От простуды таблетки кагоцел: Препарат КАГОЦЕЛ

Содержание

анализ и систематизация данных по результатам доклинических и клинических исследований

ДИ — доверительный интервал

ЖКТ — желудочно-кишечный тракт

ИЛ — интерлейкин

ИФН — интерферон

МНН — международное непатентованное название

НЯ — нежелательные явления

ОР — относительный риск

ОРВИ — острые респираторные вирусные инфекции

ОРЗ — острые респираторные заболевания

ПЦР — полимеразная цепная реакция

СО — слизистая оболочка

Кагоцел представляет собой высокомолекулярное соединение, синтезированное на основе натриевой соли карбоксиметилцеллюлозы и низкомолекулярного природного полифенола. Природный полифенол госсипол открыт более 100 лет назад и сразу стал предметом научного интереса ученых всего мира. В структуре госсипола имеется 6 фенольно-гидроксильных и 2 альдегидные группы. Фенольно-гидроксильные группы обеспечивают высокую противовирусную, противоопухолевую, антиоксидантную и иммуномодулирующую активность природного соединения [1], а альдегидные группы — непрофильные эффекты.

В частности, известно, что госсипол в определенных дозах способен подавлять сперматогенез у некоторых видов животных, тем самым проявляя антифертильный эффект [2]. На основе госсипола ранее создавались различные лекарственные формы, которые использовались в медицинской практике [3]. В том числе госсипол исследовался в качестве мужского контрацептивного средства, блокирующего сперматогенез. Однако применение таких лекарственных средств было ограничено малой терапевтической широтой по величинам используемых доз, особенно при системном введении [4, 5]. В последующем стало известно, что при ковалентном связывании различных молекул с альдегидными группами госсипола значительно снижаются как общая токсичность нового соединения, так и его антифертильное действие при сохранении противовирусной активности [6—10]. Таким образом, создание эффективного и нетоксичного препарата требовало «нейтрализации» именно альдегидных групп, что и было успешно решено с помощью ковалентного соединения последних с карбоксиметилцеллюлозой — макромолекулой, традиционно применяемой в пищевой и медицинской промышленности.
Полученный сополимер, получивший название «кагоцел», является высокомолекулярным соединением, в силу чего практически не проникает через гистогематический барьер, в частности через гематотестикулярный. Необратимая модификация вступивших в ковалентную связь альдегидных групп при сохранении высокой активности фенольных групп обеспечила препарату кагоцел высокую интерфероногенность.

Определение содержания примесей в субстанции кагоцел методом высокоэффективной жидкостной хроматографии показало, что обнаруживаемое количество свободного госсипола в препарате варьирует от 0,0002 до 0,0030%, что в 20—100 раз меньше установленного Государственной фармакопеей Российской Федерации XIII и контролируемого порога содержания примесей в фармацевтических субстанциях (0,05%). Такое низкое содержание примесей свободного госсипола (что соответствует количеству госсипола в максимальной суточной дозировке препарата от 0,0001 до 0,002 мг) обеспечивает гарантированную безопасность препарата в соответствии с инструкцией по медицинскому применению лекарственного средства [11].

Максимально полное удаление примесей свободного госсипола в конечном продукте обеспечивается за счет избытка окисленной карбоксиметилцеллюлозы и многократных стадий очистки. Лекарственное средство кагоцел защищено патентами, действующими на территории Российской Федерации, но не имеет международного непатентованного названия (МНН), в связи с тем что для такого соединения со сложной химической структурой МНН не зарегистрировано. Согласно приказу Минздрава России от 20 декабря 2012 г. N 1175н «Об утверждении порядка назначения и выписывания лекарственных препаратов, а также форм рецептурных бланков на лекарственные препараты, порядка оформления указанных бланков, их учета и хранения», назначение и выписывание лекарственных препаратов осуществляется медицинским работником по МНН, а в его отсутствие — по группировочному наименованию. В отсутствие МНН и группировочного наименования лекарственного препарата он назначается и выписывается медицинским работником по торговому наименованию. В настоящее время решается вопрос о выборе группировочного названия действующего вещества для данного соединения.

Токсичность, мутагенная и аллергогенная активность. По данным литературы, кагоцел не вызывает ни острой, ни хронической токсичности, и это является несомненным достоинством препарата. В то же время оптимальные его концентрации в сотни раз ниже предела его токсичности, определенной на лабораторных животных. Так, при оценке общей токсичности препарата кагоцел в экспериментах на лабораторных животных (самцах и самках белых мышей, белых крысах, кроликах) в ГУ НИИ общей патологии и патофизиологии и ВНИИ химико-фармацевтический институт (ЦХЛС-ВНИХФИ) установлено, что применение препарата в дозах, превышающих лечебную в 20—40 раз, не вызывало развития патологических процессов в органах и тканях животных. В соответствии с требованиями по доклинической проверке токсичности фармацевтических препаратов проведена оценка токсичность препарата кагоцел при однократном введении нарастающих дозировок препарата (острая токсичность) и после длительного повторного введения белым крысам и кроликам в течение 90 дней (испытание хронической токсичности).

Результаты экспериментов показали, что препарат кагоцел имеет очень низкую острую токсичность для животных и относится по этому показателю к группе малотоксичных веществ. При длительном введении препарата кагоцел в дозировках выше терапевтической в 25 раз также не зафиксировано развития патологических процессов в органах и тканях животных. При оценке острой и субхронической токсичности препарата кагоцел на неполовозрелых молодых животных в дозах, превышающих в 10 и 100 раз терапевтическую дозу для человека, также показано отсутствие негативного влияния на организм неполовозрелых животных.

Для оценки мутагенной активности в НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи РАМН проведены исследования с использованием высокочувствительных к мутагенам штаммов бактерий, а также прямые эксперименты на лабораторных животных, которым препарат кагоцел вводился в сверхвысоких дозах (в 150 раз выше лечебной) в течение 8 дней. По результатам этих исследований не обнаружено появления мутантных форм бактерий или нарушений структуры их генома, а также нарушений в хромосомах или зародышевых клетках животных.

В опытах с лимфоцитами крови человека клетки подвергали прямому воздействию заведомо высоких доз препарата кагоцел в течение 24 ч, после чего проверяли жизнеспособность клеток и сохранность структуры хромосом лимфоцитов. В результате исследования не обнаружено гибели лимфоцитов или повреждений наследственного аппарата клеток человека. Полученные результаты свидетельствуют об отсутствии повреждающего действия субстанции кагоцел на ДНК клеток млекопитающих.

Исследование местнораздражающего и кожно-резорбтивного действия препарата кагоцел проводились на кроликах породы Шиншилла при однократном нанесении препарата на кожу и введении в конъюнктивальный мешок глаза. Сенсибилизирующее действие препарата кагоцел оценивалось в реакциях кожной анафилаксии и гиперчувствительности замедленного типа на мышах, реакции прямой дегрануляции тучных клеток на крысах и в конъюнктивальной пробе на морских свинках. Иммуномодулирующее действие изучали на крысах линии Вистар, мышах линий СВА и С57В1/6 в реакциях гемагглютинации, связывания комплемента и гиперчувствительности замедленного типа.

В экспериментах использовали 2 различные дозы препарата кагоцел — эквитерапевтическую (10 мг/кг) и десятикратно ее превышающую (100 мг/кг). В результате изучения аллергенного действия препарата кагоцел на животных показано, что использование препарата как в эквитерапевтической, так и в десятикратно превышающей терапевтическую не сопровождалось развитием аллергических проявлений в реакции общей анафилаксии, конъюнктивальной пробе, реакции дегрануляции тучных клеток и гиперчувствительности замедленного типа. На модели животных продемонстрировано, что кагоцел не оказывает местнораздражающее, кожно-резорбтивное и иммунотоксическое действие.

Влияние препарата кагоцел на генеративную функцию изучено в экспериментах на белых крысах в ФГБУН «Научно-исследовательский центр токсикологии и гигиенической регламентации биопрепаратов Федерального медико-биологического агентства» и ФГБУ «Научно-исследовательский институт общей патологии и патофизиологии» РАМН. Установлено, что кагоцел в условиях длительного ежедневного перорального введения подопытным животным не оказывает отрицательного действия на гонады и плодовитость животных, что подтверждается результатами морфологического анализа семенников и функционального состояния сперматозоидов у самцов, а также результатами оценки воздействия препарата на эмбриогенез и потомство крыс, длительно получавших препарат перед спариванием.

Кроме того, длительное пероральное введение препарата кагоцел крысам в период до спаривания в дозе, превышающей максимальную суточную дозу, рекомендованную для человека, не оказало негативного воздействия на показатели генеративной функции животных и не повлияло на показатели физического развития потомства в антенатальном и постнатальном периодах развития [12]. Однако известно, что семенники обладают повышенной чувствительностью к токсическим воздействиям в период полового созревания [13]. В связи с этим сотрудниками НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга ТНИМЦ РАН проведена экспериментальная оценка возможного токсического действия препарата кагоцел на репродуктивную систему крыс-самцов пубертатного возраста. Процедуры исследования и оценка полученных результатов проводились согласно методическим рекомендациям по доклиническому изучению репродуктивной токсичности новых лекарственных средств [14]. Полученные результаты позволили установить, что введение препарата кагоцел в терапевтической дозе и в 10 раз ее превышающей крысам-самцам пубертатного возраста не приводило к угнетению репродуктивной системы по достижении ими репродуктивного возраста.
Интегральные показатели воспроизводящей функции — способность к оплодотворению и зачатию статистически значимо не снижались, а нарушений процесса образования мужских половых клеток не выявлялось. Судя по показателям эмбриональной гибели и состоянию плодов кагоцел не вызывал появление нежизнеспособных и/или генетически неполноценных гамет [15].

Иммуномодулирующая активность. Многолетние исследования ученых России и Узбекистана, предшествующие созданию препарата кагоцел, были направлены преимущественно на изучение противовирусных и индуцирующих продукцию интерферонов (ИФН) свойств госсипола и его производных [16]. В последующие годы подробное изучение природных производных полифенолов хлопчатника проводилось в лаборатории онтогенеза вирусов НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского и в отделе интерферонов НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи под руководством акад. Ф.И. Ершова [17]. Известно, что кагоцел как полимерное лекарство реализует свои эффекты в значительной мере за счет воздействия на иммунные механизмы слизистой оболочки (СО) желудочно-кишечного тракта (ЖКТ). Кагоцел взаимодействует с иммуноцитами СО ЖКТ, в которой сосредоточено около 70% иммунокомпетентных клеток тела человека. Противовирусное действие препарата кагоцел не является прямым, так как точкой приложения препарата не являются белки вирусов. Противовирусное действие обусловлено способностью стимулировать и восстанавливать синтез собственных ИФН в условиях иммуносупрессивного действия различных вирусов. Эта особенность обеспечивает универсальность действия — способность подавлять развитие разных вирусов как возбудителей гриппа и острых респираторных вирусных инфекций (ОРВИ) другой этиологии, так и вирусов герпеса.

Результаты изучения иммуномодулирующей активности препарата кагоцел обобщены и представлены в табл. 1. В экспериментах in vitro в клетках цельной крови и в изолированных лимфоцитах практически здоровых людей установлено, что иммуномодулирующие свойства препарата кагоцел в значительной мере связаны с биологическими эффектами ИЛ-1β и α-фактора некроза опухоли [23]. Кроме того, ИФН-индуцирующая активность препарата кагоцел зависит от наличия второго костимулирующего молекулярного сигнала. В качестве таких молекулярных коиндукторов могут выступать различные патогенассоциированные молекулярные паттерны, в том числе белки вирусов, бактериальные лектины и полисахариды [23].

Таблица 1. Доклинические исследования биологической активности препарата кагоцел Примечание. ПЦР — полимеразная цепная реакция.

В связи с тем что кагоцел является пероральным нерастворимым препаратом, взаимодействующим с клетками иммунной системы, которые находятся в СО ЖКТ, первичный пик продукции ИФН I типа наблюдается в кишечнике уже через 4 ч после приема препарата, достигая максимальных значений уже через 48 ч, и сохраняется в течение 96—120 ч после однократного приема [24]. Низкая токсичность препарата кагоцел существенно уменьшает риск побочных явлений при повторном и профилактическом применении препарата, а также при его сочетании с другими противовирусными средствами [25].

Противовирусная активность. Оценка противовирусного действия препарата кагоцел ex vivo в отношении различных штаммов вирусов гриппа типа A и B проводилась в ФГБУ «НИИ гриппа» Минздрава России, а также в НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН и в ФГБУ ГНЦ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России. Сотрудниками ФГБУ «НИИ гриппа» Минздрава России в экспериментах на культуре клеток MDCK показано наличие у препарата кагоцел выраженного ингибирующего влияния как на продукцию вируса гриппа A/California/07/09 (h2N1) в культуре, так и на способность вирусного потомства к репликации при втором пассаже культивирования. Кроме того, высокая противовирусная активность препарата кагоцел ex vivo продемонстрирована как в отношении штаммов вируса гриппа типа A: A/Puerto Rico/8/34 (h2N1), A/Belgium/145/09 (h2N1), A/X47 (h4N2), A/Aichi 1/68 (h4N2), A/Aichi 1/86 (h4N2) [26] и высокопатогенного штамма птичьего вируса гриппа A (H5N1), так и в отношении штаммов вируса гриппа типа B: B/Memphis/12/97 (Yamagata-подобный штамм) и B/Brisbane/60/08 (Victoria-подобный штамм). В НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН проводилась оценка противовирусного действия препарата кагоцел ex vivo в культуре клеток Vero в отношении вирусов простого герпеса 1-го и 2-го типов, а также в отношении штаммов вируса простого герпеса 1-го типа, обладающих резистентностью к ацикловиру и двойной резистентностью к ацикловиру и 2-фосфорноуксусной кислоте. Установлено, что препарат оказывает выраженное избирательное антигерпетическое действие и способен полностью предотвращать развитие вирусспецифического цитопатического эффекта в отношении всех включенных в исследование штаммов вируса герпеса [27].

Терапевтическая и профилактическая эффективность. Терапевтическая эффективность применения препарата кагоцел для лечения больных гриппом и ОРВИ другой этиологии доказана результатами многочисленных клинических исследований. Так, в период с 2000 по 2001 г. проведено многоцентровое рандомизированное слепое плацебо-контролируемое клиническое исследование по оценке эффективности и безопасности препарата кагоцел — таблетки 0,012 г для лечения гриппа и других острых респираторных заболеваний (ОРЗ) у взрослых (протокол НМК0100 утвержден заместителем председателя ФК МЗ РФ в 2000 г. ). В исследовании приняли участие 3 центра: НИИ гриппа РАМН (Санкт-Петербург), НИИ вирусологии им. Д.И. Ивановского РАМН (Москва) и Военно-медицинская академия им. С.М. Кирова (Санкт-Петербург). Подтверждение диагноза и этиологическая расшифровка проводились с помощью метода ПЦР, вирусологических, серологических методов, в том числе методом иммунофлюоресцентной экспресс-диагностики, а также реакции связывания комплемента и реакции торможения гемагглютинации в динамике заболевания. Всего в исследование включены 264 больных в возрасте от 18 до 64 лет. Завершил исследование 261 пациент. Из них 187 больных имели лабораторно-подтвержденный диагноз гриппа, а у 74 пациентов диагностированы ОРВИ другой этиологии (парагрипп, аденовирусная инфекция и др.) (табл. 2). Ни у одного пациента, включенного в исследование, не диагностировано наличие сопутствующих хронических заболеваний в стадии декомпенсации. Клиническое обследование больных включало ежедневный осмотр, двукратную термометрию с контролем артериального давления и частоты сердечных сокращений. Всем пациентам до и после лечения проводился клинический анализ крови и биохимический анализ крови (общий билирубин, аланинаминотрансфераза, глюкоза, креатинин, мочевина и общий белок), а также по показаниям — рентгенологическое исследование грудной клетки и электрокардиография. Рандомизация пациентов в группы исследования проводилась по мере поступления больных в клиники. Лечение начинали не позднее 48 ч от появления первых симптомов заболевания. Пациенты основной группы как с диагнозом грипп (n=84), так и с диагнозом ОРВИ другой этиологии (n=37) принимали препарат кагоцел по 2 таблетки 3 раза в день в течение первых 2 дней, затем по 1 таблетке 3 раза в день в течение последующих 2 дней. Суммарная доза препарата на курс лечения составила 216 мг (18 таблеток). Пациенты контрольной группы как с гриппом (n=82), так и с ОРВИ другой этиологии (n=37) принимали таблетки плацебо, которые назначались с той же кратностью и продолжительностью. Группу сравнения (3-ю) составил 21 больной гриппом, которые получали препарат ремантадин в стандартных дозировках. Кроме изучаемых препаратов пациентам по показаниям назначались жаропонижающие (парацетамол) и антибактериальные препараты (пенициллин, 4 млн ед/сут).

Таблица 2. Распределение больных, включенных в исследование НМК0100, по группам

В качестве критериев терапевтической эффективности оценивались сроки нормализации температуры тела, длительность интоксикационного и катарального синдромов, а также частота развития осложнений. Сравнительный анализ динамики клинической картины заболевания показал, что у пациентов, получавших препарат кагоцел, быстрее купировались основные симптомы гриппа (табл. 3). Установлено, что продолжительность лихорадки и таких проявлений интоксикационного синдрома, как головная боль, ломящие боли в мышцах и суставах, у больных гриппом, получавших препарат кагоцел, была существенно меньше, чем у пациентов контрольной группы (p<0,01). Частота наступления благоприятного исхода заболевания (отсутствие лихорадки к 3-му дню лечения) среди пациентов основной группы была в 1,27 раза выше, чем среди пациентов контрольной группы (относительный риск — ОР 1,27 при 95% доверительном интервале — ДИ от 1,05 до 1,54). Кроме того, отсутствие симптомов интоксикации к 3-му дню лечения в 1,38 раза чаще наблюдалось у пациентов, получавших препарат кагоцел (ОР 1,38 при 95% ДИ от 1,14 до 1,67). Однако средние показатели продолжительности катаральных симптомов заболевания и частоты развития осложнений у больных гриппом в различных группах исследования были сопоставимы (табл. 4). Необходимо лишь отметить, что продолжительность кашля у пациентов, получавших препарат кагоцел, была меньше, чем у пациентов, получавших препарат ремантадин.

Таблица 3. Продолжительность клинических проявлений у пациентов с гриппом, включенных в исследование НМК0100, дни Примечание. * — p<0,01.

Таблица 4. Частота развития осложнений гриппа у пациентов, включенных в исследование НМК0100

Сравнительный анализ динамики клинической картины ОРВИ другой этиологии показал, что у пациентов, получавших препарат кагоцел, также быстрее купировались основные симптомы заболевания. Так, продолжительность лихорадки и проявлений интоксикационного синдрома в группе больных, получавших препарат кагоцел, была в 1,4 раза меньше, чем в контрольной группе (p<0,01).

Анализ данных клинико-лабораторного обследования пациентов основной группы позволил установить, что препарат кагоцел в суточной дозе 0,072 и 0,036 г и курсовой дозе 0,216 г не дает побочных или токсических эффектов. Применение препарата кагоцел в лечении больных как гриппом, так и ОРВИ другой этиологии характеризовалось хорошей переносимостью. Ни в одном случае не зарегистрировано аллергических и побочных реакций.

Результаты оценки интерферонового статуса у пациентов, получавших препарат кагоцел и плацебо, подтвердили клинические наблюдения терапевтической эффективности препарата кагоцел, а также результаты проведенных ранее доклинических исследований. Установлено, что препарат кагоцел вызывал индукцию ИФН-α и ИФН-γ, в то время как препарат плацебо не оказывал существенного влияния на показатели системы ИФН. Так, у абсолютного большинства больных до начала лечения выявлено снижение титров индуцированных ИФН-α и ИФН-γ, повышение титров сывороточных ИФН и выявлена отсутствующая норме способность лейкоцитов крови к спонтанной продукции ИФН. В результате лечения у большинства больных, получавших препарат кагоцел, отмечались нормализация титров индуцированных ИФН-α и ИФН-γ и снижение титров сывороточных ИФН. У абсолютного большинства пациентов in vitro выявлена высокая чувствительность лейкоцитов крови к интерферониндуцирующему действию препарата кагоцел, которая сохранялась на протяжении всего курса лечения [28].

В последующие годы терапевтическая эффективность препарата кагоцел в отношении более быстрого купирования симптомов гриппа и ОРВИ неоднократно подтверждалась в пострегистрационных клинических исследованиях. Так, в 2016 г. опубликованы результаты многоцентрового наблюдательного исследования, в котором участвовали 420 больных старше 18 лет, обратившихся в различные медицинские учреждения г. Еревана за период с октября 2012 г. по сентябрь 2016 г. с клиническими признаками ОРЗ: ринофарингита, ринофарингита с трахеобронхитом или ринофарингита с трахеобронхитом с признаками бронхообструкции. Все больные были разделены на 2 группы. Пациенты основной группы (n=360) кроме традиционного симптоматического лечения получали препарат кагоцел в дозировках согласно инструкции. Пациенты контрольной группы (n=120) получали только симптоматическое лечение. Результаты исследования позволили установить, что у больных, получавших препарат кагоцел, быстрее, чем у пациентов контрольной группы, нормализовалась температура тела, купировались симптомы интоксикации и катаральные явления в носоглотке и трахее. Кроме того, у пациентов основной группы почти в 2 раза оказалась короче и продолжительность периода нетрудоспособности (3,6 и 6,5 сут соответственно; р<0,05). При расчете ОР развития осложнений установлено, что у пациентов, получавших препарат кагоцел, реже наблюдались осложнения в виде синуситов, отитов, тонзиллита, бронхита и бронхопневмонии, чем у пациентов контрольной группы. Ни у одного больного, получавшего препарат кагоцел, не наблюдались нежелательные явления (НЯ) и связанные с приемом препарата отклонения в показателях клинического и биохимического анализов крови [29].

Еще в одном наблюдательном клиническом исследование по оценке терапевтической эффективности и безопасности препарата кагоцел в лечение больных ОРЗ приняли участие 150 пациентов, работавших в условиях воздействия вредных производственных факторов низкой интенсивности. Исследование проведено в 2014 г. на базе Центра медицинской профилактики ФГБНУ «Новосибирский НИИ терапии и профилактической медицины». Все пациенты находились на амбулаторном лечении с установленным диагнозом ОРЗ. Основную группу составили 100 больных, получавших препарат кагоцел в сочетании с симптоматической терапией. Контрольную группу составили 50 больных, получавших только симптоматическую терапию. При оценке эффективности лечения установлено, что к 3-му дню лечения у пациентов, принимавших кагоцел, интоксикационный и катаральный синдромы менее выражены, чем у больных контрольной группы. Анализ дополнительно назначаемых лекарственных препаратов показал, что в основной группе у всех пациентов отсутствовала необходимость в назначении антибактериальных и муколитических препаратов, а длительность приема других средств симптоматической терапии составила 1,8±0,1 дня. В контрольной группе средняя длительность приема лекарственных средств составила 3,9±0,4 дня (p<0,05), что существенно больше. Кроме того, в 10% случаев больным контрольной группы требовалось назначение пенициллинов и муколитиков. Таким образом, у пациентов, получавших препарат кагоцел, отмечено более быстрое купирование проявлений интоксикационного и катарального синдромов, что привело к уменьшению потребности в приеме симптоматических средств и способствовало более быстрому восстановлению трудоспособности. У пациентов основной группы не отмечено обострений хронического бронхита. Препарат хорошо переносился и его применение не сопровождалось развитием побочных эффектов [30].

В 2016 г. опубликованы результаты многоцентрового международного наблюдательного исследования FLU-EE, целью которого стало изучение течения клинической картины гриппа и ОРВИ в повседневной клинической практике с оценкой эффективности и безопасности применяемой противовирусной терапии. В исследование включены 18 946 пациентов в возрасте от 18 до 93 лет с установленным диагнозом грипп или ОРВИ, проходивших лечение амбулаторно в 262 центрах России, Армении, Молдовы и Грузии. Согласно плану исследования осуществлялось 3 визита, на каждом из которых проводился подробный медицинский осмотр с определением тяжести отдельных симптомов и заболевания в целом. В рамках исследования проведена динамическая оценка назначаемой в клинической практике лекарственной, в том числе противовирусной, терапии ОРВИ и гриппа, а также наличия осложнений, обусловливающих необходимость назначения системных антибиотиков. Противовирусная терапия назначалась 17 316 (91,4%) пациентам, при этом препарат кагоцел получали 17 266 (91,1%) пациентов. На основании проведенной противовирусной терапии пациентов разделили на 2 группы. В основную группу вошли 17 266 пациентов, получавших препарат кагоцел в соответствии с инструкцией, начиная с первого визита. В группу сравнения вошли 1680 пациентов, не получавших в составе терапии препарат кагоцел. По возрасту и полу пациентов, по срокам обращения за медицинской помощью и начала лечения исследуемые группы больных были сопоставимы. Сравнительный анализ динамики клинической картины заболевания показал, что в группе больных, получавших кагоцел, к 3-му визиту наблюдалось более выраженное, чем в группе сравнения, снижение частоты основных симптомов заболевания. Так, снижение частоты выявления озноба среди пациентов основной группы к 3-му визиту было в 1,4 раза больше, чем у пациентов группы сравнения, слабости — в 1,11 раза больше, болей в мышцах и суставах — в 2,20 раза больше, ринита — в 2,47 раза больше, склерита/конъюнктивита — в 1,81 раза больше, кашля — в 1,81 раза больше, а зуда в горле — в 3,18 раза больше (p<0,05). Максимальное различие между динамикой клинической симптоматики больных основной группы и группы сравнения зарегистрировано в отношении температурной реакции. Снижение частоты выявления гипертермии к 3-му визиту у пациентов, получавших кагоцел, было 4,79 раза больше, чем у пациентов группы сравнения (p<0,01). Кроме того, применение препарата кагоцел позитивно влияло на течение гриппа и ОРВИ другой этиологии, что выражалось также в уменьшении числа пациентов с осложнениями данных заболеваний и получавших системные антибактериальные препараты. По результатам проведенного исследования авторы сделали следующий вывод: включение препарата кагоцел в состав терапии гриппа и ОРВИ достоверно приводило к улучшению клинической картины заболевания, что выражалось в более существенном и опережающем группу сравнения регрессе основных анализируемых симптомов заболевания, снижении частоты возникновения осложнений и назначении системных антибактериальных препаратов. Итогом эффективного терапевтического действия препарата кагоцел стало улучшение результатов лечения и ускорение сроков выздоровления. Авторы также отметили высокий уровень безопасности препарата кагоцел. Всего зарегистрировано 14 (0,08%) случаев НЯ, которые предположительно могут иметь связь с приемом препарата. Все случаи НЯ были нетяжелыми [31, 32].

