид: 23241101.
  6. 6. Хадеми Ф., Пурсина Ф., Хоссейни Э., Акбари М., Сафаи Х.Г.Helicobacter pylori в Иране: систематический обзор устойчивости к антибиотикам. Иранский журнал фундаментальных медицинских наук. 2015;18(1):2–7. Эпб 2015/03/27. пмид: 25810869.
  7. 7. Караманолис Г.П., Дайкос Г.Л., Ксурис Д., Гукос Д., Делладетсима И., Ладас С.Д. Эволюция устойчивости Helicobacter pylori к антибиотикам за 10 лет в Греции. пищеварение. 2014;90(4):229–31. Эпублик 23.12.2014. пмид: 25531953.
  8. 8. Меграуд Ф., Коенен С., Верспортен А., Кист М., Лопес-Бреа М., Хиршл А.М. и др.Устойчивость Helicobacter pylori к антибиотикам в Европе и ее связь с потреблением антибиотиков. Кишка. 2013;62(1):34–42. Эпб 2012/05/15. пмид: 22580412.
  9. 9. Боянова Л., Гергова Г., Евстатьев И., Спасова З., Кандиларов Н., Янева П. и др. Устойчивость Helicobacter pylori к шести антибиотикам по двум системам контрольных точек и эволюция устойчивости в Болгарии. Инфекционные болезни (Лондон, Англия). 2016;48(1):56–62. Эпублик 2015/10/16. пмид: 26465202.
  10. 10. Шиота С., Редди Р., Альсаррадж А., Эль-Сераг Х.Б., Грэм Д.Ю.Антибиотикорезистентность Helicobacter pylori среди мужчин-ветеранов США. Клиническая гастроэнтерология и гепатология: официальный журнал клинической практики Американской гастроэнтерологической ассоциации. 2015;13(9):1616–24. Эпб 2015/02/15. пмид: 25681693.
  11. 11. Liu WZ, Xie Y, Cheng H, Lu NH, Hu FL, Zhang WD и другие. Четвертый китайский национальный консенсус по лечению инфекции Helicobacter pylori. Журнал болезней органов пищеварения. 2013;14(5):211–21. Эпублик 2013/01/11.пмид: 23302262.
  12. 12. Юань Ю., Форд А. С., Хан К.Дж., Гисберт Дж.П., Форман Д., Леонтиадис Г.И. и др. Оптимальная продолжительность схем эрадикации Helicobacter pylori. Кокрановская база данных систематических обзоров. 2013;(12):Cd008337. Эпублик 18.12.2013. пмид: 24338763.
  13. 13. Liou JM, Chen CC, Lee YC, Chang CY, Wu JY, Bair MJ и др. Систематический обзор с метаанализом: 10- или 14-дневная последовательная терапия по сравнению с 14-дневной тройной терапией в первой линии лечения инфекции Helicobacter pylori.Пищевая фармакология и терапия. 2016;43(4):470–81. Эпублик 17.12.2015. пмид: 26669729.
  14. 14. Villoria A, Garcia P, Calvet X, Gisbert JP, Vergara M. Мета-анализ: высокие дозы ингибиторов протонной помпы по сравнению со стандартной дозой в тройной терапии для эрадикации Helicobacter pylori. Пищевая фармакология и терапия. 2008;28(7):868–77. Эпб 2008/07/23. пмид: 18644011.
  15. 15. Xin Y, Manson J, Govan L, Harbour R, Bennison J, Watson E, et al. Фармакологические схемы эрадикации Helicobacter pylori: обзор систематических обзоров и сетевого метаанализа. БМК гастроэнтерология. 2016;16(1):80. Эпаб 2016/07/28. пмид: 27460211.
  16. 16. Chen H, Dang Y, Zhou X, Liu B, Liu S, Zhang G. Индивидуальная терапия в сравнении с эмпирически выбранным лечением эрадикации Helicobacter pylori: метаанализ. Медицина. 2016;95(7):e2750. Эпб 2016/02/18. пмид: 26886617.
  17. 17. Лютер Дж., Хиггинс П.Д., Шенфельд П.С., Моайеди П., Вакил Н., Чей В.Д. Эмпирическая четырехкомпонентная и тройная терапия для первичного лечения инфекции Helicobacter pylori: систематический обзор и метаанализ эффективности и переносимости.Американский журнал гастроэнтерологии. 2010;105(1):65–73. Эпб 2009/09/17. пмид: 19755966.
  18. 18. Марин А.С., МакНичолл А.Г., Гисберт Дж.П. Обзор схем спасения после неудачной тройной терапии, содержащей кларитромицин (для эрадикации Helicobacter pylori). Экспертное мнение о фармакотерапии. 2013;14(7):843–61. Эпб 2013/03/30. пмид: 23537368.
  19. 19. Roghani HS, Massarrat S, Pahlewanzadeh MR, Dashti M. Влияние двух разных доз метронидазола и тетрациклина в тройной терапии висмута на уничтожение Helicobacter pylori и его устойчивых штаммов.Европейский журнал гастроэнтерологии и гепатологии. 1999;11(7):709–12. Эпубликовано 13 августа 1999 г. пмид:10445787.
  20. 20. Fattahi E, Motamedi R, Nayebi AR, Rezazadeh H, Shakir A. Тройная терапия с использованием двух доз метронидазола вместе с амоксициллином и омепразолом для искоренения инфекции Helicobacter pylori: рандомизированное открытое исследование. Индийский журнал гастроэнтерологии: официальный журнал Индийского общества гастроэнтерологии. 2004;23(4):154. Эпублик 31.08.2004. пмид: 15333981.
  21. 21.Bardhan K, Bayerdorffer E, Veldhuyzen Van Zanten SJ, Lind T, Megraud F, Delchier JC, et al. Исследование HOMER: влияние увеличения дозы метронидазола в сочетании с омепразолом и амоксициллином на лечение инфекции Helicobacter pylori. Хеликобактер. 2000;5(4):196–201. Эпб 2001/02/17. пмид:11179983.
  22. 22. Мацухиса Т. , Каваи Т., Масаока Т., Судзуки Х., Ито М., Кавамура Ю. и др. Эффективность метронидазола в качестве препарата второй линии для лечения инфекции Helicobacter pylori у населения Японии: многоцентровое исследование в столичном районе Токио.Хеликобактер. 2006;11(3):152–8. Эпублик от 11 мая 2006 г. пмид: 16684262.
  23. 23. Нил Г.А., Сухауэр Л.Дж., Ронка П.Д., Скоглунд М.Л. Время оценки эрадикации Helicobacter pylori после лечения. Хеликобактер. 1997;2(1):13–20. Эпб 1997/03/01. пмид:9432316.
  24. 24. Шривастава А. Эндоскопическое лечение в сравнении с эндоскопическим и фармакологическим лечением острого варикозного кровотечения: метаанализ. Индийский журнал гастроэнтерологии: официальный журнал Индийского общества гастроэнтерологии.2002;21(4):169. Эпублик 19.10.2002. пмид:12385561.
  25. 25. Хиггинс Дж.П., Томпсон С.Г., Дикс Дж.Дж., Альтман Д.Г. Измерение несогласованности в мета-анализах. BMJ (Клинические исследования под ред.). 2003;327(7414):557–60. Эпб 2003/09/06. пмид:12958120; Центральный PMCID PubMed: PMCPmc192859.
  26. 26. Лахай Р., Фарли А., Даллер С., Аршамбо А., Фаллоне К.А., Понич Т. и др. Квадротерапия на основе висмута с субцитратом висмута, метронидазолом, тетрациклином и омепразолом для эрадикации Helicobacter pylori.Канадский журнал гастроэнтерологии = Journal canadien de gastroenterologie. 2001;15(9):581–5. Эпублик 27 сентября 2001 г. пмид:11573100.
  27. 27. Сьерра Ф., Фореро Д.Д., Рей М., Ботеро М.Л., Карденас А. Пилотное исследование: разные виды терапии очень успешны для эрадикации Helicobacter pylori. Пищевая фармакология и терапия. 2013;37(12):1165–71. Эпублик 2013/05/10. пмид: 23656465.
  28. 28. Санчес-Дельгадо Дж., Гарсия-Иглесиас П., Кастро-Фернандес М., Бори Ф., Баренис М., Буханда Л. и др.Тройная терапия высокими дозами эзомепразола, амоксициллина и метронидазола в течение десяти дней обеспечивает высокие показатели эрадикации Helicobacter pylori. Пищевая фармакология и терапия. 2012;36(2):190–6. Эпб 2012/05/18. пмид: 225.
  29. 29. Дзенишевский Дж., Ярош М. Руководство по лечению инфекции Helicobacter pylori. Журнал физиологии и фармакологии: официальный журнал Польского физиологического общества. 2006; 57 Приложение 3: 143–54. Эпублик 13.10.2006. пмид: 17033112.
  30. 30. Симояма Т., Фукуда С., Миками Т., Фукуши М., Мунаката А. Эффективность метронидазола для лечения устойчивых к кларитромицину инфекций Helicobacter pylori у населения Японии. Журнал гастроэнтерологии. 2004;39(10):927–30. Эпублик 19.11.2004. пмид: 15549444.
  31. 31. Доре М.П., ​​Маррас Л., Марагкудакис Э., Ниедду С., Манка А., Грэм Д.Ю. и др. Терапия спасения после двух или более предыдущих неудач лечения Helicobacter pylori: режим суперспасения.Хеликобактер. 2003;8(4):307–9. Эпб 2003/09/03. пмид: 12950603.
  32. 32. Фрейзер А.Г., Мур Л., Али М.Р., Чуа Л.Е., Холлис Б., Литтл С.В. Аудит тройной терапии низкими дозами для эрадикации Helicobacter pylori. Медицинский журнал Новой Зеландии. 1996;109(1027):290–2. Эпб 1996/08/09. пмид:8773671.
  33. 33. Bayerdorffer E, Lonovics J, Dite P, Diete U, Domjan L, Kisfalvi I, et al. Эффективность двух различных режимов дозирования омепразола, амоксициллина и метронидазола для лечения инфекции Helicobacter pylori.Пищевая фармакология и терапия. 1999;13(12):1639–45. Эпублик 14 декабря 1999 г. пмид:10594399.
  34. 34. Suarez MS, Gonzalez Cansino J, Velasco Ilizalde C, Sabatier CA, Castillo Hernandez J. Три схемы лечения коллоидным субцитратом висмута (Q-ULCER) при язвенной болезни с Helicobacter pylori. Архив медицинских исследований. 1999;30(1):55–9. Эпубликовано 11 марта 1999 г. пмид:10071426.
  35. 35. Хо Дж., Чон С.В., Чон Дж.Т., Квон Дж.Г., Ким Э.Й., Ли Д.В. и др. Рандомизированное клиническое исследование 10-дневной сопутствующей терапии и стандартной тройной терапии для эрадикации Helicobacter pylori.Заболевания органов пищеварения и печени: официальный журнал Итальянского общества гастроэнтерологов и Итальянской ассоциации изучения печени. 2014;46(11):980–4. Эпб 2014/08/19. пмид: 25132282.
  36. 36. Matougui N, Boudjella ML, Mouffok F, Bouhadef A, Guechi Z, Bouzid K и др., редакторы. Эрадикация H. pylori с помощью четырех тройных терапий: рандомизированное двойное слепое исследование. Международный семинар по Helicobacter и родственным бактериям в г.; 2009.
  37. 37. Мильке С., Кирш С., Шнайдер-Брахерт В., Хаферланд С., Ноймайер М., Бастлейн Э. и др.Проспективное рандомизированное исследование квадротерапии и двойной терапии высокими дозами для лечения Helicobacter pylori, устойчивой как к метронидазолу, так и к кларитромицину. Хеликобактер. 2003;8(4):310–9. Эпб 2003/09/03. пмид: 12950604.
  38. 38. Намбу К., Тамура А., Миясака Н., Сугимото Х. НИЗКИЕ ДОЗЫ АНТИБАКТЕРИАЛЬНОГО ЛЕЧЕНИЯ ИНФЕКЦИИ HELICOBACTER PYLORI (HP) ПРИ ЯЗВЕННОЙ ЯЗВЕ. Журнал Общества Университета Сёва. 2000;60.
  39. 39. Шарара А.И., Саркис Ф.С., Эль-Халаби М.М., Малли А., Мансур Н.М., Азар С. и др.Бросая вызов догме: рандомизированное исследование стандартной и половинной сопутствующей квадротерапии без висмута при инфекции Helicobacter pylori. Объединенный европейский гастроэнтерологический журнал. 2014;2(3):179–88. Эпублик от 02.11.2014. пмид: 25360301.
  40. 40. Бороди Т.Дж., Брандл С., Эндрюс П., Ферч Н., Янкевич Э., Хайленд Л. Использование высокоэффективной тройной терапии с более низкими дозами для уменьшения побочных эффектов эрадикации Helicobacter pylori. Американский журнал гастроэнтерологии. 1994;89(1):33–8. Эпб 1994/01/01.пмид:8273794.
  41. 41. Нисидзава Т., Маэкава Т., Ватанабэ Н., Харада Н., Хосода Й., Ёсинага М. и др. Кларитромицин по сравнению с метронидазолом в качестве первой линии эрадикации Helicobacter pylori: многоцентровое проспективное рандомизированное контролируемое исследование в Японии. Журнал клинической гастроэнтерологии. 2015;49(6):468–71. Эпб 2014/06/13. пмид: 24921211.
  42. 42. Ди Джулио М. , Ди Кампли Э., Ди Бартоломео С., Катальди В., Марцио Л., Гросси Л. и др. Чувствительность Helicobacter pylori к противомикробным препаратам in vitro к девяти антибиотикам, используемым в настоящее время в Центральной Италии.Скандинавский журнал гастроэнтерологии. 2016;51(3):263–9. Эпублик 12.11.2015. пмид: 26554617.
  43. 43. Kalsch J, Keskin H, Schutte A, Baars T, Baba HA, Bechmann LP, et al. Пациенты с ультразвуковым диагнозом стеатоза печени относятся к группе высокого метаболического риска. Zeitschrift fur Gastroenterologie. 2016;54(12):1312–9. Эпублик 2016/12/10. пмид: 27936481.
  44. 44. Gisbert JP, Calvet X, Gomollon F, Mones J. [Эрадикационное лечение Helicobacter pylori. Рекомендации II Испанской консенсусной конференции].Медицинская клиника. 2005;125(8):301–16. Эпб 2005/09/15. пмид: 16159556.
  45. 45. Фок К.М., Кателарис П., Сугано К., Анг Т.Л., Хант Р., Тэлли Н.Дж. и др. Второе Азиатско-Тихоокеанское согласованное руководство по инфекции Helicobacter pylori. Журнал гастроэнтерологии и гепатологии. 2009;24(10):1587–600. Эпублик 01.10.2009. пмид: 19788600.
  46. 46. Su P, Li Y, Li H, Zhang J, Lin L, Wang Q и др. Устойчивость к антибиотикам Helicobacter pylori, выделенных в юго-восточном прибрежном районе Китая.Хеликобактер. 2013;18(4):274–9. Эпб 2013/02/20. пмид: 23418857.
  47. 47. Грэм Д.Ю. Антибиотикорезистентность Helicobacter pylori: последствия для терапии. Гастроэнтерология. 1998;115(5):1272–1277. Эпублик 1998/10/31. пмид:9797384.
  48. 48. Street ME, Caruana P, Caffarelli C, Magliani W, Manfredi M, Fornaroli F и др. Лечение на основе устойчивости к антибиотикам и чувствительности к антибиотикам при инфекции Helicobacter pylori: преимущества и результаты. Архивы болезней в детстве.2001;84(5):419–22. Эпб 2001/04/24. пмид: 11316688.
  49. 49. Бонтемс П., Калач Н., Одерда Г., Саламе А., Мюйшонт Л., Мендже Д.Ю. и др. Последовательная терапия в сравнении с индивидуально подобранной тройной терапией при инфекции Helicobacter pylori у детей. Журнал детской гастроэнтерологии и питания. 2011;53(6):646–50. Эпб 2011/06/28. пмид: 21701406.
  50. 50. Банг CS, Байк GH. Попытки повысить скорость эрадикации инфекции Helicobacter pylori. Всемирный журнал гастроэнтерологии.2014;20(18):5252–62. Эпб 2014/05/17. пмид: 24833855.

