Циста
Цисты инфузорий образуются при неблагоприятных условиях, т. е. при резкой смене состава сточной воды (поступление промышленных стоко,в) или при недостатке питательных веществ.[ …]
Цисты имеют двойную оболочку — наружную соединительнотканную, образованную тканями хозяина, и внутреннюю — тонкую, образованную секретом цитогенных клеток паразита. Внутри цисты находится в согнутом состоянии метацеркарий (см. рис. 68). Живая личинка периодически совершает маятникообразные или «переливающиеся» движения. Мертвые личинки неподвижны, с нечеткой внутренней структурой, экскреторный пузырь разрушен, депигментирован, целостность оболочек цисты нарушена.[ …]
Покоящиеся цисты известны у многих форм. У Oicomonas они состоят из части плазмы материнской клетки. У некоторых форм покоя Monas имеется особая пора.[ …]
Известно, что образование цист является эффективным средством защиты от действия неблагоприятных факторов окружающей среды. Установлено, что образование цист также зависит от температуры воды [60].
В пределах каждой цисты половые клетки находятся на одинаковой стадии разви-тия, так как являются потомками одной сперматогониальной клетки (Jungersen, 1889; Friess, 1933; Henderson, 1962; Сакун, Буцкая, 1963; Stanley et al, 1965; Ahsan, 1966a) и образуют как бы единый клан, семью.[ …]
Размножается гидрурус одножгутиковыми зооспорами тетраэдрической формы (рис. 73, 2). Цисты у этого вида шаровидные, с экваториальным утолщением оболочки в виде полукольца (рис. 73, 3). Они возникают обычно в конечных разветвлениях таллома.[ …]
Одним из важнейших условий существования инфузорий является способность защищаться оболочкой цисты (инцистироваться) ст вредных воздействий внешней среды. В таком виде животные могут оставаться в живом состоянии длительное время. Например, цисты инфузории Gastrostyla переносят двухлетнее пребывание при полном отсутствии влаги. Цисты могут переноситься ветром, птицами, водными организмами и т. п. Попадая во влажное место, они эксцистируются; вышедшее из цисты животное переходит к деятельному образу жизни.
Слева — гаметофит о мужскими ([ …]
При вскрытии обращают внимание на наличие цестод и поражения печени плероцеркоидами. Извлеченные из цист личинки в инвазионной стадии достигают длины 15—17 мм, как и взрослые гельминты; сколекс имеет две пары крючьев. У сигов цисты находят в мышцах.[ …]
Основным методом диагностики глюгеозов является микроскопическое исследование содержимого цист или мелких кусочков пораженных органов на нативных препаратах и при окраске по Романовскому — Гимзе.[ …]
При осмотре скелетной мускулатуры обращают внимание на цвет, консистенцию, наличие кровоизлияний, отека, припухлостей, цист паразитов, степень прикрепления к костям.[ …]
Патогенным представителем этого типа является балантидий (Balantidium coli), вызывающий у человека балантидиоз. Человек инвазируется цистами баланти-дия в результате приема зараженной им пищи и воды, а также пользования загрязненными предметами.[ …]
Патологоанатомические изменения. У слабозараженной рыбы в мышечной ткани и иногда под серозной оболочкой печени обнаруживают цисты плероцеркоидов.
При высокой интенсивности инвазии у рыб много плероцеркоидов находят в скелетной мускулатуре и под капсулой печени. Личинки располагаются преимущественно в дорсальной трети тела, между спинным и жировым плавниками, глубоко в мышцах ближе к позвоночнику (Б. ЫеЬаштки).[ …]
Размножается хромулина путем продольного деления, чаще всего в пальмеллевидном состоянии. В конце вегетации могут возникать кремнистые, тонкостенные цисты с гладкой поверхностью и длинной, слегка расширенной у отверстия, шейкой (рис. 68, 2). После периода покоя циста прорастает, из нее выходят 1 — 2—4 зооспоры (рис. 68, 3). Выйдя из оболочки цисты, зооспора становится самостоятельной вегетативной клеткой. В течение лета деление и образование зооспор может повторяться многократно. А так как хромулина является прекрасным кормом для ракообразных, то увеличение ее численности способствует улучшению кормовой базы для многих гидробионтов водоема.[ …]
У сиговых рыб плероцеркоиды локализуются в межмышечной ткани и в большей степени в мышцах спины, вокруг которых разрастается соединительнотканная капсула.
Эти цисты сдавливают расположенные вблизи мышечные пучки, вызывая деструкцию ткани.[ …]
Коловратки — аэробы, чувствительны к недостатку кислорода. Предельно высокой температурой для них является 50° С. При неблагоприятных условиях животное образует цисты (при этом голова и нога втягиваются в панцирь). Коловратки чувствительны к изменению активной реакции среды. Они являются показательными организмами, характеризующими работу очистных сооружений в аэробных условиях.[ …]
Дизентерийная амеба является паразитом человека. Для нее характерен сложный цикл развития. Человек заражается в результате заглатывания с загрязненными продуктами цист этого организма. Болезнь, вызываемая этим паразитом, носит название амебиаза.[ …]
Род Monas отличается от очень сходного по строению рода Oicomonas главным образом наличием сопутствующего жгутика. Отдельные виды Monas и хризомонады имеют очень сходную форму цист покоя. Клетки с нежной оболочкой, переменной формы, свободноплавающие или прикреплены нежными нитями, отходящими от заднего конца, в большинстве одиночные, реже временно объединены в колонии.
Жгутики в выемке переднего конца, с базальным зерном и рнзопластом. Передний конец тела иногда с утолщением (ротовая полоса). Глазное пятно имеется или отсутствует. Одна сократительная вакуоля. Внутри имеются жировые капли, иногда лейкозин. Бесполое размножение делением, половое— путем копуляции двух особей. Известны цисты покоя (Lemm., 1914). У Monas при большом увеличении можно обнаружить стигму. По мнению Прингсгейма (Pringsheim, 1963), глазное пятно является органоидом чувствительности (Sinnesorgan), который регулирует направление движения. Стигма находится рядом с основанием жгутика, в передней части тела. Приигсгейм (1963) исследовал пять штаммов Monas и всегда находил маленькую красную точку, которая не имела ничего общего с пластидами. Прингсгейм указывает на маленькие жировые капли в клетках упомянутого вида. Они склонны к накапливанию сахаристых веществ в задней части тела. Возможно, это полисахариды, физиологически мало изученные вещества. Мало известно и о дыхании, Еыделении энзимов.
Сердце извлекают из сердечной полости, помещают на стекло, вскрывают, добавляют немного физиологического раствора и раздавливают другим стеклом.[ …]
Вскрывают рыб в следующем порядке. Жабры обнажают удалением жаберной крышки ножницами. Отмечают степень ослизне-ния, изменения их окраски и рисунка, наличие кровоизлияний, очагов некроза, цист паразитов и т. д. Ножницами отрезают 2—3 дуги и просматривают их под лупой. Иногда готовят препараты отдельных лепестков на предметном стекле. Накрыв их покровным стеклом, определяют толщину складок и патологические изменения.[ …]
У некоторых грибов рода бластокладиелла таллом состоит из простого вздутия, от которого отходят многочисленные ризоиды (рис. 11). Это вздутие у спорофита преобразуется затем или в зооспорангий, или в цисту, аугаметофита образует гаметы. У большинства же видов таллом представлен более или менее удлиненной клеткой с хорошо развитыми ризоидами в основании. На конце ее или образуется один крупный тонкостенный зооспорангий, отделяющийся перегородкой от остальной части таллома, или внутри тонкостенного вместилища формируется циста, одетая толстой двухслойной оболочкой (рис.
Золотистые водоросли — очень древняя группа водорослей, возникшая от каких-то первичных амебоидных организмов. По набору пигментов, составу запасных веществ и наличию кремния в оболочках вегетативных клеток и цист золотистые водоросли обнаруживают сходство с диатомовыми, желто-зелеными и отчасти бурыми водорослями. Есть основание полагать, что именно золотистые водоросли в свое время дали начало диатомовым водорослям.[ …]
Вода не должна содержать болезнетворных бактерий и вирусов. Водный путь распространения характерен для возбудителей холеры, брюшного тифа, паратифов и лептоспирозов, бруцеллеза. С водой в организм ( человека могут попасть цисты дизентерийной амебы, яйца аскарид и др.[ …]
В гистологических срезах выявляются гранулемы в разных стадиях развития.
В начальных стадиях болезни гранулемы состоят из гистиоцитарно-фибробластических элементов и эпителиоидных клеток. Затем они инкапсулируются вместе с цистами грибов и в центре подвергаются некрозу (рис. 45). Капсула гранулем окрашивается реактивом Шиффа в красный цвет (РАБ-положительна), а ядра плазмодиев гриба — в синий. Разроет многочисленных гранулем приводит к атрофии и склерозу паренхимы органов.[ …]
Простейшие способны к раздражимости, т. е. к ответным реакциям на воздействие различных факторов. В частности, одной из важнейших форм раздражимости простейших является способность к превращению их вегетативных форм при неблагоприятных условиях в цисты, что называют инцистированием. Благодаря инцис-тированию простейшие способны выживать в самых неблагоприятных условиях (высыхание среды, появление в ней вредных веществ, изменение температуры и др.) в течение времени, измеряемого годами. При попадании в благоприятные условия цисты развиваются в активные вегетативные формы (трофозоиты).
Восстановленный активный ил состоял из зооглейных скоплений бактерий, среди которых были обнаружены: корненожки— в значительном количестве Euglypha sp., Trinema sp., единично Arcella sp. и Centropyxis sp.; инфузории — единично Vor-ticella sp., большие колонии Opercularia glomerata и порядочно цист; коловратки — в значительном количестве Philodina roseola; в небольшом количестве были встречены малоподвижные клещи. Концентрация активного ила в этот период была 3 г/л при зольности 8,2%.[ …]
Так, древесные и кустарниковые породы Якутии не вымерзают при -70°С, в Антарктиде при такой же температуре обитают лишайники, отдельные виды водорослей, ногохвостки, пингвины. В лабораторных экспериментах семена, споры и пыльца растений, коловратки, нематоды, цисты простейших после обезвоживания переносят температуры, близкие к абсолютному нулю, до —271,16°С, возвращаясь после этого к активной жизни.
Приостановка всех жизненных процессов организма называется анабиозом. Из состояния анабиоза живые организмы возвращаются к нормальной жизни при условии, если не была нарушена структура макромолекул в их клетках.[ …]
Вскрывают брюшную полость дугообразным разрезом от анального отверстия к основанию левого грудного плавника. Боковую стенку отворачивают пинцетом и осматривают брюшную полость, обращая внимание на наличие ремнецов, нематод, а под серозными покровами и в брыжейке — на цисты и капсулы, содержащие личиночные стадии ленточных и круглых червей, миксоспоридий и др.[ …]
Яйца геогельминтов могут сохранять жизнеспособность в почве от 3 до 10 лет, биогельминтов — до 1 года, цисты кишечных патогенных простейших — от нескольких дней до 3—6 месяцев.[ …]
Размножение происходит только в амебоидной фазе. Эктоплазма хорошо дифференцирована; эндоплазма гранулированная и содержит одну сократительную вакуолю, пищеварительные вакуоли и одно ядро пузырьковидного типа, видимого и у живой клетки.
В стадии амебы диаметр тела варьирует у видов между 6 — 30 мк (обычно 10—20 мк). Цисты сферические, оболочка имеет структуру или гладкая. Род Naegleria является мезо-, обычно до поли-сапробного и существует активно в настоях, почве, фекалиях и т. п., питаясь бактериями.[ …]
Тело состоит из тонкозернистой прозрачной цитоплазмы; в полностью растянутом состоянии достигают в длину 3 мм и больше. Клетки многоядерные, от 8—20 до нескольких сотен ядер; ядра диаметром 5—6 мк, с крупной эндосомой (ка-риосомой), деление ядер одновременное. Цисты многоядерные, образуются посредством локальной конденсации протоплазмы.[ …]
Рекомендуемые минимальные концентрации бактерицидного остаточного хлора приведены в табл. 7.1. Эти данные основаны на экспериментах, проведенных при температурах между 20° и 25°С. после 10-минутного контакта со свободным хлором и 60-минутного контакта со связанным хлором. Минимальные содержания остаточного хлора, необходимые для разрушения цист и инактивации вирусов, значительно выше; эффективным антивирусным агентом считается только недиссоции-рованная хлорноватистая кислота.
Поэтому, хотя концентрации остаточного хлора, приведенные в табл. 7.1, обычно считаются вполне приемлемыми, вода, забираемая из загрязненных рек и озер, обычно обрабатывается более высокими дозами хлора. Например, может быть использовано предварительное хлорирование (до точки перегиба) для образования и сохранения свободного остаточного хлора в обрабатываемой воде во время прохождения ею всех стадий процесса очистки.[ …]
В. Chrysophyta. Этот тип включает три больших группы водорослей, никогда не образующих крахмал. Пластиды желто-зелено-го, желтого или коричневого цвета; запасным продуктом являются лейкозин или жир и масла. Эти водоросли образуют либо кремнистый скелет (диатомеи), либо оболочку, иногда покрытую кремнистыми чешуйками (Chrysophyceae), или образуют кремнистые цисты (форма защиты) (Chrysophyceae и Xanthophyceae).[ …]
С пораженных органов собирают паразитов и консервируют разными способами в зависимости от их систематического положения и размеров. Для определения простейших — инфузорий, жгутиконосцев — готовят мазки соскобов из жабр и кожных покровов на предметных стеклах, подсушивают их на воздухе и хранят в бумаге или фиксируют жидкостью Шаудина 15—20 мин.
Из цист миксо-споридий также готовят мазки на предметных стеклах, которые сразу заключают в глицерин-желатину.[ …]
Патогенез и симптомы болезни. Взрослые цестоды, паразитируя в кишечнике рыб, хитиновыми крючками травмируют слизистую оболочку, вызывают воспаление, кровоизлияния и отеки. Нередко просвет кишечника закрывается гельминтами. На печени вокруг плероцеркоидов образуется капсула из соединительной ткани светло-серого цвета, величиной с горошину и более. В цистах обнаруживают одну, а иногда 2—3 личинки. Цисты, сросшиеся с окружающей тканью, сдавливают ткань печени, нарушая ее функцию.[ …]
Озон, являясь мощным бактерицидным и вирулицидным агентом, имеет ряд преимуществ перед другими дезинфектантами. Во-первых, быстрота воздействия окислителя: инактивация бактерий производится в 300 раз быстрее, чем хлором. Во-вторых, широкая область использования: озон одинаково эффективно ¡разрушает бактерии и вирусы, грубы и простейшие, атакует споровые бактерии и цисты простейших.
Наконец, озон проявляет почти одинаковую активность в широком интервале pH и температуры.[ …]
Большие, длиной 300—600 мк, разнообразные по форме амебы; псевдоподии цилиндрические, лопастные, с закругленными концами. Цитоплазма содержит многочисленные кристаллические тела, разной формы, размером до 4,5 мк, грубозернистая. Ядро дисковидной формы, крупное, диаметр 45 мк, толщина 15 мк, с большим количеством хроматиновых масс; сократительная вакуоля одна или несколько, крупная. Цисты крупные, шаровидной формы, с большим количеством посторонних частичек, приклеенных к внешней оболочке. Движение быстрое. Вид сборный.[ …]
Фекальное загрязнение воды ухудшает ее качество, а патогенные микроорганизмы, попадающие в воду с выделениями теплокровных животных, могут явиться причиной роста заболеваемости кишечными инфекциями. Сальмонеллы часто обнаруживаются в сточных водах, в воде рек, ирригационных систем и колодцев и в приливной морской воде. Другие патогенные микроорганизмы реже обнаруживаются в воде.
Возможно, это является следствием того, что лабораторные методы их выделения и идентификации пока что несовершенны.[ …]
Протозойные болезни вызывают возбудители, относящиеся к подцарству простейшие (Protozoa). Простейшие отличаются тем, что их тело морфологически соответствует одной клетке, а физиологически они представляют собой целостный организм со всеми присущими ему функциями. Их жизненный цикл простой и состоит из чередования полового процесса и вегетативного пути размножения. Многие простейшие могут образовывать цисты покоя и в таком виде переживать неблагоприятное время.[ …]
Клетки чаще вытянуты, на переднем конце широкие, сзади суженные, длина 10—15 мк. Псевдоподии широколопастные, короткие, гиалиновые. На конце псевдоподий спереди и сзади почти всегда обнаруживаются очень тонкие плазматические шипы; сзади при движении хорошо заметна хвостовая кисточка. Ядро с кариосомой хорошо видимо у живых клеток. Движение состоит из медленного перетекания. Цисты с маленькими бугорками на внешней оболочке.
Питаются бактериями.[ …]
В Ковровском районе Владимирской области Т.А. Краснолобова /1958, 1962/ проводила исследования биологии трематоды Prost— hogonimus pellucidus (= P. cuneatus), возбудителя заболевания яйцеводов домашних птиц — простогонимоза. Из 11 исследованных видов стрекоз метал ер кари ями этой трематоды были заражены: Cor— dulia aenea, Libellula quadrimaculata, Leucorrhinia rubicunda, Somatochlora metalliaca. Выявленные у стрекоз метацеркарии были представлены тремя типами: в двухслойной, однослойной цисте и свободные (неинцистированные). Автор дала описание всех трех типов метацеркарий. В дальнейшем Т.А. Краснолобовой /1968/ установлено, что на территории СССР существуют два вида из рода Prosthogonimus — Р. cuneatus и P. ovatus, а все другие названия являются лишь их синонимами.[ …]
Определение микробиологических показателей, установленных стандартами для питьевой и другой воды, связано с необходимостью проведения их в лабораторных условиях. Вместе с тем косвенные признаки микробиологического загрязнения можно обнаружить по наличию видимых следов разложения органических остатков, трупов животных, нечистот, впадения в водоем сточных канав и др.
Фекальные загрязнения обычно содержат множество бактерий, среди них — патогенные цисты простейших паразитов, яйца гельминтов, микроорганизмы. Индикаторным видом микроорганизмов, указывающим на фекальные загрязнения, принято считать бактерии группы кишечной палочки (БГКП), типичным представителем которых являются E.coli (сами БГКП нетоксичны для теплокровных). Микробиологический показатель качества воды предусматривает определенное число БГКП в единице объема воды (не более 3 в 1 л) — так называемый коли-индекс.[ …]
При делении, которое аналогично делению рода Naegleria, в ядре ясно выступают большие полярные «шапочки». У большинства видов Vahlkampfia эктоплазма дифференцируется менее отчетливо, чем у представителей рода Hartmari-nella, с которыми они имеют большое внешнее сходство. Движутся с помощью одной широкой псевдоподии. Цисты одноядерные с двойными оболочками. Широко распространены в различных почвах.[ …]
Активные клетки с многочисленными эктоплазматическими псевдоподиями: лопастными или короткоконическими овальными, никогда не заостренными на конце; диаметр 20—50 мк.
Цитоплазма блестящая, очень прозрачная. Одно ядро; под ядерной оболочкой находятся гранулы периферического слоя хроматина, расположенные почти всегда кольцеобразно. Делящееся ядро с двумя большими полярными «шапочками» и экваториальной пластинкой. Эндоплазма содержит несокра-щающуюся вакуолю, реже — 2. Цисты образуют характерную двойную оболочку и имеют вид пяти- или многоугольной звезды. Движения медленные.[ …]
Форма клеток изменчивая, с несколькими псевдоподиями, 15— 30×8—14 мк, моноподиальная, лимакского типа. Движения исключительно быстрые; выпускает полушаровидные псевдоподии в разных местах на периферии тела. Цитоплазма очень жидкая, эктоплазма хорошо дифференцируется; эндоплазма с многочисленными преломляющими свет гранулами; в старых культурах эндоплазма сильно вакуолизованная. Сократительная вакуоля крупная. Ядро хорошо видимо, кариосома относительно крупная. Под ядерной мембраной просматривается кольцевая зона эктохроматиновых гранул. Циста сферическая, диаметром 10 мк, обернута желатиновым слоем.
[ …]
Наиболее часто встречающаяся форма тела — овальная. Движение лимаксное (слизнеподобное), но может выпускать во все стороны широкие и короткие псевдоподии. Цитоплазма тонкозернистая, в состоянии покоя отсутствует заметный раздел между эндо- и эктоплазмой, который возникает только при движении. Сократительная вакуоля в задней части, в эндоплазме. Размер ядра колеблется между 2—4 мк. Ядро круглое, с большой эндосомой в центральной части (1—2,5 мк), которая видима в живой клетке. Цисты шаровидной формы, 7,2—12,0 мк, ядро в цисте лежит эксцентрично; оболочка двойная.[ …]
Из динофитов постоянно присутствует в пробах вид Ceratium hirundineïla f. gracile со средней биомассой 0.263 г/м3, достигая высоких значений биомассы дважды: в июле 0.468 г/м3 (рис. 30) и в третьей декаде сентября 0.402 г/м3. Минимальные значения биомассы динофито-вых наблюдались в мае и составили 0.0005 г/м3. Биомасса возрастала и составила в третьей декаде сентября 0.581 г/м3 при средней численности 1.005 млн кл./м3 — вклад в численность и биомассу вносили виды Peridinium cinctum (средняя биомасса 0.175 г/м3) и P. volzii (биомасса в сентябре 0.193 г/м3). Константный вид Ceratium hirundineïla встречался в третьей декаде сентября в стадии цист и в виде обломков панциря.[ …]
Играют большую роль в деструкции труд-иоразрушаемых органических веществ, таких как целлюлоза. Клетки миксобактерии по форме бывают палочковидные, веретенообразные, эллипсоидальные или шаровидные. Причем в пределах одного вида встречаются все эти формы клеток на разных стадиях развития. Примером может служить целлюлозоразрушающая бактерия Мухососсиэ НикЫпзош, у которой в молодой культуре вегетативные клетки удлиненные с заостренными концами, часто имеют Б-образную форму. Со временем эта форма клеток изменяется в палочковидную. Палочки уже не имеют заостренных концов, у них концы округлые. Постепенно палочки укорачиваются, уплотняются, превращаясь в шарообразные формы, которые называются цистами. У Мухо-соссиэ Ни1сЫпзот цисты одноклеточные, но у других миксо-бактерий встречаются цисты, состоящие из нескольких вегетативных клеток. Цисты миксобактерий объединяются в довольно крупные «плодовые тела» овальной или грушевидной формы; иногда они приобретают настолько причудливую форму, что напоминают скорее маленькое растение, чем бактерию. Однако встречаются и такие миксобактерии, которые не образуют плодовых тел. Их принадлежность к миксобактериям устанавливается по другим признакам.[ …]
У свободноплавающих форм жгуты отходят от переднего конца; плавательный (моторный) жгут немного длиннее, волочащийся — в 2 раза длиннее тела. В цитоплазме жгутики отходят от двух отдельных базальных гранул, которые располагаются тесно вместе, на поверхности ядра. Амебоидная форма образует короткие пальцевидные псевдоподии, при этом жгуты всегда сохраняются. Единстве нная сократительная вакуоля находится в заднем конце тела. Ядро хорошо заметно у живых клеток, в центре, ближе к переднему концу. Способ плавания жгутиконосцев этого вида весьма характерен и обычно является отличительной особенностью организма в смешанной культуре (Сандон, 1927). Жгутики прямые и почти жесткие, движения быстрые, с вибраторными колебаниями, благодаря чему тело движется прыжками. Цисты шаровидные или эллипсоидные, диаметром 12X15 мк. Внешняя оболочка толстая, отделена от внутренней широким пространством. Обнаружены в черноземах (Гельцер, 1964).[ …]
живые угрозы — Простейшие
Простейшие (Protozoa)
Подцарство простейших (Pгotozoa) включает многочисленные виды одноклеточных организмов, часть которых ведет паразитический образ жизни.
Тело одноклеточных простейших состоит из цитоплазмы, ограниченной наружной мембраной, ядра, органелл, обеспечивающих функции питания, движения, выделения. Простейшие передвигаются с помощью псевдоподий (саркодовые), жгутиков и ундулирующих мембран (жгутиковые), ресничек (ресничные инфузории).
Питание простейших происходит по-разному. Одни заглатывают пищевые частицы клеточным ртом, другие поглощают их при помощи псевдоподий (ложноножек), образующихся в любом участке тела. При этом частица пищи как бы обтекается и оказывается внутри вакуоли в цитоплазме простейшего, где и переваривается (фагоцитоз). У некоторых видов простейших питание происходит и путем всасывания питательных веществ поверхностью тела (пиноцитоз). Пищей служат органические частицы, микроорганизмы и растворенные в окружающей среде питательные вещества.
Простейшие некоторых видов способны инцистироваться, т. е. округляться и покрываться плотной оболочкой. Образовавшиеся цисты более устойчивы к воздействию внешних факторов. При попадании в благоприятные условия простейшие освобождаются из цисты и начинают размножаться. Размножение происходит бесполым (поперечное, продольное и множественное деление) и половым путями. Многие паразитические простейшие размножаются последовательно в нескольких хозяевах. Например, жизненный цикл малярийного плазмодия проходит в теле комара и организме человека.
Класс саркодовые (Sarcodina).
К саркодовым относятся различные виды простейших, встречающихся в морях,. водоемах и почве. Многие виды амеб обитают в организме животных и человека (род Entamoeba). Амебы передвигаются, изменяя форму тела и образуя кратковременные выросты — псевдоподии, или ложноножки (свое наименование амебы получили от греч. amoibe — изменение). Размножение амеб бесполое, путем деления.
Дизентерийная амеба (Eпtamoeba histolytica).
Амеба существует в виде различных форм. Большая вегетативная форма крупнее, размером 20-60 мкм. Цитоплазма разделена на два слоя: наружный (эктоплазма) и внутренний (эндоплазма). Эндоплазма — мелкозернистая блестящая масса, напоминающая мелко истолченное стекло. Эктоплазма имеет вид прозрачной стекловидной массы, которую особенно хорошо видно при образовании ложноножек. Амеба прозрачная, бесцветная, ядро у живой амебы не видно. У погибшей и неподвижной амебы ядро вырисовывается в виде кольцевидного скопления блестящих зерен. Эндоплазма часто содержит от одного до нескольких эритроцитов на разных стадиях переваривания, что очень типично для этой формы амебы. Поэтому ее часто называют гематофагом, или эритрофагом (пожирателем эритроцитов). Отличается от других видов амеб поступательным движением. Под микроскопом видно, как толчкообразно образуется вырост эктоплазмы и в него быстро с завихрением переливается вся эндоплазма. Затем образуется новая ложноножка и опять следует быстрое переливание содержимого амебы. Иногда амеба на несколько мгновений как бы замирает, а затем внезапно вновь начинает характерное передвижение. Обнаруживается большая вегетативная форма в свежевыделенных жидких испражнениях больного острым амебиазом, что с несомненностью подтверждает диагноз.
Тканевая форма — патогенная форма амебы, паразитирующая в ткани слизистой оболочки толстого кишечника и вызывающая специфическое его поражение. Размер 20-25 мкм, строение сходно с предыдущей формой. Обнаруживается на гистологических срезах из пораженных участков стенки кишечника и иногда при распаде язв в жидких испражнениях.
Просветная форма обитает в просвете верхних отделов толстого кишечника и является основной формой существования дизентерийной амебы. Просветные формы могут быть обнаружены в жидких свежевыделенных фекалиях реконвалесцентов или больных хронической амебной дизентерией. У носителей или больных в стадии ремиссии в оформленном или полуоформленном стуле не встречается. Для обнаружения необходимо исследовать фекалии, полученные путем глубоких промываний кишечника, или последние порции фекалий после приема солевого слабительного. Размер 15-20 мкм. В нативном препарате ядро амебы не видно. Цитоплазма содержит бактерии, мелкие вакуоли, но не содержит эритроциты. Движение более слабое, чем у тканевой формы, ложноножки образуются медленнее, размер их также меньше. Разделение на экто- и эндоплазму выражено лишь при образовании ложноножек.
Предцистная форма обычно обнаруживается в полуоформленных испражнениях. Размер 12-20 мкм. По строению напоминает просветную форму, вакуоли отсутствуют, движение замедленное, иногда в цитоплазме видно небольшое количество бактерий. Циста образуется из просветной (предцистной) формы в нижних отделах толстого кишечника. Цисты обнаруживаются в оформленных или полуоформленных испражнениях хронических больных и паразитоносителей. Цисты неподвижны, покрыты оболочкой, бесцветны, прозрачны, имеют округлую форму. Размер 8-15 мкм. В цистах иногда заметны блестящие короткие с закругленными концами палочки — хроматоидные тела (они содержат РНК и протеин). Для утончения видовой принадлежности цисты окрашивают раствором Люголя. При этом хорошо выявляются 4 ядра в виде колечек, что характерно для цисты дизентерийной амебы. В незрелой цисте 1-3 ядра. В виде не резко очерченных желто-коричневых пятен выявляется также гликоген, который может занимать до 2/3 объема цисты. Хроматоидные тела при окраске раствором Люголя не видны. Гликоген и хроматоидные тела в зрелых цистах практически незаметны.
Жизненный цикл. Просветные формы дизентерийной амебы обитают в верхнем отделе толстого кишечника человека, не причиняя ему вреда. Однако при некоторых условиях, превращаясь в патогенные тканевые формы, проникают в стенку кишечника. Просветные формы, пассивно передвигаясь вместе с содержимым кишечника, попадают в его концевые отделы, где неблагоприятные условия (обезвоживание, изменение бактериальной флоры, изменение рН среды и др.) приводят к гибели амеб или превращению их в цисты. Цисты с испражнениями человека выделяются в окружающую среду, где могут длительное время сохраняться. Для человека заразны зрелые четырехядерные цисты. Цисты, попадая в воду, на овощи, руки и пищу (на которую они заносятся, в частности, мухами), различные предметы, например посуду, игрушки, в конце концов заносятся в рот человека. Отсюда они проникают в желудочно-кишечный тракт, где оболочка их растворяется. Каждое ядро делится надвое, образуется восьмиядерная амеба, из которой возникает 8 дочерних. Дизентерийная, или гистологическая, амеба вызывает у человека заболевание амебную дизентерию, или амебиаз. В толстом кишечнике образуются множественные язвы.