Сотрудниками кафедры инфекционных болезней Тихоокеанского государственного медицинского университета в 2015—2016 гг. проведено открытое проспективное сравнительное исследование по оценке эффективности применения монотерапии гриппа противовирусным препаратом в сравнении с комбинированной терапией с применением двух противовирусных препаратов с разным механизмом действия у 200 больных гриппом, А (Н1N1) pdm09. У всех больных клинический диагноз подтвержден индикацией вируса в назофарингеальных смывах методом ПЦР с предварительной обратной транскрипцией в реальном времени.

Все пациенты случайным образом разделены на 4 группы по 50 человек, сопоставимые по срокам поступления в стационар, возрасту, полу и срокам лечения от начала заболевания. Пациенты 1-й группы получали монотерапию умифеновиром; 2-й группы — монотерапию осельтамивиром; 3-й группы — умифеновир в сочетании с кагоцелом; 4-й группы — осельтамивир в сочетании с кагоцелом.

Введение в терапевтическую схему индуктора ИФН кагоцела, по сравнению с соответствующей монотерапией осельтамивиром и умифеновиром, позволяет сократить длительность лихорадки (для 1-й и 3-й группы p<0,0005; для 2-й и 4-й группы p<0,005), общей интоксикации (для групп 1-й и 3-й p<0,05; для 2-й и 4-й группы p<0,05) и катарального синдрома (для 1-й и 3-й группы p<0,05; для 2-й и 4-й группы p<0,05), снизить частоту возникновения пневмоний (p<0,05) и синуситов (p<0,05). Отмечена также хорошая переносимость пациентами проводимого лечения [33].

Профилактическая эффективность препарата кагоцел в отношении гриппа и ОРВИ другой этиологии оценивалась в слепом плацебо-контролируемом рандомизированном исследовании, которое проводилось в период сезонного подъема заболеваемости гриппом и ОРВИ. Всего в исследовании принял участие 331 человек. Из них 208 принимали препарат кагоцел четырехнедельными курсами: 2 дня прием препарата и 5 дней перерыв, всего на курс 16 таблеток. Плацебо принимали 123 человека. Полученные результаты позволили установить, что лица, принимавшие кагоцел, заболевали гриппом и ОРВИ в 2,5 раза реже, чем лица, получавшие плацебо. Кроме того, у заболевших, но принимавших ранее с целью профилактики препарат кагоцел, реже возникали осложнения, быстрее купировались лихорадочные реакции и симптомы интоксикации [34].

Оценка влияния препарата кагоцел на профессионально значимые качества сотрудников ОАО РЖД проведена в 2009 г. на базе Центра профессиональной патологии и профессиональной пригодности ЦКБ № 1 ОАО РЖД. В исследование включены 30 пациентов в возрасте от 23 до 59 лет, из них 28 мужчин и 2 женщины. Всем пациентам назначался препарат кагоцел по схеме лечения гриппа: в первые 2 дня по 2 таблетки 3 раза в день, в последующие 2 дня по одной таблетки 3 раза в день. Всего на курс 18 таблеток, длительность курса 4 дня. Всем пациентам до начала лечения и в день его окончания проводилось психофизиологическое исследование, целью которого служило выявление возможного влияния препарата на функциональное состояние пациента и его профессионально важные качества: переключение внимания, бдительность, процессы возбуждения и торможения нервной системы. Полученные результаты оценивались в соответствии с указанием Министерства путей сообщения от 01.12.1999 г. № 310у «О совершенствовании психофизиологической службы на железнодорожном транспорте». По результатам проведенного исследования установлено, что применение препарата кагоцел таблетки 12 мг по схеме лечения гриппа и ОРВИ лицам операторских профессий не сопровождалось ухудшением их профессионально значимых качеств. Препарат кагоцел не вызывал развития гриппоподобных симптомов и хорошо переносился пациентами. Ни в одном случае применение препарата кагоцел не сопровождалось развитием НЯ, токсических и аллергических реакций [35].

Результаты экспериментальных и клинических исследований демонстрируют высокий профиль безопасности и широкий спектр противовирусной активности препарата кагоцел, эффективность для профилактики и лечения ОРВИ и гриппа, вызываемого различными штаммами. Применение препарата с лечебной целью при гриппе и ОРВИ приводит к сокращению продолжительности основных клинических симптомов заболевания, снижает частоту развития осложнений, хорошо переносится пациентами. Профилактическое применение снижает заболеваемость ОРВИ и гриппом, облегчает течение заболевания и уменьшает риск развития осложнений. Несмотря на проведенные клинические испытания и длительный опыт практического применения, пострегистрационные исследования по препарату продолжаются и в настоящее время.

Авторы заявляют об отсутствии конфликта интересов.

Кагоцел® — таблетки, 12 мг, инструкция, способ применения и дозы, побочные действия, отзывы о препарате — Энциклопедия лекарств РЛС

Фармакологическое действиепротивовирусное.

Фармакодинамика

Основным механизмом действия лекарственного препарата Кагоцел® (далее по тексту — Кагоцел) является способность индуцировать продукцию интерферонов. Кагоцел вызывает образование в организме человека т.н. поздних интерферонов, являющихся смесью альфа- и бета-интерферонов, обладающих высокой противовирусной активностью. Кагоцел вызывает продукцию интерферонов практически во всех популяциях клеток, принимающих участие в противовирусном ответе организма: Т- и В- лимфоцитах, макрофагах, гранулоцитах, фибробластах, эндотелиальных клетках. При приеме внутрь одной дозы Кагоцела титр интерферонов в сыворотке крови достигает максимальных значений через 48 ч.

Интерфероновый ответ организма на введение кагоцела характеризуется продолжительной (до 4–5 сут) циркуляцией интерферонов в кровотоке. Динамика накопления интерферонов в кишечнике при приеме внутрь кагоцела не совпадает с динамикой титров циркулирующих интерферонов. В сыворотке крови продукция интерферонов достигает высоких значений лишь через 48 ч после приема кагоцела, в то время как в кишечнике максимум продукции интерферонов отмечается уже через 4 ч.

Препарат Кагоцел, при назначении в терапевтических дозах, нетоксичен, не накапливается в организме. Препарат не обладает мутагенными и тератогенными свойствами, не канцерогенен и не обладает эмбриотоксическим действием.

Наибольшая эффективность при лечении препаратом Кагоцел достигается при его назначении не позднее 4-го дня от начала острой инфекции. В профилактических целях препарат может применяться в любые сроки, в т.ч. и непосредственно после контакта с возбудителем инфекции.

Фармакокинетика

Через 24 ч после введения в организм препарат Кагоцел накапливается, в основном, в печени, в меньшей степени в легких, тимусе, селезенке, почках, лимфоузлах. Низкая концентрация отмечается в жировой ткани, сердце, мышцах, семенниках, мозге, плазме крови. Низкое содержание кагоцела в головном мозге объясняется высокой молекулярной массой препарата, затрудняющей его проникновение через ГЭБ. В плазме крови препарат находится преимущественно в связанном виде.

При ежедневном многократном введении кагоцела Vd препарата колеблется в широких пределах во всех исследованных органах. Особенно выражено накопление препарата в селезенке и лимфатических узлах. При приеме внутрь в общий кровоток попадает около 20% введенной дозы препарата. Всосавшийся препарат циркулирует в крови, в основном, в связанной с макромолекулами форме: с липидами — 47%, с белками — 37%. Несвязанная часть препарата составляет около 16%.

Выведение: из организма препарат выводится, в основном, через кишечник: через 7 суток после введения из организма выводится 88% введенной дозы, в т.ч. 90% — через кишечник и 10% — почками. В выдыхаемом воздухе препарат не обнаружен.

Показания

профилактика и лечение гриппа и других острых респираторных вирусных инфекций у взрослых и детей в возрасте от 3 лет;

лечение герпеса у взрослых.

Противопоказания

повышенная чувствительность к компонентам препарата;

дефицит лактазы, непереносимость лактозы, глюкозо-галактозная мальабсорбция;

беременность;

период лактации;

возраст до 3 лет.

Применение при беременности и кормлении грудью

В связи с отсутствием необходимых клинических данных препарат противопоказано принимать при беременности и в период грудного вскармливания.

Побочные действия

Возможно развитие аллергических реакций.

Если любые из указанных в инструкции побочных эффектов усугубляются, или пациент заметил любые другие побочные эффекты, не указанные в инструкции, следует сообщить об этом врачу.

Взаимодействие

Кагоцел хорошо сочетается с другими противовирусными препаратами, иммуномодуляторами и антибиотиками (аддитивный эффект).

Способ применения и дозы


Внутрь, независимо от приема пищи.

Для лечения гриппа и ОРВИ взрослым назначают в первые 2 дня по 2 таблетки 3 раза в день, в последующие 2 дня — по 1 таблетке 3 раза в день. Всего на курс лечения — 18 таблеток, длительность курса — 4 дня.

Профилактика гриппа и ОРВИ у взрослых проводится 7-дневными циклами: 2 дня по 2 таблетки 1 раз в день, 5 дней перерыв, затем цикл повторить. Длительность профилактического курса — от 1 недели до нескольких месяцев.

Для лечения герпеса у взрослых назначают по 2 таблетки 3 раза в день в течение 5 дней. Всего на курс лечения — 30 таблеток, длительность курса — 5 дней.

Для лечения гриппа и ОРВИ детям от 3 до 6 лет назначают в первые 2 дня по 1 таблетке 2 раза в день, в последующие 2 дня — по 1 таблетке 1 раз в день. Всего на курс — 6 таблеток, длительность курса — 4 дня.

Для лечения гриппа и ОРВИ детям от 6 лет назначают в первые 2 дня по 1 таблетке 3 раза в день, в последующие 2 дня — по 1 таблеткк 2 раза в день. Всего на курс — 10 таблеток, длительность курса — 4 дня.

Профилактика гриппа и ОРВИ у детей от 3 лет проводится 7-дневными циклами: 2 дня по 1 таблетке 1 раз в день, 5 дней перерыв, затем цикл повторить. Длительность профилактического курса — от 1 недели до нескольких месяцев.

Если после лечения улучшения не наступает или симптомы усугубляются, или появляются новые симптомы, необходимо проконсультироваться с врачом.

Применять препарат следует только согласно тем показаниям, тому способу применения и в тех дозах, которые указаны в инструкции.

Передозировка

При случайной передозировке рекомендуется назначить обильное питье, вызвать рвоту.

Форма выпуска

Таблетки, 12 мг. По 10 таблеток. в контурной ячейковой упаковке из пленки ПВХ/ПВДХ и фольги алюминиевой с термосвариваемым покрытием. 1, 2 или 3 контурные ячейковые упаковки вместе с инструкцией по применению помещают в пачку из картона.

Производитель

1. ООО «НИАРМЕДИК ПЛЮС». 125252, Россия, Москва, ул. Авиаконструктора Микояна, 12.

Адрес места производства: 123098, Россия, Москва, ул. Гамалеи, 18, стр. 4, 10, 11, 18, 33.

2. ООО «Хемофарм». 249030, Россия, Калужская обл., г. Обнинск, Киевское ш., 62.

3. ООО «НИАРМЕДИК ФАРМА». 2490030, Россия, Калужская обл., г. Обнинск, ул. Королева, 4, оф. 402.

Адрес места производства: 249010, Россия, Калужская обл., Боровский р-н, в р-не дер. Маланьино, Киевское ш., 120, корп. 3. 4, 5.

Юридическое лицо, на имя которого выдано регистрационное удостоверение: ООО «НИАРМЕДИК ПЛЮС». 125252, Россия, Москва, ул. Авиаконструктора Микояна, 12.

Претензии потребителей направлять по адресу: 125252, Россия, Москва, ул. Авиаконструктора Микояна, 12.

Тел./факс: (495) 385-80-08.

e-mail: [email protected]

Условия отпуска из аптек

В защищенном от света месте, при температуре не выше 25 °C

Хранить в недоступном для детей месте.

Не применять по истечении срока годности, указанного на упаковке.

Экспресс-консилиум Как врачи выбирают препараты для лечения ОРВИ и гриппа: Общество: Россия: Lenta.ru

С гриппом знаком каждый. Шансы заболеть в период межсезонья особенно велики. Высокая температура, общая слабость, апатия, насморк и другие неприятные симптомы надолго выбивают человека из колеи. Что делать, чтобы не заболеть? Что делать, если вы все же подхватили грипп? В любом случае специалисты советуют запастись Кагоцелом.

Кагоцел можно применять и для профилактики, и для лечения. Почему же из всего разнообразия противовирусных препаратов медики отдают предпочтение именно Кагоцелу? Мы решили выяснить это у врачей самых разных специальностей.

Дмитрий, иммунолог

Всем известно, что организм человека сам способен бороться с вирусами. Ключевую роль в этом играют интерфероны. От того, как много клеток вовлечено в их выработку, зависит, разовьется инфекционная болезнь или нет. Кагоцел стимулирует синтез интерферонов практически во всех клетках. Это и клетки иммунной системы (лимфоциты, макрофаги, нейтрофилы), и клетки, выстилающие кровеносный сосуд изнутри и контактирующие с кровью, в которой, как правило, и содержатся болезнетворные микробы, а также фибробласты, имеющиеся в любом органе. Кагоцел уникален еще и тем, что приводит к образованию позднего интерферона, отличающегося максимальной активностью в отношении вирусов. И эта активность долго сохраняется — 4–5 суток, а пик ее наблюдается уже через 48 часов после приема первой таблетки.

Таким образом, Кагоцел мобилизует практически все клетки человеческого организма на борьбу с вирусной инфекцией. Начинать лечение необходимо не позже четвертого дня с момента возникновения клинической симпотматики. Это тоже одно из преимуществ Кагоцела, поскольку многие противовирусные средства эффективны, только если их принимать со второго дня заболевания.

Ольга, терапевт

Я — терапевт, поэтому ко мне на прием приходят самые разные пациенты с гриппом. У многих есть сопутствующие проблемы. Одна из самых распространенных — хронические заболевания почек. Большинство противовирусных препаратов выводятся с мочой (фильтруются в почках), поэтому перечень средств для лечения гриппа у этой категории больных крайне ограничен. Вот почему уже несколько лет пациентам с патологией почек я рекомендую Кагоцел. Он на 95 процентов выводится кишечником — и только 5 процентов фильтруется в почках. Его можно применять как для лечения гриппа, так и для профилактики гриппозной инфекции.

Светлана, педиатр

Мне как педиатру постоянно приходится сталкиваться с так называемыми «часто болеющими детьми». Считается, что ребенка можно отнести к этой группе, если повторные заболевания верхних дыхательных путей происходят у них 6–8 раз в год. Частые и особенно тяжело протекающие ОРВИ, следующие одно за другим, оказывают на организм ребенка негативное воздействие, снижают функциональную активность иммунитета, что чревато серьезными осложнениями.

Поэтому мне очень важно, чтобы в моем арсенале был препарат, способный не только справляться с вирусной инфекцией, но и стимулировать собственный иммунитет ребенка. Отечественный индуктор интерферона, Кагоцел полностью удовлетворяет этому условию. После приема первой таблетки максимальная концентрация интерферона в кишечнике отмечается уже через 4 часа. Через несколько дней лечения Кагоцелом нормализуется температура, а проявления интоксикации уменьшаются. Однако препарат применяется в педиатрии не только для лечения, но и для профилактики ОРВИ. Профилактический прием Кагоцела в течение месяца предохраняет ребенка от заболевания гриппом и ОРВИ на 4 месяцев после окончания курса.

Сергей, пульмонолог

Известно, что грипп опасен не сам по себе, а своими осложнениями, причем чаще всего развивается бактериальная пневмония. Дело в том, что вирусы ослабляют местный иммунитет, поэтому условно патогенные бактерии из безобидных обитателей дыхательных путей превращаются в болезнетворных агентов. Развитие пневмонии — прямое показание для антибактериальной терапии. Но в сочетании с вирусной инфекцией добиться желаемого терапевтического результата непросто. На помощь приходит Кагоцел, который я всегда назначаю своим пациентам из-за его аддитивного эффекта. Этим термином в медицине называется усиление терапевтической активности, то есть Кагоцел не только убивает вирусы как первичную причину болезни, но и повышает эффективность антибиотиков, борющихся с осложнениями гриппа.

Имеются противопоказания. Перед применением проконсультируйтесь со специалистом

Материал подготовлен при поддержке компании «Ниармедик»

Кагоцел таблетки 12мг №10х2 — Планета Здоровья

Наименование

Кагоцел

Описание

Таблетки от белого с коричневатым оттенком до светло-коричневого цвета круглые двояковыпуклые с вкраплениями коричневого цвета.

Форма выпуска

Таблетки, 12 мг. По 10 таблеток в контурную ячейковую упаковку из пленки ПВХ/ПВДХ (поливинилхлоридной/поливинилиденхлоридной – PVC/PVDC) и фольги алюминиевой с термосвариваемым покрытием. 1, 2 или 3 контурные ячейковые упаковки вместе с инструкцией по применению помещают в пачку из картона.

Дозировка

12 мг

Особые указания

В связи с незрелостью глотательного рефлекса у детей младше 6-летнего возраста могут возникать трудности при проглатывании твердых лекарственных форм, что связано с повышенным риском аспирации. Необходимо учитывать индивидуальные особенности ребенка и соблюдать меры осторожности при использовании таблеток Кагоцел у детей младше 6 лет. Для достижения лечебного эффекта прием препарата следует начинать не позднее четвертого дня от начала заболевания.

Фармакодинамика

Механизм действия препарата Кагоцел определяется его способностью индуцировать продукцию интерферонов. Кагоцел стимулирует интерфероновый ответ поздней фазы (24-48 часов), сопровождающийся повышением содержания в организме интерферонов типов I/II, обладающих высокой противовирусной активностью и обеспечивающих иммунную защиту от вирусного инфекционного агента. При приеме внутрь одной дозы препарата Кагоцел титр интерферонов в сыворотке крови достигает максимальных значений через 48 часов. В то же время, в тканях кишечника максимум продукции интерферонов отмечается уже через 4 часа. Иммунный ответ организма на введение кагоцела характеризуется продолжительной (до 4-5 суток) циркуляцией интерферонов в кровотоке. Препарат Кагоцел, при назначении в терапевтических дозах, нетоксичен, не накапливается в организме. При исследованиях у животных не выявлено мутагенных, тератогенных, канцерогенных и эмбриотоксических свойств кагоцела. Влияние кагоцела на фертильность (в частности, на сперматогенез) у человека не изучалось. В длительных исследованиях на животных не выявлено влияния препарата на репродуктивные свойства как мужских, так и женских особей. Наибольшая эффективность при лечении препаратом Кагоцел достигается при его назначении не позднее 4-го дня от начала острой инфекции. В профилактических целях препарат может применяться в любые сроки, в том числе и непосредственно после контакта с возбудителем инфекции.

Фармакокинетика

Через 24 часа после введения в организм кагоцел накапливается, в основном, в печени, в меньшей степени в легких, тимусе, селезенке, почках, лимфоузлах. Низкая концентрация отмечается в жировой ткани, сердце, мышцах, семенниках, мозге, плазме крови. Низкое содержание кагоцела в головном мозге объясняется высокой молекулярной массой препарата, затрудняющей его проникновение через гематоэнцефалический барьер. В плазме крови препарат находится преимущественно в связанном виде. При ежедневном многократном введении кагоцела объем распределения колеблется в широких пределах во всех исследованных органах. Особенно выражено накопление препарата в селезенке и лимфатических узлах. При приеме внутрь в общий кровоток попадает около 20% введенной дозы препарата. Всосавшийся препарат циркулирует в крови, в основном, в связанной с макромолекулами форме: с липидами – 47%, с белками – 37%. Несвязанная часть препарата составляет около 16%. Выведение: из организма препарат выводится, в основном, через кишечник: через 7 суток после введения из организма выводится 88% введенной дозы, в том числе 90% – через кишечник и 10% – почками. В выдыхаемом воздухе препарат не обнаружен.

Показания к применению

Препарат Кагоцел применяют у взрослых и детей в возрасте от 3 лет в качестве профилактического и лечебного средства при гриппе и других острых респираторных вирусных инфекциях (ОРВИ), а также как лечебное средство при герпесе у взрослых.

Способ применения и дозы

Для приема внутрь. Для лечения гриппа и ОРВИ взрослым назначают в первые два дня – по 2 таблетки 3 раза в день, в последующие два дня – по одной таблетке 3 раза в день. Всего на курс – 18 таблеток, длительность курса – 4 дня. Профилактика гриппа и ОРВИ у взрослых проводится 7-дневными циклами: два дня – по 2 таблетки 1 раз в день, 5 дней перерыв, затем цикл повторить. Длительность профилактического курса – от одной недели до нескольких месяцев. Для лечения герпеса у взрослых назначают по 2 таблетки 3 раза в день в течение 5 дней. Всего на курс – 30 таблеток, длительность курса – 5 дней. Для лечения гриппа и ОРВИ детям в возрасте от 3 до 6 лет назначают в первые два дня – по 1 таблетке 2 раза в день, в последующие два дня – по одной таблетке 1 раз в день. Всего на курс – 6 таблеток, длительность курса – 4 дня. Для лечения гриппа и ОРВИ детям в возрасте от 6 лет назначают в первые два дня – по 1 таблетке 3 раза в день, в последующие два дня – по одной таблетке 2 раза в день. Всего на курс – 10 таблеток, длительность курса – 4 дня. Профилактика гриппа и ОРВИ у детей в возрасте от 3 лет проводится 7-дневными циклами: два дня – по 1 таблетке 1 раз в день, 5 дней перерыв, затем цикл повторить. Длительность профилактического курса – от одной недели до нескольких месяцев. Если после лечения улучшения не наступает или симптомы усугубляются, или появляются новые симптомы, необходимо проконсультироваться с врачом. Применяйте препарат только согласно тем показаниям, тому способу применения и в тех дозах, которые указаны в инструкции.

Применение при беременности и в период лактации

В связи с отсутствием необходимых клинических данных препарат противопоказано принимать в период беременности и в период грудного вскармливания (см. раздел «Противопоказания»).

Меры предосторожности

Влияние на способность управлять транспортными средствами, механизмами Влияние препарата на способность к управлению транспортными средствами, механизмами не изучено.

Взаимодействие с другими препаратами

Препарат Кагоцел хорошо сочетается с другими противовирусными препаратами, иммуномодуляторами и антибиотиками (аддитивный эффект).

Противопоказания

— Беременность и период грудного вскармливания; — Возраст до 3 лет; — Повышенная чувствительность к компонентам препарата; — Дефицит лактазы, непереносимость лактозы, глюкозо-галактозная мальабсорбция.

Состав

Действующее вещество: кагоцел (в пересчёте на сухое вещество) – 12 мг. Вспомогательные вещества: крахмал картофельный – 10 мг, кальция стеарат – 0,65 мг, Лудипресс (состав: лактозы моногидрат – от 91 % до 95 %, повидон (Коллидон 30) – от 3,0 % до 4,0 %, кросповидон (Коллидон CL) – от 3,0 % до 4,0 %) – до получения таблетки массой 100 мг.

Передозировка

При случайной передозировке рекомендуется назначить обильное питье, вызвать рвоту.

Побочное действие

Возможно развитие аллергических реакций. Если любые из указанных в инструкции побочных эффектов усугубляются, или Вы заметили любые другие побочные эффекты, не указанные в инструкции, сообщите об этом врачу.

Условия хранения

В защищенном от света месте при температуре не выше 25 °C. Хранить в недоступном для детей месте. Срок годности 4 года. По истечении срока годности, указанного на упаковке, препарат не должен применяться.

Купить Кагоцел таблетки 12мг №10х2 в аптеке

Цена на Кагоцел таблетки 12мг №10х2

Инструкция по применению для Кагоцел таблетки 12мг №10х2

форма выпуска, инструкция по применению, аналоги, отзывы

Кагоцел
Групповая принадлежность:

Противовирусное средство


Описание для торгового наименования:

Кагоцел


Лекарственная форма:

таблетки


Фармакологическое действие:

Противовирусное средство. Индуцирует продукцию позднего интерферона (смесь альфа- и бета-интерферонов, обладающих высокой противовирусной активностью) во всех популяциях клеток, принимающих участие в противовирусном ответе организма: Т- и В-лимфоциты, макрофаги, гранулоциты, фибробласты, эндотелиальные клетки. При приеме внутрь одной дозы титр интерферона в сыворотке крови достигает максимума через 48 ч. Интерфероновый ответ организма характеризуется продолжительной (до 4-5 сут) циркуляцией интерферона в плазме крови. Динамика накопления интерферона в кишечнике при приеме внутрь (максимум продукции через 4 ч) не совпадает с динамикой титра циркулирующего интерферона в сыворотке крови (максимум через 48 ч). В терапевтических дозах нетоксичен, не кумулирует, не обладает мутагенным, канцерогенным, тератогенным и эмбриотоксическим действием. Наибольшая эффективность достигается при назначении не позднее 4-го дня от начала острой инфекции. С целью профилактики может назначаться в любые сроки, в т.ч. непосредственно после контакта с возбудителем инфекции.


Показания:

Грипп, ОРВИ, герпес.


Противопоказания:

Гиперчувствительность, беременность.


Побочные действия:

Аллергические реакции.


Способ применения и дозы:

Внутрь. Лечение гриппа и ОРВИ: в первые 2 дня — 2 таблетки 3 раза в день, в последующие 2 дня — 1 таблетка 3 раза в день. Курсовая доза — 18 таблеток, курс лечения — 4 дня. Лечение герпеса: 2 таблетки 3 раза в день в течение 5 дней. Курсовая доза — 30 таблеток.


Взаимодействие:

Аддитивный эффект отмечается при назначении с др. противовирусными, иммуномодулирующими ЛС, антибиотиками.


Минздрав рекомендует россиянам схемы лечения гриппа A/h2N1

Кроме того, чиновники в качестве альтернативной схемы рекомендуют сочетать альфа и гамма интерфероны, принимать их от двух до шести раз в день в течении десяти дней. После перерыва в одну неделю повторяется та же схема лечения.

«Для лечения беременных женщин (начиная с 14-ой недели беременности) можно использовать Интерферон альфа-2b в суппозиториях — по 500000 МЕ два раза в день (суточная доза 1000000ME) в течение пяти суток», — говорится в пресс-релизе.

Лечение среднетяжелых и тяжелых случаев

В лечении гриппа, который протекает со средней тяжестью, врачи рекомендуют комбинировать кагоцел и арбидол.

В первый день от начала болезни нужно принимать кагоцел по две таблетки три раза в день, последующие три дня — по одной таблетке три раза в день. Кроме того, нужно принимать арбидол четыре раза в сутки по две таблетки каждые шесть часов в течение семи-десяти дней.

Кроме арбидола и кагоцела, специалисты советуют не пренебрегать альфа и гамма интерферонами по той же схеме, которая описана выше.