Сравнительное исследование тройной терапии на основе кларитромицина и метронидазола в качестве первой линии эрадикации Helicobacter pylori — FullText — Oncology 2017, Vol. 93, Доп. 1

Введение: Тройная терапия на основе кларитромицина (CAM), включающая ингибиторы протонной помпы и амоксициллин, назначается в качестве терапии первой линии для эрадикации инфекции He licobacter pylori .Однако уровень эрадикации, достигнутый с помощью тройной терапии на основе CAM, снизился до уровня эрадикации H. pylori. Методы: H. pylori -положительные пациенты получали тройную терапию на основе CAM, включающую эзомепразол и амоксициллин (группа EAC), или тройную терапию на основе MNZ, включающую эзомепразол и амоксициллин (группа EAM). Результаты: Показатели эрадикации H. pylori , достигнутые в анализах по назначению лечения (ITT) и в соответствии с протоколом (PP), составили 70.6 и 72,7% соответственно в группе ЕАС. Показатели эрадикации, полученные с помощью анализов ITT и PP, составили 91,7 и 94,3% соответственно в группе EAM. В группе EAC показатели эрадикации были значительно ниже у пациентов с устойчивыми к САМ штаммами, чем у пациентов с чувствительными к САМ штаммами. Напротив, показатели эрадикации были сопоставимы между пациентами, имеющими штаммы, устойчивые к САМ, и пациентами, имеющими штаммы, чувствительные к САМ, в группе ЭАМ. Заключение: Тройная терапия на основе MNZ, состоящая из эзомепразола и амоксициллина, превосходит тройную терапию на основе CAM, включающую эзомепразол и амоксициллин, в качестве эрадикационной терапии первой линии против H.пилори .

© 2017 S. Karger AG, Базель

Введение

Рак желудка является третьей ведущей причиной смерти от рака во всем мире [1]. Географически рак желудка очень распространен в Восточной Азии, где высок уровень распространенности инфекции Helicobacter pylori [2]. H. pylori представляет собой грамотрицательную бактерию, которая колонизирует слизистую оболочку желудка человека и затем вызывает широкий спектр желудочных расстройств [3]. Хроническая желудочная инфекция, вызванная H.pylori первоначально вызывает хронический активный гастрит, который затем может привести к развитию язвенной болезни, атрофического гастрита, рака желудка и лимфомы лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистой оболочкой [3]. Инфекция H. pylori в настоящее время является широко признанной основной причиной рака желудка [4]. Это утверждение адекватно подтверждается большим количеством эпидемиологических и клинических данных. Во-первых, около 90% пациентов с раком желудка демонстрируют серопозитивность к H. pylori [4,5]. Во-вторых, проспективное и долгосрочное исследование показало, что рак желудка чаще наблюдался у японских пациентов с H. pylori , чем у лиц без инфекции [6]. В-третьих, эрадикация H. pylori существенно снизила заболеваемость раком желудка у пациентов с высоким риском, перенесших эндоскопическую резекцию [7]. Наконец, в-четвертых, сообщалось, что защитный эффект против рака желудка сохраняется более 10 лет после эрадикации H. pylori [8]. Таким образом, H. pylori можно считать одной из важнейших причин рака желудка [9].

Н.pylori -ассоциированный рак желудка является одним из лучших примеров рака, связанного с воспалением [10,11]. Генетические и эпигенетические изменения накапливаются в эпителиальных клетках желудка, инфицированных H. pylori , в ответ на прогрессирование хронического воспаления [10,11]. Фактически, поздние стадии H. pylori -ассоциированного хронического гастрита, сопровождающегося тяжелой атрофией желудка и кишечной метаплазией, считаются предраковыми состояниями, поскольку рак желудка имеет тенденцию возникать из слизистой оболочки желудка, демонстрирующей эти признаки [6]. Однако следует отметить, что эрадикация H. pylori снижает риск развития рака желудка даже при наличии выраженной желудочной атрофии и кишечной метаплазии [7]. Таким образом, эрадикация H. pylori является наиболее эффективной стратегией профилактики рака желудка.

Тройная терапия, содержащая ингибитор протонной помпы (ИПП) с амоксициллином (АМПК) и кларитромицином (КАМ), широко используется в качестве эрадикационной терапии первой линии для H. pylori в Японии [12].Пациентов, у которых эрадикационная терапия первой линии оказалась неэффективной, обычно лечат тройной терапией, содержащей ИПП, включающей AMPC и метронидазол (MNZ) [13,14]. Хотя многоцентровое исследование, проведенное в 2001 г., показало, что уровень эрадикации с помощью терапии первой линии составлял около 90%, в 2014 г. этот показатель снизился до 70-80% [13,15]. Возможным объяснением снижения уровня эрадикации является распространенность устойчивых к САМ H. pylori в Японии [16,17]. Окамура и др. [16] сообщили, что уровень резистентности к САМ превышает 30 и 50% у пожилых и молодых пациентов соответственно.Таким образом, мы предположили, что тройная терапия на основе MNZ, содержащая PPI и AMPC, превосходит тройную терапию на основе CAM в качестве варианта эрадикации первой линии. Целью этого исследования было сравнение эффективности тройной терапии на основе MNZ и тройной терапии на основе CAM в качестве эрадикационной терапии H. pylori .

Пациенты

Это проспективное рандомизированное контролируемое исследование было разработано, чтобы определить, превосходит ли тройная терапия на основе MNZ тройную терапию на основе MNZ в качестве терапии первой линии для эрадикации H.пилори . В исследование были включены пациенты, которым была проведена эзофагогастродуоденоскопия для дальнейшего обследования и наблюдения за симптомами верхних отделов желудочно-кишечного тракта и заболеваниями, связанными с H. pylori , включая пептические язвы и хронический гастрит в университетской больнице Киндай с июня 2013 г. по август 2015 г. Также были включены пациенты, которым была проведена эзофагогастродуоденоскопия для наблюдения за постэндоскопической диссекцией подслизистого слоя по поводу раннего рака желудка. Критерии исключения были следующими: возраст <19 лет; история Х.pylori эрадикационная терапия; аллергия на PPI, AMPC, CAM или MNZ; тяжелая дисфункция печени; выраженная дисфункция почек; тяжелое заболевание сердца; беременность; злоупотребление алкоголем; наркотическая зависимость. Перед началом лечения от каждого пациента было получено письменное информированное согласие, а протокол исследования был одобрен Этическим комитетом Университета Киндай. Кроме того, это испытание зарегистрировано в Медицинской информационной сети университетской больницы (000011203).

Дизайн исследования

В общей сложности 140 пациентов, которые соответствовали критериям включения и согласились на получение H.pylori были включены в исследование. Оценку инфекции H. pylori проводили с помощью экспресс-тестов на уреазу, культуральных методов, тестов на антитела H. pylori в сыворотке и тестов на антиген H. pylori в кале. Пациентов считали H. pylori -положительными, когда хотя бы один из этих тестов давал положительные результаты. В качестве эрадикационной терапии первой линии против H.пилори . Пациенты были случайным образом разделены на две группы: группу EAC и группу EAM. Пациентам группы EAC назначали эзомепразол 20 мг, CAM 400 мг и AMPC 750 мг два раза в день в течение 7 дней, а пациентам группы EAM назначали эзомепразол 20 мг, MNZ 500 мг и AMPC 750 мг два раза в день в течение 7 дней. 7 дней. Эрадикация H. pylori была подтверждена с помощью уреазного дыхательного теста через 4 недели после завершения лечения. Восприимчивость к CAM и MNZ была проверена с использованием образцов биопсии желудка, полученных во время эндоскопии, как описано ранее [18,19].