Неглерии (род Naegleгia), Акантамебы (род Acanthamoeba), Гартманеллы (род Hartmanella)
Обитают в загрязненной воде, бассейнах со слабохлорированной водой, горячих источниках, влажной ночве, отстойниках, или навозе. Питаются бактериями. Размер амеб в среднем 10 — 20 мкм. Движение медленное, во время которого заметно деление цитоплазмы на экто- н эндоплазму. В последней видны многочисленные вакуоли, пузырьковидное ядро. Неглерии при движении образуют одну длинную широкую ложноножку, увеличиваясь при этом до 30-40 мкм. В воде и спинно-мозговой жидкости могут приобретать жгутиковую форму. Амеба вытягивается или становится овальной, ядро сдвигается в передний конец, на котором образуются два длинных жгутика. Эта форма вновь может стать амебовидной.
Акантамебы и неглерии при движении вытягиваются, расширяясь кпереди с образованием 2-3 пальцевидных ложноножек. Акантамебы обычно покрыты характерными мелкими шиповатыми ложноножками. Жгутиковые формы не образуют. При неблагоприятных условиях образуют цисты округлой формы, бесцветные, с четкой двухконтурной оболочкой, гладкой у неглерий и морщинистой у остальных. В цитоплазме можно заметить от одного до нескольких хроматоидных телец. При окраске по Люголю видно 1 ядро с центрально расположенным ядрышком (кариосомой). Цисты устойчивы к высушиванию, замораживанию и дезинфицирующим веществам.
Выявлены случаи носительства акантамеб и гартманелл здоровыми людьми в носоглотке. Цисты могут распространяться воздушным путем. Свободноживущие амебы заносятся в носоглотку грязными руками из почвы. Амебы, прежде всего неглерии, через слизистую оболочку по ходу обонятельного нерва проникают в головной мозг, где размножаются в сером веществе. Это вызывает тяжелое заболевание человека — первичный амебный менингоэнцефалит. Акантамебы могут поражать носоглотку, легкие, слизистую оболочку желудка, приводить к очаговым изъязвлениям травмированной кожи или роговицы. Неглерии и акантамебы могут обитать в увлажнителях кондиционеров, что ведет к попаданию амебных антигенов в воздух помещений и аллергическому поражению легких.
Класс инфузории (Ciliata)
Для инфузорий характерно наличие множества ресничек, покрывающих тело и служащих оранеллами движения. Размножение бесполое, путем поперечного деления и половое, путем конъюгации — обмена ядрами между двумя особями.
Балантидий (Balantidium coli) (от греч. balantidium\мешoк) — самый крупный представитель паразитических простейших человека. Вегетативная форма вытянутая, чаще яйцеобразная. Длина 30-150 мкм, ширина 30-100 мкм. С помощью многочисленных ресничек балантидии активно двигаются, нередко вращаясь при этом вокруг своей оси. Питаются различными пищевыми частицами, включая бактерии, грибы, форменные элементы крови, для заглатывания которых служит цитостом (клеточный рот). Цитоплазма содержит пищеварительные и две пульсирующие выделительные вакуоли. Ядро (макронуклеус или большое ядро, так как имеется еще и ядрышко. или микронуклеус) у живых представителей иногда видно и без окраски в виде светового пузырька бобовидной формы. При окраске по Гейденгайну оно имеет черный цвет. В фекалиях сохраняются в течение 3 часов. Цисты округлой формы с толстой оболочкой. Размер 50-60 мкм. В растворе Люголя окраска равномерная коричнево-желтая. Цитоплазма цисты однородна.
Жизненный цикл. Балантидии обитают в кишечнике свиней, для которых они малопатогенны. С испражнениями свиней цисты паразита выделяются в окружающую среду, где могут сохраняться несколько недель. Попадая с загрязненной водой или пищей в рот, цисты в толстом кишечнике человека дают начало вегетативной стадии с последующим их размножением, вызывая заболевание — балантидиаз. Человек, больной или носитель, только в редких случаях может быть источником распространения балантидиев, так как у человека цисты образуются редко и в незначительном количестве, а вегетативными стадиями заразиться почти невозможно.
Класс жгутиковые (Flagellate)
Характерным отличием жгутиковых является наличие одного или нескольких жгутиков. В теле жгутиковых у основания жгута имеется особый органоид — кинетопласт, функция которого связана с выработкой энергии для движения жгутика. У некоторых видов один из жгутиков проходит вдоль тела и соединяется с ним тонкой перепонкой, образуя волнообразную (ундулирующую) мембрану. Последняя обеспечивает поступательное движение простейшего. Среди многочисленных видов данного класса для человека имеют наибольшее патогенное значение лейшмании и трипаносомы. Передаются они человеку через кровососущих переносчиков. Другие представители жгутиковых — лямблии — обитают в кишечнике, а различные виды трихомонад — в кишечнике, ротовой полости и мочеполовых путях. Распространены эти простейшие очень широко.
Лейшмании (Leishmania)– внутриклеточные паразиты, вызывающие заболевания – лейшманиозы.
Leishmania tгopica (впервые обнаружены в 1897 г. русским врачом и ученым П. Ф. Воровским), вызывает антропонозный (городской) кожный лейшманиоз;
Leishmania majoг — возбудитель зоонозного (пустынного) кожного лейшманиоза;
Leishmania braziliensis – встречается в Южной Америке и вызывает кожно – слизистый (американский) лейшманиоз;
Leishmania donovani вызывает висцеральный, или внутренний, лейшманиоз (индийский кала — азар), возбудителя этого вида впервые обнаружили в селезенке больных людей Лейшман и Донаван (1900-1903), в честь которых он и получил название;
Leishmania infantum — возбудитель висцерального (средиземноморского) лейшманиоза.
Лейшмании проходят две стадии развития: безжгутиковую и жгутиковую. Безжгутиковая форма овальная, длиной 2-6 мкм. Ядро округлое, занимает до 1/3 клетки. Рядом с ним находится кинетопласт, имеющий вид короткой палочки. При окраске по Романовскому цитоплазма голубая или голубовато-сиреневая, ядро — красно-фиолетовое, кинетопласт окрашивается более интенсивно, чем ядро. Встречаются в теле позвоночного хозяина (человек, собака, грызуны), паразитируют внутриклеточно в макрофагах, клетках костного мозга, селезенки, печени. В одной пораженной клетке может содержаться до нескольких десятков лейшманий. Размножаются простым делением. Жгутиковая форма подвижная, жгутик длиной 15-20 мкм. Тело удлинённое веретенообразное, длиной до 10-20 мкм. Деление продольное. Развиваются в теле безпозвоночного хозяина — переносчика (москита) и в культуре на питательных средах.
Жизненный цикл. Лейшманиозы входят в группу трансмиссивных инфекций, переносчиками служат мелкие кровососущие насекомые — москиты. Москиты заражаются при кровососании на больных людях или животных. В первые же сутки заглоченные безжгутиковые паразиты превращаются в подвижные жгутиковые формы, начинают размножаться и спустя 6-8 дней скапливаются в глотке москита. При укусе человека или животного зараженным москитом подвижные лейшмании из его глотки проникают в ранку и затем внедряются в клетки кожи или внутренних органов в зависимости от вида лейшманий. Здесь происходит их превращение в безжгутиковые формы.
Трипаносомы – одноклеточные паразиты, вызывающие многие заболевания у животных и людей – трипоносомозы.
Trypanosoma gamblense и Trypanosoma rhodesiense вызывают африканский трипаносомоз (сонную болезнь) и Trypanosoma cruzi — возбудитель американского трипаносомоза (болезнь Шагаса). Trypanosoma equiperdum — вызывает случную болезнь лошадей.
Строение. Тело трипаиосам (от греч. trypanon — бурав и soma- тело) продолговатое узкое, имеет жгутики и ундулирующую мембрану. На спаде паразитемии они становятся короткими, широкими с укороченным жгутом или даже без него. Длина тела трипаносом 17-28 мкм, в средней части находится овальное ядро.
Жизненный цикл. Первая часть жизненного цикла проходит в пищеварительном канале мухи цеце, вторая — в организме хозяина. Trypanosoma equiperdum локализуется в капиллярах слизистой оболочки половых органов животных
У позвоночных хозяев (человек, домашние и дикие животные) трипаносомы находятся в крови, откуда при укусах попадают в желудок переносчика. Переносчики возбудителей африканского трипаносомоза — кровососущие мухи рода Glossina, или мухи цеце, американского трипаносомоза — триатомовые клопы. Возбудитель случной болезни передается половым путем или механическим.
Лямблии (Lamblia intestinalis).
Лямблии существуют в виде вегетативной формы (трофозоит) и способны образовывать цисты. Вегетативная форма активная, подвижная, грушевидной формы. Передний конец тела закруглен, задний — заострен. Длина 9-18 мкм. В передней части тела находится присасывательный диск в виде углубления. Имеет 2 ядра, 4 пары жгутиков. Жгутики, проходя частично в цитоплазме, образуют два хорошо видимых при окраске продольных пучка. Движение характерное, паразит все время переворачивается боком за счет вращательного движения вокруг продольной оси. В препарате при комнатной температуре лямблии быстро погибают. Пищу всасывают всей поверхностью тела. Размножаются путем продольного деления. Цисты — неподвижные формы лямблии. Длина 10-14 мкм. Форма овальная. Оболочка сравнительно толстая, хорошо очерчена, часто в значительной своей части как бы отслоена от тела самой цисты. Этот признак помогает отличить цисту от других сходных образований. В растворе Люголя окрашиваются в желтовато-коричневый цвет. Окрашивание позволяет видеть в зрелой цисте 4 ядра.
Лямблии обитают в верхнем отделе тонкого кишечника. С помощью присасывательного диска прикрепляются к ворсинкам. В желчном пузыре лямблии не живут, так как желчь на них действует губительно. Обычно вегетативные формы с испражнениями не выделяются, однако при поносах их можно обнаружить в свежевыделенных жидких фекалиях. Лямблии, попадая в нижние отделы кишечника, где условия для них неблагоприятные, превращаются в цисты, которые и выделяются обычно с испражнениями. Цисты хорошо сохраняются в окружающей среде, в зависимости от влажности и температуры воздуха — до месяца. При высушивании погибают очень быстро. Заражение может произойти через загрязненные руки, игрушки, пищу и воду. Цисты, попадая в кишечник, превращаются там в вегетативные формы. Одна циста образует две вегетативные формы. Вызывают заболевание — лямблиоз.
Трихомонада – это одноклеточный простейший организм, ведущий паразитический образ жизни. Для человеческого организма самыми характерными обитателями считаются представители трёх групп: кишечная трихомонада (Trichomonas hominis), влагалищная трихомонада (Trichomonas vagimalis) и ротовая трихомонада (Trichomonas tenax).
Кишечная трихомонада паразитирует в толстом отделе кишечнике человека. У неё грушевидная форма тела, длина которого достигает 8 -20 мкм. От его переднего конца отходят пять жгутиков. По всей длине одной из сторон тела микроорганизма располагается волнообразная перепонка, которую называют ундулирующей мембраной. Это своеобразный органоид движения паразита. По её наружному краю проходит тончайшая нить, свободный конец которой представлен в виде жгутика. Двигается простейшее очень активно и беспорядочно, осуществляя поступательные толчкообразные движения, а также оно способно вращаться вокруг собственной оси. Цитоплазматическая мембрана трихомонады заметна только при замедлении движения или при полной остановке простейшего. Она отмечается в виде волнообразного сокращения на одной из сторон тела. Трихомонада не образует цист, и размножается путём деления. Этот возбудитель обитает в толстом кишечнике человека и обнаруживается в очень больших количествах в жидких испражнениях. Как правило, кишечная трихомонада не является агрессивным микроорганизмом, однако, при ослаблении иммунитета может вызвать серьёзные заболевания кишечника, что наиболее характерно для маленьких детей.
Влагалищная трихомонада — этот микроорганизм, как и все другие представители рода трихомонад, грушевидной формы, достигает в длину 14 – 30 мкм. Передняя часть его тела оснащена ундулирующей мембраной которая доходит до средины её тела и четырьмя жгутиками. Клеточное ядро расположено ближе к переднему краю. Осевая нить (акростиль), проходя сквозь всё тело, в виде шипа выступает на заднем его конце. В цитоплазме простейшего имеются вакуоли. Влагалищная трихомонада не образует цист и очень быстро гибнет во внешней среде. Является восприимчивым к факторам внешней среды, поэтому вне организма человека может жить короткое время. В других органах данный паразит не выживает, поэтому экстрагенитальный трихомониаз возникает крайне редко.
Ротовая трихомонада по своему строению очень схожа с кишечной. Её ундулирующая мембрана не доходит до конца тела простейшего. Длина микроорганизма – 6 – 13 мкм, не образует цист. В настоящее время не существует доказательств её агрессивного воздействия на организм человека, однако, эти простейшие иногда встречаются у пациентов, страдающих заболеваниями ротовой полости, а также в мокроте больных с бронхо-легочными патологиями.
Класс Споровики (Sporozoa)
У споровиков в процессе полового цикла размножения при слиянии мужской и женской половых клеток образуется спора (циста), в которой формируются спорозоиты. Затем различными путями спорозоиты передаются от одного хозяина к другому.
подкласс Кокцидии (Coccidia). Кокцидии (от лат. coccus- круглый) — внутриклеточные паразиты, в основном позвоночных и редко беспозвоночных животных.
Эймерии (Eimeriа). Семейсво Eimeriidae, подсемейство Eimeriinae – имеют сложную биологию развития, болезни, вызываемые этим подсемейством строго специфичны и называются эймериозами (кокцидиозами). Эймериевые паразитируют только у позвоночных животных, преимущественно у млекопитающих и птиц.
Eimeriа bovis, E. zurni, E. ellipsoidalis и др. Морфологические виды различаются величиной, формой и цветом ооцист, числом полярных гранул и др. Каждый вид развивается только в определенных отрезках кишечника. Вызывают эймериоз крупного рогатого скота.
Eimeriа tenella, E. necatrix, E. maxima, E. acevulina, E. hagani – вызывают эймериоз кур. Кроме кур болеют гуси, утки и индейки. Эймерии могут заносится в птичники людьми на обуви и предметах ухода, грызунами, дикими птицами. Ооцисты обладают высокой устойчивостью к дезсредствам и низким температурам. Они гибнут при высушивании и чувствительны к действию высокой температуры.
Eimeriа stiedae, E.perforans, E. media, E. magna и др. – вызывают эймериоз кроликов.
Изоспоры (Isospora). Семейсво Eimeriidae, подсемейство Isosporinae. Изоспоры внутриклеточные паразиты позвоночных, неспецифичны и могут вызывать не только изоспорозы, но и токсоплазмоз, саркоцистоз и пр. по родовому названию, когда их эндогенные стадии развиваются в промежуточном хозяине.
Цистоизоспоры (Cystoisospora). Семейсво Eimeriidae. Род Cystoisospora. Цистоизоспоры проходят сложный цикл развития и вызывают заболевания собак и кошек. Инвазионными ооцистами цистоспор могут заражаться грызуны – мыши, крысы, хомяки. В их организме формируются гипнозоиты или монозоитные цисты, которые могут сохраняться в них длительное время (до 23 мес.). При поедании инвазированных грызунов кошки и собаки заболевают цистоизоспорозом. Cystoisospora canis, C. ohioenensis – паразитирует у собак, C. felis, C. revolta – у кошек. Цистоизоспоры во внешней среде сохраняют жизнеспособность месяцами, они устойчивы к воздействию дезинфицирующих средств и низких температур. Высокая репродуктивная способность способствует обсеменению цистоизоспорами обширных территорий. Мест обитания животных, что приводит к перезаражению как основных, так и промежуточных хозяев.
Криптоспоры (Cryptosporidium). Семейсво Eimeriidae. Род Cryptosporidium. — паразиты млекопитающих, птиц, рептилий и рыб, вызывают криптоспоридиоз. У млекопитающих паразитирует 2 вида: C. muris и C. parvum, которая в основном патогенна для человека. У рыб паразитирует — C. nasorum, у рептилий — C. serpentis, у птиц — C. baileyi и C. meleagrides. Ооцисты криптоспоридий круглой или овальной формы 2,5х3,5 мкм и 5х7 мкм содержат 4 свободно лежащих спорозоита и остаточное тело. Различают ооцисты с тонкими и толстыми стенками. В процессе развития ооцисты с тонкими оболочками выделяются из организма не полностью часть их может оставаться в организме в местах паразитирования и снова заражать его, т.е. приводить к аутоинвазии. Ооцисты устойчивы к воздействию неблагоприятных факторов, а также имеют высокую репродуктивную способность. Переносчиками могут быть другие животные, особенно грызуны и насекомые.
Токсоплазма (Toxoplasma gondii), относится к семейству Eimeriidae, подсемейству Isosporinae. Внутриклеточный паразит, распространенный по всему миру, возбудитель токсоплазмоза. Он имеет полулунную, дугообразную или овальную или округлую форму 4*8 х 2-4 мкм. В мазках красится по Романовскому ядро в рубиновый, а протоплазма в голубой цвет. Проходит две фазы развития: бесполое – в организме животных, птиц и человека, и половое – в организме кошки и все представителей семейства кошачьих. Во внешнюю среду кошки выделяют токсоплазмы в виде ооцист, которые спорулируют, и в них формируется 2 споры по 4 спорозоита в каждой. Промежуточные хозяева заражаются при заглатывании таких ооцист. В кишечнике из ооцист освобождаются спорозоиты и расселяются в клетках различных органов и тканей, в которых размножаются путем почкования и образуют цисты. Они содержат большое число мерозоитов. Окончательные хозяева заражаются при поедании мяса зараженных промежуточных хозяев. В кишечнике кошек проходит половая фаза развития, которая завершается выделением во внешнюю среду ооцист, снова заглатываемых промежуточными хозяевами. Ооцисты сохраняются в почве до полутора лет.
Саркоцисты (Sarcocystis) (от греч. sark- мясо ) — простейшие, вызывающие заболевание – саркоцистоз. Человек — окончательный хозяин двух видов саркоцист: Sarcocystis hominis и Sarcocystis suihominis; и промежуточный хозяин Sarcocystis lindemanni.
Половое размножение саркоцист (их прежнее наименование — саркоспоридии) совершается в ворсинках слизистой оболочки тонкого кишечника человека. При этом образуются и выделяются с испражнениями зрелые одиночные спороцисты, иногда они спаренные в общей сморщенной оболочке ооцисты (ооциста — предшествующая стадия, развивающаяся в эпителии кишечника). Спороцисты овальные, размером 12-16 Х 9-10 мкм, содержат по 4 зрелых спорозоита. Хорошо сохраняются в окружающей среде. После заглатывания промежуточными хозяевами (для S. Homiпis — крупный рогатый скот, для S. Suihomiпis — свиньи) спорозоиты в кишечнике освобождаются из спороцисты и проникают через кровь в поперечнополосатые мышцы. Здесь происходит бесполый цикл размножения, что и приводит к образованию в мышцах саркоцист. Саркоцисты располагаются продольно в мышечных волокнах. Имеют вид удлиненных, иногда до 5 см, образований, покрыты тонкой оболочкой, от которой отходят внутренние перегородки. Образующиеся благодаря этому камеры заполнены зернистой массой — большим числом трофозоитов. Трофозоиты длиной в несколько микрометров, передний конец их заострен, ядро расположено ближе к заднему концу тела. По Романовскому цитоплазма окрашивается в бледно-голубой или светло-сиреневый цвета, ядро — в фиолетово-красный. Человек заражается, употребляя в пищу недостаточно термически обработанную говядину или свинину, содержащие саркоцисты. В некоторых случаях саркоцисты (Sarcocystis lindemanni) развиваются и в мышцах человека, заражение предположительно происходит от мелких грызунов.
Изоспоры (lsospora belli) — вид кокцидии, который паразитирует исключительно в человеческом организме. Развитие кокцидии, бесполое и половое, происходит в эпителиальных клетках слизистой оболочки тонкого кишечника. С испражнениями зараженного человека выделяются ооцисты — бесцветные прозрачные образования длиной 20-30 мкм, с двухконтурной оболочкой. Форма ооцист овальная, несколько вытянутая с одним зауженным концом. В свежевыделенных испражнениях ооцисты незрелые и содержат в центре шарообразную зародышевую массу. При комнатной температуре в течение 2—3 дней этот шар делится поперечно, разделившиеся части покрываются оболочкой — образуются две спороцисты длиной 12-14 мкм. В каждой из них образуются 4 спорозоита вытянутой серповидной формы. Ядро в спорозоите имеет вид светлого пузырька. В окружающей среде ооцисты сохраняются несколько месяцев. При заглатывании человеком зрелых ооцист с загрязненными водой, пищей, в кишечнике из них освобождаются спорозоиты, внедряются в клетки стенок кишечника и начинают развиваться. Кокцидии, развиваясь в клетках эпителия, разрушают их. Возникает воспаление, иногда образуются язвы и эрозии слизистой оболочки тонкого кишечника. Развивается заболевание изоспороз.
Подкласс Кровяные споровики (Haemosporina) — специализированные внутриклеточные паразиты крови млекопитающих, птиц и рептилий. Они поражают эритроциты крови.
Пироплазмы (Piroplasmina), семейство Plasmodoiae, род Plasmodium
Малярийные плазмодии
Plasmodium vivax- возбудитель трехдневной малярии;
Plasmodium malariae — возбудитель четырехдневной малярии;
Plasmodium falciparum – возбудитель тропической малярии;
Plasmodium ovale – возбудитель малярии овале.
Малярийные плазмодии проходят две стадии развития — бесполую (шизогонию, от греч. schizen- делиться) в организме человека и половую (спорогонию) в организме переносчика — самок малярийных комаров рода Anopheles. При кровососании зараженный малярийный комар вместе со слюной вводит в ранку спорозоиты — веретенообразные, чуть изогнутые образования длиной 11-15 мкм. С кровью они попадают в клетки печени, где развиваются и делятся (тканевая, или экзоэритроцитарная шизогония). Образовавшиеся в результате деления в клетках печени молодые паразиты (мерозоиты) поступают в кровь и проникают в эритроциты — наступает эритроцитарная шизогония. С наступлением эритроцитарной шизогонии развитие Р. falciparum и Р. Malaгiae в печени прекращается. Однако у Р. vivax и Р. ovale часть спорозоитов сохраняется в печени («дремлют») и в дальнейшем, активизируясь, вызывает отдаленные рецидивы болезни (А. Я. Лысенко и др.). Мерозоиты, проникшие в эритроциты, превращаются в трофозоиты (растущие формы), а последние — в шизонты (делящиеся формы). Шизонты в процессе деления дают новое поколение мерозоитов, которые в свою очередь проникают в другие эритроциты. Указанный цикл развития в эритроцитах составляет 72 ч для Р. malariae или 48 ч для остальных видов. В некоторых эритроцитах развиваются мужские и женские половые формы — гамонты. Они завершают свое развитие, только попав в организм комара с кровью в течение 7-45 сут в зависимости от температуры окружающего воздуха. В результате в слюнных железах малярийного комара скапливаются спорозоиты, и такой комар становится способным вновь заражать людей.
отряд Пироплазмиды (Piroplasmida)
семейство Бабезии (Babesidae)
Babesia bovis — паразит крови крупного рогатого скота, возбудитель бабезиоза крупного рогатого скота и спорадических заболеваний людей. Локализуется в эритроцитах, иногда его обнаруживают в лейкоцитах и плазме крови в виде кольцевидных, овальных, амебовидных, грушевидных и парногрушевидных форм. Чаще встречаются овальные и кольцевидные формы. В эритроцитах располагаются по периферии. Грушевидные формы меньше радиуса эритроцита, соединяются острым концом под тупым углом, в них по одной хроматиновой массе, они как бы «сидят верхом» на эритроците. Их величина 1,5-2,4 х 0,75-1,12 мкм. Поражаемость эритроцитов в пик инвазии достигает 57% и более. Способны длительно паразитировать в крови. Переносчики – иксодовые клещи, сезон заражения — весенне-летний.
Babesia microti и Babesia divergens передются через укусы клещей почти всех родов семейства Ixodidae (Dermacentor, Rhipicephalus, Hyalomma). Передача происходит через слюну во время питания клеща. Естественным резервуаром возбудителей в природе служат больные бабезиозом животные. Промежуточные резервуары — мелкие грызуны. Являются возбудителем бабезиоза человека.
Piroplasma bigeminum – паразит крови, вызывает остро протекающую трансмиссивную болезнь – пироплазмоз крупного рогатого скота, которому наиболее восприимчивы коровы, буйволы и зебу. Локализуется в эритроцитах, овальной, кольцевидной, амебовидной формы. Чаще всего встречаются парные грушевидные паразиты больше радиуса эритроцита, располагающиеся в центре, соединенные под острым углом, содержащие несколько глыбок хроматина. Основными переносчиками являются клещи Boophylus calcaratus.
Piroplasma ovis – морфологически идентичны с Piroplasma bigeminum, но отличаются своей специфичностью. Вызывает пироплазмоз и бабезиоз мелкого рогатого скота. Основными переносчиками являются клещи рода Rhipicephalus и Haemaphysallus. Экспериментально доказана возможность переноса инвазии клещами рода Ixodes и Dermacentor.
Piroplasma caballi – возбудитель пироплазмоза лошадей. Локализуется в эритроцитах, в виде овальных, кольцевидных, амебовидных и парногрушевидных форм величиной больше радиуса эритроцита, имеющих по несколько хроматиновых масс, расположенных центрально, заостренные концы соединены под острым углом. Переносчиками являются имагинальные стадии иксодовых клещей родов Dermacentor и Hyalomma.
Piroplasma canis — возбудитель пироплазмоза собак, которым болеют собаки, лисы, енотовидные собаки и другие пушные звери. Локализуется в эритроцитах, в виде овальных, кольцевидных, амебовидных и парногрушевидных форм величиной больше радиуса эритроцита, содержат по несколько хроматиновых масс, расположены центрально, соединены под острым углом. Переносчиками являются имагинальные стадии иксодовых клещей родов Dermacentor и Rhipicephalus. Возбудитель передается трансфазно, заражение происходит имагинальными стадиями.
Francaiella colchica, Fr. Occidenlis, Fr. Caucasica – возбудители франсаиеллеза крупного рогатого скота. Овальной, кольцевидной, амебовидной и парногрушевидной формы. Располагаются в центре эритроцита, равны радиусу эритроцита, имеют одну хроматиновую массу, соединены между собой под тупым углом. Заражение эритроцитов достигает 8%. Основные переносчики – иксодовые клещи Boophylus calcaratus и Ixodes ricinus. Передается трансовариально.
Семейство Theileriidae
Theileria annulata, Th. Mutans, Th. Sergenti – возбудители тейлериоза крупного рогатого скота. Тейлерии имеют сложный цикл развития. Клещи-переносчики рода Hyalomma и Haemaphysallus при сосании крови инокулируют в организм животного мелкие одноярусные спорозоиты. Они проникают в лимфатические узлы и паренхиматозные органы, где проходят дальнейшее развитие. Из них формируются многоядерные клетки или макромеронты, гранатные тела, макрошизонты, каховские шары и микрошизонты. Последние в процессе деления образуют микромерозоиты, которые проникают в кровь и заражают эритроциты, где дальнейшее их размножение происходит путем простого бинарного деления и почкования. Эритроцитарные формы продолжают свое развитие в клещах-переносчиках, куда они попадают с кровью. Источником инвазии являются больные или переболевшие животные. Клещи-переносчики воспринимают инвазию в фазе личинки или нимфа, а заражают животных в фазе нимфы или имаго в пределах одной генерации.
Theileria ovis, Th. recondita – возбудители тейлериоза овец и коз. Развитие тейлерий происходит в лимфатических узлах, селезенке и печени, где формируютмя макромеронты и микромеронты, микромерозоиты, которые проникают в эритроциты, где обнаруживаются в виде овальных, кольцевидных. Палочковидных и запятовидных форм с одной хроматиновой массой. Их цитоплазма окрашена в голубой цвет, а ядро в рубиновый цвет. При поражении Th. Ovic зараженность эритроцитов может достигать 95% , при заражении Th. recondita – до 2% эритроцитов. Переносчики – клещи имагинальной стадии Haemaphysallus sulcate и Alveonasus lahorensis (кошарный клещ) в фазе нимфы.
Семейство Nuttalliidae
Nutallia equi – возбудитель нуталлиоза лошадей, которым болеют лошади. Ослы, мулы и зебры. Обладает большим полиморфизмом. В эритроцитах наблюдается в виде овальных, кольцевидных, запятовидных, грушевидных и крестообразных форм. Типичной формой является «мальтийский крест». Источником возбудителя служат больные животные и нуталлионосители. Переносчиками являются клещи родов Hyalomma, Dermacentor, Rhipicephalus в имагинальной стадии. Возбудитель в них передается трансфазно.