Можно также лечиться ингаверином — суточная доза 90 мг один раз в день в течение пяти дней, тамифлю — по 75 мг в два раза в день в течение пяти дней. Препараты необходимо принимать в первые дни болезни.

Для лечения беременных женщин (начиная с 14-ой недели беременности) можно использовать альфа интерфероны в суппозиториях по 500000МЕ два раза в день в течение пяти суток. Затем необходима поддерживающая терапия по 150000МЕ два раза в день по два раза в неделю в течение трех недель.

Рекомендации по лечению больных с тяжелыми формами гриппа такие же, как при лечении среднетяжелых случаев.

Кроме того, специалисты рекомендуют не злоупотреблять симптоматическим лечением, но по рекомендации врача можно принимать антибактериальные средства, анальгетики, нестероидные противовоспалительные препараты, противоаллергические средства.

Болезнь лучше предупредить

В качестве профилактики заболевания медики рекомендуют принимать кагоцел (два дня по две таблетки в день, затем — перерыв пять дней и еще два дня по две таблетки в день), или арбидол при непосредственном контакте с больным гриппом или ОРВИ (по две таблетки в день в течение 10-14 дней), или альфа и гамма интерфероны.

Беременным женщинам (начиная с 14-ой недели беременности) можно использовать альфа интерферон в суппозиториях по 150000МЕ два раза в день в течение пяти суток.

Противовирусный препарат «Кагоцел» содержит госсипол, провоцирующий бесплодие у мужчин. Росгвардия закупает это лекарство коробками

Несмотря на непрекращающуюся критику, создатель «Кагоцела» Феликс Ершов продолжает называть свою разработку одной из самых совершенных.  

«Кагоцел» — высокомолекулярный природный полимер, получаемый путем химического синтеза из растительного сырья. Я сам постоянно принимаю «Кагоцел» — в профилактических целях, и всем рекомендую этот замечательный препарат для защиты как в начале гриппозного сезона, так и на его пике, когда уже вокруг все болеют», — рассказывал Ершов «Московскому комсомольцу» накануне нового сезона продаж препарата — в сентябре 2019 года.

Однако практически все российские исследования «Кагоцела», в том числе посвященные госсиполу и фертильности, проводились не независимыми учеными, а коллегами Ерошова из «Ниармедик». Так, в одном из них утверждается, что госсипол действительно содержится в составе «Кагоцела» (при этом в «Ниармедик» старательно избегают употребления самого слова «госсипол», заменяя его химической формулой), но создателям препарата якобы удалось купировать его вредные свойства.

Дело в том, что госсипол вреден для человека, если попадает в организм в свободном состоянии. Но целлюлоза, добавляемая в процессе производства в «Кагоцел», связывает вещество. Правда, есть один нюанс. Исследования специалисты «Ниармедик» проводили только в лабораторных условиях, имитируя состав желудочного сока (в нем госсипол не высвобождался).

Однако дополнительных исследований на биологических моделях in vivo и in vitro, гарантирующих безопасность «Кагоцела» в соответствии с действующими требованиями Минздрава РФ, не проводилось. 

У западных ученых пока нет четкого представления о том, как применять госсипол без вреда для человека. В одной из публикаций, размещенных на сайте национальной медицинской библиотеки США, говорится, что в случае с коровами связанный госсипол все-таки может высвобождаться в процессе пищеварения.

границ | Паттерн экспрессии генов лимфоцитов пейеровой бляшки, подвергшихся воздействию кагоцела, указывает на то, что рецепторы распознавания образов опосредуют его действие

Введение

Продукты распада бактерий, грибков и вирусов запускают быструю реакцию иммунных клеток и некоторых других типов клеток в организме как часть врожденного иммунного ответа (Kieser and Kagan, 2017). Среди этих продуктов распада (патоген-ассоциированные молекулярные паттерны, PAMP) полисахариды бактериальной и грибковой клеточной стенки при связывании с толл-подобными рецепторами (Iwasaki, Medzhitov, 2004), рецепторы декстина-1 и, возможно, другие типы рецепторов (Brown, 2005) вызывают воспаление, продукцию интерферона, способствуют выживанию и пролиферации иммунных клеток (Iwasaki, Medzhitov, 2004; Brown, 2005; Kieser, Kagan, 2017).Некоторым полисахаридам природного происхождения приписывают иммуномодулирующую активность, среди них лентинан (Borchers et al., 1999) и растительные β-D-глюканы (Estrada et al., 1997; Tada et al., 2009) привлекли наибольшее внимание как возможные терапевтические агенты, в то время как другие, такие как зимозан (CARLO и FIORE, 1958) или каррагинан (Necas и Bartosikova, 2013), оказались полезными исследовательскими инструментами в качестве индукторов иммунного ответа/воспаления. Следует отметить, что иммуномодулирующие эффекты глюканов были зарегистрированы у различных видов млекопитающих, птиц, рыб и даже беспозвоночных, что указывает на участие эволюционно законсервированного пути/механизма (Vos et al., 2007).

Встречающиеся в природе глюканы стимулируют активность макрофагов, адаптивные иммунные реакции, опосредованные В- и Т-клетками, и обладают противораковой активностью (Brown and Gordon, 2003). Некоторые из глюканов традиционно используются в качестве средств от множества заболеваний (Bisen et al., 2010). Кагоцел — синтетический сополимер модифицированной карбоксиметилцеллюлозы и природного полифенола госсипола, разработанный в НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Гамалеи и реализуемый в России и странах СНГ ООО «Ниармедик» в качестве перорального индуктора интерферона.Госсипол в количестве не более 3% по массе ковалентно связан с карбоксиметилцеллюлозным остовом. Основанием для включения госсипола в полимер были его иммуномодулирующие свойства (Ершов и др., 1988), в то время как ковалентное связывание иммобилизовало полифенол и, таким образом, снижало его токсичность (Eagle, Castillon, 1948) или возможное влияние на мужскую фертильность (Lim et al. др., 2019). Действительно, госсипол не высвобождается из кагоцела при хранении или инкубации с желудочным или кишечным соком (Синицын и соавт., 2020). В исследованиях хронической и репродуктивной токсичности при применении умеренных доз кагоцела побочных эффектов выявлено не было (Боровская, 2017).

Клинические данные подтверждают эффективность кагоцела для лечения гриппа (Фазылов и др., 2016; Сологуб, Цветков, 2017) и других вирусных инфекций (Галегов и др., 2002; Логинова и др., 2020) в качестве монотерапии или часть комбинированного лечения (Попов и др., 2017b). Анализ концентрации интерферона в плазме крови больных гриппом свидетельствует о повышении уровня цитокинов при применении кагоцела (Popov et al., 2017а). Однако молекулярные механизмы действия кагоцела изучены недостаточно. Стремясь дать представление о возможных механизмах действия кагоцела, мы использовали лимфоциты пейеровых бляшек мышей в качестве тест-системы, намеренно избегая дальнейшей изоляции конкретных типов клеток для сохранения клеточных взаимодействий. Для предпочтительной стимуляции Т-лимфоцитов мы использовали конканавалин А в качестве митогена или, для имитации вирусной инфекции, комбинацию конканавалина А и лиганда TLR3 poly I:C. Стимулированные лимфоциты инкубировали с различными концентрациями кагоцела или, в качестве положительного контроля, с четко определенными глюканами, лентинаном и β-D-глюканом овса, и анализировали на продукцию цитокинов и паттерны экспрессии генов через 24 и 72 часа после обработки.

Результаты

Продукция цитокинов

Содержание цитокинов в культуральных средах анализировали через 24 и 72 ч культивирования с различными полисахаридами (рис. 1). Дисперсионный анализ, как и ожидалось, выявил значительное влияние времени и митогенной стимуляции на концентрацию всех исследованных цитокинов, за исключением ИЛ-10, на который не влиял тип митогена (рис. 1). Среди полисахаридов β-D глюкан оказывал значительное влияние на TNFα (F (1.000, 10.00) = 14.1, p = 0,004), IL2 (F (1.000, 10.00) = 5.26, p = 0,045), IL10 (F (1.000, 10.00) = 5,78, p = 0,037) и уровни INFγ (F (1,000, 10,00) = 5,46, p = 0,042). Лентинан повышал уровни TNFα (F (1,000, 10,00) = 5,81, p = 0,037) и IL6 (F (1,000, 10,00) 6 = 8,006 ).015), в то время как INFγ снижался при таком лечении (F (1,000, 10,00) = 15,48, p = 0,003). Кагоцел не оказывал последовательного влияния на TNFα, IL2, IL6 и INFγ, однако инкубация лимфоцитов с кагоцелом повышала концентрацию IL10 (F (3,000, 30,00) = 6,27, p = 0,002) в кажущейся дозе. зависимым образом (рис. 1D). Повышенная продукция IL-10 клетками, обработанными кагоцелом, может объяснить отсутствие влияния препарата на продукцию провоспалительных цитокинов стимулированными лимфоцитами.

РИСУНОК 1 . Концентрации TNFα (A) , IL6 (B) , IL2 (C) , IL10 (D) и INFγ (E) в средах через 24 (светлые столбцы) и 72 ч (заштрихованные столбцы) ) культивирования лимфоцитов пейеровой бляшки, стимулированных конканавалином А (ConA, незакрашенные столбцы) в отсутствие или в присутствии поли I:C лиганда TLR-3. Клетки обрабатывали физиологическим раствором (H 2 O), 300 мкг/мл β-D глюкана овса (βDGlu), 300 мкг/мл лентинана (Lent) или 30–300 мкг/мл кагоцела.Результаты представляют собой среднее значение ± sem из 6 независимых запусков эксперимента. Статистические данные о воздействии наркотиков см. в тексте.

Экспрессия гена

После получения данных об экспрессии гена, выраженных в виде нормализованных подсчетов, сначала мы провели кластерный анализ. Полученная кластеризация соответствовала плану эксперимента, при этом двумя самыми верхними факторами в выходной иерархии были время и примененный митоген (дополнительная таблица S1). Таким образом, мы пришли к выводу, что наш экспериментальный дизайн эффективно изменил характер экспрессии генов, связанных с воспалением, в лимфоцитах пейеровых бляшек мышей.

Затем, для общего представления данных, мы подсчитали гены с повышенной и пониженной регуляцией по сравнению с соответствующими контрольными клетками для каждой комбинации применяемого препарата, стимуляции митогеном и времени. Как показано на Фигуре 2, при обработке полисахаридами в лимфоцитах, обработанных конканавалином А, через 24 ч инкубации преобладало подавление, за исключением лентинана, который усиливал экспрессию гена. Через 72 часа инкубации количество генов с повышенной экспрессией превысило количество генов с подавленной экспрессией.В отличие от этого, когда стимуляция конканавалином А дополнялась поли I:C в качестве лиганда TLR3, количество генов с повышенной активностью обычно было выше, чем количество генов, связанных с воспалением, с подавленной регуляцией. Количество генов с подавленной регуляцией увеличивалось с концентрацией кагоцела в инкубационной среде в клетках, стимулированных конканавалином А. Следует отметить, что в присутствии поли I:C в обработанных кагоцелом лимфоцитах поли I:C при некоторых концентрациях препарата гены с подавленной экспрессией не выявлены.

РИСУНОК 2 . Количество повышающих (красный) и понижающих (синий) генов, связанных с воспалением, в лимфоцитах пейеровых бляшек, стимулированных конканавалином А (ConA), в отсутствие или в присутствии лиганда TLR-3 поли I:C через 24 и 72 ч после обработки 300 мкг /мл β-D глюкана овса (βDGlu), 300 мкг/мл лентинана (Lent) или 30–300 мкг/мл кагоцела по сравнению с контрольными лимфоцитами, обработанными физиологическим раствором. РНК собирали в 3 независимых циклах эксперимента.

Тепловые карты, представленные на рисунке 3, дают более подробное представление о данных (полный список см. в дополнительной таблице S2).Для этой презентации мы сгруппировали реагирующие гены с помощью биологического процесса Gene Ontology. В целом паттерны экспрессии имели сходный профиль для всех анализируемых процессов. Понижающая регуляция преобладала в клетках, стимулированных конканавалином А, тогда как при более мощной стимуляции комбинацией конканавалина А и поли I:C повышающая регуляция была более частой. Более выраженные изменения экспрессии генов наблюдались при 72 ч культивирования с полисахаридами, тогда как через 24 ч ответы экспрессии генов были более умеренными.Наконец, в то время как паттерны экспрессии при обработке клеток β-D-глюканом и лентинаном были сходными, эффекты кагоцела отличались от этих двух глюканов. Кагоцел наносили на клетки в трех различных концентрациях; Следует отметить, что наиболее выраженные эффекты на экспрессию генов наблюдались, как это ни парадоксально, при самой низкой концентрации препарата.

РИСУНОК 3 . Тепловая карта (log 2 -кратное изменение экспрессии) генов, участвующих в врожденном иммунном ответе, GO:0045087 (A) , адаптивном иммунном ответе, GO:0002250 (B) , защитном ответе на бактерии, GO: 0042742 (C) , защитный ответ на вирус, GO:0051607 (D) , и гуморальный иммунный ответ, GO:0019730 (E) в лимфоцитах пейеровых бляшек мышей, стимулированных конканавалином A (ConA) в отсутствие или в присутствии лиганда TLR-3 поли I:C через 24 и 72 ч после обработки 300 мкг/мл β-D глюкана овса, 300 мкг/мл лентинана или 30-300 мкг/мл кагоцела (Kag) по сравнению с контролем, физиологическим раствором- обработанные, лимфоциты.РНК собирали в 3 независимых циклах эксперимента.

Гены-респондеры в обработанных кагоцелом лимфоцитах участвовали в регуляции синтеза макромолекул (GO:0031326, GO:0010556, GO:2000112), регуляции транскрипции (GO:0006355, GO:2001141, GO:16) и апоптоз (GO:0006915, GO:0012501, GO:0008219). В частности, в лимфоцитах пейеровой бляшки активировались гены, кодирующие компоненты системы комплемента (C1qa, C2, C3), цитокины, хемокины и передачу сигналов липидов (Ccl21a, Il11, Il1b, Il23a, Il5, Ltb4r2, Alox15, Pla2g4a). , Ptger1), передачу внутриклеточного сигнала (Mapkapk5, Hras) и, что важно, врожденное восприятие и ответ на патогены (Defa-rs1, Ifna1, Tlr2, Mrc1, Mx2).

Факторы транскрипции, связанные с реакцией генов

Стремясь выяснить возможный механизм действия кагоцела, мы использовали гены-респондеры в качестве исходных данных для анализа обогащения сайтов связывания факторов транскрипции. Сопоставив результаты этого анализа для различных экспериментальных условий, мы идентифицировали несколько факторов транскрипции, которые потенциально могут управлять вызванными кагоцелом изменениями экспрессии в лимфоцитах пейеровой бляшки. Среди этих факторов наибольшее кратное обогащение имели CEBP, гомеобокс, регуляторные факторы интерферона, NFκB, ретиноидный X-рецептор альфа, Stat, Tead4, цинковый палец и белки, содержащие домен SCAN.Следует отметить, что для двух контрольных глюканов, β-D-глюкана овса и лентинана, были выделены практически идентичные факторы транскрипции. Полный список идентифицированных транскрипционных факторов представлен в дополнительной таблице S3.

Мастер-регуляторы

Мы продолжили поиск механизмов действия кагоцела и провели анализ потенциальных мастер-регуляторов и путей. Как правило, для этого типа анализа на выходе появляется широкий спектр возможных регуляторов, а не один кандидат.Чтобы исключить бессмысленные результаты, мы сопоставили данные для одного и того же препарата в разных экспериментальных условиях (митоген и момент времени), а в случае кагоцела мы также могли включить в этот анализ данные для трех доз. Регуляторы и пути с одиночными или бессистемными заходами не учитывались. Таким образом, мы смогли идентифицировать пути cIAP, CIKS, dok9, MEKK1, FXR, IKK, IRAK, TRAF, dsRNA:TLR3:TRIF и несколько путей, включающих передачу сигналов TLR, в качестве потенциальных регуляторов, лежащих в основе действия кагоцела на экспрессию гена лимфоцита.Полный список идентифицированных главных регуляторов представлен в дополнительной таблице S4.

Обсуждение

Здесь мы приводим результаты анализа экспрессии генов в лимфоцитах пейеровой бляшки мышей при обработке сополимером карбоксиметилцеллюлозы и госсипола, кагоцелом или встречающимися в природе глюканами, лентинаном и β-D глюканом овса в качестве положительного контроля. Полисахариды индуцировали выраженные изменения экспрессии воспалительных и иммунных генов, что указывает на рецепторы распознавания образов как на вероятные мишени действия кагоцела.

Мы использовали первичную культуру лимфоцитов пейеровой бляшки мышей в качестве тест-системы для изучения эффектов кагоцела. Причин такого выбора несколько. Во-первых, хорошо задокументировано, что глюканы эффективны при пероральном введении, и то же самое верно для синтетического глюкана, кагоцела, который принимается перорально в качестве иммуностимулятора. Однако из-за высокой молекулярной массы этих полимеров (>10 5 ) они плохо всасываются из кишечника (Vos et al., 2007). Фармакокинетические данные для полисахаридов с аналогичной молекулярной массой свидетельствуют о том, что их биодоступность при пероральном воздействии составляет от сотых до десятых долей процента (Mehvar and Shepard, 1992). В соответствии с этим только около 10% дозы кагоцела всасывается из желудочно-кишечного тракта крыс при пероральном введении, предположительно низкомолекулярной фракции полимера (Андреев-Андриевский и др., 2019). Несоответствие между очевидным действием глюканов на иммунную систему и их плохой абсорбцией может быть разрешено путем наблюдения за специфическим накоплением полисахаридов в пейеровых бляшках после перорального воздействия.Так, после употребления каррагинана его идентифицировали в пейеровых бляшках (Nicklin et al., 1988). Глюканы могут интернализоваться М-клетками при связывании с рецептором dectin-1 (Smet et al., 2013), а кишечные эпителиоциты могут способствовать поглощению частиц антигенов над пейеровыми бляшками (Howe et al., 2014). Хотя распределение кагоцела в различных тканях стенки кишечника не изучалось, мы предполагаем, что кагоцел может проникать в пейеровы бляшки при пероральном воздействии, что делает их потенциальным местом его действия на иммунитет.

Лимфоциты пейеровой бляшки представляют собой смешанную популяцию, состоящую из 60 % В-клеток, 25 % Т-клеток, 10 % дендритных клеток (CD11c+) и менее 5 % макрофагов или полиморфноядерных нейтрофилов (Лефрансуа и Лайке, 1996; Юнг и др., 2010). Хотя это верно для свежевыделенных клеток, мы использовали протокол стимуляции, специально способствующий пролиферации Т-клеток (Dwyer and Johnson, 1981). Таким образом, учитывая относительно длительный период культивирования с митогенами до применения препаратов, можно предположить, что большую часть исследуемой культуры составляли разнообразные субпопуляции Т-клеток.

Накопленные за последние годы существенные данные свидетельствуют о том, что связь между дыхательными путями и иммунной системой кишечника имеет решающее значение для противовирусной защиты хозяина. С одной стороны, респираторные вирусы могут вызывать повреждение кишечника, как это наблюдается при гриппе (Wang et al., 2014) или, совсем недавно, при SARS-CoV-2 (Scaldaferri et al., 2020). Инфицированные эпителиальные клетки могут представлять вирусные антигены для усиления клеточно-опосредованного иммунитета (Nguyen et al., 1998). В то же время иммунная система кишечника, прежде всего пейеровы бляшки, является важным местом эмиграции лимфоцитов (Rothkötter et al., 1999; Хайдеггер и др., 2013). Следует отметить, что дендритные клетки составляют до 4% иммигрирующих клеток (Rothkötter et al., 1999). Основываясь на существующих связях между микробиотой, кишечной иммунной системой и общей резистентностью хозяина к инфекции (Ichinohe et al., 2011; Clemente et al., 2012), было предложено несколько стратегий, использующих модификацию диеты или прямое интродукция некоторых штаммов комменсальных бактерий (Villena et al., 2012; Goto et al., 2013; Illiano et al., 2020).Интересно, что результаты противогриппозной вакцинации зависят от восприятия комменсальной микробиоты с помощью TLR (Oh et al., 2014), поэтому разрабатываемые пероральные вакцины против гриппа напрямую используют лиганды TLR в качестве адъювантов (Lycke, 2012). Более того, некоторые полисахариды были предложены в качестве адъювантов для пероральных вакцин (Smet et al., 2013).

Гены, экспрессия которых в кишечных лимфоцитах после инкубации с кагоцелом активируется, включают несколько важных участников врожденного иммунного ответа, компонентов системы комплемента, систем противовирусной защиты и хемокинов.Хотя значение системы комплемента плазмы для иммунитета очевидно, важность экспрессии компонентов системы комплемента в Т-клетках, о которой недавно сообщалось, не совсем ясна, но может быть связана с выживанием и дифференцировкой клеток (Hansen et al., 2018). ). Взаимодействие передачи сигналов от TLR и рецепторов к комплементарным анафилатоксинам значительно изменяет иммунный ответ (Song, 2012). Меньше известно об актуальности экспрессии кининогена в лимфоцитах.Храс1, а. к.а. p21 является негативным регулятором клеточного цикла (Khanna et al., 2005), способным индуцировать остановку клеточного цикла после активации TLR4/TRIF в рамках противовирусного ответа (Mlcochova et al., 2020). Важно отметить, что H-Ras способен усиливать передачу сигналов интерферона (Chen et al., 2017). Белок теплового шока 27 кДа выполняет множество функций, следует отметить, что после высвобождения во внеклеточное пространство HSP27 способен активировать NF-κB зависимым от TLR4 образом (Shi et al., 2019).

Несколько генов, важных для миграции лимфоцитов или хемотаксиса, были среди генов-респондеров в лимфоцитах, обработанных кагоцелом.Таким образом, CCL21, лиганд CCR7, активировался в PP-лимфоцитах, ко-стимулированных конканавалином A и Poly I:C, но не при стимуляции только конканавалином A. Важно отметить, что нарушение передачи сигналов CCL21/CCR7 ослабляет иммунный ответ на различные вирусы, препятствуя миграции клеток и правильному взаимодействию во время презентации антигена (Comerford et al., 2013). Рецептор 2 лейкотриена B4 является еще одним медиатором клеточной миграции с повышенной экспрессией. Интересно, что хемотаксические эффекты лигандов TLR опосредуются этим рецептором (Lefebvre et al., 2010). При лечении кагоцелом лимфоциты ПП экспрессировали больше РНК TLR2, сенсора бактериальных липопротеинов и липотейхоевых кислот. Одним из разнообразных лигандов этого рецептора является зимозан, грибковый β-глюкан (Sato et al., 2003). Однако известно, что TLR2 связывает широкий спектр лигандов и образует функциональные гетеродимеры с другими типами молекул TLR и не-TLR (Oliveira-Nascimento et al., 2012). Одним из партнеров по димеризации TLR2 является TLR6, который также активировался в клетках, обработанных кагоцелом, наряду с 7 и 9, однако в меньшей степени по сравнению с TLR2.

IL23 представляет собой провоспалительный цитокин с многогранным действием на дифференцировку Т-клеток и продукцию INFγ (Guo et al., 2019). Согласно обзору (Novelli and Casanova, 2004), дефицит IL-23 приводит к существенному снижению резистентности к различным ДНК- и РНК-вирусам, поэтому индукция экспрессии IL-23 является одним из очевидных положительных эффектов кагоцела для противовирусной защиты лимфоцитов. IFIT3 представляет собой белок, индуцируемый интерфероном, который также активируется при вирусной инфекции и двухцепочечной РНК, способный ингибировать репликацию вируса и инициацию трансляции, а также клеточную миграцию и пролиферацию (Fensterl and Sen, 2011).Одной гиперэкспрессии IFIT3 было достаточно для подавления репликации вируса в модели на свиньях (Li et al., 2015). Другим геном, активируемым в лимфоцитах PP, обработанных кагоцелом, является родственная дефензину последовательность 1, богатый цистеином белок, специфичный для кишечника грызунов и не обнаруживаемый у человека (Andersson et al., 2012).

Белки 1 и 2 резистентности к миксовирусам повышались при лечении кагоцелом, что обеспечивает еще одно механистическое объяснение эффективности препарата. Эти ГТФазы ингибируют различные вирусы, блокируя ранние этапы репликации вируса (Haller et al., 2015). Рекомбинантный Mx-1, модифицированный для облегчения проникновения в клетки, был способен эффективно подавлять инфекцию гриппа in vitro и in vivo (Jung et al., 2019). Интересно, что белок MX может индуцироваться интерферонами как I, так и III типа (Haller et al., 2015). Из-за ограничений системы анализа экспрессии генов у нас нет экспериментальных данных по экспрессии интерферона III типа. Учитывая, что оба интерферона типа I и III одновременно индуцируются TLR (Ank et al., 2008) и активации дектина-1 (Dutta et al., 2020), заманчиво предположить, что в нашем исследовании интерферон III типа активировался в клетках, обработанных кагоцелом, и опосредовал некоторые эффекты препарата. Еще одним компонентом систем клеточной противовирусной защиты, реагирующих на аппликацию кагоцела, была 2-5′-олигоаденилатсинтетаза 2, фермент, способный прерывать репликацию вируса посредством активации РНКазы L и независимым от олигоаденилата способом (Kristiansen et al., 2010). ).

Ifna1 был одним из генов с наибольшим кратным изменением (>5) в клетках, обработанных кагоцелом, по сравнению с контрольными лимфоцитами PP.Аналогичное увеличение продукции интерферона, индуцированное кагоцелом, ранее сообщалось с использованием клеточных линий человека (Вершинина и др., 2002). Противовирусные свойства интерферона исследуются годами, и поиск в PubMed «альфа-интерферон И вирус» дает более 23 тысяч ссылок. Имеется еще больше информации об использовании интерферонов для лечения различных вирусных инфекционных заболеваний. Важно отметить, что потенцирующий эффект кагоцела на экспрессию Ифна проявлялся в присутствии лиганда TLR-3 poly I:C, что свидетельствует о вовлечении дополнительных механизмов индукции интерферона.Сообщалось, что как dectin-1 (Dragicevic et al., 2012), так и рецепторы TLR2 (Vanhoutte et al., 2008) взаимодействуют с передачей сигналов TLR-3, значительно изменяя функции лимфоцитов.