Статистический анализ

Для оценки частоты эрадикации использовались анализы по назначению лечения (ITT) и согласно протоколу (PP). Анализ χ 2 использовали для статистического анализа, и значение p <0,05 указывало на статистическую значимость.

Результаты

Пациенты

Всего в это исследование было включено 140 пациентов, и 136 пациентов завершили эрадикационную терапию первой линии. Как показано на рисунке 1, 68 и 72 пациента получали лечение по протоколам EAC и EAM соответственно.По два пациента в каждой группе выбыли из исследования из-за выбытия из-под наблюдения или несоблюдения режима лечения. Ни у одного из пациентов, завершивших эрадикационную терапию первой линии, не было выявлено серьезных побочных эффектов, потребовавших прекращения эрадикационной терапии. Как показано в таблице 1, не наблюдалось существенных различий в отношении исходных характеристик, таких как возраст, пол и заболевания, между группами EAC и EAM. Кроме того, частота CAM-резистентных H. pylori , выделенных из образцов слизистой оболочки желудка, была сопоставима между группами EAC и EAM.

Таблица 1

Клинические характеристики пациентов

Рис. 1

Блок-схема включения пациентов в это исследование. EAC, тройная терапия на основе кларитромицина, включающая эзомепразол и амоксициллин; ЭАМ, тройная терапия на основе метронидазола, включающая эзомепразол и амоксициллин.

Эффективность эрадикации

Эрадикация H. pylori была подтверждена с помощью уреазного дыхательного теста через 4 недели после завершения терапии первой линии.Как показано на рисунке 2a и в таблице 2, показатели эрадикации H. pylori согласно анализам ITT и PP составили 70,6% (48/68) и 72,7% (48/66) соответственно в группе EAC. Показатели эрадикации, полученные при анализе ITT и PP, составили 91,7% (66/72) и 94,3% (66/70) соответственно в группе ЭАМ. Таким образом, показатели эрадикации в группе EAM были значительно выше, чем в группе EAC.

Таблица 2

H. pylori Показатели эрадикации

Рис.2

Показатели эрадикации H. pylori . Пациентов лечили тройной терапией на основе кларитромицина (CAM), включающей эзомепразол и амоксициллин (EAC), или тройной терапией на основе метронидазола, включающей эзомепразол и амоксициллин (EAM). Показатели эрадикации были рассчитаны с помощью анализа намерения лечить (ITT) и согласно протоколу (PP) ( и ). Показатели эрадикации в группах EAC и EAM рассчитывали у пациентов с CAM-чувствительными и CAM-резистентными штаммами ( b ).** p <0,01 по сравнению с группой EAM ( a ) или с группой, восприимчивой к CAM ( b ).

Затем мы рассмотрели влияние устойчивости к CAM на показатели эрадикации. Как показано на рисунке 2b и в таблице 2, показатели эрадикации составили 87,9% (29/33) и 51,9% (14/27) у пациентов, получавших EAC, у которых были чувствительные к CAM и устойчивые к CAM штаммы H. pylori соответственно. Напротив, показатели эрадикации составили 90,9% (40/44) и 95,7% (22/23) у получавших ЭАМ пациентов с САМ-чувствительными и САМ-резистентными штаммами H.pylori соответственно. Таким образом, более низкие показатели эрадикации в группе EAC были связаны с более низкими показателями эрадикации у пациентов с резистентными к САМ штаммами H. pylori .

Обсуждение

Тройная терапия на основе CAM, содержащая PPI и AMPC, часто используется в качестве эрадикационной терапии первой линии против инфекции H. pylori в Японии [13,15]. Хотя в 2001 г. уровень эрадикации, достигнутый при использовании этой схемы первого ряда, составлял около 90%, к 2014 г. этот показатель снизился до менее 80% [13,15].Прогрессирующее увеличение числа устойчивых к САМ штаммов H. pylori считается ответственным за снижение уровня эрадикации [16,17]. В этом проспективном рандомизированном исследовании мы сравнили эффективность EAM с эффективностью EAC. Мы обнаружили, что уровень эрадикации, достигнутый с помощью EAM, был намного выше, чем уровень, достигнутый с помощью EAC в анализах ITT и PP. Это открытие не зависело от чувствительности штамма к САМ в группе ЕАМ. С другой стороны, уровень эрадикации, достигнутый с помощью EAC, был намного ниже у пациентов с устойчивыми к CAM штаммами, чем у пациентов с чувствительными к CAM штаммами. Мы обнаружили, что показатели эрадикации, достигнутые с помощью EAC и EAM, были сопоставимы у пациентов с чувствительными к САМ штаммами H. pylori (87,9 против 90,9%). Напротив, уровень эрадикации, достигнутый с помощью EAM, был намного выше, чем уровень, достигнутый с помощью EAC, в отношении чувствительных к CAM штаммов H. pylori (51,9 против 95,7%). Процент устойчивости к САМ составил 39,3%, тогда как устойчивость к МНЗ составила 3,67%. Кроме того, как в группах EAC, так и в группах EAM не наблюдалось серьезных побочных эффектов, требующих прекращения эрадикационной терапии.Взятые вместе, наши результаты показывают, что тройная терапия на основе MNZ, содержащая PPI и AMPC, превосходит тройную терапию на основе CAM в качестве терапии первой линии для эрадикации H. pylori из-за высокой распространенности резистентности к CAM и относительно более низкой распространенности MNZ. сопротивление. В соответствии с нашими результатами Nishizawa et al. [13] также утверждали, что терапия на основе MNZ превосходит терапию на основе CAM.

Вонопразан (ВПЗ), новый блокатор кислоты, конкурирующий с калием, недавно использовался в качестве первой линии эрадикации H.pylori [20,21,22]. Мураками и др. [21] сообщают, что уровень эрадикации, достигнутый при тройной терапии на основе ВПЗ первой линии, содержащей САМ и АМФС, составил 92,6%, а при тройной терапии на основе ВПЗ второй линии, содержащей МНЗ и АМФС, — 98,0%, даже при наличии САМ-резистентные штаммы. Хотя молекулярные механизмы, ответственные за высокую скорость эрадикации, опосредованную VPZ, остаются неизвестными, одним из возможных объяснений может быть усиление антимикробной активности CAM и AMPC в присутствии VPZ [21].Считается, что VPZ, который демонстрирует мощную способность ингибировать выработку желудочной кислоты, создает среду, в которой противомикробные препараты проявляют свою оптимальную активность. Таким образом, тройная терапия на основе CAM, содержащая VPZ и AMPC, может быть эффективным лечением первой линии. Однако следует отметить, что показатели эрадикации, достигнутые с помощью тройной терапии на основе CAM, содержащей VPZ и AMPC, были относительно низкими (86,3, 87,9%) в двух исследованиях [20,22]. Необходимы дальнейшие клинические исследования эффективности тройной терапии на основе CAM, содержащей VPZ и AMPC, для определения эффективности этой схемы, особенно в отношении штаммов, устойчивых к CAM.

Эрадикация H. pylori является наиболее эффективным методом профилактики рака желудка. Эрадикация этого микроорганизма предотвращает метахронное развитие рака желудка у пациентов, подвергшихся эндоскопическому лечению раннего рака желудка и демонстрирующих тяжелую атрофию желудка и/или кишечную метаплазию [7]. Таким образом, эрадикация H. pylori также эффективна для предотвращения канцерогенеза желудка даже на поздних стадиях хронического гастрита с предраковыми аномалиями слизистой оболочки, такими как тяжелая атрофия желудка и/или кишечная метаплазия.В настоящее время доступно несколько схем эрадикации против H. pylori . Неосторожный выбор схемы эрадикации может привести к появлению и распространению штаммов, устойчивых к антибиотикам, без профилактики рака желудка. Будущие исследования, непосредственно сравнивающие эффективность и безопасность схем эрадикации H. pylori , необходимы для разработки соответствующей схемы лечения первой линии.

В заключение, тройная терапия на основе MNZ, включающая эзомепразол и AMPC, превосходит тройную терапию на основе CAM, включающую эзомепразол и AMPC, в качестве терапии первой линии для эрадикации против H.пилори .

Заявление о раскрытии информации

У авторов нет конфликта интересов, о котором следует заявить.

Авторское право: Все права защищены. Никакая часть данной публикации не может быть переведена на другие языки, воспроизведена или использована в любой форме и любыми средствами, электронными или механическими, включая фотокопирование, запись, микрокопирование или любую систему хранения и поиска информации, без письменного разрешения издателя. .
Дозировка препарата: авторы и издатель приложили все усилия, чтобы гарантировать, что выбор препарата и дозировка, указанные в этом тексте, соответствуют текущим рекомендациям и практике на момент публикации. Тем не менее, в связи с продолжающимися исследованиями, изменениями в правительственных постановлениях и постоянным потоком информации, касающейся лекарственной терапии и реакций на лекарства, читателю настоятельно рекомендуется проверять вкладыш в упаковке для каждого лекарства на предмет любых изменений в показаниях и дозировке, а также для дополнительных предупреждений. и меры предосторожности. Это особенно важно, когда рекомендуемый агент является новым и/или редко используемым лекарственным средством.
Отказ от ответственности: заявления, мнения и данные, содержащиеся в этой публикации, принадлежат исключительно отдельным авторам и участникам, а не издателям и редакторам.Появление рекламы и/или ссылок на продукты в публикации не является гарантией, одобрением или одобрением рекламируемых продуктов или услуг или их эффективности, качества или безопасности. Издатель и редактор(ы) отказываются от ответственности за любой ущерб, нанесенный людям или имуществу в результате любых идей, методов, инструкций или продуктов, упомянутых в содержании или рекламе.

Высокая первичная резистентность к метронидазолу и левофлоксацину и умеренная резистентность к кларитромицину у Helicobacter pylori, выделенных у пациентов в штате Карнатака | Патогены кишечника

  • Kusters JG, van Vliet AHM, Kuipers EJ.Патогенез инфекции Helicobacter pylori . Clin Microbiol Rev. 2006;19(3):449–90.

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Иванчак Б.М., Борис-Иваницка А., Бернат М., Госчиняк Г. Оценка последовательной и стандартной тройной терапии при лечении инфекции Helicobacter pylori у детей в зависимости от чувствительности бактерий к антибиотикам. Adv Clin Exp Med. 2016;25(4):701–8.

    Артикул пабмед Google ученый

  • Пелликано Р., Пальмас Ф., Понцетто А., Астеджано М., Смедиле А., Моргандо А. и др. Снижение уровня эрадикации инфекции Helicobacter pylori с помощью тройной терапии на основе метронидазола. Рандомизированное исследование. Минерва Гастроэнтерол Диетол. 2002;48(3):265–70.

    КАС пабмед Google ученый

  • Kabakambira JD, Hategeka C, Page C, Ntirenganya C, Dusabejambo V, Ndoli J, et al.Эффективность схем эрадикации Helicobacter pylori в Руанде: рандомизированное контролируемое исследование. БМК Гастроэнтерол. 2018;18(1):134.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Чеха К.М., Диб СОА, Алхалаби М.М. Пилотное исследование: сравнение эффективности 14-дневной тройной терапии кларитромицином и левофлоксацином при эрадикации инфекции Helicobacter pylori в одноцентровом опыте населения Сирии.Авиценна J Med. 2018;8(1):14–7.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Мабе К., Окуда М. , Кикути С., Амагай К., Йошимура Р., Като М. и др. Рандомизированное контролируемое исследование: тройная терапия на основе ИПП, содержащая метронидазол, по сравнению с кларитромицином в качестве терапии первой линии для Helicobacter pylori у подростков и молодых людей в Японии. J заразить Chemother. 2018;24(7):538–43.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Lee JW, Kim N, Nam RH, Lee SM, Kwon YH, Sohn SD, et al.Благоприятные результаты культуральной эрадикационной терапии Helicobacter pylori в регионе с высокой антимикробной резистентностью. Хеликобактер. 2019;24:e12561.