временная форма существования микроорганизмов, характеризующаяся наличием защитной оболочки, которая образуется в неблагоприятных условиях или в определ
1. Цисты бактерий
Цисты многих бактерий также называют экзоспорами. Цисты представителей рода Azotobacter являются более устойчивыми к действию неблагоприятных факторов внешней среды, чем вегетативные клетки — так, цисты в два раза более устойчивы к действию ультрафиолетового излучения чем вегетативные клетки, устойчивы к высушиванию, гамма-излучению, солнечной радиации, действию ультразвука, однако не являются устойчивыми к действию высоких температур. Формирование цист индуцируется изменением концентрации питательных веществ в питательной среде, добавлением некоторых органических веществ например этанола, н-бутанола и β-гидроксибутирата к питательной среде, цисты редко образуются в жидких питательных средах, инцистирование может быть индуцированно химическими факторами, инцистирование сопровождается метаболическими сдвигами, изменениями в катаболизме и дыхании, изменениями в биосинтезе макромолекул. Определённое значение в индукции инцистирования имеет альдегиддегидрогеназа, а также регулятор ответа AlgR. Циста представляет собой сферическое тело, состоящее из так называемого центрального тела, представляющего собой уменьшенную копию вегетативной клетки с большим количеством вакуолей, и двуслойной оболочки, внутренняя часть которой называется интима и имеет волокнистое строение, а внешняя экзина, представленная ровной, отражающей структурой, имеющей гексагональное кристаллическое строение, экзина частично гидролизуется трипсином и устойчива к действию лизоцима в отличие от центрального тела. Центральное тело может быть изолированно в жизнеспособном состоянии некоторыми хелатирующими агентами. Главными компонентами внешней оболочки цисты являются алкилрезорцинолы, состоящие из длинных алифатических цепей и ароматических колец, также представлены среди других бактерий, животных и растений
Исследование кала на яйца гельминтов и простейшие
Это микроскопическое исследование кала, целью которого является выявление яиц гельминтов (глистов), цист и вегетативных форм простейших.
Метод исследования
Микроскопия.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Кал (иногда несколько порций, собранных в разные дни).
Как правильно подготовиться к исследованию?
Исключить прием слабительных препаратов, введение ректальных свечей, масел, ограничить прием медикаментов, влияющих на перистальтику кишечника (белладонны, пилокарпина и др.) и на окраску кала (железа, висмута, сернокислого бария), в течение 72 часов до сдачи кала.
Общая информация об исследовании
Анализ кала на яйца гельминтов, цист и вегетативных форм простейших — это микроскопическое исследование, используемое для обнаружения паразитов, инфицировавших нижние отделы пищеварительного тракта, откуда они и попадают в стул.
На предметном стекле делается тонкий мазок кала, который затем окрашивается, после чего паразиты и/или их яйца могут быть обнаружены и определены под микроскопом квалифицированным лаборантом.
Существует множество паразитов, способных инфицировать человека. Каждый тип имеет специфический жизненный цикл, процесс созревания и может жить как в одном, так и в большем количестве хозяев. Некоторые, прежде чем инфицировать человека, проводят часть жизни в промежуточных хозяевах, таких как овцы, коровы, улитки. Большинство имеют более одной формы развития, у некоторых есть личиночная фаза, которая является промежуточной между яйцом и зрелой формой. Яйца некоторое время могут существовать в окружающей среде вне хозяина и сохранять способность к инфицированию.
Большинство людей заражается через пищу. Яйца и паразиты выделяются со стулом инфицированного человека или животного и могут затем попасть в воду или продукты.
Паразитарная инфекция особенно опасна для определенных групп людей: детей, пожилых, пациентов с ослабленной иммунной системой, например, ВИЧ-инфицированных. У них заражение паразитами может приводить к серьезным осложнениям.
Самые частые признаки паразитарной инфекции: продолжительная диарея, кровь и слизь в стуле, боль в животе и тошнота. У некоторых возникают головные боли и лихорадка, у других симптомов может быть мало или они вообще могут отсутствовать. Диарея продолжительностью дольше нескольких дней грозит потерей веса, обезвоживанием и дисбалансом электролитов.
Особенно велика вероятность заражения у тех, кто путешествует в развивающиеся страны, где теплый климат и система очистки питьевой воды неэффективна.
Для чего используется исследование?
- Для выяснения причины продолжительной диареи — чтобы определить, есть ли паразиты в нижних отделах пищеварительного тракта, и, если есть, идентифицировать их. Поскольку существует много других причин диареи, данный анализ часто назначается вместе с другими тестами, такими как посев кала, который позволяет обнаружить болезнетворные бактерии в стуле.
- Для контроля эффективности антипаразитарной терапии.
Что означают результаты?
| Показатель | Референсные значения |
|---|---|
| Diphhyllobothrium latum | Не обнаружены |
| Ascaris lumbricoides | Не обнаружены |
| Trichocephalus trichiurus | Не обнаружены |
| Thominx aerophilus | Не обнаружены |
| Ancylostomatidae genus sp. | Не обнаружены |
| Fasciola hepatica | Не обнаружены |
| Schistosoma mansoni | Не обнаружены |
| Schistosoma japonicum | Не обнаружены |
| Schistosoma haematobium | Не обнаружены |
| Taeniidae genus sp. | Не обнаружены |
| Hymenolepis nana | Не обнаружены |
| Opisthorchis felineus | Не обнаружены |
| Trichostrongylidae sp. | Не обнаружены |
| Dicrocoelium lanceatum | Не обнаружены |
| Цисты и формы простейших | Референсные значения |
|---|---|
| Blastocystis hominis | Не обнаружены |
| Entamoeba histolytica | Не обнаружены |
| Balantidium coli | Не обнаружены |
| Lamblia intestinalis | Не обнаружены |
| Entamoeba coli | Не обнаружены |
| Endolimax nana | Не обнаружены |
| Chilomastix mesnill | Не обнаружены |
| Jodamoeba butshli | Не обнаружены |
Тип лечения и его продолжительность будут зависеть от вида паразита и общего состояния здоровья пациента. Количество организмов может дать врачу информацию о тяжести инфекции.
Вопрос: Яна | 10 Апреля, 2021
Здравствуйте, после сдачи пцр теста на ковид, через какое время будет результат? Где и как его можно получить? И есть ли возможность получения результата на английском языке?
Здравствуйте. Результат обследования готов в течение 24 часов (чаще, уже через 12 часов Вам приходит СМС с кодом посещения и ссылкой, пройдя по которой можно увидеть анализа). Печатную версию результата можно получить в нашем филиале, расположенном по адресу 15 микр дом 8 а. Анализ на английском языке выдаем (не забудьте предупредить об этом администратора)
Вопрос: Дарья | 07 Апреля, 2021
Добрый день)
Подскажите,пожалуйста,если рана находиться в ротовой полости,нужно сдавать пцр тест крови или соскоб в ротовой полости?
Здравствуйте. Из Вашего вопроса непонятно ПЦР на какой вид возбудителя Вам требуется провести. Этот вопрос лучше обсудить с врачом, который рекомендует провести обследование
Простейшие
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 278 | Смирнов О.Ю. |
1044. В препарате пунктата красного костного мозга, окрашенном по Романовскому, выявлены внутриклеточные мелкие овальные тельца, 3 мкм, ядро занимает 1/3 клетки, внутри есть ядрышко. Каким может быть диагноз?
–Токсоплазмоз
–Трипаносомоз
+ Висцеральный лейшманиоз
–Балантидиаз
–Малярия
1045. У женщины родился мёртвый ребёнок с многочисленными пороками развития (неполностью разделённые предсердия и желудочки, микрофтальм, микроцефалия). Какое протозойное заболевание могло послужить причиной внутриутробной гибели плода?
–Балантидиаз
+ Токсоплазмоз
–Малярия
–Лейшманиоз
–Трипаносомоз
1046. У больной обнаружено воспаление мочеполовых путей. В мазке из слизистой оболочки влагалища выявлены овальные клетки с большим ядром, остриём в конце тела и ундулирующей мембраной, от передней части отходят жгутики. Назовите заболевание:
–лямблиоз
+ трихомоноз
– балантидиаз
– лейшманиоз
– амёбиаз
1047. В зоопарк одного из городов Украины завезли антилоп с берегов озера Виктория. В мазках крови животных выявлены трипаносомы. Какие профилактические мероприятия наиболее целесообразно провести?
+ Профилактические мероприятия не нужны
–Взять мазки крови у лиц, которые находились в контакте с животными
–Вылечить животных
–Карантинные мероприятия
–Уничтожить животных – носителей трипаносом
1048. В отделение инфекционной больницы попал больной с
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 279 | Смирнов О.Ю. |
предварительным диагнозом «амёбиаз». Для лабораторной диагностики нужно использовать такой материал:
–плазму крови
–клетки костного мозга
–зубной налёт
–дуоденальное содержимое + фекалии
1049. Каким протозойным заболеванием можно заразиться при переливании крови?
–Трихомонозом + Малярией
–Лейшманиозом
–Лямблиозом
–Токсоплазмозом
1050. В жидких фекалиях больного со слизью и кровью выявлены крупные яйцеобразные клетки, большое ядро в них похоже на фасоль, вокруг оболочки заметно какое-то мерцание. Что это за паразит?
–Токсоплазма
–Кишечная трихомонада
+ Балантидий
–Лямблия
–Дизентерийная амёба
1051. На приём к врачу обратился больной с жалобами на часто повторяющиеся изнурительные приступы, которые сопровождаются ознобом, жаром и потом. Для постановки окончательного диагноза нужно исследовать:
–дуоденальное содержание
–спинномозговую жидкость
–выделения половых органов
+ кровь
–фекалии
1052. В лаборатории исследовали фекалии больного с хроническим воспалением толстой кишки. Выявлены округлые цисты размером до 18 мкм с 8 и 16 ядрами. Кому они принадлежат?
–Дизентерийным амёбам
–Балантидиям
–Лямблиям
–Токсоплазмам
+Кишечным амёбам
1053. Родился ребёнок с грубыми нарушениями строения чере-
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 280 | Смирнов О.Ю. |
па, без глаз и ручек, с почти полным отсутствием наружных половых органов. У матери раньше было 2 выкидыша. Какое это заболевание может быть?
+ Токсоплазмоз
–Трипаносомоз
–Висцеральный лейшманиоз
–Амёбиаз
–Малярия
1054. От больного хронической амёбной дизентерией в лабораторию доставили оформленные фекалии без примесей слизи и крови. Какие формы амёбы можно в них обнаружить?
–8- и 16-ядерные цисты
+ Четырёхъядерную цисту и просветную форму
– Ооцисту с 8 спорозоитами
– Тканевую форму
– Четырёхъядерную цисту, просветную и тканевую формы
1055. Больной обратился к врачу по поводу слабости, повышенной утомляемости, бессонницы ночью и сонливости днём, головной боли, апатии, заторможенности. Какой метод диагностики нужно использовать?
+ Микроскопию спинномозговой жидкости
–Микроскопию кала
–Микроскопию пунктата грудины
–Посев крови на питательную среду, микроскопию
–Микроскопию толстой капли крови и мазка
1056. На лечении в гастроэнтерологическом отделении находились дети, больные лямблиозом. Заражение их произошло:
–трансплацентарно
–вследствие укусов комаров
+ при заглатывании цист с водой и пищей
–при повреждении кожи (царапины)
–при заглатывании вегетативных форм с водой и пищей
1057. У 3-летнего ребёнка резко повысилась температура, возникли понос, высыпания на коже, увеличились селезёнка и печень. В семье живёт кошка, у которой слезились глаза, потеряно зрение. Какое заболевание возможно у ребёнка?
–Балантидиаз
–Висцеральный лейшманиоз
–Трихомоноз
–Амёбиаз
+ Токсоплазмоз
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 281 | Смирнов О.Ю. |
1058. От больного хроническим желудочно-кишечным заболеванием в лабораторию доставили жидкие испражнения. На основании какого результата исследования ставится диагноз амёбиаза?
+ Только при выявлении тканевой формы амёбы
–При выявлении тканевой формы амёбы и положительных результатах иммунологического анализа
–Достаточно обнаружения в кале примесей крови
–При выявлении любой формы амёбы (тканевой или просветной формы, или цисты)
–При выявлении просветной формы или цисты амёбы
1059. Больному поставили предварительный диагноз «урогенитальный трихомоноз». Для уточнения диагноза нужно:
–выявить цисты в фекалиях
–выполнить иммунологические реакции
–выявить вегетативные формы в испражнениях
+ выявить вегетативные формы в выделениях половых органов
– выявить вегетативные формы в крови
1060. У больного с язвенным поражением кишечника в жидких фекалиях со слизью обнаружена кровь. Какую протозойную болезнь наиболее вероятно предположить?
– Лейшманиоз
– Токсоплазмоз + Амёбиаз
– Трихомоноз
– Лямблиоз
1061. У больного полторы недели наблюдается лихорадка. Приступы высокой температуры повторяются через 2 дня. Когда нужно взять кровь на анализ?
+ В любое время
–В период озноба и повышения температуры
–Между приступами
–В период жара – при очень высокой температуре
–При снижении температуры
1062. У женщины было 2 спонтанных аборта. Врач выявил токсоплазмоз. Каким наиболее вероятным путём заразилась эта женщина?
+ Алиментарным
–Контактно-бытовым (через мочалку, полотенце) или половым
–Трансмиссивным
–Трансплацентарно
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 282 | Смирнов О.Ю. |
–При переливании крови
1063. Группа украинских биологов отлавливала в Средней Азии песчанок. У некоторых членов экспедиции выявлены язвы на коже. Какой вид простейшего является наиболее вероятным возбудителем заболевания?
–Balantidium coli
–Plasmodium falciparum
+ Leishmania major
–Trypanosoma cruzi
–Toxoplasma gondii
1064. У больного в пунктате лимфатических узлов обнаружены мелкие тельца, изогнутые в форме полумесяца. При окраске по Романовскому цитоплазма голубая, ядро красное. Жгутиков нет. Что это?
–Лейшмании
+ Токсоплазмы
–Лямблии
–Трипаносомы
–Трихомонады
1065. От больного хронической амёбной дизентерией в лабораторию доставлены жидкие испражнения с примесью крови. Какие формы дизентерийной амёбы можно там обнаружить?
–8- и 16-ядерные цисты
+ Тканевую форму
–Четырёхъядерную цисту, просветную и тканевую формы
–Четырёхъядерную цисту и просветную форму
–Тканевую форму, просветную форму, одноядерную цисту
1066. У больного головная боль, боль в мышцах, внезапно повысилась температура, под вечер снизилась с сильным потовыделением. Кожа желтушная, увеличены печень и селезёнка. Какие методы диагностики нужны?
–Микроскопия пунктатов внутренних органов
–Внутрикожная аллергическая проба с токсоплазминовым антигеном
–Иммунологические реакции крови больного с антигенами
–Протозоологическое исследование фекалий больного
+Микроскопия толстой капли и мазков крови
1067. В нативном мазке фекалий клинически здорового человека выявлены овальные цисты размером 50×30 мкм с хорошо
заметной оболочкой и двумя ядрами разного размера. Эти цисты принадлежат:
– Giardia lamblia
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 283 | Смирнов О.Ю. |
–Entamoeba gingivalis
–Entamoeba histolytica
–Amoeba proteus
+Balantidium coli
1068. Ребёнка 14 лет с нормальным развитием госпитализировали с диагнозом токсоплазмоз. Заражение могло случиться:
+через загрязнённые ооцистами руки
–путём заглатывания цист с водой
–через повреждения кожи (царапины)
–трансплацентарно
–через слизистые оболочки носа
1069. Студентка жалуется на боль в желудке, потерю аппетита, жидкий стул с примесью слизи. В фекалиях выявлены овальные образования 12 мкм с двухконтурной оболочкой, внутри – 2–4 ядра. Что это?
–Балантидий
–Циста амёбы
–Тканевая форма амёбы
+ Циста лямблии
–Просветная форма амёбы
1070. У больного наблюдается типичная для приступа малярии клиническая картина: лихорадка, истощение. Приступы повторяются через определённые промежутки времени. Какая
стадия малярийного плазмодия выявляется в крови больного во время каждого приступа1?
–Спорозоит
–Ооциста2
–Оокинета
–Спороциста
+ Мерозоит
1 Непонятно, что означает «во время приступа»? Во время озноба, жара, или же при снижении температуры (все это разные стадии приступа), а также между приступами наблюдаются разные формы плазмодия, причём во время приступа – не мерозоиты, а шизонты разных стадий. А стадию мерозоитов перед приступом тяжело «поймать». Этот вопрос мы приводим согласно оригиналу («Збірник завдань…», №153), но лучше было бы авторам его переработать. В 2010 г. Центр тестирования выложил на своём интернетсайте ещё худший вариант этого вопроса: «У больного наблюдается типичная для приступа малярии клиническая картина: лихорадка, жар, проливной пот. Какая стадия малярийного плазмодия вероятнее всего будет выявлена в крови больного в это время?» Какое такое «это время» – остаётся непонятным, правильным здесь должен быть ответ «трофозоит», но его среди ответов нет, предлагаемый ответ «мерозоит» на самом деле неправильный, а ответ «шизонт» почему-то считается авторами неправильным.
2 Другой вариант ответа – «микроили макрогаметы».
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 284 | Смирнов О.Ю. |
1071. В поликлинику обратился студент-иностранец, прибывший из Индии. В фекалиях обнаружили вегетативные формы дизентерийной амёбы. Назовите наиболее вероятный путь проникновения возбудителя в организм больного:
–парентеральный + алиментарный
–трансмиссивный
–половой
–воздушно-капельный
1072. Фекалии больного с подозрением на амёбиаз доставлены в лабораторию через час после выделения. Амёбы не обнаружены. Исключает ли это диагноз амёбиаза?
+ Нет, так как вегетативные формы быстро разрушаются во внешней среде
–Нет, так как нужно дополнительно сделать анализ крови и иммунологическое исследование
–Да, так как отсутствуют все формы амёбы (просветная, тканевая, циста)
–Да, так как отсутствуют просветные формы и цисты
–Да, так как отсутствуют тканевые формы
1073. У больного – воспаление двенадцатиперстной кишки и жёлчного пузыря. В фекалиях выявлены 4-ядерные овальные цисты размером 12 мкм, с хорошо очерченной толстой оболочкой. Какое это может быть заболевание?
–Токсоплазмоз
–Трихомоноз
+ Лямблиоз
–Балантидиаз
–Амёбиаз
1074. В хирургическое отделение госпитализирован больной с подозрением на абсцесс печени. В последнее время больной постоянно находился в командировке в пределах Украины и неоднократно болел острым желудочно-кишечным заболеванием, которое сопровождалось жидкими испражнениями с примесями крови. К врачу больной не обращался. Какое протозойное заболевание может быть у больного?
–Малярия
–Лейшманиоз
–Трипаносомоз
+ Амёбиаз
– Токсоплазмоз
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 285 | Смирнов О.Ю. |
1075. У человека в фекалиях имеются слизь, кровь и обнаружены простейшие длиной 30–200 микрон. Тело покрыто ресничками, имеет правильную овальную форму с немного суженным передним концом и широким округлым задним концом. На переднем конце заметен рот. В цитоплазме есть два ядра и две сократительные вакуоли. Кому из простейших соответствуют эти признаки?
–Лямблии
–Дизентерийной амёбе
–Трихомонаде
–Кишечной амёбе
+Балантидию
1076. У женщины родился мёртвый ребёнок с многочисленными пороками развития. Какой материал необходимо исследовать для подтверждения диагноза токсоплазмоза?
+Плаценту, гистологические срезы органов плода
–Кал матери
–Иммунологическую пробу крови матери с антигеном
–Содержимое кишечника плода
–Пунктат внутренних органов матери
1077. В свежих кровянисто-слизистых фекалиях больного с дисфункцией кишечника обнаружили простейших, которые передвигались с помощью выпячиваний эктоплазмы и имели захваченные эритроциты. Какой вид простейших наиболее вероятно обнаружили?
–Трихомонаду кишечную
–Токсоплазму
+ Дизентерийную амёбу
–Балантидия
–Лямблию
1078. В жидких фекалиях были найдены грушевидные простейшие размером 10–20 микрон. Они имеют 5 жгутиков и быстро двигаются. Заметны ундулирующая мембрана и большое ядро. Тело заканчивается аксостилем. Какого простейшего обнаружили?
–Lamblia
–Trichomonas
–Entamoeba coli
+ Trichomonas hominis
–Balantidium
1079. У больного большие язвы (10–15 см) на нижних конечно-
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 286 | Смирнов О.Ю. |
стях, болезненные при пальпации, с большим сукровичным экссудатом. Месяц назад он находился в азиатской стране в сельской местности, где живут москиты и грызуны. Назовите заболевание и его возбудителя:
+ зоонозный кожный лейшманиоз, Leishmania major
–кала-азар, Leishmania donovani
–трипаносомоз, Trypanosoma brucei gambiense
–аллергическая реакция на укусы москитов
–антропонозный кожный лейшманиоз, Leishmania tropica
1080. Тщательными лабораторными исследованиями содержимого кишечника здорового человека установлено наличие среди кишечной микрофлоры Entamoeba histolytica forma minuta. При каких условиях у этого человека может развиться амёбиаз?
–После употребления кисломолочных продуктов
+ Вследствие недоедания
–Вследствие длительного пребывания на солнце
–В результате частичной потери крови
–После контакта с больным гриппом
1081. У больного наблюдаются лихорадка, увеличение селезёнки и печени, установлено уменьшение количества эритроцитов в крови. При микроскопировании мазков пунктата грудины в клетках костного мозга выявлено большое количество мелких одноклеточных безжгутиковых паразитов. В их цитоплазме расположено одно ядро. Заметен палочковидный блефаропласт. При культивировании паразита на искусственной питательной среде он превращается в жгутиковую форму. Какое заболевание можно предположить?
–Трихомониаз
–Амёбиаз
+ Висцеральный лейшманиоз
– Трипаносомоз
– Болезнь Шагаса
1082. В зоопарк одного из городов Украины доставлены броненосцы из Южной Америки. В их крови выявлена Trypanosoma cruzi. Представляют ли собой эти животные эпидемиологическую опасность?
+ Эпидемиологической опасности нет
– Опасны только для человека
– Опасны для домашних животных и человека
– Опасны только для собак
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология 287 Смирнов О.Ю.
– Опасны для других броненосцев и собак
1083. При исследовании дуоденального содержимого больного с расстройством пищеварения выявлены простейшие размером 10–18 мкм. Их тело имеет грушевидную форму, 4 пары жгутиков, в расширенной передней части тела – 2 ядра, расположенных симметрично. Какой представитель простейших паразитирует у больного?1
–Трихомонада кишечная
–Амёба кишечная
–Балантидий + Лямблия
–Дизентерийная амёба
1084. Группа украинских туристов привезла из Самарканда песчанок. На таможне при обследовании зверьков на коже обнаружили язвы. Какой вид простейшего является наиболее вероятным возбудителем заболевания животных?
–Balantidium coli
+ Leishmania major
–Trypanosoma cruzi
–Plasmodium falciparum
–Toxoplasma gondii
1085. Муха цеце (Glossina palpalis), которая только что вышла из куколки, насосалась крови человека, больного африканской сонной болезнью. Через неделю эта же муха укусила здорового человека, но последний не заболел трипаносомозом, так как:
+ для развития инвазионной стадии в организме мухи трипаносоме нужно 20 дней
–этот человек своевременно сделал соответствующие профилактические прививки
–переносчиком возбудителя трипаносомоза является не муха цеце, а москит
–человек имел врождённый иммунитет
–трипаносомоз – природно-очаговая болезнь, а повторный укус произошёл, очевидно, за пределами природного очага
1086. При исследовании мазка крови больного с подозрением на малярию, взятого в период ремиссии, плазмодии выявлены не были. В какой период болезни необходимо было взять
1 В аналогичном вопросе ответы содержат латинские названия возбудителей: Entamoeba coli; Balantidium coli; Trichomonas hominis; Giardia intestinalis; Entamoeba histolytica.
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 288 | Смирнов О.Ю. |
кровь, и какие препараты приготовить для подтверждения диагноза?
–Микроскопическое исследование мазка периферической крови, взятого во время лихорадки
–Микроскопическое исследование толстой капли крови в период ремиссии
–Заражение лабораторных животных кровью больного, взятой в любой
период + Микроскопическое исследование толстой капли и мазка перифериче-
ской крови, взятых в период приступа
– Серологические исследования в любой период
1087. Какую клиническую картину можно наблюдать у больного трёхдневной малярией (возбудитель болезни Plasmodium vivax), если каждый день измерять температуру и отмечать дни, когда она повышается?
– 40–37–37–40–37–37–…
+ 40–37–40–37–40–37–…
–40–37–37–37–40–37–37–37–…
–40–40–37–40–40–37–40–40–37…
–40–40–40–37–40–40–40–37–…
1088. К врачу обратился пациент, который жалуется на общую слабость, боль в кишечнике, нарушение функций пищеварения, частые поносы (3–5 раз в сутки) с примесями крови. Лабораторный анализ фекалий показал наличие вегетативных форм простейших, имеющих непостоянную форму тела, в цитоплазме которых содержатся фагоцитированные эритроциты.
Какой представитель простейших выявлен в фекалиях больного?1
–Лямблия
–Балантидий
–Амёба кишечная
–Трихомонада кишечная
+ Дизентерийная амёба
1089. При употреблении в пищу недостаточно проваренного мяса млекопитающих можно заразиться:
–трипаносомозом
–лямблиозом
+ токсоплазмозом
– балантидиазом
1 В аналогичном вопросе ответы содержат латинские названия возбудителей: Giardia intestinalis; Balantidium coli; Entamoeba coli; Trichomonas vaginalis; Entamoeba histolytica.
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 289 | Смирнов О.Ю. |
–лейшманиозом
1090. К врачу обратился больной, у которого на лице не заживают язвы. Недавно больной приехал из Туркменистана. Врач установил диагноз: кожный лейшманиоз. Каким путём возбудитель этой болезни проник в организм человека?
–Алиментарным
–Половым
–Воздушно-капельным
–Контактно-бытовым
+Трансмиссивным
1091. У работницы животноводческой фермы аллергическая проба на токсоплазмоз оказалась положительной, в сыворотке крови выявлено нарастание титра антител. Она ни на что не жалуется. Какое заболевание можно предположить?
– Бессимптомный токсоплазмоз
– Хронический токсоплазмоз
– Острый токсоплазмоз
– Врождённый токсоплазмоз + Паразитоносительство токсоплазм
1092. При медицинском обследовании у одного из работников столовой в фекалиях выявлены цисты, содержащие 4 ядра одинакового размера. Для какого простейшего характерны такие цисты?
– Амёбы кишечной
– Балантидия + Дизентерийной амёбы
–Трихомонады вагинальной
–Токсоплазмы
1093. В зоопарк г. Киева были доставлены антилопы из Афри-
ки. В крови у них обнаружена Trypanosoma brucei gambiense.
Являются ли эпидемиологически опасными эти животные?
–Опасны для домашних животных и человека
–Опасны для других антилоп
+ Не представляют эпидемиологической опасности
–Опасны только для хищников
–Опасны только для человека
1094. У человека установлен хронический (бессимптомный) токсоплазмоз. Госпитализация не была сделана, а растерянные родственники изолировали пациента от любых контактов. Врач указал на нецелесообразность изоляции, поскольку:
–заражение человека токсоплазмозом происходит исключительно внут-
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология 290 Смирнов О.Ю.
риутробно + человек не может быть источником заражения другого человека
– возбудитель токсоплазмоза передаётся воздушно-капельным путём
– вся семья уже поражена токсоплазмой и лечить нужно всех
– это спровоцирует обострение болезни
1095. В населённом пункте, расположенном возле водоёма, выявили два случая заболевания малярией. Диагноз был подтверждён исследованием крови, которое показало наличие возбудителя трёхдневной малярии. Это:
+ Plasmodium vivax
–Plasmodium falciparum
–Plasmodium malariae
–Plasmodium ovale
–Plasmodium berghei
1096. В результате обследования больному поставлен диагноз висцеральный лейшманиоз. Возбудитель этого заболевания локализуется в:
–мышцах
–эритроцитах
–клетках головного мозга
–лёгких
+клетках печени и селезёнки
1097. К врачу обратился больной с тяжёлым расстройством кишечника; в жидких фекалиях со слизью обнаружена кровь. Была заподозрена бактериальная дизентерия, но диагноз лабораторно не подтвердился. Какая протозойная болезнь наиболее вероятна у этого больного?
–Токсоплазмоз
–Лямблиоз
–Трихомоноз + Амёбиаз
–Лейшманиоз
1098. Рабочий скотного двора заразился балантидиазом. Для человека инвазионной является:
–ооциста
–большая вегетативная форма
–псевдоциста
+ циста
–спорозоит
1099. Больной во время родов перелили кровь донора, который прибыл из Анголы. Через две недели у реципиентки возникла
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 291 | Смирнов О.Ю. |
лихорадка. Было предположено, что у больной малярия. С помощью какого лабораторного исследования можно уточнить этот диагноз?
–Изучение лейкоцитарной формулы крови + Исследование толстой капли крови1
–Определение возбудителя методом посева крови на питательную среду
–Проведение серологических исследований
–Исследование пунктата лимфатических узлов
1100. Какие стадии жизненного цикла токсоплазм происходят в организме человека?
+ Эндогония
–Шизогония
–Спорогония
–Гаметогенез
–Оплодотворение2
1101. У больного обнаружены воспаление и увеличение лимфатических узлов, язвы кожи и окружающих тканей. Микроскопирование выделений из язв выявило внутриклеточные формы жгутиковых. Какое заболевание может быть у больного?
–Кокцидиоз
–Балантидиаз
–Лейшманиоз висцеральный
–Токсоплазмоз
+Лейшманиоз дерматотропный
1102. У больного малярией брали кровь для исследования в
период озноба и повышения температуры. Какие стадии эритроцитарной шизогонии будут преобладать?