Следует отметить, что большинство генов кагоцел-респондеров, участвующих в противовирусной защите, активировались только в ко-стимулированных конканавалином А и поли I:C лимфоцитах, в то время как в отсутствие дцРНК эти гены подавлялись в леченных кагоцелом клеток по сравнению с контрольными лимфоцитами. Среди них следует указать Oasl, Il17, Ifit1 и Ccr1.Напротив, ИЛ5 активировался кагоцелом в конканавалин А, стимулированных РР-лимфоцитах, но не было обнаружено влияния на экспрессию этого цитокина в кон-А и ко-стимулированных клетках поли I:С. Другой интересной возможностью является участие аутокринной петли интерферона I типа в эффектах кагоцела. При активации рецепторов TLR INFα может стимулировать клетку аутокринным образом через INFAR1 (Song et al., 2015), и, что важно, сообщается, что этот механизм участвует в эффектах β-D-глюканов (Hassanzadeh- Киаби и др., 2017). Кроме того, интерферон I типа способен повышать продукцию IL10 различными типами иммунных клеток, стимулированных лигандами TLR (Gabryšová et al., 2014). Таким образом, повышенная продукция IL10 при обработке лимфоцитов пейеровой бляшки кагоцелом (рис. 1D) подтверждает участие INFα в реализации эффектов кагоцела.

До начала исследования мы предположили, что либо Toll-подобные рецепторы, либо рецептор dectin-1 могут опосредовать иммуномодулирующие эффекты кагоцела.В этом исследовании мы провели поиск мастер-молекул, опосредующих изменения в паттернах экспрессии генов. Среди кандидатов на опосредование действия кагоцела ключевые компоненты TLR-сигнальных путей TRAF, Tab, TAK, IKKα и IKKβ, RIP и IRF были идентифицированы с высокими баллами и низкими FDR, а экспрессия IRF3 и IFF7 была умеренно повышенной. регулируется кагоцелом (рис. 3). Идентификация пути IFNα, IFNβ/IFNAR/Tyk2/Jak и его отдельных компонентов среди кандидатов подтверждает гипотезу об участии аутокринной петли интерферона в действии кагоцела на лимфоциты PP.Далее, наши результаты подтверждают возможность участия рецептора dectin-1 в реализации эффектов кагоцела. Несмотря на то, что передача сигналов dectin-1 изучена менее полно по сравнению с другими PRR (Tang et al., 2018), очевидно, что передача сигналов dectin и TLR2 тесно взаимодействует, опосредуя активируемый глюканом противогрибковый иммунитет (Brown, 2005). В подтверждение возможности активации dectin-1 кагоцелом среди кандидатов в мастер-молекулы были идентифицированы SYK и ZAP-70. Более того, передача сигналов от обоих возможных рецепторов кагоцела конвергентна в управлении воспалительной реакцией (Gantner et al., 2003). Наконец, ко-стимуляция рецепторов TLR и Dectin-1 увеличивает продукцию IL-10 (Gabryšová et al., 2014), что является одним из возможных объяснений повышенной продукции IL-10, наблюдаемой в обработанных кагоцелом лимфоцитах в этом исследовании (рис. 1D).

Результаты нашего исследования обобщены на рис. 4. Мы пришли к выводу, что лимфоциты пейеровых бляшек, играющие важную роль в противовирусной защите, могут быть доступны для кагоцела при пероральном введении, что делает ассоциированную с кишечником лимфоидную ткань вероятным местом локализации кагоцела. действие.При воздействии кагоцела на смешанную популяцию PP-лимфоцитов препарат предположительно связывается с рецепторами TLR2 и/или dectin-1, индуцируя нижестоящую передачу сигналов и активацию врожденного противовирусного ответа с возможным вовлечением аутокринной петли интерферона. Эти гены, активность которых повышается при лечении кагоцелом, участвуют в различных стадиях противовирусного и антибактериального иммунитета, начиная от распознавания патогена и модуляции иммунного ответа и заканчивая эффекторными белками. Необходимы дальнейшие исследования для подтверждения участия этих механизмов в иммуномодулирующем действии кагоцела.

РИСУНОК 4 . Возможный механизм действия кагоцела, обобщенный по результатам исследования. Элементы сети, выделенные жирным цветом, представляют собой либо гены с повышенной регуляцией в лимфоцитах пейеровой бляшки, либо факторы транскрипции/главные регуляторы, идентифицированные с помощью инструментов биоинформатики.

Материалы и методы

Выделение лимфоцитов пейеровых бляшек

Лимфоциты пейеровых бляшек выделяли из самцов мышей BALB/c, как описано ранее (Lefrançois and Lycke, 1996).Вкратце, мышей гуманно умерщвляли, тонкий кишечник вырезали и помещали на лед. Просвет кишечника промывали 20 мл охлажденного льдом PBS, пейеровы бляшки подвергали микродиссекции под микроскопом и трижды промывали охлажденным льдом PBS с добавлением гентамицина (100 мкг/мл). Пластыри от 6-8 мышей объединяли.

Для облегчения диссоциации ткани пластыри инкубировали в CMF (85% HBSS без Mg 2+ , Ca 2+ и NaHCO 3 ; 1xHEPES-бикарбонатный буфер и 5% FBS) на ротационном шейкере в течение 30 мин при 37°С.После этого ткань пропускали через 70-мкм клеточный фильтр, суспензию осаждали (5 мин при 500 rcf) и трижды промывали CMF. Лимфоциты отделяли центрифугированием в 44% Percoll, наслоенном на 80% Percoll, в течение 20 мин при 600 rcf, четыре раза промывали в HBSS и ресуспендировали до 1×10 6 /мл в RPMI 1640 с добавлением L-глютамина, 10% FBS. и 100 мкг/мл гентамицина. Чтобы проверить количество жизнеспособных лимфоцитов, клетки по-разному окрашивали йодидом пропидия (10 мкМ) и SYBR Green (1 мкМ), а количество живых клеток подсчитывали по микрофотографиям.В шести отдельных экспериментах в среднем 90 ± 3% клеток были жизнеспособны.

Культура лимфоцитов

Выделенные лимфоциты разделяли на две аликвоты и стимулировали 10 мкг/мл конканавалина А или комбинацией 10 мкг/мл конканавалина А и 10 мкг/мл агониста TLR-3 поли I:C. Для обеспечения надлежащего отжига поли I:C нагревали в течение 5 мин при 55°С и охлаждали до комнатной температуры в течение 1 ч. Стимулированные лимфоциты высевали в 24-луночные планшеты (SPL Life Sciences, Южная Корея), 1.5 × 10 6 клеток на лунку, инкубировали при 37°С в атмосфере 5% CO 2 (инкубатор MCO-5AC, Sanyo, Япония).

Через 24 ч культивирования с митогенами к клеткам добавляли воду (H 2 O) или 30, 100 или 300 мкг/мл кагоцела (Kag) в объеме 15 мкл (1:100 v: в). Лимфоциты положительного контроля обрабатывали 300 мкг/мл лентинана (Lent) или 300 мкг/мл β-D-глюкана овса (βDGlu).

Образцы собирали через 24 и 72 часа инкубации с препаратами, по одной лунке на обработку, в каждый из двух моментов времени.Клетки осаждали центрифугированием при 500 rcf в течение 5 мин. Культуральные среды собирали и замораживали при 80°С для последующего анализа содержания цитокинов, при этом клетки немедленно лизировали 500 мкл TRI-реагента в течение 20 мин на ротационном шейкере при комнатной температуре.

Таким образом, паттерны экспрессии и продукцию цитокинов для каждого из препаратов изучали в двух временных точках для каждого из двух протоколов стимуляции митогеном. Всего было выполнено шесть независимых повторов этой конструкции.Концентрацию цитокинов измеряли во всех прогонах, а характер экспрессии генов исследовали только в трех последних прогонах.

ELISA

Культуральные среды анализировали на содержание INFα, INFγ, IL2, IL10 и TNFα с использованием наборов RnD в соответствии с инструкциями производителя.

Статистический анализ концентраций цитокинов проводили отдельно для каждого из испытуемых препаратов с использованием трехфакторного дисперсионного анализа (факторы «Время», «Митоген» и «Лекарство») с помощью Prism (v.8.0, GraphPad, США). Только основные эффекты и взаимодействия были проанализированы и признаны значимыми при p < 0,05.

Выделение РНК

Для разделения фаз лизаты реагента TRI обрабатывали 1-бром-3-хлорпропаном (1:10 об.:об.), тщательно перемешивали и центрифугировали при 12 000 rcf и 4°C в течение 15 мин. Водную фазу собирали и очищали с помощью микронаборов RNeasy (Qiagen, США) в соответствии с инструкциями производителя.Средний выход составил ≈800 нг на образец, измеренный с помощью флуорометра Qubit 4 (Invitrogen, США). Чистоту препаратов РНК анализировали с помощью NanoDrop (Thermo Scientific, США) и препараты субоптимального качества (A 260 /A 280 < 1,8, A 260 /A 230 < 1,8) исключали из дальнейшего анализа. Повторные образцы из трех независимых опытов смешивали в равных количествах и хранили при температуре -80°С до последующего анализа.

Анализ экспрессии генов

Анализ экспрессии генов проводили с использованием мышиных чипов nCounter Inflammation panel и анализировали с помощью программного обеспечения nCounter (NanoStiring Technologies, США) в соответствии с инструкциями производителя (Kulkarni, 2011).Вкратце, необработанные подсчеты были пороговыми с использованием среднего плюс 2 стандартных отклонения подсчетов встроенных отрицательных контролей, индивидуально для каждого чипа. Затем подсчеты были нормализованы к коэффициенту, полученному из подсчетов встроенных положительных контролей. Наконец, была применена вторая нормализация к среднему геометрическому экспрессии генов домашнего хозяйства для отдельных образцов.

Прогнозирование факторов транскрипции

В качестве следующего шага, отдельно для каждого из протестированных веществ, было рассчитано кратное изменение для каждого из генов-мишеней по сравнению с уровнем экспрессии в контрольном (обработанном солевым раствором) образце в соответствующий момент времени и выражается как логарифм 2 .Гены с двукратным изменением экспрессии по сравнению с сопоставимым по времени контролем (обработанным физиологическим раствором) были названы генами-респондерами (RG) и включены в дальнейший анализ. Факторы транскрипции, которые потенциально могут управлять экспрессией RG, были идентифицированы с использованием метода матрицы веса позиций. С этой целью были обнаружены сайты связывания факторов транскрипции в промоторной области (от -1500 до +500 п.н. относительно сайта начала транскрипции) RG. Для этого координаты сайта начала транскрипции каждого исследуемого гена были идентифицированы пакетом «biomaRt» в среде R с использованием координат 5’UTR наиболее распространенной изоформы мРНК, оцененной Cufflinks (v.2.2.1, NIH) на основании данных секвенирования РНК пейеровой бляшки CD 4+ Т-лимфоцитов (Visekruna et al., 2019). Поиск потенциальных сайтов связывания факторов транскрипции и анализ обогащения сайтов связывания в промоторных областях выполняли для повышающих и понижающих генов отдельно относительно набора из 5000 случайных промоторов генов, кодирующих белок, с использованием платформы GeneExplain («Поиск обогащенной TBFS в треков») и базу данных сайтов связывания факторов транскрипции (TBFS) TRANSFAC v. 2020.2 (Koschmann et al., 2015). Вкратце, алгоритм ищет TBFS в промоторной области исследуемого и эталонного генов. Затем подсчитывают количество промоторных участков, содержащих специфические TBFS, для исследуемого и эталонного генов с последующим статистическим анализом с помощью точного критерия Фишера. Во время поиска TFBS отсечение матрицы позиционных весов (PWM) оптимизируется, чтобы максимизировать скорректированное кратное обогащение (отношение шансов с доверительным интервалом 99%). Сайты связывания факторов транскрипции с скорректированным кратным обогащением (отношение шансов с доверительным интервалом 99 %), равным 1.1 и FDR <0,1 (критерий Фишера) считались значимыми.

Gene Ontology Analysis

Функциональное обогащение генов-респондеров было исследовано по отношению ко всему набору анализируемых генов (248 генов) с помощью инструмента PANTHER Overrepresentation Test (выпущен 28 июля 2020 г.) с использованием полного биологического процесса GO и PANTHER. Базы данных путей. Термины Gene Ontology с p <0,05 (исправленный биномиальный критерий Бонферрони) считались значительно обогащенными.

Прогнозирование вышестоящих сигнальных путей и мастер-регуляторов

Наборы факторов транскрипции, полученные для повышающей и понижающей регуляции генов для данной комбинации тестируемого вещества и момента времени, использовали в качестве исходных данных для анализа восходящих сигнальных путей и мастер-регуляторов (Платформа GeneExplain с базой данных Transpath v. 2020.2 и рабочим процессом «Поиск главных регуляторов в сетях»), как описано в (Koschmann et al., 2015). Поиск был выполнен с максимальным радиусом 10 шагов вверх по течению от набора входных генов, а потенциальные главные регуляторы отфильтровывались с отсечкой: оценка> 0.2, FDR <0,05 и Z-показатель >1,0 (где показатель отражает степень связи молекулы-регулятора с другими молекулами в базе данных и с входным списком; Z-показатель отражает специфичность каждой мастер-молекулы для входного списка; FDR представляет собой вероятность того, что молекула займет наблюдаемый или более высокий ранг случайно; FDR и Z-оценка рассчитываются на основе 1000 случайных результатов).

Материалы и реагенты

Гентамицин, конканавалин А, RPMI-1640 с добавлением L-глютамина, HBSS, 10 × PBS и 1 М раствор натриевой соли HEPES были приобретены у компании «ПанЭко» (Россия).Percoll ® , йодид пропидия, β-D-глюкан и калиевая соль полиинозиновой полицитидиловой кислоты (Poly I:C) были приобретены у Sigma-Aldrich (Россия). SYBRGreen был приобретен у Lumiprobe (Россия). TRI REAGENT ® был приобретен в Molecular Research Center, Inc. (США). Фетальную бычью сыворотку приобретали у компании BioSera (Франция). Лентинан был приобретен у компании Toronto Research Chemicals (Канада). Набор RNeasy Micro Kit был приобретен у Qiagen (США). Кагоцел предоставлен компанией «НиарМедик Плюс» (Россия).

Заявление о доступности данных

Первоначальные материалы, представленные в исследовании, включены в статью/дополнительный материал. Дальнейшие запросы можно направлять соответствующему автору.

Этическое заявление

Исследование на животных рассмотрено и одобрено комиссией по биоэтике ООО «Институт митоинженерии» МГУ (протокол № 143 от 11 марта 2019 г.).

Вклад авторов

Все перечисленные авторы внесли существенный, непосредственный и интеллектуальный вклад в работу и одобрили ее для публикации.

Финансирование

Исследование выполнено Институтом митоинженерии МГУ по договору с ООО «Ниармедик». Частично финансирование было предоставлено Междисциплинарной научно-образовательной школой Московского университета «Молекулярные технологии живых систем и синтетическая биология».

Конфликт интересов

Рецензент AZ заявил ответственному редактору о прошлом соавторстве с одним из авторов RZ.

Исследование выполнено Институтом митоинженерии МГУ по договору с ООО «Ниармедик».Спонсор, действующий в качестве спонсора исследования, одобрил план исследования, но не принимал участия в сборе, анализе и интерпретации данных или принятии решения о публикации.

Примечания издателя

Все утверждения, изложенные в этой статье, принадлежат исключительно авторам и не обязательно представляют претензии их дочерних организаций, издателя, редакторов и рецензентов. Любой продукт, который может быть оценен в этой статье, или претензии, которые могут быть сделаны его производителем, не гарантируются и не поддерживаются издателем.

Благодарности

Авторы благодарят Ирину Савченко, Анфису Попову, Евгению Лагереву, Ольгу Фадееву и Екатерину Телятникову за техническую помощь в сборе данных. Биоинформатический анализ данных выполнен Даниилом Поповым и Павлом Махновским из ИМБП РАН по контракту с Институтом митоинженерии МГУ. Рисунок 4 был создан с помощью Biorender. Авторы благодарны доктору Руперту Холмсу за корректуру и редактирование рукописи.

Дополнительный материал

Дополнительный материал к этой статье можно найти в Интернете по адресу: https://www.frontiersin.org/articles/10.3389/fphar.2021.679511/full#supplementary-material

Ссылки

Андерссон М.Л., Карлссон-Шёберг Дж.М.Т. и Пютсеп К.Л.-А. (2012). CRS-пептиды: уникальные защитные пептиды клеток Панета мыши. Иммунол слизистых оболочек. 5, 367–376. doi:10.1038/mi.2012.22

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Андреев-Андриевский А. А., Попова А. С., Лагерева Е. А., Машкин М. А., Рудой Б. А., Казаишвили Ю.Г. и др. (2019). Изучение фармакокинетики кагоцела, меченного тритием. Фармация 68, 1–8. doi:10.29296/25419218-2019-08-08

CrossRef Full Text | Google Scholar

Анк, Н., Иверсен, М. Б., Бартольди, К., Штехели, П., Хартманн, Р., Дженсен, У. Б., и др. (2008). Важная роль интерферона III типа (IFN-λ/IL-28) в противовирусной активности, индуцированной TLR. Дж. Иммунол. 180, 2474–2485. doi:10.4049/jimmunol.180.4.2474

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Бисен, П.С., Багель Р.К., Санодия Б.С., Тхакур Г.С. и Прасад Г.Б.К.С. (2010). Lentinus Edodes: макрогриб с фармакологической активностью. CMC 17, 2419–2430. doi:10.2174/0929867107

495

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Borchers, A.T., Stern, J.S., Hackman, R.M., Keen, C.L., and Gershwin, M.E. (1999). Грибы, опухоли и иммунитет. Экспл. биол. Мед. 221, 281–293. doi:10.1046/j.1525-1373.1999.d01-86.x10.3181/00379727-221-44412

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Карло, Ф.JD и Fiore, JV (1958). О составе зимозана. Наука 127, 756–757. doi:10.1126/science.127.3301.756-a

Полный текст CrossRef | Google Scholar

Чен Г.-А., Лин Ю.-Р., Чанг Х.-Т. и Хванг Л.-Х. (2017). H-ras оказывает противоположное влияние на реакцию интерферона типа I в зависимости от статуса его активации. Фронт. Иммунол. 8, 972. doi:10.3389/fimmu.2017.00972

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Клементе, Дж.К., Урселл, Л.К., Парфри, Л.В., и Найт, Р. (2012). Влияние микробиоты кишечника на здоровье человека: комплексный взгляд. Сотовый 148, 1258–1270. doi:10.1016/j.cell.2012.01.035

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Комерфорд И., Харата-Ли Ю., Бантинг М. Д., Грегор К., Кара Э. Э. и Макколл С. Р. (2013). Множество функций и сложная регуляция оси хемокинов CCR7/CCL19/CCL21 в адаптивной иммунной системе. Фактор роста цитокинов.Ред. 24, 269–283. doi:10.1016/j.cytogfr.2013.03.001

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Де Смет Р., Демор Т., Вершуэр С., Дуллаерс М., Острофф Г. Р., Леклерк Г. и др. (2013). Микрочастицы β-глюкана являются хорошими кандидатами для доставки антигена через слизистые оболочки при пероральной вакцинации. Дж. Контроль. Выпускать. 172, 671–678. doi:10.1016/j.jconrel.2013.09.007

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Драгичевич А., Джопалич Т., Василиджич С., Вучевич Д., Томич С., Божич Б. и др. (2012). Передача сигналов через Toll-подобный рецептор 3 и дектин-1 усиливает способность дендритных клеток, происходящих из моноцитов человека, стимулировать иммунный ответ T-Helper 1 и T-Helper 17. Цитотерапия 14, 598–607. doi:10.3109/14653249.2012.667873

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Датта О., Эспиноса В., Ван К., Авина С. и Ривера А. (2020). Дектин-1 способствует экспрессии интерферонов типа I и III для поддержки оптимального противогрибкового иммунитета в легких. Фронт. Цел. Заразить. микробиол. 10, 321. doi:10.3389/fcimb.2020.00321

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Двайер, Дж. М., и Джонсон, К. (1981). Использование конканавалина А для изучения иммунорегуляции Т-клеток человека. клин. Эксп. Иммунол. 46, 237–249.

Реферат PubMed | Google Scholar

Eagle, E., and Castillon, LE (1948). Острая пероральная токсичность госсипола и пигментных желез хлопкового семени для крыс, мышей, кроликов и морских свинок. Арх. Биохим. 18, 271–277.

Реферат PubMed | Google Scholar

Эстрада А., Юн К.-Х., Ван Кессель А., Ли Б., Хаута С. и Лаарвельд Б. (1997). Иммуномодулирующая активность β-глюкана овса in vitro и in vivo. Микробиолог. Иммунол. 41, 991–998. doi:10.1111/j.1348-0421.1997.tb01959.x

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Фазылов В. К., Ситников И. Г., Силина Е. В., Шевченко С. Б., Можина Л. Н., Замятина Л.Л. и др. (2016). Лечение острой респираторной вирусной инфекции и гриппа в повседневной клинической практике: результаты многоцентрового международного обсервационного исследования FLU-EE. Тер. ковчег. 88, 68–75. doi:10.17116/terarch3016881168-75

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Габришова Л., Хоус А., Сарайва М. и О’Гарра А. (2014). Интерлейкин-10 в здоровье и болезни. Курс. Верхняя. микробиол. 380, 157–190. doi:10.1007/978-3-662-43492-5_8

CrossRef Full Text | Google Scholar

Галегов Г.А., Наровлянский А.Н., Сарымсаков А.А., Мезенцева М.В., Полонский В.О., Гомес Л.А. и др. (2002). Влияние Кагоцела на репродукцию вируса герпеса. Вопр Вирусол. 47, 42–44.

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Google Scholar

Гантнер Б.Н., Симмонс Р.М., Канавера С.Дж., Акира С. и Андерхилл Д.М. (2003). Совместная индукция воспалительных реакций с помощью Dectin-1 и Toll-подобного рецептора 2. J. Exp. Мед. 197, 1107–1117. дои: 10.1084 / джем.20021787

Реферат PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Гото Х., Сагитани А., Ашида Н., Като С., Хирота Т., Шинода Т. и др. (2013). Противогриппозные эффекты живых и неживых Lactobacillus Acidophilus L-92, сопровождающиеся активацией врожденного иммунитета. Бр. Дж. Нутр. 110, 1810–1818 гг. doi:10.1017/s0007114513001104

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Халлер О., Штехели П., Швеммле М.и Кохс, Г. (2015). Mx GTPases: Dynamin-подобные противовирусные машины врожденного иммунитета. Тенденции микробиол. 23, 154–163. doi:10.1016/j.tim.2014.12.003

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Хансен, С. Б., Виллер, А., Баярри-Олмос, Р., Кемпер, К., и Гарред, П. (2019). Экспрессия генов комплемента C3, C5, C3aR и C5aR1 в покоящихся и активированных CD4+ T-клетках. Иммунобиология 224, 307–315. doi:10.1016/j.imbio.2018.12.004

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Хасанзаде-Киаби, Н., Яньес А., Данг И., Мартинс Г. А., Андерхилл Д. М. и Гудридж Х. С. (2017). Аутокринная передача сигналов IFN I типа в дендритных клетках, стимулированных грибковыми β-глюканами или липополисахаридами, способствует активации Т-клеток CD8. Дж. Иммунол. 198, 375–382. doi:10.4049/jimmunol.1601143

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Хайдеггер С., Анц Д., Стефан Н., Бон Б., Хербст Т., Фендлер В. П. и др. (2013). Вирус-ассоциированная активация врожденного иммунитета вызывает быстрое разрушение пейеровых бляшек у мышей. Кровь 122, 2591–2599. doi:10.1182/blood-2013-01-479311

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Howe, S. E., Lickteig, D. J., Plunkett, K. N., Ryerse, J. S., and Konjufca, V. (2014). Поглощение растворимых и дисперсных антигенов эпителиальными клетками в тонкой кишке мыши. Плос. Один. 9, е86656. doi:10.1371/journal.pone.0086656

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ичинохе Т., Панг И.К., Кумамото Ю., Пипер Д.Р., Хо Дж.Х., Мюррей Т.С. и соавт. (2011). Микробиота регулирует иммунную защиту от вирусной инфекции гриппа А дыхательных путей. Проц. Натл. акад. науч. 108, 5354–5359. doi:10.1073/pnas.1019378108

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ханна А.К., Пламмер М., Нилакантан В. и Пипер Г.М. (2005). Рекомбинантный белок Р21 ингибирует пролиферацию лимфоцитов и факторы транскрипции. Дж. Иммунол. 174, 7610–7617. doi:10.4049/jimmunol.174.12.7610

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Кизер, К. Дж., и Каган, Дж. К. (2017). Мультирецепторное обнаружение отдельных бактериальных продуктов врожденной иммунной системой. Нац. Преподобный Иммунол. 17, 376–390. doi:10.1038/nri.2017.25

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Кошманн Дж., Бхар А., Стегмайер П., Кел А. и Вингендер Э. (2015). «Анализ вверх по течению»: комплексный подход к анализу пути промотора к причинно-следственной интерпретации данных микрочипов. Микроматрицы 4, 270–286. doi:10.3390/microarrays4020270

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Кристиансен Х., Шерер С. А., Маквин М., Ядонато С. П., Вендс С., Тавачелвам К. и др. (2010). Внеклеточная 2′-5′ олигоаденилатсинтетаза стимулирует РНКазу L-независимую противовирусную активность: новый механизм вирус-индуцированного врожденного иммунитета. Дж. Вирол. 84, 11898–11904. doi:10.1128/jvi.01003-10

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Кулкарни М.М. (2011). Цифровой мультиплексный анализ экспрессии генов с использованием системы NanoString nCounter. Курс. протокол Мол. биол. 94, 25Б.10.1–25Б.10.17. doi:10.1002/0471142727.mb25b10s94

CrossRef Full Text | Google Scholar

Лефевр Дж. С., Марло С., Мило В., Левеск Т., Пикард С., Фламанд Н. и др. (2010). Лиганды Toll-подобных рецепторов вызывают миграцию полиморфноядерных лейкоцитов: ключевые роли лейкотриена B4 и фактора, активирующего тромбоциты. ФАСЭБ. Дж. 24, 637–647.doi:10.1096/fj.09-135624

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Лефрансуа Л. и Лике Н. (1996). Выделение интраэпителиальных лимфоцитов тонкого кишечника мышей, пейеровой бляшки и клеток собственной пластинки. Курс. протокол Мол. биол. 17, 3.19.1–3.19.16. doi:10.1002/0471142735.im0319s17

CrossRef Full Text | Google Scholar

Li, Y., Wen, Z., Zhou, H., Wu, S., Jia, G., Qian, W., et al. (2015). Свиной интерферон-индуцируемый белок с тетратрикопептидными повторами 3, poIFIT3, ингибирует репликацию вируса свиного гриппа и усиливает продукцию IFN-β. Дев. Комп. Иммунол. 50, 49–57. doi:10.1016/j.dci.2014.10.008

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Лим В., Хэм Дж., Парк С., Бэ Х., Ю С. и Сонг Г. (2019). Госсипол вызывает нарушение сперматогенеза и стероидогенеза у самцов мышей. Дж. Агрик. Пищевая хим. 67, 2075–2085. doi:10.1021/acs.jafc.8b06946

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Логинова С.Ю., Щукина В.Н., Савенко С.В., и Борисевич С.В. (2020). Противовирусная активность Кагоцел In Vitro в отношении вируса SARS-CoV-2. журн. 65, 3–6. doi:10.37489/0235-2990-2020-65-3-4-3-6

Полный текст CrossRef | Google Scholar

Млкохова П., Уинстон Х., Зулиани-Альварес Л. и Гупта Р. К. (2020). TLR4-опосредованный путь запускает интерферон-независимую остановку G0 и противовирусную активность SAMHD1 в макрофагах. Cell Rep. 30, 3972–3980. doi:10.1016/j.celrep.2020.03.008

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Некас, Дж.и Бартосикова Л. (2013). Каррагинан: обзор. Veterinarni Medicina 58, 187–205. doi:10.17221/6758-VETMED

Nguyen, H.H., Boyaka, P.N., Moldoveanu, Z., Novak, M.J., Kiyono, H., McGhee, J.R., et al. (1998). Эпителиальные клетки, инфицированные вирусом гриппа, представляют вирусные антигены антиген-специфическим CD8 + цитотоксическим Т-лимфоцитам. Дж. Вирол. 72, 4534–4536. doi:10.1128/jvi.72.5.4534-4536.1998

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Никлин, С., Бейкер К. и Миллер К. (1988). Поглощение каррагинана кишечником: распределение и влияние на гуморальную иммунную компетентность. Доп. Эксп. Мед. биол. 237, 813–820. doi:10.1007/978-1-4684-5535-9_122

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Oh, J. Z., Ravindran, R., Chassaing, B., Carvalho, F. A., Maddur, M. S., Bower, M., et al. (2014). TLR5-опосредованное определение кишечной микробиоты необходимо для ответа антител на вакцинацию против сезонного гриппа. Иммунитет 41, 478–492.doi:10.1016/j.immuni.2014.08.009

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Попов А. Ф., Симакова А. И., Дмитренко К. А., Щелканов М. Ю. (2017а). Динамика изменения цитокинов (ИФН-γ, ИФН-α, ИЛ-18, ФНО-α) при лечении среднетяжелого течения гриппа А (h2N1) Pdm09 (2013–2016 гг.) монотерапией осельтамивиром (тамифлю) и умифеновиром (арбидолом) и в комбинации с Кагоцелом. Тер. ковчег. 89, 66–70. doi:10.17116/terarch30178

-70

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Попов А.Ф., Симакова А.И., Дмитренко К.А., Щелканов М.Ю. (2017б). Повышение противогриппозной эффективности осельтамивира (тамифлю®) и умифеновира (арбидола®) при совместном применении с кагоцелом®. Антибиот. Чемотер. 62, 25–29.