    Артикул пабмед Google ученый

  • Yeo YH, Hsu CC, Lee CC, Ho HJ, Lin JT, Wu MS, et al. Систематический обзор и сетевой метаанализ: сравнительная эффективность терапии второй линии эрадикации Helicobacter pylori . J Гастроэнтерол Гепатол. 2019;34(1):59–67.

    Артикул пабмед Google ученый

  • Hu Y, Zhu Y, Lu NH. Новые и эффективные схемы лечения Helicobacter pylori в эпоху растущей устойчивости к антибиотикам. Front Cell Infect Microbiol. 2017;7:168.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Гудвин А., Керсулит Д., Сиссон Г., Вельдхуйзен ван Зантен С.Дж., Берг Д.Е., Хоффман П.С.Устойчивость к метронидазолу у Helicobacter pylori обусловлена ​​нулевыми мутациями в гене (rdxA), который кодирует нечувствительную к кислороду НАДФН-нитроредуктазу. Мол микробиол. 1998;28(2):383–93.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Чон Дж.Й., Мукхопадхьяй А.К., Дайлидиен Д., Ван И, Велапатино Б., Гилман Р.Х. и др. Последовательная инактивация генов нитроредуктазы rdxA (HP0954) и frxA (HP0642) вызывает умеренную и высокую устойчивость к метронидазолу у Helicobacter pylori . J Бактериол. 2000;182(18):5082–90.

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • De Francesco V, Zullo A, Hassan C, Giorgio F, Rosania R, Ierardi E. Механизмы устойчивости к антибиотикам Helicobacter pylori : обновленная оценка. World J Gastrointest Pathophysiol. 2011;2(3):35.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Герритс М.М., де Зоете М.Р., Аренц Н.Л., Куйперс Э.Дж., Кустерс Дж.Г.Опосредованная мутацией 16S рРНК устойчивость к тетрациклину у Helicobacter pylori . Противомикробные агенты Chemother. 2002;46(9):2996–3000.

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Rimbara E, Noguchi N, Kawai T, Sasatsu M. Мутации в пенициллин-связывающих белках 1, 2 и 3 ответственны за устойчивость к амоксициллину у Helicobacter pylori . J Антимикробная химиотерапия. 2008;61(5):995–8.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Cattoir V, Nectoux J, Lascols C, Deforges L, Delchier JC, Megraud F, et al. Обновленная информация об устойчивости к фторхинолонам у Helicobacter pylori : новые мутации, ведущие к устойчивости, и первое описание полиморфизма gyrA, связанного с гиперчувствительностью. Противомикробные агенты Int J. 2007;29(4):389–96.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Pandya HB, Agravat HH, Patel JS, Sodagar NR.Возникновение картины устойчивости к противомикробным препаратам Helicobacter pylori в центральном Гуджарате. Индийская J Med Microbiol. 2014;32(4):408–13.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Датта С., Чаттопадхьяй С., Патра Р. , Де Р., Рамамурти Т., Хембрам Дж. и др. Большинство штаммов Helicobacter pylori из Калькутты в Индии устойчивы к метронидазолу, но чувствительны к другим препаратам, обычно используемым для эрадикации и лечения язвы.Алимент Фармакол Тер. 2005;22(1):51–7.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Тьягараджан С.П., Рэй П., Дас Б.К., Айягари А., Хан А.А., Дхармалингам С. и др. Географические различия в структуре устойчивости к противомикробным препаратам клинических изолятов Helicobacter pylori от пациентов в Индии: многоцентровое исследование. J Гастроэнтерол Гепатол. 2003;18(12):1373–8.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Шетти В., Ламичане Б., Чуа Э.Г., Баллал М., Тай С.Ю.Черновые последовательности генома 42 изолятов Helicobacter pylori из сельских районов Южной Индии. Объявление генома. 2018;6(5):e01486-17.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Вани Ф.А., Башир Г., Хан М.А., Заргар С.А., Расул З., Кадри К. Устойчивость к антибиотикам у Helicobacter pylori : анализ мутаций в больнице третичного уровня в Кашмире, Индия. Индийская J Med Microbiol. 2018;36(2):265–72.

    Артикул пабмед Google ученый

  • Сингх В., Мишра С., Маурья П., Рао Г., Джейн А.К., Диксит В.К. и др. Характер лекарственной устойчивости и клональность в штаммах H. pylori . J Infect Dev Cries. 2009;3(2):130–6.

    Артикул пабмед Google ученый

  • Герритс М.М., Ван дер Вауден Э.Дж., Бакс Д.А., Ван Цвет А.А., Ван Влит АХМ, де Йонг А. и др. Роль генов rdxA и frxA в кислородзависимой резистентности к метронидазолу Helicobacter pylori . J Med Microbiol. 2004;53(11):1123–8.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Martinez-Julvez M, Rojas AL, Olehnovich I, Espinosa Angarica V, Hoffman PS, Sancho J. Структура RdxA – нечувствительной к кислороду нитроредуктазы, необходимой для активации метронидазола в Helicobacter pylori . FEBS J. 2012;279(23):4306–17.

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Malfertheiner P, Megraud F, O’Morain CA, Gisbert JP, Kuipers EJ, Axon AT, et al.Ведение инфекции Helicobacter pylori — согласованный отчет Maastricht V/Florence. Кишка. 2017;66(1):6–30.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Chen D, Cunningham SA, Cole NC, Kohner PC, Mandrekar JN, Patel R. Фенотипическая и молекулярная чувствительность к противомикробным препаратам Helicobacter pylori . Противомикробные агенты Chemother. 2017;61(4):e02530-16.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Хао Кью, Ли Ю, Чжан З-Дж, Лю Ю, Гао Х.Новые точки мутации в гене 23S рРНК связаны с устойчивостью Helicobacter pylori к кларитромицину на северо-востоке Китая. Мир J Гастроэнтерол. 2004;10(7):1075.

    КАС Статья пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Miftahussurur M, Shrestha PK, Subsomwong P, Sharma RP, Yamaoka Y. Emerging Helicobacter pylori Устойчивость к левофлоксацину и новая генетическая мутация в Непале. БМС микробиол.2016;16(1):256.

    Артикул пабмед ПабМед Центральный Google ученый

  • Phan TN, Santona A, Tran VH, Tran TNH, Cappuccinelli P, Rubino S, et al. Высокий уровень резистентности к левофлоксацину на фоне устойчивых к кларитромицину и метронидазолу Helicobacter pylori во Вьетнаме. Противомикробные агенты Int J. 2015;45(3):244–8.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Афтаб Х., Мифтахуссурур М., Сабсомвонг П., Ахмед Ф., Хан А.К., Ямаока Ю. Helicobacter pylori чувствительность к антибиотикам в Бангладеш: появление устойчивости к левофлоксацину. J Infect Dev Cries. 2016;10(3):245–53.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Hu Y, Zhang M, Lu B, Dai J. Helicobacter pylori и устойчивость к антибиотикам — постоянная и неразрешимая проблема. Хеликобактер. 2016;21(5):349–63.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Лонг С, Чен К, Ю Л, Лян С, Лю В, Лу Х.Висмут повышает эффективность терапии ингибитором протонной помпы кларитромицином, метронидазолом, тройным Helicobacter pylori , несмотря на высокую распространенность резистентности к противомикробным препаратам. Хеликобактер. 2018;23(3):e12485.

    Артикул пабмед Google ученый

  • Ван Л., Линь З., Чен С., Ли Дж., Чен С., Хуан З. и др. Десятидневная квадротерапия с висмутом эффективна в качестве терапии первой линии при хроническом гастрите, связанном с Helicobacter pylori : проспективное рандомизированное исследование в Китае.Клин Микробиол Инфект. 2017;23(6):391–5.

    КАС Статья пабмед Google ученый

  • Зееманн Т. Прокка: экспресс-аннотация генома прокариот. Биоинформатика. 2014;30(14):2068–9.

    КАС Статья Google ученый

  • Границы | Влияние температуры на устойчивость Helicobacter pylori

    к метронидазолу

    Введение

    Helicobacter pylori (H.pylori) была установлена ​​в качестве основной причины различных гастродуоденальных заболеваний, включая хроническое воспаление желудка, язвенную болезнь и рак желудка (РЖ), и классифицируется как канцероген I класса (Ishaq and Nunn, 2015). H. pylori обитает в слизистой оболочке желудка человека и поражает почти половину населения мира с распространенностью, превышающей 80% в некоторых регионах, таких как части Азии (Hooi et al., 2017). Было показано, что эрадикация H. pylori снижает заболеваемость РЖ в ряде групп риска (Takenaka et al., 2007; Косунен и др., 2011).

    Стандартная тройная терапия, состоящая из ингибитора протонной помпы в сочетании с кларитромицином и амоксициллином или метронидазолом, была основой лечения инфекции H. pylori в течение последних двух десятилетий. Однако растущая устойчивость к антибиотикам сделала стандартную тройную терапию менее эффективной — в зависимости от эффективности и устойчивости на местном уровне также были введены четырехкомпонентные терапии на основе висмута и без висмута (Graham and Fischbach, 2010).Устойчивость к кларитромицину и метронидазолу также различается в разных регионах мира и препятствует элиминации H. pylori (Kim et al., 2015). В Китае уровень устойчивости к кларитромицину составляет около 50%, в то время как устойчивость к метронидазолу колеблется от 41,6 до 95,4% в Юго-Восточном Китае (Su et al., 2013; Thung et al., 2016). Было показано, что различные механизмы влияют на устойчивость H. pylori к антибиотикам в физиологических условиях (Hu et al., 2016; Alba et al., 2017). Было показано, что точечные мутации в 23S рРНК и изменения в системах откачивающих насосов придают устойчивость к макролидам, таким как кларитромицин (Francesco et al., 2011). Кроме того, снижение активности нитроредуктазы (rdxA), флавиноксидоредуктазы (frxA) и ферродоксиноподобных ферментов (frxB) приводит к снижению активации метронидазола (Francesco et al., 2011).

    Изменения условий окружающей среды приводят к изменениям в транскриптомных профилях H. pylori (Thompson et al., 2003; Де ла Круз и др., 2017). Предыдущие данные показали, что локальное нагревание наночастиц подавляет рост и вирулентность H. pylori в качестве потенциального альтернативного подхода к лечению инфекций H. pylori (Wu et al., 2019; Zhi et al., 2019). В то время как разница температур привела к изменениям, которые привели к повышению устойчивости к антибиотикам у других видов бактерий (Liang et al., 2016; Loughman et al., 2016; De Silva et al., 2018), влияние температуры на устойчивость к антибиотикам и транскриптомные изменения в Х.pylori ранее не исследовались.

    В этом исследовании мы изучаем влияние изменений температуры на рост H. pylori и его чувствительность к метронидазолу с использованием эталонного резистентного штамма. Кроме того, мы исследуем возмущения в транскриптомных профилях, лежащие в основе изменений температурно-зависимой чувствительности к антибиотикам.

    Материалы и методы

    Бактериальный штамм и условия культивирования

    Штамм типа H. pylori NCTC 11637 (Lock et al., 2001) использовали для этого исследования, а идентификацию 16S рРНК использовали для проверки штаммов. Бактерии культивировали на основе агара Кармали (CM0935, Oxoid, Великобритания) с добавлением 5% стерильной дефибринированной овечьей крови (Beijing XLF Medical Sales Co. Ltd, Китай) в течение 3–5 дней при 37°С в микроаэрофильных условиях: микроаэробный газ. смесь, состоящая из 5% кислорода, 10% углекислого газа и 85% азота (мешок GEN microaer, BioMérieux, Франция). H. pylori пересевают три раза перед каждым экспериментом.

    Сравнение роста

    H. pylori при различных температурах

    H. pylori NCTC 11637 культивировали при 37 и 41°C для оценки влияния повышенной температуры на рост бактерий. Бактерии ресуспендировали в фосфатно-солевом буфере (PBS) до 8 различных концентраций разведения (0,5, 0,25, 0,125, 0,0625, 0,03125, 0,015, 0,0075, 0,003 по МакФарланду). Чашки диаметром 90 мм, засеянные 0,1 мл бактериальной суспензии, инкубировали при 37°С в качестве контроля. В лечебной группе 0.1 мл бактериальных суспензий в 8 разведениях высевали на 3 набора по 8 чашек. После инокуляции 3 набора чашек (каждый набор состоит из 8 чашек с различной концентрацией бактерий) инкубировали при 41°С в течение 1, 3 и 5 дней соответственно, а затем инкубировали при 37°С еще 3 дня. Колонии в каждой чашке подсчитывали после последней инкубации.