–Многоядерные шизонты
–Амёбовидные трофозоиты
–Трофозоиты в стадии кольца
–Половые формы
+Распад шизонтов и высвобождение мерозоитов
1103. Больной жалуется на общую слабость, плохой аппетит, тошноту, понос. При обследовании дуоденального содержимо-
1На сайте http://testcentr.org.ua/ (2013) было написано: «Изучение мазка толстой капли крови для нахождения эритроцитарных стадий возбудителя». Но «мазка толстой капли» не существует в природе.
2В БЦТ предлагается вариант ответа «экзогония». Но такого термина в отечественной и зарубежной научной литературе не существует, поэтому здесь мы заменили его на «оплодотворение».
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 292 | Смирнов О.Ю. |
го обнаружены простейшие грушевидной формы с 4 парами жгутиков и 2 ядрами. Какое заболевание может быть у пациента?
– Лейшманиоз висцеральный
–Токсоплазмоз + Лямблиоз
–Малярия
–Трихомоноз
1104. У женщины родился мёртвый ребёнок с многочисленными пороками развития. Какое протозойное заболевание могло послужить причиной внутриутробной гибели плода?
–Амёбиаз
–Трихомоноз1
–Лейшманиоз
+ Токсоплазмоз
–Лямблиоз
1105. В инфекционную больницу обратился больной с жалобами на частые жидкие испражнения, боль в желудке, рвоту. Во время протозойного исследования фекалий выявлены небольшие вегетативные формы без эритроцитов. Фекалии поместили в холодильник, и через сутки были обнаружены 4-ядерные цисты. Причиной такого состояния может быть:
–Trichomonas
+ Entamoeba histolytica
–Balantidium
–Entamoeba coli
–Lamblia
1106. Малярия – тяжёлое протозойное заболевание, которое
сопровождается изнурительными приступами лихорадки. Эти приступы возникают потому, что2:
1Другой вариант – малярия.
2В БЦТ вопрос звучит так: По данным ВОЗ малярией ежегодно на Земле болеют приблизительно 250 млн человек. Малярия – тяжёлое протозойное заболевание, которое сопровождается изнурительными приступами лихорадки. Считают, что присту-
пы возникают потому, что: а) поражается селезёнка, костный мозг; б) белки вместе с гемоглобином поступают в кровь при разрушении эритроцитов вследствие эритроцитарной шизогонии; в) образуются антитела к своим эритроцитам; г) происходит сенсибилизация организма; д) наблюдается гемолиз эритроцитов. Предлагается вариант б как правильный. Однако «разрушение эритроцитов» и «гемолиз эритроцитов» (ответ д) – это одно и то же. Нужно было бы подобрать лучшие формулировки. Фраза «считают, что приступы возникают…» не совсем удачная, так как причина этих приступов является доказанной. Кроме того, правильный ответ является очень длинным, поэтому этот вопрос мы переработали.
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 293 | Смирнов О.Ю. |
–поражаются селезёнка, костный мозг
–происходит сенсибилизация организма
+ происходит гемолиз эритроцитов вследствие шизогонии
–образуются антитела к своим эритроцитам, которые и вызывают гемолиз
–разрываются клетки печени вследствие шизогонии
1107. У больного с симптомами воспаления 12-перстной кишки, жёлчного пузыря, жёлчных протоков в фекалиях обнаружены 2–4-ядерные цисты размером 10–14 мкм, овальной формы, с отслоённой в виде полумесяца оболочкой. Какие простейшие паразитируют у больного?
+ Лямблии
–Балантидии
–Дизентерийные амёбы
–Трипаносомы
–Лейшмании
1108. Бизнесмен приехал в Индию из Южной Америки. При осмотре врач выявил, что пациент страдает от сонной болезни. Каким был способ инвазии?
–Вследствие укусов комара
+ Вследствие укусов клопа
–Через загрязнённые фрукты и овощи
–Через грязные руки
–После контакта с больными собаками
1109. В гастроэнтерологическое отделение поступил больной с воспалением жёлчных путей. В порциях жёлчи обнаружены подвижные простейшие грушевидной формы, двухъядерные, с 4 парами жгутиков и опорным стержнем – аксостилем. Какое протозойное заболевание диагностируется у пациента?
–Балантидиаз
–Токсоплазмоз1
–Трихомоноз
–Амёбная дизентерия
+Лямблиоз
1110. Мужчина 42 лет обратился к врачу с жалобами на слабость мышц, измождённость, сонливость, снижение умственной деятельности. Выяснено, что 5 лет тому назад больной находился в Эфиопии. Какие действия врача наиболее целесо-
1 В БЦТ здесь «амёбиаз кишечный», то авторы вопроса ошибочно считают, что это заболевание вызывается паразитом Entamoeba coli, но на самом деле кишечный амёбиаз – это кишечная форма амёбной дизентерии (существует ещё и внекишечная форма).
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология 294 Смирнов О.Ю.
образны для постановки диагноза?
– Взять на исследование фекалии
– Провести анализ мазка, взятого с половых органов
– Провести микроскопию мазков крови + Исследовать пунктаты лимфоузлов и спинномозговой жидкости
– Исследовать биоптат мышц
1111. При каком протозойном заболевании человека поражаются головной мозг и глаза?
– Лейшманиозе
– Лямблиозе
– Трихомонозе + Токсоплазмозе
– Амёбиазе
1112. С помощью кровососущих переносчиков происходит заражение:
– лямблиями + лейшманиями
–трихомонадами
–амёбами
–токсоплазмами
1113. В медико-генетическую консультацию обратились супруги в связи с рождением ребёнка с многочисленными пороками
развития (микроцефалия, идиотия и т. п.). Женщина во время беременности болела, но мутагенов и тератогенов1 не употребляла. Кариотип родителей и ребёнка нормальный. Как выяснил врач, в квартире семья держит кота. Что может быть вероятной причиной уродства новорождённого ребёнка?
–Во время беременности женщина болела лейшманиозом
–Во время беременности женщина болела дизентерией
–Во время беременности женщина болела балантидиазом
–Во время беременности женщина болела трихомонозом
+Во время беременности женщина болела токсоплазмозом
1114. В инфекционное отделение больницы госпитализирован больной, у которого наблюдаются изнурительные приступы лихорадки, сопровождающиеся повышением температуры тела до 40°С. Эти пароксизмы ритмически повторяются каждые 48 ч. Из анамнеза известно, что больной недавно вернулся из стран Южной Африки, где находился на протяжении трёх лет.
1 Крайне неудачно сформулировано, лучше – «веществ с мутагенным и тератогенным действием».
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 295 | Смирнов О.Ю. |
Каков вероятный возбудитель этого заболевания?
+ Возбудитель трёхдневной малярии
–Возбудитель токсоплазмоза
–Возбудитель лямблиоза1
–Возбудитель африканского трипаносомоза
–Возбудитель четырёхдневной малярии
1115. Диагноз амёбиаза ставится в случае выявления в экскрементах:
–четырёхъядерных цист
–одноядерных цист
–мелких просветных форм
–восьмиядерных цист
+больших тканевых форм
1116. У больного кровяные испражнения, 3–10 и более раз в сутки. Какое протозойное заболевание это может быть?
–Лейшманиоз
–Трипаносомоз + Амёбиаз
–Малярия
–Трихомоноз
1117. У ребёнка из Средней Азии выявлен висцеральный лейшманиоз. Назовите внутренний орган, в котором могут находиться паразиты:
–спинной мозг
–головной мозг
–сердце
–лёгкие
+красный костный мозг
1118. Какую клиническую картину можно наблюдать у больного четырёхдневной малярией (возбудитель болезни Plasmodium malariae), если каждый день измерять температуру и отме-
чать дни, когда она повышается?
–40–37–40–37–40–37–…
–40–37–37–37–40–37–37–37–…
–40–40–40–40–37–40–40–40–40–37–…
+ 40–37–37–40–37–37–…
–40–40–37–37–40–40–37–37–…
1119. К врачу, находящемуся в рабочей командировке в одной из стран тропической Африки, с жалобами обратилось местное
1 Другой вариант: «Возбудитель тропической малярии».
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 296 | Смирнов О.Ю. |
население по поводу болезни детей 14-летнего возраста, которая сопровождается стойкой нециклической лихорадкой, истощением, анемией, увеличением печени и селезёнки. Учитывая местные условия, связанные с большим количеством москитов, можно предположить, что дети болеют:
+ висцеральным лейшманиозом
–балантидиазом
–токсоплазмозом
–лямблиозом1
–амёбиазом2
1120. При исследовании содержимого двенадцатиперстной кишки обнаружены простейшие грушевидной формы с парными ядрами и четырьмя парами жгутиков. Между ядрами – две опорные нитки, с вентральной стороны расположен присасывательный диск. Какой представитель простейших обнаружен у больного?
–Токсоплазма
+ Лямблия
–Трихомонада кишечная
–Трипаносома
–Лейшмания
1121. Женщина 25 лет любила употреблять сырые продукты животноводства (молоко, яйца, мясо). Когда она забеременела, врачи при обследовании обнаружили в крови высокие титры антител, что свидетельствовало об инвазии. Возник вопрос о прерывании беременности. Какое заболевание выявили у этой женщины?
–Трипаносомоз
+ Токсоплазмоз
– Трихомоноз
– Лямблиоз
– Малярию
1122. Профессиональные болезни чаще всего случаются у людей определённой профессии. Какие из протозойных заболеваний можно отнести к профессиональным?
+ Балантидиаз
– Амёбиаз
– Лямблиоз
– Малярия
1Другой вариант: «сонной болезнью».
2Другой вариант: «болезнью Шагаса».
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 297 | Смирнов О.Ю. |
–Лейшманиоз
1123. К врачу обратился больной с жалобами на повышенную температуру, понос со слизью и кровью. При обследовании в фекалиях больного были выявлены бесцветные ооцисты размером 23–33 мкм, удлинённой яйцеобразной формы, с вытянутым передним концом, на котором есть неглубокая перетяжка. Ооциста с двойной оболочкой и зернистым слоем внутри. Для какого вида простейших характерны описанные особенности?
–Balantidium coli
–Lamblia intestinalis
+ Isospora belli
–Toxoplasma gondii
–Entamoeba histolytica
1124. Для каких простейших возможен трансмиссивный путь передачи возбудителя болезни?
–Лямблий, токсоплазм
–Малярийных плазмодиев, токсоплазм
–Трихомонад, трипаносом
+ Малярийных плазмодиев, лейшманий
–Лямблий, балантидиев
1125. К врачу-инфекционисту обратились родители с больным ребёнком, которые длительное время работали в одной из азиатских стран, где водится много москитов. У ребёнка выявлены такие симптомы: кожа землистого цвета, потеря аппетита, вялость, увеличенные печень, селезёнка и периферийные лимфатические узлы. Для какого протозойного заболевания характерны эти симптомы?
–Балантидиаза
–Амёбиаза
–Токсоплазмоза
–Лямблиоза
+Висцерального лейшманиоза
1126. Мужчина среднего возраста потерял зрение на правый глаз и обратился к врачу по поводу ухудшения зрения на левый глаз. Какое протозойное заболевание может подозревать врач?
–Лейшманиоз + Токсоплазмоз
–Трипаносомоз
–Лямблиоз
–Трихомоноз
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология 298 Смирнов О.Ю.
1127. При микроскопии мазка фекалий выявлены четырёхъядерные цисты. Какому паразиту из простейших они принадлежат?
– Лейшмании1
– Балантидию + Дизентерийной амёбе
– Трихомонаде
– Токсоплазме
1128. При микроскопическом исследовании нативного препарата экскрементов больного, которые имеют кровянисто-слизис- тый характер, были найдены микроорганизмы сферической формы, цитоплазма которых содержит эритроциты, а также цисты небольшого размера с 4 ядрами. О каком возбудителе можно думать?
+ Entamoeba histolytica
–Entamoeba coli
–Lamblia intestinalis
–Trichomonas hominis
–Leishmania donovani
1129. В женской консультации проводится обследование женщины, у которой было несколько спонтанных абортов. На основании клинико-эпидемиологического анамнеза был заподозрен хронический токсоплазмоз. Какое лабораторное исследование наиболее эффективно для подтверждения диагноза?
–Микроскопия мазка крови
–Микроскопия влагалищного мазка
+ Серологические реакции2
– Кожно-аллергическая проба
– Микроскопия мазка фекалий
1130. Через две недели после переливания крови у реципиента возникла лихорадка. О каком протозойном заболевании можно думать?
– Лейшманиозе + Малярии
– Амёбиазе
1В БЦТ здесь ответ «лямблии». Однако цисты лямблий тоже имеют 4 ядра, хотя там есть и дополнительные отличительные признаки (пулевидная форма, хорошо очерченная двухконтурная оболочка, могут быть заметны парабазальное тело и жгутики внутри), т. е. этот ответ тоже правильный. В вопросе следовало дополнительно указать форму цисты и характер оболочки, чтобы не возникало лишних проблем при ответе.
2Другой вариант ответа – «серологические реакции и молекулярно-генетические методы».
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 299 | Смирнов О.Ю. |
–Токсоплазмозе
–Трипаносомозе
1131. Пациенту поставлен предварительный диагноз: токсоплазмоз. Какой материал использовали для диагностики этой болезни?
–Дуоденальное содержание
–Фекалии
–Мочу
+ Кровь
– Мокроту
1132. Какие протозойные болезни относятся к природно-очаго- вым заболеваниям?
+ Лейшманиоз
–Лямблиоз
–Трихомоноз
–Амёбиаз
–Балантидиаз
1133. В больницу доставили пациента с жалобами на головную боль. Он болеет 1,5 недели. Болезнь началась с резкого повышения температуры тела до 39,9°С. Через 3 часа она уменьшилась, и началось потовыделение. Приступы повторяются ритмически каждые 48 часов. Пациент был на экскурсии в одной из африканских стран. Врачи заподозрили малярию. Какой метод лабораторного исследования нужно использовать?
–Иммунологическую пробу
+ Анализ крови
–Анализ кала
–Анализ выделений из влагалища
–Анализ мочи
1134. У больной с симптомами воспалительного процесса мочевых и половых путей в мазке из слизистой оболочки влагалища выявлены большие одноклеточные организмы грушевидной формы с заострённым задним концом тела, большим ядром и ундулирующей мембраной. Какие простейшие выявлены в мазке?
–Trypanosoma brucei gambiense
–Trichomonas hominis
–Toxoplasma gondii
–Lamblia intestinalis
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 300 | Смирнов О.Ю. |
1135. К врачу обратились пациенты с похожими жалобами: слабость, боли в животе, жидкий стул. После исследования фекалий выяснилось, что срочной госпитализации подлежит один из пациентов, у которого были выявлены цисты с четырьмя ядрами. Для какого простейшего характерные такие цисты1?
–Кишечной амёбы
–Трихомонады
+ Дизентерийной амёбы
–Балантидия
–Лямблии
1136. С целью паразитологического подтверждения диагноза и выделения возбудителя средиземноморского висцерального лейшманиоза у больных проводилась стернальная пункция костного мозга. Какого возбудителя можно выявить в препаратах костного мозга (выберите латинское название)?
–Leishmania tropica minor
–Leishmania donovani
+ Leishmania infantum
– Lamblia intestinalis
– Trypanosoma cruzi
1137. В женскую консультацию обратилась женщина, у которой было два непроизвольных выкидыша. Какое протозойное заболевание могло вызвать невынашивание беременности?
+ Токсоплазмоз
–Трихомоноз
–Балантидиаз
–Лямблиоз
–Амёбиаз
1138. Пациент, имеющий на открытой части тела безболезненные язвы, покрытые коричнево-красными корками, обратился к врачу. После удаления этих корок показалась поверхность, покрытая грануляциями. При микроскопировании микропрепаратов, окрашенных по Романовскому–Гимзе, были выявлены микроорганизмы сферической и овальной формы. Продолжи-
1 Вопрос предлагался на экзамене в 2004 году, но он неудачно сформулирован. Четырёхъядерную цисту имеет не только дизентерийная амёба, но и лямблия. Цисты выделяет носитель (в оформленном или в полуоформленном кале), которого срочно госпитализировать не нужно (лечение бессимптомных носителей проводится амбулаторно), а в случае поноса, т. е. при острой форме амёбиаза, в кале будут тканевые трофозоиты, а никак не зрелые четырёхъядерные цисты! Лучше уж было бы поставить вопрос так: «Какой возбудитель вызывает заболевание, требующее госпитализации?»
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология 301 Смирнов О.Ю.
тельность болезни была больше одного года. Какой микроорганизм может вызвать эту болезнь?
– Lamblia intestinalis
– Leishmania tropica var. major
– Trichomonas hominis
+ Leishmania tropica var. minor
– Leishmania donovani
1139. При микроскопии мазка фекалий человека выявлены восьмиядерные цисты. Кому из простейших они принадлежат?
– Балантидию + Амёбе кишечной
– Лямблии
– Трихомонаде кишечной
– Токсоплазме
1140. У больного наблюдаются тошнота, рвота, частый (20 раз в сутки) жидкий стул с примесью слизи и крови. При микроскопическом исследовании фекалий были обнаружены вегетативные формы, имеющие 2 ядра и реснички, и одноядерные цисты. Какой наиболее вероятный диагноз можно предположить у больного?
– Токсоплазмоз
– Амёбиаз
– Лямблиоз + Балантидиаз
– Трихомоноз1
1141. При обследовании беременной женщины была выявлена Trichomonas vaginalis. В какой биологической форме этот паразит чаще всего встречается в организме человека?
– Циста с 4 ядрами + Трофозоит
–Циста с 8 ядрами
–Одноядерная циста
–Мерозоит
1142. У больного обнаружено протозойное заболевание, при котором поражается головной мозг и наблюдается потеря зрения. При анализе крови найдены одноклеточные организмы полумесячной формы с заострённым концом. Возбудителем этого заболевания является:
–лейшмания
1 В БЦТ – кишечный трихомоноз, однако такая болезнь не существует.
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 302 | Смирнов О.Ю. |
+ токсоплазма
–амёба
–лямблия
–трихомонада
1143. В больницу попали пациенты с жалобами на общую слабость, боль в кишечнике, расстройство пищеварения. При исследовании фекалий были обнаружены цисты с четырьмя ядрами. Для какого простейшего характерны такие цисты?
–Балантидия
–Амёбы кишечной
–Амёбы ротовой
+ Амёбы дизентерийной
–Лямблии1
1144. В полости кариозных зубов обнаружены паразитические простейшие. Установлено, что они относятся к классу Саркодовых. Считается, что они могут вызывать некоторые осложнения при стоматологических заболеваниях. Этими одноклеточными являются:
–Entamoeba coli
–Amoeba proteus
–Entamoeba histolytica
–Lamblia intestinalis
+Entamoeba gingivalis
1145. Во время обследования врачами санитарно-эпидемиоло- гической станции работников сферы общественного питания нередко выявляется бессимптомное паразитоносительство, когда клинически здоровый человек является источником цист, которые заражают других людей. При паразитировании у че-
ловека какого возбудителя это возможно?
–Малярийного плазмодия + Дизентерийной амёбы
–Трипаносомы
–Дерматотропных лейшманий
–Висцеротропных лейшманий
1146. У женщины в анамнезе два выкидыша, третьим родился ребёнок с многочисленными пороками развития (отсутствуют
1 На самом деле цисты лямблий тоже имеют 4 ядра, хотя там есть и дополнительные отличительные признаки (хорошо очерченная двухконтурная оболочка, могут быть заметны парабазальное тело и жгутики внутри), т. е. этот ответ тоже правилен. Следовало бы в вопросе дополнительно указать характер оболочки, чтобы не возникало лишних проблем при ответе.
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 303 | Смирнов О.Ю. |
верхние конечности, недоразвиты нижние конечности). Результатом паразитирования в организме женщины какого возбудителя могут быть эти аномалии развития?
–Entamoeba histolytica
–Lamblia intestinalis
–Balantidium coli
–Trichomonas hominis
+Toxoplasma gondii
1147. У пациента лихорадка с двойным ежедневным повышением до 39–40°C, увеличением селезёнки и печени. Анализ крови показал анемию. Какую болезнь можно заподозрить у пациента?
+Лейшманиоз
–Гиардиоз
–Трихомоноз
–Балантидиаз
–Трипаносомоз
1148. Через три недели после командировки в Индию температура тела журналиста утром резко повысилась, сопровождалась ознобом и головной болью. Через несколько часов температура снизилась. Приступы стали повторяться через день. Был поставлен диагноз: тропическая малярия. Какая стадия развития плазмодия является инфекционной для самки анофелеса?
–Шизонты
–Мерозоиты
+ Гаметоциты
–Микрогаметы
–Спорозоиты
1149. При исследовании мазка крови, взятого от больного человека и окрашенного по Романовскому, врач обнаружил простейших и диагностировал болезнь Шагаса. Какое простейшее вызвало эту болезнь?
–Leishmania donovani
–Toxoplasma gondii
–Leishmania tropica
–Trypanosoma brucei
+Trypanosoma cruzi
1150. У ребёнка были тошнота, рвота и боли в правом подреберье. При исследовании кала были найдены овальные цисты (8–14 мкм) с 2–4 ядрами. Какую болезнь можно заподозрить у
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 304 | Смирнов О.Ю. |
пациента?
+ Гиардиоз
–Амёбиаз
–Трихомоноз
–Трипаносомоз
–Лейшманиоз
1151. В мазке крови пациента с малярией найдены клетки малярийного плазмодия, которые занимают почти весь эритроцит. Ядра большие, заметен пигмент. Какая стадия эритроцитарной шизогонии обнаружена в препарате?
–Спорозоиты
–Трофозоиты
–Кольцевые трофозоиты
+ Мерозоиты
– Ооцисты
1152. К врачу-гинекологу обратилась женщина с жалобами, характерными для воспалительного процесса во влагалище. Какой вид простейших может вызвать эти жалобы?
– Plasmodium malariae
– Toxoplasma gondii
+ Trichomonas vaginalis
–Entamoeba coli
–Lamblia intestinalis
1153. При исследовании мазка спинномозговой жидкости, окрашенного по Романовскому, были выявлены простейшие в форме полумесяца с суженным концом, голубой цитоплазмой и красным ядром. О какой болезни может идти речь?
–Лейшманиозе
–Малярии
+ Токсоплазмозе
–Трипаносомозе
–Амёбиазе
1154. Человек, который проживал в эндемическом очаге, переболел трёхдневной малярией. Через полтора года после переезда в другую местность заболел малярией снова. Какова наиболее вероятная форма этого заболевания?
–Суперинфекция
–Реинфекция
–Персистирующая инфекция
+ Рецидив
– Вторичная инфекция
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология 305 Смирнов О.Ю.
1155. Пациент, работающий на свиноферме, жалуется на периодические боли в животе, жидкий стул с примесью слизи и крови, головную боль, слабость, лихорадку. Исследование толстого кишечника выявило язвы размером от 1 мм до нескольких сантиметров, фекалии содержали овальные одноклеточные организмы с ресничками. Какую болезнь можно предположить?
– Амёбиаз
– Лямблиоз + Балантидиаз
– Токсоплазмоз
– Трихомоноз
1156. Приведите пример природно-очагового заболевания, которое вызвано жгутиковыми.
– Трихомоноз + Трипаносомоз
– Токсоплазмоз
– Лямблиоз
– Балантидиаз
1157. Среди простейших есть свободноживущие и паразитические формы. Болезни, которые вызываются паразитическими простейшими, имеют общее название:
+ протозоозы1
–трематодозы
–филяриатозы
–нематодозы
–цестодозы
1158. К врачу обратился больной с жалобами на боль в животе, частые жидкие испражнения с примесями слизи и крови. При исследовании фекалий в мазке выявили вегетативные формы простейших размером 30–40 мкм, которые содержат большое количество фагоцитированных эритроцитов. Какое протозойное заболевание у этого больного?
–Лейшманиоз
–Трихомоноз
–Лямблиоз
–Токсоплазмоз
+Амёбиаз
1159. Некоторые из простейших в неблагоприятных условиях
1 В БЦТ ошибочно написано «протозоонозы» (такого слова не существует).
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 306 | Смирнов О.Ю. |
образуют цисты. Укажите такое животное:
–малярийный плазмодий
–трипаносома
–трихомонада кишечная + амёба дизентерийная
–трихомонада влагалищная
1160. В фекалиях больного с расстройством желудочно-кишеч- ного тракта выявленные одноклеточные животные овальной формы, покрытые короткими ресничками. Их цитоплазма содержит две пульсирующих вакуоли, микро- и макронуклеус. На какую болезнь указывают эти признаки?
–Амёбиаз
+ Балантидиаз
–Токсоплазмоз
–Висцеротропный лейшманиоз
–Лямблиоз
1161. У беременной женщины подозрение на токсоплазмоз. Какой эффективный метод диагностики токсоплазмоза подтвердит диагноз?
–Полимеразная цепная реакция
–Клинический анализ крови
+ Микроскопия крови
–ДНК-анализ
–Реакция Кассони
1162. У больного обнаружена африканская сонная болезнь. Какое насекомое, кусая больного, могло передать ему возбудителя этой болезни?
–Вольфартова муха
–Комнатная муха
–Осенняя жигалка
+ Муха цеце
– Постельный клоп
1163. В мазках кала больного были выявлены цисты простейших организмов. Каким из перечисленных ниже видов они могут принадлежать?
+ Lamblia intestinalis
–Trichomonas tenax
–Trichomonas hominis
–Chilomastix mesnili
–Trichomonas vaginalis
1164. У женщины, живущей в Туркмении, после укуса москита
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология 307 Смирнов О.Ю.
на лице образовалась язва. После микроскопии отделяемого из язвы был поставлен диагноз: дерматотропный лейшманиоз. Какая стадия лейшманий была найдена в клетках кожи больной?
– Жгутиковая
– Ресничная + Безжгутиковая
– С псевдоподиями
– Циста1
1165. Изучая мазок из мочеполовых путей мужчины под микроскопом, лаборант обнаружил простейших, имеющих следующие признаки: тело грушевидной формы размером 20 мкм, имеется 4 жгутика и ундулирующая мембрана, ядро, вакуоли, аксостиль. Определите данного паразита.
+ Трихомонада влагалищная
–Лямблия
–Трихомонада кишечная
–Трипаносома
–Токсоплазма
1166. Во время трёх беременностей у женщины наблюдаются выкидыши. В процессе обследования отмечено, что женщина на протяжении длительного времени проводила отпуск на юге Украины, проживала в семье, где была кошка. Каким паразитом могла заразиться женщина, чтобы он мог быть причиной выкидышей?
–Лямблией
–Амёбой
–Плазмодием
+ Токсоплазмой
–Балантидием
1167. При санитарном обследовании водоёма, в котором купаются дети из оздоровительного лагеря, выявлены цисты овальной формы размером 50–60 мкм в диаметре, в цитоплазме которых видны 2 ядра (большое и малое). Цисты каких простейших обнаружены в воде?
–Лямблии
+ Балантидия
–Токсоплазмы
–Амёбы
1 В БЦТ – вегетативная, однако все вышеперечисленные стадии являются вегетативными.
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 308 | Смирнов О.Ю. |
–Эвглены
1168. При микроскопировании выделений из дёсен больного, страдающего пародонтозом, найдены простейшие грушевидной формы, которые имеют длину тела 6–13 мкм. В клетке есть одно ядро, на переднем конце расположены 4 жгутика, есть ундулирующая мембрана. Каких простейших обнаружили у больного?
–лейшманий
+ трихомонад
–амёб
–балантидиев
–лямблий
1169. В инфекционную больницу попал больной в тяжёлом состоянии с симптомами обезвоживания организма, болями в кишечнике, анемией, кровяным поносом. Врач заподозрил наличие амёбной дизентерии, но диагноз в процессе лабораторной диагностики не подтвердился. Какое протозойное заболевание, кроме дизентерии, может вызвать подобную симптоматику у человека?
+ Балантидиаз
–Лямблиоз
–Трихомоноз
–Токсоплазмоз
–Трипаносомоз
1170. Пациентка жалуется на плохой сон, сниженную трудоспособность, зуд, ощущение изжоги в районе наружных половых органов, гнойные пенистые выделения. При дифференциальной диагностике выявлены одноклеточные организмы грушевидной формы с 4-мя жгутиками и шипом на противоположном конце тела. Какой это вид организмов?
–Lamblia intestinalis
–Trichomonas hominis
+ Trichomonas vaginalis
–Toxoplasma gondii
–Entamoeba gingivalis
1171. В последнее время заболевание токсоплазмозом довольно часто встречается у новорождённых. Что является причиной этого?
–Несоблюдение правил личной гигиены
–Наследственные факторы
–Факторы окружающей среды
| Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 309 | Смирнов О.Ю. | |
|
|
|
|
|
– Родовые травмы |
|
|
| |
+ Внутриутробное заражение от больной матери |
|
| ||
| 1172. При микроскопическом | исследовании | свежих фекалий | |
больного с жалобами на частые жидкие испражнения с кровью («малиновое желе») были выявлены большие клетки с одним ядром и поглощёнными эритроцитами. Для какого из перечисленных ниже простейших характерна такая морфологическая форма?
– Giardia lamblia
– Campylobacter jejuni
– Toxoplasma gondii
+ Entamoeba histolytica
– Balantidium coli
1173. К врачу обратилась женщина с жалобами на сонливость, быструю утомляемость, истощение, лихорадку. Известно, что она недавно вернулась из путешествия по Африке. Какой основной метод лабораторных исследований нужно провести для установления диагноза?
+ Микроскопическое исследование мазков крови и пунктата лимфатических узлов
–Биохимическое исследование
–Иммунологические реакции1
–Клинический анализ крови
–Биологический метод
1174. К врачу обратилась женщина 25 лет с жалобами на жидкие испражнения, вздутие живота, потерю аппетита. При микроскопии мазков из испражнений обнаружены лямблии. Каков основной механизм передачи возбудителя?