Google Scholar

Роткеттер Х. Дж., Пабст Р. и Бейли М. (1999). Миграция лимфоцитов в слизистой оболочке кишечника: вход, транзит и эмиграция лимфоидных клеток и влияние антигена. Вет. Иммунол. Иммунопатология 72, 157–165.doi:10.1016/s0165-2427(99)00128-2

CrossRef Full Text | Google Scholar

Сато М., Сано Х., Иваки Д., Кудо К., Кониши М., Такахаши Х. и др. (2003). Прямое связывание Toll-подобного рецептора 2 с зимозаном, и индуцированная зимозаном активация NF-Κb и секреция TNF-α подавляются белком сурфактанта легкого Collectin A. J. Immunol. 171, 417–425. doi:10.4049/jimmunol.171.1.417

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Скальдаферри, Ф., Ianiro, G., Privitera, G., Lopetuso, L.R., Vetrone, L.M., Petito, V., et al. (2020). Захватывающее путешествие SARS-CoV-2 в кишечник: от патогенеза к будущим клиническим последствиям. Воспаление. Кишечник Дис. 26, 1306–1314. doi:10.1093/ibd/izaa181

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Ши, К., Ульке-Леме, А., Дэн, Дж., Батулан, З., и О’Брайен, Э. Р. (2019). Характеристика белка теплового шока 27 во внеклеточных везикулах: потенциальная противовоспалительная терапия. FASEB j. 33, 1617–1630. doi:10.1096/fj.201800987r

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Синицин А., Хотченков В., Рудой Б. и Казаишвили Ю. (2017). Оценка возможности выделения свободного госсипола из кагоцела под влиянием имитаторов пищеварительного сока человека. Фармация 66, 41–47.

Полнотекстовая перекрестная ссылка | Google Scholar

Сологуб Т.В., Цветков В.В. (2017). Кагоцел в терапии гриппа и острых респираторных вирусных инфекций: анализ и систематизация данных по результатам доклинических и клинических исследований. Тер. ковчег. 89, 113–119. doi:10.17116/terarch3017898113-119

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Сун Дж., Гуань М., Чжао З. и Чжан Дж. (2015). Интерфероны типа I функционируют как аутокринные и паракринные факторы, индуцирующие аутотаксин в ответ на активацию TLR. Плос Один 10, e0136629. doi:10.1371/journal.pone.0136629

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Тада Р., Икеда Ф., Аоки К., Йошикава М., Kato, Y., Adachi, Y., et al. (2009). β-d-глюкан, полученный из ячменя, вызывает иммуностимуляцию через опосредованный дектин-1 путь. Иммунол. лат. 123, 144–148. doi:10.1016/j.imlet.2009.03.005

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Тан Дж., Лин Г., Лэнгдон В. Ю., Тао Л. и Чжан Дж. (2018). Регуляция противогрибкового иммунитета, опосредованного лектиновым рецептором С-типа. Фронт. Иммунол. 9, 123. doi:10.3389/fimmu.2018.00123

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Vanhoutte, F., Paget, C., Breuilh, L., Fontaine, J., Vendeville, C., Goriely, S., et al. (2008). Синергия и перекрестное ингибирование Toll-подобных рецепторов (TLR)2 и TLR3 в миелоидных дендритных клетках мышей. Иммунол. лат. 116, 86–94. doi:10.1016/j.imlet.2007.11.014

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Вершинина М.Ю., Наровлянский А.Н., Дерябин П.Г., Амченкова А.М., Иванова А.М., Щербенко В.Е. и др. (2002). Регуляция мРНК цитокинов интерфероном и индукторами интерферона. рус. Дж. Иммунол. 7, 161–166.

Реферат PubMed | Google Scholar

Виллена Дж., Судзуки Р., Фуджи Х., Чиба Э., Такахаши Т., Томосада Ю. и др. (2012). Иммунобиотик Lactobacillus Jensenii модулирует воспалительный ответ, индуцированный Toll-подобным рецептором 4, посредством негативной регуляции в свиных антигенпрезентирующих клетках. клин. Вакцина. Иммунол. 19, 1038–1053. doi:10.1128/cvi.00199-12

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Висекруна, А., Hartmann, S., Sillke, Y.R., Glauben, R., Fischer, F., Raifer, H., et al. (2019). Развитие кишечника и гомеостаз требуют активации и апоптоза дието-реактивных Т-клеток. Дж. Клин. Вкладывать деньги. 129, 1972–1983 гг. doi:10.1172/jci98929

Резюме PubMed | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Вос, А. П., М’Рабет, Л., Шталь, Б., Бём, Г., и Гарссен, Дж. (2007). Иммуномодулирующие эффекты и потенциальные рабочие механизмы перорально применяемых неперевариваемых углеводов. Крит. Преподобный Иммунол. 27, 97–140. doi:10.1615/critrevimmunol.v27.i2.10

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Wang, J., Li, F., Wei, H., Lian, Z.-X., Sun, R., and Tian, ​​Z. (2014). Инфекция респираторного вируса гриппа индуцирует кишечное иммунное повреждение через опосредованное микробиотой воспаление, зависящее от клеток Th27. Дж. Экспл. Мед. 211, 2397–2410. doi:10.1084/jem.20140625

PubMed Abstract | Полный текст перекрестной ссылки | Google Scholar

Паттерн экспрессии генов лимфоцитов пейеровой бляшки, подвергнутых воздействию кагоцела, предполагает, что рецепторы распознавания образов опосредуют его действие

Abstract

Кагоцел представляет собой синтетическое производное карбоксиметилцеллюлозы, сополимеризованное с госсиполом.Клинические данные свидетельствуют о его безопасности и эффективности при лечении гриппа и других вирусных инфекций за счет усиления продукции интерферона. Связанная с кишечником лимфоидная ткань кажется вероятным местом действия кагоцела. Исследование было направлено на изучение молекулярных механизмов его действия с использованием мышиных лимфоцитов пейеровой бляшки в качестве тест-системы и паттернов продукции цитокинов и экспрессии генов в качестве первичных результатов. Лимфоциты пейеровых бляшек, выделенные от мышей BALB/c, стимулировали конканавалином А или, для имитации вирусной инфекции, комбинацией конканавалина А и лиганда TLR3 poly I:C.Через 24 ч стимуляции клетки обрабатывали физиологическим раствором, 30, 100 или 300 мкг/мл кагоцела или, в качестве положительного контроля, 300 мкг/мл b-D-глюкана овса или 300 мкг/мл лентинана. После 24 и 72 ч инкубации с этими препаратами продукция цитокинов была проанализирована с помощью ELISA, а картина экспрессии генов была исследована с использованием чипов панели nCounter Inflammation с последующим биоинформационным анализом. Экспрессия генов, участвующих в воспалительном ответе, противовирусной защите, выживании и пролиферации лимфоцитов (C1qa, C2, C3, Ccl21a, Il11, Il1b, Il23a, Il5, Ltb4r2, Alox15, Pla2g4a, Ptger1, Mapkapk5, Hras, ​​Ifna1, Tlr2, Mrc1 , Mx2) повышалась в обработанных кагоцелом лимфоцитах пейеровых бляшек.Определен список вероятных факторов транскрипции (CEBP, IRF, NFκB, RXR, Stat, Tead4 и ZSCAN) и мастер-регуляторов (cIAP, CIKS, dok9, MEKK1, FXR, IKK, IRAK, TRAF, dsRNA:TLR3: ТРИФ). Изменения в паттерне экспрессии генов и результаты биоинформатического анализа позволяют предположить, что ключевыми медиаторами иммуномодулирующего действия кагоцела являются рецепторы распознавания паттернов, TLR и dectin-1, с возможным участием аутокринной петли интерферона. Гены, активируемые кагоцелом, включают различные компоненты системы врожденной иммунной защиты.

Ключевые слова: кагоцел, экспрессия генов, цитокины, рецепторы распознавания образов, лимфоциты пейеровой бляшки

Введение

Продукты распада бактерий, грибов и вирусов вызывают быструю реакцию иммунных клеток и некоторых других типов клеток в организме как часть врожденного иммунного ответа (Kieser and Kagan, 2017). Среди этих продуктов распада (патоген-ассоциированные молекулярные паттерны, PAMP) полисахариды бактериальной и грибковой клеточной стенки при связывании с толл-подобными рецепторами (Iwasaki, Medzhitov, 2004), рецепторы декстина-1 и, возможно, другие типы рецепторов (Brown, 2005) вызывают воспаление, продукцию интерферона, способствуют выживанию и пролиферации иммунных клеток (Iwasaki, Medzhitov, 2004; Brown, 2005; Kieser, Kagan, 2017).Некоторым полисахаридам природного происхождения приписывают иммуномодулирующую активность, среди них лентинан (Borchers et al., 1999) и растительные β-D-глюканы (Estrada et al., 1997; Tada et al., 2009) привлекли наибольшее внимание как возможные терапевтические агенты, в то время как другие, такие как зимозан (CARLO и FIORE, 1958) или каррагинан (Necas и Bartosikova, 2013), оказались полезными исследовательскими инструментами в качестве индукторов иммунного ответа/воспаления. Следует отметить, что иммуномодулирующие эффекты глюканов были зарегистрированы у различных видов млекопитающих, птиц, рыб и даже беспозвоночных, что указывает на участие эволюционно законсервированного пути/механизма (Vos et al., 2007).

Встречающиеся в природе глюканы стимулируют активность макрофагов, адаптивные иммунные реакции, опосредованные В- и Т-клетками, и обладают противораковой активностью (Brown and Gordon, 2003). Некоторые из глюканов традиционно используются в качестве средств от множества заболеваний (Bisen et al., 2010). Кагоцел — синтетический сополимер модифицированной карбоксиметилцеллюлозы и природного полифенола госсипола, разработанный в НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Гамалеи и реализуемый в России и странах СНГ ООО «Ниармедик» в качестве перорального индуктора интерферона.Госсипол в количестве не более 3% по массе ковалентно связан с карбоксиметилцеллюлозным остовом. Основанием для включения госсипола в полимер были его иммуномодулирующие свойства (Ершов и др., 1988), в то время как ковалентное связывание иммобилизовало полифенол и, таким образом, снижало его токсичность (Eagle, Castillon, 1948) или возможное влияние на мужскую фертильность (Lim et al. др., 2019). Действительно, госсипол не высвобождается из кагоцела при хранении или инкубации с желудочным или кишечным соком (Синицын и соавт., 2020). В исследованиях хронической и репродуктивной токсичности при применении умеренных доз кагоцела побочных эффектов выявлено не было (Боровская, 2017).

Клинические данные подтверждают эффективность кагоцела для лечения гриппа (Фазылов и др., 2016; Сологуб, Цветков, 2017) и других вирусных инфекций (Галегов и др., 2002; Логинова и др., 2020) в качестве монотерапии или часть комбинированного лечения (Попов и др., 2017b). Анализ концентрации интерферона в плазме крови больных гриппом свидетельствует о повышении уровня цитокинов при применении кагоцела (Popov et al., 2017а). Однако молекулярные механизмы действия кагоцела изучены недостаточно. Стремясь дать представление о возможных механизмах действия кагоцела, мы использовали лимфоциты пейеровых бляшек мышей в качестве тест-системы, намеренно избегая дальнейшей изоляции конкретных типов клеток для сохранения клеточных взаимодействий. Для предпочтительной стимуляции Т-лимфоцитов мы использовали конканавалин А в качестве митогена или, для имитации вирусной инфекции, комбинацию конканавалина А и лиганда TLR3 poly I:C. Стимулированные лимфоциты инкубировали с различными концентрациями кагоцела или, в качестве положительного контроля, с четко определенными глюканами, лентинаном и β-D-глюканом овса, и анализировали на продукцию цитокинов и паттерны экспрессии генов через 24 и 72 часа после обработки.

Результаты

Продукция цитокинов

Содержание цитокинов в культуральной среде анализировали через 24 и 72 ч культивирования с различными полисахаридами (). Дисперсионный анализ, как и ожидалось, выявил значительное влияние времени и применяемой митогенной стимуляции на концентрацию всех исследованных цитокинов, за исключением ИЛ-10, на который не влиял тип митогена (). Среди полисахаридов β-D глюкан оказывал значительное влияние на TNFα (F (1,000, 10.00) = 14.1, p = 0,004), IL2 (F (1.000, 10.00) = 5.26, p = 0,045), IL10 (F (1.000, 10.00) = 5,78, p = 0,037) и уровни INFγ (F (1,000, 10,00) = 5,46, p = 0,042). Лентинан увеличил уровни TNFα (F (1.000, 10,00) = 5,81, p = 0,037) и IL6 (F (1.000, 10.00) = 8,68, p = 0,015), в то время как При таком лечении уровень INFγ был снижен (F (1.000, 10.00) = 15,48, р = 0,003). Кагоцел не оказывал последовательного влияния на TNFα, IL2, IL6 и INFγ, однако инкубация лимфоцитов с кагоцелом повышала концентрацию IL10 (F (3,000, 30,00) = 6,27, p = 0,002) в кажущейся дозе. зависимый способ (). Повышенная продукция IL-10 клетками, обработанными кагоцелом, может объяснить отсутствие влияния препарата на продукцию провоспалительных цитокинов стимулированными лимфоцитами.

TNFα (A) , IL6 (B) , IL2 (C) , IL10 (D) и INFγ (E) концентрации в среде через 24 ч (светлые столбцы) и 72 ч заштрихованные столбцы) культивирования лимфоцитов пейеровой бляшки, стимулированных конканавалином А (ConA, незаштрихованные столбцы) в отсутствие или в присутствии поли I:C лиганда TLR-3.Клетки обрабатывали физиологическим раствором (H 2 O), 300 мкг/мл β-D глюкана овса (βDGlu), 300 мкг/мл лентинана (Lent) или 30–300 мкг/мл кагоцела. Результаты представляют собой среднее значение ± sem из 6 независимых запусков эксперимента. Статистические данные о воздействии наркотиков см. в тексте.

Экспрессия гена

После получения данных об экспрессии гена, выраженных в виде нормализованных подсчетов, сначала мы провели кластерный анализ. Полученная кластеризация соответствовала плану эксперимента, при этом двумя самыми верхними факторами в выходной иерархии были время и примененный митоген (дополнительная таблица S1).Таким образом, мы пришли к выводу, что наш экспериментальный дизайн эффективно изменил характер экспрессии генов, связанных с воспалением, в лимфоцитах пейеровых бляшек мышей.

Затем, для общего представления данных, мы подсчитали гены с повышенной и пониженной регуляцией по сравнению с соответствующими контрольными клетками для каждой комбинации применяемого препарата, стимуляции митогеном и времени. Как показано на , при обработке полисахаридами в лимфоцитах, обработанных конканавалином А, через 24 часа инкубации преобладало подавление, за исключением лентинана, который усиливал экспрессию гена.Через 72 часа инкубации количество генов с повышенной экспрессией превысило количество генов с подавленной экспрессией. В отличие от этого, когда стимуляция конканавалином А дополнялась поли I:C в качестве лиганда TLR3, количество генов с повышенной активностью обычно было выше, чем количество генов, связанных с воспалением, с подавленной регуляцией. Количество генов с подавленной регуляцией увеличивалось с концентрацией кагоцела в инкубационной среде в клетках, стимулированных конканавалином А. Следует отметить, что в присутствии поли I:C в обработанных кагоцелом лимфоцитах поли I:C при некоторых концентрациях препарата гены с подавленной экспрессией не выявлены.

Количество повышающих (красный) и понижающих (синий) генов, связанных с воспалением, в лимфоцитах пейеровых бляшек, стимулированных конканавалином А (КонА), в отсутствие или в присутствии поли I:C лиганда TLR-3 через 24 и 72 ч после лечения 300 мкг/мл β-D глюкана овса (βDGlu), 300 мкг/мл лентинана (Lent) или 30–300 мкг/мл кагоцела по сравнению с контрольными лимфоцитами, обработанными физиологическим раствором. РНК собирали в 3 независимых циклах эксперимента.

Представленные тепловые карты дают более подробное представление о данных (полный список см. в дополнительной таблице S2).Для этой презентации мы сгруппировали реагирующие гены с помощью биологического процесса Gene Ontology. В целом паттерны экспрессии имели сходный профиль для всех анализируемых процессов. Понижающая регуляция преобладала в клетках, стимулированных конканавалином А, тогда как при более мощной стимуляции комбинацией конканавалина А и поли I:C повышающая регуляция была более частой. Более выраженные изменения экспрессии генов наблюдались при 72 ч культивирования с полисахаридами, тогда как через 24 ч ответы экспрессии генов были более умеренными.Наконец, в то время как паттерны экспрессии при обработке клеток β-D-глюканом и лентинаном были сходными, эффекты кагоцела отличались от этих двух глюканов. Кагоцел наносили на клетки в трех различных концентрациях; Следует отметить, что наиболее выраженные эффекты на экспрессию генов наблюдались, как это ни парадоксально, при самой низкой концентрации препарата.

Тепловая карта (log 2 -кратное изменение экспрессии) генов, участвующих в врожденном иммунном ответе, GO:0045087 (A) , адаптивный иммунный ответ, GO:0002250 (B) , защитный ответ на бактерии, GO:0042742 (C) , защитный ответ на вирус, GO:0051607 (D) , и гуморальный иммунный ответ, GO:0019730 (E) в лимфоцитах пейеровых бляшек мышей, стимулированных конканавалином A (ConA) в отсутствие или наличие лиганда TLR-3 поли I:C через 24 и 72 ч после обработки 300 мкг/мл β-D глюкана овса, 300 мкг/мл лентинана или 30-300 мкг/мл кагоцела (Kag) по сравнению с контролем, обработанные физиологическим раствором, лимфоциты.РНК собирали в 3 независимых циклах эксперимента.

Гены-респондеры в обработанных кагоцелом лимфоцитах участвовали в регуляции синтеза макромолекул (GO:0031326, GO:0010556, GO:2000112), регуляции транскрипции (GO:0006355, GO:2001141, GO:16) и апоптоз (GO:0006915, GO:0012501, GO:0008219). В частности, в лимфоцитах пейеровой бляшки активировались гены, кодирующие компоненты системы комплемента (C1qa, C2, C3), цитокины, хемокины и передачу сигналов липидов (Ccl21a, Il11, Il1b, Il23a, Il5, Ltb4r2, Alox15, Pla2g4a). , Ptger1), передачу внутриклеточного сигнала (Mapkapk5, Hras) и, что важно, врожденное восприятие и ответ на патогены (Defa-rs1, Ifna1, Tlr2, Mrc1, Mx2).

Факторы транскрипции, связанные с реакцией генов

Стремясь выяснить возможный механизм действия кагоцела, мы использовали гены-респондеры в качестве исходных данных для анализа обогащения сайтов связывания факторов транскрипции. Сопоставив результаты этого анализа для различных экспериментальных условий, мы идентифицировали несколько факторов транскрипции, которые потенциально могут управлять вызванными кагоцелом изменениями экспрессии в лимфоцитах пейеровой бляшки. Среди этих факторов наибольшее кратное обогащение имели CEBP, гомеобокс, регуляторные факторы интерферона, NFκB, ретиноидный X-рецептор альфа, Stat, Tead4, цинковый палец и белки, содержащие домен SCAN.Следует отметить, что для двух контрольных глюканов, β-D-глюкана овса и лентинана, были выделены практически идентичные факторы транскрипции. Полный список идентифицированных транскрипционных факторов представлен в дополнительной таблице S3.

Мастер-регуляторы

Мы продолжили поиск механизмов действия кагоцела и провели анализ потенциальных мастер-регуляторов и путей. Как правило, для этого типа анализа на выходе появляется широкий спектр возможных регуляторов, а не один кандидат.Чтобы исключить бессмысленные результаты, мы сопоставили данные для одного и того же препарата в разных экспериментальных условиях (митоген и момент времени), а в случае кагоцела мы также могли включить в этот анализ данные для трех доз. Регуляторы и пути с одиночными или бессистемными заходами не учитывались. Таким образом, мы смогли идентифицировать пути cIAP, CIKS, dok9, MEKK1, FXR, IKK, IRAK, TRAF, dsRNA:TLR3:TRIF и несколько путей, включающих передачу сигналов TLR, в качестве потенциальных регуляторов, лежащих в основе действия кагоцела на экспрессию гена лимфоцита.Полный список идентифицированных главных регуляторов представлен в дополнительной таблице S4.

Обсуждение

Здесь мы приводим результаты анализа экспрессии генов в лимфоцитах пейеровой бляшки мышей при обработке сополимером карбоксиметилцеллюлозы и госсипола, кагоцелом или встречающимися в природе глюканами, лентинаном и β-D глюканом овса в качестве положительного контроля. Полисахариды индуцировали выраженные изменения экспрессии воспалительных и иммунных генов, что указывает на рецепторы распознавания образов как на вероятные мишени действия кагоцела.

Мы использовали первичную культуру лимфоцитов пейеровой бляшки мышей в качестве тест-системы для изучения эффектов кагоцела. Причин такого выбора несколько. Во-первых, хорошо задокументировано, что глюканы эффективны при пероральном введении, и то же самое верно для синтетического глюкана, кагоцела, который принимается перорально в качестве иммуностимулятора. Однако из-за высокой молекулярной массы этих полимеров (>10 5 ) они плохо всасываются из кишечника (Vos et al., 2007). Фармакокинетические данные для полисахаридов с аналогичной молекулярной массой свидетельствуют о том, что их биодоступность при пероральном воздействии составляет от сотых до десятых долей процента (Mehvar and Shepard, 1992). В соответствии с этим только около 10% дозы кагоцела всасывается из желудочно-кишечного тракта крыс при пероральном введении, предположительно низкомолекулярной фракции полимера (Андреев-Андриевский и др., 2019). Несоответствие между очевидным действием глюканов на иммунную систему и их плохой абсорбцией может быть разрешено путем наблюдения за специфическим накоплением полисахаридов в пейеровых бляшках после перорального воздействия.Так, после употребления каррагинана его идентифицировали в пейеровых бляшках (Nicklin et al., 1988). Глюканы могут интернализоваться М-клетками при связывании с рецептором dectin-1 (Smet et al., 2013), а кишечные эпителиоциты могут способствовать поглощению частиц антигенов над пейеровыми бляшками (Howe et al., 2014). Хотя распределение кагоцела в различных тканях стенки кишечника не изучалось, мы предполагаем, что кагоцел может проникать в пейеровы бляшки при пероральном воздействии, что делает их потенциальным местом его действия на иммунитет.

Лимфоциты пейеровой бляшки представляют собой смешанную популяцию, состоящую из 60 % В-клеток, 25 % Т-клеток, 10 % дендритных клеток (CD11c+) и менее 5 % макрофагов или полиморфноядерных нейтрофилов (Лефрансуа и Лайке, 1996; Юнг и др., 2010). Хотя это верно для свежевыделенных клеток, мы использовали протокол стимуляции, специально способствующий пролиферации Т-клеток (Dwyer and Johnson, 1981). Таким образом, учитывая относительно длительный период культивирования с митогенами до применения препаратов, можно предположить, что большую часть исследуемой культуры составляли разнообразные субпопуляции Т-клеток.

Накопленные за последние годы существенные данные свидетельствуют о том, что связь между дыхательными путями и иммунной системой кишечника имеет решающее значение для противовирусной защиты хозяина. С одной стороны, респираторные вирусы могут вызывать повреждение кишечника, как это наблюдается при гриппе (Wang et al., 2014) или, совсем недавно, при SARS-CoV-2 (Scaldaferri et al., 2020). Инфицированные эпителиальные клетки могут представлять вирусные антигены для усиления клеточно-опосредованного иммунитета (Nguyen et al., 1998). В то же время иммунная система кишечника, прежде всего пейеровы бляшки, является важным местом эмиграции лимфоцитов (Rothkötter et al., 1999; Хайдеггер и др., 2013). Следует отметить, что дендритные клетки составляют до 4% иммигрирующих клеток (Rothkötter et al., 1999). Основываясь на существующих связях между микробиотой, кишечной иммунной системой и общей резистентностью хозяина к инфекции (Ichinohe et al., 2011; Clemente et al., 2012), было предложено несколько стратегий, использующих модификацию диеты или прямое интродукция некоторых штаммов комменсальных бактерий (Villena et al., 2012; Goto et al., 2013; Illiano et al., 2020).Интересно, что результаты противогриппозной вакцинации зависят от восприятия комменсальной микробиоты с помощью TLR (Oh et al., 2014), поэтому разрабатываемые пероральные вакцины против гриппа напрямую используют лиганды TLR в качестве адъювантов (Lycke, 2012). Более того, некоторые полисахариды были предложены в качестве адъювантов для пероральных вакцин (Smet et al., 2013).