    Тестирование чувствительности к антибиотикам

    In vitro минимальных ингибирующих концентраций (МИК) четырех антибиотиков (амоксициллин, кларитромицин, метронидазол, тетрациклин) в отношении H.pylori NCTC 11637. Все эксперименты проводились в трехкратной повторности. МИК амоксициллина, метронидазола и тетрациклина в отношении H. pylori определяли с помощью эпсилометрического теста (Е-тест) с использованием Е-полоски (BioMerieux SA, Франция), а для определения чувствительности к кларитромицину применяли метод Кирби-Бауэра. H. pylori NCTC 11637 культивировали, как описано выше, и колонии третьего поколения отбирали и суспендировали в PBS до мутности 2 по стандарту МакФарланда.Затем 0,1 мл бактериальной суспензии равномерно наносили на основу агара Кармали. Каждую чашку с агаром оставляли для высыхания на 15 минут, после чего прикрепляли Е-полоску, и чашки инкубировали, как описано выше. МИК определяли как наименьшую концентрацию, которая не допускала видимого роста после 72 часов инкубации при 37°C. Клинические пограничные значения для амоксициллина, кларитромицина, метронидазола и тетрациклина определены как: >0,125, >0,5, >8 и >1 мг/л, соответственно, в соответствии с пограничными точками тестирования чувствительности к противомикробным препаратам, версия 8 Европейского комитета (Европейский комитет по противомикробным препаратам). Тестирование восприимчивости [ECUCAST], 2018).

    Экстракция РНК и транскриптомный анализ

    Штамм H. pylori NCTC 11637 был разделен на две группы в трех повторностях. Экспериментальную группу лечили при 41°С в течение 3 дней. Контрольную группу лечили при 37°С в течение 3 дней. Клетки собирали, общую РНК выделяли и очищали с использованием набора Bacterial RNA (Omega Bio-tek, GA, США) в соответствии с протоколами производителя. Контроль качества каждого образца РНК проводили с помощью биоанализатора Agilent 2100 (Agilent Technologies, Пекин, Китай). Библиотеки кДНК были сконструированы с использованием набора для подготовки библиотеки РНК NEBNext ® Ultra TM (New England Biolabs, Ипсвич, Массачусетс, США) и отправлены для секвенирования с использованием IlluminaHiseq 4000. Конструирование библиотеки и секвенирование были выполнены Allwegene BioTech Co., Ltd. (Пекин, Китай). Необработанные чтения были отфильтрованы с использованием Trimmomatic v0.33 (Bolger et al., 2014) и сопоставлены с геномом H. pylori NCTC 11637 (Национальный центр биотехнологической информации [NCBI], 2012) с использованием Bowtie2 v2.2.6 (Langmead and Salzberg, 2012) с параметрами по умолчанию. Гены были количественно определены с использованием HTSeq v0.6.0 (Anders et al., 2015). Дифференциально экспрессируемые гены (DEG) анализировали с помощью DESeq2 v1.22.1 в R (Love et al., 2014). Гены с абсолютным логарифмом 2 кратных изменений > 1 и с поправкой на множественное тестирование (процедура Бенджамини-Хохберга) q <0,05 рассматривались как DEG.

    Экспрессия генов с помощью количественной RT-PCR

    Количественная полимеразная цепная реакция в реальном времени (qRT-PCR) выполнялась с использованием тех же анализируемых образцов (3 контрольных образца при 37°C и 3 при 41°C в течение 3 дней), что и при транскриптомном анализе RNA-seq.10 генов с дифференциальными уровнями экспрессии, идентифицированными с помощью секвенирования РНК, были отобраны для последующей проверки (5 из наиболее ассоциированных генов и 5, связанных с устойчивостью к метронидазолу, из биоинформатического скрининга, как описано в Курирование генов, связанных с устойчивостью ). Генеспецифические праймеры (дополнительная таблица 1A) были разработаны и приобретены у Invitrogen (Пекин, Китай). Для каждого биологического образца выполняли три технические повторности. кДНК первой цепи синтезировали с использованием набора реагентов PrimeScript TM RT с gDNA Eraser (Takara, Japan) в соответствии с инструкциями производителя.Реакции qRT-PCR проводили с использованием системы обнаружения последовательностей ABI Prism 7500 (Perkin-Elmer Applied Biosystems, Foster City, CA). H. pylori 16S рРНК использовали в качестве внутреннего контроля. Экспрессию генов и кратность изменений log 2 анализировали с использованием алгоритма 2 –ΔΔ CT (Livak and Schmittgen, 2001). После контроля качества один биологический образец при 37°C продемонстрировал низкие показания по всем генам по сравнению с двумя другими биологическими образцами (которые не показали низких показаний в РНК-секвенции) и был исключен из анализа.

    Анализ путей GO и KEGG

    Сначала мы сопоставили гены с символами Entrez Gene. Анализ обогащения Gene Ontology (GO), включающий клеточный компонент (CC), молекулярную функцию (MF) и биологический процесс (BP), был проведен для DEG в R с пакетом GOSeq v1.26.0 и topGO v2.26.0 с использованием H. pylori. 11637 эталонный штамм, аннотированный Pfam (база данных семейств белков) (El-Gebali et al., 2019) в качестве фона. KOBAS v3.0 (Xie et al., 2011) использовался для выполнения анализа пути обогащения Киотской энциклопедии генов и геномов (KEGG) для DEG с использованием H. pylori 26695 в качестве фона. p <0,05, скорректированное для множественного тестирования (значение q ) с использованием метода Бенджамини-Хохберга, использовалось в качестве порога значимости для анализа обогащения пути GO и KEGG. Мы также провели анализ чувствительности, используя абсолютный log 2 кратность изменения > 1,5, q <0,05 в качестве пороговых значений для DEG.

    Курирование генов устойчивости

    Включение всех картированных генов в пути устойчивости к метронидазолу

    Пути устойчивости к антибиотикам метронидазола у H.pylori на основе четырех групп широких механизмов: (1) сниженная активность нитроредуктаз, (2) повышенная активность системы поглотителей кислородных радикалов, (3) сниженное поглощение и усиленный отток и (4) повышенная активность ДНК ферменты репарации, были определены из современной литературы (Hu et al., 2016; Alba et al., 2017). Все картированные гены ( n = 1552) были вручную проверены двумя независимыми рецензентами, чтобы определить, связан ли каждый из них с одним из четырех механизмов, основанных на функции гена и описании гена. Были включены гены с заданиями, которые совпадают между двумя рецензентами.

    Курирование генов, связанных с устойчивостью к метронидазолу, в литературе

    Запросы были сделаны в PubMed с использованием ключевых слов «хеликобактер пилори», «метронидазол» и «резистентность », а затем были вручную отобраны для создания списка зарегистрированных генов устойчивости H. pylori к метронидазолу. Затем DEG, идентифицированные в этом исследовании, были сопоставлены со списком генов, о которых сообщается в литературе. Тесты на обогащение проводились путем тестирования перестановки (10 000 раз).

    Обнаружение и секвенирование rdxA, frxA и fdxB

    Для условий как 37°C, так и 41°C была проведена стандартная амплификация в полимеразной цепной реакции (ПЦР). Конкретные реагенты, праймеры и условия подробно описаны в дополнительной таблице 1B. ПЦР, гель-электрофорез и секвенирование ДНК методом секвенирования Сэнгера проводили в соответствии со стандартными протоколами производителя.

    Результаты

    Повышенная температура подавляет рост

    H. pylori

    Влияние повышенной температуры на H.pylori (штамм NCTC 11637) оценивали рост при 37°С (контрольная группа) и при 41°С в течение 1, 3 и 5 дней. Рост H. pylori значительно ингибировался после инкубации при 41°C, при этом ингибирование было более очевидным при длительной инкубации (рис. 1А). При концентрации инокулята 0,002 МакФарланда количество бактериальных колоний в контрольной группе составило 4288 ± 184 КОЕ/мл. Количество КОЕ/мл уменьшилось до 2970 ± 462, 2255 ± 575 и 1990 ± 187 КОЕ/мл через 1, 3 и 5 дней лечения при 41°С соответственно ( p = 0.026 [1 день], p = 0,018 [3 дня], p = 0,00011 [5 дней], по сравнению с контрольной группой).

    Рис. 1. (A) Ингибирование роста H. pylori при различных температурных условиях. (B) Изменения чувствительности к метронидазолу при различных температурных условиях.

    Изменение температуры повышает чувствительность

    H. pylori к метронидазолу

    Мы исследовали влияние повышенной температуры на чувствительность резистентного к метронидазолу штамма H.pylori NCTC 11637 к метронидазолу с помощью Е-тест-полоски. Минимальная ингибирующая концентрация (МИК) метронидазола в условиях культивирования при 37°C (контрольная группа) составляла >256 мкг/мл. После культивирования при 41 °C в течение 3 дней МИК H. pylori к метронидазолу снизилась до 8 мкг/мл (рис. 1В), что является пограничной точкой устойчивости к метронидазолу. Штамм NCTC 11637 был чувствителен к кларитромицину, амоксициллину и тетрациклину, и это не изменилось в условиях повышенной температуры культивирования (дополнительная таблица 2).В инокуляции субкультуры H. pylori после возврата от 41 до 37°С роста не наблюдалось.

    Анализы транскриптома выявляют изменения в генах лекарственной устойчивости

    Идентификация дифференциально экспрессируемых генов с помощью секвенирования РНК

    Для изучения транскриптомных изменений, которые могут привести к снижению устойчивости к повышенной температуре, мы использовали секвенирование РНК для оценки изменений в экспрессии генов между 37 и 41°C. Парное секвенирование Illumina 6 образцов (3 культивированных при 37°C и 3 при 41°C) дало в общей сложности 252 222 378 чистых прочтений.70,9–80,1% прочтений образцов были сопоставлены с аннотированным геномом H. pylori NCTC 11637, кульминацией которого стало 1552 картированных гена. Измерения экспрессии генов были в высокой степени согласованы между биологическими репликами в каждом температурном режиме (Pearson’s r : 0,97–0,99 в пределах условия, рисунок 2A). 583 из 1552 картированных генов имели значительную дифференциальную экспрессию при абсолютном log 2 кратность изменения > 1 и q < 0,05 после инкубации при 41°C в течение 3 дней по сравнению с 37°C, из которых 292 экспрессировались и 291 были подавлены (рис. 2B, C и дополнительная таблица 3).

    Рисунок 2. Дифференциально экспрессируемые гены (DEG) с помощью секвенирования РНК. (A) Тепловая карта корреляции Пирсона экспрессии всех картированных генов (B) Иерархическая кластеризованная тепловая карта существенно дифференциально экспрессируемых генов (583). (C) График вулкана, отображающий DEG. Вертикальная ось соответствует значению q , горизонтальная ось отображает логарифм 2 кратности изменения. Красные точки представляют экспрессированные транскрипты с повышающей регуляцией (292), зеленые точки представляют транскрипты с понижающей регуляцией (291).Вертикальные и горизонтальные пунктирные линии обозначают абсолютный log 2 кратность изменения = 1 и скорректированный p = 0,05 соответственно.

    Измерения экспрессии генов с помощью qRT-PCR

    Мы выбрали 10 ДЭГ, 5 наиболее ассоциированных генов и 5 генов, связанных с устойчивостью к метронидазолу (Материалы и методы), для измерения с помощью qRT-PCR. 8 из 10 DEG показали последовательное направление в логарифмических изменениях экспрессии генов (рис. 3). Все 5 DEG с наиболее сильной статистической значимостью ассоциации [HP17_RS13720 (HP1076), HP_RS12585 (HP0115), flgL, HP17_RS17120 (HP0630) и HP17_RS13130 ​​(HP1286)] показали направленно согласованные изменения с использованием qRT-PCR.