–Парентеральный
+ Фекально-оральный
–Половой
–Трансмиссивный
–Контактный
1175. При обследовании рабочих кафе в фекалиях одного из них выявлены вегетативные формы Balantidium coli. Какие меры нужно предпринять во избежание распространения инвазии?
+ Изолировать носителя инвазии и провести его лечение
– Сделать предохранительные прививки всем рабочим кафе
1 В БЦТ – аллергический метод.
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 310 | Смирнов О.Ю. |
–Отстранить от работы носителя инвазии
–Провести дезинфекцию рабочего помещения
–Никакие меры не нужны
1176. В налёте с дёсен больного пародонтозом были обнаружены одноклеточные организмы грушевидной формы с 4 жгутиками. Какое из перечисленных простейших находилось в налёте?
–Balantidium coli
–Trichomonas hominis
–Entamoeba gingivalis
+ Trichomonas tenax
– Acanthamoeba
1177. Женщина родила ребёнка с множественными пороками развития (гидроцефалия, недоразвитые конечности). Есть подозрение на токсоплазмоз. Какой метод необходимо использовать для уточнения диагноза?
– Клинический анализ крови + Серологические исследования
–Исследование мазков фекалий
–Биохимический анализ крови
–Исследование пунктата грудины
1178. При исследовании мазков из полости рта у пациента были найдены вегетативные формы Trichomonas tenax. К какому виду симбиоза можно их отнести?
–эктопаразитизм
–эндопаразитизм
+ комменсализм
–мутуализм
–синойкия
1179. У больного с подозрением на одно из протозойных заболеваний исследован пунктат лимфатического узла. В препарате, окрашенном по Романовскому–Гимзе, выявлены тельца полулунной формы с заострённым концом, голубой цитоплазмой, ядром красного цвета. Каких простейших обнаружили в мазках?
–Малярийных плазмодиев
–Дерматотропных лейшманий
–Висцеротропных лейшманий
+ Токсоплазм
–Трипаносом
1180. В кале работника ресторана обнаружены цисты. Они
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 311 | Смирнов О.Ю. |
имеют 4 ядра одинакового размера. Какому простейшему принадлежат эти цисты?
–Entamoeba coli
–Balantidium coli
+ Entamoeba histolytica
–Trichomonas vaginalis
–Toxoplasma gondii
1181. При осмотре больной врач-гинеколог отметил симптомы воспаления половых путей; в мазке, взятом из влагалища, обнаружены овальные грушевидные простейшие с шипом, от передней части отходят жгутики, имеется ундулирующая мембрана. Какое заболевание подозревает врач у больной?
–Лямблиоз
–Лейшманиоз1
–Токсоплазмоз
+ Урогенитальный трихомоноз
–Балантидиаз
1182. Больной обратился к стоматологу с симптомами воспаления в ротовой полости. В мазках, взятых из поверхности зубов и дёсен, выявлены простейшие с непостоянной формой тела, которая меняется вследствие образования ложноножек. Размер тела от 6 до 30 мкм. Укажите вид простейшего.
–Кишечная амёба
–Дизентерийная амёба
–Кишечная трихомонада
–Лямблия
+Ротовая амёба
1183. Пациент через 15 суток после возвращения из многомесячного плавания в районах Средиземноморья и Западной Африки почувствовал слабость, головную боль, периодические повышения температуры. Врач заподозрил у больного малярию. Какой из перечисленных методов является наиболее адекватным в диагностике данного заболевания?
–Микробиологический + Микроскопический
–Серологический
–Аллергический
–Биологический
1 В БЦТ здесь «кишечный трихомоноз», но такого заболевания не существует (Trichomonas hominis непатогенна).
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 312 | Смирнов О.Ю. |
1184. При микроскопическом исследовании в кале выявили восьмиядерные цисты. Какому простейшему принадлежат эти цисты?
–Balantidium coli
–Giardia intestinalis
–Trichomonas hominis + Entamoeba coli
–Toxoplasma gondii
1185. Во время осмотра работников ресторана врачи часто замечают асимптоматический паразитоз: абсолютно здоровые
лица являются носителями цист, которые заражают других людей. Паразитирование каких паразитов делает это возможным?
+ Entamoeba histolytica
–Plasmodium vivax
–Trypanosoma gambiense
–Leishmania donovani
–Leishmania infantum
1186. У беременной женщины взяли кровь для подтверждения клинического диагноза «токсоплазмоз». Какая из перечислен-
ных серологических реакций имеет диагностическое значение? 1
–Реакция нейтрализации
–Реакция гемадсорбции
–Реакция агглютинации
–Реакция торможения гемагглютинации
+Реакция связывания комплемента
1187. В анамнезе у женщины три выкидыша, вследствие четвёртой беременности родился ребёнок с поражением центральной нервной системы и глаз, увеличением лимфоузлов, селезёнки. Известно, что дома у пациентки живут две кошки. Микроскопическим исследованием мазков крови и пунктатов лимфоузлов в клетках обнаружены тельца в форме полумесяца, один конец заострён и имеет образование в виде присоски, другой закруглён. Какой паразит обнаружен у женщины?
1 Этот вопрос был на экзамене в 2011 и 2012 гг. Однако следует заметить, что в курсе медицинской биологии подробно серологические методы не рассматриваются (их изучают студенты в курсе микробиологии, вирусологии и иммунологии), причём в основном учебнике Пишака–Бажоры «Медична біологія» (Вінниця: Нова книга, 2004), рекомендованном украинским Минздравом, данный метод диагностики токсоплазмоза – РСК – не упоминается вообще, а говорится лишь, что используются серологические методы.
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология 313 Смирнов О.Ю.
+ Toxoplasma gondii
– Lamblia intestinalis
– Balantidium coli
– Trichomonas hominis
– Plasmodium vivax
1188. У 60-летней женщины с тяжёлой формой пародонтоза при микроскопическом исследовании соскоба десны были выявлены одноядерные простейшие размером 3–60 мкм с широкими псевдоподиями. Какие простейшие были выявлены у больной?
+ Entamoeba gingivalis
–Trichomonas tenax
–Entamoeba histolytica
–Toxoplasma gondii
–Balantidium coli
1189. У человека после укуса москитом возникли язвы кожи. Анализ содержимого язвы выявил внутри клеток человека безжгутиковые одноклеточные организмы. Каков предварительный диагноз?
–Трипаносомоз
–Балантидиаз
+ Лейшманиоз дерматотропный
–Лейшманиоз висцеральный
–Токсоплазмоз
1190. У пациента, прибывшего из эндемического района, повысилась температура тела, отмечается головная боль, озноб, общее недомогание – симптомы, характерные и для обычной простуды. Какие лабораторные исследования необходимо провести, чтобы подтвердить или опровергнуть диагноз «малярия»?
–Исследование спинномозговой жидкости
–Исследование пунктата лимфоузлов
–Анализ мочи
–Микроскопия пунктата красного костного мозга
+ Микроскопия мазков крови
Вопросы из БЦТ, не вошедшие в основной текст
Вопрос. Выберите возбудителей природно-очаговых болезней человека, которые относятся к подцарству Простейших. Варианты ответов:
а) трипаносомы, лейшмании, малярийные плазмодии; б) лямблия, трихомонада урогенитальная, балантидий; в) амёба кишечная, амёба дизентерийная; г) лейшмания висцеральная, трихомонада ротовая; д) трихомонада влагалищная, трихомонада ротовая, лямблия. Предлагается вариант а как пра-
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 314 | Смирнов О.Ю. |
вильный. Действительно, есть природно-очаговые трипаносомозы и лейшманиозы, однако же малярия не является природно-очаговой, хотя и распространена в определённых районах земного шара. Никакие животные не болеют теми видами малярии, которыми болеет человек, поэтому малярия человека является антропонозной эндемической болезнью, а «эндемический» и «природно-очаговый» – это не одно и то же.
Вопрос. Описаны рецидивы 4-дневной малярии, вызванные травмой или хирургическим вмешательством через 10–20 лет после первого заболевания. Выберите наиболее правильное объяснение этого явления: а) на протя-
жении длительного времени после первого приступа в печени наблюдается шизогония, а после травмы или операции в кровь из печени попадают тканевые мерозоиты; при первичном заражении в ткани печени проникают спорозоиты; б) на протяжении длительного времени после первого приступа в печени наблюдается шизогония, а после травмы или операции в кровь из печени попадают тканевые мерозоиты; в) при первичном заражении в ткани печени проникают спорозоиты 2 типов: одни из них (тахиспорозоиты) начинают расти и размножаться сразу же и обусловливают первичное заболевание, другие (брадиспорозоиты) длительное время сохраняются в тканях печени; г) после первого приступа в крови длительное время продолжается эритроцитарная шизогония при малом количестве эритроцитов, которая клинически не проявляется, а после травмы или операции снижается иммунитет и увеличивается количество плазмодиев; д) на протяжении длительного времени после первого приступа в печени наблюдается шизогония, а после травмы или операции в кровь из печени попадают тканевые мерозоиты; после первого приступа в крови длительное время продолжается эритроцитарная шизогония при малом количестве мерозоитов. Предлагается вариант в как правильный. Но нужно заметить, что этот ответ лишь описывает факт сохранения плазмодия в клетках печени и не объясняет, почему же всё-таки травма или операция является стимулом для активизации размножения возбудителя. Больше того, известны случаи возврата малярии через много лет после выздоровления в отсутствие операционного вмешательства. Термины «тахиспорозоиты» и «брадиспорозоиты» в литературе отсутствуют, а стадии, сохраняющиеся в печени, называются гипнозоитами. Да и ответы очень длинные.
Вопрос. При микроскопическом исследовании препарата, приготовленного из кала больного амёбной дизентерией и окрашенного раствором Люголя, обнаружена тканевая форма дизентерийной амёбы (эритрофаг). Для какой формы амёбиаза характерны такие результаты исследования?
Варианты ответов: а) больной является носителем дизентерийных амёб; б) больной находится на стадии ремиссии; в) больной страдает хронической формой амёбной дизентерии; г) больной страдает острой формой амёбиаза; д) у больного рецидив амёбиаза. Предлагается вариант г как правильный. Но вариант д тоже будет правильный, так как рецидив – это возврат симптомов болезни, и при рецидиве амёбиаза будут как раз выявляться тканевые формы амёбы.
Вопрос. Самка малярийного комара во время укуса всосала кровь человека, больного малярией. Какое максимальное количество ооцист малярийного плазмодия может образоваться в её организме, если туда попало четыре макрогаметоцита и пять микрогаметоцитов? Варианты ответов:
а) четыре; б) один; в) два; г) три; д) пять. Правильный ответ а. Вопрос мы не
Тесты «Крок-1» – Медицинская биология | 315 | Смирнов О.Ю. |
включили в основной текст как неинтересный и не имеющий практического значения.
Вопрос. В фекалиях больного хроническим колитом выявлены пулевидные цисты диаметром 10 мкм с 4 ядрами. Какому простейшему они принад-
лежат? Варианты ответов: а) лямблии; б) дизентерийной амёбе; в) балантидию; г) кишечной амёбе; д) ротовой амёбе. Предлагается вариант б как правильный. Однако овальные (пулевидные) цисты характерны для лямблий, а у дизентерийной амёбы цисты округлые. Кроме того, чтобы отличить цисты амёбы от цист лямблии, необходимо описывать дополнительные признаки цист. В английском варианте вопроса (в сборнике «Collection of tasks for preparing for test examination in natural science «Krok-1 General Medical Training»», V. F. Moskalenko et al., eds. – K.: Medicine, 2006) ситуация лучше – сказано, что цисты круглые.
Слово ЦИСТА — Что такое ЦИСТА?
Слово состоит из 5 букв: первая ц, вторая и, третья с, четвёртая т, последняя а,
Слово циста английскими буквами(транслитом) — tsista
Значения слова циста. Что такое циста?
Циста
Циста (от греч. κύστις — пузырь) — временная форма существования микроорганизмов (обычно бактерий и простейших (протистов), многих одноклеточных), характеризующаяся наличием защитной оболочки…
ru.wikipedia.org
ЦИСТА ЦИСТА (от греч. kystis — пузырь), временная форма существования многих одноклеточных организмов, характеризующаяся наличием защитной оболочки, к-рая также наз.
Биологический энциклопедический словарь. — 1986
ЦИСТА,временная форма существования многих одноклеточных организмов, характеризующаяся наличием защитной оболочки, которая также называется цистой. У простейших (некоторые жгутиковые, инфузории и др.)…
Биологический словарь
ЦИСТА, Cista, κίστη, ящик для хранения самых разнообразных предметов: денег, драгоценностей, платья, плодов, книг, жертвенных сосудов, особенно назначенных для такого употребления или богослужения (Tibull. 1, 7, 48. Ov. а. а. 2, 609)…
Классические древности. — 2007
Циста в зоологии
Циста в зоологии — представляет собою капсулу или наружную оболочку, которою громадное большинство простейших окружается при временном переходе в особое состояние покоя.
Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона. — 1890-1907
Циста, род корзины
Циста, род корзины (латинск. cista, греческ. κίστη) — у этрусков и древних римлян род корзины или ларца цилиндрической формы, с крышкою, служивший для различных целей.
Энциклопедический словарь Ф.А. Брокгауза и И.А. Ефрона. — 1890-1907
ЛЕТНЯЯ ЦИСТА
ЛЕТНЯЯ ЦИСТА — состояние тела низшего гриба, проникшего в клетку хозяина и покрывшегося оболочкой. Л. ц. называют еще начальной клеткой, или просорусом, поскольку она способна прорастать сразу же, причем в свободную часть клетки хозяина.
Словарь ботанических терминов. — 1984
Русский язык
Ци́ст/а.
Морфемно-орфографический словарь. — 2002
- цирюльня
- цистаденома
- цисталгия
- циста
- цистеин
- цистерна
- цистерцианец
Анализ кала на цисты и вегетативные формы простейших
Исследование кала на простейшие — это универсальный метод диагностики кишечных протозоонозов при эпидемиологических и диагностических осмотрах населения. Используется для выявления наличия цист и ооцист простейших кишечника.
Простейшие кишечника принадлежат к типу Protozoa. Характерной особенностью этого типа является то, что на всех этапах жизненного цикла они существуют в виде одной клетки. В жизненном цикле проходят две стадии: вегетативную – стадию трофозоида (активную, подвижную, размножающуюся, питающуюся) и стабильную стадию – цисты.
Анализ кала на цисты и вегетативные формы простейших – это микроскопическое исследование, которое используется для поиска паразитов, инфицирующих нижние отделы пищеварительного тракта, откуда они попадают в стул. Берётся тонкий мазок стула на предметном стекле, который затем окрашивается, после чего паразиты в виде вегетативных форм или цист могут быть обнаружены.
Анализ кала на простейшие и яйца гельминтов показан для диагностики ряда заболеваний:
- амебиаза (Entamoeba histolytica) — дизентерийная амеба поражает толстую кишку, печень,
- лямблиоза (Lamblia intestinalis) — приводит к нарушению кишечной функции: диарее, возможно также бессимптомное носительство; если простейший паразит попадает в желчевыводящие пути, то развивается холецистит и холангит,
- балантидиаза (Balantidium coli) — инфузория приводит к язвенному поражению толстого кишечника с дизентериеподобным синдромом,
- прочих гельминтозов.
Обнаружение и дифференцирование простейших — один из наиболее сложных разделов исследования испражнений. Отличие патогенных форм простейших от непатогенных требует известного опыта и тщательности в работе.
Здесь следует учитывать, что большинство этих одноклеточных организмов встречается в двух формах: вегетативной — активной, подвижной, жизнедеятельной, легко поддающейся вредным воздействиям (в частности, охлаждению) и потому быстро погибающей после выделения из кишечника, и в виде устойчивых к внешним воздействиям цист. Существование вегетативных форм требует более или менее жидкой среды, поэтому они обнаруживаются преимущественно в жидком, полужидком, слизистом кале. При неблагоприятных условиях для их жизнедеятельности (например, уплотнение каловых масс) они превращаются в цисты. В оформленном кале простейшие, как правило, встречаются лишь в инцистированном состоянии.
Кал для отыскания в нем вегетативных форм должен исследоваться сразу после его выделения, еще в теплом состоянии. Необходимость этого вызывается двумя причинами. Во-первых, в остывшем кале вегетативные формы простейших быстро гибнут и мертвыми быстро поддаются действию протеолитических ферментов. Вследствие этого они сначала теряют характерные особенности своей структуры, позволяющие отличать патогенные формы от непатогенных, а затем и совсем растворяются. Во-вторых, при остывании уменьшается, а затем исчезает подвижность простейших — важный вспомогательный фактор при их дифференцировании.
Следует заметить, что сохранение кала в термостате не допускается, так как в условиях искусственного подогревания простейшие очень быстро подвергаются дегенеративным изменениям, затрудняющим их распознавание.
В оформленном кале, как правило, встречаются только цисты, однако в комках слизи, находящихся на его поверхности, иногда можно найти и вегетативные формы. Поэтому определение вегетативных форм простейших, находящихся в слизи, следует производить по возможности быстро.
Иногда для обнаружения простейших, особенно амеб, используют материал, полученный при ректороманоскопии. В этих случаях особенно нужно помнить о необходимости правильного обращения с полученным незначительным количеством материала. За время транспортировки в лабораторию, расположенную даже в том же здании, эта капля успевает остыть, а иногда и высохнуть. Поэтому лучше всего подготовить все необходимое для исследования в том же помещении, где проводится эндоскопия. Смазывания ректоскопа вазелиновым маслом или жиром делают последующую микроскопию затруднительной.
Для обнаружения в кале простейших прибегают к ряду методов. Трудности, сопряженные с обнаружением цист простейших, могут быть в известной степени преодолены путем применения методов концентрации. Культивирование простейших и заражение ими животных, применяемые в основном с научными целями, ввиду сложности методики малопригодны в повседневной практической работе. Выделение простейших с калом происходит непостоянно. Поэтому не следует ограничиваться при их поисках однократным исследованием. Последнее нужно повторить 4-5 раз через 2-3 дня.
Унифицированные методы определения простейших с помощью нативного мазка н мазка с раствором Люголя.
Принцип. Движущиеся простейшие обнаруживаются при исследовании суспензии каловых масс в изотоническом растворе хлорида натрия с помощью микроскопа. Препарат в этом растворе служит прежде всего для выявления вегетативных форм простейших, которые распознаются по характеру движения. Препарат суспензии каловых масс в растворе Люголя в основном используют для дифференцирования цист простейших.
Оценка результатов. Исследуют 2-3 препарата, отмечая всех замеченных простейших. В сомнительных случаях или при получении отрицательного результата анализ повторяют; на протяжении 1-2 нед проводят не менее 3 анализов. Метод позволяет наряду с непатогенными простейшими выявить Entamoeba histolitica и Balantidium coli, а также условно-патогенную Lamblia intestinalis.
Унифицированный метод с применением консервантов.
Принцип. Простейшие фиксируются в каловых массах консервирующим раствором, поэтому морфологические признаки простейших длительное время остаются без изменений.
Оценка результатов. Исследуют 2-3 препарата, отмечая всех обнаруженных простейших. Структуры простейших при применении консервантов окрашиваются в синий цвет красителем. Внутренняя структура балантидиев в консервированном материале становится незаметной, и балантидиев обнаруживают лишь по войлокообразному слою ресничек по периферии клетки.
Унифицированный метод формалин-эфирного обогащения.
Принцип. Формалин-эфирная обработка позволяет выделять и концентрировать цисты простейших.
Оценка результатов. При исследовании препарата отмечают всех обнаруженных простейших. Метод позволяет выявить цистные их формы. Основные формы простейших представлены ниже.
Класс корненожек (Shizopoda)
К классу корненожек относятся амебы. Характерной особенностью вегетативной стадии этого одноклеточного организма является отсутствие оболочки, вследствие чего тело не имеет постоянной формы. При неблагоприятных условиях тело амебы покрывается оболочкой и она превращается в цисту — устойчивую форму, способную сохранять жизнеспособность вне организма человека. В цисте ядро делится на 2-4-8 частей. Попав в кишечник человека, циста под влиянием пищеварительных ферментов освобождается от своей оболочки. Протоплазма ее делится с образованием одноядерных вегетативных особей, количество которых соответствует числу ядер цисты.
Из паразитирующих в кишечнике человека амеб наиболее часто встречаются патогенная Entamoeba histolytica — возбудитель дизентерии и непатогенные Entamoeba hartmanni, Entamoeba coli, Endolimax папа, Jodamoeba buschlii.
Главная задача, возникающая при обнаружении амеб,- различить патогенную дизентерийную от непатогенных форм. Поэтому лабораторный работник должен быть знаком с морфологическими особенностями этих видов простейших.
Entamoeba histolytica.
В свежем нативном препарате дизентерийная амеба имеет вид почти бесцветного неопределенной формы комочка. Ядра в ней не видно. Протоплазма ясно делится на зоны: наружную — гомогенную эктоплазму и внутреннюю — эндоплазму. Первая примерно в 2 раза меньше второй.
При движении амебы псевдоподии возникают из эктоплазмы, а затем в образовавшееся выпячивание постепенно вливается эндоплазма. Характер движения является одной из типичнейших особенностей дизентерийной амебы. Псевдоподия выбрасывается ею мгновенно, а при перемещении в нее эндоплазмы движение становится поступательным. Все это отличает дизентерийную амебу от кишечной, у которой нет деления на эндо- и эктоплазму; форма меняется очень медленно, и при образовании псевдоподий тело не перемещается в пространстве.
Е. histolytica встречается в кишечнике в двух формах: тканевой и просветной. Тканевая форма, называемая также Е.histolytica forma magna, получила свое название вследствие того, что она проникает в ткани хозяина и, поселяясь там, вызывает изъязвление стенки кишечника. Ее встречают в кале при остром амебиазе. Размер этой амебы колеблется в значительных пределах (от 16 до 60 мкм). В состоянии покоя, когда форма тела приближается к округлой, размер ее 20-30 мкм, а в вытянутом состоянии длина может быть в 2 раза больше. Наличие в протоплазме амеб эритроцитов является очень важным диагностическим признаком, так как непатогеиные формы никогда их не содержат. Бактерии в протоплазме живой тканевой формы встречаются как исключение. Обычно они проникают в тело амебы только после ее гибели. Просветная форма, или Е.histolytica forma minuta, обитает в просвете кишечника (отсюда и ее название). В стенку кишечника она не внедряется, поэтому не вызывает ее изъязвления и соответствующей клинической картины. Просветная форма амебы обнаруживается у лиц, выздоравливающих от острого амебиаза, у страдающих хронической формой заболевания и у носителей.
Отличия просветной формы от тканевой следующие: она меньше размером — обычно 12-25 мкм, изредка еще меньше. Движение совершается более медленно, хотя иногда наблюдается выбрасывание псевдоподий. В протоплазме эритроцитов нет и содержится небольшое количество бактерий.
Цисты Е. histolytica правильной круглой формы, бесцветны, диаметр их в среднем 10- 12 мкм. Протоплазма слегка зерниста, ядра (1-4) без окраски плохо различимы. В некоторых цистах можно заметить хроматоидные тела — короткие, бесцветные, сильно преломляющие свет палочки с закругленными концами, которым приписывается роль запасного питательного материала. Эритроцитов цисты никогда не содержат.
В препарате, окрашенном раствором Люголя, можно обнаружить у цисты ясно различимую двухконтурную оболочку, ядра и гликогеновую вакуоль. Ядра выглядят как колечки, в центре которых в виде блестящей точки расположена кариосома. Зрелая циста содержит 4 ядра. Хроматоидные тела не окрашиваются йодом.
Наиболее характерным признаком дизентерийной амебы является строение ее ядра. Оно имеет округлую форму с диаметром 3-8 мкм и располагается в эндоплазме эксцентрично. В центре ядра находится округлая или многоугольная, правильной формы, около 0,5 мкм в поперечнике, кариосома, окруженная светлой зоной. Пространство между кариосомой и оболочкой не содержит никаких зерен. Дизентерийную амебу необходимо отличать от обнаруживаемых в кишечнике непатогенных форм.
Entamoeba hartmanni — непатогенная амеба, имеющая наибольшее сходство с E.hisiolytica в строении тела, но отличающаяся значительно меньшей величиной. Вегетативные формы ее имеют размер от 5 до 12 мкм. Размер 4-ядерных цист — от 5 до 10 мкм. Движения ее совершаются медленно, эритроцитов она не фагоцитирует.
Entamoeba coli — наиболее часто встречающийся в кишечнике вид амеб. В нативном препарате вегетативная форма имеет размер 29-30 мкм в округлившемся состоянии и до 60 мкм в вытянувшемся. В протоплазме нет деления на эндо- и эктоплазму, она не содержит эритроцитов. В больших щелевидных вакуолях имеется значительное количество разнообразных включений: бактерии, грибы, лейкоциты, крахмальные зерна, цисты других простейших. Движения медленные, не имеют поступательного характера. В отличие от Е.histolytica ядро заметно и в нативном и еще лучше в окрашенном йодом препарате. Цисты E.coli круглой формы, крупнее цист дизентерийной амебы: их диаметр в среднем около 19-20 мкм. Двухконтурная оболочка толще, чем у Е. histolytica. Ядер от 1 до 8, они могут быть заметны и в неокрашенных препаратах, но лучше видны после окраски йодом.
Стадия 4-ядерной цисты очень кратковре- менна и поэтому наблюдается редко в отличие от Е. histolytica; нахождение 8-ядерных цист подтверждает их принадлежность к виду Е. coli. В связи с тем что ядра лежат в разных плоскостях сферического тела цисты, то увидеть и правильно подсчитать их можно только, работая микрометрическим винтом. При окраске йодом можно заметить в ядре кариосому, а в протоплазме незрелых (I-2-ядерных) цист — большую гликогеновую вакуоль.
Endolimax nana — непатогенная амеба малого размера (в среднем около 7 мкм). В препарате свежевыделенного кала при температуре человеческого тела (на нагревательном столике) движения ее довольно активны, напоминают движения Е. histolytica, но при остывании препарата они быстро прекращаются. Протоплазма, делящаяся на эндо- и эктоплазму, никогда не содержит эритроцитов, в ее вакуолях заметно лишь большое количество включенных микробов. Ядро в нативном препарате незаметно.
Цисты круглой или чаще овальной формы размером 8-16X6-8 мкм содержат 1-4 ядра. Как в не окрашенном, так и в окрашенном йодом препарате их трудно отличить от мелких цист дизентерийной амебы.
Jodamoeba butschlii — непатогенная амеба размером от 8 до 20 мкм. Движения медленные, быстро прекращающиеся при остывании препарата,- Псевдоподии образуются из эктоплазмы; эндоплазма зернистая, ее вакуоли содержат бактерии, крахмал и другие частицы, но никогда в них нет эритроцитов. В неокрашенных препаратах ядро обычно незаметно, при окраске гематоксилином оно довольно большого размера с тонкой оболочкой и большой кариосомой. Последняя лежит в центре ядра, занимая примерно половину его, и окружена светлой зоной.
Более характерными особенностями отличаются цисты этой амебы. Они имеют различную, часто неправильную форму, довольно толстую двухконтурную оболочку и, как правило, одно ядро. Наиболее характерен их вид при окраске раствором Люголя. На фоне зеленовато-желтой протоплазмы резко выступает ясно контурированная большая гликогеновая вакуоль, интенсивно окрашенная в красновато-коричневый цвет. Она занимает около половины протоплазмы. Изредка гликогеновых вакуолей бывает 2 или 3.
Класс жгутиковых (Flagellata).
Lamblia intestinalis.
Лямблии, как и описываемые ниже трихомонады, относятся к классу жгутиковых. Общей особенностью последних является наличие на поверхности тела одного или нескольких жгутиков, с помощью которых они передвигаются. В отличие от амеб тело жгутиковых покрыто оболочкой, наличие которой обусловливает постоянство их формы.
Лямблии паразитируют в тонком кишечнике человека, преимущественно в двенадцатиперстной кишке, а также в желчном пузыре. Существование вегетативной особи лямблии требует жидкой среды, поэтому, попадая в толстый кишечник, лямблии инцистируются и в кале находятся только цисты. Лишь при профузных поносах или после действия сильных слабительных с испражнениями могут быть выведены и вегетативные формы. Как правило, последние легко обнаруживаются в желчи при дуоденальном зондировании.
Вегетативные формы лямблий при рассматривании их с передней поверхности имеют грушевидную форму, в профиль — ложкообразную. Это зависит от того, что на передней поверхности тела паразита имеется вдавление, представляющее собой присоску, с помощью которой он прикрепляется к клеткам кишечного эпителия. Питаются лямблии осмотически всей поверхностью тела. Длина последнего 10-20 мкм, ширина 8-10 мкм.
Живые лямблии находятся в состоянии непрерывного движения, преимущественно колебательного, осуществляемого четырьмя парами жгутиков. Несмотря на то, что в нативном препарате внутреннее строение лямблии неразличимо и жгутики едва заметны вследствие быстрого их мелькания, облик паразита, особенно движущегося, настолько характерен, что спутать его ни с чем невозможно. Поэтому для диагностики, как правило, достаточно рассмотрения нативного препарата.
На окрашенных препаратах выявляется довольно сложное внутреннее строение лямблий. Они полностью билатерально симметричны. Посередине тела по его длине проходят два параллельных нитевидных опорных образования — аксостили. По обе стороны от них симметрично расположены 2 ядра и 4 пары блефаробластов — точечных телец, от которых отходит такое же число жгутиков. Имеется только одно непарное образование — парабазальное тело, отходящее в форме запятой от середины аксо- стиля; назначение его неизвестно.
При исследовании кала наиболее важно уметь обнаружить и отличить цисты лямблий, обнаружение которых позволяет нередко поставить диагноз лямблиоза без дуоденального зондирования. В нативном препарате цисты лямблий выглядят овальными, реже круглыми, бесцветными, светопреломляющими образованиями длиной 10-14 мкм с двухконтурной прозрачной оболочкой.
