Стафилококк от чего может быть: Стафилококк у детей — причины, симптомы, диагностика и лечение стафилококковой инфекции в Москве в клинике «СМ-Доктор»

Содержание

Микробиологическое (культуральное) исследование отделяемого из носа на золотистый стафилококк — Исследования клинического материала на флору

Стафилококки – это грамположительные факультативно-анаэробные кокки, широко распространены во внешней среде. Они являются сапрофитами кожи и слизистых оболочек человека и животных.

Стафилококк золотистый (Staphylococcus aureus) — наиболее патогенный вид стафилококков, возбудитель гнойно-воспалительных поражений у человека. Передается от человека к человеку при контакте, через воздух, воду и пищу. При некоторых заболеваниях (гнойничковые болезни кожи, ангины и др.) инфекция может быть эндогенной.

Стафилококки играют огромную роль в патологии. Они вызывают самые разнообразные гнойные заболевания: гнойничковые поражения кожи и подкожной клетчатки, ангины, отиты, пневмонии, уретриты, холециститы, энтероколиты, сепсис и др. Особенно велика их роль в акушерско-гинекологической практике и хирургии.

Стафилококки являются наиболее частой причиной гнойно-воспалительных заболеваний у новорожденных вплоть до генерализованной инфекции — сепсиса, маститов у рожениц, гнойных осложнений после операций у хирургических больных.

Стафилококковые заболевания протекают тяжело, с высокой летальностью, особенно у детей раннего возраста и ослабленных больных.

Золотистый стафилококк может вызывать пищевые токсикоинфекции при употреблении пищевых продуктов обсемененных им и его токсином: кондитерские изделия без термообработки (содержащие яйца и молочные продукты), салаты и мороженное. Дети могут инфицироваться от взрослых стафолококконосителей.

Основным резервуаром золотистых стафилококков у здоровых людей является полость носа. Однако золотистые стафилококки также могут обитать в зеве, в области промежности, в подмышечных областях, на волосистой части кожи головы и в желудочно-кишечном тракте, вызывая состояние бессимптомного бактерионосительства. Хроническое носительство типично для персонала медицинских учреждений, больных атопическими дерматитами, наркоманов.

При при культуральном исследовании мазков из носа и зева носительством считается количество бактерий до 103.

В эпидемиологических целях исследование на носительство золотистого стафилококка проводят во время ежегодных профилактических осмотров и при предварительных осмотрах для приема на работу в сферы обслуживания населения: медицина, образование, питание и торговля. В данном случае посев выполняется из 2 локусов: носа и зева.

Стафилококк у кошек – статья от ветеринара

Стафилококк у кошек — это инфекционное заболевание, вызываемое бактериями. Встречается эта болезнь у кошек достаточно часто. Насколько это опасно и может ли человек заразиться стафилококком от кошки — рассмотрим в этой статье.

О стафилококке

Стафилококк — это род микроорганизмов, а точнее бактерий, относящихся к семейству staphylococcaceae. “Стафилококк” переводится с греческого как “гроздь винограда”. В окрашенных мазках под микроскопом это круглые бактерии (кокки), которые расположены группами и напоминают виноградные грозди. В природе представители этого семейства широко распространены — они могут населять воздух, почву, воду, а также жить на коже и слизистых оболочках животных и человека.

Стафилококков разделяют на две группы в зависимости от производства фермента коагулазы: коагулазоположительные и коагулазонегативные. Коагулазоположительные являются наиболее патогенной группой и чаще вызывают заболевания (сюда относят стафилококк псевдоинтермедиус и золотистый стафилококк). Коагулазонегативные стафилококки тоже могут вызывать заболевания.

Для кошек значение могут иметь следующие виды стафилококков: Staphylococcus pseudintermedius (стафилококк псевдоинтермедиус), Staphylococcus aureus (золотистый стафилококк), Staphylococcus schleiferi ssp (стафилококк шлейфера), Staphylococcus epidermidis (эпидермальный стафилококк), Staphylococcus xylosus, Staphylococcus sciuri, Staphylococcus felis и другие.

Стафилококк псевдоинтермедиус является комменсалом, т. е. может жить на теле животного или человека, не вызывая заболевания. У кошек он не сильно распространен. Согласно проводимым исследованиям, от 6 до 22% здоровых кошек являются носителями стафилококка псевдоинтермедиус. Уже в раннем возрасте стафилококк у котят начинает колонизацию на различных участках тела: например, на коже и слизистых оболочках. Колонизация может проходить всю жизнь.Только у небольшого процента кошек развивается клиническая инфекция, для этого, как правило, требуется первопричина — например, травма кожи.

Стафилококк псевдоинтермедиус может приводить к развитию оппортунистических инфекций. Оппортунистические инфекции — это инфекции, которые не вызывают заболеваний у здорового организма, но могут быть опасны при снижении иммунитета.

Золотистый стафилококк не является комменсалом у людей и собак. Золотистый стафилококк у кошек обнаруживается у 20% представителей популяции. Чаще всего его выделяют с кожи и наружных слуховых проходов. Достаточно большая распространенность золотистого стафилококка у здоровых кошек дает возможность предполагать, что он может быть комменсалом. Был проведен ряд исследований, которые показали наличие у собак и их владельцев одинакового штамма золотистого стафилококка, что может говорить о возможности межвидовой передачи.

С кошками данные исследования не проводились.

Стафилококк шлейфера и другие виды коагулазоположительных стафилококков встречаются у кошек гораздо реже — до 2%.

Коагулазонегативные стафилококки обычно встречаются у здоровых собак и кошек, как и у других видов млекопитающих. Местожительство различных стафилококков у кошек может варьироваться, причем некоторые встречаются в определенном месте, другие — во многих местах тела. Коагулазонегативный стафилококк у кота или кошки без признаков заболевания очень часто выделяется с кожи, из слюны и со слизистой ротовой полости и половых путей. Наиболее часто встречается стафилококк фелис, реже выделяют гемолитический стафилококк, стафилококк эпидермис, стафилококк симулянс, стафилококк сапрофитикус. Несмотря на широкое распространение колонизации, заболевания коагулазонегативными стафилококками встречаются очень редко.

Метициллинрезистентные стафилококки. Метициллинустойчивые / резистентные стафилококки (MRS) устойчивы ко всем β-лактамным антибиотикам (пенициллинам, цефалоспоринам, карбапенемам) за счет производства измененного пенициллинсвязывающего белка.

Метициллинрезистентный золотистый стафилококк (MRSA) и метициллинрезистентный стафилококк псевдоинтермедиус (MRSP) становятся серьезной проблемой в ветеринарии. Некоторые штаммы, особенно штаммы MRSP, в настоящее время устойчивы почти ко всем доступным вариантам лечения, что значительно усложняет ведение клинического заболевания, в котором они участвуют.

Колонизация метициллинрезистентным стафилококком псевдоинтермедиус может достигать 1,2%, но при этом он является условно патогенным организмом и колонизация не обязательно приведет к заболеванию.

Метицилинрезистентному золотистому стафилококку сейчас отводят особое внимание как зоонозу — заболеванию, которое может передаваться человеку. Но ни одно клиническое исследование не подтвердило, что колонизация стафилококка у кошек или собак может являться важным фактором распространения метициллинрезистентного золотистого стафилококка у человека.

Можно ли заразиться стафилококком от кошки?

На данный момент нет ни одного исследования, которое бы доказало, что кошка может являться первичным источником заражения человека стафилококковой инфекцией. В медицине основными факторами заражения человека стафилококком, в том числе золотистым стафилококком, считается снижение иммунитета: ВИЧ, химиотерапия, прием иммуносупрессивных препаратов, а также наличие ран, в том числе и хирургических. Большое внимание в медицине уделяется стафилококку как больничной инфекции, т. е. инфекции, которую можно получить в медицинском учреждении при некачественной дезинфекции.

Причины возникновения стафилококка

Заболевания, вызываемые стафилококком у кошек, всегда вторичны на фоне первичной причины. Например, инфекция кожи возникает на фоне аллергической реакции или заражения паразитами; инфекция мочевыводящих путей — на фоне мочекаменной болезни; инфекция дыхательной системы — на фоне вирусной инфекции.

Потенциальную возможность микроорганизмов вызывать заболевания называют фактором вирулентности. Основной фактор вирулентности стафилококка — это способность колонизировать разные участки тела. Стафилококки сохраняются в организме, ожидая момента, когда они смогут вызвать болезнь — например при травматизации тканей или снижении иммунитета.

К факторам вирулентности также относят способность стафилококков секретировать различные ферменты и токсины (гемолизины, протеазы, липазы и т. д.). Ферменты и токсины нарушают целостность тканей, тем самым способствуя развитию воспаления и помогая стафилококкам использовать для питания поврежденные ткани организма.

В некоторых ситуациях стафилококки могут вызывать смертельные заболевания за счет выработки определенных токсинов. Например, может произойти пищевое отравление из-за того, что стафилококк синтезировал энтеротоксин в результате неправильного хранения пищи. Синтез энтеротоксина определяется наличием у стафилококка определенного гена. Этот ген обнаруживался в изолятах золотистого стафилококка и псевдоинтермедиус. Заболевания, опосредованные стафилококковыми энтеротоксинами, не встречаются у кошек и собак, но нет оснований полагать, что домашние животные по своей природе устойчивы к действию стафилококковых энтеротоксинов. Золотистый стафилококк может выделять эксфолиативный токсин, который может вызывать синдром ожога кожи и синдром токсического шока. Тот же токсин можно обнаружить у стафилококка псевдоинтермедиус.

Стафилококк у котят

Стафилококк у котят так же, как и у взрослых кошек, может развиваться вторично на фоне основного заболевания. Если мама-кошка является носителем тех или иных стафилококков, то в процессе ухода за котятами она их передаст им. Если котята здоровы, стафилококковая инфекция не будет представлять для них опасности. Родовые травмы, вирусные инфекции, искусственное, несбалансированное кормление, паразитарные инвазии — все это будет являться причиной для развития стафилококковой инфекции у котят.

Симптомы

Стафилококк у кошек играет главную роль в развитии оппортунистических инфекций — от поверхностной пиодермии (кожного бактериального воспаления) до глубоких системных инфекций. Оппортунистические инфекции вызываются микроорганизмами, которые не могут вызвать заболевания у здорового животного, а проявляются при снижении иммунитета или вторично к уже имеющемуся заболеванию или травме. Снижение иммунного статуса у кошки может происходить при заболевании хроническими вирусными инфекциями (вирусный иммунодефицит кошек (FIV), вирусной лейкемии кошек (FLV) или при длительном приеме иммуносупрессивных препаратов.

Псевдоинтермедиус стафилококк у кота или кошки чаще всего вызывает кожные инфекции. Реже может стать причиной хирургических инфекций, септического артрита, остеомиелита, инфекции мочевыводящих путей, абсцесса печени, перитонита и глазных инфекций. Инфекции могут быть разные по тяжести — от легких до тяжелых.

Золотистый стафилококк у кошек по картине проявления и тяжести может быть неотличим от стафилококка псевдоинтермедиус.

Стафилококк шелфера чаще всего проявляется у кошек пиодермией (кожной инфекцией) и наружным отитом. Реже могут возникать инфекции в других локализациях: мочеполовой или дыхательной системах. Первичные инфекции коагулазонегативных стафилококков встречаются крайне редко. Среди стафилококков этой группы внимание заслуживает стафилококк фелис. При инфекции мочевыводящих путей часто обнаруживается именно он. Следовательно стафилококк фелис может являться первичным патогеном.

Специфических клинических признаков при заболеваниях инфекцией стафилококка у кошек нет. Признаки заболевания будут связаны непосредственно с поражением органа или системы органов. При заболеваниях кожи это будут эрозивные или язвенные поражения кожи с потерей шерсти в пораженных местах. При глубоких инфекциях кожи и подкожной клетчатки будут формироваться абсцессы. При поражении дыхательной системы мы увидим слизистые, гнойные истечения из носа или кашель. При воспалении мочевой системы появятся признаки цистита: частое и болезненное мочеиспускание, изменение цвета и прозрачности мочи. При тяжелой, глубокой и обширной инфекции появятся системные неспецифические признаки: отказ от еды, лихорадка, вялость.

Хочется отдельно отметить, что бактериальные, в том числе стафилококковые, заболевания кожи у кошек всегда вторичны к основному заболеванию. Это может быть аллергическая реакция или паразитарная инвазия, травмы кожи, полученные, к примеру, от других животных. При этом мы можем увидеть признаки сопутствующего заболевания — например, блошиные фекалии при блошиной инвазии.

Диагностика

При стафилококковой инфекции, как уже было написано ранее, нет специфических клинических признаков. Цитологическое исследование окрашенных мазков может выявить наличие септического воспаления.

Но окончательный диагноз ставится только путем бактериологического посева — выявлением бактериологической культуры из пораженного очага. Интерпретацию полученных результатов следует проводить с осторожностью, особенно при получении образцов, собранных с нестерильных мест, таких как кожа или дыхательные пути. Учитывая, что многие стафилококки изначально являются комменсалами и в собранный материал могут попасть случайно, материал для бактериологического исследования нужно выбирать тщательно, не допускать загрязнения образцов. Один из важных аспектов бактериологического исследования — это тестирование полученных образцов на чувствительность к антибиотикам. Это делается для того, чтобы понять, какие антибиотики будут подавлять стафилококк, а какие будут неэффективны. Это особенно важно для метициллинрезистентных штаммов.

Лечение стафилококка у кошек

Лечение стафилококка у кошки будет зависеть от глубины поражения, количества пораженных тканей и от места инфекции.

Общая тактика лечения одинаковая.

Для лечения стафилококка у кошки используется системная терапия — применение антибиотиков. Антибиотикотерапия в идеальном варианте должна подбираться на основании бактериологического посева. Учитывая проблему появления метициллинрезистентных стафилококков, антибиотикотерапия должна проводиться под контролем врача. Бесконтрольное, неправильное применение антибиотиков — недостаточная дозировка, маленький курс, частое применение разных антибиотиков — приводит к появлению резистентных к антибиотикам штаммов стафилококка у кошек, собак, других млекопитающих и человека.

Местная обработка дает возможность очищать поврежденные ткани от загрязнений и омертвевших клеток и доставлять антибиотики и антисептики прямо к очагу инфекции. При лечении кожи используют антибактериальные шампуни, промывания, примочки, кремы и мази. При артритах — внутрисуставные инъекции. При отитах — капли и лосьоны в уши.

Возможность использовать антибиотик непосредственно в очаге инфекции дает возможность в разы повысить его терапевтическую концентрацию и тем самым эффективность. Большое значение местное лечение имеет для тканей, где тяжело достигнуть необходимой концентрации антибиотика за счет системного применения. Хорошим примером будет лечение наружного отита: антибиотик входит в состав ушных капель и так достигает очага воспаления, что является намного эффективнее системной терапии.

Хочется отметить, что при бактериологическом исследовании и проведении подтитровки к антибиотикам в лаборатории используют стандартные дозировки антибиотиков, используемые при системной терапии. За счет повышения концентрации антибиотика в несколько раз можно вызвать гибель стафилококков, которые в лабораторных исследования показали свою устойчивость. Также местное лечение дает возможность использовать антисептики — препараты, которые не используются для системной терапии, такие как хлоргексидин, повидон-йод, бензоил пероксид, сульфадиазин серебра, мупироцин и т. д. Особенно важно использование данных препаратов, когда мы имеем дело с метициллинрезистентным стафилококком у кота или кошки, когда системная терапия ограничена.