    Рисунок 3. Гистограмма, показывающая log 2 кратных изменений при инкубации при 41°C в течение 3 дней по сравнению с 37°C с использованием методов RNA-Seq и qRT-PCR для 10 выбранных DEG. Столбики погрешностей указывают на стандартные отклонения от среднего значения. Гены упорядочены по RNA-Seq log 2 кратность изменений.

    Анализ обогащения путей GO и KEGG

    Для изучения изменений молекулярных и функциональных путей в результате повышения температуры был проведен анализ обогащения путей GO и KEGG в DEG.Хотя ни один из путей не был значительно обогащен после поправки на множественное тестирование, мы обнаружили обогащение при номинальной значимости ( p <0,05) для метаболических процессов GO лекарственных средств, витаминов, супероксидов и активных форм кислорода. Клеточный компонент был обогащен рибосомными, немембранно-связанными органеллами и компонентами цитоплазмы при номинальном пороге. Обогащение молекулярной функции включало структурную составляющую рибосомы, активность оксидоредуктазы, активность супероксиддисмутазы и активность различных симпортеров (дополнительные таблицы 4.1, 4.2). Анализ чувствительности с использованием DEG, определенных с использованием более строгих порогов абсолютного логарифма 2 кратность изменения > 1,5 с поправкой q <0,05, показал аналогичные результаты. Оба анализа показали обогащение GO активными формами кислорода и метаболическими процессами (дополнительная таблица 5).

    ДЭГ обогащены специфическими путями резистентности к метронидазолу

    Все картированные гены были отобраны на основе описания генов и функционируют в четырех широких путях резистентности к метронидазолу: (1) нитро-редуктазы, (2) поглотители кислородных радикалов, (3) поглощение и отток лекарств и (4) связанные с репарацией ДНК.126 генов были связаны с одним из четырех путей (дополнительная таблица 6 и таблица 1). Пути, связанные с нитроредуктазой, были обогащены ДЭГ в условиях повышенной температуры при 41 ° C (перестановка 10 000 раз, эмпирические p = 0,0038). Пути поглотителя кислородных радикалов были погранично значимыми для обогащения ДЭГ (эмпирические p = 0,05).

    Таблица 1. Курирование DEG в путях резистентности к метронидазолу (скорректировано p < 0.05).

    Кроме того, мы провели независимый литературный поиск опубликованных генов, связанных с устойчивостью к метронидазолу. Наш литературный поиск выявил 46 генов-кандидатов, связанных с устойчивостью к метронидазолу, у H. pylori , которые были классифицированы по 10 категориям (дополнительная таблица 7). Все эти гены были обнаружены среди 1552 генов, секвенированных в нашем исследовании. 21 из 46 генов показал дифференциальную экспрессию. Тестирование перестановок не выявило значительного обогащения среди генов устойчивости в целом для DEG (эмпирические p = 0.15). Однако гены, связанные с «окислительно-восстановительными» путями резистентности, были значительно обогащены для DEG с дифференциальной экспрессией 7 из 9 генов (эмпирические p = 0,016). Другие пути с более чем 5 генами в каждой категории не показали обогащения ДЭГ.

    Метронидазол представляет собой пролекарство, которое сначала активируется нитроредуктазой (мутировавшей в резистентных штаммах H. pylori NCTC 11637; Debets-Ossenkopp et al., 1999) с образованием радикалов кислорода, токсичных для бактерий, посредством повреждения ДНК (Cederbrant et al., 1992; ван дер Воуден и др., 2001). Мы обнаружили, что экспрессия NAD(P)H-зависимой оксидоредуктазы ( rdxA [HP17_RS12480]) была снижена (кратное изменение log 2 : -1,51, p = 3,8 × 10 –5 ). Кроме того, мы также обнаружили, что экспрессия супероксидазы дисмутазы ( Sod [HP17_RS11110] ), важного белка в детоксикации свободных кислородных радикалов, была снижена (log 2 кратное изменение: -3,29, p = 4,1 × 10 –45 ) и экспрессия его репрессора транскрипции, регулятора захвата железа ( Fur [HP17_RS13980]) (Tsugawa et al., 2011), был активизирован (log 2 кратность изменения: 2,14, p = 1,7 × 10 –8 ).

    Ключевые последовательности генов устойчивости не изменяются при повышенной температуре

    Мы независимо протестировали установленные генов устойчивости H. pylori rdxA, frxA и fdxB с помощью секвенирования по Сэнгеру, чтобы увидеть, не привели ли повышенные температурные условия к структурным изменениям в этих генах. Все три гена были успешно обнаружены и амплифицированы с помощью ПЦР в обоих температурных условиях (дополнительная фигура 1).Секвенирование по Сэнгеру не выявило каких-либо изменений в генетических последовательностях для rdxA, frxA или fdxB (дополнительные рисунки 2–4).

    Обсуждение

    Наше исследование показало, что повышенная температура ингибирует рост резистентного к метронидазолу штамма H. pylori (NCTC 11637), что согласуется с предыдущими сообщениями об изменениях роста чувствительных штаммов H. pylori (штамм 26695) при повышенных температурах (Jiang and Doyle, 1998). Кроме того, мы представляем новый вывод о том, что повышенная температура (41 ° C) повышает чувствительность резистентного штамма к метронидазолу, о чем ранее не сообщалось.Исследования выявили терморегулируемую устойчивость к антибиотикам у некоторых видов. Francisella tularensis показал повышенную устойчивость к гентамицину при температуре окружающей среды (26°C) по сравнению с температурой тела млекопитающих (37°C) (Loughman et al., 2016). Связанные с температурой изменения экспрессии устойчивости к антибиотикам наблюдались у Acinetobacter baumannii ATCC 17978 (De Silva et al., 2018).

    Это первое исследование, изучающее изменения экспрессии генов при повышении температуры у H.пилори . Транскриптомное профилирование показало хорошую внутреннюю согласованность в условиях лечения и широко распространенные изменения в экспрессии генов с дифференциальной экспрессией более чем одной трети всех генов. Предыдущая литература показала транскриптомные изменения у H. pylori при внезапном снижении температуры (Han et al., 2009). Приблизительно одинаковая доля ДЭГ регулировалась как вверх, так и вниз, как и результаты, наблюдаемые при пониженной температуре.

    Несмотря на то, что никакие специфические пути GO или KEGG не были обогащены для DEG после множественной коррекции тестирования, мы обнаружили номинальные статистические данные, указывающие на то, что метаболические процессы могут быть обогащены.Кроме того, анализы перестановок, основанные на аннотации генов механизмов устойчивости к метронидазолу и конкретных генов устойчивости к метронидазолу, опубликованных в литературе, показали обогащение окислительно-восстановительными путями (поглотитель кислородных радикалов) и нитроредуктазными путями. Метронидазол представляет собой пролекарство, которое сначала активируется нитроредуктазой с образованием кислородных радикалов, токсичных для бактерий, посредством повреждения ДНК (van der Wouden et al., 2001). Теоретически повышенная активность нитроредуктазы приводит к снижению резистентности к метронидазолу.Мы обнаружили снижение экспрессии нитроредуктаз, таких как NAD(P)H-зависимая оксидоредуктаза ( rdxA , HP17_RS12480) при нагревании. Штамм H. pylori NCTC 11637, используемый в этом исследовании, содержит индуцированную транспозоном делецию в rdxA , которая играет ключевую роль в придании устойчивости (Debets-Ossenkopp et al., 1999), таким образом, NAD(P)H-зависимый оксидоредуктаза, продуцируемая мутировавшим геном, не обеспечивает нормального функционирования вне зависимости от уровня экспрессии.

    Кроме того, мы также обнаружили, что экспрессия Sod снижается при повышенной температуре.Sod способствует устойчивости к метронидазолу за счет смягчения повреждений, связанных с кислородными радикалами, а повышенные уровни Sod связаны с развитием устойчивости к метронидазолу (Wassmann and Bruchhaus, 2000; van der Wouden et al., 2001). Интересно, что мы наблюдали повышенную экспрессию регулятора негативной транскрипции Sod , Fur , что также может способствовать снижению экспрессии Sod . Следовательно, другим вероятным механизмом, с помощью которого более высокая температура приводит к снижению устойчивости к метронидазолу, может быть снижение экспрессии Sod , что приводит к повышенной восприимчивости к повреждению супероксидом.ДЭГ в других путях резистентности, таких как репарация ДНК, насосные комплексы оттока, подвижность бактериальных жгутиков, изменения в метаболизме или потенциальные новые пути, также могут играть роль в индуцированном температурой снижении резистентности к метронидазолу. Наконец, мы подтвердили, что ключевые гены устойчивости, rdxA, frxA и fdxB , не мутируют в условиях повышенной температуры, предполагая, что изменения устойчивости могут быть связаны с экспрессией генов или изменениями функции белка. Для детального выяснения этих функциональных механизмов потребуются дальнейшие исследования.Наш подход к изучению транскриптомных изменений, связанных с устойчивостью к антибиотикам, связанной с температурой, может выявить нарушенные генные пути, а также предложить гены-кандидаты и пути в качестве потенциальных новых мишеней для противомикробных препаратов.

    В нашем исследовании изучалось влияние температуры 41°C на рост H. pylori , устойчивость к метронидазолу и транскриптомные изменения. Необходимы дальнейшие исследования для детального изучения механизмов снижения резистентности к метронидазолу.Можно также изучить эффекты при других температурах, а также при использовании штаммов с различными профилями и механизмами резистентности к различным другим антибиотикам, обычно используемым для эрадикации H. pylori . Остается выяснить, отражаются ли также in vitro эффекты повышенной температуры in vivo .

    В настоящее время лечение антибиотиками в сочетании с ингибиторами протонной помпы является основным подходом к лечению инфекций H. pylori . К сожалению, эффективность снизилась из-за быстрого роста резистентности (Fallone et al., 2019). Появление штаммов с множественной лекарственной устойчивостью еще больше усугубляет проблему (Боянова и др., 2019). H. pylori колонизирует и размножается в слизистой оболочке желудка у людей, что делает возможным местное лечение. Поскольку слизистая оболочка желудка млекопитающих может выдерживать температуру до 46°C (Kang et al., 2004), постулируется, что локальное повышение температуры способствует эрадикации H. pylori in vivo в дополнение к терапии на основе антибиотиков. Одним из способов достижения этого может быть хорошо контролируемая локальная фототермическая/магнитная термообработка с использованием наноматериалов, которые ранее продемонстрировали способность подавлять рост бактерий (Mocan et al., 2017; Chen et al., 2018), в том числе H. pylori (Wu et al., 2019). Недавно сообщалось, что золотые нанозвезды @ H. pylori — нанозонды антител могут нацеливаться и убивать H. pylori в желудке модельных животных при лазерном облучении в ближней инфракрасной области (Zhi et al., 2019). Тем не менее, целесообразность и безопасность длительного локального теплового воздействия на слизистую оболочку желудка человека необходимо установить в клинических условиях, чтобы оно стало жизнеспособной стратегией для H.pylori эрадикация.

    В заключение, рост H. pylori и устойчивость к метронидазолу значительно подавлялись при культивировании in vitro при 41°C. Транскриптомный анализ показал дифференциальные изменения экспрессии генов в более чем одной трети генов с признаками обогащения, указывающими на окислительно-восстановительные пути как потенциальные факторы снижения устойчивости к метронидазолу, связанного с температурой. Изменения экспрессии генов в других путях резистентности также могут играть роль в индуцированной температурой чувствительности к метронидазолу.Наши результаты предлагают новый подход к лечению метронидазола и множественной лекарственной устойчивости H. pylori in vivo.

    Заявление о доступности данных

    Первоначальные материалы, представленные в исследовании, общедоступны. Эти данные можно найти здесь: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/sra/PRJNA718481.