Гены, экспрессия которых в кишечных лимфоцитах после инкубации с кагоцелом активируется, включают несколько важных участников врожденного иммунного ответа, компонентов системы комплемента, систем противовирусной защиты и хемокинов.Хотя значение системы комплемента плазмы для иммунитета очевидно, важность экспрессии компонентов системы комплемента в Т-клетках, о которой недавно сообщалось, не совсем ясна, но может быть связана с выживанием и дифференцировкой клеток (Hansen et al., 2018). ). Взаимодействие передачи сигналов от TLR и рецепторов к комплементарным анафилатоксинам значительно изменяет иммунный ответ (Song, 2012). Меньше известно об актуальности экспрессии кининогена в лимфоцитах.Храс1, а. к.а. p21 является негативным регулятором клеточного цикла (Khanna et al., 2005), способным индуцировать остановку клеточного цикла после активации TLR4/TRIF в рамках противовирусного ответа (Mlcochova et al., 2020). Важно отметить, что H-Ras способен усиливать передачу сигналов интерферона (Chen et al., 2017). Белок теплового шока 27 кДа выполняет множество функций, следует отметить, что после высвобождения во внеклеточное пространство HSP27 способен активировать NF-κB зависимым от TLR4 образом (Shi et al., 2019).

Несколько генов, важных для миграции лимфоцитов или хемотаксиса, были среди генов-респондеров в лимфоцитах, обработанных кагоцелом.Таким образом, CCL21, лиганд CCR7, активировался в PP-лимфоцитах, ко-стимулированных конканавалином A и Poly I:C, но не при стимуляции только конканавалином A. Важно отметить, что нарушение передачи сигналов CCL21/CCR7 ослабляет иммунный ответ на различные вирусы, препятствуя миграции клеток и правильному взаимодействию во время презентации антигена (Comerford et al., 2013). Рецептор 2 лейкотриена B4 является еще одним медиатором клеточной миграции с повышенной экспрессией. Интересно, что хемотаксические эффекты лигандов TLR опосредуются этим рецептором (Lefebvre et al., 2010). При лечении кагоцелом лимфоциты ПП экспрессировали больше РНК TLR2, сенсора бактериальных липопротеинов и липотейхоевых кислот. Одним из разнообразных лигандов этого рецептора является зимозан, грибковый β-глюкан (Sato et al., 2003). Однако известно, что TLR2 связывает широкий спектр лигандов и образует функциональные гетеродимеры с другими типами молекул TLR и не-TLR (Oliveira-Nascimento et al., 2012). Одним из партнеров по димеризации TLR2 является TLR6, который также активировался в клетках, обработанных кагоцелом, наряду с 7 и 9, однако в меньшей степени по сравнению с TLR2.

IL23 представляет собой провоспалительный цитокин с многогранным действием на дифференцировку Т-клеток и продукцию INFγ (Guo et al., 2019). Согласно обзору (Novelli and Casanova, 2004), дефицит IL-23 приводит к существенному снижению резистентности к различным ДНК- и РНК-вирусам, поэтому индукция экспрессии IL-23 является одним из очевидных положительных эффектов кагоцела для противовирусной защиты лимфоцитов. IFIT3 представляет собой белок, индуцируемый интерфероном, который также активируется при вирусной инфекции и двухцепочечной РНК, способный ингибировать репликацию вируса и инициацию трансляции, а также клеточную миграцию и пролиферацию (Fensterl and Sen, 2011).Одной гиперэкспрессии IFIT3 было достаточно для подавления репликации вируса в модели на свиньях (Li et al., 2015). Другим геном, активируемым в лимфоцитах PP, обработанных кагоцелом, является родственная дефензину последовательность 1, богатый цистеином белок, специфичный для кишечника грызунов и не обнаруживаемый у человека (Andersson et al., 2012).

Белки 1 и 2 резистентности к миксовирусам повышались при лечении кагоцелом, что обеспечивает еще одно механистическое объяснение эффективности препарата. Эти ГТФазы ингибируют различные вирусы, блокируя ранние этапы репликации вируса (Haller et al., 2015). Рекомбинантный Mx-1, модифицированный для облегчения проникновения в клетки, был способен эффективно подавлять инфекцию гриппа in vitro и in vivo (Jung et al., 2019). Интересно, что белок MX может индуцироваться интерферонами как I, так и III типа (Haller et al., 2015). Из-за ограничений системы анализа экспрессии генов у нас нет экспериментальных данных по экспрессии интерферона III типа. Учитывая, что оба интерферона типа I и III одновременно индуцируются TLR (Ank et al., 2008) и активации дектина-1 (Dutta et al., 2020), заманчиво предположить, что в нашем исследовании интерферон III типа активировался в клетках, обработанных кагоцелом, и опосредовал некоторые эффекты препарата. Еще одним компонентом систем клеточной противовирусной защиты, реагирующих на аппликацию кагоцела, была 2-5′-олигоаденилатсинтетаза 2, фермент, способный прерывать репликацию вируса посредством активации РНКазы L и независимым от олигоаденилата способом (Kristiansen et al., 2010). ).

Ifna1 был одним из генов с наибольшим кратным изменением (>5) в клетках, обработанных кагоцелом, по сравнению с контрольными лимфоцитами PP.Аналогичное увеличение продукции интерферона, индуцированное кагоцелом, ранее сообщалось с использованием клеточных линий человека (Вершинина и др., 2002). Противовирусные свойства интерферона исследуются годами, и поиск в PubMed «альфа-интерферон И вирус» дает более 23 тысяч ссылок. Имеется еще больше информации об использовании интерферонов для лечения различных вирусных инфекционных заболеваний. Важно отметить, что потенцирующий эффект кагоцела на экспрессию Ифна проявлялся в присутствии лиганда TLR-3 poly I:C, что свидетельствует о вовлечении дополнительных механизмов индукции интерферона.Сообщалось, что как dectin-1 (Dragicevic et al., 2012), так и рецепторы TLR2 (Vanhoutte et al., 2008) взаимодействуют с передачей сигналов TLR-3, значительно изменяя функции лимфоцитов.

Следует отметить, что большинство генов кагоцел-респондеров, участвующих в противовирусной защите, активировались только в ко-стимулированных конканавалином А и поли I:C лимфоцитах, в то время как в отсутствие дцРНК эти гены подавлялись в леченных кагоцелом клеток по сравнению с контрольными лимфоцитами. Среди них следует указать Oasl, Il17, Ifit1 и Ccr1.Напротив, ИЛ5 активировался кагоцелом в конканавалин А, стимулированных РР-лимфоцитах, но не было обнаружено влияния на экспрессию этого цитокина в кон-А и ко-стимулированных клетках поли I:С. Другой интересной возможностью является участие аутокринной петли интерферона I типа в эффектах кагоцела. При активации рецепторов TLR INFα может стимулировать клетку аутокринным образом через INFAR1 (Song et al., 2015), и, что важно, сообщается, что этот механизм участвует в эффектах β-D-глюканов (Hassanzadeh- Киаби и др., 2017). Кроме того, интерферон I типа способен повышать продукцию IL10 различными типами иммунных клеток, стимулированных лигандами TLR (Gabryšová et al., 2014). Таким образом, повышенная продукция IL-10 при обработке лимфоцитов пейеровой бляшки кагоцелом (2) подтверждает участие INFα в реализации эффектов кагоцела.

До начала исследования мы предположили, что либо Toll-подобные рецепторы, либо рецептор dectin-1 могут опосредовать иммуномодулирующие эффекты кагоцела. В этом исследовании мы провели поиск мастер-молекул, опосредующих изменения в паттернах экспрессии генов.Среди кандидатов на опосредование действия кагоцела ключевые компоненты TLR-сигнальных путей TRAF, Tab, TAK, IKKα и IKKβ, RIP и IRF были идентифицированы с высокими баллами и низкими FDR, а экспрессия IRF3 и IFF7 была умеренно повышенной. регулируется кагоцелом (). Идентификация пути IFNα, IFNβ/IFNAR/Tyk2/Jak и его отдельных компонентов среди кандидатов подтверждает гипотезу об участии аутокринной петли интерферона в действии кагоцела на лимфоциты PP. Далее, наши результаты подтверждают возможность участия рецептора dectin-1 в реализации эффектов кагоцела.Несмотря на то, что передача сигналов dectin-1 изучена менее полно по сравнению с другими PRR (Tang et al., 2018), очевидно, что передача сигналов dectin и TLR2 тесно взаимодействует, опосредуя активируемый глюканом противогрибковый иммунитет (Brown, 2005). В подтверждение возможности активации dectin-1 кагоцелом среди кандидатов в мастер-молекулы были идентифицированы SYK и ZAP-70. Более того, передача сигналов от обоих возможных рецепторов кагоцела конвергентна в управлении воспалительной реакцией (Gantner et al., 2003).Наконец, ко-стимуляция рецепторов TLR и Dectin-1 увеличивает продукцию IL-10 (Gabryšová et al., 2014), что является одним из возможных объяснений повышенной продукции IL-10, наблюдаемой в этом исследовании в обработанных кагоцелом лимфоцитах ().

Результаты нашего исследования обобщены в . Мы пришли к выводу, что лимфоциты пейеровых бляшек, играющие важную роль в противовирусной защите, могут быть доступны для кагоцела при пероральном введении, что делает ассоциированную с кишечником лимфоидную ткань вероятным местом действия кагоцела.При воздействии кагоцела на смешанную популяцию PP-лимфоцитов препарат предположительно связывается с рецепторами TLR2 и/или dectin-1, индуцируя нижестоящую передачу сигналов и активацию врожденного противовирусного ответа с возможным вовлечением аутокринной петли интерферона. Эти гены, активность которых повышается при лечении кагоцелом, участвуют в различных стадиях противовирусного и антибактериального иммунитета, начиная от распознавания патогена и модуляции иммунного ответа и заканчивая эффекторными белками. Необходимы дальнейшие исследования для подтверждения участия этих механизмов в иммуномодулирующем действии кагоцела.

Возможный механизм действия кагоцела, обобщенный по результатам исследования. Элементы сети, выделенные жирным цветом, представляют собой либо гены с повышенной регуляцией в лимфоцитах пейеровой бляшки, либо факторы транскрипции/главные регуляторы, идентифицированные с помощью инструментов биоинформатики.

Материалы и методы

Выделение лимфоцитов пейеровых бляшек

Лимфоциты пейеровых бляшек выделяли из самцов мышей BALB/c, как описано ранее (Lefrançois and Lycke, 1996).Вкратце, мышей гуманно умерщвляли, тонкий кишечник вырезали и помещали на лед. Просвет кишечника промывали 20 мл охлажденного льдом PBS, пейеровы бляшки подвергали микродиссекции под микроскопом и трижды промывали охлажденным льдом PBS с добавлением гентамицина (100 мкг/мл). Пластыри от 6-8 мышей объединяли.

Для облегчения диссоциации ткани пластыри инкубировали в CMF (85% HBSS без Mg 2+ , Ca 2+ и NaHCO 3 ; 1xHEPES-бикарбонатный буфер и 5% FBS) на ротационном шейкере в течение 30 мин при 37°С.После этого ткань пропускали через 70-мкм клеточный фильтр, суспензию осаждали (5 мин при 500 rcf) и трижды промывали CMF. Лимфоциты отделяли центрифугированием в 44% Percoll, наслоенном на 80% Percoll, в течение 20 мин при 600 rcf, четыре раза промывали в HBSS и ресуспендировали до 1×10 6 /мл в RPMI 1640 с добавлением L-глютамина, 10% FBS. и 100 мкг/мл гентамицина. Чтобы проверить количество жизнеспособных лимфоцитов, клетки по-разному окрашивали йодидом пропидия (10 мкМ) и SYBR Green (1 мкМ), а количество живых клеток подсчитывали по микрофотографиям.В шести отдельных экспериментах в среднем 90 ± 3% клеток были жизнеспособны.

Культура лимфоцитов

Выделенные лимфоциты разделяли на две аликвоты и стимулировали 10 мкг/мл конканавалина А или комбинацией 10 мкг/мл конканавалина А и 10 мкг/мл агониста TLR-3 поли I:C. Для обеспечения надлежащего отжига поли I:C нагревали в течение 5 мин при 55°С и охлаждали до комнатной температуры в течение 1 ч. Стимулированные лимфоциты высевали в 24-луночные планшеты (SPL Life Sciences, Южная Корея), 1.5 × 10 6 клеток на лунку, инкубировали при 37°С в атмосфере 5% CO 2 (инкубатор MCO-5AC, Sanyo, Япония).

Через 24 ч культивирования с митогенами к клеткам добавляли воду (H 2 O) или 30, 100 или 300 мкг/мл кагоцела (Kag) в объеме 15 мкл (1:100 v: в). Лимфоциты положительного контроля обрабатывали 300 мкг/мл лентинана (Lent) или 300 мкг/мл β-D-глюкана овса (βDGlu).

Образцы собирали через 24 и 72 часа инкубации с препаратами, по одной лунке на обработку, в каждый из двух моментов времени.Клетки осаждали центрифугированием при 500 rcf в течение 5 мин. Культуральные среды собирали и замораживали при 80°С для последующего анализа содержания цитокинов, при этом клетки немедленно лизировали 500 мкл TRI-реагента в течение 20 мин на ротационном шейкере при комнатной температуре.

Таким образом, паттерны экспрессии и продукцию цитокинов для каждого из препаратов изучали в двух временных точках для каждого из двух протоколов стимуляции митогеном. Всего было выполнено шесть независимых повторов этой конструкции.Концентрацию цитокинов измеряли во всех прогонах, а характер экспрессии генов исследовали только в трех последних прогонах.

ELISA

Культуральные среды анализировали на содержание INFα, INFγ, IL2, IL10 и TNFα с использованием наборов RnD в соответствии с инструкциями производителя.

Статистический анализ концентраций цитокинов проводили отдельно для каждого из испытуемых препаратов с использованием трехфакторного дисперсионного анализа (факторы «Время», «Митоген» и «Лекарство») с помощью Prism (v.8.0, GraphPad, США). Только основные эффекты и взаимодействия были проанализированы и признаны значимыми при p < 0,05.

Выделение РНК

Для разделения фаз лизаты реагента TRI обрабатывали 1-бром-3-хлорпропаном (1:10 об.:об.), тщательно перемешивали и центрифугировали при 12 000 rcf и 4°C в течение 15 мин. Водную фазу собирали и очищали с помощью микронаборов RNeasy (Qiagen, США) в соответствии с инструкциями производителя.Средний выход составил ≈800 нг на образец, измеренный с помощью флуорометра Qubit 4 (Invitrogen, США). Чистоту препаратов РНК анализировали с помощью NanoDrop (Thermo Scientific, США) и препараты субоптимального качества (A 260 /A 280 < 1,8, A 260 /A 230 < 1,8) исключали из дальнейшего анализа. Повторные образцы из трех независимых опытов смешивали в равных количествах и хранили при температуре -80°С до последующего анализа.

Анализ экспрессии генов

Анализ экспрессии генов проводили с использованием мышиных чипов nCounter Inflammation panel и анализировали с помощью программного обеспечения nCounter (NanoStiring Technologies, США) в соответствии с инструкциями производителя (Kulkarni, 2011).Вкратце, необработанные подсчеты были пороговыми с использованием среднего плюс 2 стандартных отклонения подсчетов встроенных отрицательных контролей, индивидуально для каждого чипа. Затем подсчеты были нормализованы к коэффициенту, полученному из подсчетов встроенных положительных контролей. Наконец, была применена вторая нормализация к среднему геометрическому экспрессии генов домашнего хозяйства для отдельных образцов.

Прогнозирование факторов транскрипции

В качестве следующего шага, отдельно для каждого из протестированных веществ, было рассчитано кратное изменение для каждого из генов-мишеней по сравнению с уровнем экспрессии в контрольном (обработанном солевым раствором) образце в соответствующий момент времени и выражается как логарифм 2 .Гены с двукратным изменением экспрессии по сравнению с сопоставимым по времени контролем (обработанным физиологическим раствором) были названы генами-респондерами (RG) и включены в дальнейший анализ. Факторы транскрипции, которые потенциально могут управлять экспрессией RG, были идентифицированы с использованием метода матрицы веса позиций. С этой целью были обнаружены сайты связывания факторов транскрипции в промоторной области (от -1500 до +500 п.н. относительно сайта начала транскрипции) RG. Для этого координаты сайта начала транскрипции каждого исследуемого гена были идентифицированы пакетом «biomaRt» в среде R с использованием координат 5’UTR наиболее распространенной изоформы мРНК, оцененной Cufflinks (v.2.2.1, NIH) на основании данных секвенирования РНК пейеровой бляшки CD 4+ Т-лимфоцитов (Visekruna et al., 2019). Поиск потенциальных сайтов связывания факторов транскрипции и анализ обогащения сайтов связывания в промоторных областях выполняли для повышающих и понижающих генов отдельно относительно набора из 5000 случайных промоторов генов, кодирующих белок, с использованием платформы GeneExplain («Поиск обогащенной TBFS в треков») и базу данных сайтов связывания факторов транскрипции (TBFS) TRANSFAC v. 2020.2 (Koschmann et al., 2015). Вкратце, алгоритм ищет TBFS в промоторной области исследуемого и эталонного генов. Затем подсчитывают количество промоторных участков, содержащих специфические TBFS, для исследуемого и эталонного генов с последующим статистическим анализом с помощью точного критерия Фишера. Во время поиска TFBS отсечение матрицы позиционных весов (PWM) оптимизируется, чтобы максимизировать скорректированное кратное обогащение (отношение шансов с доверительным интервалом 99%). Сайты связывания факторов транскрипции с скорректированным кратным обогащением (отношение шансов с доверительным интервалом 99 %), равным 1.1 и FDR <0,1 (критерий Фишера) считались значимыми.

Gene Ontology Analysis

Функциональное обогащение генов-респондеров было исследовано по отношению ко всему набору анализируемых генов (248 генов) с помощью инструмента PANTHER Overrepresentation Test (выпущен 28 июля 2020 г.) с использованием GO bio process Complete и PANTHER. Базы данных путей. Термины Gene Ontology с p <0,05 (исправленный биномиальный критерий Бонферрони) считались значительно обогащенными.

Прогнозирование вышестоящих сигнальных путей и мастер-регуляторов

Наборы факторов транскрипции, полученные для повышающей и понижающей регуляции генов для данной комбинации тестируемого вещества и момента времени, использовали в качестве исходных данных для анализа восходящих сигнальных путей и мастер-регуляторов (Платформа GeneExplain с базой данных Transpath v. 2020.2 и рабочим процессом «Поиск главных регуляторов в сетях»), как описано в (Koschmann et al., 2015). Поиск был выполнен с максимальным радиусом 10 шагов вверх по течению от набора входных генов, а потенциальные главные регуляторы отфильтровывались с отсечкой: оценка> 0.2, FDR <0,05 и Z-показатель >1,0 (где показатель отражает степень связи молекулы-регулятора с другими молекулами в базе данных и с входным списком; Z-показатель отражает специфичность каждой мастер-молекулы для входного списка; FDR представляет собой вероятность того, что молекула займет наблюдаемый или более высокий ранг случайно; FDR и Z-оценка рассчитываются на основе 1000 случайных результатов).

Материалы и реагенты

Гентамицин, конканавалин А, RPMI-1640 с добавлением l-глютамина, HBSS, 10 × PBS и 1 М раствор натриевой соли HEPES были приобретены у компании «ПанЭко» (Россия).Percoll ® , йодид пропидия, β-D-глюкан и калиевая соль полиинозиновой полицитидиловой кислоты (Poly I:C) были приобретены у Sigma-Aldrich (Россия). SYBRGreen был приобретен у Lumiprobe (Россия). TRI REAGENT ® был приобретен в Molecular Research Center, Inc. (США). Фетальную бычью сыворотку приобретали у компании BioSera (Франция). Лентинан был приобретен у компании Toronto Research Chemicals (Канада). Набор RNeasy Micro Kit был приобретен у Qiagen (США). Кагоцел предоставлен компанией «НиарМедик Плюс» (Россия).

Кагоцел таб 12 мг 10 шт

Описание

Состав
Активное вещество:
1 таблетка содержит: Кагоцел (в пересчете на сухое вещество) – 12 мг.
Вспомогательные вещества:
Крахмал картофельный – 10 мг, Кальция стеарат – 0,65 мг, людипресс (состав: лактозы моногидрат – от 91% до 95%, повидон (Коллидон 30) – от 3,0% до 4,0%, кросповидон (Коллидон CL) – от 3,0 % до 4,0%) – до получения таблеток массой 100 мг каждая.
Описание:
Таблетки от белого до коричневатого оттенка до светло-коричневого цвета круглые, двояковыпуклые с вкраплениями коричневого цвета.
Форма выпуска:
Таблетки по 12 мг.
Упаковка 20 таблеток.
Противопоказания
– Беременность и лактация;
– Возраст до 3 лет;
– Повышенная чувствительность к препарату;
– лактазная недостаточность, непереносимость лактозы, глюкозо-галактозная мальабсорбция.
Дозировка
12 мг
Показания
Препарат Кагоцел применяют у взрослых и детей с 3 лет как профилактическое и лечебное средство при гриппе и других острых респираторных вирусных инфекциях (ОРЗ), а также как средство от герпеса у взрослых.
Взаимодействие с другими лекарственными средствами
Препарат Кагоцел хорошо сочетается с другими противовирусными средствами, иммуномодуляторами и антибиотиками (аддитивный эффект).
Передозировка
При случайной передозировке рекомендуется назначить обильное питье, вызвать рвоту.
Фармакологическое действие
Фармакологическая группа:
Противовирусное средство.
Фармакодинамика:
Основным механизмом действия Кагоцела является способность индуцировать продукцию интерферонов. Кагоцел вызывает образование в организме человека так называемых поздних интерферонов, представляющих собой смесь альфа- и бета-интерферонов, обладающих высокой противовирусной активностью.Кагоцел вызывает продукцию интерферона практически во всех клеточных популяциях, участвующих в противовирусном ответе организма: Т- и В-лимфоцитах, макрофагах, гранулоцитах, фибробластах, эндотелиальных клетках. При приеме внутрь одной дозы Кагоцела титр интерферона в сыворотке крови достигает максимума через 48 часов. Интерфероновый ответ организма на введение Кагоцела характеризуется длительной (до 4-5 дней) циркуляцией интерферонов в кровотоке. Динамика накопления интерферона в кишечнике при приеме Кагоцела не совпадает с динамикой титров циркулирующих интерферонов.Продукция интерферона в сыворотке крови достигает высоких значений только через 48 часов после приема Кагоцела, в то время как в кишечнике максимальная продукция интерферона отмечается только через 4 часа.
Препарат Кагоцел при приеме в терапевтических дозах нетоксичен, не кумулирует в организме. Препарат не обладает мутагенными и тератогенными свойствами, не канцерогенен и не обладает эмбриотоксической активностью.
Наибольшая эффективность при лечении препаратом Кагоцел достигается при его назначении не позднее 4-х суток от начала обострения инфекции.В профилактических целях препарат можно применять в любой период времени, в том числе сразу после контакта с инфекционным агентом.
Фармакокинетика:
Через 24 ч после введения в организм Кагоцел накапливается преимущественно в печени, в меньшей степени в легких, тимусе, селезенке, почках, лимфатических узлах. Низкие концентрации были в жировой ткани, сердце, мышцах, яичках, головном мозге, плазме крови. Низкое содержание Кагоцела в головном мозге обусловлено высокой молекулярной массой препарата, затрудняющей его проникновение через гематоэнцефалический барьер.В препаратах плазмы крови находится преимущественно в связанной форме.
При ежедневном многократном введении объем распределения Кагоцела широко варьирует во всех органах. Особенно выражено накопление препарата в селезенке и лимфатических узлах. При введении в кровоток попадает около 20% введенной дозы. Всасывается препарат, циркулирующий в крови, преимущественно в связанной с макромолекулами форме: липиды — 47%, белки — 37%. Несвязанных с препаратом составляет около 16%.
Выведение: препарат выводится из организма преимущественно через кишечник: через 7 дней после введения из организма выводится 88% введенной дозы, в том числе 90% — через кишечник и 10% — почками.Вдыхание наркотиков не обнаружено.
Беременность и кормление грудью
В связи с отсутствием клинических данных препарат противопоказан к применению при беременности и в период лактации.
Условия поставки аптек
Без рецепта.
побочные эффекты
Может развиться аллергическая реакция.
Если какие-либо из этих побочных эффектов усугубляются, или если вы заметили какие-либо другие побочные эффекты, не упомянутые в инструкциях, сообщите об этом своему врачу.
Особые указания
Для достижения терапевтического эффекта прием препарата следует начинать не позднее четвертого дня от начала заболевания.
Влияние на способность управлять двигателем транспортного средства.
Влияние на способность управлять транспортными средствами, механизмы не изучались.
Условия хранения
В защищенном от света месте при температуре не выше 25 С.
Хранить в недоступном для детей месте.
Способ применения и дозы
Внутрь, независимо от приема пищи.
Для лечения гриппа и ОРВИ у взрослых назначают в первые двое суток — по 2 таблетки 3 раза в сутки, в последующие двое суток — по одной таблетке 3 раза в сутки.На курс – 18 таблеток, продолжительность курса – 4 дня.
Профилактика гриппа и ОРВИ у взрослых проводится 7-дневными циклами: 2 дня — по 2 таблетки 1 раз в день, 5 дней перерыв, затем цикл повторяют. Продолжительность профилактического курса – от одной недели до нескольких месяцев.
Для лечения герпеса взрослым назначают по 2 таблетки 3 раза в день в течение 5 дней. На курс – 30 таблеток, продолжительность курса – 5 дней.
Для лечения гриппа и ОРВИ у детей в возрасте от 3 до 6 лет назначают в первые двое суток — по 1 таблетке 2 раза в сутки, в последующие двое суток — по одной таблетке 1 раз в сутки.На курс – 6 таблеток, продолжительность курса – 4 дня. №
Для лечения гриппа и ОРВИ у детей в возрасте от 6 лет назначают в первые двое суток — по 1 таблетке 3 раза в сутки, в последующие двое суток — по одной таблетке 2 раза в сутки. На курс – 10 таблеток, продолжительность курса – 4 дня.
Профилактику гриппа и ОРВИ у детей проводят 7-дневными циклами в течение 3 лет: два дня – по 1 таблетке 1 раз в день, 5 дней перерыв, затем цикл повторяют.Продолжительность профилактического курса – от одной недели до нескольких месяцев.
Если после лечения нет улучшения или симптомы усугубляются, или появляются новые симптомы, следует проконсультироваться с врачом.
Применение по показаниям препарата только по показаниям и в тех дозах, которые указаны в инструкции.
Информация
Внешний вид может отличаться от изображенного на картинке. Есть противопоказания. Необходимо прочитать инструкцию или проконсультироваться со специалистом.