Иногда для лечения стафилококковой инфекции требуется хирургическое лечение — например, при лечении абсцессов. При хирургическом лечении удаляются некротизированные ткани, устанавливаются дренажи для возможности оттока экссудата и доступа для введения антисептиков и мазей.

При глубоких и обширных инфекциях требуется поддерживающее лечение: инфузионная терапия, обезболивающие и жаропонижающие препараты.

Профилактика

Профилактика заключается в поддержании общего здоровья кошки. Для этого следует придерживаться простых рекомендаций:

  • Качественное и сбалансированное питание;
  • Проведение профилактических процедур: ежегодная вакцинация, регулярная обработка от эндо- и эктопаразитов;
  • При первых признаках недомогания кошки (вялость, кашель, затрудненное мочеиспускание, поражения кожи) следует своевременно обращаться к ветеринарному специалисту.

Статья не является призывом к действию!

Для более детальной проработки проблемы рекомендуем обратиться к специалисту.

Спросить ветеринара

3 сентября 2020

Обновлена: 12 октября 2021

Статья была полезна?

Спасибо, давайте дружить!

Подписывайтесь на наш Инстаграмм

Подписаться

Спасибо за обратную связь!

Давайте дружить — скачайте приложение Petstory

Исследования на стафилококк — ЕКДЛ

Золотистые стафилококки (Staphylococcus aureus) – грамположительные условно-патогенные бактерии рода Staphylococcus, являющиеся наиболее частой причиной стафилококковых, в частности внутрибольничных, инфекций. Золотистые стафилококки в норме могут располагаться на коже, слизистой оболочке носа и реже в гортани, влагалище, кишечнике. Они встречаются у 30% здоровых людей.

Если у человека слабая иммунная система или нарушен нормальный состав микрофлоры, то при повреждении кожи (слизистых оболочек) золотистый стафилококк может приводить к разнообразным местным и системным инфекционно-воспалительным поражениям:

  • кожи (карбункулам, импетиго, фолликулиту),
  • молочных желез (маститу),
  • дыхательных путей и ЛОР-органов (тонзиллиту, гаймориту, отиту, фарингиту, лариноготрахеиту, пневмонии),
  • мочевыводящих путей (уретриту, циститу, пиелонефриту),
  • пищеварительной системы (энтеритоколиту, аппендициту, перитониту, парапроктиту, холециститу),
  • костно-суставной системы (остеомиелиту, артриту).

В отдельных случаях возможна генерализация инфекции с развитием септикопиемии. Производимый золотистым стафилококком энтеротоксин вызывает пищевые отравления и синдром токсического шока. Основные источники инфекции: здоровые (носители) и больные люди, домашние и сельскохозяйственные животные, а также пища, содержащая возбудителя инфекции (чаще всего это сахаросодержащие молочные продукты). Инфицирование может происходить контактным и воздушно-пылевым путем. Возможно аутоинфицирование.

Для идентификации золотистого стафилококка проводится посев клинического материала на питательные среды, где при наличии S. aureus через 18-24 часа наблюдается рост колоний золотистого цвета.

Определение количества бактерий может потребоваться, например, чтобы понять, нужно ли проводить лечение: в некоторых случаях, если количество небольшое, лечение не проводится. Решение о его необходимости зависит от клинических проявлений, а также от количества стафилококка. При небольшом содержании микробов и отсутствии симптоматики лечение может вообще не понадобиться, т. к. и в норме на слизистой могут находиться эти микробы. Стафилококк в кишечнике обнаруживается постоянно, это не повод для лечения, но если его количество превышено, тогда нужны меры (бактерия может вызывать колики и расстройства). Стафилококк в мазке без симптомов вагинита также является нормой, в то время как большие количества стафилококка в мазке, наряду с повышением лейкоцитов, требуют лечения.

Наличие стафилококка не обязательно означает инфекцию, это может быть бессимптомное носительство, например при посеве мазков из носа и зева носительством считается количество бактерий до 103. Однако более высокие показатели говорят нам о золотистом стафилококке как о причине заболевания, и это уже далеко не бессимптомное носительство.

Многое зависит от возраста пациента. Например, золотистый стафилококк в количестве 104 является вполне нормальным показателем для детей старше 1 года, но у грудных детей в таком количестве уже потребует лечения.

В любом случае наличие стафилококка при отсутствии симптомов болезни – еще не повод к назначению лекарств.

Количество стафилококка может определяться до и после лечения. Если выясняется, что рост возбудителя обильный, значит, инфекция набирает обороты, предыдущая терапия была неудачной и срочно требуется новый курс лечения; умеренный и скудный рост микроорганизмов по результатам последних анализов говорит об успешности терапии. Кроме того, в дальнейшем необходимо контролировать количество стафилококков в течение 1 или 2 месяцев после пройденного лечения.

Отмечено также, что после пребывания больных в хирургической клинике стафилококк обнаруживался у них вдвое чаще, чем при поступлении. У больных, поступающих в стационары, наблюдается замена антибиотикочувствительных стафилококков на антибиотикоустойчивые.

Лечение больных стафилококковой болезнью препаратами пенициллина или другими давно применяемыми антибиотиками часто остается безрезультатным, поскольку такие препараты нередко только усугубляют тяжесть течения инфекции. Поэтому так важно установить, какие антибиотики будут эффективны при лечении стафилококка.

Посев на золотистый стафилококк (S. aureus) без определения чувствительности к антибиотикам, количественно: исследования в лаборатории KDLmed

Микробиологическое исследование, позволяющее выявить инфицированность золотистым стафилококком и определить количество возбудителя.

Синонимы английские

Staphylococcus aureus culture, MRSA culture (Methicillin-resistant S. aureus culture), quantitative.

Метод исследования

Микроскопия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Грудное молоко, кал, мазок из зева, мазок с конъюнктивы, мазок из носа, мазок урогенитальный (с секретом предстательной железы), мокроту, отделяемое раны, отделяемое уха, ректальный мазок, среднюю порцию утренней мочи.

Как правильно подготовиться к исследованию?

  • Рекомендуется употребить большой объем жидкости (воды) за 8-12 часов до сбора мокроты.
  • Исследование рекомендуется проводить до начала приема антибиотиков и других антибактериальных химиотерапевтических препаратов.
  • Исключить прием мочегонных препаратов в течение 48 часов до сбора мочи (по согласованию с врачом).
  • Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонна, пилокарпин и др. ) и на окраску кала (железо, висмут, сернокислый барий), в течение 72 часов до сбора кала.
  • Женщинам исследование (процедуру забора урогенитального мазка или сбор мочи) рекомендуется производить до менструации или через 2 дня после её окончания.
  • Мужчинам не мочиться в течение 3 часов до забора урогенитального мазка или сбора мочи.

Общая информация об исследовании

Золотистые стафилококки (Staphylococcus aureus) – грамположительные условно-патогенные бактерии рода Staphylococcus, являющиеся наиболее частой причиной стафилококковых, в частности внутрибольничных, инфекций. Золотистые стафилококки в норме могут располагаться на коже, слизистой оболочке носа и реже в гортани, влагалище, кишечнике. Они встречаются у 30 % здоровых людей.

Если у человека слабая иммунная система или нарушен нормальный состав микрофлоры, то при повреждении кожи (слизистых оболочек) золотистый стафилококк может приводить к разнообразным местным и системным инфекционно-воспалительным поражениям:

  • кожи (карбункулам, импетиго, фолликулиту),
  • молочных желез (маститу),
  • дыхательных путей и ЛОР-органов (тонзиллиту, гаймориту, отиту, фарингиту, лариноготрахеиту, пневмонии),
  • мочевыводящих путей (уретриту, циститу, пиелонефриту),
  • пищеварительной системы (энтеритоколиту, аппендициту, перитониту, парапроктиту, холециститу),
  • костно-суставной системы (остеомиелиту, артриту).

В отдельных случаях возможна генерализация инфекции с развитием септикопиемии. Производимый золотистым стафилококком энтеротоксин вызывает пищевые отравления и синдром токсического шока. Основные источники инфекции: здоровые (носители) и больные люди, домашние и сельскохозяйственные животные, а также пища, содержащая возбудителя инфекции (чаще всего это сахаросодержащие молочные продукты). Инфицирование может происходить контактным и воздушно-пылевым путем. Возможно аутоинфицирование.

Для идентификации золотистого стафилококка проводится посев клинического материала на питательные среды, где при наличии S. aureus через 18-24 часа наблюдается рост колоний золотистого цвета.

Определение количества бактерий может потребоваться, например, чтобы понять, нужно ли проводить лечение: в некоторых случаях, если количество небольшое, лечение не проводится. Решение о его необходимости зависит от клинических проявлений, а также от количества стафилококка. При небольшом содержании микробов и отсутствии симптоматики лечение может вообще не понадобиться, т. к. и в норме на слизистой могут находиться эти микробы. Стафилококк в кишечнике обнаруживается постоянно, это не повод для лечения, но если его количество превышено, тогда нужны меры (бактерия может вызывать колики и расстройства). Стафилококк в мазке без симптомов вагинита также является нормой, в то время как большие количества стафилококка в мазке, наряду с повышением лейкоцитов, требуют лечения.

Наличие стафилококка не обязательно означает инфекцию, это может быть бессимптомное носительство, например при посеве мазков из носа и зева носительством считается количество бактерий до 103. Однако более высокие показатели говорят нам о золотистом стафилококке как о причине заболевания, и это уже далеко не бессимптомное носительство.

Многое зависит от возраста пациента. Например, золотистый стафилококк в количестве 104 является вполне нормальным показателем для детей старше 1 года, но у грудных детей в таком количестве уже потребует лечения.

В любом случае наличие стафилококка при отсутствии симптомов болезни – еще не повод к назначению лекарств.

Количество стафилококка может определяться до и после лечения. Если выясняется, что рост возбудителя обильный, значит, инфекция набирает обороты, предыдущая терапия была неудачной и срочно требуется новый курс лечения; умеренный и скудный рост микроорганизмов по результатам последних анализов говорит об успешности терапии. Кроме того, в дальнейшем необходимо контролировать количество стафилококков в течение 1 или 2 месяцев после пройденного лечения.

Для чего используется исследование?

  • Для определения целесообразности лечения.
  • Для дифференциации бактерионосительства и опасного инфицирования.
  • Для контроля за состоянием пациента после проведенного лечения.
  • Для того чтобы подтвердить, что стафилококк является причиной возникшего заболевания (об этом свидетельствуют высокие показатели посева).

Когда назначается исследование?

  • При диагностике дисбактериоза.

Что означают результаты?

Референсные значения: нет роста.

Золотистый стафилококк в мазке в небольших количествах является частью нор­мальной микрофлоры человека. Значительное повышение стафилококка в мазке может быть симптомом воспалительного процесса, кожных инфекций (угри и пр.) и смертельно опасных заболеваний (пневмония, остеомиелит, эндокардит и др.). Результат посева интерпретирует врач исходя из того, в каком количестве выделены микроорганизмы.

Также рекомендуется

Кто назначает исследование?

Терапевт, врач общей практики, педиатр, ЛОР, инфекционист.

Литература

  1. Moreillon P., Que Y.-A., Glauser M.P. Staphylococcus aureus (Including Staphylococcal Toxic Shock). In: Principles and practice of infectious disease / G.L. Mandell, Bennett J.E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.

Эндометриоз

Эндометриоз – заболевание, которое встречается довольно часто, по распространённости уступая миоме матки и кистам яичников.

Эндометриоз – воспаление внутренней (слизистой) оболочки матки (эндометрия), при этом слизистая оболочка матки имеет тенденцию к разрастанию в других отделах организма.

Эндометриоз развивается у женщин детородного возраста, но иногда встречается и у юных девушек. При этом стратистика показывает, что у женщин, рожавших несколько раз, эндометриоз встречается реже, чем у нерожавших или страдающих бесплодием.

Эндометриоз считается наиболее распространенным гинекологическим заболеванием женщин репродуктивного возраста (25 — 40 лет). По словам специалистов, это третье по распространенности гинекологическое заболевание после миомы матки и различных воспалительных процессов в половых органах.

Эндометриоз опасен тем, что он очень часто протекает бессимптомно, и при этом женщина не посещает регулярно гинеколога, обращается к врачу только тогда, когда её начинают мучить боли в малом тазу. На этой стадии эндомертриоз диагностируется в 70% случаев.

Различают несколько стадий эндометриоза, создана его классификация:

  • генитальный эндометриоз
  • экстрагенитальный эндометриоз.

Генитальный эндометриоз может проявиться в двух видах: внутренний (аденомиоз) и наружный. При генитальном эндометриозе слизистая оболочка разрастается в мышечном слое канала и шейки матки.

Экстрагенитальный эндометриоз так же имеет две степени – это перитонеальный (в области яичников и маточных труб) и экстраперитонеальный (наружные половые органы, влагалище, шейка матки и так далее).

Причины эндометриоза

Существуют различные теории, объясняющие причину эндометриоза.

Наиболее распространенной теорией является предположение о том, что отторгающиеся во время менструации участки эндометрия вживляются в ткани. В первую очередь поражаются органы малого таза (матка, маточные трубы, прямокишечно-маточные связки, толстая кишка, мочевой пузырь, влагалище, яичники).

Причины, которые вызывают эндометриоз точно озвучить довольно сложно, скорее всего, здесь имеет воздействие не одна конкретная причина, а комплекс причин. Среди них называют попадающие в слизистую оболочку матки инфекции (стрептококки, стафилококки, гонококки и другие) из влагалища; инфекция может быть занесена после длительных сложных родов, при аборте, особенно сделанном вне больницы.

Также причиной эндометриоза могут быть гормональные нарушения, проявившаяся наследственность и даже психологическая травма.

Если у Вас есть предрасположенность к эндометриозу, не беспокойтесь, просто своевременно посещайте гинеколога. Самым лучшим вариантом является выявление эндометриоза на ранней стадии и скорейшее начало лечения.

Эндометриоз может стать причиной бесплодия: помните, вовремя не повещая гинеколога, вы рискуете своим здоровьем.

Пройти все необходимую диагностику и лечение Вы можете у нас в медицинском центре «Моя Клиника» достаточно позвонить по телефону в Москве 8 (499) 792- 41-57 и записаться на осмотр к гинекологу. Стоимость услуги см в разделе цены.

Анализ кала на стафилококк в Москве

Стафилококковые бактерии получили свое название благодаря своей форме в виде шара. На данный момент известно о существовании пятидесяти видов стафилококков. Данная группа микроорганизмов разделилась на две части. Одни стафилококки прекрасно уживаются с человеком, не причиняя ему вреда. Другие становятся причиной достаточно серьезных заболеваний.

Наибольшую опасность представляет золотистый стафилококк, который способен поражать любой орган, в том числе мозг сердце и мочеполовые органы. Сердечно-сосудистая, мочеполовая центральная нервная система являются самыми уязвимыми в этом отношении. Заражение может проходить как воздушно-капельным путем или при контакте через кожу и слизистые. Данный возбудитель является причиной многих заболеваний. Его очень трудно уничтожить, так как он с легкостью приспосабливается к любым неблагоприятным условиям, устойчив к действию большинства видов антибиотиков и антисептиков. Не боятся эти возбудители и 98% спирта, не погибая при обработке поверхностей. Для обнаружения бактерии используют анализ кала, мочи, крови, мазки со слизистых.