Более ясная картина получается при окраске раствором Люголя. В таком препарате ясно видны оболочка цисты, аксостиль, 2 или 4 ядра, лежащие у одного из полюсов, блефаробласты, жгутики. Все это образует сложный, но характерный рисунок.
Trichomonas hominis.
Кишечные трихомонады во многом похожи на влагалищные. Они имеют овальную или грушевидную форму, длина их 10-15 мкм. На переднем коние тела расположены 3-5 жгутиков, на заднем — один. От переднего конца к заднему тянется ундулирующая перепонка, которая находится в непрерывном движении, по ней как бы пробегают одна за другой волны, начинающиеся у переднего конца. Благодаря жгутикам и ундулирующей перепонке тело паразита находится в непрерывном движении: то поступательном, то колебательном, то вращательном. Движение ундулирующей перепонки хорошо заметно в нативном препарате под большим увеличением микроскопа и позволяет определить вид простейшего. Цист трихомонада не образует. Вопрос о патогенности кишечных трихомонад окончательно не решен.
Chilomastix mesnili — непатогенный жгутиконосец, грушевидной формой тела напоминающий трихомонады. Отличается от последних отсутствием ундулирующей перепонки, наличием спиральной борозды, проходящей через все тело от переднего конца к заднему. Жгутиков четыре, расположены они у переднего конца, три из них направлены кпереди и обусловливают быстрое вращательное движение простейшего, и один жгутик лежит вдоль ротового отверстия. Последнее находится в переднем конце и по длине равно 1/3-1/2 тела. Длина Chilomastix mesnili 13-24 мкм, ширина 6-10 мкм. На окрашенном препарате видно круглое ядро, расположенное в передней части тела, с несколькими зернами хроматина и одной кариосомой. В протоплазме много пищевых вакуолей, наполненных бактериями. Аксостиля нет. Цисты формой напоминают лимон размером 7-9 X 5-6 мкм. В окрашенных йодом цистах видны одно ядро, извивающийся жгутиковый аппарат и фибриллы, окаймляющие цнтостом.
Класс ресничных (Ciliata).
Balantidium coli.
Балантидий — единственная ресничная инфузория, паразитирующая в кишечнике человека и вызывающая заболевания различной тяжести — от легких Колитов до тяжелых язвенных поражений. Встречается и носительство у здоровых людей. В. coli — самый крупный из обнаруживаемых в кишечнике человека простейших организмов. Размер его овального тела 50-90 × 30-65 мкм, однако встречаются особи, достигающие 150-200 мкм.
Эту инфузорию вследствие больших размеров легко увидеть и отличить даже под малым увеличением микроскопа благодаря ее большой подвижности. Передвижение В. coli, совершаемое с помощью ресничек, настолько быстрое, что паразит то и дело исчезает из поля зрения и препарат приходится передвигать, чтобы за ним уследить. Подвижность его сохраняется довольно долго и после остывания кала.
Для обнаружения вегетативных форм В. coli обычно используют нативный препарат. Форма тела В. coli яйцевидная, несколько суженная к переднему концу, где помещается воронкообразное углубление — перистом играющее роль рта и пищевода. Все тело инфузории покрыто ресничками, располагающимися параллельными рядами, идущими по длине тела несколько наискосок. Перистом также покрыт ресничками, загоняющими внутрь его пищевые частички. В средней части тела расположено большое бобовидной формы ядро -макронуклеус, в углублении которого лежит маленький пузырьковидный микронуклеус (они лучше видны на окрашенных препаратах). В протоплазме имеются 2, (реже 1-3) пульсирующие сократительные вакуоли, служащие примитивными органоидами выделения, а также несколько пищеварительных вакуолей, содержащих бактерии, эритроциты, лейкоциты, зерна крахмала и другие продукты питания паразита.
В. coli образует цисты сферической формы диаметром 50-60 мкм. Они покрыты бесцветной двухконтурной оболочкой. В окрашенных препаратах у них виден макронуклеус и одна сократительная вакуоль (нефункционирующая).
Класс споровиков (Sporozoa).
Blastocystis hominis. В кале нередко встречается образование, похожее на цисты простейших и могущее быть принято за них. Это бластомицет (гриб) Blastocystis hominis. Он обнаруживается чаще в жидком, чем нормальном, кале, но является, по-видимому, безвредным обитателем кишечника, Бластоцисты легко отличить от цист простейших при окраске йодом. Они имеют почти правильную круглую форму, различную величину — от 5 до 30 мкм в диаметре. Вся центральная часть их тела занята большой вакуолью — гомогенной, круглой, не окрашивающейся йодом. Протоплазма оттеснена к периферии и окружает вакуоль тонким слоем в виде кольца.
Лабораторные методы исследования в клинике: Справочник / Меньшиков В.В. М.: Медицина, — 1987 год — 368 с.
простейших | микроорганизм | Британника
простейшее , организм, обычно одноклеточный и гетеротрофный (использующий органический углерод в качестве источника энергии), принадлежащий к любой из основных ветвей протистов и, как большинство протистов, обычно микроскопический. Все простейшие являются эукариотами и поэтому обладают «истинным», или мембраносвязанным, ядром. Они также являются нефиламентными (в отличие от организмов, таких как плесень, группа грибов, которые имеют волокна, называемые гифами) и ограничены влажными или водными средами обитания, будучи повсеместными в таких средах по всему миру, от Южного полюса до Северного полюса.Многие из них являются симбионтами других организмов, а некоторые виды — паразитами.
Динофлагеллят Noctiluca scintillans (увеличено).
Дуглас П. УилсонБританская викторина
Наука и случайная викторина
К какому царству принадлежат грибы? Какой динозавр был хищником размером с курицу? Проверьте свои знания обо всем в науке с помощью этой викторины.
Современные ультраструктурные, биохимические и генетические данные сделали термин простейшее весьма проблематичным. Например, простейшее исторически относилось к простейшим, имеющим животные черты, такие как способность перемещаться по воде, как если бы они «плыли», как животное. Традиционно считалось, что простейшие являются прародителями современных животных, но современные данные показали, что для большинства простейших это не так.Фактически, современная наука показала, что простейшие представляют собой очень сложную группу организмов, которые не обязательно имеют общую эволюционную историю. Эта несвязанная или парафилетическая природа простейших заставила ученых отказаться от термина простейшие в формальных классификационных схемах. Следовательно, подкоролевство Protozoa теперь считается устаревшим. Сегодня термин простейшие используется неофициально по отношению к нефиламентным гетеротрофным протистам.
амебаАмеба (увеличено).
Расс Кинн / Photo ResearchersК широко известным простейшим относятся типичные динофлагелляты, амебы, парамеции и вызывающий малярию Plasmodium .
Особенности простейших
Наблюдать за простейшими микроорганизмами из капли воды в пруду под оптическим и электронным микроскопом.
Парамеции и другие одноклеточные организмы в воде пруда.
Encyclopædia Britannica, Inc. Посмотреть все видео к этой статьеХотя простейшие больше не признаются в качестве формальной группы в существующих системах биологической классификации, простейшие все еще можно использовать как строго описательный термин.Простейших объединяет их гетеротрофный способ питания, что означает, что эти организмы получают углерод в восстановленной форме из окружающей среды. Однако это не уникальная особенность простейших. Кроме того, это описание не так однозначно, как кажется. Например, многие протисты являются миксотрофами, способными как к гетеротрофии (вторичное получение энергии через потребление других организмов), так и к автотрофности (получение первичной энергии, например, путем захвата солнечного света или метаболизма химических веществ в окружающей среде).Примеры миксотрофов простейших включают многие хризофиты. Некоторые простейшие, такие как Paramecium bursaria , развили симбиотические отношения с эукариотическими водорослями, в то время как амеба Paulinella chromatophora , по-видимому, приобрела автотрофность в результате относительно недавнего эндосимбиоза цианобактерии (сине-зеленой водоросли). Следовательно, многие простейшие либо сами осуществляют фотосинтез, либо пользуются фотосинтетическими способностями других организмов. Однако некоторые виды водорослей простейших утратили способность к фотосинтезу (например,g., Polytomella видов и многих динофлагеллят), что еще больше усложняет понятие «простейшие».
репрезентативных простейшихрепрезентативных простейших. Фитофлагеллята Gonyaulax — одна из динофлагеллят, ответственных за появление красных приливов. Зоофлагеллята Trypanosoma brucei является возбудителем африканской сонной болезни. Амеба — один из самых распространенных саркодинов. Другие представители подтипа Sarcodina, такие как радиолярии, гелиозойные и фораминиферы, обычно обладают защитным покровом.Светлячок Pinaciophora показан покрытым чешуей. Тип Ciliophora, который включает мерцательные Tetrahymena и Vorticella, содержит наибольшее количество видов простейших, но является наиболее однородной группой. Плазмодий , вызывающий малярию, распространяется через укус комара, который вводит инфекционные споры (спорозоиты) в кровоток.
© Merriam-Webster Inc. Получите подписку Britannica Premium и получите доступ к эксклюзивному контенту.Подпишитесь сейчасПростейшие подвижны; почти все обладают жгутиками, ресничками или псевдоподиями, которые позволяют им ориентироваться в своих водных средах обитания. Однако эта общность не является уникальной чертой простейших; например, организмы, которые явно не являются простейшими, также производят жгутики на различных стадиях своего жизненного цикла (например, большинство бурых водорослей). Простейшие также строго не являются многоклеточными и существуют либо в виде одиночных клеток, либо в виде клеточных колоний. Тем не менее, некоторые колониальные организмы (например,g., Dictyostelium discoideum , супергруппа Amoebozoa) демонстрируют высокий уровень клеточной специализации, граничащий с многоклеточностью.
Из описательных руководящих принципов, представленных выше, исключаются многие организмы, такие как жгутиковые фотосинтетические таксоны (ранее Phytomastigophora), которые считались простейшими по старым классификационным схемам. Организмы, которые соответствуют современному определению простейших, встречаются во всех основных группах протистов, признанных протистологами, что отражает парафилетическую природу простейших.
Проанализируйте, как отдельные реснички используют вязкое сопротивление для координации мощности и движений восстановления для передвижения.
Скоординированное биение ресничек продвигает простейших через воду.
Encyclopædia Britannica, Inc. Посмотреть все видео к этой статьеНаиболее важные группы свободноживущих простейших встречаются в нескольких основных эволюционных кластерах протистов, включая инфузории (супергруппа Chromalveolata), лобозные амебы (супергруппа Amoebozoa), филозные амебы (супергруппа Rhizaria), криптомонады (супергруппа Chromalveolata), раскопки (супергруппа Excavata), опистоконты (супергруппа Opisthokonta) и эвглениды (Euglenozoa).Эти группы организмов важны с экологической точки зрения из-за их роли в круговоротах питательных веществ микробов и встречаются в самых разных средах, от земных почв до пресноводных и морских сред обитания до водных отложений и морского льда. Значительные простейшие паразиты включают представителей Apicomplexa (супергруппа Chromalveolata) и трипаносом (Euglenozoa). Организмы этих групп являются возбудителями таких заболеваний человека, как малярия и африканская сонная болезнь. Из-за преобладания этих патогенов человека и экологической важности упомянутых выше свободноживущих простейших групп, об этих группах известно много.Поэтому данная статья концентрируется на биологии этих сравнительно хорошо охарактеризованных простейших. В конце статьи приводится краткое изложение современной классификационной схемы протистана.
комментариев о роли кисты в жизненном цикле и выживании свободноживущих простейших в JSTOR
AbstractНесмотря на довольно большое количество сообщений, разбросанных по всей более старой литературе, о существовании цист (нескольких видов) у многих видов свободноживущих простейших, у нас есть удручающе мало информации о точной роли этой стадии в жизненный цикл организма или то, как он конкретно связан с выживанием вида.Существенные вопросы, такие как роль, которую они могли сыграть в «адаптивной стратегии» организма на протяжении его долгой эволюционной истории, и их место в микробиоценозах, членами которых они сейчас являются, остаются без ответа, не говоря уже о многих других, включая точную информацию о удручающе неуловимая природа основных факторов, участвующих в индукции как энцистментации, так и эксцистментации. Тем не менее за десятилетия накопилось много важных данных, которые заслуживают хотя бы краткого рассмотрения.Самый последний предыдущий обзор кист появился 20 лет назад и был очень ограничен в освещении этой темы.
Информация для издателяWiley — глобальный поставщик контента и решений для рабочих процессов с поддержкой контента в областях научных, технических, медицинских и научных исследований; профессиональное развитие; и образование. Наши основные направления деятельности выпускают научные, технические, медицинские и научные журналы, справочники, книги, услуги баз данных и рекламу; профессиональные книги, продукты по подписке, услуги по сертификации и обучению и онлайн-приложения; образовательный контент и услуги, включая интегрированные онлайн-ресурсы для преподавания и обучения для студентов и аспирантов, а также для учащихся на протяжении всей жизни.Основанная в 1807 году компания John Wiley & Sons, Inc. уже более 200 лет является ценным источником информации и понимания, помогая людям во всем мире удовлетворять их потребности и реализовывать их чаяния. Wiley опубликовал работы более 450 лауреатов Нобелевской премии во всех категориях: литература, экономика, физиология и медицина, физика, химия и мир. Wiley поддерживает партнерские отношения со многими ведущими мировыми обществами и ежегодно издает более 1500 рецензируемых журналов и более 1500 новых книг в печатном виде и в Интернете, а также базы данных, основные справочные материалы и лабораторные протоколы по предметам STMS.Благодаря растущему предложению открытого доступа, Wiley стремится к максимально широкому распространению и доступу к публикуемому контенту, а также поддерживает все устойчивые модели доступа. Наша онлайн-платформа, Wiley Online Library (wileyonlinelibrary.com), является одной из самых обширных в мире междисциплинарных коллекций онлайн-ресурсов, охватывающих жизнь, здоровье, социальные и физические науки и гуманитарные науки.
Ультраструктура дифференцировки цист у паразитарных простейших
Акинс Р.А., Гозс С.М., Байерс Т.Дж. (1985) Факторы, регулирующие активность энцистмента (EEA) Acanthamoeba castellanii .J Gen Microbiol 131: 2609–2617
CAS Google Scholar
Alsam S, Sissons J, Dudley R, Ahmed Kan N (2005) Механизмы, связанные с фагоцитозом Acanthamoeba castellanii (T4). Parasitol Res 96: 402–409
PubMed Статья Google Scholar
Argüello-García R, Argüello-López C, González-Robles A, Castillo-Figueroa AM, Ortega-Pierres MG (2002) Последовательное обнажение и сборка волокон стенки кисты на поверхности энцистирующей Giardia duoden.Паразитология 125: 209–219
PubMed Статья Google Scholar
Арройо-Бегович А., Мартинес-Паломо А., Санчес-Парес, Массачусетс (1978) Formación de la pared celular durante el enquistamiento de Entamoeba invadens . Arch Invest Med (Мексика) 9: 105–112
Google Scholar
Arroyo-Begovich A, Cárabez-Trejo A, Ruíz-Herrera J (1980) Идентификация структурного компонента в стенке кисты Entamoeba invadens .J Parasitol 66: 735–741
PubMed Статья CAS Google Scholar
Benchimol M (2004) Высвобождение секреторных пузырьков при энцистировании Giardia lamblia . FEMS Microbiol Lett 235: 81–87
PubMed Статья CAS Google Scholar
Bernal RM, Tovar R, Santos JI, Muñoz ML (1998) Возможная роль кальмодулина в эксцистации Giardia lamblia .Parasitol Res 84: 687–693
PubMed Статья CAS Google Scholar
Бингам А.К., Мейер Э.А. (1979) Эксцистанция Giardia может быть индуцирована in vitro в кислых растворах. Nature 277: 301–302
Статья Google Scholar
Blanton WE, Villemez CL (1978) Распределение молекулярного размера и длины цепи в целлюлозе Acanthamoeba .J Protozool 25: 264–267
CAS Google Scholar
Boucher SE, Gillin FD (1990) Эксцистация цист Giardia lamblia, полученных in vitro, цист, полученных in vitro. Infect Immun 58: 3516–3522
PubMed CAS Google Scholar
Buchel LA, Gorenflot A, Chochillon C, Savel J, Gobert G (1987) Экстракция in vitro Giardia от человека: исследование с помощью сканирующей электронной микроскопии.J Parasitol 73: 487–493
PubMed Статья CAS Google Scholar
Байерс Т.Дж. (1979) Рост, размножение и дифференциация Acanthamaoeba . Int Rev Cytol 61: 283–338
PubMed Статья CAS Google Scholar
Chambers JA, Thompson JE (1972) Исследование с помощью сканирующей электронной микроскопии процесса эксцистментации Acanthamoeba castellanii .Exp Cell Res 73: 415–421
PubMed Статья CAS Google Scholar
Чавес-Мунгиа Б., Кристобаль-Рамос А.Р., Гонсалес-Роблес А., Цуцуми В., Мартинес-Паломо А. (2003) Ультраструктурное исследование Entamoeba вторгается в инцистацию и эксцистанцию . J Submicrosc Cytol Pathol 35: 235–243
PubMed Google Scholar
Чавес-Мунгиа Б., Седильо-Ривера Р., Мартинес-Паломо А. (2004) Ультраструктура стенки кисты Giardia lamblia .J Eukaryot Microbiol 51: 220–226
PubMed Статья Google Scholar
Чавес-Мунгиа B, Оманья-Молина М., Гонсалес-Ласаро М., Гонсалес-Роблес А, Бонилья П., Мартинес-Паломо А (2005) Acanthamoeba castellanii инцистация и эксцистанция. J Eukaryot Microbiol 52: 153–158
PubMed Статья Google Scholar
Coggins JR, Schaefer FW III (1986) Giardia muris : ультраструктурный анализ эксцистации in vitro.Exp Parasitol 61: 219–228
PubMed Статья CAS Google Scholar
Coppi A, Eichinger D (1999) Регулирование Entamoeba вторгается в энцистацию и экспрессию генов с галактозой и N-ацетилглюкозамином. Mol Biochem Parasitol 102: 67–77
PubMed Статья CAS Google Scholar
Das S, Gillin FD (1991) Хитинсинтаза в энцистировании Entamoeba invadens .Biochem J 280: 641–647
PubMed CAS Google Scholar
Erlandsen SL, Macechko PT, Van Keulen H, Jarroll EL (1996) Формирование стенки кисты Giardia : исследования внеклеточной сборки с использованием мечения иммунозолотом и полевой эмиссионной СЭМ с высоким разрешением. J Eukaryot Microbiol 43: 416–429
PubMed Статья CAS Google Scholar
Feely DE, Dyer K (1987) Локализация активности кислой фосфатазы в трофозоитах Giardia lamblia и Giardia muris .J Protozool 348: 80–83
Google Scholar
Фрисарди М., Гош С.К., Филд Дж., Ван Деллен К., Роджерс Р., Робинс П., Самуэльсон Дж. (2000) Самый распространенный гликопротеин стенок амебной кисты (Джейкоб) — это лектин с пятью Cys-богатыми хитинами связывающие домены. Infect Immun 68: 4217–4224
PubMed Статья CAS Google Scholar
García-Sapién AG, González-Robles A, Mora-Galindo J (1999) Эффект красного конго на жизнеспособность кист и структуру клеточной стенки энцистирования Entamoeba invadens .Arch Invest Med (Мексика) 30: 1106–1115
Google Scholar
Gerwing GJ, van Kuik JA, Leeflang BR, Kamerling JP, Vliegenthart JF, Karr CD, Jarroll EL (2002) Нитчатая стенка кисты Giardia Кишечник содержит (1-3) -N-ацетил-D- полимер галактозамина: структурное и конформационное исследование. Гликобиология 12: 499–505
Статья Google Scholar
Gillin FD, Reiner DS, McCaffery JM (1996) Клеточная биология примитивного эукариота Giardia lamblia .Annu Rev Microbiol 50: 679–705
PubMed Статья CAS Google Scholar
Jarroll EL, Macechko PT, Steimle PA, Bulik D, Karr CD, van Keulen H, Paget TA, Gerwing G, Kamerling J, Vliegenthart J, Erlandsen S (2001) Регулирование углеводного обмена во время инцистирования Giardia . J Eukaryot Microbiol 48: 22–26
PubMed Статья CAS Google Scholar
Keister DB (1983) Аксеническое культивирование Giardia lamblia в среде TYI-S-33 с добавлением желчи.Trans R Soc Trop Med Hyg 77: 487–488
PubMed Статья CAS Google Scholar
Lanfredi-Rangel A, Attias M, Reiner DS, Gillin FD, De Souza W (2003) Структура биогенеза Giardia lamblia, энцистационных секреторных пузырьков. J Struct Biol 143: 153–163
PubMed Статья CAS Google Scholar
León G, Fiori C, Das S, Moreno M, Tovar R, Sánchez-Salas JL, Muñoz ML (1997) Электронно-зондовый анализ и биохимическая характеристика электронно-плотных гранул, секретируемых Entamoeba histolytica .Mol Biochem Parasitol 85: 233–242
PubMed Статья Google Scholar
Lindmark DG (1988) Giardia lamblia : локализация гидролазной активности в лизосомоподобных органеллах трофозоитов. Exp Parasitol 65: 141–147
PubMed Статья CAS Google Scholar
Luján HD, Mowatt MR, Byrd LG, Nash TE (1996a) Холестериновое голодание вызывает дифференциацию кишечного паразита Giardia lamblia .Proc Natl Acad Sci USA 93: 7628–7633
PubMed Статья Google Scholar
Luján HD, Mowatt MR, Nash TE (1996b) Потребность в липидах и захват липидов Giardia lamblia трофозоитов в культуре. J Eukaryot Microbiol 43: 237–242
PubMed Статья Google Scholar
Luján HD, Mowatt MR, Nash TE (1997) Механизмы дифференцировки Giardia lamblia в кисту.Microbiol Mol Biol Rev 61: 294–304
PubMed Google Scholar
Маеда Х., Исида Н. (1967) Специфичность связывания гексопиранозилполисахаридов с флуоресцентным отбеливателем. J Biochem (Токио) 62: 276–278
CAS Google Scholar
Manning P, Erlandsen SL, Jarroll EL (1992) Углеводный и аминокислотный анализ цист Giardia muris . J Protozool 39: 290–296
PubMed CAS Google Scholar
Мартинес-Паломо A (1970) Поверхностные оболочки клеток животных.Int Rev Cytol 29: 29–95
Статья Google Scholar
Мартинес-Паломо А, Меза I, Чавес Б., Росалес-Энсина Дж.Л., Муньос М.Л., Гонсалес-Роблес А., Ройкинд М. (1987) Entamoeba histolytica : активация и высвобождение плотных мембранных тел. Клеточные и молекулярные взаимодействия хозяин – паразит при протозойных инфекциях. Springer, Берлин
Google Scholar
McCaffery JM, Gillin FD (1994) Giardia lamblia : ультраструктурная основа транспорта белка во время роста и инцистации.Exp Parasitol 79: 220–235
PubMed Статья CAS Google Scholar
Reiner DS, McCaffery M, Gillin FD (1990) Сортировка белков стенки кисты по регулируемому секреторному пути во время дифференцировки примитивного эукариота, Giardia lamblia . Eur J Cell Biol 53: 142–153
PubMed CAS Google Scholar
Rondanelli EEG, Osculati F, Gerna G, Fiori GP (1965) Ricerche microelettroniche su Entamoeba invadens .Boll Ist Sieroter Milan 44: 218–239
PubMed CAS Google Scholar
Sánchez L, Enea V, Eichinger D (1994) Идентификация регулируемого в процессе развития транскрипта, экспрессируемого во время инцистации Entamoeba invadens . Mol Biochem Parasitol 67: 125–135
PubMed Статья Google Scholar
Sbota A (1985) Субплазмалеммальные кальций-связывающие микрообласти в Acanthamoeba .J Cell Sci 79: 217–235
Google Scholar
Slavin I, Saura A, Carranza PG, Touz MC, Nores MJ, Luján HD (2002) Дефосфорилирование белков стенки кисты секретируемой лизосомальной кислой фосфатазой необходимо для эксцистации Giardia lamblia . Mol Biochem Parasitol 122: 95–98
PubMed Статья CAS Google Scholar
Sun CH, McCaffery JM, Reiner DS, Gillin FD (2003) Разработка генома Giardia lamblia для новых белков стенки кисты.J Biol Chem 278: 21701–21708
PubMed Статья CAS Google Scholar
Tomlinson G, Jones EA (1962) Выделение целлюлозы из стенки кисты почвенной амебы. Biochim Biophys Acta 63: 194–200
PubMed Статья CAS Google Scholar
Васкезделара-Сиснерос Л.Г., Арройо-Бегович А. (1984) Индукция энцистации Entamoeba invadens путем удаления глюкозы из культуральной среды.J Parasitol 70: 629–633
PubMed Статья CAS Google Scholar
Ward W, Alvarado L, Rawlings ND, Engel JC, Franklin C, McKerrow JH (1997) Примитивный фермент для примитивной клетки: протеаза, необходимая для эксцистации Giardia . Ячейка 89: 437–444
PubMed Статья CAS Google Scholar
Патоген и окружающая среда | Амебиаз | Паразиты
Причинный агент
Несколько видов простейших из рода Entamoeba колонизируют людей, но не все из них связаны с болезнями. Entamoeba histolytica хорошо известна как патогенная амеба, связанная с кишечными и внекишечными инфекциями. Другие виды важны, потому что их можно спутать с E. histolytica при диагностических исследованиях.
Жизненный цикл
Цисты и трофозоиты передаются с фекалиями ( 1 ). Кисты обычно обнаруживаются в стуле, тогда как трофозоиты обычно обнаруживаются в стуле при диарее. Заражение Entamoeba histolytica происходит при попадании в организм зрелых цист ( 2 ) с пищей, водой или руками, зараженными фекалиями.Эксцистация ( 3 ) происходит в тонком кишечнике, и высвобождаются трофозоиты ( 4 ), которые мигрируют в толстую кишку. Трофозоиты размножаются путем бинарного деления и образуют цисты ( 5 ), и обе стадии проходят с фекалиями ( 1 ). Благодаря защите, обеспечиваемой их стенками, цисты могут выживать от нескольких дней до недель во внешней среде и несут ответственность за передачу инфекции. Трофозоиты, попавшие со стулом, быстро разрушаются после выхода из организма, и в случае попадания внутрь не выдерживают воздействия желудочной среды.Во многих случаях трофозоиты остаются ограниченными просветом кишечника ( A: неинвазивная инфекция) бессимптомных носителей, выделяющих кисты в стуле. У некоторых пациентов трофозоиты проникают в слизистую оболочку кишечника ( B: кишечное заболевание) или через кровоток во внекишечные участки, такие как печень, мозг и легкие ( C: внекишечное заболевание), что приводит к патологическим проявлениям. Было установлено, что инвазивные и неинвазивные формы представляют собой два отдельных вида, соответственно E.histolytica и E. dispar . Эти два вида морфологически неотличимы, если только E. histolytica не наблюдается с проглоченными эритроцитами (эритрофагоцистоз). Передача также может происходить через контакт с фекалиями во время полового контакта (в этом случае не только цисты, но и трофозоиты могут оказаться заразными).
Быстрая диагностика кишечных паразитарных простейших с особым вниманием к Entamoeba histolytica
Entamoeba histolytica — это инвазивное кишечное патогенное паразитарное простейшее, вызывающее амебиаз.Его следует отличать от Entamoeba dispar и E. moshkovskii , непатогенных комменсальных паразитов просвета кишечника человека, которые морфологически идентичны E. histolytica . Обнаружение специфических антигенов E. histolytica в стуле — это быстрый и чувствительный метод, который следует рассматривать как метод выбора. ПЦР в стуле в реальном времени — высокочувствительный и специфический метод, но его высокая стоимость делает его непригодным для использования в эндемичных районах, где существуют экономические ограничения.Серология является важным компонентом диагностики кишечного и особенно внекишечного амебиаза, поскольку это чувствительный тест, дополняющий обнаружение паразитарных антигенов или ДНК. Циркулирующие лектиновые антигены Gal / GalNac могут быть обнаружены в сыворотке крови пациентов с нелеченным амебным абсцессом печени. На горизонте появятся множественные ПЦР-анализы в реальном времени, которые позволяют идентифицировать множество энтеропатогенов с высокой чувствительностью и специфичностью.
1. Введение
Всемирная организация здравоохранения (ВОЗ) ставит диарейные заболевания на второе место среди причин заболеваемости и смертности среди детей в развивающихся странах [1–3].Кишечные простейшие — это один из случаев диарейного заболевания у детей. Кишечные простейшие передаются фекально-оральным путем и имеют жизненные циклы, состоящие из стадии кисты и стадии трофозоита. Кисты состоят из устойчивой стенки и выводятся с калом. Стенка кисты защищает организм от высыхания во внешней среде. Антисанитарные условия способствуют передаче большинства простейших. Традиционно паразитов выявляли простым микроскопическим и серологическим методами.Новые подходы включают обнаружение антигенов и ПЦР [4–7].
2. Кишечные паразиты:
Cryptosporidium, Cyclospora, Entamoeba spp., Giardia, Isospora2.1.
CryptosporidiumРод Cryptosporidium был идентифицирован у мышей Эдвардом Тайцзером в 1907 году [3]. Он был обнаружен как патоген для человека в 1976 году. Многие виды заражают людей и широкий круг животных. Cryptosporidium parvum и Cryptosporidium hominis — наиболее распространенные виды, вызывающие заболевания у людей [8].Криптоспоридиоз человека также наблюдается у C. felis, C. meleagridis, C. canis, C. suis, и C. muris [9–11]. В развивающихся странах Cryptosporium spp. Инфекции чаще всего встречаются у детей младше пяти лет, чаще всего в возрасте до двух лет [12, 13]. C. hominis — это род, который поражает только людей, а C. parvum — людей и крупный рогатый скот [11]. Недавняя литература показывает, что C. hominis — самый распространенный штамм, обнаруживаемый в стуле человека [9, 14].Каждая ооциста размером около микрометров содержит четыре инфекционных спорозоитов. Недавно субгенотипирование C. hominis показало, что инфекции включали широкий спектр подтипов, состоящих из трех семейств подтипов (Ia, Ib и Id) [3].