Кагоцел таб 12 мг 20 шт

Описание

Состав
Активное вещество:
1 таблетка содержит: Кагоцел (в пересчете на сухое вещество) – 12 мг.
Вспомогательные вещества:
Крахмал картофельный – 10 мг, Кальция стеарат – 0,65 мг, людипресс (состав: лактозы моногидрат – от 91% до 95%, повидон (Коллидон 30) – от 3,0% до 4,0%, кросповидон (Коллидон CL) – от 3,0 % до 4,0%) – до получения таблеток массой 100 мг каждая.
Описание:
Таблетки от белого до коричневатого оттенка до светло-коричневого цвета круглые, двояковыпуклые с вкраплениями коричневого цвета.
Форма выпуска:
Таблетки по 12 мг.
Упаковка 20 таблеток.
Противопоказания
– Беременность и лактация;
– Возраст до 3 лет;
– Повышенная чувствительность к препарату;
– лактазная недостаточность, непереносимость лактозы, глюкозо-галактозная мальабсорбция.
Дозировка
12 мг
Показания
Препарат Кагоцел применяют у взрослых и детей с 3 лет как профилактическое и лечебное средство при гриппе и других острых респираторных вирусных инфекциях (ОРЗ), а также как средство от герпеса у взрослых.
Взаимодействие с другими лекарственными средствами
Препарат Кагоцел хорошо сочетается с другими противовирусными средствами, иммуномодуляторами и антибиотиками (аддитивный эффект).
Передозировка
При случайной передозировке рекомендуется назначить обильное питье, вызвать рвоту.
Фармакологическое действие
Фармакологическая группа:
Противовирусное средство.
Фармакодинамика:
Основным механизмом действия Кагоцела является способность индуцировать продукцию интерферонов. Кагоцел вызывает образование в организме человека так называемых поздних интерферонов, представляющих собой смесь альфа- и бета-интерферонов, обладающих высокой противовирусной активностью. Кагоцел вызывает продукцию интерферона практически во всех клеточных популяциях, участвующих в противовирусном ответе организма: Т- и В-лимфоцитах, макрофагах, гранулоцитах, фибробластах, эндотелиальных клетках.При приеме внутрь одной дозы Кагоцела титр интерферона в сыворотке крови достигает максимума через 48 часов. Интерфероновый ответ организма на введение Кагоцела характеризуется длительной (до 4-5 дней) циркуляцией интерферонов в кровотоке. Динамика накопления интерферона в кишечнике при приеме Кагоцела не совпадает с динамикой титров циркулирующих интерферонов. Продукция интерферона в сыворотке крови достигает высоких значений только через 48 часов после приема Кагоцела, в то время как в кишечнике максимальная продукция интерферона отмечается только через 4 часа.
Препарат Кагоцел при приеме в терапевтических дозах нетоксичен, не кумулирует в организме. Препарат не обладает мутагенными и тератогенными свойствами, не канцерогенен и не обладает эмбриотоксической активностью.
Наибольшая эффективность при лечении препаратом Кагоцел достигается при его назначении не позднее 4-х суток от начала обострения инфекции. В профилактических целях препарат можно применять в любой период времени, в том числе сразу после контакта с инфекционным агентом.
Фармакокинетика:
Через 24 ч после введения в организм Кагоцел накапливается преимущественно в печени, в меньшей степени в легких, тимусе, селезенке, почках, лимфатических узлах.Низкие концентрации были в жировой ткани, сердце, мышцах, яичках, головном мозге, плазме крови. Низкое содержание Кагоцела в головном мозге обусловлено высокой молекулярной массой препарата, затрудняющей его проникновение через гематоэнцефалический барьер. В препаратах плазмы крови находится преимущественно в связанной форме.
При ежедневном многократном введении объем распределения Кагоцела широко варьирует во всех органах. Особенно выражено накопление препарата в селезенке и лимфатических узлах. При введении в кровоток попадает около 20% введенной дозы.Всасывается препарат, циркулирующий в крови, преимущественно в связанной с макромолекулами форме: липиды — 47%, белки — 37%. Несвязанных с препаратом составляет около 16%.
Выведение: препарат выводится из организма преимущественно через кишечник: через 7 дней после введения из организма выводится 88% введенной дозы, в том числе 90% — через кишечник и 10% — почками. Вдыхание наркотиков не обнаружено.
Беременность и кормление грудью
В связи с отсутствием клинических данных препарат противопоказан к применению при беременности и в период лактации.
Условия поставки аптек
Без рецепта.
побочные эффекты
Может развиться аллергическая реакция.
Если какие-либо из этих побочных эффектов усугубляются, или если вы заметили какие-либо другие побочные эффекты, не упомянутые в инструкциях, сообщите об этом своему врачу.
Особые указания
Для достижения терапевтического эффекта прием препарата следует начинать не позднее четвертого дня от начала заболевания.
Влияние на способность управлять двигателем транспортного средства.
Влияние на способность управлять транспортными средствами, механизмы не изучались.
Условия хранения
В защищенном от света месте при температуре не выше 25 С.
Хранить в недоступном для детей месте.
Способ применения и дозы
Внутрь, независимо от приема пищи.
Для лечения гриппа и ОРВИ у взрослых назначают в первые двое суток — по 2 таблетки 3 раза в сутки, в последующие двое суток — по одной таблетке 3 раза в сутки. На курс – 18 таблеток, продолжительность курса – 4 дня.
Профилактика гриппа и ОРВИ у взрослых проводится 7-дневными циклами: 2 дня — по 2 таблетки 1 раз в день, 5 дней перерыв, затем цикл повторяют.Продолжительность профилактического курса – от одной недели до нескольких месяцев.
Для лечения герпеса взрослым назначают по 2 таблетки 3 раза в день в течение 5 дней. На курс – 30 таблеток, продолжительность курса – 5 дней.
Для лечения гриппа и ОРВИ у детей в возрасте от 3 до 6 лет назначают в первые двое суток — по 1 таблетке 2 раза в сутки, в последующие двое суток — по одной таблетке 1 раз в сутки. На курс – 6 таблеток, продолжительность курса – 4 дня. №
Для лечения гриппа и ОРВИ у детей в возрасте от 6 лет назначают в первые двое суток — по 1 таблетке 3 раза в сутки, в последующие двое суток — по одной таблетке 2 раза в сутки.На курс – 10 таблеток, продолжительность курса – 4 дня.
Профилактику гриппа и ОРВИ у детей проводят 7-дневными циклами в течение 3 лет: два дня – по 1 таблетке 1 раз в день, 5 дней перерыв, затем цикл повторяют. Продолжительность профилактического курса – от одной недели до нескольких месяцев.
Если после лечения нет улучшения или симптомы усугубляются, или появляются новые симптомы, следует проконсультироваться с врачом.
Применение по показаниям препарата только по показаниям и в тех дозах, которые указаны в инструкции.
Информация
Внешний вид может отличаться от изображенного на картинке. Есть противопоказания. Вам необходимо прочитать руководство или проконсультироваться со специалистом.

(PDF) Характер экспрессии генов лимфоцитов пейеровой бляшки, подвергшихся воздействию кагоцела Предполагает, что рецепторы распознавания образов опосредуют его действие

Guo, Y., Cao, W., and Zhu, Y. (2019). Иммунорегуляторные функции семейства цитокинов IL-12

в противовирусных системах. Viruses 11, 772. doi:10.3390/

v110

Haller, O., Staeheli, P., Schwemmle, M., и Kochs, G. (2015). Mx GTPases:

Динаминоподобные противовирусные машины врожденного иммунитета. Тенденции микробиол. 23,

154–163. doi:10.1016/j.tim.2014.12.003

Хансен, К.Б., Виллер, А., Баярри-Олмос, Р., Кемпер, К., и Гарред, П. (2019).

Экспрессия генов комплемента C3, C5, C3aR и C5aR1 в покоящихся и

активированных CD4+ T-клетках. Иммунобиология 224, 307–315. doi:10.1016/

j.imbio.2018.12.004

Hassanzadeh-Kiabi,N., Яньес А., Данг И., Мартинс Г. А., Андерхилл Д. М. и

Гудридж Х. С. (2017). Аутокринная передача сигналов IFN I типа в дендритных

клетках, стимулированных грибковыми β-глюканами или липополисахаридами, способствует

активации CD8 Т-клеток. Дж. Иммунол. 198, 375–382. doi:10.4049/

jimmunol.1601143

Heidegger S., Anz D., Stephan N., Bohn B., Herbst T., Fendler W.P., et al.

(2013). Вирус-ассоциированная активация врожденного иммунитета вызывает быстрое

разрушение пейеровых бляшек у мышей.Кровь 122, 2591–2599. doi:10.1182/

blood-2013-01-479311

Howe, S.E., Lickteig, D.J., Plunkett, K.N., Ryerse, J.S., and Konjufca, V. (2014).

Поглощение растворимых и дисперсных антигенов эпителиальными клетками мыши

Тонкий кишечник. Плос. Один. 9, е86656. doi:10.1371/journal.pone.0086656

Ichinohe, T., Pang, I.K., Kumamoto, Y., Peaper, D.R., Ho, J.H., Murray, T.S., et al.

(2011). Микробиота регулирует иммунную защиту от респираторных инфекций

Вирус гриппа А.проц. Натл. акад. науч. 108, 5354–5359.

doi:10.1073/pnas.1019378108

Илиано П., Брамбилла Р. и Паролини К. (2020). Взаимное взаимодействие кишечника

Микробиота, диета и болезни человека. Febs J. 287, 833–855. doi:10.1111/

фев.15217

Ивасаки А. и Меджитов Р. (2004). Толл-подобный рецепторный контроль адаптивных

иммунных ответов. Нац. Иммунол. 5, 987–995. doi:10.1038/ni1112

Юнг К., Хьюго Ж.-П. и Барро Ф.(2010). Пейеровы бляшки: иммунные датчики

кишечника. Междунар. Дж. Инфламм. 2010, 1–12. doi: 10.4061/2010/823710

Юнг, Х., О, Дж., и Ли, Х. (2019). Проникающий в клетки Mx1 повышает противовирусную

устойчивость к вирусной инфекции гриппа слизистых оболочек. Viruses 11, 109.

doi:10.3390/v11020109

Ханна А.К., Пламмер М., Нилакантан В. и Пипер Г.М. (2005). Рекомбинантный белок P21

ингибирует пролиферацию лимфоцитов и факторы транскрипции.

Дж. Иммунол. 174, 7610–7617. doi:10.4049/jimmunol.174.12.7610

Kieser, KJ, and Kagan, JC (2017). Мультирецепторное обнаружение отдельных бактериальных продуктов

врожденной иммунной системой. Нац. Преподобный Иммунол. 17,

376–390. doi:10.1038/nri.2017.25

Кошманн Дж., Бхар А., Стегмайер П., Кел А. и Вингендер Э. (2015).

«Анализ восходящего потока»: интегрированный подход к анализу пути продвижения промотора

к причинно-следственной интерпретации данных микрочипа.Микрочипы 4, 270–286.

doi:10.3390/microarrays4020270

Kristiansen, H., Scherer, C.A., McVean, M., Iadonato, S.P., Vends, S.,

Thavachelvam, K., et al. (2010). Внеклеточный 2′-5’олигоаденилат

Синтетаза стимулирует РНКазу L-независимую противовирусную активность: новый механизм

вирус-индуцированного врожденного иммунитета. Дж. Вирол. 84, 11898–11904.

doi:10.1128/jvi.01003-10

Кулкарни, М. М. (2011). Цифровой мультиплексный анализ экспрессии генов с использованием системы

NanoString nCounter.Курс. протокол Мол. биол. 94, 25Б.10.1–25Б.10.17.

doi:10.1002/0471142727.mb25b10s94

Lefebvre, J.S., Marleau, S., Milot, V., Lévesque, T., Picard, S., Flamand, N., et al.

(2010). Лиганды Toll-подобных рецепторов индуцируют миграцию полиморфноядерных лейкоцитов

: ключевые роли лейкотриена B4 и фактора активации тромбоцитов.

ФАСЭБ. Дж. 24, 637–647. doi:10.1096/fj.09-135624

Лефрансуа, Л., и Лике, Н. (1996). Изоляция тонкого кишечника мыши

Внутриэпителиальные лимфоциты, пейеровы бляшки и клетки собственной пластинки.Курс.

Протокол. Мол. биол. 17, 3.19.1–3.19.16. doi:10.1002/0471142735.im0319s17

Li, Y., Wen, Z., Zhou, H., Wu, S., Jia, G., Qian, W., et al. (2015). Свиной интерферон-

Индуцированный белок с тетратрикопептидными повторами 3, poIFIT3, ингибирует репликацию свиного

вируса гриппа и усиливает продукцию IFN-β. Дев. Комп.

Иммунол. 50, 49–57. doi:10.1016/j.dci.2014.10.008

Лим В., Хэм Дж., Пак С., Бэ Х., Ю С. и Сонг Г. (2019).Госсипол вызывает нарушение сперматогенеза и стероидогенеза у самцов мышей. Дж. Агрик. Пищевая

Хим. 67, 2075–2085. doi:10.1021/acs.jafc.8b06946

Логинова С.Ю., Щукина В.Н., Савенко С.В., Борисевич С.В. (2020).

Противовирусная активность Кагоцела in vitro в отношении вируса SARS-CoV-2. ж. 65, 3–6.

doi:10.37489/0235-2990-2020-65-3-4-3-6

Lycke, N. (2012). Недавний прогресс в разработке вакцины для слизистых оболочек: потенциал и ограничения

.Нац. Преподобный Иммунол. 12, 592–605. doi:10.1038/nri3251

Мехвар, Р., и Шепард, Т.Л. (1992). Зависит от молекулярной массы

Фармакокинетика меченых флуоресцеином декстранов у крыс. Дж. Фарм. науч. 81,

908–912. doi:10.1002/jps.2600810914

Млкохова П., Уинстон Х., Зулиани-Альварес Л. и Гупта Р.К. (2020). TLR4-

Опосредованный путь запускает интерферон-независимую остановку G0 и противовирусную активность

SAMHD1 в макрофагах. Сотовый представитель30, 3972–3980. doi:10.1016/

j.celrep.2020.03.008

Некас Дж. и Бартосикова Л. (2013). Каррагинан: обзор. Veterinarni Medicina

58, 187–205. doi:10.17221/6758-VETMED

Nguyen H.H., Boyaka P.N., Moldoveanu Z., Novak M.J., Kiyono H., McGhee,

J.R., et al. (1998). Эпителиальные клетки, инфицированные вирусом гриппа, представляют вирусные

антигены антиген-специфическим CD8 + цитотоксическим Т-лимфоцитам. Дж. Вирол. 72,

4534–4536.doi:10.1128/jvi.72.5.4534-4536.1998

Никлин С., Бейкер К. и Миллер К. (1988). Поглощение каррагинана кишечником:

Распределение и влияние на гуморальный иммунитет. Доп. Эксп. Мед.

Биол. 237, 813–820. doi:10.1007/978-1-4684-5535-9_122

Новелли Ф. и Казанова Ж.-Л. (2004). Роль IL-12, IL-23 и IFN-γ в иммунитете

к вирусам. Цитокиновый фактор роста. Откр. 15, стр. 367–377. doi:10.1016/

j.cytogfr.2004.03.009

О, Дж.Z., Ravindran, R., Chassaing, B., Carvalho, F.A., Maddur, M.S., Bower, M.,

et al. (2014). TLR5-опосредованное определение кишечной микробиоты необходимо для ответа антител

на сезонную вакцинацию против гриппа. Иммунитет 41, 478–492.

doi:10.1016/j.immuni.2014.08.009

Oliveira-Nascimento, L., Massari, P., and Wetzler, L.M. (2012). Роль TLR2 в инфекции

и иммунитете. Передний. Иммун. 3, 79. doi:10.3389/fimmu.2012.00079

Попов А.Ф., Симакова А.И., Дмитренко К.А., Щелканов М.Ю. (2017a).

Динамика изменений цитокинов (ИФН-γ, ИФН-α, ИЛ-18, ФНО-α) в

Лечение умеренного гриппа А (h2N1) Pdm09 (2013-2016) с

Осельтамивир (Тамифлю) и умифеновир (арбидол) отдельно и в комбинации

с кагоцелом. тер. ковчег. 89, 66–70. doi:10.17116/terarch30178

-70

Попов А.Ф., Симакова А.И., Дмитренко К.А., Щелканов М.Ю.

(2017b).Повышение противогриппозной эффективности осельтамивира (тамифлю®) и умифеновира

(арбидола®) при совместном применении с кагоцелом®. Антибиот.

Химия. 62, 25–29.

Роткеттер Х. Дж., Пабст Р. и Бейли М. (1999). Миграция лимфоцитов в

слизистой оболочке кишечника: вход, транзит и эмиграция лимфоидных клеток и влияние антигена. Вет. Иммунол. Иммунопатология 72, 157–165.

doi:10.1016/s0165-2427(99)00128-2

Сато, М., Сано, Х., Иваки Д., Кудо К., Кониши М., Такахаши Х. и др. (2003).

Прямое связывание Toll-подобного рецептора 2 с зимозаном и индуцированный зимозаном NF-

Активация Κb и секреция TNF-α подавляются легочным коллектином

Поверхностно-активный белок A. J. Immunol. 171, 417–425. doi:10.4049/

jimmunol.171.1.417

Scaldaferri, F., Ianiro, G., Privitera, G., Lopetuso, L.R., Vetrone, L.M., Petito, V.,

et al. (2020). Захватывающее путешествие SARS-CoV-2 в кишечник: от патогенеза

к будущим клиническим последствиям.Воспаление. Кишечник Дис. 26,

1306–1314. doi:10.1093/ibd/izaa181

Ши, К., Ульке-Леме, А., Дэн, Дж., Батулан, З., и О’Брайен, Э. Р. (2019).

Характеристика белка теплового шока 27 во внеклеточных везикулах:

Потенциальная противовоспалительная терапия. ФАСЭБ Дж. 33, 1617–1630. doi:10.1096/

fj.201800987r

Синицин А., Хотченков В., Рудой Б. и Казаишвили Ю. (2017). Оценка

возможности высвобождения свободного госсипола из кагоцела под влиянием

имитаторов пищеварительного сока человека.Фармация 66, 41–47.

Сологуб Т.В., Цветков В.В. (2017). Кагоцел в терапии гриппа и острых респираторных вирусных инфекций

: анализ и систематизация данных результатов доклинических и клинических испытаний

. тер. ковчег. 89, 113–119. doi:10.17116/

терарх3017898113-119

Сонг Дж., Гуань М., Чжао З. и Чжан Дж. (2015). Интерфероны типа I функционируют как

аутокринные и паракринные факторы, индуцирующие аутотаксин в ответ на активацию TLR

.Плос Один 10, e0136629. doi:10.1371/journal.pone.0136629

Song, W.-C. (2012). Перекрёстные помехи между комплементарными и толл-подобными рецепторами.

Токсикол. Патол. 40, 174–182. doi:10.1177/0192623311428478

Границы фармакологии | www.frontiersin.org Август 2021 г. | Том 12 | Артикул 67951111

Андреев-Андриевский и др. ППР Опосредованное действие Кагоцела на лимфоциты

инструкция по применению, состав, дозировка

Иммуномодулирующие и противовирусные препараты пользуются большой популярностью только в осенне-зимний период, когда простудные заболевания атакуют не только взрослых, но и маленьких детей.

Своевременно назначенный противовирусный препарат предотвращает распространение заболевания по организму, а при уже имеющемся заболевании быстро устраняет все его симптомы.

Какие лекарства от простуды и гриппа наиболее эффективны? Сегодня мы расскажем вам о таком популярном препарате, как «Кагоцел». Инструкция, аналоги, стоимость и показания этого медикамента будут представлены ниже.

Состав, форма выпуска, описание и упаковка

Знаете ли вы, какая форма выпуска препарата «Кагоцел» для детей? Инструкция по применению говорит, что этот продукт продается в виде кремовых или коричневатых таблеток круглой и двояковыпуклой формы с вкраплениями.Его действующим веществом является такое вещество, как кагоцел.

Также следует отметить, что в состав препарата входят также вспомогательные составляющие в виде крахмала картофельного, кальция стеарата и лудипресса, т.е. лактозы прямого прессования, состоящей из моногидрата лактозы и повидона.

Таблетки «Кагоцел» можно приобрести в упаковках ячеистых контурных, которые помещены в пачки картонные.

Механизм действия

Как действует препарат «Кагоцел», цена которого чуть ниже названной? Это средство представляет собой комплексную органическую натриевую соль, которую получают путем синтеза растворимых в хлопке семян хлопчатника и карбоксиметилцеллюлозы из водорастворимого полифенола.

Из вышеизложенного можно смело сделать вывод, что «Кагоцел» для детей – противовирусное средство на основе определенной доли растительных соединений.

Согласно инструкции, этот препарат обладает следующими свойствами:

  • противовирусный;
  • противомикробный;
  • иммуномодулирующие;
  • радиозащитный.

Механизм действия этого препарата очень прост. Он основан на способности активных компонентов стимулировать образование различного рода интерферонов, то есть естественных белков-защитников человеческого организма.В свою очередь, они активируют ферментативные системы, подавляющие вредоносную микрофлору и вирусные колонии.

Кроме того, интерфероны подавляют активность опухоли. Область применения этого препарата распространяется на Т- и В-лимфоциты, макрофаги, эндотелиальные клетки, гранулоциты и даже фибробласты.

Особенности препарата

Какие особенности присущи препарату «Кагоцел» детский? Через сутки основные компоненты этого препарата накапливаются в легких, тканях печени, почек, тимусе, селезенке и лимфатических узлах, то есть во всех органах, проявляющих выраженные иммунные свойства по отношению к поступающим извне вирусам.

Следует также отметить, что небольшая концентрация входящих в его состав ингредиентов наблюдается в жировой ткани, миокарде сердца, семенниках, мышцах, плазме крови и головном мозге.

Интерферон в сыворотке увеличивается постепенно. Максимальной его концентрации в крови она достигает через двое суток после приема таблеток. В кишечнике динамика накопления противовирусных элементов значительно выше и наблюдается через 4 часа.

Лечебное действие медикамента характеризуется как пролонгированное.Это связано с тем, что ответ интерферонов сохраняется в течение 5 дней. Благодаря этому свойству максимальная эффективность препарата при консервативном лечении наблюдается при его приеме не позднее 4 дней от начала острого течения заболевания.

Фармакокинетика

Абсорбируются ли таблетки Кагоцел? При пероральном введении в системный кровоток препарат поступает в количестве 20% от общей дозы. За сутки он накапливается во внутренних органах и тканях.

Небольшое количество активного компонента в головном мозге объясняется большой молекулярной массой препарата, что затрудняет проникновение через ГЭБ.

В крови препарат связывается с липидами (на 47%) и белками (на 37%). Несвязанная часть препарата составляет около 16%.

Препарат вводят преимущественно через кишечник через неделю после приема.

Показания к применению препарата

Когда вы получаете препарат Кагоцел для детей? В инструкции по применению указаны следующие заболевания:

  • вирусные инфекции (респираторные) острого характера;
  • грипп;
  • простой герпес у взрослых пациентов;
  • профилактика простуды.

Противопоказания

Какие противопоказания к применению Кагоцела детям? В инструкции по применению указаны следующие противопоказания к данному средству:

  • период грудного вскармливания и беременности;
  • индивидуальная повышенная чувствительность больного к входящим в состав препарата веществам;
  • приобретенная или наследственная непереносимость препарата;
  • ферментативные расстройства пищеварительного тракта;
  • возрастная категория до 3 лет.

Препарат «Кагоцел» для детей: инструкция по применению

В аннотации сказано, что применять такие противовирусные таблетки следует только внутрь. При этом их нельзя разжевывать, а также долго держать во рту (необходимо запивать простой водой).

Дозировка и продолжительность лечения ребенка этим препаратом подбираются индивидуально.

Дозировка для детей

Как давать детям препарат «Кагоцел»: до или после еды? Согласно инструкции, прием пищи не влияет на терапевтические свойства этого лекарства.Поэтому употреблять его можно независимо от приема пищи.

Прием «Кагоцела» в 3-6 лет проводят по 1 таблетке 2 раза в сутки (в первые 2 дня). Следующие двое суток такую ​​же дозу назначают один раз в сутки.

Таким образом, детский терапевтический курс включает 6 таблеток, которые принимают в течение 4 дней.

Как пить «Кагоцел» в возрасте 6 лет? В этом случае его назначают по 1 таблетке 3 раза в день (в первые 2 дня). Следующие двое суток доза сохраняется, но кратность приема снижается до двух раз в сутки.

Таким образом, продолжительность консервативной терапии не изменяется, однако дозировка увеличивается до 10 таблеток.

«Кагоцел» для профилактики вирусных заболеваний принимают по одной таблетке в день в течение четырех дней.

Прием препарата при герпесе

Как пить «Кагоцел» при герпесных высыпаниях? Ввиду того, что действие этого препарата распространяется на иммунную систему и вирусы, его применяют не только для лечения гриппа и простуды, но и для устранения герпеса.

При данном заболевании препарат назначают в количестве двух таблеток три раза в день в течение пяти дней.Курсовая доза препарата составляет 30 таблеток.

Назначение взрослым

Препарат «Кагоцел» для профилактики простудных заболеваний принимают 7-дневными циклами. В этом случае курс делится на два этапа. Во время первого приема лекарства принимают по 2 таблетки один раз в день в течение двух дней. Что касается второй фазы, то она включает в себя 5-дневный перерыв. За это время действующие вещества лекарства способны реализовать свои терапевтические эффекты. После этого профилактический курс можно повторить.

Как пить таблетки Кагоцел взрослым: до или после еды? Прием данного препарата взрослым пациентам также не должен зависеть от приема пищи.

Для лечения респираторных вирусных инфекций острой природы, а также гриппа или гриппоподобных заболеваний этот препарат назначают по 2 таблетки 3 раза в день в течение первых двух дней, а последующие 2 дня — по 1 таблетке 3 раза в день.

Побочное действие

Теперь вы знаете, как давать препарат «Кагоцел» ребенку (3 года).

Также следует отметить, что неблагоприятные явления от применения этого средства возникают очень редко. Как правило, они ограничиваются только аллергическими реакциями.Но если у пациента обнаружены какие-либо побочные эффекты, ему следует немедленно обратиться к квалифицированному врачу.

Стоимость и аналогичные средства

Сколько стоят таблетки Кагоцел? Цена этого лекарства не очень высока. В среднем это 180-200 рублей.