Показания к анализу

Проявление стафилококковой инфекции весьма специфично, поэтому врач отправляет пациента на обследование при обнаружении следующих симптомов:

  • Кожных высыпаний.
  • Насморка.
  • Боли в горле.
  • Кашля, влажного или сухого.
  • Повышенной температуры.

В тяжелых случаях, из-за отравления токсинами выделяемыми бактериями, может произойти потеря сознания, так как продукты жизнедеятельности микроорганизмов вызывают падение давления.

При размножении стафилококков в кишечнике появляются все признаки дисбактериоза. В этом случае у пациента появляются следующие жалобы:

  • Тошнота, которая сменяется частыми продолжительными рвотами.
  • Плохой аппетит или отвращение к еде.
  • Разлитые боли в области живота.
  • Понос, при котором в кале имеется слизь и примесь крови.

Данные симптомы характерны для многих патологий и не всегда связанных со стафилококками, но в пяти процентах случаев при анализе обнаруживают именно бактерии этого вида.

В группу риска по инфекционным заболеваниям, спровоцированным золотистым стафилококком, входят люди с ослабленным иммунитетом:

  • Новорожденные дети.
  • Пожилые люди.
  • Пациенты, прошедшие курс лучевой терапии.
  • Страдающие СПИД и носители ВИЧ.

Проблемы с желудочно-кишечным трактом, спровоцированные стафилококками, могут возникнуть не только по причине отравления, но и из-за длительного приема антибиотиков и других типов препаратов, уничтожающих нормальную флору в кишечнике. Обследование на стафилококки проходят все работники хирургических и родильных отделений.

Подготовка к процедуре

При подготовке к данному виду обследований необходимо соблюсти ряд правил, лишь в этом случае будет получен максимально точный результат.

  • За семь дней до проведения исследования прекращают прием всех медикаментов, особенно антибиотиков и противовоспалительных.
  • Накануне анализа нельзя принимать слабительные средства.
  • Материал для изучения должен оказаться в лаборатории не позднее трех часов с момента взятия.
  • Кал непродолжительное время можно хранить в холодильнике.
  • Для хранения и доставки кала используют только стерильную емкость.

Ложный результат может появиться из-за подавления патологической бактериальной флоры лекарственными препаратами. А также при нарушении правил забора образца для исследования.

Как проводится анализ

При обнаружении стафилококков в кале могут быть использованы несколько методов:

  • Микроскопический.
  • Серологический.
  • Бактериологический.

При первом случае кокки определяются и подсчитываются при окрашивании по Граму. Второй метод является скорее вспомогательным и проводится параллельно с изучением фекалий. На пробу берут кровь и в плазме ищут антитела к возбудителю.

При третьем методе проводят посев в питательную среду бактерий, и после увеличения колонии проводят изучение внешнего вида выращенных бактерий. К примеру, колония золотистого стафилококка имеет ровный край с радужным венчиком вокруг и цвет окрашивания от золотистого до белого.

Анализ кала при положительном результате первого анализа берется повторно через три дня.

Нормы и расшифровка результата

Анализ может иметь два значения: положительный и отрицательный.

При отрицательном вредных микроорганизмов не обнаруживают среди выращенных экземпляров.

При положительном возбудители в кале есть, и значение приобретает их количественный показатель. При незначительном количестве, речь идет о носительстве. Потенциальный возбудитель есть, но его рост подавляется иммунитетом. Если число бактерий превышает 10 в 4 степени, то речь идет о полноценном воспалительном процессе, вызванном стафилококками.


Убийца стафилококка: российские ученые разработали зубной ополаскиватель нового поколения

Материаловеды НИТУ «МИСиС» под руководством доцента кафедры физической химии Георгия Фролова совместно со специалистами Вятского государственного университета разработали уникальный состав зубного ополаскивателя, существенно меняющего состав микрофлоры зубов, уничтожающего бактерии зубного налета до 83% и снижающего воспаление десен. Клиническая апробация раствора ополаскивателя была проведена на добровольцах, на кафедре стоматологии Кировского государственного медицинского университета.

Стоматологи сегодня активно решают задачу профилактики кариеса с использованием растворов, не содержащих фтора (избыток NaF вреден как для зубов, так и для всего организма в целом). При этом зубная щетка с пастой очищает максимум 61% налета и только с жевательных, язычных и щечных поверхностей. Не многие пациенты используют зубную нить, мотивируя это отсутствием времени. Наиболее популярными становятся ополаскиватели, т.к. их частицы проникают в межзубные промежутки. Российские ученые из НИТУ «МИСиС» в партнерстве с медицинскими специалистами разработали новый тип ополаскивателя для полости рта на основе наночастиц металлов, который при регулярном использовании подавляет рост патогенных бактерий в зубной полости на 83%, снижая риск развития кариеса и заболеваний парадонта.

Ученые НИТУ «МИСиС» под руководством доцента кафедры физической химии Георгия Фролова совместно с Вятским государственным университетом провели ряд экспериментов на культурах бактерий зубного налета. Уже в течение первых 24 часов происходило ингибирование (подавление) роста бактерий зубного налета при использовании различных растворов наночастиц металлов.

Клиническая апробация раствора ополаскивателя была проведена на добровольцах, на кафедре стоматологии Кировского государственного медицинского университета, с определением гигиенических и парадонтальных индексов до начала применения ополаскивателя, и через 14 и 30 дней его использования. Опыты выявили чувствительность налета к различным растворам, содержащим наночастицы оксидов металлов, полученных инновационным способом в лаборатории университета. Снижение противовоспалительных свойств было подтверждено микробиологически. Выявлено проникновение раствора в межзубные промежутки, куда не проникают щетинки зубной щетки с зубной пастой. Данные клинических исследований показали и снижение адгезии (склеивания) микроорганизмов на поверхности зубов на 20%. При большем разведении раствора 1:100, к 30 дню снижается количество грибковой флоры, что говорит о нормализации рН ротовой жидкости.

«Гибель клетки патогенного микроорганизма происходит в результате химической деструкции стенок клетки и различных мембран, в том числе и мембран органелл клетки. Химическая деструкция происходит в результате взаимодействия дисперсной системы „магнетит в водном растворе цетилпиридиния хлорида“ с биополимерами клетки микроба. В результате этого происходит лизис (выход) содержимого клетки в окружающую среду. По-видимому, наночастицы оксида металла являются биокатализаторами ферментов гидролиза пептидной и гликозидной связей в полимерных молекулах клеточной стенки и мембран. В отношении золотистого стафилококка и большинства кокков бактерицидные и бактериостатические свойства препарата иногда значительно превосходят по своей выраженности действие антибиотиков» — сообщила соавтор проекта декан стоматологического факультета Кировского ГМУ, к.м.н. Светлана Громова.

Руководитель научной группы Георгий Фролов рассказал о научных выводах экспериментов: «Безионные коллоидные растворы оксидов металлов являются для человека не токсичными. Являясь одновременно источником микроэлементов, они проявляют долговременные антибактериальные свойства в отношении микроорганизмов зубного налета. Мы зафиксировали в ходе исследования, что при использовании ополаскивателя на основе оксидов металлов значительно снижается количество мягкого зубного налета на поверхностях зубов (до 83%), снижается количество патогенной микрофлоры вплоть до полного её уничтожения. Соответственно снижается воспаление десны. Все процессы более выражены при разведении раствора 1:10 Растворы с содержанием наночастиц рекомендуется использовать в ополаскивателях для полости рта в сочетании с традиционными средствами гигиены».

В настоящее время первые опытные партии препарата создаются в лаборатории НИТУ «МИСиС», разработчики занимаются регистрацией состава и официальным патентованием его в качестве ополаскивателя.

Staphylococcus — Медицинская микробиология — Книжная полка NCBI

Общие понятия

Клинические проявления

Стафилококки могут вызывать многие формы инфекций. (1) золотистый стафилококк вызывает поверхностные поражения кожи (фурункулы, ячмень) и локализованные абсцессы в других места. (2) S. aureus вызывает глубоко укоренившиеся инфекции, такие как остеомиелит и эндокардит и более серьезные инфекции кожи (фурункулез). (3) S. aureus является основной причиной госпитального (внутрибольничного) инфицирование хирургических ран и с S. epidermidis вызывает инфекции, связанные с постоянным использованием медицинских устройств.(4) С aureus вызывает пищевое отравление, выделяя энтеротоксины в пищу. (5) S. aureus вызывает синдром токсического шока путем высвобождения суперантигенов в кровоток. (6) S saprophiticus причины инфекции мочевыводящих путей, особенно у девочек. (7) Другие виды стафилококки ( S. lugdunensis, S. haemolyticus, S. warneri, S. schleiferi, S. intermedius ) являются редкими возбудителями.

Структура

Стафилококки представляют собой грамположительные кокки диаметром 1 мкм. Они образуют сгустки.

Классификация

S aureus и S intermedius являются коагулаза положительный. Все остальные стафилококки коагулазоотрицательны. Они солеустойчивы и часто гемолитические. Для идентификации требуется анализ биотипа.

Естественная среда обитания

S. aureus колонизирует носовой ход и подмышечные впадины. С epidermidis является обычным кожным комменсалом человека. Другие виды стафилококки являются редкими комменсалами человека.Одни являются комменсалами других животные.

Патогенез

S. aureus экспрессирует множество факторов потенциальной вирулентности. (1) Поверхность белки, которые способствуют колонизации тканей хозяина. (2) Факторы, которые, вероятно, подавляют фагоцитоз (капсула, иммуноглобулин, связывающий белок А). (3) Токсины которые повреждают ткани хозяина и вызывают симптомы заболевания. Коагулазоотрицательный стафилококки обычно менее вирулентны и экспрессируют меньше факторов вирулентности. S. epidermidis легко колонизирует имплантированные устройства.

Защита хозяина

Фагоцитоз является основным механизмом борьбы со стафилококковой инфекцией. Образуются антитела, которые нейтрализуют токсины и способствуют опсонизации. То капсула и белок А могут препятствовать фагоцитозу. Рост биопленки на имплантаты невосприимчивы к фагоцитозу.

Лечение

Инфекции, полученные вне больниц, обычно можно лечить с помощью пенициллиназорезистентные β-лактамы. Внутрибольничная инфекция часто вызываются устойчивыми к антибиотикам штаммами и лечатся только ванкомицин.

Устойчивость к антибиотикам

Множественная устойчивость к антибиотикам все чаще встречается у S aureus и S. epidermidis . Устойчивость к метициллину свидетельствует о множественном сопротивлении. Метициллин-устойчивый S aureus (MRSA) вызывает вспышки в больницах и может эпидемия.

Эпидемиология

Эпидемиологическое отслеживание S aureus проводится традиционно методом фагового типирования, но имеет ограничения. Методы молекулярного типирования проходят испытания экспериментально.

Диагностика

Диагностика основана на проведении тестов с колониями. Тесты на коэффициент слипания, коагулаза, гемолизины и термостабильная дезоксирибонуклеаза обычно используются для идентифицировать S aureus . Коммерческие тесты латексной агглютинации доступный. Идентификация S epidermidis подтверждается коммерческие наборы для биотипирования.

Контроль

Пациенты и персонал, являющиеся переносчиками эпидемических штаммов, особенно MRSA, должны быть изолированные. Пациентам могут быть назначены дезинфицирующие ванны или местное лечение. антибиотик для эрадикации носительства MRSA.Программы инфекционного контроля используются в большинство больниц.

Введение

Бактерии рода Staphylococcus являются патогенами человека и других млекопитающие. Традиционно они были разделены на две группы в зависимости от их способность к свертыванию плазмы крови (коагулазная реакция). Коагулазоположительные стафилококки составляют наиболее патогенный вид S aureus . То В настоящее время известно, что коагулазонегативные стафилококки (ЦНС) включают более 30 других разновидность.ЦНС являются обычными комменсалами кожи, хотя некоторые виды могут вызывать инфекции. В настоящее время очевидно, что деление стафилококков на коагулазы положительное и отрицательное является искусственным и, действительно, в некоторых случаях вводит в заблуждение. коагулаза является маркером S aureus , но нет прямых доказательств того, что это фактор вирулентности. Кроме того, некоторые природные изоляты S. aureus являются дефект коагулазы. Тем не менее, этот термин все еще широко используется среди клинические микробиологи.

S aureus экспрессирует множество внеклеточных белков и полисахариды, некоторые из которых коррелируют с вирулентностью. Вирулентность возникает в результате сочетанное действие многих факторов, выраженное во время инфекции. Антитела будут нейтрализуют стафилококковые токсины и ферменты, но вакцины отсутствуют. Обе лечение антибиотиками и хирургический дренаж часто необходимы для лечения абсцессов, большие фурункулы и раневые инфекции. Стафилококки – частые возбудители инфекций связанных с постоянными медицинскими устройствами.Их трудно лечить только антибиотики и часто требуют удаления устройства. Некоторые штаммы, заражающие госпитализированные пациенты устойчивы к большинству антибиотиков, используемых для лечения инфекций, а ванкомицин является единственным оставшимся препаратом, к которому резистентность не развитый.

Таксономия

ДНК-рибосомальная РНК (рРНК) гибридизация и сравнительный олигонуклеотидный анализ 16S рРНК продемонстрировала, что стафилококки образуют связную группу в роду уровень. Эта группа встречается в широком семействе Bacillus-Lactobacillus-Streptococcus. кластер, определяющий грамположительные бактерии с низким содержанием G + C ДНК.

Не менее 30 видов стафилококков были идентифицированы биохимическим анализом и в частности, гибридизацией ДНК-ДНК. Одиннадцать из них могут быть выделены от человека. как комменсалы. S aureus (ноздри) и S epidermidis (ноздри, кожа) являются обычными комменсалами и также обладают наибольшим патогенным потенциалом. S saprophyticus (кожа, иногда) также является частой причиной инфекции мочевыводящих путей. S. haemolyticus, S. simulans, S. cohnii, S. warneri и S lugdunensis также могут вызывать инфекции у человек.

Идентификация стафилококков в клинической лаборатории

Структура

Стафилококки представляют собой грамположительные кокки размером около 0,5–1,0 мкм в диаметр. Они растут гроздьями, парами и иногда короткими цепочками. То кластеры возникают из-за того, что стафилококки делятся в двух плоскостях. Конфигурация кокки помогают отличить микрококки и стафилококки от стрептококков, которые обычно растут цепочками. Необходимо проводить наблюдения за культурами, выращенными в бульоне, так как стрептококки, выращенные на плотной среде, могут образовывать сгустки. Несколько поля должны быть изучены, прежде чем решить, являются ли глыбы или цепочки настоящее время.

Тест на каталазу

Тест на каталазу важен для различения стрептококков (каталазонегативных) каталазоположительные стафилококки. Испытание проводится путем заливки скошенный агар или бульонную культуру с несколькими каплями 3% перекиси водорода. Каталазоположительные культуры сразу пузырятся. Тест не должен быть сделан на крови агар, потому что кровь сама по себе образует пузырьки.