2.2.
CyclosporaCyclospora cayetanensis — спорулирующее паразитическое простейшее, которое поражает верхний отдел тонкого кишечника. Он был идентифицирован как эндемический патоген, передаваемый через пищу и воду, во многих развивающихся странах.Заболевание впервые привлекло внимание врачей в 1970-х годах [15]. Он является важным возбудителем диареи путешественников в развитых странах и был ответственен за многочисленные вспышки болезней пищевого происхождения в Соединенных Штатах и Канаде в конце 1990-х годов. Приблизительно 1500 человек в течение 1996 года имели Cyclospora cayetanensis диарею из-за гватемальской малины. Эта эпидемия повторилась в 1997 г., подчеркнув риски для мировой экономики и продовольственного снабжения [16]. Рибосомная ДНК C. cayetanensis и трех других видов демонстрирует высокую степень гомологии друг с другом.Гомология Cyclospora и отсутствие данных о его последовательностях у других видов затрудняют методы идентификации [17]. Частота заражения Cyclospora высока в теплые месяцы. Было обнаружено, что циклоспориаз связан с владением домашними животными, особенно птицами, морскими свинками и кроликами [18]. Многие аспекты этого заболевания и его передачи остаются загадкой.
2.3.
Entamoeba spp.2.3.1.
Entamoeba disparE.dispar существует в просвете толстой кишки как безвредный сапрофит [19]. E. dispar и E. histolytica морфологически идентичны и филогенетически близки (98% идентичности последовательностей рРНК). Оба вида имеют схожий круг хозяев, но имеют совершенно разные свойства в отношении патогенности in vivo [20]. И E. histolytica , и E. dispar способны колонизировать людей, но только E. histolytica может вызывать инвазивные заболевания (колит и внекишечные проявления).У E. dispar in vivo разрушения ткани не наблюдается. Ранее группа исследователей пришла к выводу, что колонизация E. dispar никогда не была задокументирована как вызывающая инвазивное заболевание у людей, поэтому паразит не требует лечения [21–23].
2.3.2.
Entamoeba histolyticaОсновной целью обнаружения и дифференциации видов E. histolytica в образцах кала является обнаружение возбудителя амебной дизентерии.Около 40–50 миллионов человек ежегодно заболевают клиническим амебиазом, что приводит к 100 000 смертей [24]. Возбудителем амебного колита и абсцесса печени является E. histolytica . Непатогенные паразиты E. dispar и E. moshkovskii более распространены и идентичны по внешнему виду E. histolytica [25, 26]. Инвазивные штаммы E. histolytica могут вызвать смерть; значение (выше) распространенности E. histolytica является завышенным, поскольку оно датируется до выделения патогена E.histolytica от непатогена E. dispar [26]. Кроме того, существует шесть дополнительных видов амеб ( Entamoeba coli, Entamoeba hartmanni, Entamoeba polecki, Entamoeba chattoni, Iodamoeba butschlii и Endolimax nana ), которые инфицируют людей [27–37]. Есть и другие виды амеб, которые инфицируют людей, то есть акантамеба, вызывающая кишечные инфекции у людей. E. nana и I. butschlii колонизируют кишечник человека и не являются патогенными [38].В развитых странах инфекция, вызванная E. dispar , в 10 раз чаще, чем E. histolytica [39–43]. Точно так же даже в развивающейся стране E. histolytica и E. dispar могут быть одинаково распространены [35]. E. histolytica и E. dispar имеют почти 90% геномной идентичности, а E. moshkovskii также имеет близкое генетическое родство [44].
2.3.3.
Entamoeba moshkovskiiСвободноживущая и паразитическая амеба Entamoeba moshkovskii по цистовой и трофозоитной формам неотличима от E.histolytica и E. dispar . E. moshkovskii недавно было показано, что это обычная инфекция людей на Индийском субконтиненте. Ранние изоляты E. moshkovskii были из сточных вод [45]. E. moshkovskii является осмотолерантным и идентифицируется ростом при комнатной температуре и рибопринтингом [45–48]. Человеческие изоляты E. moshkovskii поступили из Северной Америки, Южной Африки, Бангладеш и Италии [49, 50]. Патогенная роль E.moshkovskii еще не определен. Чтобы свести к минимуму путаницу с E. histolytica / E. dispar , необходим диагностический инструмент. E. moshkovskii Распространенность свидетельствует о распространенности инфекции среди детей [50].
2.4.
ЛямблииЛямблии — это двухъядерные жгутиковые простейшие, открытые Ван Левенгук в 1681 году. Лямблиоз является наиболее частой причиной небактериальной диареи во всем мире [51].Ежегодно регистрируется 500 000 новых случаев, и около 200 миллионов человек заболевают симптоматическим лямблиозом [52]. Этих паразитов можно найти у млекопитающих и других животных, включая рептилий и птиц. Giardia lamblia (син. duodenalis или интестиналис ) имеет два передних ядра равного размера, которые содержат полные копии генома [53]. Вентральный липкий диск паразита состоит из микротрубочек. Есть четыре пары жгутиков (одна передняя пара, две задние пары) и каудальная пара, выходящая из диска.Рассмотрена сложная работа уникального цитоскелета Giardia [54]. Цисты Giardia устойчивы к хлорированию и озонолизу и могут сохранять жизнеспособность в течение нескольких недель, особенно в холодной поверхностной воде. Заражение Giardia чаще всего происходит при попадании кисты в загрязненную воду или пищу. Даже мухи могут распространять жизнеспособные цисты Giardia lamblia на своем экзоскелете, которые они приобрели естественным путем из антисанитарных источников [55].Существует два различных генотипа G. lamblia , которые инфицируют людей, обычно называемые комплексами A и B. Молекулярный анализ показал, что генетическая вариация между двумя группами выше, чем та, которая используется для определения других видов простейших [56]. . Кроме того, было высказано предположение, что могут существовать фенотипические различия между сообществами. Одно исследование показало связь между перемежающейся диареей и комплексом A, а также между стойкой диареей и комплексом B [57].Другие исследования показали, что у детей с комплексом А симптомы более высоки [58]. Недавнее исследование показало, что большинство из случаев заражения G. lamblia в северо-восточном бразильском сообществе относились к группе B [59].
2.5.
IsosporaИзоспориаз — кишечное заболевание человека, вызываемое паразитом Isospora belli . Он встречается во всем мире, особенно в тропических и субтропических районах. Впервые это было зарегистрировано в 1915 году. Инфекция чаще всего встречается у лиц с ослабленным иммунитетом. I. belli — это простейшие кокцидии типа Apicomplexa, которые паразитируют на эпителии верхних отделов тонкой кишки человека и вызывают диарейные заболевания. Весь жизненный цикл Isospora состоит из бесполого развития и полового размножения, которые происходят у одного и того же хозяина. Передача ооцист I. belli , по-видимому, ограничивается антропонозным циклом, поскольку люди являются единственным известным естественным хозяином [60]. Ооцистам I. belli обычно требуется от одного дня до нескольких дней, чтобы завершить спорогоническое развитие и стать инфекционными [61, 62].
3. Методические подходы с акцентом на диагностику амебиаза
3.1. Микроскопический
При амебиазе микроскопия не может отличить E. histolytica от наиболее распространенных паразитов E. dispar и E. moshkovskii . Таким образом, это устаревший подход к диагностике амебиаза, но он все еще применяется в большинстве частей мира, где современные диагностические подходы не смогли прижиться. Для микроскопии каждый образец стула следует разделить на две части.Прямая микроскопия должна выполняться путем смешивания небольшого количества образца с 0,9% раствором хлорида натрия (влажный образец) или раствором йода Люголя. Это позволяет обнаруживать подвижные трофозоиты Entamoeba histolytica / dispar , а также может предоставить информацию о содержимом стула, то есть о наличии лейкоцитов и эритроцитов. Затем вторую порцию образца стула окрашивают трихромом и / или йодом для выявления трофозоитов и кист. Требуются три отрицательных пробы стула, прежде чем можно будет принять решение об отсутствии амебной инфекции [63].Трофозоиты, содержащие проглоченные эритроциты, чаще встречаются у E. histolytica , чем у E. dipar [64–66]. Чувствительность микроскопии составляет всего 60%, и это противоречит вводящим в заблуждение результатам из-за неправильной идентификации макрофагов как трофозоитов, (полиморфно-ядерных лейкоцитов) PMN как цист (особенно когда дольчатые ядра PMN распадаются) и других « Entamoeba разновидностей» [ 64, 66–70].
3.2. Серология
Комбинация серологического анализа и анализа стула на антиген более чувствительна и специфична, чем микроскопия, для диагностики инфекции Entamoeba histolytica [42].Выборочные тесты для серологии — это непрямой флуоресцентный тест на антитела (IFAT), встречный иммуноэлектрофорез (CIEP) или иммуноферментный анализ (ELISA). Серологические тесты являются положительными во время клинических проявлений амебиаза в 60–90% случаев, при этом положительные серологические тесты наблюдаются в общей популяции эндемичных районов в 5–10% (поднимает вопрос как о ложноположительных, так и о ложноотрицательных результатах серологических исследований). ).
3.2.1. Dipstick
Тесты для выявления амебиаза в местах оказания медицинской помощи были бы подходящей технологией для развивающихся стран.Есть как минимум два таких теста, которые находятся на ранних стадиях разработки [71, 72].
3.2.2. Быстрое обнаружение антигена
Исследование ооцист и паразитов (O&P) в кале не позволяет морфологически различить три близкородственных общих амебы: патогенную E. histolytica и комменсальную E. dispar и E. moshkovskii . Дифференциация E. histolytica от E. dispar наиболее практически может быть осуществлена путем обнаружения антигена.В настоящее время имеется несколько коммерческих тестов для обнаружения антигенов для диагностики in vitro. Тест TechLab E. histolytica II выявляет исключительно E. histolytica [73, 74]. Коммерческие иммуноферментные анализы от Merlin и Alexon не позволяют различать E. histolytica и E. dispar [75, 76]. Buss et al. пришли к выводу, что два ELISA, использованные в их исследовании, были относительно быстрыми и простыми в выполнении, но Techlab E.ИФА histolytica II превзошел тест R-Biopharm Ridascreen Entamoeba [77]. Чувствительность и специфичность набора TechLab были изучены во всем мире, а именно. Бангладеш [73], Канада [42], Нидерланды [78], Великобритания [79] и Индия [80].
Инфекция E. histolytica также может быть обнаружена через лектиновый антиген Gal / GalNAc в сыворотке. Преимущество заключается в том, что это более чувствительный метод, чем обнаружение антилектиновых антител, для ранней диагностики амебного абсцесса печени (ALA).Он также более специфичен и использует четко определенный антиген, лектин Gal / GalNAc. Кроме того, в отличие от тестов на обнаружение антител, его можно использовать в качестве теста на лечение [81]. Недостатком этого метода является то, что чувствительность этого метода значительно снижается у пациентов с АЛК после начала антиамебной терапии.
Слюнный антиген также был протестирован в качестве предиктора инвазивного заболевания. В одном из исследований было обнаружено, что присутствие лектина в слюне имеет умеренную чувствительность (65.8%) и высокая специфичность (97,4%) на ранних стадиях инфекции (амебный колит в течение 1 недели). Хотя неинвазивный сбор образцов является преимуществом, чувствительность этого анализа, по-видимому, ниже, чем чувствительность определения сывороточного антигена [82].
3.3. ПЦР
3.3.1. Обычная ПЦР
Диагностика E. histolytica с помощью тестов ПЦР началась в начале 1990-х годов. Дифференциация E. histolytica от E. dispar с помощью анализа рестрикционных фрагментов одного гена, амплифицированного in vitro, впервые была описана в 1991 г. [83].Подходы на основе ПЦР были одобрены ВОЗ и в развитых странах нашли применение в клинических и эпидемиологических исследованиях [84–87]. Идентификация E. histolytica может быть проведена из различных клинических образцов, таких как стул, ткани и аспират абсцесса печени [70]. Хотя ПЦР 18S рДНК дорогостоящая, она так же чувствительна, как и методы ELISA [88–93]. Было обнаружено, что методы ПЦР очень чувствительны и специфичны для обнаружения ДНК паразита в образцах, положительных при микроскопии, с использованием как ручных, так и автоматизированных методов [94–101].ПЦР-тесты, нацеленные на 18S рДНК, широко используются для обнаружения и дифференциации видов Entamoeba . Это может быть легко обнаружено по фрагменту ДНК однокопийного гена или по многокопийным внехромосомным плазмидам амеб [102]. Было установлено, что амплификация фрагментов ДНК E. histolytica и E. dispar из стула человека с помощью стандартной ПЦР является чувствительным и специфическим методом ее обнаружения [100]. Экстракцию ДНК проводили непосредственно из стула и амплифицировали с использованием праймеров, амплифицирующих внехромосомную кольцевую ДНК [100, 101, 103].Микроскопически положительный E. histolytica положительный клинический 27/30 (90%) образцов кала и 3/30 (10%) аспиратов абсцесса печени из больниц Фармонгкутклао и Раматибоди в Бангкоке, Таиланд, были оценены с помощью ПЦР. При микроскопическом исследовании все образцы были признаны положительными на цисты или трофозоиты Entamoeba . После тестирования с помощью специфичного для рода ПЦР [35] 25/30 (83%) образцов были положительными на Entamoeba spp. тогда как 5/30 (16,6%) образцов были отрицательными.С помощью разработанного метода ПЦР успешно идентифицировано 10/30 (33,3%) протестированных клинических образцов: 4/10 (40%) были положительными для E. histolytica 6/10 (60%) для E. dispar. Такие же результаты были получены при использовании ранее описанных праймеров, специфичных для E. histolytica- и специфичных для E. dispar- [104]. Амплификация E. moshkovskii ни на одном экземпляре не наблюдалась [85].
Для одновременного обнаружения и дифференциации E.histolytica и E. dispar из ДНК, выделенной из образцов фекалий с положительным результатом микроскопии (свежих и фиксированных формалином). Была разработана мультиплексная ПЦР с зарегистрированной чувствительностью и специфичностью 94% и 100% соответственно [86, 105, 106]. Haque et al. идентифицировал E. moshkovskii в образцах фекалий с помощью метода рибопринтинга [49]. Был разработан тест ПЦР для идентификации E. moshkovskii в образцах фекалий, который показал высокую чувствительность и специфичность с использованием ДНК, выделенной непосредственно из образцов стула с помощью набора для экстракции стула QIAGEN [106, 107].Более простой инструмент молекулярного обнаружения ПЦР, разработанный Али и соавт. для диагностики E. moshkovskii инфекций использовали для обнаружения паразита непосредственно в кале. Из 109 образцов стула, исследованных с помощью ПЦР у детей дошкольного возраста в Бангладеш, E. histolytica было обнаружено в 17/109 (15,6%), E. dispar — в 39/109 (35,8%), E. moshkovskii в 23/109 (21,1%), смешанная инфекция E. histolytica и E. dispar у 17 (73,9%) и E.dispar и E. moshkovskii коинфекция в 11/23 (48%) [50]. Высокая ассоциация E. moshkovskii с E. dispar могла скрыть его идентификацию в предыдущих исследованиях.
3.3.2. ПЦР в реальном времени
Прелесть недавно разработанной методологии ПЦР в реальном времени (кПЦР) для лабораторной диагностики инфекционных заболеваний заключается в том, что она более чувствительна, чем обычная ПЦР, работает быстрее, сокращает время обработки и снижает риск загрязнения ампликонов из лабораторных сред и снизили затраты на реагенты [108].Происходит специфическое обнаружение ампликона, что позволяет осуществлять непрерывный мониторинг образования ампликона (продукта ПЦР) на протяжении всей реакции. По сравнению с обычной ПЦР, ПЦР в реальном времени более чувствительна, а также является количественной. Разработано несколько методов кПЦР [109–111]. Клинические образцы могут содержать примеси, которые могут ингибировать ферментативную амплификацию нуклеиновых кислот. Таким образом, использование внутреннего контроля (IC) для рутинной диагностической ПЦР обеспечивает уверенность в том, что клинические образцы успешно амплифицированы и обнаружены.
Для обнаружения E. histolytica методом одноплексной ПЦР в реальном времени, Qvarnstrom et al. использовали зонды TaqMan, нацеленные на ген 18S рРНК, с подходом SYBR Green, предлагающим хорошую альтернативу (но не специфичную для последовательности) анализу TaqMan [109].
Verweij et al. разработали мультиплексный анализ кПЦР для обнаружения трех различных кишечных паразитов: E. histolytica , G. lamblia и C. parvum . Их исследование показало 100% (20/20) амплификацию E.histolytica и G. lamblia ДНК в микроскопически положительных изолятах. Кроме того, в 20 образцах, в которых модифицированное кислотоустойчивое окрашивание выявило ооцист Cryptosporidium , и в 4/7 (57%) образцов от ребенка с ослабленным иммунитетом с жалобами на диарею ДНК C. parvum была обнаружена с помощью теста qPCR [111 ]. Verweij et al. показали 100% специфичность и чувствительность мультиплексной ПЦР для E. histolytica и G. lamblia, и C.parvum [112] .
Позже Haque et al. провели мультиплексный анализ ПЦР в реальном времени для обнаружения E. histolytica , G. lamblia и C. parvum . Предел обнаружения для мультиплексной ПЦР в реальном времени составлял 1 трофозоит E. histolytica на экстракцию (100 л), 10 трофозоитов G. Кишечник на экстракцию и 100 ооцист Cryptosporidium на экстракцию [21]. Мультиплексный анализ qPCR продемонстрировал 83/97 (85%) согласие с микроскопией для Giardia со специфичностью для E.histolytica и G. lamblia, и C. parvum 98%, 97% и 100% соответственно [21].
В другом исследовании КПЦР для E. histolytica была положительной в 20/23 (87%) образцах гноя абсцесса печени, причем 3 отрицательных образца были взяты у пациентов, которые уже получали антиамебную терапию [108]. Результаты были высокоспецифичными и чувствительными [40].
Stroup et al. разработали видоспецифический зондовый анализ Cryptosporidium qPCR, который является чувствительным и простым в выполнении.Анализ был проведен на 123 образцах стула человека из Бангладеш и Танзании и показал чувствительность и специфичность 91% по сравнению с микроскопией. КПЦР-анализ Cryptosporidium parvum- и специфичный Cryptosporidium meleagridis кПЦР для скорпиона обеспечил 100% точность определения вида по сравнению с анализом и секвенированием Vspl RFLP [113].
Анализ qPCR Isospora belli был проведен с 21 положительным и 120 отрицательным образцами стула и достиг 100% специфичности и чувствительности.ПЦР может дополнить клиническую лабораторную диагностику изоспориаза, особенно у пациентов с диареей в анамнезе, развивающейся во время или сразу после поездки в развивающиеся страны [114].
4. Будущие подходы
Бремя кишечных простейших инфекций настолько велико в развитых и развивающихся странах, что существует потребность в улучшенных диагностических тестах. Производство тестов на обнаружение антигена «полосками» с боковым потоком в местах оказания медицинской помощи и высокопроизводительных скрининговых тестов, основанных на обнаружении антигена или ПЦР, является очевидным приоритетом.
5. Выводы
В клинических лабораториях для диагностики кишечного амебиаза следует использовать комбинацию обнаружения паразита с помощью обнаружения антигена или ПЦР (с использованием специфических тестов на E. histolytica ) и серологического тестирования и / или с помощью колоноскопии и биопсия кишечных амебных поражений, а в случае амебного абсцесса печени — комбинация серологического исследования и дренирования абсцесса печени с тестированием жидкости на паразитов, в идеале — ПЦР. Разработка молекулярных инструментов, включая обнаружение антигенов, ПЦР и КПЦР, для обнаружения E.histolytica, E. dispar , E. moshkovskii , Giardia spp и Cryptosporidium spp. ДНК в образцах кала или абсцесса печени обещает сделать большие успехи. Объединение многих новых технологий в диагностической лаборатории станет проблемой для всех, но может привести к лучшему пониманию проблем общественного здравоохранения, связанных с этими заболеваниями.
Благодарности
А. Сингх благодарит Программу Фулбрайта для стипендиатов Совета по международному обмену учеными (CIES), США, за предоставление ей постдокторской стипендии в Департаменте инфекционного и международного здравоохранения системы здравоохранения Университета Вирджинии.Она также благодарна Центральному отделению микробиологии Университета Трибхуван, Киртипур, Катманду, Непал, за предоставление ей учебного отпуска для этого исследования. Работа лабораторий авторов поддержана грантом NIH AI043596.
Метаболическое профилирование простейших паразитов Entamoeba invadens Выявлена активация непредсказуемого пути во время инцистации
Образец цитирования: Джилани Дж., Сато Д., Хусейн А., Эскуэта-де-Кадис А., Сугимото М., Сога Т. и др. (2012) Метаболическое профилирование простейших паразитов Entamoeba invadens выявило активацию непредсказуемого пути во время инцистации.PLoS ONE 7 (5): e37740. https://doi.org/10.1371/journal.pone.0037740
Редактор: Джон Паркинсон, Госпиталь для больных детей, Канада
Поступила: 21 ноября 2011 г .; Принята к печати: 23 апреля 2012 г .; Опубликовано: 25 мая 2012 г.
Авторские права: © 2012 Jeelani et al. Это статья в открытом доступе, распространяемая в соответствии с условиями лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника.
Финансирование: Эта работа была поддержана грантом на научные исследования Министерства образования, культуры, спорта, науки и технологий (MEXT) Японии (18GS0314, 18050006, 18073001, 203
Конкурирующие интересы: Авторы заявили, что никаких конкурирующих интересов не существует.
Введение
Дифференциация или преобразование стадии развития широко распространены у всех живых организмов. Для многих патогенных простейших это важно для их выживания и передачи.Несколько паразитических простейших, таких как Entamoeba histolytica [1] и Giardia lamblia [2], которые вызывают диарею, и свободноживущие простейшие, в том числе Balamuthia mandrillaris , вызывающий гранулематозный энцефалит [3], и Acanthamoii. ответственные за амебный кератит и энцефальтит [4], представляют две морфологически различные стадии в их жизненном цикле: подвижная, пролиферативная, лабильная форма трофозоита, которая обитает у млекопитающих-хозяев и отвечает за патогенез, и устойчивая киста, которая защищена клеточная стенка, которая позволяет выжить в неблагоприятных внешних условиях и ответственна за передачу [5].Процесс инцистации привлекает внимание не только с точки зрения передачи болезней, но и как модель для дифференциации. Следовательно, выяснение процесса инцистации как на метаболическом, так и на транскриптомном уровне должно привести к лучшему пониманию этого процесса и, следовательно, к возможности более эффективных мер борьбы с инфекционными заболеваниями, вызываемыми паразитами.
Кишечный паразит Entamoeba histolytica , возбудитель амебиаза, по оценкам, заражает 50 миллионов человек ежегодно, в основном в развивающихся странах, где он является основным источником заболеваемости и смертности [6].В настоящее время не существует системы axenic in vitro для изучения энцистации паразита, инфицирующего человека Entamoeba histolytica ; однако такая система существует для E. invadens , паразита рептилий. Эти два организма имеют одинаковый двухэтапный жизненный цикл и патогенный потенциал по отношению к позвоночным-хозяевам [7] и образуют четырехъядерные хитиновые цисты с осмотически устойчивыми стенками кист [8]. E. invadens легко инцистирует in vitro в ответ на лишение источника углерода [9], гипоосмотический шок [10] или комбинацию этих двух стимулов [11].
Поскольку большинство современных лекарств против простейших нацелены на метаболизм, очень важно понимать структуру и динамику метаболической сети паразитов во время инцистации. Косвенные подходы к реконструкции метаболической сети путем сравнительной геномики и энзимологических исследований отдельных ферментов, в лучшем случае, являются неполными и сталкиваются с серьезными препятствиями в сильно дивергентных организмах, таких как паразитические простейшие. Глобальная метаболомика — это новая и мощная технология, которая дает относительно полную картину метаболизма в биологических системах и недавно была применена к широкому кругу важных проблем [12] — [15].Мы решили применить этот подход, чтобы понять основы изменений клеточного метаболизма, которые происходят во время энцистации. Чтобы лучше понять взаимосвязь между экспрессией генов и уровнями метаболитов, мы также проанализировали профиль экспрессии мРНК ферментов, участвующих в образовании или использовании этих метаболитов.
Результаты и обсуждение
Общая стратегия анализа метаболома и транскриптома энцистации
Энцистация in vitro E.invadens проводили с использованием 47% среды LG без глюкозы [11]. В этих условиях примерно 80% трофозоитов дифференцировались в устойчивые к саркозилу цисты в течение 120 часов (рис. 1А). Мы также проверили образование кист путем окрашивания калькофлуором и показали, что процентное содержание амеб, устойчивых к саркозилу, и амеб, окрашенных калькофтором, было сопоставимым (данные не показаны). Экстракты метаболитов получали из клеток, собранных в разные моменты времени во время инцистации (0, 0.5, 8, 24, 48 и 120 ч). Для идентификации пиков использовались системы капиллярного электрофореза-времяпролетной масс-спектрометрии (CE-TOFMS) в катионном и анионном режимах [16]. Основные пики были идентифицированы и количественно определены с помощью стандартов метаболитов путем сопоставления ближайших значений m / z и нормализованного времени миграции для дальнейших статистических сравнений и интерпретаций. Все представленные данные были нормализованы по количеству клеток (на 10 6 клеток), так как это широко используемый и практически принятый метод в большинстве исследований [17], [18].Кроме того, практически невозможно нормализовать данные метаболитов с объемом клетки, поскольку популяция во время энцистации является полиморфной и гетерогенной (т.е. представляет собой смесь трофозоитов и цист с разными пропорциями в разные моменты времени). Однако следует отметить, что трофозоиты и циста незначительно различаются по размеру (диаметр обычных трофозоитов и цист E. histolytica составляет 13–20 и 11–14 мкм соответственно [19]). Следовательно, наши данные необходимо тщательно интерпретировать, поскольку концентрации метаболитов в цистах имеют тенденцию занижаться (потенциально более чем в 2 раза).Однако большинство, если не все, изменений метаболитов, представленных здесь, в значительной степени отражают изменения внутриклеточных концентраций, но не объема клеток. Выявленные метаболиты и их количество перечислены в наборе данных S1. Мы идентифицировали более 100 промежуточных метаболитов, которые включают аминокислоты, нуклеотиды, биосинтетические предшественники и промежуточные продукты центрального углеродного метаболизма (рис. 1B и C). Чтобы проверить воспроизводимость результатов, мы сравнили метаболомные и транскриптомные данные двух биологических реплик в разные моменты времени во время инцистации.Наблюдалась почти идеальная корреляция между первой и второй повторностями (рис. 2).
Рисунок 1. Изменение метаболитов во время энцистации.
( A ) Кинетика энцистации. Показан процент амеб, устойчивых к 0,05% саркозилу во время инцистирования. ( B и C ) Тепловая карта, полученная путем иерархической кластеризации профилей метаболитов, полученных в результате анализа CE-TOFMS. Строки соответствуют метаболитам, а столбцы — временным интервалам.Показаны 104 метаболита, обнаруженные во время инцистирования. Уровни метаболитов выражены как log 2 кратного изменения относительно времени 0 ч. Оттенки красного и зеленого цвета указывают на увеличение и уменьшение метаболитов, соответственно, согласно шкале масштаба, показанной внизу.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0037740.g001
Рис. 2. Корреляция между двумя биологическими повторами.
Показана корреляция уровней метаболитов в метаболомном анализе ( A ) и транскриптов в анализе ДНК-микрочипов ( B ) между первой и второй биологическими повторностями в разные моменты времени во время инцистирования.Коэффициент корреляции Пирсона и их P-значения (двусторонние) были рассчитаны с использованием призмы GraphPad версии 5.04.
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0037740.g002
Используя анализ иерархической кластеризации [20], мы сгруппировали метаболиты по их временным профилям и идентифицировали те, которые демонстрировали аналогичные изменения в профиле во время инцистации (рис. 1B и C). Например, кластерный анализ показал, что метаболиты, участвующие в пути биосинтеза хитина, имеют очень похожие профили (см. Ниже).Более того, другие метаболиты, о которых известно, что они участвуют в общих биохимических путях, таких как метаболизм полиаминов, показали аналогичные временные профили содержания (см. Ниже). Чтобы сопоставить изменения в уровнях метаболитов с изменениями в уровнях транскриптов, мы также глобально исследовали экспрессию генов с помощью анализа ДНК-микрочипов (Dataset S2).
Путь гликолиза и биосинтеза хитина
Метаболизм глюкозы играет ключевую роль в клеточном метаболизме, вырабатывая энергию и предшественники нуклеотидов и жирных кислот [21].Несколько линий доказательств предполагают, что этот паразит полагается исключительно на гликолиз для снабжения АТФ, поскольку он лишен цикла Кребса и окислительного фосфорилирования [22], [23]. Мы наблюдали, что уровни различных промежуточных продуктов гликолитического пути, включая глюкозо-6-фосфат и фруктозо-6-фосфат, были значительно снижены во время инцистирования (рис. 3А). В то время как уровни транскриптов многих генов, участвующих в гликолизе, и других путей также изменялись во время энцистации (набор данных S2), метаболиты, участвующие в биосинтезе хитина, заметно увеличивались после 8 часов индукции, что позволяет предположить, что поток гликолиза был перенаправлен в сторону биосинтеза хитина. путь (рис. 3А).Хитин является основным компонентом стенок цист простейших паразитов [24], включая E. histolytica [25], G. lamblia [26], B. mandrillaris [27] и A. castellanii [ 28]. Поскольку хитин не встречается у позвоночных, его синтетический путь представляет собой отличную мишень, специфичную для паразитов, для разработки новых химиотерапевтических средств, как было предложено [29]. Мы обнаружили, что экспрессия генов всех ферментов, участвующих в биосинтезе хитиновой стенки, также увеличилась (Рисунок S1).