    Вклад авторов

    MG провела экспериментов по росту H. pylori и тестирование чувствительности к антибиотикам, а также подготовила рукопись.YH выполнил биоинформатический анализ и курировал родственные гены. XW участвовал в биоинформатическом анализе. HT, FM и BH участвовали в тестировании чувствительности к антибиотикам и анализе экспрессии генов. BS и GW разработали и задумали исследование, участвовали в его координации и написали рукопись. GW нес основную ответственность за окончательный контент. Все авторы прочитали и одобрили окончательный вариант рукописи.

    Финансирование

    Это исследование было поддержано Национальным научным фондом Китая (грант №.51471186) и Национального центра клинических исследований гериатрических заболеваний (грант № NCRCG-PLAGH-2019015). Спонсор не участвовал в разработке исследования, сборе данных, анализе данных, интерпретации данных или написании статьи.

    Конфликт интересов

    Авторы заявляют, что исследование проводилось при отсутствии каких-либо коммерческих или финансовых отношений, которые могли бы быть истолкованы как потенциальный конфликт интересов.

    Дополнительный материал

    Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fmicb.2021.681911/full#supplementary-material

    Дополнительный рисунок 1 | Электрофорез в агарозном геле фрагментов генов H. pylori NCTC 11637, амплифицированных с помощью ПЦР. (A) Дорожки 1–6, ПЦР-фрагменты гена rdxA ; (B) Дорожка 1, ПЦР-фрагменты гена frxA из H. pylori NCTC 11637, культивированные при 37°C; дорожка 2, ПЦР-фрагменты гена frxA из H. pylori NCTC 11637, культивированные при 41°C; Дорожки 3–5, ПЦР-фрагменты гена fdxB из H.pylori NCTC 11637, культивированные при 37°С с парами праймеров 1–3 соответственно, дорожки 6–8, ПЦР-фрагменты гена fdxB из H. pylori NCTC 11637, культивированные при 41°С с парами праймеров 1–3, соответственно.

    Дополнительный рисунок 2 | Взрыв последовательности ДНК гена rdxA в H. pylori 26695 и H. pylori NCTC 11637.По сравнению с H. pylori 26695 структурная вариация гена rdxA в H. pylori NCTC 11637 включала точечные мутации и вставку mini-IS605, которые вызывали инактивацию rdxA и, следовательно, устойчивость к метронидазолу. 11637- rdxA -37: последовательность гена rdxA штамма H. pylori NCTC 11637, культивируемого при 37°C. 11637- rdxA -41: последовательность гена rdxA штамма H. pylori NCTC 11637, культивируемого при 41°C.26695- rdxA : эталонная последовательность гена rdxA H. pylori 26695. Пунктирным прямоугольником показан сайт начала гена rdxA , а сплошным прямоугольником показан сайт терминации гена rdxA . На рисунке показано, что 11637- rdxA -37 и 11637- rdxA -41 абсолютно одинаковы. Область яркого света показала вставку mini-IS605, одного из эндогенных мобильных элементов, в H. pylori NCTC 11637.

    Дополнительный рисунок 3 | ДНК-последовательность доли Ген FRXA в гг. Pylori 26695 и H. pylori NCTC 11637. 11637- FRXA -37: FRXA Последовательность гена H. Pylori NCTC 11637 культивируется в 37°С. 11637- frxA -41: последовательность гена frxA штамма H. pylori NCTC 11637, культивируемого при 41°C. 26695- frxA : эталонная последовательность frxA гена H.pylori 26695. На рисунке показано, что 11637- frxA -37 и 11637- frxA -41 были абсолютно одинаковыми.

    Дополнительный рисунок 4 | ДНК-последовательность доли ген FDXB в г. Pylori 26695 и H. pylori NCTC 11637. 11637- FDXB -37: FDXB Последовательность гена H. Pylori NCTC 11637 37°С. 11637- fdxB -41: последовательность гена fdxB H.pylori NCTC 11637 культивировали при 41°C. 26695- fdxB : эталонная последовательность гена fdxB H. pylori 26695. На рисунке показано, что 11637- fdxB -37 и 11637- fdxB 10427-4 были точно такими же.

    Сокращения

    л.н., биологический процесс; CC, клеточный компонент; КОЕ, колониеобразующие единицы; DEGs, дифференциально экспрессируемые гены; E -тест, Эпсилометрический тест; РЖ, рак желудка; ГО, Генная онтология; Х.pylori , Helicobacter pylori ; KEGG, Киотская энциклопедия генов и геномов; MF, молекулярная функция; МИК, минимальная ингибирующая концентрация; PBS, фосфатно-солевой буфер; ПЦР, полимеразная цепная реакция; Pfam, база данных семейств белков.

    Каталожные номера

    Андерс С., Пил П. Т. и Хубер В. (2015). HTSeq — платформа Python для работы с высокопроизводительными данными секвенирования. Биоинформатика 31, 166–169. doi: 10.1093/биоинформатика/btu638

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Боянова Л., Хаджийский П., Кандиларов Н., Марковская Р. и Митов И. (2019). Множественная лекарственная устойчивость у Helicobacter pylori: текущее состояние и будущие направления. Эксперт. Преподобный Клин. Фармакол. 12, 909–915. дои: 10.1080/17512433.2019.1654858

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Cederbrant, G., Kahlmeter, G., и Ljungh, A. (1992). Предлагаемый механизм устойчивости к метронидазолу у Helicobacter pylori. J. Антимикроб.Чемотер. 29, 115–120. doi: 10.1093/jac/29.2.115

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Chen, W., Wang, Y., Qin, M., Zhang, X., Zhang, Z., Sun, X., et al. (2018). Нацеливание на бактериальную гипоксию для комбинированной биотерапии и фототермической терапии. ACS Nano 12, 5995–6005. doi: 10.1021/acsnano.8b02235

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Де ла Крус, М. А., Арес, М. А., фон Барген, К., Панунци, Л.G., Martinez-Cruz, J., Valdez-Salazar, H.A., et al. (2017). Профилирование экспрессии генов факторов транскрипции Helicobacter pylori в различных условиях окружающей среды. Перед. микробиол. 8:615. doi: 10.3389/fmicb.2017.00615

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Де Сильва, П. М., Чонг, П., Фернандо, Д. М., Уэстмакотт, Г., и Кумар, А. (2018). Влияние температуры инкубации на устойчивость к антибиотикам и факторы вирулентности Acinetobacter baumannii ATCC 17978. Антимикроб. Агенты Чемотер. 62:e01514–17. doi: 10.1128/AAC.01514-17

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Debets-Ossenkopp, YJ, Pot, R.G., van Westerloo, D.J., Goodwin, A., Vandenbroucke-Grauls, C.M., Berg, D.E., et al. (1999). Вставка mini-IS605 и делеция соседних последовательностей в гене нитроредуктазы (rdxA) вызывают устойчивость к метронидазолу у Helicobacter pylori NCTC11637. Антимикроб. Агенты Чемотер. 43, 2657–2662. doi: 10.1128/AAC.43.11.2657

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Эль-Гебали, С., Мистри, Дж., Бейтман, А., Эдди, С.Р., Лучани, А., Поттер, С.К., и другие. (2019). База данных семейств белков Pfam в 2019 г. Nucleic Acids Res. 47, Д427–Д432. doi: 10.1093/nar/gky995

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Fallone, CA, Moss, S.F., and Malfertheiner, P. (2019). Согласование недавних рекомендаций по лечению Helicobacter pylori в период растущей устойчивости к антибиотикам. Гастроэнтерология 157, 44–53. doi: 10.1053/j.gastro.2019.04.011

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Франческо, В. Д., Зулло, А., Хассан, К., Джорджио, Ф., Розания, Р., и Иерарди, Э. (2011). Механизмы устойчивости к антибиотикам Helicobacter pylori : обновленная оценка. Мир J. Гастроинтест. Патофизиол. 2, 35–41. дои: 10.4291/wjgp.v2.i3.35

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Хан, Ю.Х., Лю, В.З., Ши, Ю.З., Лу, Л.К., Сяо, С.Д., и Чжан, К.Х. (2009). Профиль экспрессии генов Helicobacter pylori в ответ на изменение температуры роста. J. Microbiol. 47, 455–465.

    Академия Google

    Hooi, JKY., Lai, W.Y., Ng, W.K., Suen, M.M.Y., Underwood, F.E., Tanyingoh, D., et al. (2017). Глобальная распространенность инфекции Helicobacter pylori : систематический обзор и метаанализ. Гастроэнтерология 153, 420–429.doi: 10.1053/j.gastro.2017.04.022

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Ху, Ю., Чжан, М., Лу, Б., и Дай, Дж. (2016). Helicobacter pylori и устойчивость к антибиотикам — постоянная и неразрешимая проблема. Helicobacter 21, 349–363. doi: 10.1111/hel.12299

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Исхак, С., и Нанн, Л. (2015). Helicobacter pylori и рак желудка: современный обзор. Гастроэнтерол. Гепатол. Скамья-кровать 8 (Приложение 1), S6–S14.

    Академия Google

    Цзян, X., и Дойл, член парламента (1998). Влияние факторов окружающей среды и субстрата на выживаемость и рост Helicobacter pylori . J. Food Prot. 61, 929–933. doi: 10.4315/0362-028x-61.8.929

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Канг Ю.М., Билефельдт К. и Гебхарт Г.Ф. (2004). Сенсибилизация механочувствительных афферентных волокон блуждающего нерва у крыс термическими и химическими раздражителями и язвами желудка. J. Нейрофизиол. 91, 1981–1989 гг.

    Академия Google

    Ким, С.Ю., Чой, Д.Дж., и Чанг, Дж.В. (2015). Антибиотикотерапия Helicobacter pylori : приближается ли конец? Мир J. Гастроинтест. Фармакол. тер. 6, 183–198. дои: 10.4292/wjgpt.v6.i4.183

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Косунен Т.У., Пуккала Э., Сарна С., Сеппала К., Аромаа А., Кнект П. и др. (2011). Рак желудка у финских пациентов после лечения инфекции Helicobacter pylori : когортное исследование. Междунар. Дж. Рак 128, 433–439. doi: 10.1002/ijc.25337

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Лян Ю., Го З., Гао Л., Го Q., Ван Л., Хан Ю. и др. (2016). Роль терморегулируемой ацилтрансферазы (PA3242) в росте, устойчивости к антибиотикам и вирулентности Pseudomonas aeruginosa . Микроб. Патог. 101, 126–135. doi: 10.1016/j.micpath.2016.09.019

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Ливак, К.J. и Schmittgen, TD (2001). Анализ данных об относительной экспрессии генов с использованием количественной ПЦР в реальном времени и метода 2(-Delta Delta C(T)). Методы 25, 402–408. doi: 10.1006/meth.2001.1262

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Лок, Р. А., Кордуэлл, С. Дж., Кумбс, Г. В., Уолш, Б. Дж., и Форбс, Г. М. (2001). Анализ протеома Helicobacter pylori : основные белки типового штамма NCTC 11637. Патология 33, 365–374.