Выделение и идентификация

Присутствие стафилококков в поражении можно заподозрить после исследование прямой окраской по Граму.Однако небольшое количество бактерий в крови исключают микроскопическое исследование и требуют предварительного посева.

Микроорганизм выделяют посевом материала из клинического образца (или из культуры крови) на твердые среды, такие как кровяной агар, триптический соевый агар или сердечный агар. Образцы могут быть контаминированы другими микроорганизмы можно высевать на агар с маннитоловой солью, содержащий 7,5% натрия хлорид, который позволяет расти гало-толерантным стафилококкам. В идеале грамм следует провести окрашивание колонии и провести тесты на каталазу и продукция коагулазы, позволяющая коагулазоположительным S aureus быть быстро идентифицированным.Еще один очень полезный тест для S aureus является продукция термостабильной дезоксирибонуклеазы. Золотой золотистый может быть подтверждено тестированием колоний на агглютинацию с латексными частицами покрыты иммуноглобулином G и фибриногеном, которые связывают белок А и фактор слипания, соответственно, на поверхности бактериальной клетки. Эти доступны от коммерческих поставщиков (например, Staphaurex). Самый последний латекс тест (Pastaurex) включает моноклональные антитела к серотипам 5 и 8 капсулярного полисахарида, чтобы уменьшить количество ложноотрицательных результатов.(Некоторые недавние клинические изоляты S aureus не производят коагулазы и/или фактор скопления, который может затруднить идентификацию.)

Ассоциация S. epidermidis (и в меньшей степени другие коагулазонегативные стафилококки) с внутрибольничными инфекциями, ассоциированными с постоянными устройствами означает, что выделение этих бактерий из крови может быть важным, а не из-за случайного загрязнения, особенно если последовательные культуры крови положительны. В настоящее время идентификация S epidermidis и другие виды Staphylococcus выполняется с использованием коммерческих наборов для идентификации биотипов, таких как API Staph Ident, API Staph-Trac, Vitek GPI Card и Microscan Pos Combo. К ним относятся предварительно сформированные полоски, содержащие тестовые субстраты.

Эпидемиология инфекций, вызываемых золотистым стафилококком

Поскольку S. aureus является основной причиной внутрибольничных и внебольничные инфекции, необходимо определить родство изоляты, собранные во время расследования вспышки.Системы типирования должны быть воспроизводимы, дискриминативны и просты в интерпретации и использовании. Традиционный метод типирования S. aureus – фаговое типирование. Этот метод основан на фенотипический маркер с плохой воспроизводимостью. Кроме того, он не образует много изолятов. (20% в недавнем опросе Центра по контролю и профилактике заболеваний), и это требует поддержания большого количества запасов фагов и размножающихся штаммов и следовательно, могут выполняться только специализированными референс-лабораториями.

Многие методы молекулярного типирования применялись для эпидемиологического анализа S. aureus , в частности штаммы, устойчивые к метициллину (МРЗС). Плазмидный анализ широко применялся с успехом, но недостаток в том, что плазмиды можно легко потерять и приобрести, и поэтому они по своей природе ненадежный. Методы, предназначенные для распознавания полиморфизмов длины рестрикционных фрагментов (RFLP) с использованием различных генных зондов, включая гены рРНК (риботипирование). ограниченный успех в эпидемиологии MRSA.В этой технике выбор рестрикционный фермент, используемый для расщепления геномной ДНК, а также зонды. ключевой. ПЦР со случайным праймером предлагает потенциал для различения штаммов, но подходящая грунтовка для S aureus еще не найдена. Метод В настоящее время наиболее надежным считается гель-электрофорез в импульсном поле, где геномная ДНК разрезается рестрикционным ферментом, который генерирует большие фрагменты 50-700 кб.

Клинические проявления

S. Aureus

S. aureus печально известен тем, что вызывает фурункулы, фурункулы, ячмень, импетиго и другие поверхностные кожные инфекции у людей ().Он также может вызывать более серьезные инфекции, особенно у лица, ослабленные хроническими заболеваниями, травмами, ожогами или иммуносупрессия. Эти инфекции включают пневмонию, глубокие абсцессы, остеомиелит, эндокардит, флебит, мастит и менингит, и часто связаны с госпитализированными пациентами, а не со здоровыми людьми в сообщество. S aureus и S epidermidis распространены причины инфекций, связанных с постоянными устройствами, такими как суставные протезы, сердечно-сосудистые устройства и искусственные клапаны сердца ().

Рисунок 12-2

Инфекции, связанные с постоянными устройствами.

Патогенез

S. Aureus Инфекции

S. aureus экспрессирует многие ассоциированные с клеточной поверхностью и внеклеточные белков, являющихся потенциальными факторами вирулентности. При большинстве заболеваний, вызываемых патогенез этого организма является многофакторным. Таким образом, трудно определить именно роль того или иного фактора. Это также отражает неадекватность многих животные модели стафилококковых заболеваний.

Однако существуют корреляции между штаммами, выделенными при определенных заболеваниях, и экспрессия определенных факторов, что свидетельствует об их важности в патогенезе. С некоторыми токсинами симптомы болезни человека могут быть воспроизведены у животных с чистым белки. Применение молекулярной биологии привело к недавним достижениям в понимание патогенеза стафилококковых заболеваний. Гены, кодирующие потенциал факторы вирулентности были клонированы и секвенированы, а белки очищены.Это имеет способствовал исследованиям на молекулярном уровне способов их действия, как в vitro и в модельных системах. Кроме того, гены, кодирующие предполагаемые факторы вирулентности были инактивированы, и вирулентность мутантов по сравнению с диким типом деформации в животных моделях. Любое снижение вирулентности указывает на отсутствующий фактор. Если вирулентность восстанавливается, когда ген возвращается к мутанту, то «Молекулярные постулаты Коха» выполнены. Несколько Факторы вирулентности S aureus были подтверждены этим подход.

Адгезия

Чтобы инициировать инфекцию, возбудитель должен получить доступ к хозяину и прикрепиться к клеткам или тканям хозяина.

S aureus Прилипает к белкам хозяина

Клетки S aureus экспрессируют на своей поверхности белки, которые стимулируют прикрепление к белкам хозяина, таким как ламинин и фибронектин, которые являются частью внеклеточный матрикс (). Фибронектин присутствует на эпителиальных и эндотелиальных поверхностях, а также является компонент тромбов.Кроме того, большинство штаммов экспрессируют фибриноген/фибрин. связывающий белок (фактор слипания), который способствует прикреплению к тромбам и травмированных тканей. Большинство штаммов S aureus экспрессируют фибронектин и фибриногенсвязывающие белки.

Рисунок 12-3

Сводка факторов вирулентности Staphylococcus золотистый .

Рецептор, который способствует прикреплению к коллагену, особенно связан с со штаммами, вызывающими остеомиелит и септический артрит.Взаимодействие с Коллаген также может играть важную роль в содействии прикреплению бактерий к поврежденным ткани, где были обнажены нижележащие слои.

Доказательства того, что эти стафилококковые матрикс-связывающие белки являются факторами вирулентности был получен в результате изучения дефектных мутантов в тестах приверженности in vitro и в экспериментальные инфекции. Мутанты, дефектные по связыванию с фибронектином и фибриноген снижал вирулентность в крысиной модели эндокардита, что предполагает что бактериальное прикрепление к стерильным вегетациям, вызванное повреждением эндотелиальной поверхности клапана сердца способствует фибронектин и фибриноген.Точно так же мутанты, лишенные коллаген-связывающего белка, уменьшили вирулентность в мышиной модели септического артрита. Кроме того, растворимый лигандсвязывающий домен фибриногена, фибронектина и коллагенсвязывающего белки, экспрессированные рекомбинантными методами, сильно блокируют взаимодействие бактериальные клетки соответствующим белком-хозяином.

Роль приверженности при инфекциях, связанных с медицинскими изделиями

Инфекции, связанные с постоянными медицинскими изделиями, начиная от простых внутривенные катетеры для протезов суставов и замены сердечных клапанов могут быть вызванные S aureus и S epidermidis ().Вскоре после биоматериал имплантируется в организм человека, он покрывается комплексом смесь белков хозяина и тромбоцитов. В одной модельной системе, включающей краткосрочные контакте биоматериала с кровью показано, что фибриноген является доминирующим компонент и в первую очередь отвечал за соблюдение S aureus в последующих анализах in vitro. Напротив, с материалом которые находились в организме в течение более длительного времени (например, человеческие внутривенные катетеры) фибриноген расщепляется и больше не способствует прикреплению бактерий. Вместо, фибронектин, который остается интактным, становится преобладающим лигандом, способствующим вложение.

Прилипание к эндотелиальным клеткам

S aureus может прикрепляться к поверхности культивируемого эндотелия человека клетки и становятся интернализованными в процессе, подобном фагоцитозу. Не ясно, если присоединение включает новый рецептор или известный поверхностный белок S золотистый . Некоторые исследователи считают, что S aureus может инициируют эндокардит, прикрепляясь к неповрежденному эндотелию.Другие чувствуют что травма даже очень незначительного характера необходима, чтобы способствовать привязанности бактерии.

Избегание защиты хозяина

S aureus выражает ряд факторов, которые потенциально могут нарушать защитные механизмы хозяина. Тем не менее убедительные доказательства роли вирулентность этих факторов отсутствует.

Капсульный полисахарид

Большинство клинических изолятов S aureus экспрессируют поверхностный полисахарид серотипа 5 или 8. Это называется микрокапсула. потому что его можно визуализировать только с помощью электронной микроскопии после антитела мечение, в отличие от обильных капсул других бактерий, которые визуализируются световая микроскопия. S. aureus , выделенный из инфекции, экспрессирует высокий уровень полисахарида, но быстро теряет его при лабораторном пересеве. Функция капсулы не ясна. Он может препятствовать фагоцитозу, но в В лабораторных тестах это было продемонстрировано только в отсутствие комплемента. Наоборот, сравнение дикого типа и мутантного штамма с дефектом капсулы при эндокардите Модель предположила, что экспрессия полисахаридов на самом деле препятствует колонизации поврежденные сердечные клапаны, возможно, за счет маскировки адгезивов.

Белок А

Белок А представляет собой поверхностный белок S. aureus , который связывает молекулы иммуноглобулина G Fc-областью (). В сыворотке бактерии неправильно связывают молекулы IgG. вокруг этого неиммунного механизма. В принципе это нарушит опсонизацию и фагоцитоз. Действительно, у мутантов S aureus отсутствует белок А. более эффективно фагоцитируются in vitro, а исследования с мутантами в Модели инфекции предполагают, что белок А усиливает вирулентность.

Лейкоцидин

S. aureus может экспрессировать токсин, который специфически действует на полиморфноядерные лейкоциты.Фагоцитоз является важной защитой от стафилококковая инфекция, поэтому лейкоцидин должен быть фактором вирулентности. Этот токсин более подробно обсуждается в следующем разделе.

Повреждение хозяина

S. aureus может экспрессировать несколько различных типов белковых токсинов, которые вероятно, ответственны за симптомы во время инфекций. Некоторые повреждают мембраны эритроцитов, вызывая гемолиз; но маловероятно, что гемолиз имеет отношение к виво. Лейкоцидин вызывает повреждение мембран лейкоцитов и не является гемолитическим.Системный выброс α-токсина вызывает септический шок, тогда как энтеротоксины и TSST-1 вызывают токсический шок.

Мембраноповреждающие токсины

(a) α-токсин

Наиболее охарактеризованный и наиболее сильнодействующий мембраноповреждающий токсин из S aureus представляет собой альфа-токсин. Он выражается в виде мономера, который связывается с мембраной восприимчивых клеток. Затем субъединицы олигомеризуются в образуют гексамерные кольца с центральной порой, через которую клеточное содержимое утечка.

Восприимчивые клетки имеют специфический рецептор для α-токсина, который позволяет Низкие концентрации токсина связываются, вызывая небольшие поры, через которые могут проходить одновалентные катионы.При более высоких концентрациях токсин реагирует неспецифически с мембранными липидами, вызывая более крупные поры, через которые могут проходить двухвалентные катионы и небольшие молекулы. Однако сомнительно, если это актуально при нормальных физиологических условиях.

У человека тромбоциты и моноциты особенно чувствительны к α-токсин. Они несут сайты с высоким сродством, которые позволяют токсину связываться в физиологически значимых концентрациях. Сложная серия из следуют вторичные реакции, вызывающие высвобождение эйкозаноидов и цитокинов которые запускают выработку медиаторов воспаления.Эти события вызывают симптомы септического шока, возникающие при тяжелых инфекциях, вызванных золотистый стафилококк .

Представление о том, что α-токсин является основным фактором вирулентности S aureus подтверждается исследованиями очищенного токсина в животных и в органной культуре. Кроме того, мутанты, лишенные α-токсина, менее вирулентны в различных моделях инфекций животных.

(b) β-токсин

β-токсин представляет собой сфингомиелиназу, повреждающую мембраны, богатые этим липид. Классический тест на β-токсин – лизис овец. эритроциты.Большинство человеческих изолятов S aureus не не экспрессируют β-токсин. Внутрь вводят лизогенный бактериофаг. ген, кодирующий токсин. Это явление называется негативным фагом. преобразование. Некоторые фаги, инактивирующие ген β-токсина несут детерминанту для энтеротоксина и стафилокиназы (см. ниже).

Напротив, большинство изолятов, выделенных из коровьего мастита, экспрессируют β-токсин, предполагая, что токсин играет важную роль в патогенезе мастита. Это подтверждается тем фактом, что дефицит β-токсина мутанты имеют пониженную вирулентность в мышиной модели мастита.

(c) δ-токсин

δ-токсин представляет собой очень маленький пептидный токсин, продуцируемый большинством штаммов S aureus . Он также производится S epidermidis и Slugdunensis . Роль δ-токсин при заболевании неизвестен.

(d) γ-токсин и лейкоцидин

γ-токсин и лейкоцидины представляют собой двухкомпонентные белковые токсины которые повреждают мембраны восприимчивых клеток. Белки экспрессируются по отдельности, но действуют вместе, повреждая мембраны. Нет никаких доказательств того, что они образуют мультимеры до внедрения в мембраны.γ-токсин локус экспрессирует три белка. Компоненты В и С образуют лейкотоксин. со слабой гемолитической активностью, тогда как компоненты А и В являются гемолитическими и слабо лейкотоксичны.

Классический лейкоцидин Пантона и Валентайна (PV) отличается от лейкотоксин, экспрессируемый локусом γ-токсина. Он обладает мощным лейкотоксичен и, в отличие от γ-токсина, негемолитичен. Только небольшая часть изолятов S aureus (2% в одном исследовании) экспрессируют лейкоцидин PV, тогда как 90% выделенных из тяжелых дермонекротические поражения экспрессируют этот токсин.Это свидетельствует о том, что лейкоцидин PV является важным фактором некротизирующих кожных инфекций.

PV-лейкоцидин вызывает дермонекроз при подкожном введении кроликам. Кроме того, при концентрации ниже той, которая вызывает повреждение мембраны, токсин высвобождает медиаторы воспаления из нейтрофилов человека, что приводит к дегрануляция. Это может объяснить гистологию дермонекроза. инфекции (расширение сосудов, инфильтрация и центральный некроз).