Рисунок 3. Центральный углеродный метаболизм во время инцистирования.
( A ) Изменения уровней метаболитов, участвующих в центральном углеродном метаболизме во время инцистирования. Уровни метаболитов, представленные полоской тепловой карты, и уровни транскриптов, показанные прямоугольниками во время инцистирования, накладываются на карту метаболических путей, которая включает гликолиз, биосинтез хитина, биосинтез серина и другие связанные пути. Уровни метаболитов выражены как log 2 кратного изменения относительно времени 0 ч.Оттенки красного и зеленого цвета указывают на увеличение и уменьшение метаболитов соответственно в соответствии с масштабной линейкой. Ферменты показаны желтым или синим цветом в случае, когда уровни их транскриптов увеличиваются или уменьшаются более чем в 3 раза относительно времени 0 ч соответственно. Полные количественные данные по метаболитам, а также показатель статистической значимости приведены в Dataset S1. Сокращения: G 6-P, глюкозо-6-фосфат; G1-P, глюкозо-1-фосфат; F6-P, фруктозо-6-фосфат; F1,6-BP, фруктозо-1,6-бифосфат; DHAP, дигидроксиацетонфосфат; Gly 3-P, глицерин-3-фосфат; 3-PGA, 3-фосфоглицерат; PEP, фосфоенолпируват; GlcN6P, глюкозамин-6-фосфат; GlcNAc6-P, N-ацетилглюкозамин-6-фосфат; GlcNAc1-P, N-ацетилглюкозамин-1-фосфат; UDP-GlcN6P, UDP-глюкозамин-6-фосфат.Полные названия ферментов, обозначенные аббревиатурами, базовые уровни экспрессии в момент времени 0 ч и кратные изменения относительно 0 ч в различные моменты времени во время инцистирования можно найти в дополнительном наборе данных S2. ( B ) Средняя концентрация нуклеотидов в различные моменты времени во время инцистирования. Данные представлены в виде средних значений ± S. D. Статистические сравнения были выполнены с помощью t-критерия Стьюдента (* P <0,05, ** P <0,01). ( C ) Энергетический заряд аденилата клетки, который рассчитывается по уравнению [(АТФ) +1/2 (АДФ)] / [(АТФ) + (АДФ) + (АМФ)] во время инцистирования.Данные представлены в виде средних значений ± стандартное отклонение. Статистические сравнения проводились с помощью t-критерия Стьюдента (* P <0,05, ** P <0,01).
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0037740.g003
Уровень транскрипта глюкозамин-фруктозо-6-фосфатаминотрансферазы (GFAT), который является первым и ограничивающим скорость ферментом [30] хитина Путь биосинтеза увеличился во время инцистации, тогда как путь глюкозамин-6-фосфат-изомеразы (GN6PI) остался неизменным (Рисунок S1), что позволяет предположить, что Entamoeba предпочитает глутамин NH 3 в качестве донора аммиака для синтеза хитиновой стенки.Интересно, что глютаминсинтаза (GS) также активируется во время инцистации (рисунок S1). GS катализирует образование глутамина из иона аммония и глутамата. Таким образом, чтобы удовлетворить потребности в глюкозамине для биосинтеза хитина, GS, по-видимому, совместно активируется с GFAT, чтобы обеспечить достаточное количество доноров аминогрупп для GFAT. Совместная регуляция GFAT и GS может быть связана с другой гипотетической ролью перитрофического матрикса, а именно с удалением токсичных ионов аммония, которые высвобождаются при утилизации аргинина во время энцистации [5].Как сообщалось ранее, активность GFAT чувствительна к ингибированию по принципу обратной связи UDP-GlcNAc, конечным продуктом гексозаминового пути, и модулируется цАМФ-зависимой протеинкиназой A [31]. GFAT привлек внимание нескольких исследовательских групп [32], поскольку он предлагает потенциальную мишень для антибактериальных и противогрибковых средств.
Экспрессия одного из трех генов, кодирующих хитиндеацетилазу (CDA) (EIN_058630), была активирована во время инцистации (Dataset S2), что привело нас к гипотезе, что этот белок деацетилирует хитин с образованием хитозана (Рисунок 3A), который представляет собой смесь N -ацетилглюкозамин и глюкозамин.Хитозан, обладающий положительным зарядом, является основным компонентом стенок спор Saccharomyces cerevisiae и боковых стенок Mucor rouxii [33]. Хитозан также имеет еще одну важную особенность: способность ингибировать гликолитический путь в раковых клетках [34].
Мы также обнаружили, что количество транскриптов ферментов, участвующих в биосинтезе гликогена / крахмала, уменьшилось, а количество транскриптов ферментов, участвующих в их разложении, увеличилось (Рисунок S1). Это наблюдение привело нас к предположению, что во время инцистирования глюкоза, которая хранится в форме гликогена / крахмала, может быть перенаправлена на синтез хитина.Помимо хитиновой стенки, мы также обнаружили, что уровень О-фосфосерина, который является промежуточным звеном биосинтеза серина, увеличился через 24 часа (рис. 3А).
Аминокислота и нуклеотиды
Метаболомный анализ показал, что большинство аминокислот уменьшилось во время инцистирования, за исключением аланина (набор данных S1). Это наблюдение согласуется с предположением, что во время инцистирования, когда вся глюкоза используется для синтеза хитина, различные аминокислоты использовались в качестве альтернативного источника энергии [35].Интересно, что Giardia [36] и Trichomonas [37], как было показано, продуцируют аланин в качестве основного конечного продукта углеводного обмена в анаэробных условиях [38], что позволяет предположить, что углеводный обмен во время инцистации в Entamoeba частично напоминает таковой в . Лямблии и Трихомонады .
Экспрессия одного из двух ASAT (аспартатаминотрансфераза), который участвует в превращении аспартата в оксалоацетат (Dataset S2) (EIN_146870), увеличивается более чем в 400 раз во время инцистирования, что свидетельствует о том, что аспарагин, а также аспартат используются в качестве энергии. источник, когда глюкоза недоступна.Ранее сообщалось, что аминокислоты, такие как аспартат, аспарагин и аргинин, также служат источником энергии для анаэробных паразитарных простейших [39].
В соответствии с уменьшением количества промежуточных продуктов гликолита и аминокислот, энергетическое содержание клетки резко снизилось во время инцистации. Уровни большинства нуклеотидов, таких как АТФ, GTP, UTP и CTP, временно повысились через 2 часа, после чего уровень всех нуклеотидов резко снизился (Рисунок 3B). Мы также исследовали средний энергетический заряд аденилата [40], который рассчитывается по уравнению: [(АТФ) +1/2 (АДФ)] / [(АТФ) + (АДФ) + (АМФ)].Энергетический заряд в растущем организме обычно стабилизируется в диапазоне от 0,8 до 0,95, и на него не сильно влияют большие колебания [41]. Энергетический заряд клетки заметно снизился через 48 ч во время энцистации (рис. 3C). Уменьшение большинства пуринов и пиримидинов через 8 часов согласуется с предыдущим наблюдением для Escherichia coli , что пулы нуклеотидов непрерывно уменьшаются по мере перехода клеток от экспоненциальной к стационарной фазе роста [42].
Метаболизм полиамина во время инцистации
Алифатические полиамины путресцин, спермидин и спермин встречаются повсеместно и выполняют важные функции в стабилизации клеточных мембран, биосинтезе информирующих молекул, росте и дифференцировке клеток, а также адаптации к осмотическому, ионному, pH и термическому стрессу [43] , [44].Ингибирование метаболизма полиаминов имеет важное фармакологическое и терапевтическое значение для контроля физиологических процессов, репродукции, рака и паразитарных заболеваний [45], [46]. Ферменты для синтеза более длинных полиаминов, спермидина и спермина, не были идентифицированы в геноме Entamoeba . Это вызывает недоумение, поскольку известно, что спермидин необходим для образования гипузина на важном факторе инициации eIF5A у эукариот [47]. Эта модификация аминокислоты, вероятно, присутствует в E.histolytica как дезоксигипузинсинтаза, фермент, который использует спермидин для создания дезоксигипузина на eIF5A, был идентифицирован в геноме [48]. Следовательно, спермидин, вероятно, является важным микроэлементом для E. histolytica , и поэтому нельзя исключать синтез спермидина E. histolytica . Наши метаболомические данные также показали, что помимо путресцина, другие полиамины, такие как спермидин, спермин и N 8 -ацетилспермидин, присутствовали в пролиферирующих трофозоитах, и уровень этих метаболитов снижался по мере продолжения инцистации.Эти данные указывают на то, что амеба использует эти полиамины во время инцистации (рис. 4A). Наш результат также согласуется с предыдущим открытием, что уровни полиаминов уменьшились во время инцистирования у A. castellanii [49]. Роль N 8 -ацетилспермидина в метаболизме полиаминов остается неясной. N 8 -ацетилспермидин, как известно, превращается обратно в спермидин под действием деацетилирующего фермента [50], что свидетельствует об обратимой секвестрации избыточного спермидина.Уровень N-ацетилпутресцина, полученного из путресцина, увеличивался во время инцистирования (рис. 4A). Ацетилирование полиамина, по-видимому, является компонентом клеточного механизма, участвующего в обмене и выведении полиаминов [51], который может действовать как средство снижения внутриклеточной концентрации полиаминов. Кроме того, хранение ацетилированной (метаболически неактивной) формы полиаминов в спящих клетках (цистах) может обеспечить вновь активированные клетки легкодоступным источником полиаминов для целей роста.Другим следствием ацетилирования полиаминов является уменьшение положительного заряда, что помогает вытеснить их из анионных связывающих участков, а также увеличивает их липофильные свойства, которые могут способствовать процессам транспорта [51].
Рисунок 4. Уровни полиаминов и биогенных аминов во время инцистирования.
( A ) Данные о метаболизме и транскриптоме пути, участвующего в биосинтезе и катаболизме полиаминов и родственных метаболитов аргинина. Средние концентрации каждого метаболита (нмоль / 1 × 10 6 клеток) через временные интервалы (0, 0.5, 2, 8, 24, 48 и 120 ч) показаны. Ферменты показаны желтым или синим цветом в случае, когда уровни их транскриптов увеличиваются или уменьшаются более чем в 3 раза относительно времени 0 ч соответственно. Сокращения: ГАМК, γ-аминомасляная кислота; AdoMet, S-аденозилметионин; dAdoMet, S-аденозилметионинамин. Сплошные линии представляют собой шаги, катализируемые ферментами, кодирующие гены которых присутствуют в геноме, а пунктирные линии указывают те, которые, вероятно, отсутствуют в геноме. Сокращения: МАО, моноаминоксидаза; AdoMDC, S-аденозилметионинкарбоксилаза; SPDS, спермидинсинтаза; СПС, сперминсинтаза; GAD, глутаматдекарбоксилаза.Данные представлены в виде средних значений ± стандартное отклонение. Статистические сравнения проводились с помощью t-критерия Стьюдента (* P <0,05, ** P <0,01). ( B ) Уровень некоторых биогенных аминов и их предшественников во время инцистирования. Ось X представляет время в часах, тогда как ось Y представляет концентрацию метаболитов в нмоль / 1 × 10 6 клеток. Данные представлены в виде средних значений ± стандартное отклонение. Статистические сравнения проводились с помощью t-критерия Стьюдента (* P <0,05, ** P <0,01).
https://doi.org/10.1371/journal.pone.0037740.g004
Индукция ГАМК во время энцистации
Неожиданно мы обнаружили, что на более поздней стадии энцистации (48 и 120 ч) уровень гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК) увеличился (рис. 4А). ГАМК производится из L-глутамата в единственной реакции, катализируемой ферментом глутаматдекарбоксилазой, который отсутствует в геноме Entamoeba . Однако в геноме кодируется ряд декарбоксилаз аминокислот, и возможно, что некоторые из этих декарбоксилаз превращают глутамат в ГАМК.Было продемонстрировано, что у других организмов ГАМК также производится по альтернативному пути путресцина [52]. Профиль концентрации N-ацетилпутресцина во время инцистирования был аналогичен профилю ГАМК; повышение уровня N-ацетилпутресцина немного опережало повышение уровня ГАМК (рис. 4А). Эти данные согласуются с предположением, что ГАМК может быть синтезирован из N-ацетилпутресцина во время инцистирования. Однако необходимы дальнейшие эксперименты по маркировке, чтобы проверить образование ГАМК из глутамата или путресцина.Роль ГАМК в Entamoeba неясна. ГАМК также обнаружена у других простейших паразитов, таких как Plasmodium falciparum [53]. ГАМК является основным тормозным нейромедиатором в центральной нервной системе млекопитающих. Этот нейротрансмиттер имеет древнее происхождение как межклеточный сигнал и, как сообщается, индуцирует терминальную дифференцировку (споруляцию) Dictyostelium discoideum , амебы, обитающей в почве, через рецептор GABA B [54]. Считается, что у растений ГАМК играет роль в различных стрессовых реакциях, таких как тепловой стресс, который приводит к 6-10-кратному накоплению ГАМК по сравнению с нестрессированным растением [55], внезапному снижению температуры [56] и воде. стресс [57].Было также показано, что быстрое накопление ГАМК в ответ на ранение играет роль в защите растений от насекомых [58].
Увеличение количества биогенных аминов в ранний период инцистации
Биогенные амины — это встречающиеся в природе соединения, повсеместно встречающиеся у животных и растений. Это низкомолекулярные органические основания, алифатические (путресцин, кадаверин, изоамиламин, изобутиламин), гетероциклические (гистамин и триптамин) или ароматические (тирамин и фенилэтиламин) [59]. Эти соединения, как известно, играют важную роль в нормальной физиологии млекопитающих, например, в пролиферации и дифференцировке клеток [60].Мы также обнаружили заметные изменения в биогенных аминах, таких как кадаверин, изоамиламин и изобутиламин (рис. 4B), которые увеличивались в течение раннего периода энцистации (от 0,5 до 8 часов), когда трофозоиты образовывали большие многоклеточные агрегаты (прецисты), а затем уменьшались. когда прециста дифференцировалась в кисту. Эти три биогенных амина демонстрировали различную кинетику во время инцистации, предполагая, что эти биогенные амины могут играть определенную роль в различных процессах инцистации. Биогенные амины играют важную роль в индукции энцистации Hartmannella vermiformis , непатогенной свободноживущей амебы, которая является естественным резервуаром Legionella pneumophila , возбудителя болезни легионеров [61].Биогенные амины, такие как кадаверин, изоамиламин и изобутиламин, являются декарбоксилированным продуктом аминокислот, таких как лизин, лейцин и валин. Ранее предполагалось, что E. invadens encystation и E. histolytica образование цистоподобной структуры индуцируются CO 2 [62]. Следовательно, возможно, что CO 2 , который высвобождается во время образования биогенных аминов, также может участвовать в инициировании процесса энцистации.
Заключение и направления на будущее
Таким образом, наши анализы метаболома и транскриптома впервые у эукариот выявили глобальные изменения метаболизма во время основного процесса дифференциации от трофозоитов до цист.Геномные реконструкции, которые обычно отображают геномную информацию отдельного организма на метаболические сети хорошо изученных модельных организмов, должны основываться на прямых экспериментальных метаболических доказательствах. В противном случае они, вероятно, не смогут определить наилучшие возможные пути попадания лекарств в мишени. Мы обнаружили повышение уровня некоторых биогенных аминов, а также гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК) во время энцистации. Наконец, необходимы дальнейшие исследования, чтобы охарактеризовать ключевые метаболиты и их функции, ответственные за пути передачи сигнала, запускающие энцистацию через образование ГАМК и биогенных аминов.
Материалы и методы
E. invadens культивирование и энцистацияТрофозоитов штамма E. invadens IP-1 культивировали аксенически в среде BI-S-33 при 26 ° C. Для индукции энцистации 2-недельные культуры E. invadens в возрасте были пассированы в 47% среде LG без глюкозы [11] в количестве приблизительно 6 × 10 5 клеток / мл. Амебы собирали в различные моменты времени, и образование цист оценивали по устойчивости к 0.05% саркозила с использованием 0,22% трипанового синего для выборочного окрашивания мертвых клеток. Кисты также проверяли окрашиванием стенок кисты путем инкубации амеб с калькофлуором уайт (флуоресцентный отбеливатель; Sigma-Aldrich) при комнатной температуре.
Метаболическая экстракция
Внутриклеточные метаболиты экстрагировали, как описано ранее, с некоторыми модификациями [63]. Приблизительно 1,5 × 10 6 клеток E. invadens собирали после 0, 0,5, 2, 8, 24, 48 и 120 ч культивирования в 47% среде LG без глюкозы.Клетки немедленно суспендировали в 1,6 мл метанола при -75 ° C для подавления метаболической активности. Учитывая скорость метаболических реакций, быстрое удаление среды и немедленное прекращение метаболизма имеет важное значение для получения надежных результатов. Выбор холодного метанола в качестве экстракционного растворителя был основан на систематических исследованиях на бактериях и дрожжах, которые указывают на то, что он обеспечивает относительно хорошую экстракцию широкого спектра метаболитов [64] — [65], избегая при этом заметного разложения метаболитов и связанного с ними образования продукты разложения, которые сами могут имитировать метаболиты [66].Чтобы экспериментальные артефакты, такие как подавление ионов, не приводили к неверной интерпретации уровней метаболитов, в каждый образец добавляли внутренние стандарты, 2- ( N -морфолино) этансульфоновую кислоту, метионинсульфон и D-камфор-10-сульфоновую кислоту. . Затем образцы обрабатывали ультразвуком в течение 30 секунд, а затем смешивали с 1,6 мл хлороформа и 640 мкл деионизированной воды. После встряхивания смесь центрифугировали при 4,600 × g при 4 ° C в течение 5 мин. Водный слой (1,6 мл) фильтровали с использованием ультрафильтра Amicon Ultrafree-MC (Millipore Co.) и центрифугировали при 9100 × g при 4 ° C в течение ∼2 часов. Фильтрат сушили и хранили при -80 ° C до масс-спектрометрического анализа [67]. Перед анализом образец растворяли в 20 мкл деионизированной воды, содержащей контрольные соединения (по 200 мкМ каждого из 3-аминопирролидина и тримезиновой кислоты).
Аппаратура капиллярного электрофореза-времяпролетной масс-спектрометрии (CE-TOFMS)
CE-TOFMS выполняли с использованием системы капиллярного электрофореза Agilent CE, оснащенной времяпролетным масс-спектрометром Agilent 6210, изократическим насосом для ВЭЖХ Agilent 1100, переходным комплектом Agilent G1603A CE-MS и комплектом распылителя Agilent G1607A CE-ESI-MS. (Agilent Technologies, Вальдбронн, Германия).Система контролировалась программным обеспечением Agilent G2201AA ChemStation для CE. Сбор данных выполнялся с помощью программного обеспечения Analyst QS для Agilent TOF (Applied Biosystems, Калифорния, США; MDS Sciex, Онтарио, Канада).
Условия CE-TOFMS для анализа катионных метаболитов
Катионные метаболиты были разделены в капилляре из плавленого кварца (внутренний диаметр 50 мкм × 100 см общей длины), заполненном 1 М муравьиной кислотой в качестве электролита [68]. Раствор образца (~ 3 нл) вводили при 50 мбар в течение 3 с и прикладывали положительное напряжение 30 кВ.Капиллярные лотки и лотки для образцов поддерживали при 20 ° C и ниже 5 ° C соответственно. Жидкость оболочки, состоящая из метанола / воды (50% об. / Об.), Которая содержала 0,1 мкМ гексакис (2,2-дифторотокси) фосфазена, подавалась со скоростью 10 мкл / мин. ESI-TOFMS работал в режиме положительных ионов. Напряжение на капилляре было установлено равным 4 кВ, а расход газообразного азота (температура нагревателя 300 ° C) был установлен равным 10 фунтам на квадратный дюйм. Для TOFMS напряжение фрагментера, напряжение скиммера и напряжение октапольной радиочастоты (Oct RFV) были установлены на 75, 50 и 125 В соответственно.Функция автоматической повторной калибровки была выполнена с использованием двух эталонных масс эталонных стандартов; протонированный димер метанола 13 C ( m / z 66.063061) и протонированный гексакис (2,2-дифторотокси) фосфазен ( m / z 622.028963), что обеспечило фиксацию массы для точных измерений массы. Точные данные о массе получали со скоростью 1,5 цикла / с в диапазоне от 50 до 1000 m / z .
Условия CE-TOFMS для анализа анионных метаболитов
Анионные метаболиты разделяли в покрытом катионным полимером капилляре COSMO (+) (50 мкм i.d. × 110 см) (Nacalai Tesque), заполненный 50 ммоль / л раствором ацетата аммония (pH 8,5) в качестве электролита [69]. Раствор образца (~ 30 нл) вводили при 50 мбар в течение 30 с и прикладывали отрицательное напряжение -30 кВ. Ацетат аммония (5 ммоль / л) в смеси 50% метанол / вода (50% об. / Об.), Который содержал 0,1 мкмоль / л гексакис (2,2-дифторотокси) фосфазена, доставляли в виде жидкости для оболочки со скоростью 10 мкл / мин. ESI-TOFMS работал в режиме отрицательных ионов. Напряжение на капилляре было установлено 3,5 кВ. Для TOFMS напряжение фрагментера, напряжение скиммера и Oct RFV были установлены на 100, 50 и 200 В соответственно [70].Функция автоматической повторной калибровки была выполнена с использованием двух эталонных масс эталонных стандартов: депротонированного димера ацетата 13 C ( m / z 120.038339) и ацетатного аддукта гексакис (2,2-дифторотокси) фосфазена ( m / z 680.035541). . Остальные условия были идентичны тем, которые использовались для анализа катионного метаболома.
Обработка данных CE-TOFMS
Необработанные данные были обработаны с помощью собственного программного обеспечения Masterhands [71]. Общий поток обработки данных состоял из следующих этапов: фильтрация шума, удаление базовой линии, коррекция времени миграции, обнаружение пика и интегрирование площади пика от 0.02 m / z — срез электрофореграммы по ширине. Этот процесс напоминал стратегии, используемые в широко используемом программном обеспечении для обработки данных для анализа данных ЖХ-МС и ГХ-МС, таком как MassHunter (Agilent Technologies) и XCMS [72]. Впоследствии точные значения m / z для каждого пика были рассчитаны с помощью аппроксимации кривой Гаусса в области m / z, а время миграции было нормализовано с использованием алгоритмов выравнивания, основанных на динамическом программировании [73]. Все целевые метаболиты были идентифицированы путем сопоставления их значений m / z и нормализованного времени миграции со стандартными соединениями в собственной библиотеке.Все представленные данные были нормализованы по количеству клеток (на 10 6 клеток).
Выделение РНК и гибридизация на микрочипах affymetrix
E. invadens клеток собирали после 0, 0,5, 2, 8, 24, 48 и 120 часов культивирования в 47% среде LG без глюкозы и дважды промывали фосфатным буферным солевым раствором. Тотальную РНК выделяли из собранных трофозоитов с использованием тризольного реагента (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) в соответствии с протоколом производителя. РНК количественно определяли и проверяли на чистоту путем сравнения оптической плотности при 260 и 280 нм в спектрофотометре с нанокапельками (Thermo Scientific, Уилмингтон, Делавэр, США).Целостность выделенной РНК проверяли с помощью автоматизированной системы электрофореза от Bio-Rad (набор для анализа RNA StdSens). Все реагенты и протоколы соответствовали тем, которые описаны в руководствах affymetrix. Вкратце, тотальную РНК (5 мкг) подвергали обратной транскрипции с использованием праймера T7-Oligo (dT) в синтезе первой цепи кДНК. После синтеза второй цепи двухцепочечную матрицу кДНК использовали для транскрипции in vitro в присутствии биотинилированных нуклеотидов для получения меченой кРНК. КРНК очищали, количественно определяли, фрагментировали и гибридизовали в течение 16 ч при 45 ° C с индивидуально созданной микрочипом платформы affymetrix (49-7875) с наборами зондов, состоящими из 11 пар зондов, представляющих 9327 E.histolytica (Eh_Eia520620F_Eh) и 12,385 E. вторгается в открытых рамок считывания (Eh_Eia520620F_Ei). После гибридизации матрицы промывали и окрашивали стрептавидин-фикоэритрином с использованием GeneChip® Fluidics Station 450 (Affymetrix, Санта-Клара, Калифорния, США) в соответствии с рекомендациями производителя. После промывки и окрашивания матрицы GeneChip® затем сканировали с использованием сканера Hewlett-Packard Affymetrix Scanner 3000 (Affymetrix, Санта-Клара, Калифорния, США), и интенсивности зондов были извлечены с помощью Affymetrix® GeneChip® Command Console ™ (Affymetrix, Санта-Клара , Калифорния, США).
Анализ данных микрочипов
Для каждого условия и каждой временной точки использовалось минимум два массива. Необработанные данные экспрессии гена Mas5 были импортированы в программу GeneSpring GX 10.0.2, и нормализованные значения экспрессии для каждого набора зондов были получены из необработанных значений интенсивности зондов в R 2.7.0, загруженных из проекта BioConductor (http://www.bioconductor.org) с использованием надежного усреднения по нескольким массивам с поправкой на олигопоследовательность (gcRMA). Стандартные коэффициенты корреляции рассчитывали с использованием GeneSpring GX 10.0,2 [74]. Данные, представленные в этой публикации, депонированы в NCBIs Gene Expression Omnibus (GEO, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/geo/) и доступны через регистрационный номер серии GEO GSE33312.
Статистический анализ
Для каждого условия эксперимента были сделаны две независимые биологические повторы, а для каждой биологической повторы были сделаны три технических повтора. Все данные представлены как средние значения ± стандартное отклонение. за указанное количество опытов. Статистические сравнения проводились с помощью критерия Стьюдента.Тепловые карты уровней метаболитов были созданы с использованием иерархической кластеризации на основе коэффициентов корреляции Пирсона с использованием программного обеспечения MultiExperiment Viewer (MeV) (Институт геномных исследований [20]). Коэффициенты корреляции Пирсона и их значения P (двусторонние) были рассчитаны с использованием GraphPad Prism версии 5.04 (GraphPad Software, Inc., Сан-Диего, Калифорния). Для данных микроматрицы был проведен односторонний анализ ANOVA с апостериорным тестом Тьюки для извлечения дифференциально экспрессируемых генов.P-значения были рассчитаны с использованием критерия Велча и скорректированы методом Бенджамини-Хохберга (набор данных S2).
Общая характеристика простейших
Общие характеристики простейших
Простейшие — эукариотические микроорганизмы. Хотя их часто изучают на курсах зоологии, они считаются частью микробного мира, потому что они одноклеточные и микроскопические.
Простейшие примечательны своей способностью двигаться независимо, что характерно для большинства видов.У них обычно отсутствует способность к фотосинтезу, хотя род Euglena известен подвижностью, а также фотосинтезом (и поэтому считается как водорослью, так и простейшими). Хотя большинство простейших размножаются бесполыми методами, половое размножение наблюдается у нескольких видов. Большинство протозойных видов являются аэробными, но некоторые анаэробные виды были обнаружены в кишечнике человека и рубце животных.
Простейшие обитают в большинстве влажных местообитаний. Свободноживущие виды населяют пресноводную и морскую среду, а наземные виды населяют разлагающееся органическое вещество.Некоторые виды являются паразитами растений и животных.
Простейшие играют важную роль как зоопланктон , свободно плавающие водные организмы океанов. Здесь они лежат в основе многих пищевых цепочек и участвуют во многих пищевых сетях.
Размер и форма. Простейшие существенно различаются по размеру и форме. Меньшие виды могут быть размером с грибковые клетки; более крупные виды могут быть видны невооруженным глазом. Клетки простейших не имеют клеточных стенок и поэтому могут принимать бесконечное множество форм.У некоторых родов клетки окружены твердой оболочкой, тогда как клетки других родов заключены только в клеточную мембрану.
Многие простейшие чередуются между свободноживущей вегетативной формой, известной как трофозоит , и покоящейся формой, называемой цистой . Киста простейшего в некотором роде аналогична споре бактерии, поскольку она противостоит суровым условиям окружающей среды. Многие простейшие паразиты попадают в организм в форме кисты.
У большинства простейших есть одно ядро, но у некоторых есть и макроядро, и одно или несколько микроядер.У простейших могут присутствовать сократительные вакуоли для удаления избытка воды, часто наблюдаются пищевые вакуоли.
Питание и передвижение. Простейшие — это гетеротрофных микроорганизмов, и большинство видов получают крупные частицы пищи за счет фагоцитоза. Пищевая частица попадает в пищевую вакуоль. Затем лизосомальные ферменты переваривают питательные вещества в частице, и продукты пищеварения распределяются по клетке. У некоторых видов есть специализированные структуры, называемые цитостомами , через которые частицы проходят при фагоцитозе.
Многие простейшие виды передвигаются независимо с помощью одного из трех типов локомоторных органелл: жгутиков, ресничек и псевдоподий. Жгутики и реснички структурно похожи, имеют систему микротрубочек «9 плюс 2», тот же тип структуры, что и в хвосте сперматозоидов животных и некоторых клетках одноклеточных водорослей.