К аналогичным средствам специалисты относят следующие препараты: Авеол, Бронхостоп, Аква Марис, Атоксил, Бициклол, Авиаплант, Вазонат, Абюфен, Анаферон и другие.

К сожалению, не все перечисленные лекарства можно давать детям с трех лет.Поэтому перед их приемом необходимо проконсультироваться с педиатром.

Отзывы

Таблетки Кагоцел – очень популярный противовирусный препарат. По отзывам пациентов, его клиническая эффективность проявляется достаточно быстро. В течение недели препарат полностью устраняет острое респираторное заболевание, а также значительно улучшает качество жизни больного, в том числе в зимний период.

Большинство специалистов рекомендуют использовать это средство для профилактической санации бронхолегочной системы.

Отзывы родителей об этом препарате носят в большей степени положительный характер. По их данным, это лекарство можно давать детям с трех лет. Он хорошо устраняет все признаки простуды и гриппа, а также не дает серьезных побочных эффектов.

Противовирусные препараты, вызывающие бесплодие. Лекарства от простуды, вызывающие бесплодие у мужчин. Противовирусные препараты от гриппа и ОРВИ: результат или безопасность

Мужской организм (и особенно его половая сфера) представляет собой сложный механизм, сочетающий в себе чрезвычайно уязвимые части.Нарушить слаженность этого механизма может любой фактор – стресс, перенесенные болезни, травмы и даже прием некоторых лекарств. В частности, специалисты признают, что есть еще и лекарство от простуды, вызывающее бесплодие у мужчин, хотя и имеющее временный эффект. Представителю сильного пола следует очень осторожно относиться к таким средствам от ОРВИ и гриппа, если он планирует в ближайшее время стать отцом.

Бесплодие вследствие простуды

Бесплодие, развившееся на фоне приема некоторых лекарственных препаратов, является довольно частым явлением.Традиционно к таким препаратам относятся препараты, серьезно «регулирующие» иммунную систему, например, химиотерапевтические препараты или гормональные препараты, помогающие организму восстановить барьерные функции после облучения или лучевой терапии. Но бывает и так, что причиной бесплодия (временного, в отличие от вышеперечисленных продуктов) является самая обычная простуда и лечебное воздействие на нее.

Состояние, которое люди в быту привыкли называть простудой, с точки зрения медицины является тем или иным проявлением представителей группы острых респираторных инфекций.Такие проблемы вызываются вирусами и бактериями, имеют более чем широкое распространение при максимальной восприимчивости.

Если так называемая простуда протекает с элементарным набором симптомов — кашлем, чиханием и насморком, то она окажет минимальное влияние на фертильность мужчины. Другое дело, если заболевание не обычное ОРВИ, а грипп со значительным повышением (до 38°С) температуры тела. При этом в мужском организме возникают патологические процессы, препятствующие выработке сперматозоидов в достаточном количестве, а также негативно влияющие на качество и подвижность мужских половых клеток.

Если простуда сопровождается кашлем, чиханием и насморком, это окажет минимальное влияние на фертильность мужчины.

Простуда может вызвать мужское бесплодие по перечисленным причинам, однако это состояние обратимо: так как период созревания сперматозоидов составляет в среднем 1 месяц, после этого цикла произойдет новая продукция половых клеток, которые выживут, будут в семенной жидкости в оптимальных количествах и, если удастся оплодотворить яйцеклетку. Наличие инфекционно-вирусного поражения органов дыхания значительно снижает возможность оплодотворения, однако в течение максимум 2-3 месяцев состав и количество сперматозоидов восстанавливаются.

А если лечить простуду

Простуда, вылеченная со временем, проходит бесследно, хотя может вызвать временное бесплодие, которое исчезает в течение нескольких недель. А вот если речь идет о лечении ОРВИ и гриппа, то тут все может быть намного сложнее. Из всех лекарств от простуды противовирусные препараты и таблетки с антибиотиками могут вызывать бесплодие у мужчин.

Противовирусный препарат (может относиться к категориям интерферонов, индукторов интерферона и иммуностимуляторов), помимо своей основной активности, то есть подавления активности вирусов, способен стимулировать работу иммунной системы, что часто вызывает аутоиммунная атака на нормальный процесс сперматогенеза.Именно поэтому препараты против гриппа и простуды, такие как Амиксин, Циклоферон, Кагоцел или Арбидол, при планировании зачатия мужчинами следует использовать с особой осторожностью.

Эффекты антибиотиков в организме сохраняются в течение 3 и более месяцев

Антибиотики для лечения респираторных инфекций применяются достаточно редко, основное их назначение – борьба с заболеванием при наличии осложнений или при подозрении на них. Не последнюю роль в этом играет и тот факт, что эти препараты имеют значительное количество побочных эффектов, в том числе негативное влияние на сперматогенез.Мужская фертильность при приеме антибиотиков снижается особенно сильно и надолго, если лечение проводится на ранней стадии процесса формирования мужских половых клеток.

И даже если негативное воздействие было нанесено в середине цикла сперматогенеза, действие этих препаратов таково, что угнетаются многие системы, нарушается нормальное образование сперматозоидов и создаются условия, при которых успешное зачатие становится невозможным. Важно знать, что действие антибиотиков (чаще всего применяются Амоксициллин, Амоксиклав, Аугментин) в организме сохраняется в течение 3 и более месяцев, и это необходимо учитывать при планировании беременности.

Какое средство от «простуды» вызывает бесплодие у мужчин? Подобных вопросов и мнений в Интернете предостаточно. Какие опасения, что Кагоцел влияет на мужскую фертильность? Например, существует мнение, что госсипол, хлопковый пигмент и активный компонент кагоцела, снижает шансы на зачатие у мужчин. Это действительно так?

Считается, что противовирусные препараты, такие как кагоцел, содержащий госсипол, вещество, выделяемое из вегетативных частей хлопка, могут подавлять сперматогенез и в некоторых случаях «работать» как мужское противозачаточное средство.По своей химической природе госсипол является ядовитым алкалоидом, необходимым растению для защиты от вредоносных насекомых-вредителей.

Известно, что госсипол снижает подвижность зрелых сперматозоидов и приводит к угнетению развивающихся форм сперматозоидов, особенно на стадии сперматид. Он также способен ингибировать ряд белков и ферментов, содержащихся в сперматозоидах и сперматогенных эпителиальных клетках. Выходит, Кагоцел тоже может спровоцировать бесплодие?

Лекарства от простуды и бесплодие, как был открыт госсипол

В первой трети 20 века мужчины северных провинций Китая, в том числе этнические кыргызы, уйгуры и китайцы, столкнулись с проблемой бесплодия.Проанализировав возможные факторы, ученые установили, что на рождаемость повлияло потребление традиционного для этой местности хлопкового масла. Одним из отравляющих веществ в масле был тот же госсипол.

С госсиполем вообще странная история. В 70-х годах XX века китайские ученые попытались создать на его основе мужское противозачаточное средство — это было необходимо для контроля рождаемости в стране. Однако он был снят с разработки из-за токсичности.

Среди наиболее побочных эффектов при приеме чистого госсипола были:

  • усталость;
  • снижение либидо;
  • кишечные расстройства;
  • сухость во рту;
  • головокружение.

К концу 1990-х исследования госсипола были прекращены по рекомендации ВОЗ. Но не везде.

Принимать или не принимать лекарство от «простуды», если вы хотите ребенка?

Многих мужчин беспокоит риск бесплодия, в том числе из-за применения Кагоцела.Масла в огонь подливают публикации в Интернете и медицинская литература, ведь именно госсипол используется в производстве кагоцела. Имеются данные о том, что госсипол, как и его производные, обладает определенным противовирусным, иммуномодулирующим действием.

При изготовлении Кагоцела госсипол используется в сочетании с карбоксиметилцеллюлозой, что, по утверждению производителей, нивелирует негативные свойства, присущие свободной форме вещества. Однако есть информация, что минимальный процент госсипола соединяется с целлюлозой, другая часть остается несвязанной.Во всяком случае, научных исследований на эту тему не так много. Означает ли это, что потенциальная опасность все еще существует?

На вопросы о том, правда ли, что Кагоцел вызывает бесплодие, легко найти ответы у медицинских консультантов на официальном сайте. Пишут, что «в ходе доклинических и клинических исследований препарат показал высокий профиль безопасности (разрешен даже детям с 3 лет), в инструкции сказано, что его можно применять с 6 лет и все исследования, в том числе исследование влияния на сперматогенез у животных, проводились»*.У животных но не у людей.

Как говорится, есть о чем подумать, особенно если у мужчины проблемы с зачатием.

Согласно последним научным исследованиям, ученые утверждают, что женский фактор в развитии бесплодия занимает лишь 40% случаев. Вина мужчины в бездетности достигает 30%, при этом у мужчин одним из определяющих триггеров этого состояния являются наркотики. Многие их компоненты отрицательно влияют на сперматогенез или обладают сперматотоксичностью.В результате семенная жидкость теряет свои свойства, а сперматозоиды – свою активность, что делает невозможным оплодотворение яйцеклетки. Для женщин также существуют таблетки, вызывающие бесплодие, но в подавляющем большинстве случаев речь пойдет о противозачаточных средствах.

Какие препараты вызывают бесплодие у мужчин

Нарушение фертильности у представителей сильного пола происходит из-за употребления препаратов, оказывающих действие на такие органы и системы.

  1. Эндокринная, обеспечивающая протекание всех обменных процессов организма, в том числе регуляцию уровня дофамина, выработку половых гормонов – пролактина, тестостерона, фолликулостимулирующего гормона, а также серотонина и эндорфинов.
  2. Центральная и периферическая нервная система, особенно препараты, угнетающие их работу.
  3. кровеносная система.

Препараты различных групп приводят к угнетению половой функции. Это могут быть цитостатики, анаболические стероиды, противотуберкулезные препараты (причем они влияют на способность к зачатию у представителей обоих полов). С учетом дозировки, курса лечения половые клетки могут быть угнетены навсегда или временно, что предотвратит беременность женщины.

В большинстве случаев отмены вредного для начала оплодотворения оплодотворения яйцеклетки достаточно для возвращения фертильности к нормальному уровню. Важно понимать, что зачатие ребенка возможно только при полном здоровье обоих половых партнеров. Женское и мужское бесплодие идут рука об руку и очень близки, так как требуют лечения обоих партнеров.

Чаще всего провоцируют мужское бесплодие такие препараты.

Антидепрессанты

Эти препараты ухудшают или снижают эрекцию, способствуя развитию эректильной дисфункции.Также на фоне их приема отмечается болезненная эякуляция. Это связано с блокадой холинергической системы, что приводит к снижению чувствительности альфа-адренорецепторов. Такие же эффекты отмечаются на фоне приема некоторых бромидов или барбитуратов.

Цитостатики

Средства цитостатического ряда действуют сразу по нескольким направлениям. В первую очередь они угнетают деление и размножение клеток, в том числе половых клеток — сперматозоидов.Цитостатики также препятствуют мейозу сперматозоидов, что приводит к развитию генных мутаций, из-за которых зрелые сперматозоиды получают «дефектный» геном, несущий информацию при наличии наследственных патологий. Либо они теряют возможность оплодотворения женскими половыми клетками.

Гормональные препараты

Эстрогены сами по себе подавляют мужское половое влечение и потенцию. Подобными свойствами обладает и прием гормонов щитовидной железы, особенно если речь идет о серьезном нарушении или изменении гормонального фона.Здесь также важно следить за правильным применением препаратов, так как при приеме больным 5 таблеток в сутки даже в минимальной дозировке могут развиться другие заболевания щитовидной железы, например, вместо гипотиреоза разовьется тиреотоксикоз, который также характеризуется выраженным снижением рождаемости.

Глюкокортикоиды

Использование таблеток или инъекций глюкокортикостероидов отрицательно влияет на репродуктивную систему из-за нарушения метаболических процессов. Они с новой силой запускают выработку пролактина, что влечет за собой снижение полового влечения, эректильную дисфункцию.Для контроля двух вышеуказанных групп препаратов необходимо регулярно проводить анализ крови на гормоны.

Лекарства от давления

Препараты с антигипертензивной активностью. Они вызывают снижение потенции более чем у 1% людей, принимающих их регулярно. Причем такая ситуация возникает не только у людей, употребляющих старые препараты, но и у пациентов, употребляющих относительно новые, современные антигипертензивные таблетки.

Психотропные вещества

Научными экспериментами доказано их влияние на подвижность сперматозоидов, иногда отмечались явления астенозооспермии.

Анаболические препараты

В группу риска входят мужчины, активно занимающиеся в тренажерном зале с целью наращивания мышечной массы. Употребление этих веществ приводит к нарушению работы гипоталамо-гипофизарной системы, контролирующей все процессы внутри организма, поэтому страдает и половая функция. Часто развиваются необратимые процессы, возникает атрофия яичек.

Антиандрогены

Подавляет активность мужских половых гормонов. К ним также относятся ингибитор альдостерона верошпирон или спироналоктон, циметидин.Они, кроме своего основного воздействия, приводят к появлению гинекомастии, вызывают нарушение образования сперматозоидов.

Противовирусный

Снижают активность сперматозоидов. Одним из самых противоречивых препаратов на сегодняшний день является Кагоцел, дискуссии о котором ведутся не только среди андрологов, но и среди репродуктологов и гинекологов.

Другие средства

Токсичные вещества, в том числе конопля, этиловый спирт, входящий в состав любого алкогольного напитка, никотин, входящий в состав всех сигарет.Эти вещества могут иногда использоваться в медицинских целях. Но при чрезмерном злоупотреблении ими развивается стойкое и выраженное угнетение фертильности.

Лекарственные препараты вызывают бесплодие у женщин


Особое внимание уделяется препаратам, вызывающим бесплодие у представительниц слабого пола. Это связано с тем, что терапия бесплодия у женщин – очень сложный процесс. Если девушка длительное время принимает стероидные препараты, период восстановления ее половой системы займет длительный период времени.

Прежде всего, при диагностике бесплодия женщине необходимо позаботиться о регулярном менструальном цикле. В этом вам может помочь гинеколог. Нарушению цикла могут предшествовать различные триггерные факторы, которые необходимо быстро устранять, а затем лечить это состояние. Наиболее распространенным методом лечения бесплодия у женщин с нерегулярными менструациями является гонадотропин или кломифен.

Бромокриптин применяют для лечения бесплодия в связи с повышением концентрации пролактина в крови.Восстанавливает овуляцию, формирование яйцеклетки и выход ее в матку за счет снижения этого гормона.

Лучшей профилактикой бездетности для девочек, по мнению врачей, является своевременное лечение перенесенных заболеваний, в том числе патологии матки, эндометриоза. Также следует регулярно посещать женского врача – гинеколога. Необходим строгий отказ от вредных для организма продуктов – алкогольных напитков, курения, наркотических средств. Важным является правильный подбор противозачаточных средств – оральных контрацептивов, гормональных противозачаточных таблеток.

Барьерные методы исключат заболевания яичников и матки, что также способствует сохранности возможной будущей беременности. Важно понимать, что аборты, любые венерические заболевания провоцируют проблемы с вынашиванием в подавляющем большинстве случаев. А препараты, которые применяются для лечения бесплодия на фоне таких патологических процессов, губительно действуют на другие органы и системы.

Врачи утверждают, что все современные препараты, обладающие противозачаточным действием, обладают высокой эффективностью и не влияют на репродуктивную функцию после их отмены.Противозачаточные препараты, которые могут привести к бесплодию, давно исчезли. Они разделены на несколько групп.

  1. Монофазный, содержащий равное количество эстрогена и прогестагена. К ним относятся Регулон, Силуэт и другие.
  2. Двухфазные содержат одинаковое количество эстрогена, но концентрация гестагена различна в 1 и 2 периоде. Средствами этой группы являются Фемостон, Нео-Эуномин.
  3. Существуют также трехфазные противозачаточные таблетки. Их дозировка гормона меняется трижды, это зависит от текущего менструального цикла.Представителями этой группы являются Три-Регол, Тризистон.
  4. Микродозированные противозачаточные таблетки лучше подходят для молодых девушек — Джесс, Мерсилон.
  5. Врачи советуют принимать низкодозированные препараты уже рожавшим — Ярина, Диана.
  6. Высокодозированный — без овлона, триквалор. Это таблетки с высоким содержанием гормонов. Это препараты для лечения гормональных дисфункций у женщин.

Важно понимать, что контрацептивы способствуют зачатию после их отмены и стабилизации гормонального фона.Для устранения этой проблемы лучше всего обратиться к гинекологу и выполнять все его рекомендации и указания. Важно понимать, что нормализация работы эндокринной системы происходит не сразу, нужно подождать некоторое время, пока органы восстановятся после приема препаратов.

Мочеполовая система мужчин все больше подвергается негативному воздействию, в результате чего становится невозможным вести нормальную половую жизнь. Такие расстройства возникают из-за различных факторов: нервного напряжения, неправильного образа жизни, травм, операций или тяжелых заболеваний.В частности, существуют лекарства от простуды, вызывающие бесплодие у мужчин, поэтому без назначения врача принимать любые, даже, казалось бы, «безобидные» препараты не рекомендуется. Для предупреждения возникновения патологий с половой системой мужчина должен знать о возможных побочных действиях препаратов и противопоказаниях к их приему.

Наш постоянный читатель избавился от проблем с потенцией эффективным методом. Проверил на себе — результат 100% — полное устранение проблем.Это натуральное растительное лекарство. Мы протестировали метод и решили порекомендовать его вам. Результат быстрый. ЭФФЕКТИВНЫЙ МЕТОД.

Лекарства от простуды, которые могут вызвать бесплодие

Вирусы, вызывающие простуду

Во время болезни организм человека подвергается воздействию болезнетворных микроорганизмов, которые приводят к ослаблению всего организма. Особенно опасны простудные заболевания, сопровождающиеся повышением температуры тела до 38 градусов: мужская половая система не может вырабатывать сперматозоиды, что может привести к такому страшному заболеванию, как бесплодие.После приема терапии воспалительных процессов в организме ухудшается качество и подвижность мужских половых клеток. Если применять препарат в соответствии с инструкцией и точной дозировкой, можно избежать. Сперматозоиды вырабатываются каждые 30 дней, поэтому вероятность восстановления половых клеток через 2-3 месяца сводится к максимуму.

Кагоцел

Кагоцел — эффективное противовоспалительное средство. Назначается для лечения простудных заболеваний, а также герпеса любой сложности.Курс медикаментозной терапии не должен превышать 5 дней, но желаемый результат можно увидеть уже через пару дней. Препарат целенаправленно воздействует на очаги воспаления через вырабатываемый интерферон.

Несмотря на то, что Кагоцел отпускается без рецепта врача, принимать его самостоятельно настоятельно не рекомендуется. Препарат имеет свои противопоказания, поэтому перед его применением необходимо внимательно ознакомиться с инструкцией, включающей перечень побочных эффектов. Нельзя принимать препарат в следующих случаях:

  • индивидуальная непереносимость компонентов препарата;
  • аллергия на лактозу;
  • наличие бактериальных заболеваний.

Если игнорировать противопоказания, то могут возникнуть нежелательные последствия. Больше всего мужчин беспокоит такое осложнение, как бесплодие. Активным веществом Кагоцела является сополимер госсипола, негативно влияющий на функциональность мужских половых органов. Кроме того, действующее вещество препарата, согласно исследованиям, обладает антисперматогенной активностью и в 20% случаев вызывает бесплодие у мужчин.

На основании негативного влияния на функцию половых органов врачи не рекомендуют использовать лекарство для лечения простудных заболеваний.Вместо этого лучше принимать аналогичные средства, которые не вызывают подобных побочных эффектов. Несмотря на то, что препарат может привести к бесплодию, он все же эффективно справляется с ОРВИ, но перед его приемом необходимо проконсультироваться со специалистом.

Арбидол

Арбидол — препарат, назначаемый для устранения инфекционных заболеваний органов дыхания, гриппа, атипичной пневмонии. Это лекарство благотворно влияет на иммунную систему человека, убивает и уничтожает болезнетворные микроорганизмы. После приема Арбидола увеличивается количество Т-киллеров (цитотоксических Т-лимфоцитов), которые атакуют и эффективно уничтожают патогенные микроорганизмы.Преимущество этого препарата в том, что его компоненты быстро всасываются и при этом выводятся из организма на 90%.

Действующее вещество препарата умифеновир, вспомогательные вещества:

  • крахмал картофельный;
  • целлюлоза микрокристаллическая;
  • аэросил
  • ;
  • коллидон 25;
  • стеарат кальция.

Активные компоненты препарата способствуют устранению насморка независимо от причины его возникновения.Препарат необходимо принимать с осторожностью, так как он оказывает влияние на сперматогенез. Такое осложнение, как бесплодие, может появиться у тех мужчин, у которых уже есть проблемы с функционированием половых органов.

Циклоферон

Циклоферон – иммуномодулирующий препарат, содержащий меглюмина акридонацетат. Препарат оказывает противовоспалительное действие и разрушает генетическую информацию вирусов. Благодаря действию активного компонента в организме начинают вырабатываться интерфероны (белки, выделяемые клетками в ответ на вторжение вируса).Меглюмина акридонацетат угнетает функциональность мужских половых органов, поэтому врач решает, применять Циклоферон пациенту или нет.

Лекарственный препарат требует соблюдения точной дозировки и способа применения. Суточная доза для взрослых составляет 4 таблетки, которые необходимо запивать достаточным количеством жидкости. Циклоферон применяют при обнаружении первых симптомов простуды, прием повторяют на второй день, а затем делают перерыв на сутки.Средняя продолжительность курса лечения составляет 5 дней, но это зависит от индивидуальных особенностей организма. При необходимости врач может продлить курс терапии или назначить другой препарат.

Циклоферон имеет ряд противопоказаний, которые необходимо учитывать перед началом лечения: в противном случае может возникнуть неожиданная реакция организма. Противопоказания включают:

Цирроз печени

  • наличие аллергии на компоненты препарата;
  • возраст до 4 лет;
  • заболеваний желудочно-кишечного тракта.

Во время лечения препаратом могут возникать побочные эффекты в виде аллергических реакций и других нарушений в организме. В этом случае необходимо прекратить применение препарата и обратиться к врачу.

Влияние антибиотиков на мужское здоровье

Известно, что антибиотики воздействуют на болезнетворные микроорганизмы, подавляя их рост и уничтожая, но, с другой стороны, они также негативно влияют на эректильную функцию мужчин. Кроме того, при постоянном употреблении этих препаратов может возникнуть привыкание, в результате чего бактерии становятся толерантными к активным веществам лекарств (перестают на них реагировать).

Клинически доказано, что антибиотики приводят к нарушению работы мужских половых органов: влияют на секрецию спермы, изменяя ее вязкость и кислотность, разрушают сперматозоиды. Врачи рекомендуют планировать зачатие через 2-3 месяца после курса терапии: только к этому времени половые клетки у мужчины восстанавливаются.

При лечении антибиотиками необходимо обогатить рацион морепродуктами

Для снижения негативного воздействия антибиотиков на организм необходимо не только соблюдать рекомендации по приему, но и пересмотреть режим питания.Врачи советуют мужчинам есть продукты, положительно влияющие на эрекцию (это морепродукты, фрукты, овощи, мед, орехи). Если правильно питаться, заниматься спортом и избавиться от вредных привычек, можно ускорить лечение.

Таким образом, мужчина должен быть осторожен с лекарствами от простуды, вызывающими бесплодие.

Своевременное обращение к врачу и прохождение курса лечения помогут не только избавиться от инфекционного заболевания, но и избежать возможных негативных последствий для потенции мужчины и его репродуктивной функции.

У вас серьезные проблемы с ПОТЕНЦИЕЙ?

У вас проблемы с эрекцией? Вы уже перепробовали множество средств и ничего не помогло?

Эти симптомы вам знакомы не понаслышке:

  • вялая эрекция;
  • отсутствие желания;
  • сексуальная дисфункция.

Единственный выход — операция? Подождите и не действуйте радикально. ВОЗМОЖНО повысить потенцию! Перейдите по ссылке и узнайте, как рекомендуют лечиться специалисты…

Зайдя недавно в аптеку, я был поражен, сколько на полках лекарств от простуды. Мне казалось, что еще пять лет назад такого изобилия не было. И точно: знающие люди рассказывали мне, что столько лекарств от гриппа и простуды появилось не так давно, после пандемии гриппа 2009 года. Мне также сказали, что некоторые препараты известны только на российском рынке, что сразу вызвало у меня подозрение. И я решил провести собственное мини-расследование.

Один из широко разрекламированных препаратов – кагоцел – «прославился» как раз в 2009 году, когда Татьяна Голикова не смогла найти его в аптеке.Но потом почему-то все прицепились к арбидолу, которого тоже не было в продаже, а про кагоцел благополучно забыли, и после этого он появился как ни в чем не бывало: чистый и вне подозрений. Хотя зная историю его появления и состава, нужно было сразу же запретить его продажу.

Это было так. Советский вирусолог Феликс Ершов во главе группы ученых был отправлен в Америку, чтобы изучить и посмотреть, как обстоят дела в медицине на Западе.Ученые провели в США целый год и вернулись со следующим решением: надо лечить простуду и грипп интерфероном (в Штатах как раз был интерес к его индукторам). Совместно с Владимиром Нестеренко (заведующий отделом иммунологии НИИ эпидемиологии и микробиологии) был изобретен Кагоцел. Вот слова самого Нестеренко, которые я нашел в Интернете: «Мы взяли целлюлозу, это полимер из хлопка, мы взяли другое определенное вещество, полученное из хлопка, соединили его с целлюлозой и получили полимер.Он называется кагоцел. И Нестеренко, и Ершов умолчали о том, что новый препарат вызывает мужское бесплодие. Но его можно найти и в Интернете. Например, в той же Википедии.

Эргоферон не попал в Википедию, но если набрать это название в гугле, то первый сайт сообщит нам следующее: «Эргоферон — гомеопатическое противовирусное средство — поможет в холодное время года».

Плюс цена немного удивляет. Так, например, анаферон (20 таблеток) стоит около 200 рублей.Такая высокая стоимость обычно связана с дорогими ингредиентами. Одним из основных компонентов Анаферона является лактоза, и стоит она около 100 рублей за мешок весом… 25 килограммов.

Шерсть Интернет дальше. Находим это: «Технология производства включает иммунизацию кроликов рекомбинантным человеческим интерфероном гамма, после чего из сыворотки крови кролика на адсорбционной колонке выделяют нужные антитела». Зная состав препарата, можно подсчитать, что «на всю годовую выработку анаферона требуется всего около четырех молекул! От одного кролика можно получить антитела на следующие пару миллионов лет производства»…

Какой вывод можно сделать из всего написанного. В России очень много наркотиков, но часто среди них есть какие-то местечковые наркотики, о которых за границей никогда не слышали. Такое, увы, происходит не только в медицине. Я бы посоветовал принимать лекарства, которые известны не только у нас.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.