Суперантигены: энтеротоксины и токсин синдрома токсического шока

S. aureus может экспрессировать два разных типа токсина с суперантигенная активность, энтеротоксины, из которых шесть серотипов (A, B, C, D, E и G) и токсин синдрома токсического шока (TSST-1). Энтеротоксины вызывают диарею и рвоту при попадании в организм. виновник стафилококкового пищевого отравления. При выражении системно энтеротоксины могут вызывать синдром токсического шока (СТШ) — действительно энтеротоксины B и C вызывают 50% неменструальных TSS. ЦСТ-1 очень слабо связан с энтеротоксинами и не обладает рвотной активностью. ЦСТ-1 отвечает за 75% TSS, включая все менструальные случаи. ТСС может возникают как следствие любой стафилококковой инфекции при попадании энтеротоксина или TSST-1 высвобождается системно, и хосту не хватает соответствующего нейтрализующие антитела.Тампоассоциированный СТШ не является истинной инфекцией, вызванный ростом S aureus в тампоне и всасывание токсина в кровоток. TSS стал известен при введении супервпитывающих тампонов; и хотя количество таких случаев резко сократилось, они все еще имеют место несмотря на изъятие с рынка некоторых видов тампонов.

Суперантигены неспецифически стимулируют Т-клетки без нормального антигенного признание (). Вплоть до одна из пяти Т-клеток может быть активирована, тогда как только 1 из 10 000 активируется. стимулируются во время презентации антигена.Цитокины высвобождаются в большом количестве. количества, вызывающие симптомы СТШ. Суперантигены связываются непосредственно с главные комплексы гистосовместимости II класса антигенпрезентирующих клеток за пределами обычной антигенсвязывающей рощи. Этот комплекс распознает только элемент Vβ Т-клеточного рецептора. Таким образом, любая Т-клетка с соответствующим элементом Vβ ​​можно стимулировать, тогда как обычно при связывании также требуется антигенная специфичность.

Рисунок 12-4

Суперантигены и неспецифическая стимуляция T клетки.

Эпидермолитический (эксфолиативный) токсин (ЭТ)

Этот токсин вызывает у новорожденных синдром обожженной кожи с широко распространенным образование пузырей и потеря эпидермиса. Существуют две антигенно различные формы токсина, ETA и ETB. Имеются данные о том, что эти токсины имеют протеазу. деятельность. Оба токсина имеют сходство последовательности с S. aureus сериновая протеаза и три наиболее важные аминокислоты в активный центр протеазы сохраняется. Кроме того, изменение активного замена серина на глицин полностью устраняла активность токсина.Тем не менее, инопланетяне не обладают заметной протеолитической активностью, но обладают эстеразной активностью. Неясно, как последний вызывает расщепление эпидермиса. Возможно, что токсины нацелены на очень специфический белок, который участвует в поддержании целостность эпидермиса.

Другие внеклеточные белки

Коагулаза

Коагулаза не является ферментом. Это внеклеточный белок, который связывается с протромбина в хозяине с образованием комплекса, называемого стафилотромбин. протеаза в комплексе активируется характерная для тромбина активность, в результате превращение фибриногена в фибрин.Это основа трубчатой ​​коагулазы тест, при котором в плазме после инкубации с S образуется сгусток aureus супернатант бульонной культуры. Коагулаза – традиционный маркер для идентификации S aureus в клинической микробиологии лаборатория. Однако нет никаких доказательств того, что это фактор вирулентности, хотя разумно предположить, что бактерии могут защищать себя от защиты хозяина, вызывая локальное свертывание крови. В частности, коагулаза Дефицитные мутанты были испытаны на нескольких моделях инфекции, но не отличий от родительского штамма не наблюдалось.

В литературе существует некоторая путаница в отношении коагулазы и образования скоплений фактор, детерминанта связывания фибриногена на клетке S aureus поверхность. Частично это связано с расплывчатой ​​терминологией, с фактором скопления иногда его называют связанной коагулазой. Кроме того, хотя коагулаза считается внеклеточным белком, небольшая часть которого прочно связана с поверхности бактериальной клетки, где она может реагировать с протромбином. Наконец, он имеет недавно было показано, что коагулаза может связывать фибриноген так же, как и тромбин, по крайней мере, когда он внеклеточный. Генетические исследования однозначно показали, что коагулаза и фактор слипания — разные сущности. Отсутствуют конкретные мутанты коагулазы сохраняют активность фактора слипания, в то время как мутанты фактора слипания экспрессируют коагулаза в норме.

Стафилокиназа

Многие штаммы S aureus экспрессируют активатор плазминогена, называемый стафилокиназа. Генетическая детерминанта связана с лизогенным бактериофаги. Образуется комплекс между стафилокиназой и плазминогеном. активирует плазминоподобную протеолитическую активность, которая вызывает растворение фибрина сгустки.Механизм идентичен стрептокиназе, которая используется в медицине для лечить пациентов, страдающих коронарным тромбозом. Как и в случае с коагулазой, нет доказательства того, что стафилокиназа является фактором вирулентности, хотя это кажется разумным предположить, что локализованный фибринолиз может способствовать распространению бактерий.

Ферменты

S aureus может экспрессировать протеазы, липазу, дезоксирибонуклеазу (ДНКаза) и фермент, модифицирующий жирные кислоты (МЭЖК). Первые три, вероятно, обеспечивают питательные вещества для бактерий, и маловероятно, что они имеют что-либо, кроме незначительных роль в патогенезе.Однако фермент FAME может быть важен при абсцессах, где это может изменить антибактериальные липиды и продлить выживание бактерий. То термостабильная ДНКаза является важным диагностическим тестом для идентификации S золотистый .

Коагулазоотрицательные стафилококки

Стафилококки, отличные от S aureus , могут вызывать инфекции у человека. S. epidermidis является наиболее важным коагулазонегативным стафилококков (ЦНС) видов и является основной причиной инфекций, связанных с протезы и катетеры.ЦНС также вызывают перитонит у пациентов, получающих постоянный амбулаторный перитонеальный диализ и эндокардит у пациентов с протезами клапаны. Эти инфекции обычно не приобретаются внутрибольнично. Другие виды, такие as S. haemolyticus, S. warneri, S. hominis, S. capitis, S. intermedius, S. schleiferi и S simulans являются редкими патогенами. Slugdunesis — недавно признанный вид. Это, наверное, больше патогенны, чем другие виды ЦНС, со случаями эндокардита и других сообщается об инфекциях.Вероятно, что заболеваемость инфекциями, вызванными этих организмов недооценивается из-за трудностей идентификации.

Диагностика инфекций ЦНС затруднена. Инфекции часто вялотекущие и хронические с немногочисленными явными симптомами. Это связано с меньшим набором факторов вирулентности и токсины по сравнению с таковыми в случае S aureus . С epidermidis представляет собой комменсал кожи и является одним из наиболее распространенных загрязняющих веществ образцов, отправленных в диагностическую лабораторию, в то время как S lugdunensis часто путают с S aureus .Точный идентификация видов ЦНС требует использования дорогих тестовых наборов, таких как API-стафилококк.

В отличие от S aureus мало что известно о механизмах патогенез инфекции S. epidermidis . Приверженность, очевидно, решающий этап в инициации инфицирования инородным телом. Много исследований было сделано по взаимодействию между S epidermidis и пластиковым материалом используется в имплантатах, и была идентифицирована полисахаридная адгезия (PS/A).Мутанты отсутствие PS / A менее вирулентны в животной модели инфекции инородного тела, и иммунизация очищенным PS/A является защитной. Бактериально-пластиковые взаимодействия вероятно важно при колонизации катетеров через точку входа. Однако, белки-хозяева быстро откладываются на имплантатах. S epidermidis делает не связываются с фибриногеном, но большинство изолятов связывают фибронектин, хотя и менее активно, чем золотистый стафилококк . Однако неизвестно, есть ли белок, аналогичный участвует фибронектин-связывающий белок S. aureus .

Характерной чертой клинических изолятов S. epidermidis является производство «слизи». Это спорная тема. Некоторые чувствуют что слизь является in vitro проявлением способности образовывать биопленку in vivo, например, на поверхности протеза и, таким образом, является маркером вирулентности. In vitro слизь образуется при росте в бульоне в виде биопленки на поверхности сосуд роста. На состав этой слизи, вероятно, повлиял рост Средняя. Одно исследование с определенной средой показало, что слизь была преимущественно секретируемая тейхоевая кислота, полимер, обычно присутствующий в клеточной стенке стафилококков.Некоторые полисахариды в слизи бактерий, выращенных на твердой среде, получены из агар.

Устойчивость стафилококков к противомикробным препаратам

Госпитальные штаммы S. aureus часто устойчивы ко многим различным антибиотики. Действительно штаммы, устойчивые ко всем клинически полезным препаратам, кроме описаны гликопептиды ванкомицин и тейкопланин. Термин МРЗС относится к устойчивости к метициллину, и большинство устойчивых к метициллину штаммов также многократно стойкий.Плазмид-ассоциированная резистентность к ванкомицину была обнаружена у некоторых энтерококки, а детерминанта резистентности была перенесена с энтерококков на S aureus в лаборатории и может встречаться в природе. С epidermidis внутрибольничные изоляты также часто устойчивы к нескольким антибиотики, в том числе метициллин. Кроме того, S aureus экспрессирует устойчивость к антисептикам и дезинфицирующим средствам, таким как соединения четвертичного аммония, что может помочь его выживанию в больничной среде.

С начала эры антибиотиков S aureus ответил на внедрение новых лекарств, быстро приобретающих устойчивость у различных генетические механизмы, включая (1) приобретение внехромосомных плазмид или дополнительная генетическая информация в хромосоме через транспозоны или другие типы вставками ДНК и (2) мутациями в хромосомных генах ().

Многие детерминанты, кодируемые плазмидами, недавно были вставлены в хромосому на сайте, связанном с детерминантой устойчивости к метициллину.Может быть преимущество для организма, имеющего детерминанты резистентности в хромосоме, поскольку они будут более стабильными. По сути, существует четыре механизма устойчивости к антибиотиков у бактерий: (1) ферментативная инактивация препарата, (2) изменения в мишень лекарственного средства для предотвращения связывания, (3) ускоренный отток лекарственного средства для предотвращения токсического концентрации, накапливающиеся в клетке, и (4) обходной механизм, посредством которого выражается альтернативная лекарственно-устойчивая версия мишени ().

Будущие перспективы

Противомикробные препараты

С момента первого применения пенициллина S aureus показал замечательная способность к адаптации.Резистентность к новым препаратам развилась в течение короткое время их введения. Некоторые штаммы теперь устойчивы к большинству обычные антибиотики. Беспокоит, что нет новых антибиотики на горизонте. Любые недавние разработки были модификациями существующие препараты.

Первоначальная стратегия, используемая фармацевтической промышленностью для поиска противомикробных препаратов. Препараты должны были проверять натуральные продукты и синтетические химические вещества на антимикробные свойства. деятельность. Затем был изучен механизм действия.

Применяются новые подходы к поиску нового поколения противомикробных препаратов. Потенциальные мишени, такие как ферменты, участвующие в важной функции (например, в клеточное деление) идентифицируются на основе знаний о бактериальной физиологии и метаболизм. Затем разрабатываются методы скрининга для выявления ингибиторов конкретную молекулу-мишень. Кроме того, обладая подробными молекулярными знаниями о молекулы-мишени, могут быть разработаны специфические ингибиторы.

Вакцины и новые подходы к борьбе с внутрибольничными инфекциями

В настоящее время не существует вакцины для борьбы со стафилококковыми инфекциями.Может Теперь следует рассмотреть методы предотвращения болезней, особенно в госпитализированных пациентов.

Гипериммунная сыворотка доноров-добровольцев или гуманизированные моноклональные антитела направлены на поверхностные компоненты (например, капсульный полисахарид или поверхностный белковые адгезии) могут как предотвращать прилипание бактерий, так и способствовать фагоцитоз бактериальных клеток. Действительно, прототип вакцины на основе капсульной полисахарид из S aureus вводили добровольцев для получения гипериммунной сыворотки, которую можно было бы вводить пациентам в больнице перед операцией. Вакцина на основе белка, связывающего фибронектин, индуцирует защитный иммунитет против мастита у крупного рогатого скота, а также может быть использован в качестве вакцина у людей.

При молекулярной основе взаимодействия между бактериальной поверхностью белки и лиганды белка матрикса-хозяина известны, возможно, разработать соединения, которые блокируют взаимодействие и, таким образом, предотвращают бактериальное колонизация. Их можно вводить системно или местно.

Ссылки

  1. Easmon CSF, Adlam C: Staphylococci and стафилококковые инфекции.Тома 1 и 2. Academic Press, Лондон, 1983 г. .

  2. Фостер Т.Дж. Возможности вакцинации против инфекций, вызванных Золотистый стафилококк . вакцина. 1991;9:221. [PubMed: 2058264]
  3. Фостер Т.Дж., Макдевитт Д.: Молекулярная основа приверженности стафилококков к биоматериалам. п. 31, In Bisno AL, Waldvogel FA (ред.): Инфекции, связанные с постоянными медицинскими устройствами, 2-е издание. американский Общество микробиологии, Вашингтон, округ Колумбия, 1994.

  4. Прево Г., Куппи П., Прево П.и другие. Эпидемиологические данные по Staphylococcus aureus штаммы-продуценты синергименотропных токсинов. J Med Microbiol. 1995;42:237. [PubMed: 7707330]
  5. Rupp ME, Archer GL. Коагулазоотрицательные стафилококки: возбудители, ассоциированные с медицинский прогресс. Клин Инфекция Дис. 1994;19:231. [PubMed: 7986894]
  6. Шливерт PM. Роль суперантигенов в заболеваниях человека. J заразить Dis. 1993;167:997. [PubMed: 8486972]
  7. Skinner GRB, Ahmad, A: Стафилококковые вакцины — нынешнее состояние и перспективы на будущее.п. 537. В Mollby R, Flock JI, Nord CE, Кристенссон Б. (ред.): Стафилококки и стафилококковые инфекции. Збл. Бакт. Доп. 26, Fischer Verlag, Штутгарт, 1994.

  8. Vaudaux PE, Lew DP, Waldvogel FA: факторы хозяина предрасполагающие факторы и влияющие на терапию инфекций инородных тел. п. 1. В Бисно А.Л., Вальдвогель Ф.А. (ред.): Инфекции, связанные с постоянным лечением Устройства. 2-е изд. Американское общество микробиологии, Вашингтон, округ Колумбия, 1994 г. .