    Академия Google

    Лафман, К., Холл, Дж., Ноултон, С., Синделдекер, Д., Гилсон, Т., Шмитт, Д.М., и соавт. (2016). Температурно-зависимая устойчивость к гентамицину Francisella tularensis опосредована модуляцией поглощения. Перед. микробиол. 7:37. doi: 10.3389/fmicb.2016.00037

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Мокан, Л., Табаран, Ф.А., Мокан, Т., Поп, Т., Мостеану, О., Агостон-Кольдеа, Л., и соавт.(2017). Лазерная термическая абляция полирезистентных бактерий с использованием функционализированных наночастиц золота. Междунар. Дж. Наномед. 12, 2255–2263. doi: 10.2147/IJN.S124778

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Su, P., Li, Y., Li, H., Zhang, J., Lin, L., Wang, Q., et al. (2013). Устойчивость к антибиотикам Helicobacter pylori, выделенных в юго-восточном прибрежном регионе Китая. Helicobacter 18, 274–279. doi: 10.1111/hel.12046

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Такенака, Р., Okada, H., Kato, J., Makidono, C., Hori, S., Kawahara, Y., et al. (2007). Эрадикация Helicobacter pylori снизила заболеваемость раком желудка, особенно кишечного типа. Алимент Фармакол. тер. 25, 805–812. doi: 10.1111/j.1365-2036.2007.03268.x

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Томпсон, Л.Дж., Меррелл, Д.С., Нейлан, Б.А., Митчелл, Х., Ли, А., и Фалькоу, С. (2003). Профилирование экспрессии генов Helicobacter pylori выявило зависящее от фазы роста переключение в экспрессии генов вирулентности. Заразить. Иммун. 71, 2643–2655. doi: 10.1128/iai.71.5.2643-2655.2003

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Thung, I., Aramin, H., Vavinskaya, V., Gupta, S., Park, J.Y., Crowe, S.E., et al. (2016). Обзорная статья: глобальное появление устойчивости к антибиотикам Helicobacter pylori . Алимент Фармакол. тер. 43, 514–533. doi: 10.1111/кв.13497

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Цугава, Х., Suzuki, H., Satoh, K., Hirata, K., Matsuzaki, J., Saito, Y., et al. (2011). Двухаминокислотная мутация регулятора захвата железа определяет устойчивость Helicobacter pylori к метронидазолу. Антиоксидант. Редокс. Сигнал. 14, 15–23. doi: 10.1089/ars.2010.3146

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    ван дер Воуден, Э. Дж., Тайс, Дж. К., Кустерс, Дж. Г., ван Цвет, А. А., и Кляйбеукер, Дж. Х. (2001). Механизм и клиническое значение резистентности к метронидазолу у Helicobacter pylori . Скан. Дж. Гастроэнтерол. Доп. 234, 10–14. дои: 10.1080/003655201753265055

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Вассманн, К., и Бруххаус, И. (2000). Супероксиддисмутаза снижает чувствительность к метронидазолу патогенных простейших Entamoeba histolytica в микроаэрофильных, но не в анаэробных условиях. Арх. Биохим. Биофиз. 376, 236–238. doi: 10.1006/abbi.2000.1707

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Ву, Т., Wang, L., Gong, M., Lin, Y., Xu, Y., Ye, L., et al. (2019). Синергетические эффекты нагревания наночастиц и амоксициллина на ингибирование H. pylori . Дж. Магн. Магн. Матер. 485, 95–104. doi: 10.1016/j.jmmm.2019.04.076

    Полнотекстовая перекрестная ссылка | Академия Google

    Се, К., Мао, X., Хуанг, Дж., Дин, Ю., Ву, Дж., Донг, С., и соавт. (2011). KOBAS 2.0: веб-сервер для аннотации и идентификации расширенных путей и заболеваний. Рез. нуклеиновых кислот. 39, W316–W322.doi: 10.1093/nar/gkr483

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    Zhi, X., Liu, Y., Lin, L., Yang, M., Zhang, L., Zhang, L., et al. (2019). Пероральные рН-чувствительные нанозонды [email protected] для таргетной терапии Helicobacter pylori без нарушения микробиома кишечника. Наномедицина 20:102019. doi: 10.1016/j.nano.2019.102019

    Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Академия Google

    KoreaMed Synapse

    1). Ахмад ММ., Рахман М., Руми А.К., Ислам С., Хук Ф., Чоудхури М.Ф., Джинна Ф., Моршед М.Г., Хасан М.С., Хан А.К., Хасан М. Распространенность Helicobacter pylori в бессимптомной популяции — экспериментальное серологическое исследование в Бангладеш. J Эпидемиол. 7: 251–254. 1997.

    2). Аларкон Т., Доминго Д., Лопес-Бреа М. Расхождения между Е-тестом и методами разбавления агара для тестирования чувствительности к метронидазолу Helicobacter pylori . Дж. Клин Микробиол. 36:1165–1166. 1998.

    3).аль-Моагель М.А., Эванс Д.Г., Абдулгани М.Э., Адам Э., Эванс Д.Дж. мл., Малати Х.М., Грэм Д.Ю. Распространенность инфекции Helicobacter (ранее Campylobacter ) pylori в Саудовской Аравии и сравнение пациентов с симптомами верхних отделов желудочно-кишечного тракта и без них. Am J Гастроэнтерол. 85:944–948. 1990.

    4). Аксон АТ. Терапия Helicobacter pylori : влияние на язвенную болезнь. J Гастроэнтерол Гепатол. 6: 131–137. 1991.

    5).Бейкер С.Н., Стокер С.А., Калвер Д.Х., Торнсберри С. Сравнение теста E с методами тестирования на чувствительность к разбавлению в агаре, микроразведении в бульоне и диффузии в агар с использованием специального заражения собактериями. Дж. Клин Микробиол. 29: 533–538. 1991.

    6). Best LM., Haldane DJ., Bezanson GS., Veldhuyzen van Zanten SJ. Helicobacter pylori : первичная чувствительность к кларитромицину in vitro в Новой Шотландии. Можно J Гастроэнтерол. 11: 298–300. 1997.

    7).Кэмерон Э.А., Пауэлл К.Ю., Болдуин Л., Джонс П., Белл Г.Д., Уильямс С.Г. Helicobacter pylori : устойчивость к антибиотикам и показатели эрадикации в Саффолке, Великобритания, 1991-2001 гг. J Med Microbiol. 53:535–538. 2004.

    8). Cederbrant G., Kahlmeter G., Ljungh A. E-тест для определения чувствительности к противомикробным препаратам Helicobacter pylori . J Антимикробная химиотерапия. 31:65–71. 1993.

    9). Чавес С., Гаданьо М., Тенрейро Р., Кабрита Дж. Оценка чувствительности к метронидазолу в Helicobacter pylori : статистическая проверка и анализ частоты ошибок контрольных точек, определенных диско-диффузионным тестом.Дж. Клин Микробиол. 37:1628–1631. 1999.

    10). Чида-Саката Н., Баба М., Инагава Х., Вада А., Танака Т., Хошихара Ю., Такемото Т. Значение анаэробной предварительной инкубации Helicobacter pylori для измерения чувствительности к метронидазолу с помощью Etest. Микробиол Иммунол. 43:397–401. 1999.

    11). де Вит Н.Дж., Мендив Дж., Зайферт Б., Кардин Ф., Рубин Г. Руководство по ведению H. pylori в учреждениях первичной медико-санитарной помощи: разработка стратегии внедрения.Фам Практ. 17:С27–С32. 2000.

    12). Fallone CA., Barkun AN., Halwani E. Предотвращает ли эрадикация Helicobacter pylori рак желудка? Копать печень Dis. 33:803–804. 2001.

    13). Фок КМ. Язвенная болезнь в 1990-х годах: азиатская перспектива. J Гастроэнтер Гепатол. 12:С23–С28. 1997.

    14). Franzin L., Pennazio M., Cabodi D., Paolo RF., Gioannini P. Чувствительность к кларитромицину и амоксициллину штаммов Helicobacter pylori , выделенных у взрослых пациентов с язвой желудка или двенадцатиперстной кишки в Италии.Карр микробиол. 40:96–100. 2000.

    15). Гисберт Дж.П., Пахарес Дж.М. Helicobacter pylori «спасательная» терапия после неудачи двух курсов эрадикации. Хеликобактер. 10: 363–372. 2005.

    16). Glupczynski Y., Labbé M., Hansen W., Crokaert F., Yourassowsky E. Оценка E-теста для количественного определения чувствительности к противомикробным препаратам Helicobacter pylori . Дж. Клин Микробиол. 29: 2072–2075. 1991.

    17). Глупчинский Я., Мегро Ф., Лопес-Бреа М., Андерсен Л.П. Европейское многоцентровое исследование устойчивости к противомикробным препаратам in vitro у Helicobacter pylori . Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 20:820–823. 2001.

    18). Гриньон Б., Танкович Дж., Мегро Ф., Глупчински Ю., Хассон М.О., Конрой М.С., Эмонд Дж.П., Лулерг Дж., Раймонд Дж., Фошер Дж.Л. Валидация методов диффузии для тестирования чувствительности к макролидам Helicobacter pylori . Устойчивость к микробам. 8:61–66. 2002.

    19). Хип М., Кист М., Стробел С., Бек Д., Лен Н. Вторичная резистентность среди 554 изолятов Helicobacter pylori после неудачной терапии. Eur J Clin Microbiol Infect Dis. 19: 538–541. 2000.

    20). Кинг А. Рекомендации по тестам на чувствительность прихотливых организмов и организмов, требующих особого обращения. J Антимикробная химиотерапия. 48:77–80. 2001.

    21). Линд Т., Мегро Ф., Унге П., Байердорфер Э., О’марин К., Спиллер Р., Вельдхуйзен Ван Зантен С., Bardhan KD., Hellblom M., Wrangstadh M., Zeijlon L., Cederberg C. Исследование MACh3: роль омепразола в эрадикации Helicobacter pylori с помощью 1-недельной тройной терапии. Гастроэнтерология. 116: 248–253. 1999.

    22). Мегро Ф., Лен Н., Линд Т., Байердорфер Э., О’Морен К., Спиллер Р., Унге П., Вельдхуйзен ван Зантен С., Врангстад ​​М., Бурман С.Ф. Тестирование чувствительности Helicobacter pylori к противомикробным препаратам в большом многоцентровом исследовании: исследование MACH 2.Противомикробные агенты Chemother. 43:2747–2752. 1999.

    23). Мейер Дж.М., Силлиман Н.П., Ван В., Сипман Н.Ю., Сагг Дж.Э., Моррис Д., Чжан Дж., Бхаттачария Х., Кинг Э.К., Хопкинс Р.Дж. Факторы риска устойчивости Helicobacter pylori в Соединенных Штатах: партнерство по наблюдению за устойчивостью H. pylori к противомикробным препаратам (SHARP), 1993–1999 гг. Энн Интерн Мед. 136:13–24. 2002.

    24). Мохамед А.Э., Аль-Карави А., Аль-Джума А., Ахмед А.М., Шариг С., Yasawy MI., Osaba O. Helicobacter pylori : заболеваемость и сравнение трех диагностических методов у 196 саудовских пациентов с диспепсией. Гепатогастроэнтерология. 41:48–50. 1994.

    25). Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам (NCCLS). Стандарты эффективности тестирования чувствительности к противомикробным препаратам: одиннадцатое информационное приложение. Национальный комитет клинических лабораторных стандартов, Вилланова, Пенсильвания. 1999.

    26). Национальный комитет по клиническим лабораторным стандартам (NCCLS).Стандарты эффективности для тестирования чувствительности к противомикробным препаратам и утвержденный стандарт M7-A5. Информационное приложение; М100-С10.22. Национальный комитет клинических лабораторных стандартов, Уэйн, Пенсильвания. 2000.

    27). Пикколомини Р., Ди Бонавентура Г., Катамо Г., Карбоне Ф., Нери М. Сравнительная оценка Е-теста, разведения в агаре и микроразведения в бульоне для тестирования чувствительности штаммов Helicobacter pylori к 20 противомикробным агентам. Дж. Клин Микробиол. 35: 1842–1846.1997.

    28). Торрес Х., Каморлинга-Понсе М., Перес-Перес Г., Медрасо-Де ла Гарса А., Дехеса М., Гонсалес-Валенсия Г., Муньос О. Повышение множественной лекарственной устойчивости у штаммов Helicobacter pylori , выделенных у детей и взрослых в Мексике. Дж. Клин Микробиол. 39: 2677–2680. 2001.

    29). Утруп Л.Дж., Фламм Р., Осато М., Ферраро М.Дж., Реллер Л.Б., Барри А., Буш К., Силлиман Н. Стандартизация тестирования чувствительности и диапазоны контроля качества для Helicobacter pylori [аннотация C-31]. В . Программа и тезисы 98-го общего собрания Американского общества микробиологии. Американское общество микробиологии; Вашингтон, округ Колумбия: 1998.

    Добавить комментарий

    Ваш адрес email не будет опубликован.