Стафилококк – обзор | Темы ScienceDirect

5.53.3.2.1 Адсорбенты на основе протеина А для удаления антител

Staphylococcus белок А (SPA) представляет собой компонент клеточной стенки, который был идентифицирован у S. aureus более 40 лет назад. Его способность связывать константные области антител делает его полезным в качестве средства для выделения иммуноглобулинов. Наиболее часто используемыми продуктами на основе СПА являются Immunosorba (Fresenius Medical Care, Германия) и Prosorba (Cypress Bioscience, Inc., США). 13 Колонка Immunosorba содержит очищенный белок А, иммобилизованный в гранулах сефарозы после активации гранул бромцианом, и одна колонка Immunoadsorba может связывать около 1.2 г антител IgG при насыщении. Обычно используется двухколоночная система, в которой две колонки Immunosorba используются с перерывами во время каждой обработки. Однократное лечение с использованием колонок Иммуносорба может привести к значительному снижению концентрации антител IgG в крови пациента из-за «неограниченной» емкости колонок и большого объема обрабатываемой плазмы. Набор из двух колонок Immunosorba может быть повторно использован одним и тем же пациентом до 20 раз. В отличие от Immunosorba Prosorba представляет собой одноколоночную систему с ограниченной адсорбционной способностью.Колонка Prosorba содержит 200 мг очищенного белка А, иммобилизованного в 123 г гранул кремнезема, и одна колонка Prosorba может связывать около 0,6 г антител IgG при насыщении. Несмотря на ограниченный объем обрабатываемой плазмы, который не позволяет значительно удалить иммуноглобулин или циркулирующие иммунные комплексы, было показано, что это устройство оказывает иммуномодулирующее действие. Однако способ его действия остается несколько неясным.

Колонки были одобрены FDA для лечения ревматоидного артрита и идиопатической тромбоцитопенической пурпуры (Prosorba) и гемофилии с ингибиторами (Immunosorba). Помимо этих показаний, одобренных FDA, иммуноадсорбция на основе SPA была опробована для нескольких других аутоиммунных состояний. 13,14 Некоторые данные подтверждают возможный положительный эффект в нефрологии, кардиологии, дерматологии, гематологии, неврологии и ревматологии. Иммуноадсорбция на основе СПА была предложена для лечения пациентов с опасными для жизни аутоиммунными заболеваниями, особенно в случае пациентов с аутоиммунной тромбоцитопенической пурпурой, которые не реагируют на кортикостероиды, а также при тяжелом или резистентном к лечению ревматоидном артрите.

Помимо лечения аутоиммунных заболеваний иммуноадсорбция на основе СПА также находит важное применение при трансплантации органов. 15 Многие исследования показали эффективность иммуноадсорбции в лечении тяжелого отторжения, опосредованного антителами, которое часто вызывает рефрактерную дисфункцию трансплантата. У пациентов с острым сосудистым отторжением после трансплантации почки иммуноадсорбция может быть использована для удаления донор-специфических антител в сочетании с традиционной терапией против отторжения. Для реципиентов почек, предварительно сенсибилизированных человеческим лейкоцитарным антигеном (HLA), иммуноадсорбция также может быть успешно использована для снижения титра анти-HLA-антител перед трансплантацией для получения отрицательной перекрестной совместимости у высокосенсибилизированных пациентов. В противном случае этим пациентам было бы трудно получить донорский орган.

При проведении иммуноадсорбции на основе СПА необходимо учитывать несколько важных моментов. Во-первых, доказана эффективность иммуноадсорбции в удалении иммуноглобулинов и циркулирующих иммунных комплексов из кровотока.Однако некоторые воспалительные процессы чаще возникают в тканях, а не в сосудистом русле. Простое удаление иммуноглобулинов из кровотока не обязательно устраняет аутоиммунный процесс. Во-вторых, необходимо использовать повторные циклы лечения с адекватно обработанными объемами плазмы, чтобы преодолеть перераспределение патологических аутоантител. Тем не менее, почти полная элиминация IgG может привести к тяжелому гуморальному иммунодефициту, так что пациенты подвергаются риску осложнений в результате инфекций. В-третьих, пациенты, страдающие аутоиммунными заболеваниями, могут различаться по своему состоянию. Даже они могут проявлять схожие симптомы и иметь разные типы патогенных факторов в зависимости от разнообразия аутоантител — их классов и подклассов. Поскольку адсорбенты на основе СПА слабо адсорбируют IgG3, IgM и IgA, у разных пациентов могут существовать различия в эффективности лечения.

Дальнейшее развитие адсорбентов на основе СПА может заключаться в улучшении процессов их производства и характеристик.Более стабильные продукты уменьшат их побочные эффекты, а более дешевые продукты расширят область их применения, сделав их доступными для большего числа пациентов. Кроме того, эффективность иммуноадсорбции может быть дополнительно улучшена за счет интеграции в иммуномодулирующее лечение аутоиммунных заболеваний путем сочетания с удалением воспалительных цитокинов, иммуносупрессией и селективным отклонением иммунитета.

БАМ Глава 12: Золотистый стафилококк

Бактериологическое аналитическое руководство (BAM) Основная страница

Авторы: Сандра Таллент, Дженнифер Хейт, Реджинальд В.Беннетт (в отставке) и Гейл А. Лансетт (в отставке)

История изменений :

  • Март 2016 г.: температура для инкубации штамма S. aureus была изменена с 35°C на 35–37°C.

Staphylococcus aureus очень уязвим для разрушения при термической обработке и почти всех дезинфицирующих средствах. Таким образом, присутствие этой бактерии или ее энтеротоксинов в обработанных пищевых продуктах или на оборудовании для пищевой промышленности, как правило, указывает на плохие санитарные условия. С . aureus может вызвать тяжелое пищевое отравление. Он был идентифицирован как возбудитель многих вспышек пищевых отравлений и, вероятно, является причиной даже большего числа случаев среди отдельных лиц и семейных групп, чем показывают записи. Пищевые продукты исследуют на наличие S . aureus и/или его энтеротоксины для подтверждения того, что S . aureus является возбудителем болезней пищевого происхождения, чтобы определить, является ли пища потенциальным источником пищевого отравления «стафилококком», и продемонстрировать загрязнение после обработки, которое обычно происходит из-за контакта с человеком или загрязненных поверхностей, контактирующих с пищевыми продуктами.Выводы относительно значимости S . aureus в пищевых продуктах следует производить с осторожностью. Наличие большого количества S . aureus микроорганизмы в пищевых продуктах могут указывать на ненадлежащее обращение или санитарию; однако этого недостаточно для того, чтобы обвинить пищу в качестве причины пищевого отравления. Изолированный S . Необходимо показать, что штамм aureus вырабатывает энтеротоксины. И наоборот, небольшие популяции стафилококков во время тестирования могут быть остатками больших популяций, продуцирующих энтеротоксины в количестве, достаточном для того, чтобы вызвать пищевое отравление.Таким образом, аналитик должен учитывать все возможности при анализе пищи для S . золотистый .

Методы, используемые для обнаружения и подсчета S . aureus зависят от причин тестирования пищевых продуктов и от прошлой истории исследуемого материала. Обработанные пищевые продукты могут содержать относительно небольшое количество ослабленных жизнеспособных клеток, наличие которых должно быть продемонстрировано соответствующими средствами. Анализ продуктов питания по S . aureus может привести к судебному иску против стороны или сторон, ответственных за загрязнение пищевых продуктов.Методы анализа для S . aureus , которые были изучены совместно и признаны подходящими для использования при предоставлении информации, необходимой для требований FDA, представлены в этой главе.

Были значительные разногласия по поводу значимости и правильного метода чтения теста на коагулазу. Результаты исследований показали, что слабая активность коагулазы, представленная реакциями 1+, 2+ и 3+, редко соответствует другим критериям, связанным с S . золотистый (4). Консенсус коллег установил, что для бесспорной идентификации S необходима реакция 4+ коагулазы. золотистый . Те штаммы, которые предположительно являются S . aureus на основании реакции коагулазы менее 4+ должны быть подтверждены другими тестами, такими как анаэробная ферментация глюкозы, чувствительность к лизостафину и продукция термонуклеазы. Исследования колониальной морфологии на агаре Бэрда-Паркера, чувствительности к лизостафину, продукции коагулазы и термонуклеазы, а также ферментации глюкозы и маннита были проведены на 100 энтеротоксигенных и 51 неэнтеротоксигенном штаммах S . золотистый (3). Во всех случаях реакции энтеротоксигенных и неэнтеротоксигенных штаммов различались на 12% и менее. Это исследование показывает, что ни на один из этих тестов нельзя полагаться для дифференциации токсичных и нетоксичных стафилококков.

Метод прямого подсчета на чашках

Этот метод подходит для анализа пищевых продуктов, в которых более 100 S . Можно ожидать aureus клеток/г. Он соответствует методу в исх. 1.

  1. Оборудование и материалы

    1. То же основное оборудование, что и для обычного чашечного счета (глава 3).
    2. Сушильный шкаф или инкубатор для сушки поверхности чашек с агаром
    3. Стерильные изогнутые стеклянные штриховые стержни, в форме хоккейной клюшки или мотыги, с шлифованными концами, диаметром 3–4 мм, длиной 15–20 см, со скошенной распространяющей поверхностью длиной 45–55 мм
  2. Среды и реактивы

    1. Среда Бэрда-Паркера (M17)
    2. Триптиказный (триптический) соевый агар (TSA) (M152)
    3. Настой сердечно-мозгового вещества (BHI) бульон (M24)
    4. Коагулаза плазмы (кроличья) с ЭДТА
    5. Агар с толуидиновым синим и ДНК (M148)
    6. Лизостафин (Шварц-Манн, Маунтин-Вью-авеню., Оринджбург, Нью-Йорк 10962)
    7. Агар с триптоновым дрожжевым экстрактом (M165)
    8. Парафиновое масло, стерильное
    9. 0,02 М фосфатно-солевой буфер (R61), содержащий 1 % NaCl
    10. Каталазный тест (R12)
  3. Подготовка образца (см. главу 1 BAM).
  4. Выделение и перечисление S . золотистый

    1. Для каждого разведения, предназначенного для посева, в асептических условиях перенесите 1 мл суспензии образца на 3 чашки с агаром Бэрда-Паркера, равномерно распределив 1 мл инокулята на 3 чашки (например,г., 0,4 мл, 0,3 мл и 0,3 мл). Распределите инокулят по поверхности чашки с агаром, используя стерильную изогнутую стеклянную палочку для нанесения штрихов. Сохраняйте чашки в вертикальном положении до тех пор, пока инокулят не впитается в агар (около 10 мин на правильно высушенных чашках). Если посевной материал плохо адсорбируется, поместите чашки в инкубатор в вертикальном положении примерно на 1 час. Чашки перевернуть и инкубировать 45-48 ч при 35-37°С. Выберите чашки, содержащие 20-200 колоний, если только чашки с более низкими разведениями (>200 колоний) не имеют колоний с типичным внешним видом S . золотистый . Колонии S . aureus круглые, гладкие, выпуклые, влажные, 2-3 мм в диаметре на нескученных пластинах, от серого до угольно-черного цвета, часто со светлым (грязно-белым) краем, окружены непрозрачной зоной и часто с внешней прозрачной зона; колонии имеют маслянистую или липкую консистенцию при прикосновении к инокуляционной игле. Изредка из различных продуктов питания и молочных продуктов могут встречаться сходные по внешнему виду нелиполитические штаммы, за исключением того, что вокруг них отсутствуют непрозрачные и прозрачные зоны.Штаммы, выделенные из замороженных или высушенных пищевых продуктов, которые хранились в течение длительного времени, часто приобретают менее черную окраску, чем типичные колонии, и могут иметь грубый вид и сухую текстуру.
    2. Подсчитайте и запишите колонии. Если наблюдается несколько типов колоний, которые выглядят как S . aureus на выбранных чашках, подсчитывают количество колоний каждого типа и записывают подсчет отдельно. Если чашки с самым низким разведением содержат менее 20 колоний, их можно использовать.Если чашки, содержащие >200 колоний, имеют колонии с типичным внешним видом S . aureus и типичные колонии не появляются при более высоких разведениях, используйте эти чашки для подсчета S . aureus , но нетипичные колонии не учитывают. Выберите > 1 колонию каждого подсчитанного типа и проведите тест на выработку коагулазы. Добавьте количество колоний на чашках с тремя повторами, представленное колониями, дающими положительный тест на коагулазу, и умножьте на коэффициент разбавления образца.Сообщите этот номер как номер S . aureus /г протестированного пищевого продукта.
  5. Тест на коагулазу

    Подозреваемый перевод S . колоний aureus в небольшие пробирки, содержащие 0,2-0,3 мл бульона BHI, и тщательно эмульгируют. Инокулировать скошенный агар подходящей поддерживающей средой, например, TSA, с петлей суспензии BHI. Инкубируйте суспензию и скошенные культуры BHI в течение 18–24 ч при 35–37°C. Сохраняйте скошенные культуры при комнатной температуре для дополнительных или повторных тестов в случае, если результаты теста на коагулазу сомнительны.Добавьте 0,5 мл восстановленной коагулазной плазмы с ЭДТА (B-4, выше) к культуре BHI и тщательно перемешайте. Инкубируйте при 35-37°C и периодически проверяйте в течение 6 часов на образование сгустков. Положительным для S считается только плотный и полный сгусток, который остается на месте, когда пробирку наклоняют или переворачивают. золотистый . Частичное свертывание, ранее 2+ и 3+ коагулазные реакции, необходимо исследовать дополнительно (4). Тестируйте известные положительные и отрицательные культуры одновременно с подозрительными культурами с неизвестной активностью коагулазы.Окрашивайте все подозрительные культуры реактивом Грама и наблюдайте под микроскопом. Тест на коагулазу можно заменить тестом на латекс-агглютинацию (AUREUS TEST TM , Trisum Corp., Тайбэй, Тайвань), если требуется более быстрая процедура.

  6. Вспомогательные тесты

    1. Каталазный тест. Используйте рост из скошенного TSA для теста на каталазу на предметном стекле или точечной пластине и правильно освещайте, чтобы наблюдать образование пузырьков газа.
    2. Анаэробная утилизация глюкозы.Засейте пробирку с углеводной ферментационной средой, содержащей глюкозу (0,5%). Немедленно обильно инокулируйте каждую пробирку проволочной петлей. Убедитесь, что посевной материал достигает дна пробирки. Покройте поверхность агара слоем стерильного парафинового масла толщиной не менее 25 мм. Инкубировать 5 дней при 35-37°С. Кислота образуется анаэробно, если цвет индикатора во всей пробирке меняется на желтый, что указывает на присутствие S . золотистый . Одновременно запускайте контроли (положительные и отрицательные культуры и средние контроли).
    3. Анаэробная утилизация маннита. Повторите 2 выше, используя маннит в качестве углевода в среде. С . aureus обычно положительный, но некоторые штаммы отрицательные. Одновременно запускайте элементы управления.
    4. Чувствительность к лизостафину. Перенесите изолированную колонию с чашки с агаром с помощью инокуляционной петли в 0,2 мл фосфатно-солевого буфера и эмульгируйте. Половину взвешенных клеток перенесите в другую пробирку (13 × 100 мм) и смешайте с 0,1 мл фосфатно-солевого буфера в качестве контроля. Добавьте 0.1 мл лизостафина (растворенного в 0,02 М фосфатно-солевом буфере, содержащем 1% NaCl) в исходную пробирку для концентрации лизостафина 25 мкг/мл. Обе пробирки инкубируют при 35-37°С не более 2 часов. При исчезновении мути в испытуемой смеси проба считается положительной. Если просветления не произошло в течение 2 ч, тест отрицательный. С . aureus в целом положительный.
    5. Производство термостабильных нуклеаз. Утверждается, что этот тест столь же специфичен, как тест на коагулазу, но менее субъективен, поскольку он включает изменение цвета с синего на ярко-розовый.Он не заменяет тест на коагулазу, а скорее является вспомогательным тестом, особенно для реакций с коагулазой 2+. Подготовьте микропрепараты, нанеся 3 мл агара с толуидиновым синим дезоксирибонуклеиновой кислотой на поверхность каждого предметного стекла. Когда агар затвердеет, вырежьте лунки диаметром 2 мм (10-12 на предметное стекло) в агаре и удалите агаровую пробку путем аспирации. Добавьте около 0,01 мл нагретого образца (15 минут на кипящей водяной бане) бульонных культур, используемых для теста на коагулазу, в лунку на подготовленном предметном стекле. Инкубировать слайды во влажной камере 4 часа при 35-37°С.Появление ярко-розового ореола, простирающегося не менее чем на 1 мм от периферии лунки, свидетельствует о положительной реакции.
  7. Некоторые типичные характеристики 2 видов стафилококков и микрококков, которые могут помочь в их идентификации, показаны в таблице 1.

Таблица 1. Типичные характеристики S . золотистый , S . эпидермис и микрококки (а)

Характеристика С . золотистый С . эпидермис Микрококки
Каталазная активность + + +
Производство коагулазы +
Производство термонуклеазы +
Чувствительность к лизостафину + +
Анаэробное использование глюкозы + +
маннит +
a +, Большинство (90% и более) штаммов являются положительными; — большинство (90% и более) штаммов отрицательны.

Метод наиболее вероятного числа для Staphylococcus spp.

Метод наиболее вероятного числа (MPN) (2) рекомендуется для рутинного наблюдения за продуктами, в которых небольшое количество S . Ожидается, что aureus и в продуктах питания будет содержаться большая популяция конкурирующих видов.

  1. Оборудование и материалы. Те же, что и для метода прямого подсчета на чашках, описанного выше.
  2. Среды и реагенты — те же, что и для метода прямого подсчета на чашках, описанного выше.Дополнительно: Триптиказный (триптический) соевый бульон (ТСБ), содержащий 10 % NaCl и 1 % пирувата натрия (М154а).
  3. Подготовка пробы. То же, что и для метода прямого подсчета, описанного выше.
  4. Определение MPN

    Инокулировать 3 пробирки TSB, содержащие 10 % NaCl и 1 % пирувата натрия (B, выше), порциями по 1 мл десятичных разведений каждого образца. Максимальное разведение должно давать отрицательную конечную точку. Инкубируйте пробирки 48 ± 2 ч при 35-37°C. С помощью петли диаметром 3 мм перенесите по 1 петле из каждой пробирки, в которой наблюдается рост (помутнение), на чашку со средой Бэрда-Паркера с должным образом высушенной поверхностью.Перемешайте пробирки на вортексе перед нанесением штрихов, если рост виден только на дне или по бокам пробирок. Высейте инокулят штрихом, чтобы получить изолированные колонии. Инкубируйте планшеты 48 ч при 35-37°С. Из каждой чашки, в которой наблюдается рост, перенесите по крайней мере 1 колонию, предположительно S . aureus в бульон BHI (см. D и E метода прямого подсчета на чашке выше). Продолжить процедуру идентификации и подтверждения S . aureus (E и F, прямой подсчет на чашках, выше). Отчет S . aureus /г в виде НЧЧ/г согласно таблицам в Приложении 2, Определение НЧЧ.


Каталожные номера

  1. АОАС ИНТЕРНЕШНЛ. 1995. Официальные методы анализа, 16-е изд., сек. 975,55. AOAC INTERNATIONAL, Арлингтон, Вирджиния.
  2. АОАС ИНТЕРНЕШНЛ. 1995. Официальные методы анализа, 16-е изд., сек. 987.09. AOAC INTERNATIONAL, Арлингтон, Вирджиния.
  3. Беннет, Р.В., М. Йетерян, В. Смит, К.М. Коулз, М. Сассаман и Ф.Д. Макклюр. 1986 год. Staphylococcus aureus Идентификационные характеристики и энтеротоксигенность. J. Food Sci. 51 :1337-1339.
  4. Спербер, В.Х. и С.Р. Татини. 1975. Интерпретация пробирочного теста на коагулазу для идентификации Staphylococcus aureus . Заяв. микробиол. 29 :502-505.

Гипертекст Источник: Bacteriological Analytical Manual, 8th Edition, Revision A, 1998. Chapter 12.

Что такое золотистый стафилококк?

Staphylococcus aureus — это тип бактерий. Он окрашивается по Граму положительно и представляет собой неподвижные маленькие круглые или неподвижные кокки. Встречается в виноградоподобных (стафило-) гроздьях. Вот почему его называют стафилококком.

На кого влияет Staphylococcus aureus?

Стафилококк является одной из пяти наиболее частых причин инфекций после травм или операций. Ежегодно им страдают около 500 000 пациентов в американских больницах.В медицинской литературе он обозначается аббревиатурой « S. aureus » или «золотистый стафилококк». S. aureus был обнаружен в Абердине, Шотландия, в 1880 году хирургом сэром Александром Огстоном в гное после хирургических абсцессов.

Бактериальные клетки бактерий (Staphylococcus aureus), которые являются одним из возбудителей мастита у молочных коров. Его большая капсула защищает организм от атаки иммунной защиты коровы. Увеличение в 50 000 раз. Изображение предоставлено: arsusda.gov

Стафилококковые Семейство

Staphylococcus aureus принадлежит к семейству Staphylococceae. Поражает все известные виды млекопитающих, включая человека. Кроме того, благодаря своей способности воздействовать на широкий круг видов, S. aureus может легко передаваться от одного вида к другому. Это включает передачу между людьми и животными.

Передача

Staphylococcus aureus

S. aureus может часто встречаться в окружающей среде. S. aureus передается воздушно-капельным или аэрозольным путем. Когда инфицированный человек кашляет или чихает, он выделяет множество мелких капель слюны, которые остаются взвешенными в воздухе.Они содержат бактерии и могут заразить других.

Другим распространенным способом передачи является прямой контакт с предметами, зараженными бактериями, или через укусы инфицированных людей или животных. Приблизительно 30% здоровых людей носят S. aureus в носу, задней части горла и на коже.

Клинические проявления инфекции

Около трети здоровых людей носят эту бактерию в носу, глотке и на коже.У нормального здорового и иммунокомпетентного человека колонизация S. aureus кожи, желудочно-кишечного тракта или носоглотки не приводит к каким-либо симптомам или заболеваниям.

Когда S. aureus выделяют из абсцесса, фурункула или другого кожного поражения, это обычно происходит из-за его вторичной инвазии в рану, а не из-за первичной причины заболевания. S. aureus можно аналогичным образом выделить из абсцессов, абсцессов молочной железы или мастита, дерматита или кожных инфекций и инфекций половых путей.

S. aureus в этом отношении считается классическим оппортунистом, поскольку он использует поврежденную кожу или другие места проникновения, чтобы вызвать инфекцию.

У животных и людей с ослабленным иммунитетом или иммунодефицитом эти бактерии могут быть опасными для жизни. Это может привести к гнойным (абсцедирующим) инфекциям кожи, глаз и половых путей.

Что вызывает

S. aureus ?

Из разнообразия проявлений S. aureus может вызывать:

  • Незначительные кожные инфекции, такие как прыщи, импетиго и т. д.
  • Может вызывать фурункулы (фурункулы), флегмоны, фолликулиты, карбункулы
  • Является причиной синдрома ошпаренной кожи и абсцессов
  • Может привести к легочным инфекциям или пневмонии
  • Мозговые инфекции или менингит
  • Инфекции костей или остеомиелит
  • Сердечные инфекции или эндокардит
  • Генерализованные угрожающие жизни инфекции крови или синдром токсического шока (СТШ), бактериемия и септицемия

Диагностика

Присутствие С.aureus в культуре обычно незначителен, поскольку эта бактерия обычно присутствует на коже, носу и глотке многих людей и животных. Микроорганизм легко культивируется из носоглотки или кожи или путем посева подозрительных поражений.

На культуре бактериальные колонии имеют характерный блестящий, непрозрачный цвет от желтого до белого цвета на кровяном агаре.

Дополнительное чтение

Среда для выявления золотистого стафилококка

Золотистый стафилококк часто является частью флоры нашей кожи, но также является причиной широкого спектра заболеваний.Текущие исследования сообщают о значительном увеличении количества устойчивых к метициллину золотистых стафилококков (MRSA) за последние годы.

Стафилококки могут передаваться воздушно-капельным путем и могут встречаться как у животных, так и у людей, в сточных водах, воде, молоке или пищевых продуктах, а также на поверхностях окружающей среды или оборудовании для пищевых продуктов. Это по-прежнему одна из пяти наиболее частых причин внутрибольничных инфекций, часто вызывающая послеоперационные раневые инфекции. Следовательно, это вызывает серьезную озабоченность в больницах, особенно в отношении MRSA, устойчивого к метициллину Staphylococcus aureus.

Staphylococcus aureus — это инвазивный патоген, который может вызывать заболевание почти в любой ткани или органе человеческого тела, в первую очередь у ослабленных людей. Стафилококковые инфекции лечили с помощью пенициллина, но с годами этот возбудитель выработал устойчивость к пенициллину за счет выработки пенициллиназы. Следующим препаратом выбора был метициллин, так как он не расщепляется пенициллиназой. Хотя метициллин очень эффективен при лечении большинства инфекций Staphylococcus , некоторые штаммы выработали устойчивость к метициллину за счет продукции пенициллин-связывающего белка и больше не могут быть уничтожены этим антибиотиком.Эти устойчивые бактерии называются устойчивыми к метициллину Staphylococcus aureus (MRSA) 1 . Пациенты с повреждениями кожи из-за ран, постоянных катетеров или ожогов имеют высокий риск развития инфекции MRSA 2 . Распространение инфекции MRSA можно в значительной степени контролировать, соблюдая личную гигиену после контакта с человеком, инфицированным MRSA 1 .

Сегодня существует множество инновационных решений для обнаружения MRSA. Мы решительно поддерживаем микробиологов с помощью селективного хромогенного агара HiCrome MeReSa для обнаружения MRSA в клинических изолятах и ​​других образцах.Запатентованная хромогенная смесь, включенная в среду, специально расщепляется S. aureus с образованием голубовато-зеленых колоний на этой среде, и ее можно четко отличить от других видов. Среду делают селективной в отношении MRSA путем добавления метициллина.

Идентификация Staphylococcus aureus: ДНКаза и агар с маннитоловой солью повышают эффективность пробирочного теста на коагулазу | Annals of Clinical Microbiology and Antimicrobials

Анализ на коагулазу — единственный наиболее надежный метод выявления Staphylococcus aureus [9].Выработку коагулазы можно обнаружить с помощью теста на коагулазу на предметном стекле (SCT) или теста на коагулазу в пробирке (TCT). Скользящая коагулаза обнаруживает связанную коагулазу (также называемую «фактором слипания») [9], которая непосредственно реагирует с фибриногеном в плазме, вызывая быструю агглютинацию клеток. Отрицательные изоляты после ТСК требуют подтверждения с помощью превосходной ТСТ, поскольку штаммы с дефицитом фактора агрегации обычно продуцируют свободную коагулазу. Трубчатая коагулаза обнаруживает секретируемую внеклеточную свободную коагулазу, которая реагирует с веществом в плазме, называемым «фактором, реагирующим на коагулазу» (CRF), с образованием комплекса, который, в свою очередь, реагирует с фибриногеном с образованием фибрина (сгустка) [9].Штаммы коагулазоположительных стафилококков животных были выделены из клинических образцов человека, однако некоторые изоляты животных стафилококков также ферментируют маннит [13]. В этом исследовании оценивалась эффективность ТСТ, ДНКазы и MSA, фенотипических методов, обычно используемых для идентификации Staphylococcus aureus .

Обнаружение

Staphylococcus aureus с помощью доступных фенотипических тестов

ПЦР-амплификация гена nuc , который использовался в качестве исходного теста, выявила 32 Staphylococcus aureus из 60 стафилококковых изолятов, см. таблицу2.Из 32 nuc -положительных изолятов Staphylococcus aureus MSA выявил наибольшее количество изолятов (30 из 32, 94%), в то время как TCT (человеческая и овечья плазма соответственно) выявила 29 и 27 из 32 изолятов (91%). и 84% соответственно), табл. 2. ДНКаза выявила наименьшее количество изолятов (24 из 32, 75%).

Таблица 2. Идентификация S. aureus с помощью обычных тестов в сравнении с ПЦР-обнаружением nuc гена , подразумевая, что некоторые изоляты могут быть ошибочно идентифицированы TCT как единственный тест.Коагулазоотрицательные штаммы Staphylococcus aureus , вероятно, могут представлять собой изоляты MRSA, о которых сообщается, что они слабо или отрицательно реагируют на TCT [17], или редкие штаммы Staphylococcus aureus , которые, как сообщается, являются коагулазоотрицательными [9]. Два изолята Staphylococcus aureus (6%) также были отрицательными по MSA. Shittu и соавт. также сообщили о маннитол-отрицательном Staphylococcus aureus , устойчивом к метициллину [15]. Кроме того, восемь из 32 nuc -положительных изолятов Staphylococcus aureus были отрицательными по ДНКазе (25%).Rao et al сообщили о ДНКазо-отрицательном Staphylococcus aureus , но без объяснения этих результатов [18]. Шесть стафилококков, отличных от nuc -подтвержденных изолятов Staphylococcus aureus , образовывали желтые колонии на MSA, и аналогичные результаты были получены другими исследователями [19-24]. Другой редкой находкой в ​​этом исследовании был изолят, который был положительным по ДНКазе, но отрицательным по MSA и отрицательным по коагулазе в пробирке (т. е. не- Staphylococcus aureus ).Мы предполагаем, что этот изолят мог быть Staphylococcus schleiferi subsp. coagulans , который согласно Национальному стандартному методу также является ДНКазо-положительным [9].

Отдельные фенотипические тесты неэффективны для идентификации

Staphylococcus aureus

Мы использовали чувствительность и специфичность для оценки эффективности отдельных тестов при обнаружении Staphylococcus aureus . Рост на MSA был наиболее чувствительным (чувствительность 94%), за ним следовал TCT (человеческая и овечья плазма, чувствительность 91% и 81% соответственно), а ДНКазный тест был наименее чувствительным (чувствительность 75%).И наоборот, тест на ДНКазу был наиболее специфичным (специфичность 96%), за ним следовал MSA (специфичность 79%), в то время как TCT (плазма человека и овечья плазма) был наименее специфичным (11% и 7% соответственно), таблица 3. В целом, из отдельных исследованных тестов рост на MSA был лучшим при идентификации Staphylococcus aureus (чувствительность 94% и специфичность 79%). Наши результаты немного отличаются от результатов Han et al , которые сообщили о чувствительности и специфичности 76,5% и 99,6% соответственно для MSA [25].D’Souza и др. также сообщили о чувствительности 71%, что немного ниже, чем у нас [26]. Высокая чувствительность MSA при обнаружении Staphylococcus aureus может быть обусловлена ​​его способностью выделять патогенные Staphylococcus aureus [27], дифференцируя коагулазоотрицательные стафилококки от коагулазоположительных стафилококков.

Таблица 3 Чувствительность, специфичность, отрицательный/положительный результат Прогностические значения для обычных диагностических тестов для клинических S. aureus

Для пробирочной коагулазы плазма человека была более чувствительна, чем плазма овцы (91% по сравнению счувствительность 81%), подразумевая, что использование овечьей плазмы с TCT может выявить больше ложноотрицательных изолятов. Таким образом, в этих условиях маловероятно, что овечья плазма заменит человеческую плазму для рутинных ТКИ. Наши данные согласуются с предыдущими выводами, в которых другие исследователи сообщали о чувствительности 94–100% [28–30]. Однако в этом исследовании чувствительность к плазме человека и овцы была выше, чем в других условиях, где сообщалось о таких низких значениях, как 54,5% (плазма человека) и 45,5% (плазма овцы) [28].Таким образом, при тестах на коагулазу эффективность плазмы зависит от настроек, и выбор плазмы может повлиять на эффективность теста. Кроме того, на эффективность теста влияет использование ЭДТА или цитрата в качестве антикоагулянта. Примечательно, что цитрат влияет на коагулазные реакции энтерококков только там, где он используется [16], но не влияет на организмы, продуцирующие коагулазу, такие как Staphylococcus aureus [16].

Тест ДНКазы имел чувствительность 75% и специфичность 96%, что сравнимо с другими исследованиями, в которых сообщалось о чувствительности 75% и специфичности 100% [31].В этом исследовании тест на ДНКазу был наиболее специфичным из всех тестов и имел наименьшее количество ложноположительных изолятов (был только один ложноположительный результат). Это согласовывалось с другими отчетами, в которых сообщалось, что тест на ДНКазу превосходит ТСТ [28, 31]. Рост на MSA также был высокоспецифичным (специфичность 79%), тогда как наименее специфичным оказался тест на коагулазу в пробирке (плазма человека и овцы, специфичность 11% и 7% соответственно).

Напротив, в других исследованиях сообщалось о высокой специфичности (93.6%) для плазмы человека и овцы с ТСТ [32]. Низкая специфичность в нашем исследовании может быть частично связана с неспецифическим обнаружением других коагулазоположительных стафилококков, таких как Staphylococcus schleiferi подвидов coagulans , Staphylococcus delphini, Staphylococcus intermedius и Staphylococcus hyicus . Staphylococcus delphini и Staphylococcus intermedius являются редкими клиническими изолятами, в то время как Staphylococcus hyicu s является неопределенным (с распространенностью от 11% до 89% [17]).Распространенность этих изолятов может быть высокой в ​​определенных условиях. Хотя МСК и ДНКаза обладали высокой специфичностью и чувствительностью в качестве отдельных тестов, их использование в рутинной идентификации Staphylococcus aureus ограничено их способностью обнаруживать другие бактериальные изоляты [14] и в основном используются во время начальных скринингов [6]. Действительно, CoNS с положительной реакцией на маннитол ( Staphylococcus caprae, S. hemolyticus и S. saprophyticus ) были зарегистрированы в Нигерии и Японии [13, 14].Таким образом, в определенных условиях, при индивидуальном использовании для выявления Staphylococcus aureus , общих фенотипических тестов может быть недостаточно; некоторые изоляты будут ошибочно идентифицированы либо как Staphylococcus aureus , либо как CoNS.

Комбинация MSA и ДНКазы улучшает тест на коагулазу в пробирке

Затем мы оценили чувствительность и специфичность комбинаций тестов (т.е. MSA/DNase/TCT) при обнаружении Staphylococcus aureus с целью повышения эффективности TCT.Мы достигли абсолютной специфичности (100%) при обнаружении Staphylococcus aureus с помощью тестовых комбинаций, за исключением комбинации ДНКазы/МСА (специфичность 92%). И наоборот, чувствительность тестовых комбинаций различалась: МСК/ДНКаза/ТХТ (плазма человека) была наиболее чувствительной (чувствительность 75%), а МСК/ДНКаза/ТХТ (овечья плазма) была наименее чувствительной (чувствительность 25%). таблица 3.

Комбинация МСК/ДНКаза обеспечивает специфичность и чувствительность 92% и 96% соответственно, и эта комбинация будет предпочтительной для идентификации Staphylococcus aureus .Однако, поскольку оба теста не специфичны для Staphylococcus aureus и могут обнаруживать другие бактериальные изоляты, двойная комбинация может использоваться только для улучшения TCT. Хотя другие тестовые комбинации — МСК/ДНКаза/ТХТ (плазма человека) и МСА/ТХТ (плазма человека) имели специфичность 100%, они имели различную чувствительность (75% и 33% соответственно). В этой линии комбинация MSA/ДНКаза/TCT (человеческая плазма) лучше идентифицирует Staphylococcus aureus (100% специфичность, 75% чувствительность), чем комбинация MSA/TCT (человеческая плазма) (100% специфичность, 33% чувствительность).Точно так же комбинации ДНКаза/ТХТ (овечья плазма) и МСА/ТХТ (овечья плазма) и МСК/ДНКаза/ТХТ (овечья плазма) обладали абсолютной специфичностью (100%), но с разной чувствительностью (50%, 25% и 67%). , соответственно).

Таким образом, эффективность пробирочной коагулазы можно повысить за счет одновременного тестирования, включающего как ДНКазу, так и МСК. Для более высокой чувствительности и специфичности последующая идентификация Staphylococcus aureus может начинаться с MSA, ДНКазы, а затем TCT. Следует отметить, что улучшенная специфичность TCT существенно не изменила первоначально наблюдаемую высокую чувствительность.Настоятельно рекомендуется использовать MSA перед TCTs/DNase из-за отрицательных по фактору слипания и положительных по коагулазе стафилококков, которые все чаще выявляются при инфекциях человека. Эти изоляты также продуцируют термостабильную ДНКазу и могут быть ошибочно идентифицированы как Staphylococcus aureus . Однако эти штаммы можно отличить от Staphylococcus aureus по их неспособности продуцировать кислоту из мальтозы, лактозы и маннита. Кроме того, редкие штаммы Staphylococcus aureus могут быть коагулазоотрицательными [9], однако изоляты животных ( S.intermidius, S. hyicus, S. delphini и S. schleiferi subsp. coagulans ) могут быть положительными по трубной коагулазе [9, 33, 34]; дифференциация их также требует роста на MSA.

Прогностические значения

Рост на MSA имел самую высокую отрицательную прогностическую ценность (NPV), за которой следовала ДНКаза, в то время как пробирочная коагулаза имела самую низкую NPV (что не соответствовало первоначально наблюдаемой высокой чувствительности, см. таблицу 3). И наоборот, тестовые комбинации давали абсолютные NPV (100%), за исключением ДНКазы/МСА (NPV 92%), таблица 3.Высокие значения NPV тестовых комбинаций, особенно тех, которые включают TCT, показывают, что тестовые комбинации можно надежно использовать для рутинной идентификации Staphylococcus aureus . ДНКаза имела самую высокую положительную прогностическую ценность (PPV), за ней следовала MSA (96% и 83% соответственно). Наоборот, одна пробирочная коагулаза приводила к средним значениям PPV (54% и 50%), см. таблицу 3. Интересно, что тестовые комбинации приводили к высоким значениям PPV, при этом те, которые включали ДНКазу, имели самые высокие значения PPV (95%), см. таблицу 3.Таким образом, как и для NPV, специфичность TCT может быть улучшена за счет одновременной идентификации изолятов с помощью ДНКазы и MSA.

Таким образом, идеальная идентификация клинических изолятов Staphylococcus aureus требует ряда тестов. Инфекции, вызванные Staphylococcus aureus , встречаются чаще, чем инфекции, вызванные другими бактериями, особенно в условиях высокой распространенности ВИЧ/СПИДа [35–37]. Это гарантирует правильную идентификацию изолятов для достижения лучших результатов лечения.Поскольку представлены варианты повышения чувствительности и специфичности, эти данные улучшат идентификацию Staphylococcal aureus в клинических образцах.

Рекомендации

Для рутинной идентификации Staphylococcus aureus из клинических образцов мы рекомендуем одновременное использование всех трех тестов (начиная с роста на MSA, ДНКазу и пробирочную коагулазу) в условиях, когда плазма кролика или лошади недоступна. Рекомендуется скрининг плазмы других видов (например, кролика, козы, свиньи и крупного рогатого скота), которая может быть дешевле и безопаснее и, как сообщается, более эффективна, чем плазма человека с TCT.Кроме того, рекомендуется генотипирование клинических изолятов стафилококка для выделения изолятов CoNS и для определения распространенности редкого Staphylococcus aureus и изолятов животных в образцах человека в Уганде.

Стафилококк может скрываться глубоко в носу, показало исследование | Центр новостей

Shutterstock.com

Новое исследование показывает, что бактерии стафилококка могут скрываться глубоко в носу.

Ученые из Медицинской школы Стэнфордского университета обнаружили, что ранее не замечаемые участки глубоко внутри носа могут быть резервуарами для Staphylococcus aureus , основной бактериальной причины заболевания.

Результаты их исследования были опубликованы 11 декабря в Cell Host & Microbe .

Исследователи из Стэнфорда также обнаружили обратную зависимость между присутствием S. aureus в этих местах и ​​присутствием другого вида бактерий, Corynebacterium pseudodiphtheriticum , что позволяет предположить, что эти два организма конкурируют друг с другом и что C. pseudodiphtheriticum — или какой-то молекулярный продукт, который он выделяет, — может оказаться полезным в противодействии S.инфекции золотистого стафилококка .

«Около одной трети всех людей являются постоянными носителями S. aureus , еще одна треть является случайными носителями, а оставшаяся треть, по-видимому, вообще не является переносчиком S. aureus », — сказал Дэвид Релман, доктор медицины, Томас К. и Джоан М. Мериган Профессор и профессор медицины, микробиологии и иммунологии. Релман, который также является руководителем отдела инфекционных заболеваний в системе здравоохранения Пало-Альто по делам ветеранов, был старшим автором исследования.Ведущим автором был Милинг Ян, доктор философии, аспирант лаборатории Релмана на момент проведения экспериментов.

«Давно известно, что нос является основным резервуаром S. aureus », — сказал Релман. Насекомых также много на коже, особенно в подмышечных впадинах и в паху. Однако в подавляющем большинстве случаев это не приносит никакого вреда. (Если это приносит какую-то пользу, никто еще не понял, что это такое, добавил Релман.)

Но если кожа повреждена, например, в результате раны, медицинского разреза или установки катетера, S.aureus может попасть в кровоток и вызвать серьезные и даже опасные для жизни проблемы, такие как сепсис, пневмония или инфекция сердечных клапанов. Почти половина всех штаммов S. aureus устойчивы к семейству антибиотиков, включающему метициллин. В 2011 г. только в Соединенных Штатах произошло более 80 000 тяжелых метициллин-резистентных инфекций S. aureus , а также более 11 000 связанных с ними смертей, наряду с гораздо большим числом менее тяжелых инфекций.

«Не каждый, кто является носителем S. aureus , заболевает, — сказал Релман. «Когда они гуляют по улицам и в остальном здоровы, попытки избавить их от их S. aureus не нужны, а иногда даже бесполезны. Но как только носитель попадает в больницу с сопутствующим заболеванием, ослабленной иммунной системой или высокой вероятностью проведения процедур с проникновением через кожу, носительство S. aureus становится серьезной проблемой».

Строгие и несколько утомительные схемы элиминации S.aureus , обитающий на коже человека или в его носу, существует, но, как правило, проходит несколько недель или месяцев, прежде чем бактерия вновь заселит тех, кто восприимчив. Новое исследование предлагает возможную причину, почему это так.

Ученые набрали 12 здоровых испытуемых и доставили их в Стэнфордскую клинику отоларингологии, носа и горла, которой руководит соавтор исследования Питер Хванг, доктор медицинских наук, профессор отоларингологии. Используя специальные инструменты, позволяющие им направлять крошечные мазки в точные места внутри носа, они взяли образцы из трех конкретных областей.Первым местом — и, безусловно, наиболее хорошо изученным, потому что оно гораздо более доступно — была передняя часть носа, относительно сухой участок ткани, похожий на кожу, расположенный возле ноздри. Вторым был средний носовой ход — более теплая, влажная, выделяющая слизь складка, расположенная примерно на полпути вверх по носовой полости. И третье — клиновидно-решетчатое углубление, расположенное глубоко внутри полости у нёба носа и, как и средний носовой ход, теплое, влажное и слизистое.

Дэвид Релман

Исследователи обнаружили, что присутствие или отсутствие S.aureus на одном носовом участке обычно коррелирует с его присутствием или отсутствием на двух других. Вывод: если передняя часть носа человека является переносчиком бактерий, то, вероятно, и верхние области слизистой оболочки тоже. Возможно, именно поэтому попытки изгнать S. aureus так часто оказывались недолговечными. Сосредоточение усилий в основном на бактериях в переднем отделе носа, как это делают современные процедуры деколонизации, оставляет нетронутыми более глубокие резервуары.

Команда Релмана узнала еще три вещи.Во-первых, относительная численность S. aureus была обратно пропорциональна численности другого вида бактерий, C. pseudodiphtheriticum . Когда один присутствовал на высоких уровнях, другой присутствовал на низких уровнях или отсутствовал. Один из соавторов исследования, Сунье Памп, доктор философии, научный сотрудник лаборатории Релмана, поместил два вида бактерий на чашку с агаром для дальнейшего изучения этой взаимосвязи и обнаружил, что C. pseudodiphtheriticum сильно блокирует рост S. .золотистый .

Исследователи подозревают, что что-то, что C. pseudodiphtheticum производит и выделяет — возможно, белок или, возможно, небольшую молекулу — ответственно за неспособность развиваться S. aureus . По словам Пэмпа, если бы такое вещество удалось идентифицировать, оно могло бы дать ключ к разработке новых соединений для предотвращения или лечения инфекций, вызванных S. aureus .

Во-вторых, микробные сообщества у пациентов с S. aureus отличались от таковых у пациентов без них.Это может означать, что S. aureus изменяет окружающую среду, чтобы сделать его более или менее гостеприимным для различных других микробов. Или это может означать, что различные микробные сообщества более или менее благоприятны для колонизации S. aureus . В последнем случае можно предсказать, основываясь на их резидентных носовых микробах, какие пациенты, скорее всего, будут подвержены высокому риску инфекции S. aureus , даже если они в настоящее время не являются ее носителями. и контролировать и относиться к ним соответственно.Те пациенты, у которых был обнаружен более низкий риск, могли быть избавлены от таких процедур.

В-третьих, в среднем носовом проходе и клиновидно-решетчатом углублении — двух более глубоких и влажных участках слизистой оболочки носа — микробные сообщества были сходны друг с другом, но совершенно отличались от сообщества, населяющего более доступный и лучше изученный наружный участок, переднюю часть носа. нарис. Это говорит о том, что в настоящее время рутинные методы взятия образцов из носовой полости для микробиологического исследования могут давать искаженные результаты.

Другими соавторами исследования были аспирант Джулия Фукуяма; отоларинголог-резидент До-Ён, доктор медицины; и профессор статистики Сьюзен Холмс, доктор философии. Исследование финансировалось премией Национального института здравоохранения «Пионер» (грант DP1OD000964), благотворительным фондом Дорис Дьюк и благотворительным фондом Томаса К.

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован.